Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации интерлейкина-8 в сыворотке крови и моче (Интерлейкин-8-ИФА-БЕСТ) по ТУ 9398-555-23548172-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Г енеральный директор
АО «Вектор-Бест»
1 ,. Хусаинов
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для иммуноферментного определения
концентрации интерлейкина-8 в сыворотке крови и моче
(Интерлейкин-8-ИФА-БЕСТ)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации интерлейкина-8 в
сыворотке крови и моче «Интерлейкин-8-ИФА-БЕСТ» (далее по тексту — набор) предназначен
для определения концентрации интерлейкина-8 (ИЛ-8) в сыворотке крови и моче человека мето
дом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Интерлейкин-8 - противовоспалительный цитокин с молекулярной массой 8-10 кОа,
относящийся к СХС-хемокинам и влияющий на хемотаксис лейкоцитов, посредством связыва
ния с рецепторами СХС-1 и СХС-2. Синтезирует эндотелиальные клетки, моноциты, макрофаги,
фибропласты, мезангиальные клетки, кератиноциты и нейтрофилы. Опухолевые клетки синтези
руют ИЛ-8 и экспрессируют рецепторы СХС-1 и СХС-2 на своей поверхности.
1.3. Количественное определение содержания ИЛ-8 в сыворотке крови и моче может быть
использовано для диагностики и мониторинга терапии ряда заболеваний, в том числе таких
заболеваний как бронхит, бактериальная пневмония, атопический дерматит, сепсис, сахарный
диабет, хронический пиелонефрит, цистит.
1.4. Набор рассчитан на проведение анализа в дублях 41 неизвестного, 6 калибровочных
образцов, 1 контрольного образца, всего 96 определений при использовании всех стрипов план
шета.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2Л. Принцип метода
Метод определения основан на трехстадийном «сэндвич»- варианте твердофазного имму
ноферментного анализа с применением моно- и поликлональных антител к ИЛ-8.
На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы инкубируют в лунках с им-
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором НИИ СД М.Ю.
Рукавишниковым, нач. лаборатории стабилизации ИА. Вараксиным.
--- стр. 2 ---
{
мобилизованными моноклональными антителами. Имеющийся в образцах ИЛ-8 связывается с им
мобилизованными антителами. Связавшийся ИЛ-8 на второй стадии взаимодействует при инкуба
ции с конъюгатом № 1 (поликлональные антитела к ИЛ-8 человека с биотином). На третьей стадии
связавшийся конъюгат № 1 взаимодействует при инкубации с конъюгатом № 2 (стрептавидин с
пероксидазой хрена).
Количество связавшегося конъюгата № 2 определяют цветной реакцией с использованием
субстрата пероксидазы хрена - перекиси водорода и хромогена - тетраметилбензидина.
Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна концентрации содержащегося в образце
ИЛ-8.
После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного
графика рассчитывается концентрация ИЛ-8 в анализируемых образцах.
2.2. Состав набора
В состав набора входят;
- планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованными на внутренней
поверхности моноклональными антителами к ИЛ-8, готовый для использования - 1 шт.;
- калибровочные образцы, содержащие известные количества ИЛ-8 - 0; 5; 15; 40; 100 и 250
пг/мл, аттестованные относительно WHO International Standard 1st Standard for Interleukin-8
NIBSC code: 89/520; концентрации ИЛ-8 в калибровочных образцах могут несколько отличаться
от указанных величин, точные величины указаны на этикетках флаконов, лиофилизированные -
6 флаконов;
- контрольный образец на основе инактивированной сыворотки крови человека с извест
ным содержанием ИЛ-8, аттестованный относительно WHO International Standard 1st Standard for
Interleukin-8 NIBSC eode: 89/520; лиофилизированный - I флакон;
- конъюгат № 1 (биотинилированные поликлональные антитела к ИЛ-8), готовый для ис
пользования - 1 флакон (13 мл);
- конъюгат № 2 (стрептавидин-пероксидаза хрена), готовый для использования - 1 флакон
(13 мл);
- раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов (РВО) - 1 флакон
(7,0 мл);
- раствор для разведения образцов (РРО) - 1 флакон (13 мл);
- концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Тх25) - 2 флакона
(по 28 мл);
- раствор тетраметилбензидина плюс (раствор ТМБ плюс), готовый для использования - 1
флакон (13 мл);
- стоп-реагент, готовый для использования - 1 флакон (12 мл).
