Набор реагентов с принадлежностями для количественного иммуноферментного определения пролактина в сыворотке крови человека ("ИФА-пролактин") по ТУ 21.20.23-201-98539446-2017 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2011/10276 от 05.03.2011 · класс риска 1

Производитель: ООО "Компания Алкор Био" (Россия)

Вид изделия: Пролактин ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 202 контракта, медианная цена за единицу 8 295 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
*
альныи директор 
ания Алкор Био» 
Полынцев Д.Г. 
2017 г.
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ 
Медицинского изделия для диагностики in vitro 
Набора реагентов с принадлежностями для количественного иммунофер- 
ментного определения пролактина в сыворотке крови человека
«ИФА-пролактин»
1.НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «ИФА-пролактин» предназначен для количественного определения про­
лактина в сыворотке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Пролактин является полипептидным гормоном гипофизарного происхождения с молеку­
лярной массой около 23 000 Да. Определение концентрации пролактина имеет диагностическое 
значение при нарушении функций половых желез у обоих полов. У женщин при гиперпролактине­
мии может отмечаться галакторея, аменорея или ряд других нарушений менструального цикла в то 
время как мужчины могут страдать потерей либидо или импотенцией. Измерение концентрации 
циркулирующего пролактина важно как первичный тест на бесплодие.
Патологическая гиперпролактинемия имеет место при гипотиреоидизме, почечной недоста­
точности и у лиц с секретирующей пролактин опухолью гипофиза — пролактиномой.
Физиологическое повышение уровня пролактина имеет место во время беременности, лакта- 
щи, сна и при физическом и эмоциональном стрессе.
2.ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1.Принцип действия
В наборе «ИФА-пролактин» использован «сэндвич»-вариант твердофазного иммунофермент- 
юго анализа. Для реализации этого варианта использованы два моноклональных антитела с различ- 
юи эпитопной специфичностью к пролактину. Одно из них иммобилизовано на твердой фазе (внут­
ренняя поверхность лунок), второе конъюгировано с пероксидазой хрена. В лунках, при добавлении 
[сследуемого образца и конъюгата анти-пролактин-пероксидаза, во время инкубации одновременно 
роисходит иммобилизация пролактина, содержащегося в исследуемом образце, и связывание обра- 
овавшегося комплекса с конъюгатом.
Несвязавшиеся компоненты удаляются промывкой. Количество связавшегося конъюгата прямо 
ропорционально количеству пролактина в исследуемом образце (Рисунок 1).


--- стр. 2 ---
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
иммуноферментного определения пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пролактин»
анти-пролактин-пероксидазаПланшет с антителами 
к пролактину
Рисунок 1. Схема анализа
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит окрашивание раствора в лунках. Степень 
окраски прямо пропорциональна концентрации пролактина в анализируемых пробах. После измере­
ния оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается 
концентрация пролактина в исследуемых образцах.
2.2.Состав набора
Набор «ИФА-пролактин» выпускается в двух комплектациях1:
Комплектация №1: на 96 определений при проведении анализа вручную в дубликатах 40 неиз­
вестных, 6 калибровочных проб, одной пробы контрольной сыворотки и одной пробы для определе­
ния оптической плотности раствора ТМБ при использовании всего комплекта стрипов одновременно.
Комплектация №2: на 96 определений при проведении анализа на автоматическом анализаторе 
««Alisei Q.S.» SEAC, Италия (далее «Alisei») в монопликатах 88 неизвестных, 6 калибровочных проб, 
одной пробы контрольной сыворотки и одной пробы для определения оптической плотности раствора 
ТМБ при использовании всего комплекта стрипов одновременно.
Обратите внимание, при каждой постановке анализа обязательно нужно определять оптиче­
ские плотности (ОП) калибровочных проб и раствора ТМБ в соответствии со схемой маркировки лу­
нок (и. 7.2.1.1.).
Примечание: в случае дробного применения набор может быть использован только в течение  
одного месяца после вскрытия компонентов набора.
Основной состав:
• комплект из двенадцати 8-луночных стрипов в рамке с иммобилизованными на внутренней поверх­
ности лунок моноклональными антителами к пролактину, маркирован «Стрипы с моноклональными 
антителами к пролактину» - 1 упаковка;
•калибровочные пробы (КП), аттестованные по Третьему международному стандарту пролактина че­
ловека WHO 84/500, содержащие известные количества пролактина. Флаконы маркированы «Калиб­
ровочная проба №1», «Калибровочная проба №2», «Калибровочная проба №3», «Калибровочная про­
ба №4», «Калибровочная проба №5», «Калибровочная проба №6»; точные значения концентраций
1  Допускается постановка анализа на других автоматических анализаторах для ИФА открытого типа, 
за информацией о необходимой комплектации набора и программе проведения анализа обращайтесь 
к производителю набора «ИФА-пролактин» в ООО «Компания Алкор Био», тел/факс: (812) 677-8779.
2


