Набор реагентов для выявления аллеля HLA-B*27 человека методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест-Генетика HLA-B*27) по ТУ 21.20.23-045-23548172-2018 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
^неральный директор
)-Бест»
_М.Д. Хусаинов
2019 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для выявления аллеля HLA-B*27 человека
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
«РеалБест-Генетика HLA-B*27»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления аллеля HLA-B*27 человека методом полимеразной
цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест-Генетика НТА-В*27» (далее по тек
сту - набор) предназначен для выявления аллеля *27 локуса В главного комплекса гистосов
местимости человека (HLA-B*27), ассоциированного с риском развития некоторых аутоим
мунных заболеваний (серонегативных спондилоартритов), методом полимеразной цепной
реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме ре
ального времени.
Выделение ДНК из клинических образцов (цельной крови) осуществляется с помощью
наборов «РеалБест-Генетика ДНК-экспресс» или «РеалБест экстракция 100» (возможно ис
пользование других наборов, разрешенных в установленном порядке к обращению в РФ,
предназначенных для выделения ДНК из образцов цельной крови).
Набор применяется с регистрирующими амплификаторами: «СРХ96» (фирма «Bio-
Rad», США) или «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия), зарегистрированными в
установленном порядке на территории РФ.
Набор реагентов рассчитан на проведение анализа 48 образцов, включая контрольные
образцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранных фраг
ментов ДНК человека - одного, специфичного для аллеля HLA-B*27, и другого, соответ
ствующего аутосомному гену HMBS, общему для всех образцов ДНК человека.
Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная денату-
Инструкция составлена сотрудниксши АО «Вектор-Бест»: директором
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В.
--- стр. 2 ---
рация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК-
матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой. В основе
регистрации процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом
цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию
специфичного для данного участка ДНК человека гибридизационного ДНК-зонда, который в
ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную спе
цифичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, а на 3'-
конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В
ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'-нуклеазной активности
Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение красителя и
гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуо
ресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества обра
зовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяет
ся исходным количеством специфичной ДНК в образце.
Амплификация участка гена HMBS должна детектироваться в каждом образце, что
служит контролем присутствия в смеси достаточного количества ДНК человека и контролем
правильности проведённых процедур пробоподготовки. Амплификация участка гена HLA-B
детектируется только в случае присутствия в генотипе данного индивида аллеля HLA-B*27 и
не детектируется в случае его отсутствия, независимо от наличия в генотипе других аллелей
локуса HLA-B.
2.2. Состав набора:
Компонент набора (сокращение)
Описание.
Количество
Контрольный образец (КО) 1 пробирка.
Бесцветная жидкость, содержит натрия азид (0,05%) 1 мл
Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС)
Лиофилизированная
48 пробирок
Элюирующий раствор «Генетика 2» 2 фл..
Бесцветная жидкость по 12 мл
Оптическая пленка 1 лист
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность выявления аллеля HLA-B*27 определяется по стандартному образ
цу предприятия (СОН 05-2-788) и составляет 100 %.
3.2. В КО должна выявляться ДНК маркерных последовательностей аллеля HLA-B*27
и ДНК человека (ген HMBS).
3.3. Диагностическая специфичность выявления аллеля HLA-B*27: клинические испы
тания, проведенные на 220 образцах, показали 100% специфичность (интервал 98,7 % - 100
2
--- стр. 3 ---
%, -с доверительной вероятностью 90 %);
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных
болезней».
4.3. Некоторые компоненты (КО) содержат натрия азид в концентрации, указанной в
п. 2.2 «Состав набора».
4.4. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы
вьщеления ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабора
торий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом,
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.5. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.6. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором дозаторов
переменного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.7. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для
дозаторов
4.8. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз
ных образцов.
4.9. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все рабочие
поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп в течение 1
часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфицируюпщми сред
ствами (такими, как: 0,8% раствор «Дезомакс-Иннова», 0,2% раствор «ДП-2Т»; 1% раствор
«Диабак»; 0,5%раствор «Лизафин»; 1%раствор «Мистраль»; 1%>раствор «Велтолен»),
4.10. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици
рующими средствами с последующей утилизацией (см. МУ 287-113 «Методические указания
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского
назначения»).
