Набор реагентов для определения ДНК Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium и Trichomonas vaginalis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® NCMT» по ТУ 9398-025-09286667-2014 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2015/3168 от 13.10.2015 · класс риска 2б

Производитель: ООО "НекстБио" (Россия)

Вид изделия: Множественные инфекции передающиеся половым путем нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 504 контракта, медианная цена за единицу 25 100 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
Генеральный директор 
О г р а н и ч е н н о й
5тью «НекстБио»
В.М. Трухан 
^  2015 г.
«УТВЕРЖДАЮ»
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения ДНК 
Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma 
genitalium и Trichomonas vaginalis методом лолимеразной 
цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro
«АмплиПрайм® NCMT»
АмплиПрайм
ш1
ООО «НекстБио»,
Российская Федерация, 111394,
город Москва, улица Полимерная, дом 8, стр, 2
IVD


--- стр. 2 ---
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ....................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ......................................................................................................................3
ПРИНЦИП МЕТОДА............................................................................................................4
ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ.......................................................................5
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ............................................................................6
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.......................................................................9
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.......................................................................................10
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ..............................................13
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА. 16
ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ ДНК........................21
ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
ПРОБ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА............................................................................22
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ...........................................................................22
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ...................................................22
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 1  («ПЦР-комплект» вариант FRT-100)...............................24
СОСТАВ..........................................................................................................................24
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ».............24
A. Подготовка пробирок для амплификации............................................................24
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»....25
B. Анализ и интерпретация результатов..................................................................27
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2 («ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN) .........................33
СОСТАВ..........................................................................................................................33
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ».............33
A. Подготовка пробирок для амплификации............................................................33
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»....35
B. Анализ и интерпретация результатов..................................................................36
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3(«ПЦР-комплект» вариант FRT-L)....................................42
СОСТАВ..........................................................................................................................42
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»............42
A. Подготовка пробирок для амплификации...........................................................42
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»....43
B. Анализ и интерпретация результатов..................................................................45
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 4 (комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб- 
УРО» и «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN)..............................................................51
СОСТАВ..........................................................................................................................51
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ».............52
A. Подготовка пробирок для амплификации............................................................52
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени»....53
B. Анализ и интерпретация результатов..................................................................54
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ.....................61
ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ..............................................61
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ........................................63
ПРИЛОЖЕНИЕ 1............................................................................................................... 64
стр. 2 из 66


--- стр. 3 ---
список СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения:
BKO-FL - экзогенный внутренний контрольный образец
ГЭ - геномные эквиваленты
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
дНТФ - дезоксирибонуклеотидтрифосфат
ИППП - инфекции, передаваемые половым путем
К1, К2 - ДНК-калибраторы
К+ - положительный контроль ПЦР
К- - отрицательный контроль ПЦР
НК нуклеиновые кислоты
ОК отрицательный контроль экстракции
ОКО отрицательный контрольный образец
ПЦР полимеразная цепная реакция
РУ регистрационное удостоверение
УДГ урацил-ДНК-гликозилаза
FRT флуоресцентная детекция в режиме «реального времени»
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «АмплиПрайм® МСМТъ предназначен для качественного и 
количественного определения ДНК Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis,  
Mycoplasma genitalium  и Trichomonas vaginalis  в биологическом материале 
(отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта (отделяемое слизистой 
оболочки влагалища, соскоб эпителия со слизистой оболочки цервикального канала 
и соскоб эпителия со слизистой оболочки уретры), прямой кишки, ротоглотки, 
конъюнктивы; моча, секрет предстательной железы) методом ПЦР с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации. Набор 
реагентов используется в клинической лабораторной диагностике для исследования 
биологического материала, полученного от лиц с подозрением на наличие 
инфекций, передаваемых половым путем.
Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из 
исследуемого материала с помощью комплектов реагентов, рекомендованных 
Производителем.
ВНИМАНИЕ! В соответствии с федеральным законом от 21.11.2011 №323-Ф3 «Об 
основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» ПЦР-исследование 
является одним из методов всестороннего обследования пациента, на основании 
которых лечащий врач устанавливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению 
пациента.
стр. 3 из 66


