Набор реагентов "Мелиса Токсо-IgG" для иммуноферментного качественного и количественного определения антител класса G к Тoxoplasma gondii по ТУ 9398-023-26329720-2010 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2011/10510 от 13.04.2011 · класс риска 2б

Производитель: ООО "Медико-биологический Союз" (Россия)

Вид изделия: Toxoplasma gondii антитела класса иммуноглобулин G (IgG) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 13 контрактов, медианная цена за единицу 4 850 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
*
<<Же^и]Ш-бдологический Союз»
< * ■  - у"  о \
g М .В.Лосев 
201^  г.
«УТВЕРЖДАЮ»
ИНСТРУКЦИЯ
по прим енению  н аб о р а р еаген то в 
«Мелиса Токсо-IgG»
Н абор реагентов для им м уноф ерм ентного качественного и количественного 
определения антител класса G к T oxoplasm a gondii
•  1  НАЗНАЧЕНИЕ
1.1 К ачественное и количественное определение антител класса G к Toxoplasm a gondii в 
сыворотке, плазме крови человека м етодом  им м уноф ерм ентного анализа (ИФ А) на 
твердофазном носителе в клинических и эпидем иологических исследованиях.
2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 Н абор реаген тов «М елиса Т оксо-IgG» рассчитан на проведение 96 или 192 
определений, вклю чая контрольны е образцы.
2.2 П ри исследовании небольш ого количества образцов возм ож но проведение 12 или 24 
(для разборных планш етов) независим ы х постановок И Ф А  по 8 анализов в каждой, включая 
контрольные образцы.
2.3 П ринцип м етода
М етод определения основан на двухстадийном  твердоф азном  им м уноф ерм ентном  анализе 
(ИФ А) с прим енением  антигена T oxoplasm a gondii и м оноклональны х антител против IgG 
человека.
Н а первой стадии ан ализа исследуемы е и контрольны е образцы  инкубирую т с антигеном 
^  Toxoplasm a gondii, сорбированны м  н а поверхности лунок планш ета. П ри наличии в сыворотке 
специфических антител к T oxoplasm a gondii происходит связы вание их с антигеном, при этом 
образую тся им мунны е ком плексы  антиген-антитело.
На второй стадии анализа специф ические антитела вы являю т с пом ощ ью  конъю гата 
м оноклональны х антител против IgG  человека с пероксидазой хрена.
После отм ы вки несвязавш ихся ком понентов конъю гата ком плекс «антиген-антитело- 
конъюгат» вы являю т, добавляя в лунки планш ета раствор хром огена.
Реакцию  останавливаю т стоп-реагентом. Н а спектроф отом етре изм еряю т интенсивность 
окраш ивания раствора в лунках планш ета. К онцентрация специф ических антител класса G к 
Toxoplasm a gondii п ропорциональна интенсивности окраш ивания раствора в лунках планш ета.
Ф орм ула количественного расчета специф ической активности тестируем ы х образцов 
основана на статистическом  м етоде приближ ения по двум точкам  (О П крит. и ОП(К+ср.)) 
эмпирической кривой граф ика зависим ости оптической плотности от специфической 
активности, которая п олучена при аттестации серии. Ф орм ула зависим ости рекомендована 
Комитетом по Биостандартизации ВОЗ. В качестве эталона используется К+, который является 
вторичным производственны м  стандартом, аттестованны м  относительно меж дународного 
стандарта ВО З человеческого им м уноглобулина против T oxoplasm a gondii (N IBSC code: 01/600) 
с использованием програм м ы  статистической обработки результатов И Ф А  «Paraline v.3.0».


--- стр. 2 ---
2.4 Н абор реагентов вы пускаю т в следую щ их ком плектациях:
- ком плект 1  для ручной постановки -  на 96 определений;
- ком плект 2 для ручной постановки -  на 192 определения;
- ком плект 3 для ручной постановки и автоматического анализатора -  на 96 или 192 
определения.
2.5 Состав ком плектов
Наименование компонента Комплект 1 Комплект 2 Комплект 3
иммуносорбент -  
рекомбинантный антиген 
Toxoplasma gondii, 
сорбированный в лунках 
планшетов
разборный, 
1  ш т.