4.11. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые классифи
цируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-
эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». Дезинфекцию набо
ров реагентов еледует проводить по МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции.
--- стр. 8 ---
у азиатов, при этом никаких негативных симптомов у большинства носителей HLA-B*27 не
наблюдается. Однако, частота встречаемости аллеля HLA-B*27 резко увеличивается у боль
ных анкилозирующим спондилоартритом (болезнь Бехтерева), при реактивных (вторичных)
артритах, болезни (синдроме) Рейтера, псориатическом артрите, энтеропатических артритах,
при передних эндогенных увеитах.
Точные молекулярные и патогенетические механизмы связи HLA-B27 и ассоциирован
ных с ним воспалительных заболеваний остаются недостаточно ясными. Подавляющее
большинство людей, которые являются носителями HLA-B27 антигена, здоровы, хотя риск
развития ревматоидных заболеваний выше, чем у НЬА-В27-негативных индивидов. Прояв
ления чаще встречаются у мужчин, чем у женщин. Существуют эпидемиологические, клини
ческие и экспериментальные доказательства патогенетической роли бактериальных агентов,
таких как Chlamidia trachomatis и грамотрицательных бактерий {Klebsiella, Salmonella,
Yersinia, Shigella и Campylobacter). Микробные антигены могут провоцировать развитие
аутоиммунных процессов через механизм молекулярной мимикрии между HLA-B27 антиге
ном и липополисахаридом бактериальной клетки. Ввиду повышенного риска развития вос
палительных болезней суставов носителям аллеля HLA-B27 следует особо уделять внимание
профилактике и своевременному лечению бактериальных кишечных инфекций и инфекций
мочеполового тракта (особенно хламидиоза).
Более подробно ознакомиться с диагностической значимостью выявления аллеля HLA-
В*27 человека можно в литературе:
1. Хаитов Р.М., Алексеев Л.П. Геномика HLA: новые возможности молекулярной гене
тики человека в диагностике и терапии // Молек. Мед. - 2003. - № 1. - С. 17-31.
2. Эрдес Ш., Гусева И.А., Беневоленская Л.И. Взаимосвязь анкилозирующего спонди-
лоартрита и HLA-B27 в некоторых этнических группах России // Тер. архив. - 2001. - № 1. -
С. 27-31.
3. Эрдес Ш., Гусев И.А., Крьшов М.Ю., Беневоленская Л.И. Спондилоартропатия и
субтипы HLA-B27 в некоторых популяциях севера России // Тер. арх. - 1997. - № 5. - с. 41-43.
4. Bowness Р. HLA В27 in health and disease: a double-edged sword? // RJieumatology-
(Oxford). - 2002. - Vol. 41. - № 8. - P. 857-868.
5. Colmegna I., Cuchacovich R., Espinoza LR. HLA-B27-associated reactive arthritis: patho
genetic and clinical considerations. // Clin. Microbiol. Rev. - 2004. - V. 17. - P. 348 - 369.
6. KJian M.A. HLA-B27 polymorphism and association with disease // J. Rheumatol. - 2000. -
V. 27.-P. 1110-1114.
--- стр. 9 ---
9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 26 °С не
более 10 суток.
9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться
при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной ре
гистрацией температуры.
9.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение
наборов по истечении срока их годности.
9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение данной ин
струкции по применению набора.
10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения,
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест-Генетика HLA-B*27», следует
обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, а/я 492,
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47, 332-94-44.
E-mail: plkobtk&yector-best. ru
Начальник отделения
производства ПЦР-наборов
АО «Вектор-Бест» А.В. Трухина
Директор по производству
АО «Вектор-Бест»
Директор направления «Клинические исследо;
ООО «Независимая лаборатория ИНВИТРО»
м.п.
в.к. Ткачев
Я.Э. Новикова
--- стр. 10 ---
Прошито в количестве листов
--- стр. 11 ---
Россия, 630559, Новосибирская обл., р.п. Кольцово, Научно-производственная зона, корпус 36, к. 211, АО «Вектор-Бест»
Приемная: тел. (383)-227-60-30, vector-best.ru vbobtk@vector-
best.ruДля писем: 630117, г. Новосибирск, а/я 492
ПАСПОРТ № 3010-18
факс (383)-332-94-44 P d L i
РеалБест-Генетика HLA-B*27 fi верна
Набор реагентов для выявления аллеля HLA-B'27 человека методом полимераз»б^цщцой
________________________реакции в режиме реального времени _____
ТУ 21.20.23-045-23548172-2018
Хранить при температуре (2-8)°С. Транспортировать при
Дата изготовления 2018-09-20
Дата выдачи паспорта 2018-09-20
температуре (2-8)°С. Допускается транспортирование при
температуре до 26°С не более 10 суток.
