Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот (ПРОБА-МЧ) по ТУ 9398-088-46482062-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
Организация-Производитель
СОГЛАСОВАНО
Г енеральцый директор
ОО^ЙШСЛ^ё^^л ТС»
л-;й а: ^ о г;:з ТС»\^'’
%5^;Т5» ^ Н. Левичев
«2017 г .
Инструкция по применению
ПРОБА-МЧ
Организация-разработчик
УТВЕРЖДАЮ
альный директор
ехнология»
4
Ш Трофимов
« г.
ИНСТРУКЦИЯ п о ПРИМЕНЕНИЮ
Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот
ПРОБА-МЧ
.ЛБЬГ'.'-/.
КОП»!^ ВЕРНА
ГЕНЙШЬНЫЙ ДИРЕКТОР
ОоМйНданолоп)
саЖ рР л^4П0»Ь
2017 г.
--- стр. 2 ---
Инструкция по применению Лист 2
ПРОБА-МЧ Листов 30
Оглавление
1 НАЗНАЧЕНИЕ............................................................................................................................................3
2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА................................................................................................................4
2.1 Состав набора реагентов.................................................................................................................4
2.2 Число анализируемых проб.............................................................................................................4
2.3 Принцип метода................................................................................................................................4
2.4 Функциональные показатели набора...............................................................................................5
2.5 Время проведения выделения нуклеиновых кислот.....................................................................5
3 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ..............................................................................................................6
4 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ........................................................................................................8
5 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ...............................................................................................................9
5.1 Плазма крови.....................................................................................................................................9
5.2 Мокрота.............................................................................................................................................9
5.3 Соскобы эпителиальных клеток....................................................................................................Ю
5.4 Моча................................................................................................................................................
.
5.5 Слюна, ликвор, синовиальная жидкость......................................................................................11
5.6 Сперма, секрет предстательной железы......................................................................................11
5.7 Молоко................................................................................... 11
5.8 Мазки и смывы............................................................................................................................... .
5.9 Фекалии.......................................................................................................................................... ..
5.10 Биопсийный и аутопсийный материал.........................................................................................12
5.11 Культуры клеток.......................................................................................................................... ..
5.12 Транспортировка и хранение исследуемого материала.............. 13
6 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА..................................................................................................
6.1 Выделение нуклеиновых кислот набором в фасовке для ручного дозирования
(фасовка П)...................................................................................................................... 14
6.2 Выделение нуклеиновых кислот набором в фасовке для автоматизированного дозирования
(фасовка А).......................................................................................................... 24
7ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ..........................
7.1 Транспортирование........................................................................................................................27
7.2 Хранение.............................................................................................................................. 27
7.3 Указания по эксплуатации ................................................ 27
8УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ....................................................
9ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ........................................................................................."11""1""'28
10 Символы, используемые при маркировке комплекта реагентов................................................28
11 Символы и обозначения опасности при маркировке комплекта реагентов ..............................29
12 Адрес для обращения.....................................................................................................................29
Приложение 1 Схема выделения при использовании набора в фасовке для ручного дозирования
(фасовка Н)......................................................................................................... 30
--- стр. 3 ---
Инструкция по применению Лист 3
ПРОБА-МЧ Листов 30
1 НАЗНАЧЕНИЕ
1.1 Настоящая инструкция распространяется на набор реагентов для выделения
нуклеиновых кислот (ПРОБА-МЧ), далее по тексту набор.
1.2 Набор реагентов предназначен для выделения нуклеиновых кислот (ДНК и
биологического материала человека и животных, а также из культуры клеток для
последующего анализа методом обратной транскрипции (РНК) и/или полимеразной цепной
реакции (ДНК).
Набор реагентов ПРОБА-МЧ выпускается в следующих вариантах комплектации:
ПРОБА-МЧ-НК, ПРОБА-МЧ-РАПИД.
Комплектация ПРОБА-МЧ-НК предназначена для выделения нуклеиновых кислот
СДНК и РНК) из биологического материала для последующего исследования выделенных
нуклеиновых кислот методом ПЦР.
Комплектация ПРОБА-МЧ-РАПИД предназначена для быстрого вьщеления ДНК
из биологического материала для последующего исследования выделенной ДНК методом
ПЦР.
