Набор реагентов для иммуноферментного определения альфа-фетопротеина в сыворотке крови (ИммуноФА-АФП) по ТУ 9398-016-11361534-2006 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2010/08714 · класс риска 2а

Производитель: ЗАО "НВО ИММУНОТЕХ" (Россия)

Вид изделия: Альфа-фетопротеин (АФП) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 1 контракт, медианная цена за единицу 5 014 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДАЮ”
итель Федеральной службы 
'У в сфере здравоохранения 
ьного развития
ИНСТРУКЦИЯ
п о  ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО  
ОПРЕДЕЛЕНИЯ альфа-ФЕТОПРОТЕИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ
(ИммуноФА-АФП)
Рекомендована к утверждению Научно-экспертным Советом по медицинским изделиям.
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор ИммуноФА-АФП предназначен для количественного определения содержания 
альфа-фетопротеина (АФП) в сыворотке крови человека методом одностадийного твердо­
фазного иммуноферментного анализа (ИФА).
Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 исследуемого образца, 6 ка­
либровочных проб, 1 пробы контрольной сыворотки, всего 96 определений.
АФП - гликопротеид с молекулярной массой около 70 000 Да. В период внутриут­
робного развития АФП образуется, в основном, в желточном мешке и печени плода и в не­
значительном количестве - в желудочно-кишечном тракте. Из амниотической жидкости эм­
бриона он проникает в систему кровообращения матери. Его концентрация в крови плода 
достигает максимальных значений через 12-15 недель внутриутробного развития и снижает­
ся до нормы к концу второго года жизни ребенка. У здоровых беременных женщин с нор­
мальным плодом уровень АФП повышается до 31 -  32-й недели, а к родам постепенно сни­
жается. Через несколько недель после родов АФП определяется в сыворотке крови матери в 
очень малых количествах.
В пренатальной диагностике определение АФП в сыворотке крови беременных жен­
щин используют для выявления некоторых врожденных пороков развития плода, таких как 
дефекты нервной трубки и брюшной стенки (повышенные уровни АФП) или хромосомные 
аномалии, в частности, синдром Дауна (пониженные уровни АФП), для прогнозирования уг­
розы гибели плода при патологически протекающей беременности с хроническим нарушени­
ем функций плаценты. Резкое повышение концентрации АФП происходит за 10-14 дней до 
гибели плода. Определение концентрации АФП может быть использовано также для наблю­
дения за недоношенными новорожденными с целью прогнозирования и диагностики реци­
дивирующего апноэ.
Составлена: заместителем генерального директора, к.б.н. Е.М. Гавриловой, замести­
телем генерального директора Т.А. Поздняковой - сотрудниками ЗАО “ПВО Иммунотех”; 
консультантом МОНИИАГ, д.м.н., проф. И.П. Ларичевой.


--- стр. 2 ---
Повышенный уровень АФП наблюдается при гепатоцеллюлярных карциномах и тера- 
токарциномах желточного мешка, яичника или яичек. При этом содержание АФП коррели­
рует с размером растущей опухоли и эффективностью лечения. Снижение концентрации 
АФП после удаления опухоли или лечения служит благоприятным признаком.
Количественное определение АФП необходимо для диагностики и мониторинга со­
стояния больных первичным раком печени, выявления пороков развития плода (дефектов 
нервной трубки и брюшной стенки, синдрома Дауна), мониторинга состояния плода в тече­
ние беременности.
2. ПРИНЦИП МЕТОДА
Принцип метода основан на двуцентровой схеме твердофазного иммуноферментного 
анализа с использованием двух типов моноклональных антител. Исследуемые образцы сыво­
ротки крови инкубируют в планшете с иммобилизованными на твердой фазе антителами к 
АФП и одновременно с конъюгатом моноклональных антител к АФП с пероксидазой. Коли­
чество связавшегося конъюгата выявляют с помощью раствора субстрата (тетраметилбензи- 
дина с добавлением перекиси водорода). Интенсивность окраски продукта окисления суб­
страта прямо пропорциональна концентрации АФП, содержащегося в анализируемом образ­
це.
3. СОСТАВ НАБОРА
В состав набора входят следующие компоненты;
- планшет 96-луночный полистироловый, сенсибилизированный моноклональными 
антителами к АФП, готовый для использования - 1  шт.;
- калибровочные пробы на основе сыворотки крови теленка, содержащие известные 
количества АФП: 0; 10; 50; 100; 200; 350 МЕ/мл; концентрации АФП в калибровочных про­
бах могут незначительно изменяться от серии к серии, точные значения концентраций указа­
ны на этикетках флаконов, готовые для использования - 6 фл. (по 0,5 мл).
Калибровочные пробы откалиброваны по I Международному стандарту АФП 1  st IS
72/225;
- контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержа­
нием АФП, готовая для использования - 1  фл. (0,5 мл);
- конъюгат моноклональных антител к АФП с пероксидазой, готовый для использо­
вания - 1  фл. (12,5 мл);
- раствор для разведения сывороток - 1 фл. (10 мл);
- фосфатно-солевой буферный раствор с добавлением твин-20, pH 7,0+0,5, концен­
трированный - 1 фл. (15 мл);
- раствор субстрата на основе ТМБ с добавлением перекиси водорода, готовый для 
использования - 1  фл. (12,5 мл);
- стоп-реагент, готовый для использования - 1 фл. (15 мл);
- пленка для заклеивания планшета - 1 шт.
4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Специфичность. Использование моноклональных антител к АФП для иммобилизации 
на планшетах обеспечивает высокую специфичность анализа.
Чувствительность. Минимальная концентрация АФП, определяемая с помощью набо­
ра, составляет не более 1,0 МЕ/мл.
Воспроизводимость результатов. Коэффициент вариации результатов определения 
концентрации АФП в одном и том же образце сыворотки крови не превышает 8%.


