Набор реагентов, калибраторов и контролей для количественного иммуноферментного определения свободного тестостерона в сыворотке и плазме крови человека "ДРГ Тестостерон свободный ИФА" по ТУ 21.20.23.110-008-29033535-2019 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 --- к тестостерону, покрывающими поверхность лунок планшета (твердая фаза). Связанный с белками тестостерон не участвует в этой реакции и удаляется во время промывки. После завершения инкубации несвязавшийся конъюгат удаляют промывкой. Образовавшиеся иммуноферментные комплексы выявляют в ходе инкубации с субстрат-раствором. Происходит окрашивание содержимого лунок в голубой цвет, который меняется на желтый при внесении стоп-раствора. Интенсивность окрашивания обратно пропорциональна концентрации свободного тестостерона в образце. Концентрацию свободного тестостерона рассчитывают по калибровочной кривой. 3. СОСТАВ НАБОРА В состав Набора входят следующие компоненты: - иммуносорбент - планшет с иммобилизованными антителами, 96 лунок - 1 шт. - калибраторы (Кло-Кл5), 1 мл - 6 фл. - контроль 1 (К1), 1 мл - 1 фл. - контроль 2 (К2), I мл - 1 фл. - конъюгат ферментный, 15 мл - 1 фл. - субстрат-раствор, 15 мл - 1 фл. - промывочный раствор, концентрат х40, 30 мл - 1фл. - стоп-раствор, 14 мл - 1 фл. Калибраторы (Кло - КЛ5) и контроли (К1 и К2) подходят только для набора «ДРГ Тестостерон свободный ИФА» и не могут быть использованы для других исследований. Описание компонентов Набора: - Иммуносорбент - планшет 96-луночный плоскодонный разборный для иммуноферментного анализа, содержащий 12 стрипов по 8 лунок, на поверхности которых иммобилизованы антитела к тестостерону, с прозрачными бесцветными лунками, допускается белый налет на дне и стенках лунок, готов для использования - 1 шт.; - Калибраторы (Ю10-КЛ5) - с известным содержанием тестостерона 0; 0,2; 1,0; 4,0; 20,0; 100,0 пг/мл; изготовлены растворением тестостерона в 0,01М фосфатном буфере с содержанием 0,9% NaCl; концентрации тестостерона в калибраторах могут незначительно изменяться от серии к серии, точные значения концентраций указаны на этикетках флаконов; прозрачные жидкости светло-желтого или розового цвета, допускается опалесценция, не содержат сыворотку или плазму крови человека или элементы ткани человека; содержат безртутный консервант, готовы для использования, 1 мл - 6 фл.; (коэффициент пересчета: 1 пмоль/л = 3,47 пг/мл); Контроль 1 (Kl) - с известным содержанием тестостерона, изготовлен растворением тестостерона в 0,01М фосфатном буфере с содержанием 0,9% NaCl; значение и допустимый --- стр. 4 --- диапазон концентраций тестостерона указаны на этикетке флакона или в паспорте ОТК;; прозрачная жидкость светло-желтого или розового цвета, допускается опалесценция, не содержит сыворотку или плазму крови человека или элементы ткани человека; содержит безртутный консервант, готов для использования, 1 мл - 1 фл.; Контроль 2 (К2) - с известным содержанием тестостерона, изготовлен растворением тестостерона в 0,01М фосфатном буфере с содержанием 0,9% NaCl; значение и допустимый диапазон концентраций тестостерона указаны на этикетке флакона или в паспорте ОТК; прозрачная жидкость светло-желтого или розового цвета, допускается опалесценция, не содержит сыворотку или плазму крови человека или элементы ткани человека; содержит безртутный консервант, готов для использования, 1 мл - 1 фл.; Конъюгат ферментный - тестостерон, конъюгированный с пероксидазой из корня хрена, прозрачная жидкость розового или красного цвета, допускается опалесценция, содержит безртутный консервант, готов для использования, 15 мл - 1 фл.; Субстрат-раствор - содержит тетраметилбензидин, прозрачная бесцветная или со светло- голубым, светло-зеленым или желтоватым оттенком жидкость, готов для использования, 15 мл - 1 фл.; Промывочный раствор, концентрат х40 - прозрачная бесцветная пенящаяся жидкость, возможно выпадение кристаллического осадка белого цвета, растворяющегося при нагревании до температуры от 35 до 37°С в течение 30 мин, содержит безртутный консервант, 30 мл - 1 фл.; Стоп-раствор - 0,15М раствор серной кислоты, прозрачная бесцветная жидкость, готов для использования, 14 мл - 1 фл. Набор содержит все необходимые для проведения анализа реагенты, кроме дистиллированной воды. Набор рассчитан на проведение 96 определений, включая исследования калибраторов и контролей. В комплект поставки входят: набор компонентов, инструкция по применению, паспорт. 