Набор реагентов для определения общей активности α-амилазы кинетическим методом в сыворотке крови и моче «α-АМИЛАЗА ДиаС» по ТУ 9398-005-78067494-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- 2 Информация для заказа № набора Фасовка 10 050 021 Щ 5x20 мл + Я 2 1x25 мл 10 050 022 Щ 5x80 мл + R2 1x100 мл Справка [1, 2] а-амилазы - это гидролитические ферменты, разлагающие крахмал до мальтозы. В организме человека а-амилазы имеют различное происхождение: панкреатическая амилаза производится поджелудочной железой и выходит в Кишечный тракт, слюнная амилаза синтезируется в слюнных железах и секретируется в слюну. Присутствующая в крови амилаза выходит через почки и экскретируется в мочу. Следовательно, увеличение сывороточной активности отражается в повышении мочевой амилазной активности. В основном, измерение а-амилазы в сыворотке и в моче используется для диагностики нарушений работы поджелудочной железы и для обнаружения развития осложнений [1, 2]. При острых панкреатитах активность амилазы крови повышается в течение нескольких часов после начала болей в животе, при-мерно через 12 ч достигает пика и возвращается к нормальным значениям по прошествии 5 дней. Специфичность а-амилазы для болезней поджелудочной железы не очень высока, поскольку повышенные уровни также наблюдаются при различных болезнях, не связанных с поджелудочной железой, например, паротите и почечной недостаточности. Поэтому для подтверждения острого панкреатита необходимо дополнительно проводить измерение активности липазы. Метод Ферментативный фотометрический тест, в котором субстрат 4,6-этилиден-(С7)-п-нитрофенил-(С1)- а-О-мальтогептазид (ЕР5-С7) расщепляется а-амилазами на различные фрагменты. Далее они, в свою очередь, расщепляются а-глюкозидазой с образованием глюкозы и п-нитрофенола. Увеличение оптической плотности представляет общую (панкреатическую и слюнную) амилазную активность образца [3, 4]. Принцип определения 5ЕР5-С7 + 5НгО < а"амилаза > 2Этилиден-С5 + 2С2РМР + 2Этилиден-С4 +2вЗРМР + Этилиден-ЭЗ + С4РМР 2G2PNP + 2G3PNP + G4PNP + 14НгО < а~ £ ^ ко зи Д аза > 5PNP + 14G (PNP = п-Нитрофенол, G = Глюкоза) Реагенты Компоненты и их концентрации в реакционной смеси R1: Good’s буфер, моль/л pH 7.15 0.1 NaCI, ммоль/л 62,5 MgCI2, ммоль/л 12,5 а-Гпюкозидаза, кЕ/л >2 R2: Good’s буфер, моль/л pH 7.15 0.1 EPS-G7, ммоль/л 8,5 Стабильность и хранение Реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хранении при 2-8°С, защищенном от света месте. Срок годности - 12 месяцев. Не допускать загрязнения. Не замораживать реагенты! Меры предосторожности 1. Слюна и кожа содержат а-амилазу, поэтому никогда не пипетировать реагенты ртом и избегать контакта реагента с кожей. 2. В качестве консерванта реагенты содержат азид натрия (0.95 г/л). Не глотать! Избегать контакта реагентов с кожей и слизистыми. 3. Обычные меры предосторожности, принимаемые при работе с лабораторными реактивами. Обезвреживание отходов В соответствии с местными правилами. Подготовка реагентов З а п у с к р е а к ц и и с у б с т р а т о м Реагенты готовы к использованию. З а п у с к р е а к ц и и о б р а з ц о м Смешайте 4 части реагента 1 с одной частью реагента 2 (например, 20 мл R1 + 5 мл R2) = мон о реагент. С т а б и л ь н о с т ь м о н о р е а г е н т а : 6 месяцев при 2-8°С 4 недели при 15-25°С Монореагент хранить в защищенном от света месте! Необходимые материалы, не включенные в набор • 0.9% раствор NaCI. • Общее лабораторное оборудование. --- стр. 3 --- 3 Исследуемые образцы • Сыворотка. • Гепаринизированная или ЭДТА плазма. • Моча. С т а б и л ь н о с т ь в с ы в о р о т к е и л и п л а з м е : 7 дней при 20-25°С 7 дней при 4-8°С 1 год при -20°С С т а б и л ь н о с т ь в м о ч е : 2 дня при 2 0 -2 5°С 10 дней при 4-8°С 3 недели при -20°С Загрязненные образцы хранению не подлежат. Процедура определения А д а п т а ц и и к а в т о м а т и з и р о в а н н ы м с и с т е м а м з а п р а ш и в а й т е д о п о л н и т е л ь н о Длина волны, нм 405 Длина опт. пути, см 1 Температура, °С 37 