Набор реагентов для выявления низкоавидных IgG-антител к вирусy простого герпеса "БиоПрайм-ВПГ" по ТУ 9398-014-10839330-2012 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДЕНА» Приказом Росздравпадзора ог 201 г. № «УТВЕРЖ ДАЮ » Еенеральпый директор Закрытого.акционерного общества БиотехнолоГи'^геская компания «Биосер 0 о ) А.С. Оксанич И Н С Т Р У К Ц И Я по применению набора реагентов для выявления низкоавидных IgG- а т ител к вирусу простого герпеса «ЬиоПрайм-ВПГ» 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «БиоНрайм-В111» предназначен для выявления низкоавид1Н51х Igfi-ан'гител к вирусу простого герпеса в сыворотке/плазме крови человека методом иммуноферментпого анализа с nejuno диагностики первичной инфекции. Наличие низкоавидных антител является индикатором первичной инфекции в нредшесгвуюнше 2-3 месяца. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1, ПРИНЦИП МЕТОДА Для определения индекса авидности антигел IgG каждый образец сыворогки или плазмы крови человека исследуют методом иммуноферментпого анализа в двух иарситлелъных лунках планшетов с иммобилизованными антигенами вируса простого герпеса. При этом антитела, специфичные к белкам вируса простого герпеса, взаимодействуют с адсорбированными антигенами, образуя иммунные комплексы. После однократной отмывки песвязавшихся а н 1ител в контрольные лунки (К-лунки) вносят фосфатный буфер, в опытные (ДР-лунки) - дснатурирую 1ций раствор, который вызывает диссоциацию комплексов низкоавидных антител с антигеном. Степень диссоциации зависи т от авидности антител в исследуемом образце. После отмывки в лунки добавляют конъюгат ' мыншные моноклональные антитела к Рс-фрагмснту IgG человека, мечен 1н,1е нероксидазой хрена. - который взаимодействует с комплексом аптиген-антитезю. Отмыв нссвязавн 1уюся часть кон 1логата, в лунки нлагннега вносят индикаторный раствор, включающий субстрат и хромоген. Содержан 1,ийся в конъюгате фермент катализирует раз]южение субстрата, что приводит к образованию окрашенного продукта, 1 --- стр. 2 --- иитснсивнос'гь окраски которого пропорциональна содержанию антител IgG к вирусу простого г ерпеса в исследуемом образце. По окончании реакции измеряют оптичсскос поглотение растворов в лунках при длине волны 450 им (длина волны сравнения 620- 650 нм). На присутствие в исследуемом образце низкоавидных антител указываем снижение оптического поглощения в лунке, обработанной денатурирующим раствором, в сравнении с контрольной лункой. 2.2. СОСТАВ НАБОРА Набор выпускается в виде реагентов, упакованных в коробку: Компонент Иммуносорбспт Нысокоавидный положительный контрольный образец инактивированный, К 'влт Низкоавидный положи гельный контрольный образец инак гивнрованный, К"„л, Отрицательный контрольный образец инакгивнрованный, К‘ Конъюгат Концентрат раствора № 1 для промывания планшетов (х25) Раствор № 2 для разведения сывороток Дена |урнрующий раствор Описание Разборный 96-луночный планшет для иммунологических реакций с прозрачным плоским дном лунок.______________ Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость красного цвета. Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость красного цвета. Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость синего цвета. Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость красного цвета. Пенящаяся прозрачная или опалесцирующая бесцветная жидкость, при хранении возможно paccJюeниe и выпадение кристаллического осадка, раст воряющегося при температуре (35-37)° С в течение 30 мин. Прозрачная или опалесцирующая пепя1цаяся жидкость синего цвета, при хранении допускается выпадение рьгхлого комкующегося осадка разной интенсивности, легко разбивающегося при встряхивании.____ 11розрачная бесцветная жидкость, при хранении возможно выпадение кристаллического осадка, растворяющегося при температуре (35-37)° С в течение 30 мин. Количесгво шт. 1,5 мл 1 пробирка 1 ,5 мл I пробирка 1,5 мл 1 пробирка 15 мл I флакон 25 мл 2 флакона 26 мл 1 флакон 8 мл 1 п р о б и р к а --- стр. 3 --- Фосфагный буфер Прозрачная бесцветная жидкос1ъ. 8 мл 1 пробирка Раствор № 4 для разведения хромогена Прозрачная бесцветная жидкость. 15 мл 1 флакон Хромоген Прозрачная бесцветная жидкость. 1,5 мл 1 пробирка Стоп-реагент Прозрачная бесцветная жидкость. 