Набор реагентов для выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК МВТС) по ТУ 9398-549-23548172-2016 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2017/6051 от 04.08.2017 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Mycobacterium tuberculosis нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 87 контрактов, медианная цена за единицу 10 733 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Г енеральный директор 
Щектор-Бест»
_М.Д. Хусаинов 
2017 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для выявления ДНК микобактерий 
туберкулёзного комплекса методом полимеразной цепной реакции 
в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК МВТС»
(форма 1)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК МВТС» 
предназначен для выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса {Mycobacterium 
tuberculosis complex), который включает в себя виды микобактерий, вызывающих туберкулёз 
у человека (М tuberculosis, М. bovis, М. bovis BCG, М. microti, М. africanum),  выделенных из 
клинических образцов, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
Набор предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как ротор­
ного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма «Corbett Research», Австралия), 
«Rotor-Gene Q» (фирма «Qiagen», Германия), так и планшетного типа: «iQ5 iCycler», «СГХ96» 
(фирма «Bio-Rad», США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами.
Набор реагентов «РеалБест ДНК МВТС» может быть применен для анализа клиниче­
ского материала: плазмы крови, биоптатов, ликвора, мочи, бронхоальвеолярного лаважа, 
мокроты, синовиальной жидкости.
Набор рассчитан на проведение анализа 48 образцов, включая контрольные образцы. 
Обеспечивает возможность проведения до 8 независимых процедур выделения по 6 образцов 
в каждой, включая контрольные образцы.
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: директором
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А.В.
/
/


--- стр. 2 ---
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на выделении нуклеиновых кислот из пробы совместно с 
предварительно внесённым внутренним контрольным образцом и проведении реакции ам­
плификации выбранного фрагмента ДНК с детекцией продуктов ПЦР в режиме реального 
времени.
Комплект реагентов для выделения предназначен для вьщеления нуклеиновых кислот 
из клинических образцов: плазмы крови, биоптатов, ликвора, мочи, бронхоальвеолярного 
лаважа, мокроты, синовиальной жидкости. Для предобработки образцов, содержащих комки 
слизи (мокрота, синовиальная жидкость) в набор включен раствор для обработки мокроты.
Принцип ПЦР-анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного 
участка ДНК возбудителя инфекции в ходе проведения полимеразной цепной реакции 
(ПЦР). Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная дена­
турация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК- 
матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуорес­
ценции в каждом цикле ПЦР. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит 
от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуорес­
ценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Учёт эффективности вьщеления ДНК из образцов обеспечивается вьщелением ДНК 
возбудителя инфекции из клинических проб совместно с предварительно внесённым внут­
ренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
раствор для обработки мокроты - 4 флакона по 50 мл;
Комплект реагентов для вьщеления ДНК
лизирующий раствор - 8 флаконов по 4 мл;
осадитель НК - 4 флакона по 12 мл;
раствор для отмывки №1-4  флакона по 8 мл;
раствор для отмывки №2 - 4 флакона по 5 мл;
элюирующий раствор -  4 флакона по 3 мл;
сорбент (суспензия магнитньк частиц) -  1  флакон, 1  мл.
раствор для восстановления контрольных образцов (РВК) -  1  флакон, 4 мл;
отрицательный контрольный образец (ОКО) - 2 флакона по 1  мл;
внутренний контрольный образец (ВКО), лиофилизированный - 2 флакона.


--- стр. 3 ---
Комплект реагентов для проведения ТШР
положительный контрольный образец (ПКО) —  1  пробирка, 1  мл;
готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная -  48 пробирок.
Принадлежности:
завинчивающиеся пластиковые крышки для флаконов с ВКО - 2 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 
определяется по пяти образцам, приготовленным из стандартного образца предприятия, СОП 
МВТС (СОП 05-2-430), с содержанием ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 100 
копий в пробе - 100%.
3.2. Специфичность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса опре­
деляется по пяти образцам отрицательных биопроб, приготовленньш из стандартного образ­
ца предприятия, СОП МВТС (СОП 05-2-430) 100%.
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного 
комплекса: клинические испытания, проведенные на 119 положительных образцах, показали 
100 % чувствительность (интервал 97,5% - 100%, с доверительной вероятностью 90%);
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного 
комплекса: клинические испытания, проведенные на 119 отрицательных образцах, показали 
100 % специфичность (интервал 97,5% - 100%, с доверительной вероятностью 90%).
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к  
искажению результатов HTTP.
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).
4.2. Компоненты набора (РВК и ОКО) содержат в своем составе натрия азид (0,05% 
раствор). При работе с набором следует избегать попадания его компонентов на кожу и сли­
зистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством про­
точной воды.
4.3. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.4. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
вьщеления ДНК/РНК и постановки ПЦР/ОТ-ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация 
работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе 
с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».