Принадлежности:
--- стр. 3 ---
^ - пленка для заклеивания планшета - 3 шт.;
- трафарет для построения калибровочного графика - 1 шт.;
- ванночка для реагента - 4 шт.;
- наконечники для дозатора на 2-200 мкл - 32 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции моноклональных антител к ИЛ-
4, ИЛ-6, ИЛ-2, ИЛ-18, ИЛ-17, ИНФ-гамма, ИЛ-10, ФНО-альфа, ИНФ-альфа, ИЛ-1 бета.
3.2. * Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения концентрации
ИЛ-8 в лунках, содержащих контрольный образец, не превышает 8%.
3.3. * Линейность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «линейность» -
отклонение от расчётной величины концентрации ИЛ-8 при разведении калибровочных образ
цов, содержащих 250; 100; 40 пг/мл, в 2 раза и калибровочного образца, содержащего 15 пг/мл, в
3 раза. Процент «линейности» составляет 90-110%.
3.4. * Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» - соот
ветствие измеренной концентрации ИЛ-8 предписанной в образце, полученной путём смешива
ния равных объёмов контрольного образца и калибровочного образца 15 пг/мл ИЛ-8. Процент
«открытия» составляет 90-110%.
3.5. * Чувствительность. Минимально определяемая концентрация ИЛ-8, рассчитанная на
основании среднего арифметического значения из десяти измерений оптической плотности ка
либровочного образца Во плюс 2а (а - среднее квадратичное отклонение от среднего арифмети
ческого значения), не превышает 2,0 пг/мл.
3.6. Клиническая проверка. Концентрацию ИЛ-8 измеряли в сыворотке крови, взятой с 9 до
11 ч, у 68 здоровых мужчин и женщин в возрасте 20-50 лет. Уровень ИЛ-8 не превыщал 10
пг/мл.
Концентрацию ИЛ-8 измеряли в утренней порции мочи у 25 здоровых мужчин и женщин в
возрасте 20-50 лет. Уровень ИЛ-8 не превышал 12 пг/мл.
3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения
концентрации ИЛ-8, соответствующие нормальным у обследуемого контингента людей.
*по ГОСТ Р 51352-2013.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 №
4н).
4.2. Все компоненты набора являются нетоксичными. Стоп-реагент обладает раздражаю
щим действием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания
стоп-реагента на кожу и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количе
ством проточной воды.
3
--- стр. 4 ---
4.3. При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности,
принятые при работе с потенциально инфекционным материалом. Основные правила работы из
ложены в «Инструкции по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний
при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»,
утвержденной Минздравом СССР 17 января 1991 г. и в методических указаниях МУ 287-113
«Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изде
лий медицинского назначения», утв. департаментом госсанэпиднадзора Минздрава РФ от
30.12.1998.
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер
чатки, так как образцы сыворотки крови человека следует рассматривать как потенциально ин
фицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или
возбудителей других инфекций.
4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, долж
ны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно.
4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в помеще
ниях, предназначенных для работы с наборами.
4.7. Для дезинфекции посуды и материалов, контактировавших с исследуемыми и кон
трольными образцами, рекомендуем использовать дезинфицирующие средетва, не оказывающие
негативного воздействия на качество ИФА, не содержащие активный кислород и хлор, например,
комбинированные средства на основе ЧАС, спиртов, третичных аминов. Использование дезин
фицирующих средств, содержащих активный кислород и хлор (Н 2О2, деохлор, хлорамин), при
водит к серьезному искажению результатов.
