Набор реагентов для иммуноферментного выявления е-антигена вируса гепатита В "Инвитролоджик НВеАg" по ТУ 9398-032-26329720-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- ф УТВЕРЖДАЮ ЗАО юлогический Союз» М.В. Лосев 200 ИНСТРУК ___ по применению набора реаггатов «И нвитролодж ик H BeA g» Набор реагентов для иммуноферментного выявления е-антигена вируса гепатита В 1 НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «Инвитролоджик HBeAg» предназначен для выявления е-антигена вируса гепатита В (HBeAg) в сыворотке, плазме крови человека и препаратах, приготовленных из крови человека, методом иммуноферментного анализа (ИФА) на твердофазном носителе в клинических и эпидемиологических исследованиях, а также службой крови. 2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1 Набор реагентов рассчитан на проведение 96 определений, включая контрольные образцы. 2.2 При исследовании небольшого количества сывороток возможно проведение 1 2 независимых постановок ИФА по 8 анализов в каждой, включая контрольные образцы. 2.3 Принцип метода Метод определения основан на одностадийном твердофазном ИФА с применением моноклональных антител к HBeAg, сорбированных на поверхности лунок иммуносорбента, и моноклональных антител к HBeAg, конъюгированных с пероксидазой хрена. Исследуемые сыворотки и рабочий раствор конъюгата инкубируют с иммобилизованными на поверхности лунок планшета антителами к HBeAg. При наличии в исследуемой сыворотке HBeAg образуются комплексы «антитело-антиген-конъюгат». После удаления несвязавшихся компонентов сыворотки и конъюгата образовавшиеся комплексы выявляют, добавляя в лунки планшета раствор хромогена. При этом в лунках, содержащих HBeAg, происходит изменение окраски раствора. В лунках, не содержащих HBeAg, изменение окраски раствора не произойдет. Реакцию останавливают стоп-реагентом. На спектрофотометре измеряют интенсивность окраш ивания раствора в лунках иммуносорбента. Чем выш е содержание HBeAg в сыворотке, тем интенсивнее окрашен раствор. 2.4 Набор реагентов выпускают в виде следующих комплектов: - комплект 1 для ручной постановки - на 96 определений; - комплект 3 для ручной постановки и автоматического анализатора - на 96 определений, 2.5 Состав комплектов приведен в таблице 1 . Т а б л и ц а 1 Н аим енование ком понента К ом плект 1 К ом плект 3 Иммуносорбент - моноклональные антитела к HBeAg, сорбированные в лунках разборных планшетов 1 шт. 1 шт. К+ - положительный контрольный образец, инактивированный - прозрачная малинового цвета жидкость 1 фл. (2,0 мл) 1 фл. (2,0 мл) К- - отрицательный контрольный образец, инактивированный - прозрачная желтого цвета жидкость 1 фл. (3,0 мл) 1 фл. (3,0 мл) РБР-К - разводящий буферный раствор для конъюгата - прозрачная красно-коричневого цвета жидкость 1 фл. (6,0 мл) 1 фл. (12,0 мл) или 2 фл. (6,0 мл) --- стр. 2 --- (p t r - конъюгат - прозрачная зеленого цвета жидкость 1 фл. (0,75 мл) 1 фл. (1,5 мл) или 2 фл. (0,75 мл) РХ - раствор хромогена - прозрачная розового цвета жидкость 1 фл. (13,0 мл) 1 фл. (20,0 мл) или 2 фл. (13,0 мл) ФСБ-Т(х25) - 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином - прозрачная бесцветная жидкость 1 фл. (26,0 мл) 1 фл. (50,0 мл) или 2 фл. (26,0 мл) j стоп-реагент - 0,9 моль/л раствор кислоты серной - прозрачная бесцветная жидкость 1 фл. (6,0 мл) 1 фл. (12,0 мл) 1 инструкция по применению 1 шт. I шт. Дополнительно в комплект вкладывают клейкую пленку для планшета, ванночки для реагентов, одноразовые наконечники для дозаторов. 3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1 Подлинность. Набор реагентов должен вы являть HBeAg в положительных сыворотках рабочей панели «Pn(+/-)HBeAg», аттестованной ОБТК предприятия, и не давать ложноположительных результатов при исследовании сывороток этой же панели, не содержащих HBeAg. 3.2 Чувствительность. Степень способности набора вы являть положительные сыворотки рабочей панели «Pn(+/-)HBeAg» методом ИФА без ложноотрицательных результатов - 100 % . 