--- стр. 3 ---
/
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
иммуноферментного определения пролактина в^сыворотке крови человека «ИФА-пролактин»
пролактина в калибровочных пробах указаны на этикетках флаконов- 6 или 8* флаконов (жидкости 
по 0,5 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1) и в паспорте набора реагентов;
•контрольная сыворотка с известным содержанием пролактина, маркирована «Контрольная сыворот­
ка» 1 флакон или 2 флакона* (жидкость 0,5 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица
^ /9
римечание: дополнительные флаконы калибровочных проб №2, №5 и контрольной сыворотки 
предназначены для рекалибрации по референсной калибровочной кривой при постановке на анализа­
торе «Ahsei». За более подробной информацией обращайтесь к инструкции к анализатору «Alisei».
• конъюгат анти-пролактин-пероксидаза, маркирован «Конъюгат Е»— 1 флакон (14 мл);
• концентрированный водно-солевой раствор для промывки лунок, маркирован «Буфер Р» — 
флакона (по 14 мл) или 1 флакон (50 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
• раствор тетраметилбензидина, маркирован «Раствор ТМБ» — 1 флакон (14 мл);
•стоп- реагент [ 3,59% раствор соляной кислоты (ГОСТ 3118-77, ГОСТ 14261-77)], маркирован
« топ-реагент» — 1 флакон (14 мл) или 2 флакона (по 19 мл) в зависимости от варианта комплекта­
ции (Таблица 1).
Принадлежности*:
•пакет закрывающийся полиэтиленовый (при упаковке стрипов в пакет из 2- слойного полиэтилена)- 
1 шт.; '
•одноразовая ванночка (фирма ООО «НПО Диор», Россия - 2 шт;
•одноразовый наконечник (фирма TermoFisher Scientific, Россия, кат.№ 9400302) - 16 шт.
Примечание, состав поставляемых с набором принадлежностей определяется заказчиком.
Кат. номер 100-04
1аилица
100-04А
Название компонента Комплектация №1 Комплектация №2
Комплект
стрипов в рамке 1 шт 1 шт
Комплект калибровочных проб 6 фл (жидкости по 0,5 мл) 8 фл (жидкости по 0,5 мл)
Контрольная сыворотка 1 фл (жидкость 0,5 мл) 2 фл (жидкости по 0,5 мл)
Конъюгат Е 1 фл- 14 мл 1 фл -14 мл
Концентрированный водно-солевой
раствор для промывки 2 фл по 14 мл 1 фл - 50 мл
лунок
Раствор
ТМБ 1 фл- 14 мл 1 фл- 14 мл
Стоп-реагент 1 фл- 14 мл 2 фл по 19 мл
3


