Набор реагентов для количественного иммуноферментного определения дегидроэпиандростеронсульфата в сыворотке крови человека ("СтероидИФА-ДГЭА-сульфат") по ТУ 9398-215-98539446-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- Планшет с поликлональными антителами к IgG кролика Конъюгат ДГЭА-С- пероксидаза Эндогенны й ДГЭА-С Р исунок 1. Схема анализа Во время инкубации с Т М Б происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски обратно пропорциональна концентрации Д Г Э А -С в анализируемых пробах. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчитывается концентрация Д ГЭ А -С в исследуемых образцах. 2.2. Состав набора: — Ком плект из двенадцати восьмилуночных стрипов в рамке с иммобилизованными на внутренней поверхности лунок поликлональными антителами к IgG кролика, маркирован «Стрипы с антителами к IgG кролика» - 1 упаковка; — калибровочные пробы (К П ), содержащие известные количества Д ГЭ А -С . Точные значения концентраций Д Г Э А -С в калибровочных пробах указаны на этикетках флаконов, ориентировочные - 0 ;0 ,1 ; 0,5; 1; 2,5; Ю м кг/м л - 6 флаконов (лиофилизованные препараты или жидкости по 0,5 мл); — конъю гат ДГЭА-С -пероксидаза, маркирован «Конъю гат Е» - 1 флакон (14 мл); — раствор антител к Д ГЭ А -С , маркирован «Антитела к Д Г Э А -С » ~ 1 флакон (14 мл); — концентрированный водно-солевой раствор для пром ы вки лунок, маркирован «Буфер Р» - 1 флакон (14 мл); — раствор тетраметилбензидина, маркирован «Раствор Т М Б » - 1 флакон (14 мл); — стоп-реагент (1 Н соляная кислота), маркирован «Стоп-реагент» - 1 флакон (14 мл); — контрольная сыворотка с известным содержанием Д Г Э А -С , маркирована «Контрольная сыворотка» - 1 флакон (лиофилизованный препарат или жидкость 0,5 мл); — прозрачный пластиковый пакет с замком (при упаковке стрипов в пакет из 2- слойного полиэтилена). --- стр. 3 --- ЗЛ. Специфичность. Перекрестная реакция антител к Д Г Э А -С с другими стероидами приведена в таблице 1. Таблица 1 3, АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ СТЕРО ИД ДГЭА-С Д Г Э А Перекрестная реакция, % 100 50 Другие родственные стероиды <1 3.2. Коэффициент вариации результатов определения Д Г Э А -С в одном и том же образце сыворотки крови человека с использованием набора «С тероидИ Ф А -Д ГЭ А - сульфат» не превышает 8%. 3.3. Линейность. Зависимость концентрации Д Г Э А -С в анализируемых образцах при разведении их сывороткой крови, не содержащей Д ГЭ А -С , имеет линейный характер в диапазоне концентраций калибровочных проб №2 - №6 и составляет 90-110% . 3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» Д Г Э А -С — проверка соответствия значения определяемой концентрации Д ГЭ А -С расчетной величине, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и К П №3. Процент открытия составляет 90-110% . 3.5. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая набором концентрация Д Г Э А -С в сыворотке крови человека не превышает 0,04 мкг/мл. 3.6. Диапазон ожидаемых значений. Концентрацию Д Г Э А -С измеряли в сыворотке крови, взятой с 9 до И часов, у 40 здоровых м уж чин в возрасте 21-39 лет, 120 здоровых женщ ин в возрасте 19-39 лет в различных фазах менструального цикла, 15 женщин в возрасте 49-65 лет в постменопаузе и 25 беременных женщ ин. Средняя ко н центрация Д Г Э А -С у м уж чин составила 2,7 м кг/м л (1,0-4,2 м кг/м л), у женщ ин в возрасте 19-39 лет - 2,4 м кг/м л (0,8-3,9 мкг/м л), у женщ ин в постменопаузе - 1,35 м кг/м л (0 ,1 - 2,5 мкг/мл), у беременных женщ ин - 0,7 м кг/м л (0,2-1,2 м кг/мл). Диапазон ожидаемых значений зависит от м ногих факторов: специфичности метода, особенностей исследуемой популяции, точности метода в конкретной лаборатории. По этой причине каждой лаборатории рекомендуется использовать предоставленные изготовителем значения только до тех пор, пока специалистами лаборатории не будут определены диапазоны ожидаемых значений, характерных д][я конкретной популяции в месте расположения лаборатории. Примечание: в наборе «СтероидИФА-ДГЭА-сульфат» значения концентраций катбровочных проб выражены в мкг/.ш. Для пересчета концентраций ДГЭА~С в мк\юлъ/л необходимо значение концентрации в; мкг/мл умнолситъ на 2,7. 4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И 4.1. Потенциальный риск применения набора — класс I . 