Набор реагентов для выделения ДНК из клинических образцов (РеалБест ДНК-экстракция 2) по ТУ 9398-279-23548172-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- У Т В Е Р Ж Д Е Н А « У Т В Е Р Ж Д А Ю » П риказом Росздравнадзора Генеральны й директор от « ____» _________________2 0 1_ г. № ______ ЗАО_<<Вектор-Бест» . Хусаинов 20l/r. И Н С Т Р У К Ц И Я ! по применению набора реагентов для вы деления образцов « Р е а л Б е с т Д Н К -э к с т р а к ц и я 1. Н А З Н А Ч Е Н И Е Набор реагентов «РеалБест Д Н К -экстракция 2» (далее по тексту - набор) предназначен для вьщеления ДН К из образцов сыворотки (плазмы) крови, биоптатов, ликвора, мочи, соскобов эпителиальных клеток со слизистой цервикального канала, уретры, влагалища и др. Набор реагентов «РеалБест Д Н К -экстракция 2» м ож ет быть применен в клинической практике при диагностике инфекционны х заболеваний человека методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Набор рассчитан на вы деление ДН К из 96 образцов, вклю чая контрольные образцы. О беспечивает возм ож ность проведения до 4 независимы х процедур вьщеления по 24 образца в каж дой, вклю чая контроли. 2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А Б О Р А 2.1. П ринцип метода. П ринцип вы деления Д Н К, использованны й в наборе «РеалБест Д Н К-экстракция 2», состоит в тем пературной обработке пробы м ногокомпонентны м лизирую щ им раствором, разруш ающ им клетки и ком плексы нуклеиновы х кислот с белками, с последую щ ей сорбцией вы свободивш ейся Д Н К на покры тые силикагелем магнитные частицы, отмывками и элю цией. Э ф фективность вьщ еления ДН К, которая мож ет бы ть сниж ена из-за потерь ДНК или наличия в образце ингибирую щ их примесей, оценивается при проведении ПЦР- анализа по внутреннем у контрольному образцу (ВКО ), входящ ем у в состав набора и проходящ его все стадии вы деления совместно с анализируем ы м и образцами. И нст рукция сост авлена сот рудникам и ЗАО «Вект ор-Бест »: Д ирект ором по производст ву Ткачевы м В.К. и нач. от деления производст ва П Ц Р наборов Трухиной А. В. --- стр. 2 --- « П олож ительны й контрольны й образец (П КО ) входит в состав П Ц Р-наборов серии «РеалБест». П К О проходит процедуру вы деления наравне с биологическими пробами и отрицательны м контрольны м образцом. 2.2. С остав набора: - лизирую щ ий раствор, готовый к прим енению - 4 ф лакона (по 8 мл); - осадитель НК, готовы й к прим енению - 4 ф лакона (по 12 мл); - раствор для отм ы вки № 1, готовы й к прим енению - 4 ф лакона (по 13 мл); - раствор для отм ы вки № 2, готовый к прим енению - 4 ф лакона (по 8 мл); - элю ирую щ ий раствор, готовый к прим енению - 4 ф лакона (по 15 мл); - сорбент (суспензия м агнитны х частиц) - 2 ф лакона (по 1 мл); - раствор для восстановления контрольны х образцов (РВК), готовый к прим енению - 2 ф лакона (по 4 мл); - отрицательны й контрольны й образец (О КО ), готовый к применению - 2 ф лакона (по 2 мл); - внутренний контрольны й образец (ВКО ), лиоф илизированны й - 4 флакона. 3. Т Е Х Н И Ч Е С К И Е Х А РА К Т Е РИ С Т И К И Н А БО РА Т ест на отсутствие ингибирования и эф ф ективность вьщ еления (по Д Н К Chlam ydia trachom atis) - 100 %. 4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к искажению результатов ПЦР. 4.1. П отенциальны й риск прим енения н а б о р а -к л а с с 1 (ГО С Т Р 51609-2000). 