--- стр. 4 ---
f Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
иммуноферментного определения пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пполактин»
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции обоих моноклональных антител к 
пролактину с гормоном роста, плацентарным лактогеном, тиреотропным, фолликулостимулирую­
щим и лютеинизирующим гормонами человека.
3.2. Коэффициент вариации результатов определения пролактина в одном и том же образце 
сыворотки крови человека с использованием набора «ИФА-пролактин» не превышает 8%.
3.3. Линейность. Зависимость концентрации пролактина в образцах сыворотки крови при раз­
ведении их калибровочной пробой №1 имеет линейный характер в диапазоне концентраций калиб­
ровочных проб №2 - №6 и составляет 90—110%.
ЗД.Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» пролакти­
на — проверка соответствия значения определяемой концентрации пролактина расчетной величине, 
полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 
№3. Процент открытия составляет 90-110%.
3.5.Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентрация про­
лактина в сыворотке крови человека не превышает 50 мМЕ/л.
3.6. Хук-эффект высоких концентраций. В наборах реагентов, основанных на «сэндвич»- 
принципе анализа, при высоких концентрациях аналита зависимость величины оптической плотно­
сти от концентрации становится обратно пропорциональной (так называемый хук-эффект высоких 
концентраций). При использовании набора «ИФА-пролактин» хук-эффект не обнаружен вплоть до 
концентрации пролактина 100 000 мМЕ/л.
3.7. Диапазон ожидаемых значений. Концентрация пролактина в сыворотке крови у 
120 здоровых доноров находилась в интервале: для мужчин 105-540 мМЕ/л, для женщин 67- 
726 мМЕ/л.
Диапазон ожидаемых значений зависит от многих факторов: специфичности метода, особен- 
юстей исследуемой популяции, точности метода в конкретной лаборатории. По этой причине каждой 
1аборатории рекомендуется использовать предоставленные изготовителем значения только до тех 
юр, пока специалистами лаборатории не будут определены диапазоны ожидаемых значений, харак- 
ерных для конкретной популяции в месте расположения лаборатории.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора — класс 1 (согласно Приказу Министерства 
здравоохранения РФ №4н от 06.06.2012 г.).
4.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
4.3. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицин­
ские. Требования безопасности».
4.4. Допускать к работе с набором только специально обученный персонал.
4.5. Перед началом работы ознакомиться с инструкцией и применять набор строго по назна­
чению.
4.6. Стоп-реагент представляет собой 3,59% раствор соляной кислоты. Избегать разбрызгива­
ния и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу и слизистые необ­
ходимо промыть пораженный участок большим количеством проточной воды.
4.7. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчат­
ки, разрешенные к применению на территории РФ, т.к. производные крови, входящие в состав набо-
4


--- стр. 5 ---
ж
/
ра, и исследуемые образцы являются потенциально инфицированным материалом, способным дли­
тельное время сохранять и передавать возбудителей различных вирусных инфекций.
4.8. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны 
быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно. Поскольку ИФА чувствителен 
к ионам металлов, контакт металлических предметов с компонентами набора недопустим.
4.9. Для обработки посуды и оборудования рекомендуется использовать дезинфицирующие 
средства на основе третичных аминов, четвертичных аммониевых соединений (ЧАС) или спиртов и 
разрешенные к применению на территории РФ. Использование дезинфицирующих средств на осно­
ве активного кислорода и хлора возможно лишь на предстерилизационном этапе, с последующей 
термической стерилизацией.
4.10. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в помеще­
ниях, предназначенных для работы с наборами.
4.11. Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя дезинфици­
рующие средства в соответствии МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстери- 
лизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.12. Удалять неиспользованные реактивы в соответствии с требованиями СанПиН 
2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отхода­
ми».
4.13. Все использованные одноразовые материалы и остатки образцов должны быть под­
вергнуты обработке дезинфицирующими средствами с последующей утилизацией в соответствии с 
требованиями СП 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с меди­
цинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, пред стерилизацион­
ной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.14. После использования стрипы, калибраторы, контроли, образцы и все расходные мате­
риалы, которые контактировали с образцами во время обработки, хранения или анализа (флаконы, 
перчатки, наконечники и т.д.) должны собираться отдельно и стерилизоваться в автоклаве с после­
дующей утилизацией в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10. Вместо автоклавирова­
ния наконечники могут быть стерилизованы дезинфицирующим средством, после утилизированы в 
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10.
4.15. Во время процедуры ручной промывки планшета содержимое лунок необходимо вы­
брасывать в контейнер с дезинфицирующим раствором на основе третичных аминов, ЧАС или 
спиртов.
4.16. Не использовать набор по истечении срока годности. 5
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
•спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность 
(аствора в лунках при длинах волн 450 нм и 405 нм;
•прибор для встряхивания рамки со стрипами (термостатируемый шейкер), позволяющий про­
водить встряхивание со скоростью 400-800 об/мин при температуре +37 °С;
•автоматическое промывочное устройство (вошер) для иммунологических планшетов2;
•пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными одноразовыми наконечниками3 с 
вменяемым объемом отбора жидкостей: на 5-50 мкл; 20-200 мкл; 100-1000 мкл; 1000-5000 мкл;
•пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со сменными одноразовыми наконечниками3, 
юзволяющая отбирать объемы жидкости до 300 мкл;
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
иммуноферментного определения пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пролактин»
5


