Набор реагентов с принадлежностями для количественного иммуноферментного определения свободного Т4 в сыворотке крови человека "ТироидИФА-свободный Т4" по ТУ 21.20.23-221-98539446-2016 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2011/11311 от 12.07.2011 · класс риска 1

Производитель: ООО "Компания Алкор Био" (Россия)

Вид изделия: Свободный тироксин ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 418 контрактов, медианная цена за единицу 7 543 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммуно-
ферментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-
свободный Т4»
, < ^ ^я& Щ е ? ж д а ю »
директор 
)0/д1Сёв§пднЙя Био»
" о^^^'-Шолынцев Д.Г.
2017 г.
у
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ  
Медицинского изделия для диагностики in vitro
Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофермент- 
ного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека
«ТироидИФА-свободный Т4»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «ТироидИФА-свободный Т4» предназначен для количественного 
иммуноферментного определения свободного тироксина (Т4) в сыворотке крови.
1.2. Т4 — тироидный гормон с молекулярной массой 777 Да, синтезируется щитовидной 
железой. Количественное определение уровня Т4 в крови имеет диагностическое значение при 
оценке функционального состояния щитовидной железы. В сыворотке крови Т4 в основном нахо­
дится в связанном состоянии. Основными тироксин-связывающими белками (ТСБ) сыворотки яв­
ляются: тироксин-связывающий глобулин (ТСГ), тироксин-связывающий преальбумин (ТСПА) и 
альбумин. Концентрация гормона, не связанного с белками (свободный Т4), очень мала — при­
близительно 0,03% от концентрации общего циркулирующего гормона. Считается, что биологиче­
ски активным является именно свободный гормон.
Концентрация свободного Т4 не зависит от уровня связывающих белков и остается в преде­
лах нормы как при повышенных (врожденная патология, беременность, использование оральных 
эстрогенов и контрацептивов), так и при пониженных уровнях ТСГ (врожденная патология, ис­
пользование андрогенов или салицилатов, почечная недостаточность), а также в случае пониже­
ния связывающей способности белков (использование салицилатов). Таким образом, уровень 
свободного Т4 отражает истинный тироидный статус. Его концентрация превышает уровень 
нормы при гиперфункции щитовидной железы или в результате употребления препаратов, со­
держащих тироксин. Уровень свободного Т4 находится ниже нормы при гипофункции щитовид­
ной железы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
В наборе «ТироидИФА-свободный Т4» использован вариант конкурентного твердофазного 
иммуноферментного анализа. В лунках, при добавлении исследуемого образца и конъюгата Т4- 
пероксидаза, во время инкубации устанавливается равновесие между конъюгатом и свободным Т4 
сыворотки крови в процессе связывания с антителами, иммобилизованными на внутренней 
поверхности лунок.


--- стр. 2 ---
■  Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
Несвязавшиеся компоненты удаляются промывкой. Количество связанного антителами 
конъюгата обратно пропорционально количеству свободного Т4 в исследуемом образце 
(Рисунок 1).
ми Равновесие между свободной и  связан­
ной фракциями Т4
Рисунок 1. Схема анализа
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит окрашивание раствора в лунках. Степень 
окраски обратно пропорциональна концентрации свободного Т4 в анализируемых пробах. После 
измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика 
рассчитывается концентрация свободного Т4 в исследуемых образцах.
2.2. Состав набора
Набор «ТироидИФА-свободный Т4» выпускается в двух комплектациях ^
Комплектация №1: на 96 определений при проведении анализа вручную в дубликатах 40 
неизвестных, 6 калибровочных проб, одной пробы контрольной сыворотки и одной пробы для 
определения оптической плотности раствора ТМБ при использовании всего комплекта стрипов 
одновременно.
Комплектация №2: на 96 определений при проведении анализа на автоматическом анализа­
торе ««Alisei Q.S.» SEAC, Италия (далее «Alisei») в монопликатах 88 неизвестных, 6 калибровоч­
ных проб, одной пробы контрольной сыворотки и одной пробы для определения оптической 
плотности раствора ТМБ при использовании всего комплекта стрипов одновременно.