3.3 Специфичность. Степень способности набора вы являть отрицательные сы воротки рабочей панели «Pn(+A)HBeAg» методом ИФА без ложноположительных результатов - 100 % . 4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 4.1 Потенциальный риск применения набора реагентов - класс 26 (ГОСТ Р 51609). 4.2 При работе с набором реагентов соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 4.3 Все компоненты набора реагентов, за исключением стоп-реагента, являются нетоксичными. Серная кислота, входящая в состав стоп-реагента, обладает раздражающим действием. При попадании стоп-реагента на кожу и слизистые промыть пораженный участок большим количеством проточной воды. 4.4 П ри работе с набором реагентов использовать средства индивидуальной защиты (халат, ш апочку или косынку, кожаные тапочки, одноразовые резиновые или пластиковые перчатки), т.к. контрольные образцы и исследуемые сыворотки следует рассматривать как потенциально инфицированные. 4.5 Твердые отходы, промывные растворы собирать в специальном контейнере, затем обработать дезсредствами, разрешенными для применения на территории РФ , например, раствором перекиси водорода (ГОСТ 177) с массовой долей 6 % не менее 2 ч при температуре от \7^Сцо 27 °С . 4.6 Инструменты и оборудование, а также поверхности, на которых проводился анализ, обработать дезсредствами, разрешенными для применения на территории РФ , например, раствором этилового спирта (ГОСТ Р 51652) с объемной долей 70 % в течение нескольких секунд. 4.7 Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с наборами. 5 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - Устройство для промывки микропланшетов или восьмиканальная полуавтоматическая пипетка со сменными наконечниками, позволяющими отбирать объемы жидкостей до 300 м кл; - пипетка полуавтоматическая одноканальная с переменным или фиксированным объемом со сменными наконечниками, позволяющими отбирать объемы жидкостей от 40 до 200 м кл, аттестованная по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования с погрешностью не более 3 % ; - термостат, поддерживающий температуру (37±1) °С; --- стр. 3 --- ^ - фотометр для микропланшетов, позволяющий проводить измерение оптической плотности растворов в лунках планшетов при длинах волн 450 и 650 нм; - анализатор автоматический открытого типа; - цилиндр мерный второго класса точности вместимостью 1 О О О мл; - холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 °С до 8 °С ; - бумага фильтровальная лабораторная; - вода очищенная; - спирт этиловый; - водорода перекись; - перчатки резиновые. 6 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1 Для определения H B eA g использовать сыворотку, плазму крови человека к ак свежеприготовленную, так и хранившуюся не более 48 ч при температуре от 2 °С до 8 °С или не более трех месяцев при температуре минус 20 °С. 6.2 Для проведения анализа использовать сыворотку, плазму крови человека объемом 50 м кл. 6.3 Для исключения ложноположительных результатов исследуемые сыворотки готовить и хранить в условиях, исключающих возможность бактериального пророста. Необходимо осветлять сыворотки, содержащие осадок и агрегаты, путем центрифугирования в течение 1 5 мин при частоте вращения 3000 об/мин. Не использовать сыворотки с выраженны м гемолизом, гиперлипидемией и бактериемией. 6.4 Избегать повторных циклов замораживания-оттаивания сывороток. 6.5 Перед проведением анализа каждую исследуемую сыворотку тщательно перемешать. 7 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Несоблюдение описанных ниже требований может привести к искажению результатов анализа; - при проведении анализа нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их в процессе приготовления растворов; - для приготовления растворов использовать чистую посуду; - в процессе промывки полностью заполнять лунки иммуносорбента без переполнения и перетекания жидкости в соседние лунки; ' не допускать высыхания лунок иммуносорбента между отдельными операциями; - для работы с исследуемыми сыворотками и контрольными образцами использовать одноразовые наконечники для дозаторов; - пипетки и рабочие поверхности обрабатывать раствором спирта этилового с объемной долей 70 % , не использовать хлорамин и другие хлорсодержащие вещества; - при использовании промывателя следить за состоянием емкости для рабочего раствора Ф СБ-Т и соединительных шлангов: в них не должно быть признаков бактериального или грибкового роста. 