--- стр. 5 ---
человека, рекомендованного Производителем. Во втором варианте рассчитываются 
нормированные значения концентрации ДНК микроорганизмов, отражающие 
количество клеток микроорганизмов относительно клеток слизистой оболочки 
человека.
Набор реагентов содержит систему защиты от контаминации ампликонами за счет 
применения фермента урацил-ДНК-гликозилазы (УДГ) и трифосфата дезоксиуридина. 
Фермент УДГ распознает и катализирует разрушение цепей ДНК, содержащих 
дезоксиуридин, но не ДНК, содержащей дезокситимидин. Дезоксиуридин отсутствует 
в природной ДНК, но всегда присутствует в ампликонах, поскольку трифосфат 
дезоксиуридина входит в состав смеси дНТФ в реагентах для амплификации. 
Дезоксиуридин делает контаминирующие ампликоны восприимчивыми к разрушению 
ферментом УДГ до начала амплификации ДНК-мишени, и, следовательно, они не 
могут быть в дальнейшем амплифицированы.
Фермент УДГ термолабилен и инактивируется при нагревании выше 50 °С и 
поэтому не разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР.
На этапе амплификации одновременно в одной пробирке проводится 5 реакций - 
амплификация участков ДНК N. gonorrhoeas, С. trachomatis, М. genitalium  и
7. vaginalis, а также амплификация последовательности BKO-FL. Результаты 
амплификации ДНК N. gonorrhoeas, С. trachomatis, М. genitalium  и 7. vaginalis, а 
также ДНК BKO-FL регистрируются по 5 различным каналам флуоресцентной 
детекции:
Таблица 1
Канал для 
флуорофора FAM JOE ROX Cy5.5 Су5
ДНК-мишень ДНК
N. gonorrhoeas
ДНК
с, trachomatis
ДНК
M. genitalium
ДНК
T. vaginalis ДНК BKO-FL
Область
амплификации 16S rRNA gene cryptic plasmid gyrB gene
ДНК-повторы для 
ПЦР-
идентификации
искусственно
синтезированная
последовательность
ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ
Набор реагентов выпускается в 4 формах комплектации:
Форма 1 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100.
Форма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN.
Форма 3 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L.
Форма 4 включает комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР- 
комплект» вариант FRT-100 FN.
Формы комплектации 1, 2, 3 предназначены для проведения амплификации ДНК 
с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» и
стр. 5 из 66


--- стр. 6 ---
позволяют выявлять ДНК в качественном и количественном формате. Для 
проведения полного ПЦР-исследования необходимо использовать комплекты 
реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные Производителем.
Форма комплектации 2 может быть использована совместно с автоматическими 
станциями приготовления реакционных смесей.
Форма комплектации 4 предназначена для проведения полного ПЦР- 
исследования, включающего экстракцию ДНК из биологического материала и 
амплификацию ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме 
«реального времени», и позволяет выявлять ДНК в качественном и количественном 
формате.
Форма комплектации 4 может быть использована совместно с автоматическими 
станциями пробоподготовки и приготовления реакционных смесей.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Для данного набора реагентов применимы следующие характеристики: 
Аналитическая чувствительность и линейный диапазон измерения
Таблица 2
Вид
исследуе­
мого
материала
Транспортная
среда
Комплект для  
экстракции ДНК
Комплект
для
амплифи­
кации
Микроорганизм
Аналитичес­
кая чувстви­
тельность,  
ГЭ/мл^
Линейный
диапазон
измерения,
ГЭ/мл
отделяемое 
слизистых 
оболочек 
урогениталь­
ного тракта
«АмплиПрайм 
ТС» или 
«АмплиПрайм 
тем» или 
«Транспортная 
среда ТС- 
ЭДЭМ»^
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«АмплиПрайм®
МАГНО-сорб-
УРО»
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^
2x10^-
1x10^C. trachomatis 5x10^
M. genitalium 1x10^
T. vaginalis 5x1 o' 2x10^-
1x10^
«Транспортная 
среда ТС-
эдэм»^
«АмплиПрайм
ЭДЭМ»^
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^
-
C. trachomatis 5x10^
M. genitalium 1x10^
T. vaginalis 5x10'
отделяемое 
слизистой 
оболочки 
прямой кишки, 
конъюнктивы
АмплиПрайм 
ТС» или 
«АмплиПрайм 
тем» или 
«Транспортная 
среда ТС-
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^ 2x10^-
1x10^C. trachomatis 5x10^
M. genitalium He используется^
Количество геномных эквивалентов микроорганизма (ГЭ):
-  в биологическом материале (отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, прямой 
кишки, ротоглотки, конъюнктивы), помещенном в указанную транспортную среду, в пересчете на 1  
мл;
-  в пересчете на 1  мл образца мочи или секрета предстательной железы.
^ Форма комплектации 3 или 4 комплекта реагентов «АмплиПрайм ЭДЭМ».
^ Используется только при качественном определении.
^ Выявление данного микроорганизма в указанном виде биоматериала не имеет клинического 
значения.
стр. 6 из 66


