Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации фактора некроза опухолей-альфа в сыворотке крови (альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ) по ТУ 9398-558-23548172-2016 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2017/5961 от 10.07.2017 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Фактор некроза опухолей-альфа/фактор некроза опухолей-бета ИВД, набор, иммуноферментный анализ

В госконтрактах 44-ФЗ: 96 контрактов, медианная цена за единицу 23 023 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Г енеральный директор
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для иммуноферментного определения 
концентрации фактора некроза опухолей-альфа в сыворотке крови 
(альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации фактора некроза 
опухолей-альфа в сыворотке крови «альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ» (далее по тексту -  набор) предна­
значен для определения концентрации фактора некроза опухолей-альфа (альфа-ФНО) в сыворот­
ке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Фактор некроза опухолей-альфа (альфа-ФНО) является провоспалительным цитокином 
и стимулирует в других клетках продукцию ИЛ-1 и ИЛ-6, адгезию, индукцию апоптоза, антите- 
лообразование В-клетками, продукцию колониеобразующих факторов эндотелиальными клетка­
ми и фибробластами, которые участвуют в процессе ангиогенеза обладает общим цитотоксиче­
ским действием.
1.3. Количественное определение содержания альфа-ФНО в сыворотке крови может быть 
использовано для диагностики и мониторинга терапии ряда заболеваний, в том числе таких 
заболеваний как бактериальная пневмония, гепатиты, сепсис, паразитарные
1.4. Набор рассчитан на проведение анализа в дублях 41 неизвестного, 6 калибровочных 
образцов, 1  контрольного образца, всего 96 определений при использовании всех стрипов план­
шета.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА  
2Л. Принцип метода
Метод определения основан на «сэндвич»- варианте твердофазного иммуноферментного 
анализа с применением моно- и поликлональных антител к альфа-ФНО.
На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы инкубируют в лунках с им­
мобилизованными моноклональными антителами. Имеющийся в образцах альфа-ФНО связывает­
ся с иммобилизованными антителами. Связавщийся альфа-ФНО на второй стадии взаимодейству-
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором НИИ СД М.Ю.  
Рукавишниковым, нач. лаборатории стабилизации ИА. Вараксиным.


--- стр. 2 ---
ет при инкубации с конъюгатом № 1  (поликлональные антитела к альфа-ФНО человека с биоти­
ном). На третьей стадии связавшийся конъюгат № 1  взаимодействует при инкубации с конъюгатом 
№ 2 (стрептавидин с пероксидазой хрена).
Количество связавшегося конъюгата № 2 определяют цветной реакцией с использованием 
субстрата пероксидазы хрена -  перекиси водорода и хромогена -  тетраметилбензидина. 
Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна концентрации содержащегося в образце 
альфа-ФНО.
После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного 
графика рассчитывается концентрация альфа-ФНО в анализируемых образцах.
2.2. Состав набора
В состав набора входят:
-  планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованными на внутренней 
поверхности моноклональными антителами к альфа-ФНО, готовый для использования -  1  шт.;
-  калибровочные образцы, содержащие известные количества альфа-ФНО -  0; 5; 15; 40; 
100; 250 пг/мл; аттестованные относительно WHO International Standard TUMOUR NECROSIS 
FACTOR ALPHA NIBSC code: 88/786; концентрации альфа-ФНО в калибровочных образцах мо­
гут несколько отличаться от указанных величин, точные величины указаны на этикетках флако­
нов, лиофилизированные -  6 флаконов;
-  контрольный образец на основе инактивированной сыворотки крови человека с извест­
ным содержанием альфа-ФНО, аттестованный относительно WHO International Standard TU­
MOUR NECROSIS FACTOR ALPHA NIBSC code: 88/786; лиофилизированный -  1  флакон;
-  конъюгат № 1  (биотинилированные поликлональные антитела к альфа-ФНО), готовый 
для использования -  1  флакон (13 мл);
-  конъюгат № 2 (стрептавидин-пероксидаза хрена), готовый для использования -  1  флакон 
(13 мл);
-  раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов (РВО) -  1  флакон 
(7,0 мл);
-  раствор для разведения образцов (РРО) -  1  флакон (13 мл);
-  концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Тх25) -  2 флакона 
(по 28 мл);
-  раствор тетраметилбензидина плюс (раствор ТМБ плюс), готовый для использования -  1  
флакон (13 мл);
-  стоп-реагент, готовый для использования -  1  флакон (12 мл).
Принадлежности:
-  пленка для заклеивания планшета -  3 шт.;
-  трафарет для построения калибровочного графика -  1  шт.;


--- стр. 3 ---
-  ванночка для реагента -  4 шт.;
-  наконечники для дозатора на 2-200 мкл -  32 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции используемых в наборе антител 
к альфа-ФНО со следующими цитокинами: ИЛ-1-бета,- ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-18, 
гамма-ИНФ, альфа-ИНФ.
3.2. * Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения концентрации 
альфа-ФНО в лунках, содержащих контрольный образец, не превышает 8%.
3.3. * Линейность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «линейность»-  
отклонение от расчётной величины концентрации альфа-ФНО при разведении калибровочных 
образцов, содержащих 250; 100; 40 пг/мл, в 2 раза и калибровочного образца, содержащего 15 
пг/мл, в 3 раза. Процент «линейности» составляет 90-110%.
3.4. * Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» -  со­
ответствие измеренной концентрации альфа-ФНО предписанной в образце, полученной путём 
смешивания равных объёмов контрольного образца и калибровочного образца 15 пг/мл. Процент 
«открытия» составляет 90-110%.
3.5. * Чувствительность. Минимально определяемая концентрация альфа-ФНО, рассчитан­
ная на основании среднего арифметического значения из десяти измерений оптической плотно­
сти калибровочного образца Во плюс 2о (о -  среднее квадратичное отклонение от среднего 
арифметического значения), не превышает 1,0 пг/мл.
3.6. Клиническая проверка. Концентрацию альфа-ФНО измеряли в сыворотке крови, взятой 
у 185 здоровых мужчин и женщин в возрасте 20-50 лет. Уровень альфа-ФНО не превышал 6 
пг/мл.
3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения 
концентрации альфа-ФНО, соответствующие нормальным у обследуемого контингента людей.
* по ГОСТ Р 51352-2013.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 №
4н).
4.2. Все компоненты набора являются нетоксичными. Стоп-реагент обладает раздражаю­
щим действием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания 
стоп-реагента на кожу и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количе­
ством проточной воды.
4.3. При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности, 
принятые при работе с потенциально инфекционным материалом. Основные правила работы из­
ложены в «Инструкции по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний
3