8 мл 1 пробирка Планшет для предварительного разведения образцов Цельный или разборный 96-луночный планшет с прозрачным плоским дном лунок 1 шт. Пленка для заклеивания планшета Самоклеющаяся влагонепроницаемая пленка 3 H IT . Ванночка для разведения реаген гов Ванночка из пoливинилxJЮpидa для 8 - капального дозатора 2 H IT . Набор рассчитан на проведение 48 анализов, включая контрольные. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГ НОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Чувствительность набора по сывороткам стандартной панели предприятия СПИ «БиоПрайм-ВПГ», содержащим низкоавидные IgG, составляет 100 %. Специфичность набора по сывороткам стандартной панели предприягия СПИ «БиоПрайм-ВШ ’», не содержапщм низкоавидные IgG, составляет 100 %. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ИРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ Со всеми гестируемыми образцами, отработанными растворами, а также с оборудованием и материалами, находящимися с ними в конгакге, необходимо обращаться как с потенциально инфицированными объектами: - не пинетировать растворы ртом, при работе использовать индивидуальные средства защиты (резиновые перчатки и защитные очки); --- стр. 4 --- - все отработанные растворы и отходы после завернюиия анализа обрабатывать в соответствии с установленными иормами безопасности (например, в течение 16-18 часов в рас гворе гипохлорита натрия в конечной концентрации 1 %); - все твердые отходы сбрасывать в специальный контейнер с пломбируемой крышкой и затем автоклавировать в течение 60 мин нри 121 °С или сжигать; - инструменты и оборудование до и после работы протирать 70 %-м раствором этилового спирта; - утилизировать отходы, в соответствии с требованиями СП 1.3.2322 - 08 (Санитарно - эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III - 1 V групп патогепности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней"), соб]иодая законодательство по охране окружающей среды. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ. Для проведения анализа необходимо использовать: - дистиллированную или деионизованную воду; - дезинфицирующие растворы, соответствуюнще санитарным гребовапиям; - резиновые перчатки; - раствор спирта этилового 70 %; - пинетки одноканальные автоматические вмесгимостью от 5 мкл до 1000 мкл; - пипетки 8- или 12-канальные вместимостью от 50 мкл до 250 мкл; - наконечники полипропиленовые вместимостью 250 мкл; - наконечники нолинронилсновые вместимостью 100 0 мкл; - центрифугу настольную на (3-10)х10^ об/мин; - пробирки центрифужные полипропиленовые вместимостью ( 1,5-2,2) мл для хранения и осветления образцов сыворотки; - пробирки полипропиленовые вместимостью ( 1,0-2,0) мл; - мерные стаканы или цилиндры вместимостью 250 мл и 500 мзц - воздушный термостат на 37° С; - спектрофотометр для измерения оптического пoгJЮп^eния в лупках планшета при длине волны 450 нм (д;шне волны сравнения - 620-650 нм); - контейнер для сбора твердых отходов; - автоклав для дезинфекционной обработки расходных материалов после проведения исследования; - контейнер для слива отработанных жидкостей; - фильтровальную бумагу; --- стр. 7 --- Внести по 10 мкл предварительно подготовленных (н. 6.1.) испы гуемых образцов сывороток в каждые две соседние лунки 2-х вертикситьных рядов планшета в соотвегс'гвии со схемой, представленной на рис. 1. Рис.1. Схема внесения контрольных и испытуемых образцов сывороток. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 "а " К К № 6 № 6 №14 №14 № 2 2 № 2 2 №30 №30 №38 №38 .. в К вл' 1 liAT Х о7 №7 №15 №15 №23 №23 №31 № 31 №39 с илт К 'ИЛТ № 8 № 8 №16 №16 №24 №24 №32 №32 №40 №40 D № 1 № 1 №9 №9 №17 №17 №25 №25 №33 №33 № 41 № 41 н № 2 № 2 № 10 № 10 №18 №18 №26 №26 №34 №34 №42 №42 F №3 №3 № 11 № 11 №19 №19 №27 №27 №35 №35 №43 №43 G №4 №4 № 12 № 12 № 2 0 № 2 0 №28 №28 №36 №36 №44 №44 П №5 №5 №13 №13 № 2 1 № 2 1 №29 №29 №37 №37 №45 №45 1 _ _ ..... к- .ly ilK HЛР-лунки к- .IVIIKII Д1'-лупки к- луики Д Р - луики к- лупкп дрлуики К- .п у м к ндр -.'ly iiK 'H к- .