--- стр. 7 ---
ЭДЭМ»'^
«Транспортная 
среда ТС-
эдэм»®
«АмплиПрайм
эдэм»“
«ПЦР-
комплект» 
вариант 
FRT-100, 
FRT-100 
FN. FRT-L
N. gonorrhoeae
Т. vaginalis
С. trachomatis
М. genitalium
Т. vaginalis
5x10^
5x10^
Не используется^
отделяемое
слизистой
оболочки
ротоглотки
АмплиПрайм 
ТС» или 
«АмплиПрайм 
тем» или 
«Транспортная 
среда ТС-
эдэм»^
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^ 2x10 - 
1x10'
C. trachomatis
M. genitalium He используется^
T. vaginalis
«Транспортная 
среда ТС- 
ЭДЭМ»^
«АмплиПрайм
эдэмИ
«ПЦР-
комплект» 
вариант 
FRT-100, 
FRT-100 
FN. FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^
C. trachomatis
M. genitalium He используется'^
T. vaginalis
секрет 
предстатель­
ной железы
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«АмплиПрайм®
МАГНО-сорб-
УРО»
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 5x10^
C. trachomatis 5x10^
M. genitalium 1x10'^
T. vaginalis 5x10'
2x10"
1x10^
2x1 o'" -  
1x10^
моча
«АмплиПрайм 
ТС» или 
«АмплиПрайм 
тем» или 
«Транспортная 
среда ТС- 
ЭДЭМ»^
«АмплиПрайм
ДНК-сорб-АМ»
«АмплиПрайм®
МАГНО-сорб-
УРО»
«ПЦР-
комплект»
вариант
FRT-100,
FRT-100
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae 1x10"
C. trachomatis 1x10^ 4x10 - 
1x10^
M. genitalium 2хШ
T. vaginalis
«Транспортная 
среда ТС- 
ЭДЭМ»^
«АмплиПрайм
ЭДЭМ»'^
«ПЦР- 
комплект» 
вариант 
FRT-100, 
FRT-100 
FN, FRT-L
N. gonorrhoeae
C. trachomatis
M. genitalium
T. vaginalis
1x10" 4x10 -  
1x10^
1x10^
1x10"
2x10"
1x10"
Данные значения характеристик достигаются при соблюдении правил, указанных 
в разделах «Взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала» и 
«Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК».
Аналитическая чувствительность в отношении каждого из микроорганизмов 
сохраняется и в присутствии высоких концентраций ДНК других анализируемых 
микроорганизмов -  до 10^ ГЭ/мл.
Аналитическая специфичность
Набор реагентов обнаруживает фрагменты ДНК заявленных микроорганизмов. 
Аналитическая специфичность набора реагентов доказана при исследовании ДНК 
следующих микроорганизмов: Gardnerella vaginalis, Lactobacillus  spp.. Enterococcus 
faecium, Escherichia coli, Staphylococcus  spp.. Streptococcus spp., Candida albicans,
стр. 7 из 66


--- стр. 8 ---
усо plasma horn in is, Urea plasma ureaiyticum, Urea pi asm a parvum, Neisseria flava,  
Neisseria subfiava, Neisseria sicca, Neisseria mucosa, Treponema paliidum. Toxoplasma  
gondii, HSV 1  и 2 типа, CMV, HPV, a также геномной ДНК человека.
При тестировании образцов ДНК вышеперечисленных микроорганизмов и ДНК 
человека неспецифических реакций выявлено не было.
Воспроизводимость, повторяемость и правильность
Воспроизводимость и повторяемость были определены путем тестирования 
модельного образца биоматериала. Модельный образец биоматериала был 
приготовлен разведением стандартного образца предприятия, содержащего ДНК 
N. gonorrhoeae, С. trachomatis, М. genitalium  и Т vaginalis в трех диапазонах 
концентраций (от 5x10^ до 1x10"^, от 5x10"^ до 1x10^, более 5х10^ГЭ/мл) в 
биологическом материале, не содержащем ДНК каких-либо других возбудителей 
ИППП.
Правильность была определена путем тестирования стандартных образцов 
предприятия в концентрации 5x10"^ ГЭ/мл.
Таблица 3
Воспроизводимость
Микроорганизм
Исходное
значение
концентрации,
ГЭ/мл
Количество
повторов
Среднее значение 
концентрации, 1д
Стандартное
отклонение
(SD)
Коэффициент 
вариации (CV),
%
N. gonorrhoeae
от 5x10^ до 
1x10'*
80 3,88 0,07 1.9
С. trachomatis 80 3,87 0,08 2,1
М. genitalium 80 3,87 0,10 2,6
Т  vaginalis 80 3,93 0,05 1.3
N. gonorrhoeae
ОТ 5x10"^ до 
1x10®
80 4,86 0,10 2,0
С. trachomatis 80 4,88 0,09 1,9
М. genitalium 80 4,85 0,09 1.9
Т. vaginalis 80 4,81 0,05 1.0
N. gonorrhoeae
более 5x10®
80 5,83 0,07 1,2
С. trachomatis 80 5,88 0,09 1.5
М. genitalium 80 5,89 0,09 1.5
Т. vaginalis 80 5,83 0,07 1.2
Таблица 4
Повторяемость
Микроорганизм
Исходное
значение
концентрации,
ГЭ/мл
Количество
повторов
Среднее значение 
концентрации, 1д
Стандартное
отклонение
(SD)
Коэффициент 
вариации (CV),
%
N. gonorrhoeae
от 5x10® до 
1x10''
40 3,90 0,06 1.5
С. trachomatis 40 3,88 0,08 2,0
М. genitalium 40 3,88 0,10 2,5
Т. vaginalis 40 3,92 0,04 1.1
N. gonorrhoeae ОТ 5x10"^ до 
1x10®
40 4,86 0,09 1.9
С. trachomatis 40 4,89 0,09 1,8
стр. 8 из 66