4.2. П ри работе с набором следует соблю дать «П равила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидем ического реж им а и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреж дений систем ы М инистерства здравоохранения С С С Р» (М осква, 1981 г.). 4.3. Д ля предотвращ ения контам инации необходим о территориально разделять этапы вьщ еления Д Н К и постановки ПЦ Р согласно М У 1.3. 2569-09 «О рганизация работы лабораторий, использую щ их м етоды ам плиф икации нуклеиновы х кислот при работе с м атериалом , содерж ащ им м икроорганизм ы I-IV групп патогенности». 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовы е резиновы е перчатки. 4.5. К аж дое рабочее место долж но бы ть снабж ено собственны м набором пипеток переменного объем а, необходим ы м и вспом огательны м и м атериалами и оборудованием. Запрещ ается их перем ещ ение меж ду рабочим и местами. --- стр. 3 --- 4.6. Д ля проведения реакции ам плиф икации с детекцией продуктов П Ц Р в реж им е реального времени необходим о использовать только одноразовы е наконечники с фильтром для пипеток. 4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении разных образцов. 4.8. После окончания работ для предотвращ ения контам инации рабочие поверхности лам инарны х боксов и лабораторны х столов следует подвергнуть действию бактерицидны х УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать реглам ентированны м и санитарными правилами дезинф ицирую щ им и средствами (таким и, как: 0,2% раствор Д П -2Т ; 3% раствор хлорамина; 1-3% раствор «Диабак»; 0,5% раствор «Л изаф ин»; 0,5-1% раствор «М истраль»). 4.9. Все использованны е одноразовы е м атериалы подвергать обработке дезинф ицирую щ им и средствам и с последую щ ей утилизацией. 5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы - лам инарны й бокс 2 класса биологической защ иты типа БА В п-01-«Л ам инар-с»; - холодильник бы товой, поддерж иваю щ ий тем пературу 2-8 °С; -те р м о щ е й к е р (наприм ер, TS-100, Biosan, Л атвия); - отсасы ватель м едицинский (наприм ер, В-40 (В И С М А -П Л А Н А Р)); - пипетки полуавтом атические (дозаторы м еханические) одноканальны е с переменным объём ом, со сменны ми наконечникам и (наприм ер, ф ирм а Biohit, Ф инляндия); - перчатки м едицинские одноразовы е нестерильны е неопудренны е латексны е или неопреновы е (перчатки «N eoTouch», ф ирм а A nsell H ealth care, Германия); - одноразовы е наконечники для пипеток с защ итны м фильтром /аэрозольны м барьером/ (ф ирм а FinnTip, Ф инляндия); - одноразовы е наконечники для пипеток (наприм ер, ф ирм ы FinnTip, Ф инляндия); - одноразовы е полипропиленовы е пробирки на 2 мл (наприм ер, ф ирмы SSI, кат. № 2340, СШ А ); - встряхиватель для пробирок («B io-V ortex V-1 plus», ф ирм а BioSan, Л атвия); - м агнитны й ш татив для м икропробирок (ЗА О «В ектор-Бест», кат.№ Е-9291); - контейнер с дезинф ицирую щ им раствором («К онтейнер для сбора острого инструм ентария - Е К -01», ф ирм а К М -П роект, Россия). --- стр. 4 --- 6.1. Подготовка сыворотки и плазмы крови В течение 6 часов после взятия крови следует отобрать плазму или сы воротку в отдельную пробирку. Транспорт ироват ь и хранит ь образцы при т ем перат уре от 2 до 8 °С не более 3 суток; при т ем перат уре м инус 18-60 °С до I месяца. О бразцы сы вороток или плазмы крови перед использованием необходимо отцентриф угировать при 13000 об/мин в течение 5 мин при тем пературе от 18 до 25°С. В ним ание! Н е допускает ся прим енение для анализа образцов гепаринизированной плазмы. 