В качестве биологического материала используют:
- материал с большим количеством ингибиторов ПЦР - плазма крови, слюна,
мокрота и бронхоальвеолярный лаваж, молоко, моча, сперма, секрет предстательной
железы, фекалии, биоптаты тканей;
материал, содержащий незначительное количество ингибиторов ПЦР - соскобы
эпителиальных клеток, мазки и смывы из респираторного тракта и ротоглотки,
биологические жидкости (спинномозговая жидкость (ликвор), амниотическая жидкость,
асцитическая жидкость и др.), культуры клеток.
1.3 Набор может быть использован в клинико-диагностических лабораториях
медицинских учреждений и научно-исследовательской практике.
--- стр. 4 ---
Инструкция по применению Лист 4
ПРОБА-МЧ Листов 30
2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1 Состав набора реагентов
Набор выпускается в след}тощих фасовках: фасовка для ручного дозирования
(маркируется ~ фасовка К), фасовка для автоматизированного дозирования (маркируется —
фасовка А).
2.1.1 Набор в фасовке для ручного дозирования (Фасовка Н)
Компоненты набора Комплектация
ПРОБА-МЧ-НК,
RJEF P114-N/8
ПРОБА-МЧ-РАПИД,
REF PHS-N/SЛизирующий раствор 1 флакон (30 мл) 1 флакон (15 мл)Сорбент 1 пробирка (1,1 мл) 1 флакон (9.6 мл)Связывающий раствор 1 флакон (17 мл) _
Промывочный раствор 3 флакона (по 40 мл) 1 флакон (30 мл)Элюирующий раствор 1 флакон (15 мл) 1 флакон (17,4 мл)Магнитные пестики 3 блистера (по 16 шт). 3 блистера (по 16 щт).
2.1.2 Набор в фасовке для автоматизированного дозирования (Фасовка А)
Комплектация ПРОБА-МЧ-НК,
REF Р114-А/8 ПРОБА-МЧ-РАПИД,
REF Р115-А/8
Картридж с реагентами - 2 шт.: Картридж с реагентами -1 шт.:
1 ряд* Лизирующий раствор (по 5,3 мл)1 ряд* Промывочный раствор (по 5,0 мл)
2 ряд Сорбент (по 195 мкл) 2 ряд Промывочный раствор (по 5.0 мл)
Компоненты 3 ряд Связывающий раствор (по 3,4 мл)3 ряд не заполнен
набора 4 ряд Элюирующий раствор (по 3.0 мл) 4 ряд Лизирующий раствор (по 4.8 мл)
5 ряд Промывочный раствор (по 8,7 мл)5 ряд Сорбент (по 3.2 мл)
6 ряд Пром^шочный раствор (по 8,7 мл)6 ряд Элюирующий раствор (по 5.8 мл)
Магнитные пестики 2 блистера
(по 16 шт.) Магнитные пестики 2 блистера
(по 16 шт.) ..Ряд 1 картриджа имеет боковой скос
2.2 Число анализируемых проб
Набор реагентов в фасовке для ручного дозирования рассчитан на выделение
нуклеиновых кислот из 48 анализируемых образцов (включая отрицательные контрольные
образцы), в фасовке для автоматизированного дозирования - на 32 образца (включая
отрицательные контрольные образцы).
2.3 Принцип метода
Принцип действия основан на проведении лизиса и высвобождении нуклеиновых
кислот под действием хаотропного агента (гуанидина тиоционата), с последующей
сорбцией на парамагнитных наночастицах и промывкой от примесей.
--- стр. 5 ---
Инструкция по применению Лист 5
ПРОБА-МЧ Листов 30
2.4 функциональные показатели набора
2.4.1 Эффективность выделения нуклеиновых кислот
Вид биоматериала и
нуклеиновых кислот
Полученные результаты
Выделение ДНК из
биоматериала с большим
количеством ингибиторов
ПЦР
27 истинно положительных и 45 истинно отрицательных
результатов. Ложноположительные и ложноотрицательные
результаты отсутствовали;
эффективность составила 100,0 (92,6-100') %.
Выделение РНК из
биоматериала с большим
количеством ингибиторов
ПЦР
было получено 12 истинно положительных и 18 истинно
отрицательных результатов. Ложноположительные и
ложноотрицательные результаты отсутствовали;
эффективность составила 100,0 (83,4-100') %.
Выделение ДНК из
биоматериала с
незначительным
количеством ингибиторов
ПЦР
было получено 21 истинно положительных и 91 истинно
отрицательных результатов. Ложноположительные и
ложноотрицательные результаты отсутствовали;
эффективность составила Ю0,00 (95,2-100) %.