--- стр. 3 ---
Обратите внимание, при каждой постановке анализа обязательно нужно определять опти­
ческие плотности (ОП) калибровочных проб и раствора ТМБ в соответствии со схемой марки­
ровки лунок (и. 7.2.1.1.) ■
Примечание: в случае дробного применения набор может быть использован только в те­
чение одного месяца после вскрытия компонентов набора.
Основной состав;
• комплект из двенадцати 8-луночных стрипов в рамке с иммобилизованными на 
внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к тирокеину, маркирован «Стрипы 
с моноклональными антителами к тироксину» — 1 упаковка;
• калибровочные пробы (КП), содержащие известные количества свободного Т4. 
Флаконы маркированы «Калибровочная проба №1», «Калибровочная проба №2», 
«Калибровочная проба №3», «Калибровочная проба №4», «Калибровочная проба №5», 
«Калибровочная проба №6»; точные значения концентраций свободного Т4 в калибровочных 
пробах указаны на этикетках флаконов и в паспорте набора реагентов -  6 или 8* флаконов 
(жидкости по 0,5 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
• контрольная сыворотка с известным содержанием свободного Т4, маркирована 
«Контрольная сыворотка» -  1 или 2 флакона* (жидкости по 0,5 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
*Примечание: дополнительные флаконы калибровочных проб №3, №4 и контрольной сы­
воротки предназначены для рекалибрации по референсной калибровочной кривой при по­
становке на анализаторе «Alisei». За более подробной информацией обращайтесь к инст­
рукции к анализатору «Alisei».
• конъюгат Т4-пероксидаза, маркирован «Конъюгат Е» -  1 флакон (18 мл);
• концентрированный водно-солевой раствор для промывки лунок, маркирован «Буфер 
Р»- 2 флакона (по 14 мл) или 1 флакон (50 мл) в зависимоети от варианта комплектации (Табли­
ца 1);
• раствор тетраметилбензидина, маркирован «Раствор ТМБ» -  1 флакон (14 мл);
• стоп-реагент [3,59% раствор соляной кислоты (ГОСТ 3118-77, ГОСТ 14261-77)], 
маркирован «Стоп-реагент» — 1 флакон (14 мл) или 1 флакон (19 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1).
^^Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
' Допускается постановка анализа на других автоматических анализаторах для ИФА открытого типа. 
За информацией о необходимой комплектации набора и программе проведения анализа обращайтесь к
производителю набора 
тел/факс: (812) 677-8779.
«ТироидИФА-свободный Т4» в ООО «Компания Алкор Био»,


--- стр. 4 ---
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
Принадлежности:
• пакет закрывающийся полиэтиленовый (при упаковке стрипов в пакет из 2-слойного 
полиэтилена)-! шт.
• Буфер Р (2ОХ) для автоматических промывочных устройств (14 мл)- 1 шт.*
• Буфер Р (20Х) для автоматических промывочных устройств (50 мл)- 1 шт.*
• Буфер Р (20Х) для автоматических промывочных устройств (250 мл)- 1 шт.*
• Буфер Р (20Х) для автоматических промывочных устройств (500 мл)- 1 шт.*
• Буфер Р (20Х) для автоматических промывочных устройств (1000 мл)- 1 шт.*
• одноразовая ванночка - 2 шт.*
• одноразовый наконечник - 16 шт.*
*-состав поставляемых с набором принадлежностей определяется заказчиком.
Таблица 1
Кат. номер 100-09 100-09А
Название компонента Комплектация №1 Комплектация №2
Комплект стрипов в рамке 1 шт 1 шт
Комплект калибровочных проб 6 фл (жидкости по 
0,5 мл)
8 фл (жидкости по 
0,5 мл)
Контрольная сыворотка 1 фл (жидкость 
0,5 мл)
2 фл (жидкости по 
0,5 мл)
Конъюгат Е 1 фл - 18 мл 1 фл -18 мл
Концентрированный водно-солевой 
раствор для промывки лунок 2 фл по 14 мл 1 фл- 50 мл
Раствор ТМБ 1 фл- 14 мл 1 фл- 14 мл
Стоп-реагент 1 фл- 14 мл 1 фл по 19 мл
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Перекрестная реакция антител к тироксину с другими тироидами 
приведена в Таблице 2.
Таблица 2
Тироид Перекрестная реакция, %
L-Тироксин 100,0
L-Трийодтиронин 8,0
L-Дийодтирозин 0,001
3.2. Коэффициент вариации результатов определения свободного Т4 в одном и том же 
образце сыворотки крови человека с использованием набора «ТироидИФА-свободный Т4» не 
превьппает 8%.
3.3. Линейность. Зависимость концентрации свобсдаого Т4 в образцах сыворотки крови при 
разведении их калибровочной пробой №1 имеет линейный характер в диапазоне концентраций 
калибровочных проб №2 - №6 и составляет 90-110%.
3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» 
свободного Т4 — проверка соответствия значения определяемой концентрации свободного Т4 
расчетной величине, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сьшоротки и 
калибровочной пробы №4. Процент открытия составляет 90-110%.


