Набор реагентов для дифференцирования микобактерий туберкулеза (M.tuberculosis, M.bovis и M.bovis BCG) в клиническом материале и культурах микроорганизмов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией «АмплиСенс® MTC-diff-FL» по ТУ 9398-180-01897593-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖ ДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от No
Директор Федерального
бюджетного учреждения науки
«Центральный научно-
исследовательский институт
эпидемиологии» Федеральной
службы ло надзору в сфере
защиты прав потребителей и
благополучия человека
Покровский
2011 г.
У Т В Е Р Ж Д А Ю
ИНСТРУКЦИЯ
п о п р и м е н е н и ю н а б о р а р е а г е н т о в
д л я д и ф ф е р е н ц и р о в а н и я м и к о б а к т е р и й т у б е р к у л е з а
{ М . t u b e r c u l o s i s , M . b o v i s и M . b o v i s B C G ) в к л и н и ч е с к о м
м а т е р и а л е и к у л ь т у р а х м и к р о о р г а н и з м о в м е т о д о м
п о л и м е р а з н о й ц е п н о й р е а к ц и и ( П Ц Р ) с г и б р и д и з а ц и о н н о -
ф л у о р е с ц е н т н о й д е т е к ц и е й
« А м п л и С ен с® М ГС -diff-FL »
А м п л и С е н с®
ш1
Федеральное бюджетное учреждение науки
«Центральный научно-исследовательский
институт эпидемиологии»,
Российская Федерация, 111123,
город Москва, улица Новогиреевская, дом За IVD
--- стр. 2 ---
СПИСОК СОКРАЩ ЕНИЙ.....................................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ........................................................................................................................................... 3
ПРИНЦИП М ЕТОДА...............................................................................................................................3
ФОРМАТЫ И ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕА ГЕН ТО В .................................................... 4
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ........................................................................................ 5
МЕРЫ П РЕДО СТО РО Ж Н О СТИ .......................................................................................................6
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ.................................................... 7
ФОРМАТ FRT............................................................................................................................................ 9
СОСТАВ...................................................................................................................................................... 9
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ........................................................................................ 9
ПРОВЕДЕНИЕ АМПЛИФИКАЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО
В РЕМ ЕН И »................................................................................................................................................ 9
А. Подготовка пробирок д ля ам п ли ф икац ии ......................................................................... 9
Б. П роведение ам плиф икации с детекцией в реж им е «реального врем ени».... 10
АНАЛИЗ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУ Л ЬТА ТО В ......................................................................12
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРА Н ЕН И Я
....................18
СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМ Ы Е В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ............................................19
О ГЛАВЛЕН И Е
--- стр. 3 ---
с п и с о к СОКРАЩ ЕНИЙ
В настоящ ей инструкции прим еняю тся следую щ ие сокращ ения и обозначения:
БАЛ - брон хо-альвеолярн ы й л ав аж
ВКО - внутренний контрольный о б р азец д л я наборов с
гибридизационно-ф луоресцентной детекцией
К+ - полож ительны й контроль ПЦР
К- - отрицательны й контроль ПЦР
МВТ (МТС) - микобактерии туберкулеза {Mycobacterium tuberculosis
complex) _________________________________________________
м.т. - микробные тел а
ОКО - отрицательны й контрольный о б р азец
ПВБ - пром ы вны е воды бронхов
ПКО - полож ительны й контрольный о б р азец
ПЦР - п о л и м еразн ая цепная реакция
ФВУН ЦНИИ
Эпидемиологии
Р осп отребн адзора
- ф е д е р а л ь н о е бю дж етное учреж дение науки «Ц ентральный
н аучно-исследовательский институт эпидемиологии»
Ф едеральн ой службы по н адзору в с ф е р е защ иты прав
п отреби телей и благополучия ч ел овека______________________
FRT - ф лу о р есц ен тн ая детекция в реж им е «реального времени»
PBS - ф о сф атн о -со л ево й бу ф ер
UDG - урацил-ДН К-гликозилаза
НАЗНАЧЕНИЕ
Н абор реаген тов «А мплиС енс® MTC-diff-FL» предназначен для
ди ф ф ер ен ц и р о ван и я видов микобактерий туберкулеза (МВТ) - Mycobacterium
tuberculosis com plex (МТС) - человеческого {M.tuberculosis) и бы чьего {M.bovis), а
также вакцинного ш там м а {M.bovis BCG) - в клиническом м атер и ал е и культурах
микроорганизмов м етодом ПЦР с гибридизационно-ф луоресцентной детекцией
продуктов ам плиф икации. Д ля ан ал и за сл ед у ет использовать образцы ДНК,
экстрагированной из клинического м атер и ал а или культур микроорганизмов, в
которых на этап е обнаруж ения и/или количественного оп р едел ен и я Mycobacterium
tuberculosis com plex бы ли получены полож ительны е результаты .