Выделение РНК из
биоматериала с
незначительным
количеством ингибиторов
ПЦР
было получено 65 истинно положительных, 59 истинно
отрицательных результатов и 1 ложноположительный
результат. Ложноотрицательные результаты отсутствовали;
эффективность составила 99,2 (94,4-99,2) %.
2.5 Время проведения выделения нуклеиновых кислот:
Фасовка ПРОБА-МЧ-НК ПРОБА-МЧ-РАПИЛ
Фасовка N 90 мин 40 МИН
Фасовка А 60 мин 25-40 мин
--- стр. 11 ---
Инструкция по применению
ПРОБА-МЧ
Лист 11
Листов 30
5.4.2 Перенесите 1,0 мл материала в пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл.
5.4.3 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.4.4 Наиболее полно удалите надосадочную жидкость.
5.4.5 Добавьте к осадку 1,0 мл физиологического раствора стерильного.
5.4.6 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.4.7 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл
(осадок+жидкая фракция).
5.5 Слюна, ликвор, синовиальная жидкость
5.5.1 Слюну, ликвор, синовиальную жидкость (примерно 500 мкл) соберите в стерильную
посуду и плотно закройте крьппкой.
5.5.2 Перенесите 500 мкл материала в пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл.
5.5.3 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.5.4 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл
(осадок+жидкая фракция).
5.5.5 Добавьте к осадку 500 мкл физиологического раствора стерильного.
5.5.6 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.5.7 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл
(осадок+жидкая фракция).
5.6 Сперма, секрет предстательной железы
5.6.1 Перенесите 20-30 мкл жидкого материала пипеткой в пластиковую пробирку
объёмом 1,5 мл с транспортной средой (или с 500 мкл физиологического раствора
стерильного), встряхните пробирку на вортексе в течение 5-10 с.
5.6.2 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 до 25 °С.
5.6.3 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мют
(осадок+жидкая фракция).
5.7 Молоко
5.7.1 Соберите материал в стерильную посуду и плотно закройте крьппкой.
5.7.2 Аккуратно перемешайте и перенесите 1,0 мл материала в пластиковую пробирку
объёмом 1,5 мл.
Примечание - Срок сбора молока не более 24 часов. Хранение в течение всего срока
--- стр. 12 ---
Инструкция по применению Лист 12
ПРОБА-МЧ Листов 30
сбора при температуре от 2 °С до 8 °С.
5.8 Мазки и смывы
5.8.1 Центрифугируйте пробирку, содержащую анализируемый материал, при
13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной температуре от 18 °С до 25 °С.
5.8.2 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок +
жидкая фракция).
5.9 Фекалии
5.9.1 Перенесите -250 мг (мкл) фекалий в пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл с 1,0 мл
физиологического раствора стерильного.
5.9.2 Встряхните пробирку на вортексе в течение 5-10 с.
5.9.3 Центрифугируйте пробирку при 1000 об/мин в течение 2-3 мин.
5.9.4 Перенесите 800-1000 мкл надосадочной жидкости в новую пробирку объёмом
1.5 мл, центрифугируйте при 13000 об/мин в ^течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.9.5 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок +
жидкая фракция).
5.10 Бипсийный и аутопсийный материал
5.10.1 Кусочки ткани диаметром не более 5 мм помещают в одноразовые стерильные
пробирки объёмом 2 мл, содержащих соответствующую транспортную среду.
Пробирку плотно закрывают крышкой и маркируют.
5.10.2 Полученный материал термостатируйте при 65 °С в течение 30 мин.
5.10.3 Осадите конденсат центрифугированием при 1000 об/мин в течение 3-5 с.
5.10.4 Перенесите надосадочную жидкость в новую пластиковую пробирку объёмом
1.5 мл.
5.11 Культуры клеток
5.11.1 В случае жидких культур перенесите 20-30 мкл жидкого материала пипеткой в
пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл с транспортной средой (или с 500 мкл
физиологического раствора стерильного), встряхните пробирку на вортексе в
течение 5-10 с.
5.11.2 С плотных питательньк сред материал берется бактериальной петлей.
Бактериальную петлю прокалите над пламенем непосредственно перед взятием
материала, затем петлю остудите. Материал перенесите в пластиковую пробирку
объёмом 1,5 мл с транспортной средой (или с 500 мкл физиологического раствора
--- стр. 13 ---
Инструкция по применению
ПРОБА-МЧ
Лист 13
Листов 30
стерильного), аккуратно перемешайте. Пробирку плотно закройте. После переноса
бактериальную петлю прожгите повторно для уничтожения находящейся на ней
микробной культуры.