--- стр. 5 ---
►Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
3.5. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентрация 
свободного Т4 в сыворотке крови человека не превьппает 1,0 пмоль/л.
3.6. Диапазон ожидаемых значений. Содержание свободного Т4 измеряли в сыворотке 
крови, взятой с 9 до 11 часов у 200 здоровых лиц в возрасте 18-45 лет. Диапазон измеренных 
концентраций составил 10,0-23,2 пмоль/л.
Диапазон ожидаемых значений зависит от многих факторов: специфичности метода, 
особенностей исследуемой популяции, точности метода в конкретной лаборатории. По этой 
причине каждой лаборатории рекомендуется использовать предоставленные изготовителем 
значения только до тех пор, пока специалистами лаборатории не будут определены диапазоны 
ожидаемых значений, характерных для конкретной популяции в месте расположения 
лаборатории.
Примечание: в наборе «ТироидИФА-свободный Т4» значения концентраций калибровоч­
ных проб выражены в пмоль/л. Для пересчета концентраций в нг/л необходимо значение концен­
трации в пмолъ/л умножить на 0, 777.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора — класс 1 (согласно Приказу Министерства 
здравоохранения РФ №4н от 06.06.2012 г.).
4.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
4.3. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории ме­
дицинские. Требования безопасности».
4.4. Допускать к работе с набором только специально обученный персонал.
4.5. Перед началом работы ознакомиться с инструкцией и применять набор строго по 
назначению.
4.6. Стоп-реагент представляет собой 3,59 % раствор соляной кислоты. Избегать 
разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу 
и слизистые необходимо промыть пораженный участок большим количеством проточной 
воды.
4.7. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые 
перчатки, разрешенные к применению на территории РФ, т.к. производные крови, входяпдие в 
состав набора, и исследуемые образцы являются потенциально инфицированным материалом, 
способным длительное время сохранять и передавать возбудителей различных вирусных 
инфекций.
4.8. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, 
должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно.
4.9. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в 
помещениях, предназначенных для работы с наборами.
4.10. Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя дезинфици­
рующие средства в соответствии с МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, пред- 
стерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.11. Удалять неиспользованные реактивы в соответствии с требованиями СанПиН 
2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требованшт к обращению с медицинскими отхо­
дами».