4.8. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые классифици
руются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-
эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ 287-113 «Мето
дические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий ме
дицинского назначения».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
- Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оп
тической плотности растворов в лунках планшета в двухволновом режиме: при основной длине
’60ЖЙ. ’И дате нодаът еравнения. в дааиааоне Ш нм - 655 нм-, донуекаетсй измерение при
дате ш т т ш:,
L
- m tte,
- промывочное ’^аройство дая идашетов;
-\т^ер\
V
--- стр. 9 ---
9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Вычислить среднее арифметическое значение оптической плотности для каждой пары
лунок, содержащих калибровочные, контрольный и анализируемые образцы.
9.2. Построить в линейных координатах калибровочный график зависимости среднего
арифметического значения оптической плотности (ед. опт. плотн.) от концентрации ИЛ-8 в ка
либровочных образцах (пг/мл).
9.3. Определить концентрацию ИЛ-8 в контрольном образце и анализируемых образцах по
калибровочному графику.
9.4. Еели концентрация ИЛ-8 в анализируемых образцах сыворотки крови или мочи пре
вышает 250 пг/мл, образец следует дополнительно развести раствором для разведения образцов в
20 раз (20 мкл исследуемого образца + 380 мкл раствора для разведения образцов), повторить
анализ и полученный результат умножить на 20.
9.5. Результаты анализа исследуемых образцов учитывать, если вычисленное по калибровочно
му графику значение концентрации ИЛ-8 в контрольном образце соответствует указанному диапа
зону концентраций на этикетке флакона.
При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно отражаю
щих изменение концентрации ИЛ-8 в сыворотке крови или моче, необходимо использовать
наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя).
10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспортных
средствах в соответствии с правилами перевозок, дейетвующими на транепорте данного вида,
при температуре от 2 до 8 °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не бо
лее 1 о суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно оеуществляться при
температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холодиль
никах, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной регистрацией
температуры.
10.3. Срок годности набора - 18 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение набо
ров по истечении срока их годности.
10.4. Дробное использование набора может быть реализовано в течение всего срока годно
сти. В случае дробного использования набора:
- неиспользованные стрипы можно хранить в плотно закрытом пакете при температуре от 2
до 8 °С в течение всего срока годности набора;
- конъюгат № 1, конъюгат № 2, концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с тай
ном, раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов, раствор для разводе-
--- стр. 10 ---
ния образцов, раствор ТМБ плюс и стоп-реагент после вскрытия можно хранить в плотно закры
тых флаконах при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности набора;
- приготовленные калибровочные образцы и контрольный образец можно хранить в плотно
закрытых флаконах при температуре от 2 до 8 °С не более 1 месяца; при температуре минус 20
°С и ниже - в течение всего срока годности набора. Допускается шестикратное замораживание и
оттаивание образцов;
- промывочный раствор можно хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 5 суток.
10.5. Построение калибровочного графика необходимо проводить для каждого независимо
го эксперимента, а также рекомендуется определение концентрации ИЛ-8 в контрольном образ
це.
10.6. Для представления результатов измерений концентрации ИЛ-8 в МЕ/мл, следует ис
пользовать коэффициент пересчета 0,001 (ИЛ-8 (МЕ/мл) = 0,001 ИЛ-8 (пг/мл)).
10.7. При постановке ИФА нельзя использовать компоненты из наборов разных серий или
смешивать их при приготовлении растворов, кроме неспецифических компонентов (раствор ТМБ
плюс, ФСБ-Тх25, стоп-реагент), которые взаимозаменяемы в наборах АО «Вектор-Бест».
10.8. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по
применению набора.
И. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям норма
тивной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших
вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо дей
ствия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функциональ
ные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной и тех
нической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого дефекта мате
риалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «Интерлейкин-8-ИФА-БЕСТ», следует обра
щаться в АО «Вектор-Бест» по адресу;
630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово, а/я 121,
тел. (383) 363-20-60, 227-67-64, тел./факс (383) 363-35-55.
E-mail: vbobtk(^.vector-best. ru
10
--- стр. 11 ---
Нач. лаборатории стабилизации НИИ СД
АО «Вектор-Бест» Н.А. Вараксин
Директор НИИ СД
АО «Вектор-Бест» М.Ю. Рукавишников
Т.И. Поспелова
«30» июня 2017 г.
И