Набор реагентов для выявления ДНК возбудителей инфекций, передающихся половым путём (Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Gardnerella vaginalis, цитомегаловируса, вируса простого герпеса 1 и 2 типов, вирусов папилломы человека 16 и 18 типов), методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ПЦР-12 ИППП) по ТУ № 9398-262-23548172-2011 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2012/13131 от 28.02.2012 · класс риска 2а

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Множественные инфекции передающиеся половым путем нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 4 контракта, медианная цена за единицу 64 323 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 2 ---
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного 
фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, 
отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклео- 
тидных последовательностей с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуорес­
ценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благода­
ря использованию специфичных для данных участков ДНК возбудителей инфекций, пе­
редающихся половым путём, гибридизационных ДНК-зондов, которые в ходе реакции 
связываются с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5’  конце флуоресцентный краситель, а на 3’  конце -  га­
ситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе 
полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’-3’  нуклеазной активности 
Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’  конца и происходит разобщение красителя 
и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала 
флуоресценции.
При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образо­
вавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определя­
ется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в 
образце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемы­
ми биопробами.
Учет эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
возбудителей инфекций, передающихся половым путём, из клинических проб совместно 
с предварительно внесенным внутренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
-  положительный контрольный образец универсальный (ПКО) -  2 пробирки (по 1,0 мл);
-  готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная -  96 стрипов по 6 
пробирок (каждый стрип содержит все исследуемые маркёры).
Набор дополнительно комплектуется оптической плёнкой или стрипированными 
крышками.
2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А  Н А Б О Р А


--- стр. 3 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  выявление 100 копий ДНК каждой из 12 инфекций, передаю­
щихся половым путём {Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis, My­
coplasma genitalium, Trichomonas vaginalis. Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Gardne-  
rella vaginalis,  цитомегаловируса (ЦМВ); вируса простого герпеса 1  и 2 типов (ВПГ 1, 2); 
вирусов папилломы человека 16 и 18 типов (ВПЧ 16/18) в стандартных образцах предпри­
ятия -  100%.
3.2. Специфичность выявления ДНК каждой из 12 инфекций, передающихся половым 
путём {Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis. Mycoplasma genita­
lium, Trichomonas vaginalis. Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Gardnerella vaginalis,  ци­
томегаловируса (ЦМВ), вируса простого герпеса 1  и 2 типов (В П П , 2), вирусов папилломы 
человека 16 и 18 типов (ВПЧ 16/18) по стандартной панели предприятия отрицательных 
ДНК-экстрактов -  100%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
В н и м а н и е ! Н есо б лю д ен и е п р и в е д ё н н ы х  н и ж е  т р еб о ва н и й  м о ж ет  п р и вест и  к  ис­
ка ж ен и ю  р е зу ль т а т о в П Ц Р .
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (ГОСТ Р 51609-2000).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микро­
организмами 11 1 -1 V  фупп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла­
бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа­
лом, содержащим микроорганизмы 1-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме реального 
времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром дня пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении 
разных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»;
3


--- стр. 4 ---
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»),
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени:
«iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО 
ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
-  ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» 
фирмы СП «РТС», Россия);
-  холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8°С;
-  микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия);
-  пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен­
ным объемом, со сменными наконечниками (фирма Biohit, Финляндия);
-  перчатки медицинские одноразовые нестерильные неопудренные латексные или не- 
опреновые (перчатки «NeoTouch», фирма Ansell HealthCare, Германия);
-  одноразовые наконечники для пипеток с защитным фильтром / аэрозольным барье­
ром/ (фирма Biohit, Финляндия);
-  штативы для микропробирок вместимостью 1,5 -  2 мл и 0,2 мл (фирма Хеликон, 
Россия);
-  контейнер для сброса отходов (например, «Контейнер для сброса острого инстру­
ментария -  ЕК-01», фирма КМ-ПРОЕКТ, или аналогичный);
-  нож канцелярский.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫ Е ОБРАЗЦЫ
6.1. Подготовка анализируемых образцов.
Подготовить образцы для исследования с помощью наборов для выделения ДНК «Ре- 
алБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» или 
«РеалБест экстракция 100» в соответствии с инструкцией по применению набора.
Каждая группа образцов, проходящая через процедуру выделения ДНК, должна со­
держать положительный контрольный образец универсальный (ПКО), который является 
компонентом данного набора, и отрицательный контрольный образец (ОКО), который явля­
ется компонентом набора для выделения ДНК.
Если до проведения анализа образцы выделенной ДНК хранились в замороженном 
виде, разморозить их и выдержать не менее 30 минут при температуре от 18 до 25 °С.