6.2. Подготовка соскобов эпителиальных клеток И сследуем ы й материал (соскоб эпителиальны х клеток со слизистой цервикального канала, уретры , влагалищ а и др.), забранны й с пом ощ ью одноразовы х стерильны х зондов, перенести в пробирку с транспортны м раствором (производства ЗАО «Вектор-Бест»). Т щ ательно перем ещ ать, остатки ж идкости на зонде отж ать о стенки пробирки, зонд извлечь (вы бросить в контейнер с дезинф ицирую щ им раствором ), пробирку плотно закрыть. ^ К оротким центриф угированием сбросить капли со стенок пробирок, содерж ащ их соскобы эпителиальны х клеток со слизистой цервикального канала, уретры, влагалищ а. j Транспорт ироват ь и хранит ь образцы при т ем перат уре от 18 до 25 °С до 2 суток; при т ем перат уре от 2 до 8 °С не более 2 недель; при т ем перат уре м инус 18-60 °С до 2 месяцев. 6.3. Подготовка мочи П ервую порцию утренней мочи собрать в чисты й ф лакон с плотной кры щ кой 1,5- 2,0 мл мочи отобрать в пробирку, центриф угировать при 3000 об/мин в течение 3 мин. С упернатант удалить практически полностью , не задевая осадок. П олученны й образец использовать для вьщ еления ДН К. Транспорт ироват ь и хранит ь образцы клет очного осадка м очи при т ем перат уре м инус 20 °С в т ечение 2 недель, при т ем перат уре от 2 до 8 °С не более 1 суток, при т ем перат уре от 18 до 25 °С не более 2 часов. 6.4. Подготовка компонентов набора 6.4.1. П еред началом работы необходим о достать набор из холодильника и вы держ ать при тем пературе от 18 до 25°С не менее 30 минут. 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 4 --- стр. 5 --- 6.4.2. Д остать из набора для П Ц Р серии « Р е а л Б е с т» ф лакон с полож ительны м контрольны м образцом (П КО ). 6.4.3. О трицательны й контрольны й образец (О КО ) готов к применению . После вскры тия ф лакона хранить при тем пературе от 2 до 8 °С не более 1 мес. 6.4.4. П еред началом работы прогреть лизирую щ ий раствор при 50-60°С до растворения осадка, перемеш ать. 6.4.5. П ерем еш ать на вортексе содерж им ое пробирки с сорбентом до состояния гом огенной суспензии и во ф лакон с лизирую щ им раствором добавить 260 мкл суспензии сорбента. Тщ ательно перемеш ать. 6.4.6. Во ф лакон с внутренним контрольны м образцом (ВКО ) добавить 1,0 мл раствора для восстановления контрольны х образцов (РВК ), аккуратно перемеш ать, вы держ ать 15 мин при тем пературе (18-25) °С, после чего вновь тщ ательно перемеш ать. 6.4.7. Во ф лакон с лизирую щ им раствором и сорбентом добавить 750 мкл раствора ВКО. Т щ ательно перемеш ать. 7. О Б Р А Б О Т К А К Л И Н И Ч Е С К И Х О Б Р А З Ц О В (В Ы Д Е Л Е Н И Е Д Н К ) 7.1. О тобрать и подписать необходим ое для работы количество пробирок объём ом 2 мл (по количеству исследуем ы х образцов, вклю чая полож ительны й и отрицательны й контроли). У становить их в пластиковы й вклады ш от м агнитного ш татива. 7.2. В пробирку отрицательного контроля вьщ еления внести 100 мкл ОКО. 7.3. В пробирку положительного контроля вьщеления внести 70 мкл ОКО и 30 мкл положительного контрольного образца (ПКО) (является компонентом набора на ПЦР). 7.4. В остальные пробирки пипеткой с отдельными наконечниками внести по 100 мкл анализируем ы х образцов в соответствии с м аркировкой пробирок. 7.5. В каж дую пробирку добавить по 300 мкл лизирую щ его раствора с сорбентом и ВКО. П ерем еш ать содерж им ое пробирок на вортексе в течение 10-15 сек. В ы держ ать в терм ош ейкере при 65°С с частотой вращ ения 1300 об/мин в течение 5 мин. Коротким центриф угированием сбросить капли со стенок пробирок. 