4. ПРОСЛЕЖИВАЕМОСТЬ ЗНАЧЕНИЙ, ПРИПИСАННЫХ КАЛИБРАТОРАМ И КОНТРОЛЯМ Метрологическая прослеживаемость калибраторов (Кло-Клз) и контролей (К1, К2) доказана гравиметрически и посредством калибровки относительно референсного метода, имеющего маркировку Европейского соответствия. 5. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХРАКТЕРИСТИКИ 5Л. Специфичность Специфичность (перекрестная реакция) определялась путем измерения концентрации аналитов, содержащих вещества, которые структурно или биохимически могут связываться с антителами к тестостерону, а также интерферирующие вещества (антикоагулянты). --- стр. 5 --- Результаты исследований перекрестной реакции антител к тестостерону приведены в таблице. Таблица Соединение Ед. измер. Тестируемая концентрация Полученная концентрация, пг/мл % перекрестной реакции Дегидротестостерон мкг/мл 0,01 8,22 0,08220% Андростендион мкг/мл 0,001 1,32 0,13200% Андростерон мкг/мл 10,00 4,75 0,00005% ДГЭА-С мкг/мл 100,00 5,85 <0,00001 % Кортизон мкг/мл 100,00 0,71 <0,00001 % Кортизол мкг/мл 100,00 1,07 <0,00001 % 173 Эстрадиол мкг/мл 1,00 6,90 0,00069% Эстрон мкг/мл 100,00 0,94 <0,00001 % Прегненолон мкг/мл 100,00 2,94 <0,00001 % 17а-Этинилэстрадиол мкг/мл 10,00 1,96 0,00002 % Норгестрел мкг/мл 0,10 5,90 0,00590% Даназол мкг/мл 0,10 3,27 0,00327% Альдостерон мкг/мл 50,00 < 0.2 <0,00001 % Эстриол мкг/мл 1,00 0,91 0,00009% Эпитестостерон мкг/мл 10,00 1,15 0,00001 % Прогестерон мкг/мл 100,00 0,59 <0,00001 % 17а-ОН-Прогестерон мкг/мл 10,00 8,35 0,00008% ДГЭА мкг/мл 10,00 2,83 0,00003% Преднизон мкг/мл 100,00 < 0.2 <0,00001 % Натрия цитрат мг/мл 8,00 <0.2 <0,00001 % ЭДТА мг/мл 10,00 < 0.2 <0,00001 % Гепарин мг/мл 2,40 <0.2 <0,00001 % 5.2. Аналитическая чувствительность Аналитическая чувствительность набора не превышает 0,04 пг/мл. 5.3. Воспроизводимость (К.В.) Коэффициент вариации результатов определения содержания тестостерона в одном и том же образце контрольной сыворотки с известным содержанием тестостерона не превышает 8%. 5.4. Линейность Линейность определения концентрации свободного тестостерона составляет 90-110%. 5.5. Точность («открытие») Данный аналитический параметр определяется тестом на «открытие». Процент открытия составляет 90-110%. 5.6. Диапазон измерений Диапазон измерений метода от 0 до 100 пг/мл. 6. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 6.1. Потенциальный риск применения Набора - класс 26 (ГОСТ Р 31508-2012). 6.2. При работе с Набором необходимо соблюдать требования ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасноети». --- стр. 6 --- б.З. Набор биологически безопасен, так как не содержит компонентов, имеющих в своем составе сыворотку или плазму крови человека или элементы ткани человека. Однако при работе с исследуемыми образцами и контрольными сыворотками, содержащими компоненты человеческой крови человека, их следует рассматривать как потенциально инфицированный материал. Поэтому все работы необходимо проводить в резиновых перчатках, избегать контакта с кожей и слизистыми оболочками, не пипетировать ртом. Для дезинфекции исследуемых образцов, содержащих сыворотку и плазму крови человека, а также посуды и материалов, контактирующих с ними, следует использовать дезинфицирующие средства, не оказывающие негативного воздействия на качество ИФА, например, комбинированные средства на основе ЧАС (четвертичных аммониевых соединений), спиртов, третичных аминов. 6.4. Стоп-раствор и субстрат-раствор могут оказывать раздражающее действие на кожу и слизистые оболочки. При попадании этих растворов в глаза - промыть большим количеством воды. В случае контакта с кожей стоп-раствора промыть пораженный участок большим количеством воды, а при контакте с кожей субстрат-раствора - промыть пораженный участок большим количеством воды с мылом. 