5.11.3 Центрифугируйте пробирку при 13000 об/мин в течение 10 мин при комнатной
температуре от 18 °С до 25 °С.
5.11.4 Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл
(осадок+жидкая фракция).
5.12 Транспортировка и хранение исследуемого материала
Транспортировать и хранить образцы биологического материала до начала
исследования следует при температуре от 2 °С до 8 °С не более 24 часов.
Допускается хранить полученный материал при температуре от минус 18 °С до
минус 22 °С в течение 3 месяцев.
--- стр. 18 ---
Инструкция по применению Лист 18
ПРОБА-МЧ Листов 30
6.1.1.14
6.1.1.16
6.1.1.17
Максимально отберите надосадочную жидкость (не вынимая пробирки из
штатива, не затрагивая сорбента).
6.1.1.15 Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор:
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 900 мкл
ПРОБА-МЧ-РАПИД - 250 мкл
Запустите магнитный гомогенизатор на 30 сек. (остановите во время 5-ой
паузы).
Не вьшимая пробирки из гомогенизатора, осадите сорбент на стенки
пробирок в течение 2 мин. (гомогенизатор вьжлючен).
п.6.1.18-6.1.24—(вторая—и—третья отмывка) вьшолняются только для комплектации
«ПРОБА-МЧ-НК».
6.1.1.18 Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор:
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 500 мкл
6.1.1.19 Перемешайте 3-5 раз аккуратно переворачивая пробирки (омьшая
внутреннюю поверхность крышки). Осадите капли центрифугированием при
1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
6.1.1.20 Установите пробирки в магнитный гомогенизатор.
6.1.1.21 Запустите магнитньш гомогенизатор на 30 с. (остановите во время 5-ой
паузы).
6.1.1.22 Осадите магнитные частицы на стенки пробирок в течение 2 мин.
(гомогенизатор выключен).
6.1.1.23 Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость.
6.1.1.24 Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор:
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 500 мкл
Запустите магнитный гомогенизатор на 30 сек. (остановите во время 5-ой
паузы).
6.1.1.25
6.1.1.26 Не вынимая пробирки из гомогенизатора, осадите магнитные частицы на
стенки пробирок в течение 2 мин.
--- стр. 19 ---
Инструкция по применению Лист 19
ПРОБА-МЧ Листов 30
6.1.1.27 Не вынимая пробирок, не задевая осадок полностью удалите надосадочную
жидкость.
6.1.1.28 Добавьте к осадку Элюирующий раствор.
Количество элюирующего раствора зависит от следующих параметров:
- тип исследования;
- количество параметров исследования;
- количество исследований, которые будут проведены из одного образца
нуклеиновых кислот.
Рекомендуемое количество элюата при выделении нуклеиновых кислот указано в
инструкциях к наборам реагентов для проведения ПЦР-исследований.
Например:
Тип исследования Количество элюирующего
раствора, мкл
Вирусы гепатитов и ВИЧ i 30
Урогенитальные возбудители 100
Комплексные исследования (например, Фемофлор,
Иммуноквантэкс C/V, HPV квант-21)
300
6.1.1.29 Аккуратно, избегая разбрызгивания сорбента на стенки и крьппку пробирки,
перемешайте содержимое на микроцентрифуге-вортексе. Осадите капли
центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
п.6.1.1.30 - 6.1.33 вьшолняются только для комплектации «ПРОБА-МЧ-НК»
6.1.1.30 Установите пробирки в предварительно прогретый до 75 °С термостат.
6.1.1.31 Термостатируйте пробирки при 75 °С 15 мин.
6.1.1.32 Осадите конденсат коротким центрифугированием при 1000-3000 об/мин в
течение 3-5 с.
Аккуратно, избегая разбрызгивания сорбента на стенки и крьппку пробирки,
перемешайте содержимое на микроцентрифуге-вортексе. Осадите капли
центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
Установите пробирки в магнитный гомогенизатор на 1-3 мин для осаждения
сорбента на стенки пробирок. Не включайте гомогенизатор!