ВНИМАНИЕ! Р езул ьтаты П Ц Р-исследования учитываю тся в комплексной
диагностике за б о л е в а н и я ^
ПРИНЦИП МЕТОДА
Д и ф ф ер ен ц и р о ван и е ДНК микобактерий туберкулеза, экстрагированной из
образц ов клинического м а те р и а л а или культур микроорганизмов, проводится
методом полим еразной цепной реакции (ПЦР) в ф о р м а т е «мультипрайм» с
одноврем енной ам п ли ф икац ией четы рех ф рагм ен тов ДНК, три из которых
являю тся специф ическим и миш енями, детерм инирую щ им и один из видов
^ в с о о т в е т с т в и и с Д и р е к т и в о й Е в р о п е й с к о г о С о ю з а 9 8 / 7 9 / Е С ,
--- стр. 4 ---
Mycobacterium tuberculosis complex: M.tuberculosis, M.bovis или M.bovis BCG,
четвертая - внутренним контрольным образц ом (ВКО). В составе реакционной
смеси присутствуют ф луоресц ен тн о-м ечен ы е олигонуклеотидны е зонды, которые
гибридизуются с ком плем ентарны м участком ам плиф ицируем ой ДНК-мишени, в
результате чего происходит н арастан и е интенсивности ф луоресценции.
Г ибридизационно-ф луоресцентная детекция сигналов продуктов амплификации
осущ ествляется н еп осредственн о в процессе ПЦР с помощ ью ам плиф икатора в
реж име «реальн ого врем ени».
Гибридизационно-ф луоресцентная детекция ДНК микобактерий человеческого
вида {М.tuberculosis) проводится по каналу FAM^, ДНК микобактерий бычьего вида
{M.bovis или M.bovis BCG) - по каналу JOE^, только вакцинного ш тамма {M.bovis
BCG) - по каналу ROX^, ВКО - по каналу Су5^.
«ПЦР-комплект», входящ ий в состав данного н аб ора реагентов, содержит
ф ер м ен т UDG д л я сниж ения риска возможной контаминации продуктами
амплиф икации П Ц Р-лаборатории.
ФОРМАТЫ И Ф О РМ Ы ВЫПУСКА НА БО РА РЕАГЕНТОВ
Н абор р е а г е н т о в в ы п у с к а е т с я в 1 ф о р м а т е
Ф о р м ат FRT
Н абор реагентов вы пускается в 2 ф орм ах комплектации:
Ф о рм а 1 вкпю чает комплект реаген тов «ПЦР-комплект» вариан т FRT.
Ф о рм а 2 вклю чает наборы реаген тов оптом, р асф асо в ан н ы е по отдельным
реагентам , с маркировкой реаген тов на их оптовой ф асовке.
Форма комплектации 1 предназначена д л я п роведен ия ам плиф икации ДНК видов
Mycobacterium tuberculosis com plex с гибридизационно-ф луоресцентной детекцией
в реж име «реальн ого врем ени».
Ф орма комплектации 2 п редн азн ач ен а д л я производственны х целей для
последую щ ей маркировки на язы ке заказчика и комплектации по наборам.
ВНИМАНИЕ! Ф орма комплектации 2 используется только в соответствии с
реглам ентом , утверж денны м ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора.
ВНИМАНИЕ! Н абор реаген тов предназначен д л я работы с ранее
экстрагированной ДНК, полученной при использовании комплектов реагентов
«ДНК-сорб-В», «РИ БО -преп» или «ДНК-сорб-С» д л я экстракции ДНК/РНК из
исследуем ы х о б р азц о в разны х видов м атери ал ов производства ФБУН ЦНИИ
Или аналогичному по названию каналу детекции в зависимости от используемого прибора.