4.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. 4.3. При работе с набором следует соблюдать требования ГО С Т Р 52905-2007 Лаборатории медицинские. Требования безопасности. 4.4. Стоп-реагент представляет собой 1 И раствор соляной кислоты. Избегать разбрызгивания и попадания на ко ж у и слизистые. В случае попадания раствора стоп-реа гента на ко ж у и слизистые необходимо промыть пораженный участок больц[им количеством проточной воды. --- стр. 4 --- 4.5. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. производные крови, входящие в состав набора, и исследуемые образцы являются потенциально инфицированным материалом, способным длительное время сохранять и передавать возбудителей различных вирусных инфекций, 4.6. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны быть соответствуюнщм образом маркированы и храниться отдельно. 4.7. Запрещается прием пищ и, использование косметических средств и курение в помещениях, предназначенных для работы с наборами. 5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы — Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющ ий измерять оптическую плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм; ~ прибор для встряхивания рамки со стрипами (термостатируемый шейкер), позволяющий производить встряхивание со скоростью 400-800 об/мин при температуре +37°С; ^ “ пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками с изменяемым объемом отбора жидкостей: на 5-50 мкл; 40-200 м кл; 200-1000 мкл; 1000- 5000 мкл; — пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со сменными наконечниками, позволяющая отбирать объемы жидкости до 300 мкл; “ цилиндр мерный, позволяющий отмерять 50-500 мл; — стакан стеклянный подходящего объема; — вода дистиллированная; — бумага фильтровальная; — перчатки резиновые или пластиковые; ^ 1 % раствор гипохлорита натрия или 6% раствор перекиси водорода; ” контейнер для дезинфекции; — ванночки для внесения реагентов восьмиканальной пипеткой. 6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы 6.1. Забор крови из вены осуществляют с соблюдением правил асептики. После формирования сгустка сыворотку отделяют путем центрифугирования. После центрифу гирования сыворотку переносят в отдельную пробирку. Для проведения анализа не разрешается использовать плазму крови, гемолизированную или м утную сыворотку, а также образцы сыворотки, содержащие азид натрия. 6.2. Образцы сыворотки крови разрещается хранить при температуре + 2 ...8 °С не более 2 суток; при необходимости более длительного хранения рекомендуется аликвотировать образец и хранить в замороженном виде при температуре -2 0 ^С или ниже. Не допускается повторное замораживание образца. --- стр. 5 --- 7.1. Подготовка реагентов 7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами необходимо выдержать при комнатной температуре (+18...25°С) не менее 30 минут. В скры ть пакет и переставить на свободную рамку необходимое количество стрипов. 7.1.2. Ж идкие калибровочные пробы и контрольная сыворотка готовы к использованию. Для восстановления лиофилизованных калибровочных проб и контрольной сыворотки перед вскрытием флаконов легким постукиванием стряхнуть частицы, прилипшие к стенкам флаконов или к крышкам. О ткрыть флаконы и положить кры ш ки перевернутыми на сухую поверхность. В каждый флакон с калибровочной пробой и контрольной сывороткой внести по 0,5 мл дистиллированной воды и закрыть крыш ками. Выдержать флаконы в течение 10 м инут при комнатной температуре без перемешивания. Затем, аккуратно наклоняя и вращая флаконы, перемешать их содержимое до полного растворения, избегая пенообразования. В течение следующ их 10 м инут выдержать флаконы при комнатной температуре, периодически перемешивая. 7.1.3. Конъю гат Е готов к использованию. Расход конъю гата Е на один стрип составляет 1,15 мл. 7.1.4. Раствор антител к Д ГЭ Л -С готов к использованию. Расход раствора антител к Д ГЭ Л -С на один стрип составляет 1,15 мл. 7.1.5. П ромывочны й раствор. Необходимое количество буфера Р развести дистиллированной водой в 20 раз. Например: 5 мл буфера Р + 95 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать, избегая пенообразования. 