6.1.2 Выделение нуклеиновых кислот с использованием магнитного штатива
6.1.2.1 Промаркируйте по одной пробирке объёмом 1,5 мл для каждого исследуемого
образца (в том числе для калибровочных образцов при проведении
6.1.1.33
6.1.1.34
--- стр. 20 ---
6.1.2.2
6.1.2.3
6.1.2.4
6.1.2.5
Инструкция по применению Лист 20
ПРОБА-МЧ Листов 30
количественных исследований) и для отрицательного контрольного образца
«К-».
Примечание - Для образцов, прошедших предобработку с получением осадка и
надосадочной жидкости (см. п. 5: мокрота - способ 1, слюна, моча, ликвор, сперма,
секрет предстательной железы, мазки и смывы; фекалии), промаркируйте пробирки с
подготовленным для исследования материалом в объёме 100 мкл.
При использовании внутреннего контрольного образца внесите в каждую
пробирку по 20 мкл соответствующего внутреннего контрольного образца
(РНК-ВК и/или ДНК-ВК), кроме пробирок для калибровочньк образцов.
Добавьте в каждую пробирку Лизирующий раствор, не касаясь края
пробирки:
ПРОБА-МЧ-НК - 600 мкл;
ПРОБА-МЧ-РАПИД ~ 250 мкл
Плотно закройте крьпдки пробирок, встряхните на вортексе в течение 3-5 с,
осадите капли центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
Добавьте в пробирки для исследуемых образцов необходимое количество
исследуемого образца:
ПРОБА-МЧ-НК - 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
В пробирку, промаркированную «К-», добавьте отрицательный контрольный
образец:
ПРОБА-МЧ-НК - 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
6.1.2.6
соответствующиеВ пробирки для калибровочных образцов добавьте
калибровочные образцы:
ПРОБА-МЧ-НК - 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
Плотно закройте крьшжи пробирок, встряхните на вортексе в течение 3-5 с
дважды, осадите капли центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение
3-5 с.
--- стр. 22 ---
Инструкция по применению Лист 22
ПРОБА-МЧ Листов 30
6.1.2.10
2 Смесь связывающего раствора и сорбента вносите аккуратно, не касаясь
содержимого пробирки и не допуская образование капель смеси
связьшающего буфера и сорбента на стенке пробирки.
После внесения смеси закройте пробирку и сразу перемешайте на вортексе
3-5 с.
ВНИМАНИЕ!
1 Не допускайте оседания сорбента в приготовленной смеси, при необходимости
повторите перемешивание смеси пипетированием.
2 Не ставьте пробирку/фалькон со смесью связывающего раствора и сорбента ближе
5 см от магнитного гомогенизатора или магнитного штатива.
6.1.2.11 После добавления смеси связывающего раствора и сорбента, повторно
встряхните пробирки на вортеске в течение 3-5 с.
Установите пробирки в штатив «рабочее место» на 10 мин. Периодически
(каждые 2-3 мин) встряхивайте пробирки на вортексе 1-3 с.
Через 10 мин снова встряхните пробирки на вортексе в течение 3-5 с, осадите
капли центрифугированием при 1000-3000 об/мин 3-5 с.
Установите пробирки в магнитный штатив: осадите сорбент на стенки
пробирок в течение 7 мин.
Максимально отберите надосадочную жидкость (не вынимая пробирки из
штатива, не затрагивая сорбента).
Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор:
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 900 мкл
ПРОБА-МЧ-РАПИД -250 мкл
Встряхните пробирки на вортексе в течение 3-5 е, осадите капли
центрифугированием при 1000-3000 об/мин 3-5 с.
6.1.2.18 Установите пробирки в магнитный штатив: осадите сорбент в течение 2 мин.
п.6.1.2.19-6.1.2.25 вьшолняются только для комплектапии «ПРОБА-МЧ-НК».
6.1.2.19 Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор:
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 500 мкл
6.1.2.12
6.1.2.13
6.1.2.14
6.1.2.15
6.1.2.16
6.1.2.17
--- стр. 23 ---
i
6.1.2.20
Инструкция по применению Лист 23
ПРОБА-МЧ Листов 30
6.1.2.21
6.1.2.22
6.1.2.23
6.1.2.24
Перемешайте 3-5 раз аккуратно переворачивая пробирки (омывая
внутреннюю поверхность крьппки). Осадите капли центрифугированием при
1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
Установите пробирки в магнитный штатив: осадите сорбент на стенки
пробирок в течение 2 мин.
Не задевая осадок, полностью удалите надосадочную жидкость.