--- стр. 12 ---
2. Х А РА КТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного 
фрагмента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, 
отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклео- 
тидных последовательностей с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуорес­
ценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благода­
ря использованию специфичных для данных участков ДНК возбудителей инфекций, пе­
редающихся половым путём, гибридизационных ДНК-зондов, которые в ходе реакции 
связываются с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополнительную специфичность 
метода. ДНК-зонд содержит на 5’  конце флуоресцентный краситель, а на 3’  конце -  га­
ситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе 
полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’-3’  нуклеазной активности 
Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’  конца и происходит разобщение красителя 
и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала 
флуоресценции.
При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образо­
вавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определя­
ется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Достоверность анализа контролируется по наличию положительного результата в 
образце ПКО, который подвергается процедуре выделения ДНК вместе с анализируемы­
ми биопробами.
Учет эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
возбудителей инфекций, передающихся половым путём, из клинических проб совместно 
с предварительно внесенным внутренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
-  положительный контрольный образец универсальный (ПКО) -  2 пробирки (по 1,0 мл);
-  готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная -  96 стрипов по 6 
пробирок (каждый стрип содержит все исследуемые маркёры).
Набор дополнительно комплектуется оптической плёнкой или стрипированными 
крышками.


--- стр. 13 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  выявление 100 копий ДНК каждой из 12 инфекций, передаю­
щихся половым путём {Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species, Mycoplasma hominis. My­
coplasma genitalium. Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans,  
Gardnerella vaginalis,  цитомегаловируса (ЦМВ); вируса простого герпеса 1  и 2 типов (ВПГ 1, 
2); вирусов папилломы человека 16 и 18 типов (ВПЧ 16/18) в стандартных образцах пред­
приятия -  100%.
3.2. Специфичность выявления ДНК каждой из 12 инфекций, передающихся половым 
путём {Chlamydia trachomatis, Ureaplasma species. Mycoplasma hominis, Mycoplasma  
genitalium, Trichomonas vaginalis. Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, Gardnerella  
vaginalis, цитомегаловируса (ЦМВ), вируса простого герпеса 1  и 2 типов (В П П , 2), вирусов 
папилломы человека 16 и 18 типов (ВПЧ 16/18) по стандартной панели предприятия отрица­
тельных ДНК-экстрактов -  100%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис­
кажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (ГОСТ Р 51609-2000).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микро­
организмами III-IV фупп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла­
бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа­
лом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме реального 
времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении 
разных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»;
3


--- стр. 14 ---
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»).
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени:
«iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО 
ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
-  ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» 
фирмы СП «РТС», Россия);
-  холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8°С;
-  микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия);
-  пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен­
ным объемом, со сменными наконечниками (фирма Biohit, Финляндия);
-  перчатки медицинские одноразовые нестерильные неопудренные латексные или не- 
опреновые (перчатки «NeoTouch», фирма Ansell Healthcare, Германия);
-  одноразовые наконечники для пипеток с защитным фильтром / аэрозольным барье­
ром/ (фирма Biohit, Финляндия);
-  штативы для микропробирок вместимостью 1,5 -  2 мл и 0,2 мл (фирма Хеликон, 
Россия);
-  контейнер для сброса отходов (например, «Контейнер для сброса острого инстру­
ментария -  ЕК-01», фирма КМ-ПРОЕКТ, или аналогичный);
-  нож канцелярский.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1. Подготовка анализируемых образцов.
Подготовить образцы для исследования с помощью наборов для выделения ДНК «Ре- 
алБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» или 
«РеалБест экстракция 100» в соответствии с инструкцией по применению набора.
Каждая группа образцов, проходящая через процедуру выделения ДНК, должна со­
держать положительный контрольный образец универсальный (ПКО), который является 
компонентом данного набора, и отрицательный контрольный образец (ОКО), который явля­
ется компонентом набора для выделения ДНК.
Если до проведения анализа образцы выделенной ДНК хранились в замороженном 
виде, разморозить их и выдержать не менее 30 минут при температуре от 18 до 25 °С.