--- стр. 9 ---
М. genitalium 40 4,84 0,09 1,9
Т. vaginalis 40 4,82 0,04 0,8
N. gonorrhoeae 40 5,84 0,07 1.2
С. trachomatis более 5x10^ 40 5,84 0,08 1,4
М. genitalium 40 5,88 0,09 1,5
Т. vaginalis 40 5,83 0,06 1.1
Таблица 5
Правильность
Микроорганизм Количество
повторов
Среднее 
значение 
измерения, 1д
Установленное
значение
Систематическая 
погрешность (В)
|д %
N. gonorrhoeae 100 4,85 4,86 0,01 0,2
С. trachomatis 100 4,85 4,79 0,06 1,25
М. genitalium 100 4,95 4,95 0 0
Т. vaginalis 100 4,78 4,70 0,08 1.7
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Таблица 6
Результаты тестирования набора реагентов «АмплиПрайм® NCMT» в 
сравнении с референтным методом
Тип
образцов
Результаты 
применения набора 
реагентов 
«АмплиПрайм® 
NCM T»
6Результаты применения референтного метода
N. gonorrhoeae С. trachom atis М. genitalium Г. vaginalis
положи­
тельных
отрица­
тельных
положи­
тельных
отрица­
тельных
положи­
тельных
отрица­
тельных
положи­
тельных
отрица­
тельных
Отделяемое
слизистой
оболочки
урогенитального
тракта
Всего
исследовано 
500 образцов
положи­
тельных 113 0 101 0 109 0 101 0
отрица­
тельных 0 387 0 399 0 391 0 399
Отделяемое 
слизистой 
оболочки 
прямой киш ки
Всего
исследовано 
300 образцов
положи­
тельных 103 0 104 0 0 0 0 0
отрица­
тельных 0 197 0 196 0 300 0 300
Отделяемое
слизистой
оболочки
ротоглотки
Всего
исследовано 
270 образцов
положи­
тельных 109 0 0 0 0 0 0 0
отрица­
тельных 0 161 0 270 0 270 0 270
Отделяемое
конъю нктивы
Всего
исследовано 
300 образцов
положи­
тельных 106 0 101 0 0 0 0 0
отрица­
тельных 0 194 0 199 0 300 0 300
Моча
Всего
исследовано 
500 образцов
положи­
тельных 104 0 110 0 101 0 110 0
отрица­
тельных 0 396 0 390 0 399 0 390
Секрет
предстательной
железы
Всего
исследовано 
334 образца
положи­
тельных 102 0 115 0 102 0 106 0
отрица­
тельных 0 232 0 219 0 232 0 228
Были использованы 500 образцов отделяемого слизистых оболочек 
урогенитального тракта; 300 образцов отделяемого слизистой оболочки прямой 
кишки; 270 образцов отделяемого слизистой оболочки ротоглотки; 300 образцов
®  в качестве референтного метода использовался набор реагентов «АмплиСенс® N. gonorrhoeae /  
С. trachomatis / М. genitalium/Т.  иад/лаЯз-МУЛЬТИПРАЙМ-РЬ» (РУ № ФСР 2009/06060).
стр. 9 из 66


--- стр. 10 ---
отделяемого конъюктивы; 500 образцов мочи; 334 образца секрета предстательной 
железы, полученных от пациентов с подозрением на урогенитальную инфекцию, с 
вагинитом, цервицитом, уретритом, проктитом, конъюнктивитом, фарингитом и 
простатитом.
Таблица 7
Диагностические характеристики набора реагентов 
«АмплиПрайм® NCMT»
Тип образцов
Диагностическая чувствительность 
(с доверительной вероятностью 
_________95 %), не менее %
N. допогг  
hoeae
С. tracho­
m atis
М. genita-  
lium
Т. vagina­
lis
Диагностическая специфичность 
(с доверительной вероятностью 
95 %), не менее %
N. допог-  
rhoeae
С. tracho­
m atis
М. genita-  
lium
Т. vagina­
lis
отделяемое
слизистых
оболочек
урогенитального
тракта
97,4 97,1 97,3 97,1 99,2 99,3 99,2 99,3
отделяемое 
слизистой 
оболочки прямой 
кишки
97,1 97.2 98,5 98,5 99,0 99,0
отделяемое
слизистой
оболочки
ротоглотки
97,3 98,2 98,6 98,6 98,6
отделяемое
конъюнктивы 97.2 97,1 98,5 98,5 99,0 99,0
моча 97,2 97,3 97.1 97,3 99,2 99,2 99,3 99,2
секрет
предстательной
железы
97,1 97,4 97,1 97,2 98,7 98,6 98.7 98,7
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно­
биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие 
возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно- 
эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические 
требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний 
МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы 
амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим 
микроорганизмы I-IV групп патогенности».
При работе необходимо всегда выполнять следующие требования:
- Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать 
работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней».
стр. 10 из 66