Внесите в каждую пробирку Промывочный раствор.
ПРОБА-МЧ-НК (Плазма крови) - 800 мкл
ПРОБА-МЧ-НК (Биоматериал, кроме плазмы крови) - 500 мкл
Встряхните пробирки на вортеске в течение 3-5 с, осадите капли
центрифугированием при 1000-3000 об/дшн 3-5 с. Установите в магнитный
штатив.
6.1.2.25 Не вьшимая пробирок, не задевая осадок полностью удалите надосадочную
жидкость.
6.1.2.26 Добавьте к осадку Элюирующий раствор
Количество элюирующего раствора зависит от следуюпщх параметров:
- тип исследования;
- количество параметров исследования;
- количество исследований, которые будут проведены из одного образца
нуклеиновых кислот.
Рекомендуемое количество элюата при выделении нуклеиновых кислот указано в
инструкциях к наборам реагентов для проведения ПЦР-исследований.
Например:
Тип исследования Количество
элюирующего раствора,
мкл
Вирусы гепатитов и ВИЧ 30
Урогенитальные возбудители 100
Комплексные исследования (например, Фемофлор,
Иммуноквантэкс C/V, HPV квант-21)
300
6.1.2.27 Аккуратно, избегая разбрызгивания сорбента на стенки и крьппку пробирки,
перемешайте содержимое на микроцентрифуге-вортексе. Осадите капли
центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
п.6.1.2.28 - 6.1.2.31 вьшолняются только для комплектапии «ПРОБА-МЧ-НК»
--- стр. 24 ---
Инструкция по применению
ПРОБА-МЧ
Лист 24
Листов 30
6.1.2.30
6.1.2.31
6.1.2.28 Установите пробирки в предварительно прогретый до 75 °С термостат.
6.1.2.29 Термостатируйте пробирки при 75 °С 15 мин.
Осадите конденсат центрифугированием при 1000-3000 об/мин в течение 3-
5 с.
6.1.2.32
Аккуратно, избегая разбрызгивания сорбента на стенки и крышку пробирки,
перемешайте содержимое на микроцентрифуге-вортексе. Осадите капли
центрифугированием 1000-3000 об/мин в течение 3-5 с.
Установите в магнитный штатив на 1-3 мин для осаждения сорбента на
стенки пробирок.
Надосадочная жидкость, содержащая выделенные нуклеиновые кислоты,
готова к внесению в реакционную смесь для обратной транскрипции и ПЦР-
амплификации.
Рекомендуется обратную транскрипцию ставить сразу же после выделения
РНК/ДНК.
ВНИМАНИЕ! Отбор надосадочной жидкости, содержащей нуклеиновые кислоты,
для проведения ОТ-ПЦР/ПЦР осуществляется без снятия пробирок с магнитного
гомогенизатора. Отбирать раствор нуклеиновых кислот для реакции нужно очень
осторожно, не захватывая магнитные частицы.
6.2 Выделение нуклеиновых кислот. Комплектации ПРОБА-МЧ-НК (фасовка А),
ПРОБА-МЧ-РАПИД (фасовка А).
Примечание ~ В ячейках со связывающим и лизирующими растворами при хранении в
холодильнике допускается выпадение осадка. Перед началом работы его необходимо растворить
прогреванием при 60 °С в течение 15-20 мин или при комнатной температуре в течении 1-2 часов.
6.2.1
6.2.2
6.2.3
6.2.4
Установите штатив с наконечниками на рабочий стол дозирующего
устройства ДТстрим.
Подготовьте блистер с пестиками: аккуратно снимите защитную плёнку,
установите на рабочий стол дозирующего устройства ДТстрим.
Установите картридж с растворами скошенными углами вперёд на рабочий
стол дозирующего устройства ДТстрим. Перед использованием не
распечатывайте.
Проверьте готовность дозирующего устройства ДТстрим:
--- стр. 25 ---
6.2.5
6.2.6
6.2.7
6.2.8
6.2.9
6.2.10
6.2.11
6.2.12
Инструкция по применению Лист 25
ПРОБА-МЧ Листов 30
- правильность установки магнитного пинцета (подвижной панелью назад),
- наличие устройства сброса наконечников.
Промаркируйте необходимое количество пластиковых пробирок объёмом
1,5 мл (4, 8,12, 16, 20, 24, 28 или 32 с учётом пробирки для
«К-»).