--- стр. 4 ---
4.5. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.6. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором дозаторов 
переменного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.7. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
дозаторов.
4.8. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.9. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все ра­
бочие поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп 
в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфи­
цирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор «ДП-2Т»; 1-3% раствор «Диабак»;  
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»; 0,5-2% раствор «Велтолен»).
4.10. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией (см. МУ 287-113 «Методические указания 
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского 
назначения»).
4.11. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые клас­
сифицируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». Дез­
инфекцию наборов реагентов следует проводить по МУ 287-113 «Методические указания по 
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назна­
чения».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени роторного 
типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма «Corbett Research», Австралия), «Rotor- 
Gene Q» (фирма «Qiagen», Германия) или планшетного типа: «1Q5 iCycler», «СГХ96» (фирма 
«Bio-Rad», США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
- ламинарный бокс 2-го класса биологической защиты (бокс абактериальной воздуш­
ной среды типа БАВп-01, «Ламинар-с», АО «Ламинарные системы»);
-  термошейкер - термостатируемый встряхиватель орбитального типа, позволяющий 
проводить встряхивание при 1300 об/мин и температуре (50-65) °С (например, «Thermo 
Shaker TS-ЮО» [с блоком для пробирок объемом 2 мл], фирма «BioSan», Латвия);
- холодильник бытовой, поддерживающий температуру (2-8) °С;


--- стр. 6 ---
f
6.1.3. Подготовка образцов биоптатов
Подготовку образцов биоптатов проводить согласно процедуре, описанной в 
Методических указаниях "Организация работы лабораторий, используюгцих методы 
амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы 
I-IV групп патогенности" (МУ 1.3.2569-09).
6.1.4. Подготовка образцов мочи.
Первую порцию утренней мочи собрать в чистый флакон с плотной крышкой. 1,5- 
2,0 мл мочи отобрать в пробирку, центрифугировать при 3000 об/мин в течение 3 мин. 
Супернатант удалить практически полностью, не задевая осадок. Полученный образец 
использовать для вьщеления нуклеиновых кислот.
Допускается хранение подготовленных образцов из мочи в замороженном состоянии  
при температуре минус (18-24) °С в течение 1 недели.
6.1.5. Подготовка бронхоальвеолярного лаважа или промывных вод бронхов. 
Содержимое контейнера перемешать переворачиванием, 1,5-2 мл образца перенести в
пробирку, центрифугировать при 13 000 об/мин 5 минут. Супернатант удалить, не задевая 
осадок, оставляя 200 мкл образца. Осадок ресуспендировать, отобрать для анализа 100 мкл 
образца, не захватывая комки слизи. При большом объеме слизи, обработать пробу согласно 
пункту 6.1.6.
Транспортировать и хранить образцы при температуре (18-25) °С до 2 часов; при  
температуре (2-8) °С не более суток; при температуре минус (18-24) °С до 2 недель.  
Повторное замораживание-оттаивание проб не допускается.
6.1.6. Подготовка мокроты, синовиальной жидкости.
К образцу мокроты (синовиальной жидкости) добавить равный объем Раствора для 
обработки мокроты. Тщательно перемешать, выдержать 10 минут при комнатной 
температуре. Еще раз тщательно перемешать. 100 мкл полученной взвеси использовать для 
вьщеления нуклеиновых кислот. Не захватывать комки слизи.
Транспортировать и хранить образцы при температуре (18-25)  °С до 2 часов; при  
температуре (2-8) °С не более суток; при температуре минус (18-24) °С до 2 недель.  
Повторное замораживание-оттаивание проб не допускается.
Каждая группа образцов, проходящая через процедуру выделения ДНК, должна содержать 1  
ПКО и 1  ОКО.
6.2. Подготовка реагентов.
6.2.1. Перед началом работы извлечь набор реагентов из холодильника, вскрыть упа­
ковку и вьщержать анализируемые образцы и компоненты набора при температуре (18-25) °С 
в течение 30 мин.