--- стр. 11 ---
Убирать и дезинфицировать разлитые образцы, используя дезинфицирующие 
средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней».
- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в 
отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Экстракции, 
продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, 
оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия 
процесса.
- Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также 
использованные реагенты, упаковку, биологический материал, включая 
материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, 
следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими 
отходами».
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих
продукты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого,
поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны,
оборудования и реагентов.
- Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для 
автоматических дозаторов с фильтром^. Одноразовую пластиковую посуду 
(пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, 
содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для 
обеззараживания медицинских отходов.
- Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постановка ПЦР, 
до начала и после завершения работ необходимо подвергать 
ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин.
- Набор реагентов предназначен для одноразового применения для проведения 
ПЦР-исследования указанного количества проб (см. раздел «Состав»).
- Набор реагентов готов к применению согласно данной инструкции. Применять 
набор реагентов строго по назначению.
- К работе с набором реагентов допускается только персонал, обученный методам 
молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической 
лаборатории в установленном порядке (СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями
’ ’ Для удаления надосадочной жидкости в процессе экстракции используются одноразовые наконечники 
без фильтра.
стр. 11 из 66


--- стр. 31 ---
Таблица 14
Результаты для контролей различных этапов  
количественного ПЦР-исследования
^Р М А  КОМПЛЕКТАЦИИ 1. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
Контроль
Контроли­
руемый этап 
ПЦР-
исследова-
ния
Значение порогового цикла по каналу для флуорофора (Ct)
FAM JOE ROX Су5.5 Су5
OK Экстракция
ДНК отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
К- ПЦР отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
К1 ПЦР определено определено определено определено определено
К2 ПЦР
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ПЦР (К+) значение порогового цикла {Ct) по 
любому из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 12) отсутствует или 
превышает граничное значение. Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
2. Для отрицательного контроля экстракции (ОК):
а) по каналам для флуорофоров РАМ и/или JOE и/или ROX и/или Су5.5 
определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация 
лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, 
исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и 
повторить ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК 
анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора Су5 значение порогового цикла {Ct) отсутствует 
или определено больше граничного. Это означает, что ОК не выполнил 
функцию контроля контаминации. Требуется повторное ПЦР-исследование 
всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов, 
начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров РАМ и/или 
JOE и/или ROX и/или Суб и/или Суб.5 определено значение порогового цикла 
{Ct). Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех
стр. 31 из 66


--- стр. 32 ---
образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов и/или 
ВКО.
4. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К1 
отсутствует значение порогового цикла {Ct) по какому-либо из указанных каналов 
для флуорофоров (см. табл. 14). Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
5. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К2 
значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из указанных каналов для 
флуорофоров (см. табл. 14) отсутствует или превышает граничное значение. 
Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
6. При проведении количественного ПЦР-исследования показатель эффективности 
Е при построении калибровочной прямой менее 80% или более 120%. 
Необходимо проверить правильность заданных концентраций ДНК-калибраторов 
в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность выбранного 
уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях ДНК- 
калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
7. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). 
Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или 
параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
>РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 1. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
стр. 32 из 66


--- стр. 33 ---
'РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2 («ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN)
СОСТАВ
Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN для амплификации 
фрагментов ДНК N. gonorrhoeae, С. trachomatis, М. genitalium  и Т. vaginalis с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» 
позволяет проводить ПЦР-исследование в качественном и количественном 
формате. Комплект реагентов включает:
Реагент Описание Объем, мл Количество
ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /
С. trachomatis / М. genitalium / 
Т. vaginalis________________
Прозрачная бесцветная 
жидкость 1.2 1 пробирка
ПЦР-буфер-Н Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,6 1  пробирка
К1 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,2 1 пробирка
К2 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0.2 1 пробирка
К- Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,2 1  пробирка
Комплект реагентов рассчитан на проведение 110 реакций амплификации, 
включая контроли.
К набору реагентов прилагается диск, содержащий руководство оператора  
и программное обеспечение версии 1.0 в формате Microsoft Excel для  
автоматической обработки исходных данных и получения результатов.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
Выбор пробирок для амплификации зависит от используемого  
амплификатора с системой детекции в режиме «реального времени».
Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов  
используются одноразовые наконечники с фильтрами.
А. Подготовка пробирок для амплификации
Общий объем реакционной смеси -  25 мкл, включая объем пробы ДНК -  
10 мкл.
1. Рассчитать количество каждого реагента, требующееся для приготовления 
реакционной смеси. На одну реакцию требуется 10 мкл ПЦР-смеси  
N. g o n orrh oeae /  С. trachom atis /  М. g en italiu m  / Т. vag inalis  и 5 мкл ПЦР-  
буфера-Н. Смесь готовить на общее число исследуемых и контрольных образцов 
(см. контрольные реакции в п. 7) плюс запас на несколько реакций.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует смешивать непосредственно
стр. 33 из 66