--- стр. 5 ---
Эпидемиологии Роспотребнадзора.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
А н ал и ти ч е с к а я ч у в с т в и т е л ь н о с т ь
Вид
клинического
материала
Комплект
д л я
вы д ел ен и я
ДНК
А налитическая чувствительность, м.т./мл
«АмплиСенс*'^
МГС-FL»
АмплиСенс'^
МГС-diff-FL»
M.tuberculosis
(штамм Н37 Ra)
«АмплиСенс"’ *
МГС-FL»
АмплиСенс'^’
МГС-diff-FL»
M.bovis BCG
(штамм M.bovis BCG)
PBS-буфер 5x10"
Моча
Мокрота ,
БАЛ/ПВБ
«РИБО-
преп»
1x10"
5x10^
1x10" 1x10"
5x10" 1x10"
1x10^ 1x10"
1x10"
1x10"
1x10"
PBS-буфер 5x10" 1x10" 1x10" 1x10"
Мокрота ,
БАЛ/ПВБ
«ДНК-сорб-
В» 5x10^ 5x10" 1x10" 5x10"
Моча 1x10" 5x10" 1x10" 5x10"
10%
гомогенат
разных видов
тканей
«ДНК-сорб-
С» 1x10" 1x10" 5x10" 1x10"
А н ал и ти ч е с к а я с п е ц и ф и ч н о с т ь
А налитическая специф ичность оц ен и вал ась как при тестировании штаммов
микобактерий входящ их в группу M.tuberculosis complex, так и нетуберкулезных
микобактерий, а такж е ш там м ов микроорганизмов, вы зываю щ их заболеван и я
сходных локализаций.
Для оп ред ел ен и я аналитической специф ичности на ш тамм ах различных
микроорганизмов (в концентрации не м ен ее чем 5x10® м.т./мл), тестировали
116 контрольных ш там м ов или клинических изолятов. Из них 5 входили в состав
M.tuberculosis complex, 31 явл ял и сь нетуберкулезны ми микобактериями (НТМБ),
80 принадлеж али к другим родам и сем ей ствам . С пециф ичность тест-системы
оц ен и валась по отсутствию полож ительного р езультата амплиф икации ДНК
бактерий, не принадлеж ащ их к M.tuberculosis complex, а также по наличию
положительного р езу л ьтата по соответствую щ ем у каналу детекции для
ди ф ф ер ен ц и р о ван и я видов микобактерий туберкулезного комплекса.
" Концентрация в 1 мл мокроты, обработанной реагентом для предобработки слизистого
материала «МУКОЛИЗИН».
--- стр. 6 ---
П еречень реф ер ен тн ы х видов:
- М икобактерии. прин адлеж ащ и е Mycobacterium tuberculosis complex:
М.tuberculosis, M.bovis, M.bovis BCG-1v\ др.
- Н етуберкулезны е микобактерии: М.avium, M.paratuberculosis, M.xenopi,
M.gordonae, M.ulcerans, M.phlei, M.intracellulare, M.kansasii, M.fortuitum.
- Бактерии, прин адлеж ащ и е к другим родам и сем ействам : Brucella,
Campylobacter, Chlamydophila, Cryptococuss, Enterobacter, Enterococcus, E.coli,
Klebsiella, Listeria, Moraxella, Neisseria, Pantoea, Pasteurella, Proteus,
Pseudom onas, Salmonella, Shigella, Staphylococcus, Streptococcus.
Результаты тестирован ия показали 100% специф ичность.
МЕРЫ П РЕДОСТОРОЖ НОСТИ
Р аб ота долж на проводиться в лаборатори и , вы полняю щ ей молекулярно
биологические (ПЦР) и сследован и я клинического м атер и ал а на наличие
возбудителей инф екционны х болезн ей , с соблю дением санитарно-эпидемических
правил СП 1.3.2322-08 «Б езоп асн ость работы с микроорганизмами III-IV групп
патогенности (опасности) и возбудителям и паразитарны х болезн ей», СанПиН
2.1.7.2790-10 «С анитарно-эпидем иологические требован и я к обращ ению с
медицинскими отходам и» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «О рганизация
работы л аб оратори й , использую щ их методы ам плиф икации нуклеиновых кислот
при работе с м атери ал ом , содерж ащ им микроорганизмы I-IV групп патогенности».
При р аб о те в л аб о р ато р и ях противотуберкулезны х учреждений следует
дополнительно руководствоваться требован и ям и П риказа № 109 от 21 марта
2003 г. «О соверщ ен ствован и и противотуберкулезны х мероприятий в Российской
Ф едерации» (П рилож ение № 11).
При работе всегда следует выполнять следую щ ие требования:
- С ледует рассм атр и в ать и сслед уем ы е образцы как инфекционно-опасные,
организовы вать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08
«Б езоп асн ость работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности
(опасности) и возбудителям и паразитарны х болезн ей».
- Убирать и д ези н ф и ц и р о в ать разли ты е образцы или реактивы, используя
дезинф ицирую щ ие ср ед ств а в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность
работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и
возбудителям и паразитарны х болезн ей».
- У далять н еи сп ользован н ы е реактивы в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10