--- стр. 7 ---
г
6.2.2. Во флакон с ВКО добавить 1  мл раствора РВК, аккуратно перемешать, 
вьщержать при температуре (18-25) °С 15 минут, после чего вновь тщательно перемешать.
После разведения хранить при температуре (2-8) °С не более 1 месяца или  
аликвотами по 50 мкл при температуре минус (18-24) °С не более 3 месяцев.
6.2.3. ОКО готов к применению.
После вскрытия флакона хранить при температуре (2-8) °С не более 3 месяцев.
6.2.4. Перед началом работы прогреть лизирующий раствор при (50-60) °С до 
растворения осадка, перемешать. Перемешать на вортексе содержимое флакона с сорбентом 
до состояния гомогенной суспензии и во флакон с лизирующим раствором добавить 80 мкл 
суспензии сорбента. Тщательно перемешать.
Лизирующий раствор после вскрытия и добавления суспензии сорбента хранению не  
подлежит.
7. ВЫДЕЛЕНИЕ ДНК ИЗ БИОПРОБ
7.1. Отобрать и подписать необходимое для работы количество пробирок объёмом 
2 мл (по количеству исследуемых образцов, включая необходимые контрольные образцы).
7.2. В каждую пробирку внести по 30 мкл раствора ВКО.
7.3. Для отрицательного контроля в пробирку, маркированную «ОКО», внести 
100 мкл ОКО.
7.4. Для положительного контроля в пробирку, маркированную «ПКО», внести 70 мкл 
ОКО и 30 мкл ПКО.
ПКО после вскрытия пробирки хранить при температуре (2-8) °С не более 1 месяца  
или аликвотами по 50 мкл при температуре минус (18-24) °С не более 3 месяцев.
7.5. В остальные пробирки дозатором с отдельными наконечниками внести по 100 
мкл анализируемых образцов в соответствии с маркировкой пробирок.
7.6. В каждую пробирку, не задевая стенок, внести по 300 мкл лизирующего раствора 
с сорбентом. Перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 10-15 секунд. 
Вьщержать в термошейкере с частотой вращения 1300 об/мин при 65 °С в течение 10 минут. 
Коротким центрифугированием сбросить капли со стенок пробирок.
7.7. В каждую пробирку с анализируемыми образцами внести по 400 мкл осадителя
НК.
7.8. Перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 10-15 секунд. 
Центрифугировать при 13000 об/мин в течение 5 мин при температуре (18-25) °С.
7.9. Не взбалтывая осадок, установить пробирки в магнитный штатив. Из каждой 
пробирки дозатором (или отсасывателем) с отдельным наконечником отобрать 
надосадочную жидкость, не задевая осадок.


--- стр. 8 ---
/ 7.10. В каждую пробирку к осадку добавить 500 мкл раствора для отмывки № 1. 
Перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 10-15 секунд. Центрифугировать 
при 13000 об/мин в течение 2 минут на микроцентрифуге.
7.11. Не взбалтывая осадок, установить пробирки в магнитный штатив. Из каждой 
пробирки отобрать надосадочную жидкость дозатором (или отсасывателем) с отдельным 
наконечником, не задевая осадок.
7.12. В каждую пробирку к осадку добавить по 300 мкл раствора для отмывки № 2. 
Перемешать содержимое пробирок на вортексе в течение 10-15 секунд. Центрифугировать 
при 13000 об/мин в течение 2 минут на микроцентрифуге.
7.13. Не взбалтывая осадок, установить пробирки в магнитный штатив. Из каждой 
пробирки отобрать надосадочную жидкость дозатором (или отсасывателем) с отдельным 
наконечником, не задевая осадок.
7.14. Высушить осадки в открытых пробирках при температуре (18 -  25) °С в течение 
2-3 минут.
7.15. В каждую пробирку к осадку добавить 200 мкл элюирующего раствора. 
Тщательно перемешать на вортексе, ресуспендируя магнитный осадок. Инкубировать в 
термошейкере с частотой вращения 1300 об/мин при 65 °С в течение 5 минут. 
Центрифугировать на микроцентрифуге при 13000 об/мин в течение 1  минуты. Пробы 
готовы к постановке ПЦР
Внимание! Выделенная ДНК хранится при температуре (2-8) °С не более 24 часов.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
8.1. Пробирки с подготовленными пробами установить в магнитный щтатив.
8.2. Вскрыть упаковку с ГРС и отобрать необходимое количество (по числу 
подготовленных проб, включая контроли: 1  ОКО и 1  ПКО) пробирок с ГРС. Оставщиеся 
неиспользованными пробирки с ГРС упаковать в пакет из комбинированного материала с 
осущителем, удалить из него лишний воздух и плотно закрыть зажим.
После первого вскрытия упаковки срок годности ГРС при температуре хранения (2-  
8) °С составляет 3 месяца.
8.3. Пробирки с ГРС пронумеровать и расположить в штативе.
Внимание! При использовании амплификатора «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000», 
«Rotor-Gene Q» надписи следует располагать на крышке пробирок. При использовании  
амплификаторов «iQ5 iCycler», «CFX96», «ДТ-96» надписи следует располагать на боковой 
части пробирок.