--- стр. 40 ---
количественного определения ДНК человека.
ВНИМАНИЕ! Подробную информацию по расчету значения «число ГЭ ДНК человека 
в 1  мл» смотрите в инструкции по применению набора реагентов для 
количественного определения ДНК человека.
Результат количественного ПЦР-исследования считать достоверным, если  
получены правильные результаты для контролей этапов экстракции и  
амплификации ДНК в соответствии с табл. 21 и вкладышем, прилагаемым к  
набору реагентов.
Таблица 21
Результаты для контролей различных этапов 
количественного ПЦР-исследования
РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
Контроль
Контроли­
руемый этап 
ПЦР-
исследова­
ния
Значение порогового цикла по каналу для флуорофора (Ct)
FAM JOE ROX Су5.5 Су5
OK Экстракция
ДНК отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
ПЦР отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
К1 ПЦР определено определено определено определено определено
К2 ПЦР
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ПЦР (К+) значение порогового цикла (Ct) по 
любому из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 19) отсутствует или 
превышает граничное значение. Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
2. Для отрицательного контроля экстракции (ОК)
а) по каналам для флуорофоров FAM и/или JOE и/или ROX и/или Суб.5 
определено значение порогового цикла (Cf). Вероятна контаминация 
лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, 
исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и 
повторить ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК 
анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора Суб значение порогового цикла {Ct) отсутствует 
или определено больше граничного. Это означает, что ОК не выполнил 
функцию контроля контаминации. Требуется повторное ПЦР-исследование
стр. 40 из 66


--- стр. 41 ---
всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов, 
начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров РАМ и/или 
JOE и/или ROX и/или Суб и/или Суб.5 определено значение порогового цикла 
(Cf). Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов и/или 
ВКО.
4. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К1 
отсутствует значение порогового цикла (Cf) по какому-либо из указанных каналов 
для флуорофоров (см. табл. 21). Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
б. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К2 
значение порогового цикла (Cf) по какому-либо из указанных каналов для 
флуорофоров (см. табл. 21) отсутствует или превышает граничное значение. 
Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
6. При проведении количественного ПЦР-исследования показатель эффективности 
Е при построении калибровочной прямой менее 80% или более 120%. 
Необходимо проверить правильность заданных концентраций ДНК-калибраторов 
в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность выбранного 
уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях ДНК- 
калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
7. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). 
Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или 
параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 2. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
стр. 41 из 66


--- стр. 42 ---
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3(«ПЦР-комплект» вариант FRT-L)
СОСТАВ
Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L для амплификации 
фрагментов ДНК N. gonorrhoeae, С. trachomatis, М. genitalium  и Г. vaginalis с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» 
позволяет проводить ПЦР-исследование в качественном и количественном 
формате. Комплект реагентов включает:
iPMA КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
Реагент Описание Объем, мл Количество
ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /
С. trachomatis / М. genitalium / 
Т. vaginaiis-Lyo
Порошок белого цвета
96 пробирок 
объемом 0,2 мл 
или 96-луночный 
планшет для ПЦР
К1 complex Прозрачная 
бесцветная жидкость 0,5 1  пробирка
К2 complex Прозрачная 
бесцветная жидкость 0.5 1  пробирка
К- Прозрачная 
бесцветная жидкость 0,5 1  пробирка
Буфер для элюции В Прозрачная 
бесцветная жидкость 1.2 8 пробирок
Комплект реагентов рассчитан на проведение 96 реакций амплификации, 
включая контроли.
К набору реагентов прилагается диск, содержащий руководство оператора  
и программное обеспечение версии 1.0 в формате Microsoft Excel для  
автоматической обработки исходных данных и получения результатов.
АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ»
Для внесения в пробирки реагентов, проб ДНК и контрольных образцов  
используются одноразовые наконечники с фильтрами.
А. Подготовка пробирок для амплификации
Общий объем реакционной смеси - 25 мкл, включая объем пробы ДНК -  
25 мкл.
1. Отобрать необходимое количество пробирок или достать 96-луночный планшет
для амплификации с готовой лиофилизированной реакционной ПЦР-смесью 
N. gonorrhoeae / С. trachomatis / М. genitalium / Т. vaginalis-Lyo  для
амплификации ДНК исследуемых и контрольных образцов (количество 
контрольных образцов см. в п. 3).
2. В подготовленные пробирки или лунки планшета внести по 25 мкл проб ДНК,  
полученных в результате экстракции из исследуемых образцов.
стр. 42 из 66


--- стр. 49 ---
• b PMA КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
Таблица 28
Результаты для контролей различных этапов 
количественного ПЦР-исследования
Контроль
Контроли­
руемый этап 
ПЦР-
исследова-
ния
Значение порогового цикла по каналу для флуорофора (Ct)
FAM JOE ROX Су5.5 Су5
OK Экстракция
ДНК отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
определено
меньше
граничного
К- ПЦР отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует отсутствует
К1 ПЦР определено определено определено определено определено
К2 ПЦР
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
определено
меньше
граничного
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ПЦР (К+) значение порогового цикла (Ct) по любому 
из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 26) отсутствует или превышает 
граничное значение. Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
2. Для отрицательного контроля экстракции (ОК)
а) по каналам для флуорофоров FAM и/или JOE и/или ROX и/или Суб.5 
определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация 
лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, 
исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и 
повторить ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК 
анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора Суб значение порогового цикла (Ct) отсутствует 
или определено больше граничного. Это означает, что ОК не выполнил 
функцию контроля контаминации. Требуется повторное ПЦР-исследование 
всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов, 
начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров FAM и/или 
JOE и/или ROX и/или Суб и/или Суб.б определено значение порогового цикла (Ct). 
Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех
стр. 49 из 66