6.5. Некоторые компоненты Набора содержат безртутные консерванты. В случае их контакта с глазами или кожей необходимо промыть этот участок водой. 6.6. Запрещается принимать пищу, пить, курить, пользоваться косметикой в местах работы с Набором. 7. НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В НАБОР - фотометр, позволяющий проводить измерения оптической плотности раствора в лунках планщета при длине волны 450 нм и референсной длине волны 620 нм либо 630 нм; - ручное или автоматическое устройство для отмывания планшетов или 8-канальный полуавтоматический дозатор; - термостат-инкубатор; - лабораторный холодильник-морозильник; - встряхивающее устройство (шейкер); - калиброванные и прошедшие поверку автоматические пипетки (дозаторы) переменного объема (одно- и многоканальные) с погрешностью измерения не более чем указано в паспорте на данное оборудование; - наконечники для дозаторов пипеточных одноразовые; - пластиковые одноразовые ванночки; - цилиндры мерные; - таймер; - перчатки медицинские одноразовые; - вода дистиллированная; --- стр. 8 --- /- Использовать резервуары (одноразовые ванночки) только для одного компонента. Это особенно важно при работе с субстрат-раствором. Использование емкости, которая прежде использовалась для конъюгата, может привести к изменению цвета субстрат-раствора. - Необходимо плотно закрывать флаконы с реагентами сразу после использования. - Пипетировать калибраторы и исследуемые образцы на дно лунок. Для пипетирования ферментного конъюгата и стоп-раствора рекомендуется держать пипетку вертикально над лункой и раскапывать соответствующий раствор в центр лунки для достижения полного смешивания. - С целью получения более точных результатов анализа рекомендуется пипетировать калибраторы, контроли и исследуемые образцы в дублях. - Как правило, ферментная реакция напрямую зависит от времени и температуры, поэтому перед началом анализа рекомендуется составить схему расположения всех калибраторов и исследуемых образцов, рассчитать и отобрать необходимое для анализа количество стрипов, закрепить их в держателе, подготовить все реагенты и т.д. Это обеспечит равные промежутки времени при раскапывании реагентов и проведении анализа. - Субстрат-раствор должен быть бесцветным либо иметь светло-зеленый, светло-голубой или желтоватый оттенок. Если этот реагент приобретет темно-синий цвет, то его нельзя использовать. - Не допускать контакта субстрат-раствора и стоп-раствора с металлическими поверхностями и ионами металлов. - Инкубацию с субстрат-раствором проводить в защищенном от света месте. - После начала анализа все этапы необходимо проводить без перерывов. 9.2. Подготовка реагентов Промывочный рабочий раствор. При наличии в концентрате промывочного раствора осадка солей содержимое флакона прогреть перед разведением при температуре от 35 до 37°С до полного растворения осадка. Для приготовления промывочного рабочего раствора содержимое флакона с промывочным раствором, концентратом х40 (содержит 30 мл) перенести в мерный цилиндр и довести объем раствора до 1200 мл дистиллированной водой. Для меньших объемов соотношение для разведения 1:40. Полученный раствор тщательно перемешать. Хранить промывочный рабочий раствор не более 1 месяца при температуре от 2 до 8°С. 9.3. Проведение ИФА 9.3.1. Внести по 20 мкл калибраторов, контролен и исследуемых образцов в соответствующие лунки, используя для каждого образца новый наконечник для пипеток. 9.3.2. Внести в каждую лунку по 100 мкл конъюгата ферментного. 9.3.3. Тщательно перемешать в течение 10 сек. Важно добиться полного смешивания реагентов. 9.3.4. Инкубировать в течение 60 мин при температуре 37°С --- стр. 9 --- 9.3.5. Удалить содержимое лунок планшета в сосуд для сбора отработанных растворов (с последующей дезинфекцией содержимого сосуда). Промыть лунки 3 раза промывочным рабочим раствором (см. п. 9.2), внося около 300 мкл в лунку, не допуская переливания раствора из лунки в лунку. Время между внесением раствора и его удалением из лунки должно быть не менее 30 сек. Важно: при каждой промывке аккуратно встряхивать планшет в течение 5 сек, удалить остатки раствора, постукивая перевернутым планшетом по впитывающей бумаге. Если для промывки используется автоматическое оборудование, лунки следует промыть не менее 5 раз. Для получения надежных результатов анализа очень важно следить за качеством промывки. Чувствительность и специфичность анализа напрямую зависят от качества отмывки лунок планшета. Остатки раствора удалить и полностью осушить планшет, резко постукивая им в перевернутом положении по сложенной в несколько раз чистой фильтровальной бумаге, помещенной в лоток. 