Срок годности наборов до 2019-09-20
Состав набора Характеристика и нормы Рез-ты контроля
Контрольный образец (КО), серия 1 Бесцветная жидкость, 1 пробирка, 1,0 мл Бесцветная жидкость, 1 пробирка,
1,0 мл (соответствует)
Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), серия 1 Аморфная масса белого цвета, 48 пробирок Аморфная масса белого цвета, 48
пробирок (соответствует)
Элюирующий раствор «Генетика 2», серия 1 Бесцветная жидкость, 2 флакона по 12,0 мл Бесцветная жидкость, 2 флакона по
12,0 мл (соответствует)
Оптическая пленка Прозрачная бесцветная плёнка на
полимерной основе, 1 лист
Прозрачная бесцветная плёнка на
полимерной основе, 1 лист
(соответствует)
Технические характеристики
Выявляемость маркерных последовательностей в
контрольном образце(КО)
Наличие ДНК маркерных
последовательностей аллеля HLA-B*27 и
ДНК человека (ген HMBS)
Соответствует
Специфичность выявления аллеля HLA-B*27 (СОП 05-2-
788), %
100 100 (соответствует)
В комплект поставки входят: набор реагентов, инструкция по применению, паспорт.
Заключение: Показатели качества, комплектность, упаковка и маркировка соответствуют требованиям
ТУ 21.20.23-045-23548172-2018
Начальник ОБТК В.В. ШАПРОВ
--- стр. 12 ---
Россия, 630559, Новосибирская обл., р.п. Кольцово, Научно-производственная зона, корпус 36, к. 211, АО «Вектор-Бест»
Для писем: 630117, г. Новосибирск, а/я 492 Приемная: тел_ (383)-227-60-30, “ ^wWw^ector-best.ru vbobtk@vector-
________L ____ _____ факс (383)-332-94-44 ,, рс. Гх best.ru
ПАСПОРТ № 3015-18 ^
РеалБест-Генетика HLA-B*27
Набор реагентов для выявления аллеля HLA-B*27 человека методом полимеразнощ^вщц^
реакции в режиме реального времени
ТУ 21.20.23-045-23548172-2018 Номер cepии^^^ V
____. . . . о 'А . л - / Г
Дата изготовления 2018-09-21
Дата выдачи паспорта 2018-09-21
Хранить при температуре (2-8)°С. Транспортировать при
температуре (2-8)°С. Допускается транспортирование при
температуре до 26°С не более 10 суток.
Срок годности наборов до 2019-09-21
Состав набора Характеристика и нормы Рез-ты контроля
Контрольный образец (КО), серия 2 Бесцветная жидкость, 1 пробирка, 1,0 мл Бесцветная жидкость, 1 пробирка,
1,0 мл (соответствует)
Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), серия 2 Аморфная масса белого цвета, 48 пробирок Аморфная масса белого цвета, 48
пробирок (соответствует)
Бесцветная жидкость, 2 флакона по 12,0 мл Бесцветная жидкость, 2 флакона по
12,0 мл (соответствует)
Оптическая пленка Прозрачная бесцветная плёнка на
полимерной основе, 1 лист
Прозрачная бесцветная плёнка на
полимерной основе, 1 лист
(соответствует)
Технические характеристики
Выявляемость маркерных последовательностей в
контрольном образце(КО)
Наличие ДНК маркерных
последовательностей аллеля HLA-B*27 и
ДНК человека (ген HMBS)
Соответствует
Специфичность выявления аллеля HLA-B*27 (ООП 05-2-
788), %
100 100 (соответствует)
В комплект поставки входят: набор реагентов, инструкция по применению, паспорт.
Заключение: Показатели качества, комплектность, упаковка и маркировка соответствуют требованиям
ТУ 21.20.23-045-23548172-2018
Начальник ОБТК В.В. ШАПРОВ