разделяемый 
по лункам,
I ш т.
разборный, 
2 ш т.
монолитный, 
2 ш т.
разборный, 
1  ш т.
разборный, 
2 ш т.
К+ —  положительный 
контрольный образец, 
инактивированный -  
прозрачная малинового 
цвета жидкость
1  фл. (3,0 мл) 1  фл. (3,0 мл) 2 фл. (3,0 мл) 1  фл. (3,0 мл) 2 фл. (3,0 мл) 
или 
1  фл. (6,0 мл)
4 фл. (3,0 мл) 
или 
2 фл. (6,0 мл)
К- —  отрицательный 
контрольный образец, 
инактивированный -  
прозрачная желтого цвета 
жидкость
1  фл. (3,0 мл) 1  фл. (3,0 мл) 2 фл. (3,0 мл) 1  фл. (3,0 мл)
2  фл. (3,0 мл) 
или 
1  фл. (6,0 мл)
4  ф л. (3,0 мл) 
или 
2 фл. (6,0 мл)
Кг -  конъюгат -  
прозрачная зеленого цвета 
жидкость
1  фл. (0,6 мл) 1  фл. (0,6 мл) 2  фл, (0,6 мл) 2 фл. (0,6 мл)
2  фл. (0,6 мл) 
или 
1  фл (1,0 мл)
3  фл. (0,6 мл) 
или 
2 фл. (1,0 мл)
РБР-С- разводящий 
буферный раствор для 
сывороток -  опалесцирую- 
щая фиолетового цвета 
жидкость
1  фл. (11,0 мл)1  фл. (11,0 мл)
2 фл. (11,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
2 фл. (11,0 мл) 
или 
1  фл. (20,0 мл)
2 фл. (11,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
4 фл. (11,0 мл) 
или
2 фл. (20,0 мл)
РБР-К - разводящий 
буферный раствор для 
конъюгата -  опалесцирую- 
щая зеленого цвета 
жидкость
1  фл. (13,0 мл) 1  фл. (13,0 мл)2 фл. (13,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
2 фл. (13,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
2  фл. (13,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
4 ф л. (13,0 мл) 
или
2  ф л. (20,0 мл)
ТМБ -  тетраметилбензи- 
дин- прозрачная 
бесцветная или светло- 
желтого цвета жидкость
1  фл. (0,5 мл) 1  фл. (0,5 мл)
2 фл. (0,5 мл) 
или 
1  фл. (1,0 мл)
2  фл. (0,5 мл) 
или 
1  фл. (1,0 мл)
2 фл. (0,5 мл) 
или 
1  фл. (1,0 мл)
4 ф л. (0,5 мл) 
или 
2  ф л. (1,0 мл)
БРС -  буферный раствор 
субстрата- прозрачная 
бесцветная жидкость
1  фл. (13,0 мл)1  фл. (13,0 мл)2 фл, (13,0 мл) 2  фл. (13,0 мл)
2 фл. (13,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
4 фл. (13,0 мл) 
или
2 ф л. (20,0 мл)
РХ  -  раствор хромогена 
(вместо БРС и ТМБ) -  
прозрачная розового цвета 
жидкость
1  фл. (13,0 мл) 1  фл. (13,0 мл) 2  фл. (13,0 мл)2 фл. (13,0 мл)
2  фл. (13,0 мл) 
или 
1  фл. (20,0 мл)
4  фл. (13,0 мл) 
или
2 фл. (20,0 мл)
ФСБ-Т(х25) -  25-кратный 
концентрат фосфатно­
солевого буферного 
раствора с твином -  
прозрачная бесцветная 
жидкость, допускается 
выпадение осадка
1  фл. (26,0 мл)1  фл. (26,0 мл)2 фл. (26,0 мл) 2 фл. (26,0 мл)
2 фл. (26,0 мл) 
или
1  фл. (50,0 мл)
4  ф л. (26,0 мл) 
или
I  фл. (75,0 мл)
стоп-реагент -  0,9 моль/л 
раствор кислоты серной -  
прозрачная бесцветная 
жидкость
1  фл. (6,0 мл) 1  фл. (6,0 мл) 1  фл, (12,0 мл) 1  фл. (12,0 мл) 1  фл. (12,0 мл)
2 фл. (12,0 мл) 
или
1  фл. (20,0 мл)
инструкция по применению 
с приложением 1  ш т. 1  ш т. 1  ш т. 1  ш т. 1  ш т. 1  ш т.
