Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности антител класса G к Toxoplasma gondii "Мелиса Токсо-IgG-авидность" по ТУ 9398-026-26329720-2009 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2010/07745 от 14.05.2010 · класс риска 2б

Производитель: ООО "Медико-биологический Союз" (Россия)

Вид изделия: Toxoplasma gondii индекс авидности антител класса иммуноглобулин G (IgG) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 9 контрактов, медианная цена за единицу 4 364 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Директор ЗАО
«Ме®нб0кбиологический Союз»
М.В .Лосев 
200 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов 
«М елиса ToKco-IgG-авидность»
Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности 
антител класса G к Toxoplasma gondii
1  НАЗНАЧЕНИЕ
1.1 Определение индекса авидности антител класса G к Toxoplasma gondii в сьшоротке 
(плазме) крови человека.
1.2 Набор реагентов «Мелиса ToKco-IgG-авидность» рассчитан на проведение 48 анализов, 
включая контрольные образцы.
1.3 При исследовании небольшого количества образцов возможно проведение 6 
независимых постановок ИФА по 8 анализов в каждой, включая контрольные образцы
2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 Принцип метода
Метод определения основан на двухстадийном твердофазном иммуноферментном анализе 
(ИФА) с применением антигена Toxoplasma gondii и моноклональных антител против IgG 
человека.
На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы инкубируют с антигеном 
Toxoplasma gondii, сорбированным на поверхности лунок планшета. При наличии в сьшоротке 
специфических антител к Toxoplasma gondii происходит связьшание их с антигеном, при этом 
образуются иммунные комплексы антиген-антитело.
На второй стадии анализа после удаления несвязавшихся компонентов исследуемых 
образцов в половину лунок добавляют раствор денатурирующий (РД), в котором комплексы 
антиген-высокоавидное антитело сохраняются, а комплексы антиген-низкоавидное антитело 
разрушаются (денатурируют). В другую половину лунок добавляют раствор сравнения 
(рабочий раствор ФСБ-Т), в котором все комплексы сохраняются.
На третьей стадии анализа сохранившиеся комплексы, состоящие из антител IgG и 
антигена Toxoplasma gondii, выявляют с помощью конъюгата моноклональных антител против 
IgG человека с пероксидазой хрена. После отмьшки несвязавшихся компонентов конъюгата 
комплекс «антиген-антитело-конъюгат» выявляют, добавляя в лунки планшета раствор 
хромогена.
Реакцию останавливают стоп-реагентом. На спектрофотометре измеряют интенсивность 
окрашивания раствора в лунках планшета. Концентрация специфических антител IgG к 
Toxoplasma gondii пропорциональна интенсивности окрашивания раствора в лунках планшета.
Индекс авидности образца определяют как отношение оптической плотности (ОП) 
образца в лунках, обработанных РД, к ОП образца в лунках с раствором сравнения (рабочий 
раствор ФСБ-Т).
Наименование компонента Комплект 1 Комплект 3
иммуносорбент - рекомбинантный антиген Toxoplasma gondii, 
сорбированный в лунках разборных планшетов
разборный, 
1  шт.
разборный, 
1  шт.
К+ВА - положительный контрольный образец, инактивированный - 1  фл. (1,5 мл) 1  фл. (2,5 мл)