--- стр. 50 ---
• b PMA КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов и/или ВКО.
4. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К1 
отсутствует значение порогового цикла {Ct) по какому-либо из указанных каналов 
для флуорофоров (см. табл. 28). Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
5. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К2 
значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из указанных каналов для 
флуорофоров (см. табл. 28) отсутствует или превышает граничное значение. 
Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
6. При проведении количественного ПЦР-исследования показатель эффективности Е 
при построении калибровочной прямой менее 80 % или более 120 %. Необходимо 
проверить правильность заданных концентраций ДНК-калибраторов в 
соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность выбранного уровня 
пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях ДНК-калибраторов 
и уровне пороговой линии показатель эффективности не укладывается в 
требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
7. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). 
Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или 
параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
стр. 50 из 66


--- стр. 51 ---
• b PMA КОМПЛЕКТАЦИИ 4. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 4 (комплекты реагентов «АмплиПрайм® 
МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN)
СОСТАВ
Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» вариант 100С -  комплект 
реагентов для экстракции ДНК из биологического материала -  включает:
Реагент Описание Объем, мл Количество
Лизирующий раствор 
МАГНО-сорб __________
Прозрачная бесцветная
P'5
жидкость 50 1  флакон
Компонент А-1 Прозрачная бесцветная 
жидкость 0.6 2 пробирки
Раствор для отмывки 7 Прозрачная бесцветная 
жидкость 20 1  флакон
Магнетизированная
силика Суспензия черного цвета 0,6 2 пробирки
Буфер для элюции В Прозрачная бесцветная 
жидкость 1,2 13 пробирок
BKO-FL Прозрачная бесцветная 
жидкость 1,0 2 пробирки
ОКО Прозрачная бесцветная 
жидкость 1,2 2 пробирки
Комплект реагентов вариант 100С рассчитан на экстракцию ДНК из 100 проб, 
включая контроли.
Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN для амплификации 
фрагментов ДНК N. gonorrhoeae, С. trachomatis, М. genitalium  и Т. vaginalis с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» 
позволяет проводить ПЦР-исследование в качественном и количественном 
формате. Комплект реагентов включает:
Реагент Описание Объем, мл Количество
ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /
С. trachomatis / М. genitalium / 
Т. vaginalis
Прозрачная бесцветная 
жидкость 1,2 1  пробирка
ПЦР-буфер-Н Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,6 1  пробирка
К1 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,2 1  пробирка
К2 complex Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,2 1  пробирка
К- Прозрачная бесцветная 
жидкость 0,2 1  пробирка
Комплект реагентов рассчитан на проведение 110 реакций амплификации, 
включая контроли.
При хранении лизирующего раствора МАГНО-сорб при температуре ниже 20 X  возможно 
образование осадка в виде кристаллов.
стр. 51 из 66


--- стр. 59 ---
Возможные ошибки:
1. Для положительного контроля ПЦР (К+) значение порогового цикла (Ct) по любому 
из указанных каналов для флуорофоров (см. табл. 33) отсутствует или превышает 
граничное значение. Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
2. Для отрицательного контроля экстракции (ОК)
а) по каналам для флуорофоров РАМ и/или JOE и/или ROX и/или Суб.5 
определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна контаминация 
лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, 
исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и 
повторить ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК 
анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК.
б) по каналу для флуорофора Суб значение порогового цикла (Ct) отсутствует 
или определено больше граничного. Это означает, что ОК не выполнил 
функцию контроля контаминации. Требуется повторное ПЦР-исследование 
всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов, 
начиная с этапа экстракции ДНК.
3. Для отрицательного контроля ПЦР (К-) по каналам для флуорофоров РАМ и/или 
JOE и/или ROX и/или Суб и/или Суб.б определено значение порогового цикла 
(Ct). Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или 
контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- 
исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов и/или 
ВКО.
4. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К1 
отсутствует значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из указанных каналов 
для флуорофоров (см. табл. 36). Необходимо повторить амплификацию и 
детекцию для всех образцов.
б. При проведении количественного ПЦР-исследования для ДНК-калибратора К2 
значение порогового цикла (Ct) по какому-либо из указанных каналов для 
флуорофоров (см. табл. 36) отсутствует или превышает граничное значение. 
Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов.
>РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 4. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
стр. 59 из 66