Добавьте в пробирки для исследуемых образцов необходимое количество
исследуемого образца:
ПРОБА-МЧ-НК - 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
В пробирку, промаркированную «К-», добавьте отрицательный
контрольный образец:
ПРОБА-МЧ-НК - 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
В пробирки для калибровочных образцов добавьте соответствующие
калибровочные образцы:
ПРОБА-МЧ-НК — 200 мкл,
ПРОБА-МЧ-РАПИД -100 мкл.
Устанавливайте образцы в штатив слева направо, сверху вниз.
Установите пробирки с образцами (включая пробирку «К-») в штатив для
вьщеления, установите штатив на магнитный гомогенизатор.
Запустите на управляющем компьютере программу ОТ81геатКиппег (см.
инструкцию по эксплуатации), выберите сценарий запуска.
Установите параметры дозирования: количество образцов, объём элюата
(растворённого образца нуклеиновых кислот после выделения):
Количество элюирующего раствора зависит от следующих параметров:
- тип исследования;
- количество параметров исследования;
- количество исследований, которые будут проведены из одного образца
нуклеиновых кислот.
Рекомендуемое количество элюата при выделении нуклеиновых кислот указано в
инструкциях к наборам реагентов для проведения ПЦР-исследований.
Например:
Тип исследования Количество
элюирующего раствора.
--- стр. 26 ---
ЛдНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 26
V - — ---------------- ПРОБА-МЧ Листов 30
f
мкл
Вирусы гепатитов и ВИЧ 30
Урогенитальные возбудители 100
Комплексные исследования (например, Фемофлор,
Иммуноквантэкс C/V, HPV квант-21)
300
6.2.13 Запустите выполнение дозирования реагентов.
ВНИМАНИЕ! После запуска обязательно визуально проконтролируйте раскладку
магнитных пестиков в начале вьшолнения программы!
6-2Л4 Закройте крьппки пробирок после вьшолнения программы.
Надосадочная жидкость, содержащая выделенные нуклеиновые кислоты, готова к
внесению в реакционную смесь для ПЦР— амплификации. Полученный препарат
нуклеиновых кислот можно хранить при температуре от 2 °С до 8 °С не более 7 суток или
при температуре минус 18 °С до минус 22 °С не более 1 года.
Примечание - Если предполагается хранить препарат нуклеиновых кислот более 7 суток,
необходимо перенести надосадочную жидкость в новую пробирку.
--- стр. 27 ---
Инструкция по Применению
ПРОБА-МЧ
Лист 27
Листов 30
7 ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ
7.1 Транспортирование
7.1.1 Транспортирование набора осуществляют всеми видами крытого
транспорта при температурах, соответствующих условиям хранения
компонентов, входящих в состав набора.
7.1.2 Наборы реагентов, транспортированные с нарушением температурного
режима, применению не подлежат.
7.2 Хранение
7.2.1 Набор реагентов следует хранить в холодильниках или холодильных
камерах при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности.
7.2.2 При хранении при температуре от 2 °С до 8 °С допускается вьшадение
небольшого осадка в лизирующем и сЬязьгоающем растворах.
Примечание - Осадок растворяется прогреванием при 65 °С.
7.2.3 Наборы реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного
режима, применению не подлежат.
7.3 Указания по эксплуатации
7.3.1 Набор должен применяться согласно действующей версии утвержденной
инструкции по применению.
7.3.2 После вскрытия упаковки компоненты набора следует хранить при
следующих условиях:
- компоненты набора следует хранить в холодильниках ихш
холодильных камерах при температуре от 2 °С до 8 °С в течение
всего срока годности набора.
7.3.3 Смесь сорбента со связывающим раствором хранению не подлежит.
8 УКАЗАНИЯ ПО УТИЛИЗАЦИИ
8.1 Наборы, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением
срока годности и неиспользованные реактивы, подлежат утилизации в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790 и МУ 1.3.2569.
ВНИМАНИЕ! Компоненты комплекта реагентов с наличием предупредительных
знаков об опасности следует уничтожать с соблюдением соответствующих мер
безопасности в соответствии с действующим законодательством Российской Федерации.
--- стр. 28 ---
Инструкция по применению Лист 28
ПРОБА-МЧ Листов 30
8.2 Жидкие компоненты, входящие в состав набора реагентов, пришедшие в
непригодность, перед сливом в канализацию должны быть
предварительно разбавлены водой в соотношении 1:100.