--- стр. 2 ---
сыворотка крови человека, содержащая высокоавидные антитела к 
T.gondii, не содержащая антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВГС и HBsAg - 
щзозрачная малинового цвета жидкость
или 
2 фл. (1,5 мл)
К+НА - положительный контрольный образец, инактивированный -  
сыворотка крови человека, содержащая низкоавидные антитела к 
Toxoplasma gondii, не содержащая антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВГС и 
HBsAg - прозрачная светло-малинового цвета жидкость ____________
1  фл. (1,5 мл)
1  фл. (2,5 мл)
или
2 фл. (1,5 мл)
К- - отрицательный контрольный образец - сыворотка крови человека, не 
содержащая антитела к T.gondii, ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВГС и HBsAg - 
прозрачная желтого цвета жидкость
__________________________________
1  фл. (3,0 мл) 1  фл. (3,0 мл)
Кг -  конъюгат - моноклональные антитела мыщи к IgG человека, 
конъюгированные с пероксидазой хрена - прозрачная зеленого цвета 
жидкость
1  фл. (0,6 мл)
1  фл. (1,0 мл)
или
2 фл. (0,6 мл)
РБР-С - разводящий буферный раствор для сывороток -  прозрачная, 
опалесцирующая фиолетового цвета жидкость 1  фл. (11,0 мл)
1  фл. (20,0 мл)
или
2 фл. (11,0 мл)
РБР-К - разводящий буферный раствор для конъюгата - прозрачная 
зеленого цвета жидкость 1  фл. (13,0 мл)
1  фл. (20,0 мл)
или
2 фл. (13,0 мл)
РД - раствор денатурирующий - прозрачная голубого цвета жидкость, 
допускается наличие голубого осадка _____________________________ 1  фл. (6,0 мл) 1  фл. (9,0 мл)
С
БРС -  буферный раствор субстрата - прозрачная бесцветная жидкость 1  фл. (13,0 мл)
1  фл. (20,0 мл)
или
2 фл. (13,0 мл)
ТМБ - тетраметилбензидин - прозрачная бесцветная или светло-желтого 
цвета жидкость 1  фл. (0,5 мл)
1  фл. (1,0 мл)
или
2 фл. (0,5 мл)
РХ -  раствор хромогена (вместо БРС и ТМБ) - прозрачная розового цвета 
жидкость 1  фл. (13,0 мл)
1  фл. (20,0 мл)
или
2 фл. (13,0 мл)
ФСБ-Т(х25) - 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного 
раствора с твином - прозрачная бесцветная жидкость 1  фл. (26,0 мл)
1  фл. (50,0 мл)
или
2 фл. (26,0 мл)
стоп-реагент -  0,9 моль/л раствор кислоты серной - прозрачная 
бесцветная жидкость 1  фл. (6,0 мл) 1  фл. (12,0 мл)
инструкцию по применению с приложением 1  щт. 1  шт.
Дополнительно в набор вкладывают: клейкую пленку для планшета, пластиковые емкости 
для растворов, одноразовые наконечники дня дозаторов.
3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1 Подлинность. Набор реагентов должен выявлять антитела класса G к Toxoplasma 
gondii в положительных сыворотках рабочих панелей «PIl-AT-G(+/-)T.gondii» и «РП-АТ- 
G(+)T.gondii», аттестованных ОБТК предприятия, и не давать ложноположительных 
результатов при исследовании отрицательных сывороток рабочей панели «РП-АТ-0(+/-) 
T.gondii».
3.2 Чувствительность. Степень способности набора регентов выявлять положительные 
сыворотки рабочих панелей «Pn-AT-G(+/-)T.gondii» и «Pri-AT-G(+)T.gondii» методом ИФА без 
ложноотрицательных результатов - 100 %.
3.3 Специфичность. Степень способности набора реагентов выявлять отрицательные 
сыворотки рабочей панели «Pn-AT-G(+/-)T.gondii» методом ИФА без ложноположительных 
результатов -100 %.
4 М ЕРЫ  ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ
4.1 Потенциальный риск применения набора реагентов -  класс 26 (ГОСТ Р 51609).
4.2 При работе с набором реагентов следует соблюдать «Правила устройства, техники 
безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены 
при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений 
системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).


--- стр. 3 ---
4.3 Все компоненты набора реагентов, за исключением стоп-реагента, являются 
нетоксичньп^1и. Раствор серной кислоты обладает раздражающим действием. Избегать 
разбрызгивания и попадания стоп-реагента на кожу и слизистые. В случае попадания промыть 
пораженный участок большим количеством проточной воды.
4.4 При работе с набором реагентов использовать средства индивидуальной защиты 
(халат, шапочку или косынку, кожаные тапочки, одноразовые резиновые или пластиковые 
перчатки), т.к. контрольные образцы и исследуемые сыворотки следует рассматривать как 
потенциально инфицированные.
4.5 Твердые отходы, промывные растворы собрать в специальном контейнере и затем 
обработать дезсредствами, разрешенными в установленном порядке для применения на 
территории РФ, например, раствором перекиси водорода (ТУ 2123-002-57856778) с массовой 
долей 6 % при комнатной температуре не менее 2 ч.
4.6 Инструменты и оборудование, а также поверхности, на которых проводился анализ, 
обработать дезсредствами, разрешенными в установленном порядке для применения на 
территории РФ, например, раствором этилового спирта (ГОСТ Р 51652) с объемной долей 70 % 
в течение нескольких секунд.
4.7 Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в 
помещениях, предназначенных для работы с наборами реагентов.
5 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- Устройство для промывки микропланщетов или восьмиканальная полуавтоматическая 
пипетка со сменными наконечниками, позволяющими отбирать объемы жидкостей до 300 мкл;
- пипетка полуавтоматическая одноканальная с переменным или фиксированным объемом 
со сменными наконечниками, позволяющими отбирать объемы жидкостей от 40 до 200 мкл, 
аттестованная по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования с 
погрешностью не более 3 %;
- термостат, поддерживающий температуру (37±1) °С;
- фотометр для микропланшетов, позволяющий проводить измерение оптической 
плотности растворов в лунках планшетов при длинах волн 450 и 650 нм;
- цилиндр мерный второго класса точности вместимостью 1  О О О  мл;
- холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 °С до 8 °С;
- перчатки резиновые хирургические;
- бумага фильтровальная лабораторная;
- вода очищенная;
- спирт этиловый;
- водорода перекись;
- перчатки резиновые.
6 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1 Для проведения анализа использовать образцы сыворотки (плазмы) крови человека 
объемом не менее 25 мкл,
6.2 Для определения индекса авидности антител класса G к Toxoplasma gondii 
использовать сыворотку (плазму) крови человека как свежеприготовленную, так и 
хранившуюся не более 48 ч при температуре от 2 °С до 8 °С или не более трех месяцев при 
температуре минус 20 °С.
6.3 Для исключения ложноположительных результатов исследуемые сыворотки готовить 
и хранить в условиях, исключающих возможность бактериального пророста. Необходимо 
осветлять образцы сывороток, содержащие осадок и агрегаты, путем центрифугирования в 
течение 15 мин при частоте вращения 3000 об/мин. Не использовать сыворотки с выраженным 
гемолизом, гиперлипидемией и бактериемией. Избегать повторных циклов замораживания- 
оттаивания образцов.
7 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Несоблюдение описанных ниже требований может привести к искажению результатов