7.6. В каж дую пробирку с анализируем ы м и образцам и внести по 400 мкл осадителя НК. 7.7. П ерем ещ ать содерж им ое пробирок на вортексе в течение 10-15 сек. Ц ентриф угировать при 13000 об/мин при тем пературе (18-25) °С в течение 5 мин. --- стр. 6 --- 7.8. Не взбалты вая осадок, установить пробирки в м агнитны й ш татив. Из каж дой пробирки пипеткой (или отсасы вателем ) с отдельны м наконечником отобрать надосадочную ж идкость, не задевая осадок. 7.9. В каж дую пробирку к осадку добавить 500 мкл раствора для отм ы вки № 1. П ерем еш ать содерж им ое пробирок на вортексе в течение 10-15 сек. Ц ентрифугировать при 13000 об/м ин на м икроцентриф уге 2 мин. 7.10. Не взбалты вая осадок, установить пробирки в м агнитны й ш татив. Из каждой пробирки отобрать надосадочную ж идкость пипеткой (или отсасы вателем ) с отдельным наконечником, не задевая осадок. 7.11. В каждую пробирку к осадку добавить по 300 мкл раствора для отмывки № 2. П ерем еш ать содерж им ое пробирок на вортексе в течение 10-15 сек. Ц ентрифугировать при 13000 об/м ин на м икроцентриф уге 2 мин. 7.12. Н е взбалты вая осадок, установить пробирки в м агнитны й ш татив. Из каждой пробирки отобрать надосадочную ж идкость пипеткой (или отсасы вателем ) с отдельны м наконечником , не задевая осадок. I 7.13. В ы суш ить осадки в откры ты х пробирках при тем пературе (18-25) °С в течение 2-3 мин. 7.14. В каж дую пробирку к осадку добавить по 600 мкл элю ирую ш его раствора. Тщ ательно перем еш ать на вортексе, ресуспендируя м агнитны й осадок. И нкубировать в терм ош ейкере с частотой враш ения 1300 об/м ин при 65°С в течение 5 мин. Ц ентриф угировать на м икроцентриф уге при 13000 об/м ин 1 мин. П робы готовы к постановке П Ц Р-анализа. В ним ание! В ы деленная Д Н К м ож ет хранит ься при т ем перат уре от 2 до 8 °С не более 24 часов. 8. У С Л О В И Я Т РА Н С П О РТ И Р О В А Н И Я И Х РА Н ЕН И Я Н А БО РА 8.1. Т ранспортирование наборов долж но проводиться при тем пературе от 2 до 8 °С. Д опускается транспортирование наборов при тем пературе до 25 °С не более 10 суток. Зам ораж ивание наборов не допускается. 8.2. Х ранение наборов в упаковке предприятия-изготовителя долж но производиться при тем пературе от 2 до 8 °С в течение всего срока годности. Зам ораж ивание наборов не допускается. 8.3. Запреш ается использовать ком поненты из наборов разны х серий. --- стр. 7 --- 8.4. Д ля получения достоверны х результатов необходим о строгое соблю дение инструкции по прим енению набора. 9. Г А Р А Н Т И И И З Г О Т О В И Т Е Л Я П редприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора требованиям технических условий при соблю дении условий транспортирования, хранения и применения, установленны х техническими условиям и и настоящ ей инструкцией по применению . Срок годности набора - 12 м есяцев со дня выпуска. По вопросам , касаю щ им ся качества набора «РеалБест Д Н К -экстракция 2», следует обращ аться в ЗА О « В е к т о р -Б е с т» по адресу: 630128, г. Н овоси би рск-128, а/я 102, тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./ф акс (383), 332-94-47, 332-94-44. E-mail: plkobtk& ,vector-best, ru Н ачальник отделения ЗА О «В ектор-Бест» А.В. Т рухина Д иректор по производству ЗА О «В ектор-Бест» В.К. Ткачев «С О ГЛ А С О В А Н О » зав. каф едрой клинической лабораторной д и а гн (^ ГБО У Д П О РМ М инздравсоцр: |«акив«иГ\* е'Ц " К И 4 « П Л 0 « И 0 '0 « М ю ш р м н и исоцилш о-орл,,,,, Д.М.Н., проф ессор в .в . Долгов Подпись удостоверяю: Специалист Подпис