7.1.6. Раствор тетраметилбензидина (ТМ Б ) готов к использованию. Расход Т М Б на один стрип составляет 1,15 мл. 7.1.7. Стоп-реагент готов к использованию. Расход стоп-реагента на один стрип составляет 1Д 5 мл. 7.1.8. Все реагенты перед проведением анализа должны быть тщательно перемешаны и доведены до комнатной температуры (+18...25°С ). В приложении 1 приведена схема проведения анализа. 7.2. П о ста н о в ка анализа 7.2Л. Составить протокол маркировки лунок. Л ун ки промаркировать следующим образом: А 1, А 2 - №1 для измерения величины оптической плотности раствора ТМ Б ; В1, В2 - №2 для измерения величины оптической плотности К П №1; С1, С2 - №3 для измерения величины оптической плотности К П №2; D1, D2 - № 4 для измерения величины оптической плотности К П №3; Е1, Е2 - №5 для измерения величины оптической плотности К П №4; F1, F2 - № 6 для измерения величины оптической плотности К П №5; G1, G2 ~ № 7 для измерения величины оптической плотности К П №6; Н 1 , Н 2 - № 8 для измерения величины оптической плотности контрольной сыворотки. 7.2.2. Внести в соответствующие лунки по 50 м кл калибровочных проб и контрольной сыворотки, в оставшиеся лунки по 50 м кл исследуемой сыворотки крови в дубликатах. П рим ечание: общее время внесения калибровочных проб, контрольной сыворотки и исследуемых сывороток крови не должно превышать 15 минут, иначе время инкубации 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА --- стр. 6 --- разных образцов будет значительно различаться, что приведет к неправильным результатам. 7.2.3. Во все лунки, кроме А1 и А 2, внести по 100 м кл конъю гата Д ГЭ А -С - пероксидаза. 7.2.4. Во все лунки, кроме А1 и А2, внести по 100 мкл раствора антител к Д ГЭ Л -С . 7.2.5. Инкубировать стрипы в течение 1 часа при встряхивании в термостатируемом шейкере при температуре +37°С со скоростью 500-800 об/мин. 7.2.6. По окончании инкубации удалить содержимое в контейнер с дезинфицирующим раствором (1% раствором гипохлорита натрия или 6% раствором перекиси водорода) и промыть лунки четыре раза. При каждой промывке во все лунки добавлять по 300 мкл промывочного раствора, приготовленного по п. 7.1.5., встряхнуть рамку на шейкере в течение 5-10 секунд с последующим декантированием. После последнего декантирования тщательно удалить остатки жидкости из лунок постукиванием рамки со Стрипами в перевернутом положении по фильтровальной бумаге. Допускается промывка лунок при помощи автоматического промывочного устройства. 7.2.7. Немедленно внести во все лунки по 100 м кл раствора ТМ Б . Инкубировать стрипы в темноте при комнатной температуре (+18...25°С ) в течение 15-30 м инут в зависимости от степени развития окраски. Примечание: максимальная оптическая плотность не должна превышать пределов линейного измерения спектрофотометра. Рабочий диапазон спектрофотометра необходимо уточнять в паспорте прибора. Рекомендуемая максимальная оптическая п^ютность не более 2,5 ед. ОП. 12Я. Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и раствор ТМ Б , по 100 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции, встря хивать на шейкере в течение 1-2 минут. 7.2.9. Если по техническим причинам невозможно измерить оптическую плотность в лунках планшета непосредственно после выполнения п. 7.2.8., то следует иметь в виду, что окраска в лунках планшета стабильна не более 20 м инут при температуре +18...25°С . 8. Р Е Г И С Т Р А Ц И Я Р Е З У Л Ь Т А Т О В Измерить на фотометре вертикального сканирования оптическую плотность в лунках при длине волны 450 нм. При регистрации результатов необходимо вычитать величину оптической плотности в лунках А1 и А2 из значений оптических плотностей всех остальных лунок. Примечание; среднее арифметическое значение оптической плотности в лунках А1 и А2 не должно превышать 0,09 ед.ОП. 9. У Ч Е Т Р Е З У Л Ь Т А Т О В 9.1. Построить калибровочный график зависимости оптических плотностей от концентрации Д Г Э А -С в калибровочных пробах (м кг/м л) (Рис. 2). В неш ний вид графика ’ зависит от способа преобразования осей. Примечание 1: для построения калибровочных графиков рекомендуется использовать Программное обеспечение «ИФА Мастер». Примечание 2: для построения калибровочного графика на масштабной бумаге необходимо пользоваться формулой I wiu 2.