9.3.6. Внести в каждую лунку по 100 мкл субстрат-раствора. 9.3.7. Инкубировать в течение 15 мин при температуре от 22 до 28°С в защищенном от света месте. 9.3.8. Остановить ферментную реакцию, добавив в каждую лунку по 100 мкл стоп-раствора. 10. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ Результаты ИФА регистрируют на фотометре в течение 5 мин после внесения стоп-раствора. Оптическую плотность всех лунок измеряют при длине волны 450±10 нм. Рекомендуется использование референс-светофильтра с длиной волны 620 либо 630 нм. 11. ВЫЧИСЛЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА Определение концентрации свободного тестостерона в каждом исследуемом образце следует проводить следующим образом: 11.1. Рассчитать среднее арифметическое значение оптической плотности для каждой пары лунок с калибраторами. 11.2. Используя линованную графическую бумагу, построить калибровочную кривую, поместив среднюю величину оптической плотности для каждого калибратора на вертикальной оси (Y) против соответствующей концентрации в пг/мл на горизонтальной оси (X). 11.3. Использовать средние значения оптической плотности для каждого исследуемого образца для определения соответствующей концентрации свободного тестостерона путем простой интерполяции по калибровочной кривой. 11.4. При использовании автоматического метода результаты анализа рассчитываются автоматически с помощью модели с четырьмя параметрами (например, Four Parameter Logistic). Другие методы обработки данных могут дать несколько отличающиеся результаты. --- стр. 10 --- >М.З.Образцы с концентрациями более высокими, чем концентрация самого высокого калибратора (100 пг/мл), следует обозначить, как > 100 пг/мл. 11.6. Значения калибраторов, контролей, контрольных сывороток и результаты контроля качества Набора указаны в паспорте ОТК (прилагается). Значения и диапазоны, указанные в паспорте ОТК, всегда относятея к текущей серии Набора и должны использоваться для прямого сравнения результатов. 12. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ При исследовании образцов сывороток и плазмы крови в референтной популяции здоровых пациентов с использованием Набора были получены следующие значения содержания свободного тестостерона: Референтный интервал, пг/мл Дети и подростки (возраст) Мальчики < 12 лет ГЧ-4,60 12-18 лет 0,18-23,08 Девочки <12 лет ГЧ-1,46 12-18 лет ГЧ-2,24 Мужчины (возраст) 19-55 лет 1,00-28,28 > 55 лет 0,70-21,45 Женщины (возраст) 19-55 лет ГЧ-2,85 > 55 лет ГЧ - 1,56 Примечание. ГЧ - граница чувствительности набора (0,04 пг/мл). Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория установила свои границы референтных интервалов. Диагностическое значение результатов исследования должно оцениваться в сочетании с другими клиническими тестами и диагностическими процедурами. 13. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ Надежные и воспроизводимые результаты будут получены только при строгом соблюдении приложенной инструкции. Любое ненадлежащее обращение с образцами или модификация данного теста могут повлиять на результаты. Использование гемолизированных, мутных или желтушных образцов либо образцов, прошедших несколько циклов замораживания и оттаивания, может привести к получению ложных результатов. Содержание в образцах азида натрия также может повлиять на результаты анализа. Содержание свободного тестостерона в образцах может быть ошибочным, если пациент лечился с применением кортизона или других стероидных гормонов. 14. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА В соответствии с правилами GLP (Хорошей лабораторной практики) рекомендуется проводить каждый анализ с построением калибровочной кривой.