Измерение относительно холостой пробы Запуск реакции субстратом Холостая проба Сыворотка/плазма Моча Образец, мкл 20 10 Реагент 1, мкл 1000 1000 1000 Перемешать, инкубировать 1 мин, затем добавить: Реагент 2, мкл 250 250 250 Перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плот ность (А2) через 1, 2 и 3 мин. Запуск реакции образцом Холостая проба Сыеоротка/плаэма Моча Образец, мкл - 20 10 Монореагент, мкл 1000 1000 1000 Перемешать. Через 2 мин измерить оптическую плотность (А1) и включить секундомер. Измерить оптическую плот ность (А2) через 1, 2 и 3 мин. Расчет По фактору Из значений оптической плотности вычислить ДА/мин и умножить на соответствующий фактор из нижеследующей таблицы: ДА/мин х фактор = Амилазная активность [Е/л] С ы в о р о т к а /п л а з м а Запуск субстратом 5670 Запуск образцом 4554 М о ч а Запуск субстратом 11250 Запуск образцом 9018 По калибратору ДА / М ИНдбрдзцд а-Амилаза [Е/л] = лД -----------------* Конц. кал. [Е/л]ДМ I МИНкалидрат0ра Контроли и калибраторы Для калибровки автоматизированных фотометрических систем рекомендуется калибратор TruCal U фирмы DiaSys. Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контрольных сывороток TruLab N и Р . Кат. No Фасовка TruCal U 5 9100 60 10 060 1 хЗ мл TruLab N 5 9000 60 10 060 1x5 мл TruLab Р 5 9050 60 10 060 1x5 мл --- стр. 4 --- 4 Рабочие характеристики Диапазон измерений Тест разработан для определения амилазной активности, соответствующей изменению оптической плотности не более ДА/мин = 0.35 (диапазон измерения активности амилазы составляет 7.5-1590 Е/л при запуске реакции образцом). Если значение превосходит верхнюю границу диапазона, образец должен быть разведен 1 + 10 изотоническим раствором №01 (9 г/л), и полученный результат должен быть умножен на 11. Специфичность/Помехоустойчивость Аскорбиновая к-та до 30 мг/дл, билирубин до 40 мг/дл и липемия до 1000 мг/дл триглицери дов не влияют на точность анализа. Гемоглобин, даже при низких концентрациях, мешает определению. Чувствительность/Пределы определения Нижний предел определения 3 Е/л. Воспроизводимость (ч и с л о и з м е р е н и й п - 2 0 ) Образец Среднеарифметичес кое значение, Е/л SD, Е/л CV, % Внутрисерийная Образец 1 184 2.00 1.08 Образец 2 398 2.67 0.67 Образец 3 841 4.96 0.59 Межсерийная Образец 1 180 1.82 1.01 Образец 2 383 3.74 0.97 Образец 3 817 7.48 0.92 Нормальные величины [6] Женщины Мужчины Сыворотка/плазма, Е/л <100 <100 Моча, Е/л <447 <491 Литература 1. Lorentz К. a-Amylase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgeselischaft; 1998. p. 192-202. 2. Moss DW , Henderson AR. Digestive enzymes of pancreatic origin. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3fd ed. Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999. p.689-698. 3. Kruse-Jarres JD, Kaiser C , Hafkenscheid JC, Hohenwallner W , Stein W ., Bohner J et al. Evaluation of a new alpha-amylase assay using 4,6-ethylidene-(G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-alpha,D-maltoheptaoside as substrate. J Clin Chem Biochem 1989; 27: 103- 113. 4. Lorentz K. Approved recommendation on IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 9. IFCC method for a-amylase (1,4-a-D-Glucan-4-glucanohydrolase, EC 3.2.1.1). Clin Chem Lab Med 1998; 38: 185-203. 5. Lorentz K . Routine a-amylase assay using protected 4-nitrophenyl-1,4-a-D-maltoheptaoside and a novel a-glucosidase. Clin Chem 2000; 46: 644-9. 6. Junge W , Wortmann W , Wilke B , Waldenstroem J et al. Development and evaluation of assays for determination of total and pancreatic amylase at 37°C according to the principle recommended by the IFCC. Clin Biochem 2001; 34: 607-15. Изготовитель ООО «ДИАСИС» 142290, Московская область, г. Пущино, ул. Грузовая, д. 1а. Зам. генерального директора ООО «ДИАСИС» , к.б.н. ____Ю р к о в и с - «СОГЛАСОВАНО» Зав. кафедрой клинической лабораторной диагностики ГОУ ДПО РМАПО «Росздрава» д.м.н., профессор _ _ ' Долгов В.В. П с д п ■ * удостоверяю : сг.-зциагк'^^ф к ад р о во й работе im fc Росшийw v /il го ю г.