--- стр. 4 ---
при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», 
утвержденной Минздравом СССР 17 января 1991 г. и в методических указаниях МУ 287-113 
«Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изде­
лий медицинского назначения», утв. департаментом госсанэпиднадзора Минздрава РФ от 
30.12.1998.
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер­
чатки, так как образцы сыворотки крови человека следует рассматривать как потенциально ин­
фицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или 
возбудителей других инфекций.
4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, долж­
ны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно.
4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в помеще­
ниях, предназначенных для работы с наборами.
4.7. Для дезинфекции посуды и материалов, контактировавших с исследуемыми и кон­
трольными образцами, рекомендуем использовать дезинфицирующие средства, не оказывающие 
негативного воздействия на качество ИФА, не содержащие активный кислород и хлор, например, 
комбинированные средства на основе ЧАС, спиртов, третичных аминов. Использование дезин- 
фицирзтощих средств, содержащих активный кислород и хлор (Н 2О2, деохлор, хлорамин), при­
водит к серьезному искажению результатов.
4.8. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые классифици­
руются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- 
эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ 287-113 «Мето­
дические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий ме­
дицинского назначения».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
-  Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оп­
тической плотности растворов в лунках планшета в двухволновом режиме: при основной длине 
волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620 нм - 655 нм; допускается измерение при 
длине волны 450 нм;
-  шейкер термостатируемый орбитального типа, позволяющий производить встряхивание 
при температуре 37±1 °С и 600-800 об/мин;
-  промывочное устройство для планшетов;
-  таймер;
-  холодильник бытовой;
-  дозаторы полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным объ­
ёмом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкости от 5 до 5000 мкл;


--- стр. 9 ---
9.5. Результаты анализа исследуемых образцов учитьшать, если вычисленное по калибровочно­
му графику значение концентрации альфа-ФНО в контрольном образце соответствует указанному 
диапазону концентраций на этикетке флакона.
При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно отражаю­
щих изменение концентрации альфа-ФНО в сыворотке крови, необходимо использовать наборы 
реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя).
10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспортных 
средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида, 
при температуре от 2 до 8 °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не бо­
лее 1  о суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться при 
температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холодиль­
никах, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной регистрацией 
температуры.
10.3. Срок годности набора -  18 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение набо­
ров по истечении срока их годности.
10.4. Дробное использование набора может быть реализовано в течение всего срока годно­
сти. В случае дробного использования набора:
-  неиспользованные стрипы можно хранить в плотно закрытом пакете при температуре от 2 
до 8 °С в течение всего срока годности набора;
-  конъюгат № 1, конъюгат № 2, концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с тай­
ном, раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов, раствор для разведе­
ния образцов, раствор ТМБ плюс и стоп-реагент после вскрытия можно хранить в плотно закры­
тых флаконах при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности набора;
-  приготовленные калибровочные образцы и контрольный образец хранить в плотно закры­
тых флаконах при температуре минус 20 °С и ниже -  в течение всего срока годности набора. До­
пускается шестикратное замораживание и оттаивание образцов;
-  промывочный раствор можно хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 5 суток.
10.5. Построение калибровочного графика необходимо проводить для каждого независимо­
го эксперимента, а также рекомендуется определение концентрации альфа-ФНО в контрольном 
образце.
10.6. Для представления результатов измерений концентрации альфа-ФНО в МЕ/мл, следу­
ет использовать коэффициент пересчета 0,05 (альфа-ФНО (МЕ/мл) = 0,05 альфа-ФНО (пг/мл)).
10.7. При постановке ИФА нельзя использовать компоненты из наборов разных серий или 
смешивать их при приготовлении растворов, кроме неспецифических компонентов (раствор ТМБ


--- стр. 10 ---
плюс, ФСБ-Тх25, стоп-реагент), которые взаимозаменяемы в наборах АО «Вектор-Бест».
10.8. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по 
применению набора.
11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям норма­
тивной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших 
вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо дей­
ствия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функциональ­
ные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной и тех­
нической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого дефекта мате­
риалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ», следует обращаться 
в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово, а/я 121, 
тел. (383) 363-20-60, 227-67-64, тел./факс (383) 363-35-55.
E-mail: vbobtk(a).vector-best.ru
Нач. лаборатории стабилизации НИИ СД 
АО «Вектор-Бест» Н.А. Вараксин
Директор НИИ СД 
АО «Вектор-Бест»
«СОГЛАСОВАНО»
Ректор ФГБОУ ВО БГМУ 
Минздрава России, 
член-корреспондент РАН, профессор 
м.п.
^//.С
М.Ю. Рукавищников
В.Н. Павлов 
«13» июня 2017 г.
/ сокро'^ярь ФГБОУ ВО БПШ^
ингапаза России^


--- стр. 11 ---
Всего прошито, пронумеровано и 
укреплено печатью /О  листов.
эОУ ВО ^М У  Минздрава России