Д ополнительно в набор вклады ваю т: клейкую  пленку для планш ета, пластиковы е емкости 
для растворов, одноразовы е наконечники для дозаторов.
3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1 П одлинность. Н абор реагентов вы являет антитела класса G к Toxoplasm a gondii в 
полож ительны х сы воротках рабочей панели «P n-A T -G (+ /-)T . gondii», аттестованной ОБТК
2


--- стр. 3 ---
предприятия, и не дает лож нополож ительны х результатов при исследовании сывороток этой же 
панели, не содерж ащ их антитела к T oxoplasm a gondii.
3.2 Ч увствительность. П олож ительны е сы воротки рабочей панели
«P n-A T -G (+ /-)T .gondii», аттестованной ОБТК предприятия, им ею т ОП вы ш е (ОПкрит. + 0,050). 
М инимальная достоверная концентрация антител класса G к T oxoplasm a gondii, определяемая 
набором реагентов, -  15 М Е/мл.
3.3 С пециф ичность. О трицательны е сы воротки рабочей панели «Р П -А Т -0(+ /-)Т .gondii», 
аттестованной О БТК предприятия при контроле на наборе реагентов «М елиса Токсо-IgG», 
им ею т ОП м еньш е (О П крит. -  0,050).
3.4 Открытие. Значение «откры тия» при см еш ивании равны х объем ов К+ и контрольной 
сыворотки с м иним альной концентрацией антител к T oxoplasm a gondii находится в интервале 
от 90 % до 110 %.
3.5 Л инейность. О тклонение значения концентрации антител класса G к Toxoplasm a gondii 
для каждой сы воротки находится в интервале от 90 %  до 110 % диапазона значений 
концентрации от 15 до 200 М Е/мл.
3.6 В оспроизводим ость. К оэф ф ициент вариации концентрации в одном и том же образце 
не более 8 %.
3.7 И нтерсепт. Значение 50 %  «интерсепта» долж но находиться в интервале 
ф  (40 ± 20) М Е/мл.
4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1 П отенциальны й риск прим енения набора реагентов -  класс 26 (ГО С Т  Р 51609).
4.2 При работе с набором  реагентов следует соблю дать «П равила устройства, техники 
безопасности, производственной санитарии, противоэпидем ического реж им а и личной гигиены 
при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидем иологических учреж дений 
системы М инистерства здравоохранения СССР» (М осква, 1981 г.).
4.3 Все ком поненты  набора реагентов, за исклю чением  стоп-реагента, являю тся 
нетоксичными. Раствор серной кислоты  обладает раздраж аю щ им  действием. И збегать 
разбрызгивания и попадания стоп-реагента на кож у и слизисты е. В случае попадания промыть 
пораж енный участок больш им  количеством  проточной воды.
4.4 При работе с набором  реагентов использовать средства индивидуальной защ иты 
(халат, ш апочку или косы нку, кож аны е тапочки, одноразовы е резиновы е или пластиковые 
перчатки), т.к. контрольны е образцы  и исследуемы е сы воротки следует рассматривать как 
потенциально инф ицированны е.
4.5 Тверды е отходы , пром ы вны е растворы  собрать в специальном  контейнере и затем 
обработать дезсредствам и, разреш енны м и в установленном  порядке для применения на 
территории РФ , наприм ер, раствором  перекиси водорода (ТУ 2123-002-57856778) с массовой 
долей 6 % при ком натной тем пературе не менее 2 ч.
4.6 И нструм енты  и оборудование, а такж е поверхности, на которы х проводился анализ, 
обработать дезсредствам и, разреш енны м и в установленном  порядке для применения на 
территории РФ , наприм ер, раствором  этилового спирта (ГО С Т  Р 51652) с объем ной долей 70 % 
в течение нескольких секунд.
4.7 Запрещ ается прием  пищ и, использование косм етических средств и курение в 
помещ ениях, предназначенны х для работы  с наборам и реагентов.