--- стр. 10 ---
I ровать нарастание сигнала амплификации ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса в 
канале «ROX/Orange».
9.1.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание 
сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «FAM/Green») и определять Ct ВКО.
9.2. Учёт результатов.
9.2.1. Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образ­
цов (включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеея более 
чем на 2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся 
значений.
9.2.2. Анализируемый образец ечитается положительным (содержащим ДНК мико­
бактерий туберкулёзного комплекса) если для этого образца значение Ct по каналу 
«ROX»/«Orange» меньше или равно 40.
9.2.3. Результат анализа образца считается отрицательным (не еодержащим ДНК ми­
кобактерий туберкулёзного комплекса), если для этого образца значение Ct в канале 
«ROX/Orange» больше 40 или не определяетея.
Еели для такого образца значение Ct ВКО отличается от значения (Ct ВКО)ср более 
чем на 2, то результат иеследования данного образца не подлежит анализу и учету как отри­
цательный. Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выде­
ления ДНК.
9.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуаль­
ной постановке ПЦР, считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявле­
нию и ликвидации источника контаминации и повторить анализ всех образцов данной по­
становки, для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, ана­
лиз которых дал отрицательный результат, следует учитывать как отрицательные.
10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного 
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не 
более 10 суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться 
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо­
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной ре­
гистрацией температуры.
10


--- стр. 11 ---
#
10.3. Срок годности набора -  12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении ерока их годности.
10.4. Для полз^ения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение данной 
инструкции по применению набора.
11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, 
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функци­
ональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив­
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого 
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касаюш;имся качества набора «РеалБест ДНК МВТС», следует обра­
щаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, а/я 492,
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47, 332-94-44.
E-mail: plkobtk(^,vector-best, ru
Начальник отделения 
АО «Вектор-Бест»
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест»
А.В. Трухина
В.К. Ткачев
Т.И. Поспелова
11


--- стр. 12 ---
/


--- стр. 13 ---
/ «УТВЕРЖДАЮ»
Г енеральный директор 
АО «Вектор-Бест»
_М.Д. Хусаинов 
2017 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для выявления ДНК микобактерий 
туберкулёзного комплекса методом полимеразной цепной реакции 
в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК МВТС»
(форма 2)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК МВТС» 
предназначен для выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса {Mycobacterium 
tuberculosis complex), который включает в себя виды микобактерий, вызывающих туберкулёз 
у человека (М tuberculosis, М. bovis, М. bovis BCG, М. microti, М. africanum),  выделенных из 
клинических образцов, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
Выделение ДНК из биологических проб проводится с помощью набора реагентов для 
вьщеления НК серии «РеалБест». Набор реагентов «РеалБест ДНК МВТС» может быть при­
менен в клинической практике для анализа плазмы крови, биоптатов, ликвора, мочи, брон­
хоальвеолярного лаважа, мокроты, синовиальной жидкости.
Набор предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами планшет­
ного типа: «1Q5 iCycler», «СРХ96» (фирма «Bio-Rad», США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК- 
Технология», Россия) или их аналогами.
Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: директором
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А.В.


--- стр. 14 ---
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип ПЦР-анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного 
участка ДНК возбудителя инфекции в ходе проведения полимеразной цепной реакции 
(ПЦР). Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная дена­
турация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК- 
матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуорес­
ценции в каждом цикле ПЦР. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит 
от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуорес­
ценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Для предобработки образцов, содержащих комки слизи (мокрота, синовиальная жид­
кость) в набор включен раствор для обработки мокроты.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
возбудителя инфекции из клинических проб совместно с предварительно внесённым внут­
ренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
раствор для обработки мокроты - 4 флакона по 50 мл;
положительный контрольный образец (ПКО) - 1  пробирка, 1  мл;
готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная -  96 пробирок.
Принадлежности:
оптическая плёнка - 1,5 листа.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 
определяется по пяти образцам, приготовленным из стандартного образца предприятия, СОП 
МВТС (СОП 05-2-430), с содержанием ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса 100 
копий в пробе -  100%.
3.2. Специфичность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного комплекса опре­
деляется по пяти образцам отрицательных биопроб, приготовленным из стандартного образ­
ца предприятия, СОП МВТС (СОП 05-2-430) 100%.
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного 
комплекса: клинические испытания, проведенные на 119 положительных образцах, показали 
100 % чувствительность (интервал 97,5% - 100%, с доверительной вероятностью 90%);
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК микобактерий туберкулёзного 
комплекса: клинические испытания, проведенные на 119 отрицательных образцах, показали 
100 % специфичность (интервал 97,5% - 100%, с доверительной вероятностью 90%).


--- стр. 15 ---
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к  
искажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами II1-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР/ОТ-ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация 
работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе 
с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором дозаторов 
переменного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
дозаторов.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все ра­
бочие поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп 
в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфи­
цирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор «ДП-2Т»; 1-3% раствор «Диабак»;  
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»; 0,5-2% раствор «Велтолен»),
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией (см. МУ 287-113 «Методические указания 
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского 
назначения»).
4.10. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые клас­
сифицируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». Дез­
инфекцию наборов реагентов следует проводить по МУ 287-113 «Методические указания по 
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назна-