--- стр. 3 ---
Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на "открытие" АФП -  
соответствие измеренной концентрации АФП предписанной в пробе, полученной путем 
смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 50 МЕ/мл. 
Процент "открытия" составляет 90-110 %.
Линейность. Зависимость концентрации АФП в образцах сыворотки крови при разве­
дении их сывороткой крови, не содержащей АФП, имеет линейный характер в диапазоне 
концентраций 10-350 МЕ/мл и составляет 90-110 %.
Клиническая проверка набора. Концентрация АФП, определяемая с помощью набора 
реагентов ИммуноФА-АФП, в сыворотке крови здоровых лиц (в том числе небеременных 
женщин) (п=250) не превышала 10 МЕ/мл. Концентрации АФП в сыворотке крови 350 жен­
щин в различные сроки нормально протекающей беременности приведены в табл. 1.
Таблица 1
Срок беременности в 
неделях
Медиана,
МЕ/мл
Толерантные пределы, 
МЕ/мл
7 -8 3,5 1,0-5,0
9-10 10 8-16
11-12 2 0 12,5-30
13-14 35 15-50
15-16 47 22-70
17-18 60 30-90
19-20 85 50-140
2 1 -22 ПО 65-165
23-24 145 100-185
25-26 183 110-255
27-28 245 195 -350
29-30 300 200 -  360
31-32 310 175 -330
33-34 300 195-325
35-36 230 165-280
37-38 190 140-215
39-40 1 0 0 80-135
Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора ИммуноФА-АФП 
уточнить значения концентраций АФП, соответствующие нормальным для обследуемого 
контингента.
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора, за исключением стоп-реагента, в используемых концентра­
циях являются нетоксичными.
Стоп-реагент действует на кожу и слизистые прижигающим образом, вызывая раз­
дражение и ожоги, поэтому в случае попадания на кожные или слизистые покровы его сле­
дует немедленно тщательно смыть большим количеством проточной воды.
При работе с набором следует соблюдать "Правила устройства, техники безопасно­
сти, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при 
работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений 
системы Министерства здравоохранения СССР (Москва, 1981 г.).


--- стр. 4 ---
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые 
перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфици­
рованные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита и дру­
гие возбудители вирусных инфекций.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
- Фотометр вертикального сканирования, позволяюгций измерять оптическую плотность 
раствора в лунках планшета при длине волны 450 нм;
- термостат суховоздушный, поддерживающий температуру +(37+1 )”С;
- пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объемом со сменными на­
конечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 2-20 мкл, 50-200 мкл, 200-1000 мкл;
- пипетка полуавтоматическая многоканальная с переменным объемом со сменными на­
конечниками, позволяющая отбирать объемы жидкости 50-250 мкл;
- секундомер;
- шейкер;
- стакан химический мерный или колба мерная вместимостъю 300 мл;
- вода дистиллированная;
- бумага филътровальная или салфетки марлевые;
- перчатки резиновые или пластиковые.
7. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ
7.1. Приготовление рабочего раствора фосфатно-солевого буферного раствора 
(ФСБР).
Содержимое флакона с концентратом фосфатно-солевого буферного раствора (ФСБР) 
перенести в мерный стакан или колбу вместимостью 300 мл, дважды ополоснуть флакон 
дистиллированной водой, все промывные воды объединить с разведенным ФСБР и довести 
общий объем раствора до 300 мл дистиллированной водой.
Полученный рабочий раствор ФСБР можно хранить в закрытой емкости не более 7 
дней при температуре +(2-8)°С.
Примечание. При хранении концентрата ФСБР могут образовываться кристаллы, по­
этому перед отбором аликвоты ФСБР необходимо слабо подогреть флакон с буферным рас­
твором, поместив его в водяную баню или термостат при температуре +37”С до полного рас­
творения кристаллов.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Внесение реагентов следует проводить согласно схеме на рис. 1 (стр. 5).
8.1. Вставить в рамку необходимое количество лунок для калибровочных проб, ис­
следуемых образцов и контрольной сыворотки для постановки в дубликатах. Неиспользуе­
мые Стрипы необходимо тщательно заклеить пленкой для заклеивания планшетов и хранить 
в упаковке при температуре +(2-8)°С в течение всего срока годности набора
8.2. В два ряда лунок планшета внести в дубликатах по 20 мкл калибровочных проб 
(КП), начиная с минимальной концентрации.
8.3. В две лунки планшета внести по 20 мкл контрольной сыворотки (КС).
8.4. В оставшиеся лунки внести в дубликатах по 20 мкл исследуемых образцов сыво­
ротки крови (ИС).
8.5. Во все лунки внести по 100 мкл конъюгата моноклональных антител к АФП с пе- 
роксидазой. Конъюгат вноситъ в лунки планшета в той же последовательности, что и калиб-