5 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- У стройство для пром ы вки м икропланш етов или восьм иканальная полуавтоматическая 
пипетка со сменны ми наконечникам и, позволяю щ ими отбирать объем ы  ж идкостей до 300 мкл;
- пипетка полуавтом атическая одноканальная с переменны м  или ф иксированны м  объемом 
со сменными наконечникам и, позволяю щ им и отбирать объем ы  ж идкостей от 40 до 200 мкл, 
аттестованная по значению  средней дозы  и сходим ости результатов пипетирования с 
погреш ностью  не более 3 %;
- термостат, поддерж иваю щ ий тем пературу (37±1) °С;
3


--- стр. 4 ---
- фотометр для м икропланш етов, позволяю щ ий проводить изм ерение оптической 
плотности растворов в лунках планш етов при длинах волн 450 и 650 нм;
- анализатор автом атический откры того типа;
- цилиндр м ерны й второго класса точности вм естим остью  1000 мл;
- холодильник бы товой, поддерж иваю щ ий тем пературу от 2 °С до 8 °С;
- перчатки резиновы е хирургические;
- бумага ф ильтровальная лабораторная;
- вода очищ енная;
- спирт этиловый;
- водорода перекись.
6 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1 Д ля проведения ан ализа использовать образцы  сы воротки (плазмы) крови человека 
объемом не менее 15 мкл.
6.2 Для вы явления антител класса G к Toxoplasm a gondii использовать сыворотку, плазму 
крови человека как свеж еприготовленную , так и хранивш ую ся не более 7 суток при 
температуре от 2 °С до 8 °С или не более ш ести м есяцев при тем пературе минус 20 °С.
6.3 Д ля исклю чения лож нополож ительны х результатов исследуем ы е сыворотки готовить 
и хранить в условиях, исклю чаю щ их возм ож ность бактериального пророста. Необходимо 
осветлять образцы  сы вороток, содерж ащ ие осадок и агрегаты , путем  центриф угирования в 
течение 15 мин при частоте вращ ения 3000 об/мин. Не использовать сы воротки с выраженным 
гемолизом, гиперлипидем ией и бактериемией. И збегать повторны х циклов замораж ивания- 
оттаивания образцов.
7 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Н есоблю дение описанны х ниж е требований м ож ет привести к искаж ению  результатов 
анализа:
- при проведении ан ализа нельзя использовать реагенты  из наборов реагентов разных 
серий или смеш ивать их в процессе приготовления растворов, за исклю чением  Ф СБ-Т(х25) и 
стоп-реагента, которы е взаим озам еняем ы  во всех наборах реагентов производства ЗАО «М БС»;
- для приготовления растворов использовать чистую  посуду;
- в процессе пром ы вки полностью  заполнять лунки планш ета без переполнения и 
перетекания ж идкости в соседние лунки;
- время м еж ду заполнением  и опорож нением  лунок планш ета растворам и и реагентами 
долж но быть не менее 30 с;
- не допускать вы сы хания лунок планш ета м еж ду отдельны м и операциями;
- для работы  с исследуем ы м и сы вороткам и и контрольны м и образцам и использовать 
одноразовые наконечники для дозаторов;
- дозаторы  и рабочие поверхности обрабаты вать раствором  спирта этилового с объемной 
долей 70 %, не использовать хлорам ин и другие хлорсодерж ащ ие вещ ества;
- при использовании пром ы вателя следить за состоянием  ем кости для рабочего раствора 
Ф СБ-Т и соединительны х ш лангов: в них не долж но быть признаков бактериального или 
грибкового роста.
7.1 Подготовка компонентов набора
• Ком плект перед проведением  анализа вы держ ать в течение 30 мин при температуре 
от 17 °С до 27 °С.
• Д ля отбора исследуем ы х проб и реагентов использовать автоматические дозаторы с 
погреш ностью  изм ерения объем а не более 3 %.
•  С одерж имое ф лаконов с образцам и сы вороток и реагенты  перед исследованием 
тщ ательно взболтать.


--- стр. 5 ---
Таблица  1  -  Расход ком понентов набора реагентов для постановки анализа на одном 
планш ете
ТСпмппнент Количество используемых стрипов, ш т.