--- стр. 60 ---
При проведении количественного ПЦР-исследования показатель эффективности Е 
при построении калибровочной прямой менее 80 % или более 120 %. Необходимо 
проверить правильность заданных концентраций ДНК-калибраторов в 
соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность выбранного уровня 
пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях ДНК-калибраторов 
и уровне пороговой линии показатель эффективности не укладывается в 
требуемый диапазон, следует повторить амплификацию и детекцию для всех 
образцов.
Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при этом на 
графике флуоресценции отсутствует участок характерного экспоненциального 
подъема (график представляет собой приблизительно прямую линию). 
Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии или 
параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
'РМА КОМПЛЕКТАЦИИ 4. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ
стр. 60 из 66


--- стр. 61 ---
СРОК годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ 
Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не 
подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, 
указанному на этикетках для невскрытых реагентов.
Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 
8 °С не более 5 сут. Допускается транспортирование при температуре от 2 до 25 °С 
не более 3 сут. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО», «ПЦР- 
комплект» вариант FRT-100, вариант FRT-100 FN при получении разукомплектовать 
в соответствии с указанными температурами хранения.
Хранение.
Форма комплектации 1. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 
хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-К. ПЦР-буфер-К хранить 
при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /  
С. trachomatis /М. genitalium /Т. vaginalis  хранить в защищенном от света месте. 
Форма комплектации 2. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN 
хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-Н. ПЦР-буфер-Н хранить 
при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /  
С. trachomatis /М. genitalium / Т. vaginalis хранить в защищенном от света месте. 
Форма комплектации 3. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-L хранить 
при температуре от 2 до 8 °С. ПЦР-смесь N. gonorrhoeae / С. trachomatis / 
М. genitalium /Т. vaginalis-Lyo хранить в пакетах с влагопоглотителем в защищенном 
от света месте.
Форма комплектации 4. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» 
хранить при температуре от 2 до 25 °С, кроме BKO-FL. BKO-FL хранить при 
температуре от 2 до 8 °С. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 FN 
хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-Н. ПЦР-буфер-Н хранить 
при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь N. gonorrhoeae /  
С. trachomatis /М. genitalium/Т. vaginalis  хранить в защищенном от света месте.
гарантийные  обязательства  производителя
Производитель гарантирует соответствие основных параметров и характеристик 
набора реагентов, требованиям, указанным в технической и эксплуатационной 
документации, в течение указанного срока годности при соблюдении всех условий 
транспортирования, хранения и применения.
Рекламации на качество набора реагентов «АмплиПрайм® NCMT» направлять в 
адрес производителя ООО «НекстБио» (111394 г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2) 
в отдел по работе с рекламациями (тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru).
стр. 61 из 66


--- стр. 62 ---
При выявлении побочных действий, не указанных в инструкции по применению 
набора реагентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и 
обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских 
работников при применении и эксплуатации набора реагентов, рекомендуется 
направить сообщение в отдел по работе с рекламациями по адресу, указанному 
выше, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию (в РФ -  
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с 
действующим законодательством.
Согласовано:
Научный руководитель испытательной 
лаборатории ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР/ 
Д.М.Н., профессор
В. В. Долгов
АВГ 2015
стр. 62 из 66


--- стр. 65 ---
11. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7, плотно закрыть 
крышки.
12. Смыть магнетизированную силику перемешиванием на вортексе, затем осадить 
капли на вортексе.
13. Переставить пробирки в обычный штатив, открыть крышки и переставить в 
магнитный штатив на 1 мин.
14. Отобрать надосадочную жидкость, аналогично п. 10. Перенести пробирки в 
обычный штатив.
15. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с открытыми крышками 
на магнитном штативе в течение 10 мин.
16. Добавить в пробирки по 100 мкл буфера для элюции В, перемешать на 
вортексе.
ВНИМАНИЕ! В случае проведения амплификации с использованием «ПЦР- 
комплекта» вариант FRT-L необходимо проводить элюцию ДНК в 250 мкл буфера 
для элюции в.
17. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на 5 мин.
18. Осадить капли на вортексе и переставить пробирки в магнитный штатив на 
2 мин. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к 
постановке ПЦР.
ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР осуществляется без 
снятия пробирок с магнитного штатива.
Очищенная ДНК может храниться при температуре от 2 до 8 °С в течение недели, 
при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение 6 мес и при температуре не 
выше минус 68 °С в течение года. Для этого необходимо, не захватывая 
магнетизированную силику, перенести надосадочную жидкость в стерильную 
пробирку. стр. 65 из 66


--- стр. 66 ---
Лист вносимых изменений
Редакция Место внесения  
изменений Суть вносимых изменений
30.06.15
По тексту Исправлены опечатки
Дополнительные 
материалы и 
оборудование
Уточнено, что комплект расходных материалов для 
автоматической станции для экстракции НК должен 
соответствовать инструкции Производителя
Меры предосторожности
Дополнены сведения об описание утилизации или 
уничтожения упаковки, биологического материала, 
включая материалы, инструменты и предметы, 
загрязненные биологическим материалом с 
отдельным описанием правил
Диагностические
характеристики
Изменены значения диагностических характеристик 
(специфичности и чувствительности) на значения, 
полученные в результате клинико-лабораторных 
испытаний, с доверительной вероятности 95%
стр. 66 из 66


--- стр. 67 ---
«JUi