7.1 Подготовка компонентов набора Перед проведением анализа выдержать набор в течение 30 мин при температуре от 17 ® С до 27 °С . 7.1.1 Подготовка иммуносорбента Иммуносорбент готов к использованию. Хранение: неиспользованные стрипы в плотно закрытом пакете с влагопоглотителем при температуре от 2 °С до 8 °С не более 3 месяцев. 7.1.2 Приготовление рабочего раствора Ф СБ-Т П ри наличии осадка флакон с ФСБ-Т(х25) выдержать при температ}фе 37 °С до полного растворения солей. Содержимое флакона с ФСБ-Т(х25) перенести в мерный цилиндр, разбавить в 25 раз водой очищенной и тщательно перемешать. П ри постановке ИФА на отдельных стрипах в мерный цилиндр отобрать необходимые объемы ФСБ-Т(х25) и воды очищенной в соответствии с таблицей 2. --- стр. 4 --- б л и ц а 2 Объем, Количество используемых стрипов, ш т. мл 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 И 12 комплект 1 ФСБ-Т(х25) 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 Вода до до до до до до до до до до до до очищенная 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 РБР-К 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5 5,5 6 К г 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 0,5 0,55 0,6 РХ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 1 12 Стоп-реагент 0,5 1,0 Ь5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 5,5 6,0 комплект 3 ФСБ-Т(х25) 4,0 8,0 12,0 16,0 20,0 24,0 28,0 32,0 36,0 40,0 44,0 48,0 Вода до до до до до до до до до до до до очищ енная 100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000 1100 1200 РБР-К 1,0 1,5 2,5 3 4 4,5 5,5 6 7 7,5 8,5 9 К г 0,1 0,15 0,25 0,3 0,4 0,45 0,55 0,6 0,7 0,75 0,85 0,9 РХ 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 Стоп-реагент 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 1 12 Хранение: неиспользованный ФСБ-Т(х25) в закрытом флаконе в течение срока годности набора реагентов при температуре от 2 °С до 8 °С. 7.1.3 Подготовка РБР-К и РХ РБР-К и РХ готовы к использованию. Хранение: неиспользованные РБР-К и РХ в закрытых флаконах в течение срока годности набора реагентов при температуре от 2 °С до 8 °С. 7.1.4 Подготовка рабочего раствора Кг Из флакона с Кг отобрать указанный на этикетке объем (К - объем Кг в мл) и перенести во флакон с РБР-К. Рабочий раствор Кг тщ ательно перемеш ать, не допуская образования пены . При постановке ИФА на отдельных стрипах в чистый флакон отобрать необходимые объемы РБР-К и Кг в соответствии с таблицей 2. Хранение: рабочий раствор Кг не более 10 мин при температуре от 17 °С до 27 °С, неиспользованный Кг в закрытом флаконе в течение срока годности набора реагентов при температуре от 2 ® С до 8 °С. 7.1.5 Подготовка контрольных образцов К+ и К- готовы к использованию. Хранение: неиспользованные К+ и К- в закрытых флаконах в течение срока годности набора реагентов при температуре от 2 °С до 8 °С. 7.1.6 Подготовка стоп-реагента Стоп-реагент готов к использованию. Хранение: неиспользованный стоп-реагент в закрытом флаконе в течение срока годности набора реагентов при температуре от 2 °С до 8 °С. 7.2 Проведение ИФА 7.2.1 Проведение ИФА при ручной постановке (комплект 7, комплект 3) 7.2.1 Л Необходимое количество стрипов вы нуть из пакета и закрепить на рамке. Оставшиеся стрипы упаковать в пакет с влагопоглотителем. 7.2.1.2 Приготовить рабочий раствор ФСБ-Т, рабочий раствор Кг, вскры ть флаконы с остальными реагентами и контрольными образцами. 7.2.1.3 Во все лунки иммуносорбента, предназначенные для постановки анализа, внести по 50 м кл рабочего раствора К г. 7.2.1.4 Затем в одну лунку внести 50 мкл К+, в две другие лунки - по 50 мкл К-, в остальные - по 50 мкл исследуемых сывороток. Раствор перемешать пять раз пипетированием, при этом цвет рабочего раствора Кг должен измениться.