1 2 3 4 5 6 7 з 9 1 0 1 1 1 2
комплект  1 , комплект  2
ФСБ-Т(х25) 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 12,0 14,0 16,0 18,0 20,0 22,0 26,0
Вода ДО до до до до Д О до до до до Д О ДО
очищенная 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 650
РБР-К, БРС 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0 9,0 10,0 11,0 13,0
К г, ТМ Б У/13 2У/13 ЭУ/13 4У/13 5  У/13 6У/13 7У/13 8У/13 9У/13 10У/13 1 1  У/13 У
ком плект  3
2 ФСБ-Т(х25) 4,0/ 8,0/ 12,0/ 16,0/ 20,0/ 24,0/ 28,0/ 32,0/ 36,0/ 40,0/ 44,0/ 50,0/
з " 6,0 12,0 18,0 24,0 30,0 36,0 42,0 48,0 54,0 60,0 66,0 52,0/
75,0
О Вода до до до до до до до до до до ДО ДО
очищенная 100/ 200/ 300/ 400/ 500/ 600/ 700/ 800/ 900/ 1000/ 1100/ 1250/
150 300 450 600 750 900 1050 1200 1350 1500 1650 1300/
1875
РБР-К, БРС 1,6 3,3 5,0 6,6 8,3 10,0 11,6 13,3 15,0 16,6 18 ,3 20,0/
26,0
> Кг, ТМ Б У/12 У/6 У/4 У/З 5У/12 У/2 7У/12 2У/3 ЗУ/4 5  У/6 11У/12 У
7.7.7 Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т (для промывки планшетов)
При наличии во ф лаконе с Ф С Б-Т (х25) осадка ф лакон с концентратом  выдерж ать при 
температуре 37 °С до полного растворения солей.
Содерж имое одного ф лакона с Ф С Б-Т(х25) перенести в м ерны й цилиндр и разбавить в 25 
раз водой очищ енной.
В случае использования для постановки И Ф А  одного или нескольких стрипов планш ета в 
мерный цилиндр отобрать необходим ы е объем ы  Ф С Б-Т(х25) и воды  очищ енной в соответствии 
с таблицей 1.
Хранение: рабочий раствор Ф С Б-Т  не более 12 ч при тем пературе от 17 °С до 27 °С, не 
более 7 суток при тем пературе от 2 °С до 8 °С; неиспользованны й Ф С Б-Т(х25) - в закрытом 
флаконе в течение срока годности набора при тем пературе от 2 °С до 8 °С.
7.1.2 Подготовка РБР-С, РБР-К, БРС, РХ
РБР-С, РБР-К, БРС , РХ  готовы  к использованию .
В РБР-С и РБР-К  возм ож но вы падение осадка. П еред использованием  тщ ательно 
^  перемеш ать.
Хранение : неиспользованны е РБР-С, РБР-К, БРС, РХ  в закры ты х ф лаконах в течение срока 
годности набора при тем пературе от 2 °С до 8 °С.
7.1.3 Подготовка контрольных образцов
К+ и К- готовы  к использованию .
Хранение : неиспользованны е К+ и К- в закры ты х ф лаконах в течение срока годности 
набора при тем пературе от 2 °С до 8 °С.
7.1.4 Приготовление рабочего раствора Кг
Рабочий раствор К г готовить непосредственно перед использованием .
Из ф лакона с К г отобрать указанны й на этикетке объем (V)  и перенести во флакон с 
РБР-К. Раствор тщ ательно перемеш ать, не допуская образования пены.
В случае использования одного или нескольких стрипов планш ета в чистый флакон 
отобрать необходим ы е объем ы  РБР-К  и К г в соответствии с таблицей 1.
Хранение: рабочий раствор К г не более 15 м ин при тем пературе от 17 °С до 27 °С, 
неиспользованны й К г - в закры том  ф лаконе в течение срока годности набора при температуре 
от 2 °С до 8 °С.
7.1.5 Приготовление рабочего раствора ТМБ
В случае кристаллизации ТМ Б ф лакон с реагентом  вы держ ать в течение 3 - 5  мин при 
температуре 37 °С до полного растворения ТМ Б.
5