--- стр. 6 ---
4.12. Все использованные одноразовые материалы и остатки образцов должны быть под­
вергнуты обработке дезинфицирующими средствами с последующей утилизацией в соответствии 
с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обраще­
нию с медицинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, пред- 
стерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.13 .После использования стрипы, калибраторы, контроли, образцы и все расходные ма­
териалы, которые контактировали с образцами во время обработки, хранения или анализа (фла­
коны, перчатки, наконечники и т.д.) должны собираться отдельно и стерилизоваться в автоклаве 
с последующей утилизацией в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10. Вместо авто­
клавирования наконечники могут быть стерилизованы дезинфицирующим средством, после ути­
лизированы в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10.
4.14. Во время процедуры ручной промывки планшета содержимое лунок необходимо вы­
брасывать в контейнер с дезинфицирующим раствором.
4.15. Не использовать набор по истечении срока годности.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
• спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую2плотность раствора в лунках при длинах волн 450 нм и 405 нм ;
• прибор для встряхивания рамки со стрипами (термостатируемый шейкер), позволяю- 
щий производить встряхивание со скоростью 400-800 об/мин при температуре +37°С ;
• пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками с изменяе- 
мьм объемом отбора жидкостей: на 5-50 мкл; ча 20-200 мкл; на 100-1000 мкл; 
на 1000-5000 мкл;
• автоматическое промывочное устройство (вошер) для иммунологических планшетов ;
• пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со сменными наконечниками, позволяю­
щая отбирать объемы жидкости до 300 мкл;
• цилиндр мерный, позволяющий отмерять 50-500 мл;
• стакан стеклянный подходящего объема; 
вода дистиллированная; 
бумага фильтровальная; 
перчатки резиновые или пластиковые;
1% раствор гипохлорита натрия или 6% раствор перекиси водорода; 
контейнер для дезинфекции;
ванночки для внесения реагентов восьмиканальной пипеткой.
Дополнительно для проведения анализа на анализаторе «Alisei»:
• автоматический иммуноферментный анализатор «Alisei»;
• J
• многоцелевые полипропиленовые пробирки 12x75 вместимоетью 5 мл;
• концентрированный водный раствор Триала, 5000-кратный концентрат, маркирован 
«Триал»^.
^ Допускается использование автоматических анализаторов для ИФА открытого типа с аналогичными ха­
рактеристиками. За информацией о необходимой комплектации набора и программе проведения анализа 
обращайтесь к производителю набора «ТироидИФА-свободный Т4» в ООО «Компания Алкор Био», 
тел/факс: (812) 677-8779.
^ Компоненты, не входящие в состав набора, поставляются по отдельному заказу
’ Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке кроои человека «ТироидИФА-свободный Т4»
в


--- стр. 7 ---
►Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6.1. Забор крови из вены осуществляют с соблюдением правил асептики. После форми- 
I рования сгустка сыворотку отделяют путем центрифугирования. После центрифугирования сы­
воротку переносят в отдельную пробирку.
6.2. Для проведения анализа не разрешается использовать плазму крови, гемолизиро- 
I ванную или мутную сыворотку, а также образцы сыворотки, содержащие азид натрия.
6.3. Образцы сыворотки крови разрешается хранить при температуре +2...8°С не более 
2-х суток; при необходимости более длительного хранения рекомендуется аликвотировать обра­
зец и хранить в замороженном виде при температуре -20°С и ниже. Не допускается повторное 
за.мораживание образца.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами необходимо выдержать при комнат­
ной температуре (-1-18...25°С) не менее 30 минут. Вскрыть пакет и переставить на свободную 
рамку необходимое количество стрипов.
7.1.2. Калибровочные пробы и контрольная сыворотка готовы к использованию.
7.1.3. Конъюгат готов к использованию.
7.1.4. Промывочный раствор. Необходимое количество буфера Р развести дистиллирован­
ной водой в 20 раз.
Например: 14 мл буфера Р + 266 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать, из­
бегая пенообразования.
7.1.5. Раствор тетраметилбензидина (ТМБ) готов к использованию.
7.1.6. Стоп-реагент готов к использованию.
7.1.7. Рабочий раствор Триала. Необходимое количество концентрированного раствора 
Триала развести дистиллированной водой в 5000 раз.
Например: 1 мл Триала + 4999 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать, избегая 
пенообразования.
7.1.8. Все реагенты перед проведением анализа должны быть тщательно перемещаны и 
доведены до комнатной температуры.
7.2. Постановка анализа
7.2.1. Ручная постановка
На странице 13 цриведена схема проведения анализа при ручной постановке.
7.2.1.1. Составить протокол маркировки лунок. Лунки промаркировать следующим обра­
зом:
А1, А2 -  № 1 -  для измерения величины оптической плотности раствора ТМБ;
В1, В2 - № 2 - для измерения величины оптической плотности КП №1;
С1, С2 -  № 3 -  для измерения величины оптической плотности КП №2;
D1, D2 - № 4 -  для измерения величины оптической плотности КП №3;
Е1, Е2 - № 5 -  для измерения величины оптической плотности КП №4;
F1, F2 -  № 6 -  для измерения величины оптической плотности КП №5;
G1, G2 - № 7 -  для измерения величины оптической плотности КП №6;