--- стр. 6 ---
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
опРеДеления пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пролактин>
•цилиндр мерный, позволяющий отмерять 50-500 мл;
•стакан стеклянный подходящего объема;
•вода дистиллированная или очищенная деионизованная2  *  4 * ;
•бумага фильтровальная;
•перчатки резиновые или пластиковые;
•дезинфицирующий раствор на основе третичных аминов, ЧАС или спиртов; 
•контейнер для дезинфекции;
•ванночки для внесения реагентов восьмиканальной пипеткой.
Дополнительно для проведения анализа на анализаторе «Alisei»:
•автоматический иммуноферментный анализатор «Alisei»5;
•многоцелевые полипропиленовые пробирки612x75 вместимостью 5 мл;
•концентрированный водный раствор Триала, 5000-кратный концентрат, маркирован «Триал»6.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6 Л .Забор крови из вены осуществляют с соблюдением правил асептики. После формирования 
сгустка сыворотку отделяют путем центрифугирования. После центрифугирования сыворотку пере­
носят в отдельную пробирку.
6.2.Для проведения анализа не следует использовать плазму крови, гемолизированную или 
мутную сыворотку, а также образцы сыворотки, содержащие азид натрия.
6.3.Образцы сыворотки крови разрешается хранить при температуре +2...8°С не более 2-х су­
ток; при необходимости более длительного хранения (до 3-х месяцев) рекомендуется аликвотиро- 
вать образец и хранить в замороженном виде при температуре -20°С и ниже. Не допускается по­
вторное замораживание образца.
2При использовании автоматического промывочного устройства необходимо тщательно следить за его состоянием, периодически проверять 
емкости и соединительные шланги для промывочных буферов на наличие микробиологического зароста и других загрязнений, проводить тех­
ническое обслуживание в соответствии с рекомендациями производителя оборудования.
’Повторное использование наконечников не допускается. При внесении каждого образца необходимо использовать новый наконечник.
JB соответствии с ГОСТ 6709-72 «Вода дистиллированная. Технические условия» необходимо периодически контролировать качество воды, 
используемой для приготовления растворов.
’Допускается использование автоматических анализаторов для ИФА открытого типа с аналогичными характеристиками, за информацией о 
необходимой комплектации набора и программе проведения анализа обращайтесь к производителю набора «ИФА-пролактин» в ООО «Ком­
пания Алкор Био», тел/факс: (812)677-8779
6Компоненты, не входящие в состав набора; поставляются по отдельному заказу.


--- стр. 7 ---
* Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
иммуноферментного определения пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пролактин»
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами необходимо выдержать при комнатной 
температуре (+18...25°С) не менее 30 минут. Вскрыть пакет и переставить на свободную рамку необ­
ходимое количество стрипов.
7.1.2. Калибровочные пробы и контрольная сыворотка готовы к использованию.
7.1.3. Конъюгат готов к использованию.
7.1.4. Промывочный раствор. Необходимое количество буфера Р развести дистиллированной 
или очищенной деионизованной водой в 20 раз.
Например:
14 мл буфера Р + 266 мл воды.
Тщательно перемешать, избегая пенообразования.
7.1.5. Раствор тетраметилбензидина (ТМБ) готов к использованию.
7.1.6. Стоп-реагент готов к использованию.
7.1.7. Все реагенты перед проведением анализа должны быть тщательно перемешаны и дове­
дены до комнатной температуры (+18.. ,25°С).
7.1.8. Рабочий раствор Триала. Необходимое количество концентрированного раствора Триала 
развести дистиллированной или очищенной деионизованной водой в 5000 раз.
Например: 1 мл Триала + 4999 мл воды. Тщательно перемешать, избегая пенообразования.
7.2. Постановка анализа
7.2.1. Ручная постановка
На странице 14 приведена схема проведения анализа при ручной постановке.
7.2.1.1. Составить протокол маркировки лунок. Лунки промаркировать следующим образом:
А1,А2 — №1 - для измерения величины оптической плотности раствора ТМБ;
В1,В2 — №2 - для измерения величины оптической плотности КП №1;
Cl, С2 — №3 - для измерения величины оптической плотности КП №2;
D1, D2 — №4 - для измерения величины оптической плотности КП №3;
Е1,Е2 — №5 - для измерения величины оптической плотности КП №4;
FI, F2 — №6 - для измерения величины оптической плотности КП №5;
Gl, G2 — №7 - для измерения величины оптической плотности КП №6;
HI, Н2—№8 - для измерения величины оптической плотности контрольной сыворотки.
7.2.1.2. Во все лунки, кроме лунок А1 и А2, внести по 100 мкл конъюгата.
7.2.1.3. Внести в соответствующие лунки по 20 мкл калибровочных проб и контрольной сыво­
ротки, в оставшиеся лунки - по 20 мкл исследуемой сыворотки крови в дубликатах.
Примечание: общее время внесения калибровочных проб, контрольной сыворотки и исследуе­
мых сывороток крови не должно превышать 15 минут, иначе время инкубации разных образ­
цов будет значительно различаться, что приведет к неправильным результатам.
7.2.1.4. Инкубировать стрипы в течение 60 минут при встряхивании в термостатируемом  
шейкере при температуре +37°С со скоростью 500-800 об/мин (или в течение 180 минут в термо­
стате при температуре +37°С без шейкирования).
7.2.1.5. По окончании инкубации удалить содержимое лунок в контейнер с дезинфицирующим 
на основе третичных аминов, ЧАС или спиртов и промыть лунки пять раз. При каждой промывке во 
все лунки добавлять по 300 мкл промывочного раствора, приготовленного по п. 7.1.4., встряхнуть
7