--- стр. 4 ---
ф
анализа:
- при проведении анализа нельзя использовать реагенты из наборов реагентов разных 
серий или смешивать их в процессе приготовления растворов;
- для приготовления растворов использовать чистую посуду;
- в процессе промывки полностью заполнять лунки планшета без переполнения и 
перетекания жидкости в соседние лунки;
- время между заполнением и опорожнением лунок планшета растворами и реагентами 
должно быть не менее 30 с;
- не допускать высыхания лунок планшета между отдельными операциями;
- для работы с исследуемыми сыворотками и контрольными образцами использовать 
одноразовые наконечники для дозаторов;
- дозаторы и рабочие поверхности обрабатывать раствором спирта этилового с объемной 
долей 70 %, не использовать хлорамин и другие хлорсодержащие вещества;
- при использовании промывателя следить за состоянием емкости для рабочего раствора 
ФСБ-Т и соединительных шлангов: в них не должно быть признаков бактериального или 
грибкового роста.
7.1 Подготовка компонентов набора
• Комплект перед проведением анализа вьщержать в течение 30 мин при температуре 
от17°С  до 27 °С.
• Для отбора исследуемых проб и реагентов использовать автоматические пипетки с 
погрешностью измерения объема не более 3 %.
• Все образцы сывороток и реагенты перед исследованием тщательно перемешать.
7.1.1 Подготовка иммуносорбента
Иммуносорбент готов к использованию
Хранение: после вскрытия упаковки неиспользованные стрипы планшета - в плотно 
закрытом пакете с влагопоглотителем при температуре от 2 °С до 8 °С не более 3 месяцев.
7.1.2 Приготовление рабочего раствора ФСБ-Т (для промывки планшетов и  
использования в качестве раствора сравнения)
При наличии во флаконе с ФСБ-Т(х25) осадка флакон с концентратом выдержать при 
температуре 37 °С до полного растворения солей.
Содержимое одного флакона ФСБ-Т(х25) перенести в мерный цилиндр и разбавить в 25 
раз водой очищенной.
В случае постриповой постановки анализа в мерный цилиндр отобрать необходимые 
объемы ФСБ-Т(х25) и воды очищенной в соответствии с таблицей 1.
Компонент
Количество используемых стрипов, шт.
2 4 6 8 10 12
s'< u
юо
комплект 1
ФСБ-Т(х25) 1 4,0 8,0 12,0 16,0 20,0 26,0
Вода очищенная до
100
до
200
до
300
до
400
до
500
до
650
Кг, ТМБ 2V/13 4V/13 6V/13 8V/13 10V/13 V
РЕР-К, БРС 2,0 4,0 6,0 8,0 10,0 13,0
комплект 3
ФСБ-Т(х25) 8,0 16,0 24,0 32,0 40,0 50,0/
52,0
Вода очищенная до
200
до
400
до
600
до
800
до
1000
до
1250/
1300
Кг, ТМБ V/6 V/3 V/2 2V/3 5V/6 V
РБР-К, БРС
3,3 6,6 10,0 13,3 16,6
20,0/
26,0