--- стр. 8 ---
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер-
ментного определения свободного тироксина в сыворотке крови человека «ТироидИФА-свободный Т4»
Н1, Н2 -  № 8 -  для измерения величины оптической плотности контрольной сыворотки.
7.2.1.2. Внести в соответствующие лунки по 20 мкл калибровочных проб и контрольной сы­
воротки, в оставшиеся лунки -  по 20 мкл исследуемой сыворотки крови в дубликатах.
Примечание: общее время внесения калибровочных проб, контрольной сыворотки и иссле­
дуемых сывороток крови не должно превышать 15 минут, иначе время инкубации раз­
ных образцов будет значительно различаться, что приведет к неправильным результа­
там.
7.2.1.3. Во все лунки, кроме лунок А1 и А2, внести по 150 мкл конъюгата.
7.2.1.4. Инкубировать стрипы в течение 60 минут при встряхивании в термостатируемом 
шейкере при температуре +37°С со скоростью 500-800 об/мин.
7.2.1.5. По окончании инкубации удалить содержимое лунок в контейнер с дезинфицирую­
щим раствором (1% раствором гипохлорита натрия или 6% раствором перекиси водорода) и 
промыть лунки четыре раза. При каждой промывке во все лунки добавлять по 300 мкл про­
мывочного раствора, приготовленного по п. 7.1.4., встряхнуть рамку на шейкере в течение 
5-10 секунд с последующим декантированием. После последнего декантирования тща­
тельно удалить остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со стрипами в перевер­
нутом положении по фильтровальной бумаге.
Допускается промьшка лунок при помощи автоматического промьшочного устройства.
7.2.1.6. Немедленно внести во все лунки по 100 мкл раствора ТМБ. Инкубировать стрипы в 
темноте при комнатной температуре (+18...25°С) без шейкирования в течение 15-30 ми­
нут в зависимости от степени развития окраски или в темноте в течение 10 минут при 
встряхивании в термостатируемом шейкере при температуре +37 °С со скоростью 500- 
800 об/мин.
7.2.1.7. Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и 
раствор ТМБ, по 100 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции, встряхнуть 
рамку аккуратным постукиванием в течение 20-30 секунд или перемешать на шейкере в 
течение 1-2 минут при комнатной температуре.
7.2.1.8. Если невозможно измерить оптическую плотность в лунках планшета непосредст­
венно после выполнения п. 7.2.1.7., то следует иметь в виду, что окраска в лунках план­
шета стабильна не более 20 минут при температуре +18...25°С.
Примечание: максимальная оптическая плотность не должна превышать пределов линей­
ного измерения спектрофотометра. Рабочий диапазон спектрофотометра необходимо уточнять  
в паспорте прибора. Рекомендуемая максимальная оптическая плотность не более 2,5 ед. ОП.
7.2.2. Постановка на анализаторе «Alisei»
Анализатор «Alisei» имеет полностью автоматизированный процесс проведения анализа: 
внесение реагентов, промывка, инкубирование, измерение оптической плотности, обработка ре­
зультатов. Программа определения концентрации свободного Т4 введена в память анализатора.
7.2.2.1. В случае дробного применения набора необходимо извлечь калибровочные пробы 
и контрольную сыворотку из автоматического анализатора после их внесения в лунки всех план­
шетов, участвующих в постановке, и, плотно закрыв крышками, убрать в холодильник. Не допус­
кается повторное использование калибровочных проб и контрольной сыворотки, находившихся 
на борту анализатора в течение всей сессии, вне зависимости от ее длительности. Остальные 
жидкие реагенты убрать в холодильник сразу по окончании сессии. Эти ограничения обусловле­
ны естественным испарением жидкостей, приводящим к получению некорректных результатов 
измерения при последующем использовании реагентов.