■ у н к и ДР- лунки Планшет заклей гь пленкой (или закрыть крынжой) и выдержать в течение (60±2) мин при температуре (37±1)“ С. 7.2.3. Промывание. Удалить жидкость из лунок автоматическим или ручным промывагелем. Планшет однократно промыть рабочим раствором № 1 (см. п. 7.1.1.), внося в лунки но 250 мкл промывающего раствора и выдерживая его в лунках не менее 20 с. После промывания тщательно yдaJшть остатки влаги из планшета, постукивая планшетом но сложенной в несколько раз фильтровальной бумаге, положенной па полиэ' 1'иленовую пленку. В Н И М А Н И Е ! Н е д о с т а т о ч н о е п р о м ы в а н и е п л а н ш е т о в м о ж е т п р и ве с т и к п о л уч е н и ю л о ж н ы х р е з у л ь т а т о в ! 7.2.4. Во все К-лунки (ряды планшета №№ 1, 3, 5, 7, 9, 11) внести по 150 мкл фосфатного буфера, во все ДР-лунки (ряды плапнтета № № 2, 4, 6, 8, 10, 12) - по 150 мкл денатурирующего раствора. Выдержать в течение 10 мин при темперагуре от 18 “С до 25 "С. 7.2.5. Повторить ннгикратно процедуры промывания, описанные в п. 7.2.3. 7.2.6. Во все лунки планшета внести по 100 мкл конъюгата. Иланшег заклеить пленкой (или закрыть крышкой) и выдержать в течение (30+2) мин при температуре (37±1)"С. 7.2.7. Повторить пятикратно процедуры промывания, описанные в н. 7.2.3. --- стр. 8 --- 7.2.8. Во все лунки планшета внести 100 мкл индикаторного раствора (и. 7.1,2.), Планшет поместить в зашишенное от света место на (15 ± 2) мин при темперагуре (18-25) °С. Н е р а с п о л а г а т ь п л а н ш е т ы с т о п к о й ! 7.2.9. Осчановигь пероксидазную реакцию путем внесения во все лунки но 50 мкл сгон-реаген га и немедленно провести учет результатов. 8. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Измерение оптической плочности (ОП) провести при длине Bojmbi 450 нм. Рекомендуемая длина волны сравнения (620-650) нм. Вывести спектрофотометр на нулевой уровень («бланк») по воздуху. 8.1. Результаты измерения, полученные при анализе котггрольных образцов, должны удовлетворять следующим требованиям: ЭП в К-лунке с К Г не более 0,15 о.с.; ЭП в К-лунке с К\^лт не менее 0,80 о.е.; Э11 в К-лунке с К'плт не менее 0,80 о.е. В том случае, если ОП испытуемого образца в контрольной лунке выше 1,9 о.е., провести повторное исследование образца крови в более высоком разведении. В случае, если ОП испытуемого образца в К-лунке ниже 0,5 о.е., провести исследование образца крови, новторно взятого у пациента через 7-10 суток. Вычислить индекс авидности (ИЛ) для контрольных образцов К^влт и К^плт и исньттуемых сывороток но формуле: ИЛ = (ОПдр.лу„ка/ОПк-лумка) ^ 1 00 % 1дс: О П др.лунка - ОП образца, обработанного ДР, ОПк- |у и ка - 011 образтта в К-лунке. ИЛ К* вл г должен быть не менее 60 % . ИЛ К Ил г должен быть не более 50 % . При получении иных показателей исследование повторить. 8.2. Вычисли ть ИЛ для исследуемых обра;?тюв по привсдеиной формуле (п, 8.1.), По значению индекса авидности определить присутствие в испытуемом образце низкоавидных античел: ИЛ < 50 % указывает на наличие антител с низкой авидностью; ПА от 50 % до 60 % свидетельствует о выявлении антител с неопределенной авиднос тью (пограничный результат). 11аличие высокоавидных антител не исключает возможность недавней инфектщи. --- стр. 9 --- Наличие низкоавидных антител является индикатором первичной инфекции в предшествующие 2-3 месяца. В случае неопределенного результата рекомендуется не ранее, чем через 7 сут. повторно взять кровь и провести исследование второго образца одновременно с первым. П р и м е ч а н и е : для установления диагноза следует учитывать как данные результатов лабораторных исследований, так и всю сумму клинических проявлений и эпидемиологического анамнеза. 9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА Набор транспортировать и хранить в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от +2 °С до +8 °С. Не допускать замораживания. Допускается транспортирование в течение 3 сут при температуре от +9 °С до +30 °С. Условия отпуска: для диагностики in vitro в лечебно-профилактических и санитарно-противоэпидемиологических учреждениях. Рекламации на качество набора направлять в ЗАО БТК «Биосервис» по адресу: 115088, г. Москва, а/я 20, тел./факс (495) 674-5605. 10. С РО К г о д н о с т и Срок годности набора 12 месяцев. Запрещается применять набор и его компоненты после окончания срока годности набора. Зав. производством ЗАО БТК «Биосервис» В.Ю. Кабаргина Директор ФГБУ Й «Московский научно-исследовательскийгижтитут педиатрии и детской хирургии Минздравсоцразвития России» профессор