--- стр. 8 ---
/
рамку на шейкере в течение 5-10 секунд с последующим декантированием. После последнего декан­
тирования тщательно удалить остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со стрипами в пере­
вернутом положении по фильтровальной бумаге.
Допускается промывка лунок при помощи автоматического промывочного устройства.
7.2.1.6. Немедленно внести во все лунки по 100 мкл раствора ТМБ. . Инкубировать стрипы. 
Возможны 2 варианта инкубации с ТМБ:
• Инкубирование стрипов в темноте в течение 10 минут при встряхивании в термостати-  
руемом шейкере при температуре +37 °С со скоростью 500-800 об/мин.
• Инкубирование стрипов в течение 15-30 минут в темноте без шейкирования при ком­
натной температуре (+18...25 °С).
7.2.1.7. Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и рас­
твор ТМБ, по 100 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции, встряхнуть рамку аккурат­
ным постукиванием в течение 20-30 секунд или перемешать на шейкере в течение 1— 2 минут при 
комнатной температуре.
7.2.1.8. Если невозможно измерить оптическую плотность в лунках планшета непосредственно 
после выполнения п. 7.2.1.7., то следует иметь в виду, что окраска в лунках планшета стабильна не 
более 20 минут при комнатной температуре.
Примечание: максимальная оптическая плотность не должна превышать пределов линейно­
го измерения спектрофотометра. Рабочий диапазон спектрофотометра необходимо уточнять в  
паспорте прибора. Рекомендуемая максимальная оптическая плотность не более 2,5 ед. ОП.
7.2.2. Постановка на анализаторе «Alisei»
Анализатор «Alisei» имеет полностью автоматизированный процесс проведения анализа: внесе­
ние реагентов, промывка, инкубирование, измерение оптической плотности, обработка результатов. 
Программа определения концентрации пролактина введена в память анализатора.
7.2.2.1. В случае дробного применения набора необходимо извлечь калибровочные пробы и 
контрольную сыворотку из автоматического анализатора после их внесения в лунки всех планшетов, 
участвующих в постановке, и, плотно закрыв крышками, убрать в холодильник. Не допускается по­
вторное использование калибровочных проб и контрольной сыворотки, находившихся на борту ана­
лизатора в течение всей сессии, вне зависимости от ее длительности. Остальные жидкие реагенты уб­
рать в холодильник сразу по окончании сессии. Эти ограничения обусловлены естественным испаре­
нием жидкостей, приводящим к получению некорректных результатов измерения при последующем 
использовании реагентов.
7.2.2.2. Для каждой новой серии набора реагентов необходимо построение нового калибровоч­
ного графика с концентрациями калибровочных проб, указанными на этикетках флаконов и в паспор­
те набора реагентов.
7.2.2.3. При каждой постановке рекомендуется определение концентрации пролактина в кон­
трольной сыворотке.
7.2.2.4. Не допускается рекалибрация по калибровочной кривой, полученной на наборе другой
серии.
Инструкция по применению Набора реагентов с принадлежностями для количественного
__£ммунофо^ пролактина в сыворотке крови человека «ИФА-пролактин»
8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
8.1.После выполнения ручной постановки измерить на фотометре вертикального сканирова­
ния оптическую плотность в лунках при длине волны 450 нм. Если значение оптической плотности
8