8.3 Упаковка набора реагентов (первичная: пробирки, флаконы и внешняя:
полиэтиленовые пакеты с замком и коробки из картона) относится к
отходам класса А и утилизируется с бытовыми отходами.
9 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
9.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора требованиям
технических условий при соблюдении условий транспортирования,
хранения и эксплуатации, установленных техническими условиями.
9.2 Срок годности набора - 12 месяцев при соблюдении всех условий
транспортирования, хранения и эксплуатации.
10 Символы, используемые при маркировке комплекта реагентов
|lVD| Только для in vitro диагностики
1 Температурный диапазон
Количество определений
2 Г оден до
Il o t I Серия набора
Дата производства
С И Содержит инструкцию по применению
iREFl Каталожный номер
i J Адрес производителя
Не допускается воздействие солнечного света
--- стр. 29 ---
Инструкция по применению Лист 29
ПРОБА-МЧ Листов 30
11 Символы и обозначения опасности при маркировке комплекта реагентов
А Осторожно! Обратитесь к инструкции по применению
<§> Легковоспламенимое
<>> Вызывает раздражение глаз
Содержит азид натрия не более 0,06%
12 Адрес для обращения
По вопросам, касающимся качества набора реагентов, следует обращаться к
официальному представителю производителя по адресу:
ООО «ДНК-Технология», 117587, г. Москва, Варшавское шоссе, д. 125 ж, к.6.
тел./факс +7 (495) 640-17-71, www.dna-technologv.ru
Служба клиентской поддержки; 8 (800) 200-75-15 (звонок по России бесплатный),
E-mail: hotline@.dna-technologv.ru
Анкета для осуществления обратной связи находится на сайте компании
«ДНК-Технология»: http://www.dna-technology.ru/custonier__support/
Адрес производителя и место производства:
ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, 117246, г. Москва, Научный проезд, д. 20, стр.4
Ведущий научный сотрудник
ООО «НПФ ДНК-Технология»,
кандидат биологических наук /li
7 / i
Д.Д. Абрамов
«_^» 2017 г.
СОГЛАСОВАНО
Директор ФГБУ «НЦАГиП
им. В.И. Кулакова» Минздрава России,
академик РАН, профессор
--- стр. 30 ---
^ ДНКТЕХНОЛОГИЯ Инструкция по применению Лист 30
ПРОБА-МЧ Листов 30
Приложение 1
Схема выделения при использовании набора в фасовке для ручного дозирования
ПРОБА-МЧ-НК
ПРОБА-МЧ-РАПИДПлазма крови
Биоматериал,
кроме плазмы
крови
Клинический
образец 200 мкл 100 мкл
1. Лизис
(комнатная
температура от
18 °С до 25 °С) с О р
Клинический образец +
бОО мкл лизирующего раствора
Клинический
образец +
250 мкл
лизирующего
раствора
Перемешивание 10 мин
2. Связывание
РНК/ДНКс
сорбентом
(комнатная
температура от
18 °С до 25 °С)
с | р
300 мкл
связывающего
раствора
+
20 мкл сорбента
230 мкл
связывающего
раствора
-ь
20 мкл сорбента
165 мкл сорбента
Перемешивание 10 мин 5 мин
с V
Осаждение сорбента
(комнатная температура от 18 °С до 25 °С, 7 мин)
с О
Отбор надосадочной жидкости
('не вынимать ппобипки ш мор.нитнпео штатива).
3. Промывка
Проба-МЧ-НК
- 3 раза,
Проба-МЧ“Рапид
-1 раз!
800/800/800 мкл
промывочного
раствора
900/500/500 мкл
промывочного
раствора
250 мкл
промывочного
раствора
(один раз!)
Перемешивание 30 с
с : Р
Осаждение сорбента
(комнатная температура от 18 °С до 25 ®С, 2 мин)
Отбор надосадочной жидкости
('не вынимать пппбигжи ич ма;>нитнпрп штатива)
4. Элюция
РНК/ДНК
(75 ®С, 15 мин)
30-300 мкл
элюирующего
раствора
30-300 мкл
элюирующего
раствора
100-300 мкл
элюирующего
раствора
О
75 - Н
Прогрев
75 “С, 15 мин
не выполняется
центрифуга
- вортекс -
центрифуга
Осаждение
сорбента
(комнатная
температура от
18 °С до 25 “С,
1-3 мин)
с Р
Отбор раствора нуклеиновых кислот
(не вынимать пробирки из маенитноеп штатива)