Набор реагентов для бактериологических исследований "Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (Агар Эндо-ГРМ)" по ТУ 9398-027-78095326-2007 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2007/00375 от 16.07.2007 · класс риска 1

Производитель: БУ ГНЦ ПМБ (Россия)

Вид изделия: Агар для Enterobacteriaceae питательная среда ИВД

В госконтрактах 44-ФЗ: 374 контракта, медианная цена за единицу 2 087 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА 
Приказом Росздравнадзора
от 200 г.№
«УТВЕРЖДАЮ»
Директор ФГУ^
Е осударствет 
кладной ми| 
биотехнолс
при-
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для бактериологических исследований  
«Питательная среда для выделения энтеробактерий сухая (Агар Эндо-ГРМ)»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
«Агар Эндо-ЕРМ» предназначен для бактериологических целей при диагностике ин­
фекционных заболеваний «in vitro».
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
«Агар Эндо-ЕРМ» представляет собой смесь сухих компонентов в виде мелкодис­
персного гигроскопичного порошка сиреневого цвета.
Выпускается в полиэтиленовых банках по 250 г.
2.1. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Совокупность компонентов, входящих в состав набора, обеспечивает питательные по­
требности для роста, дифференциации и ингибиции отдельных видов микроорганизмов.
2.2. СОСТАВ НАБОРА
«Агар Эндо-ЕРМ» представляет собой смесь сухих компонентов из расчета, г/л:
Панкреатический гидролизат рыбной муки ................. 12,0
Дрожжевой экстракт ........................................................ 1,0
Натрия хлорид .................................................................. 3,4
Д (+)-лактоза, 1-водная.................................................... 10,0
Натрия сульфит безводный
.................................... 0,8
Натрия фосфат 2-зам. 12 водный ........................... 0,5
Фуксин основной для микробиологических целей ... 0,2
Агар микробиологический .............................................. 10,0±3,0


--- стр. 2 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
«Агар Эндо-ГРМ» обеспечивает на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов 
Shigella sonnei «S form», Shigella dysenteriae I 1362, Escherichia coli 3912/41 (055:K59), 
Escherichia coli 168/59 (0111:K58) через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С при 
посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-штамма из разведения 10'^, раз­
бавленного стерильным 0,9 %-ным раствором хлористого натрия в соотношении 1:1 (услов-
п
но разведение 10').
Колонии: S. dysenteriae I 1362 бесцветные, круглые, прозрачные, диаметром 1,0- 
1,5 мм;
Колонии Е. coli 3912/41 (055;К59) - круглые, малинового цвета с металлическим бле­
ском, диаметром 2,0-3,0 мм;
Колонии S. sonnei «S form» бесцветные или слегка розового цвета, со слабо выражен­
ным центром, круглые, прозрачные, диаметром 1,5-2,5 мм;
Колонии Е. coli 168/59 (0111:К58) - круглые, малинового цвета, металлический блеск 
колоний может быть неясно выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.
Дифференцирующие свойства среды. Питательная среда должна обеспечивать четкую 
дифференциацию шигелл от эшерихий на всех засеянных чашках при посеве 0,1 мл каждой 
микробной смеси S. sonnei “S form" и Е. coli 168/59 (0111:К58), S. dysenteriae I 1362 и Е. coli 
3912/41 (05 5:К59) из разведения 10'^ через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С.
Ингибирующие свойства среды. Питательная среда должна полностью подавлять рост 
тест-штамма Staphylococcus aureus Wood-46 на всех засеянных чашках при посеве по 0,1 мл 
микробной взвеси из разведения 10'’ через 18-20 ч инкубации при температуре (37+1) °С.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санита­
рии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделе­
ниях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здраво­
охранения» (Москва, 1981 г.).
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
Термостат обеспечивающий температуру 37±1 °С 
Весы лабораторные 2 класса точности 
Автоклав
Пробирки стеклянные вместимостью -  10 мл
Пипетки стеклянные позволяющие отбирать объемы жидкости 1 и 2 мл


--- стр. 3 ---
• Цилиндр стеклянный мерный вместимостью 1000 мл
• Чашки Петри стерильные
• Вода диетиллированная
• Колбы
• Воронки етеклянные
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Объекты исследований в санитарной и клинической микробиологии.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Исследования образцов проводятся по соответствующим Методическим указаниям и 
ГОСТам.
7Л. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление «Агара Эндо-ГРМ».
Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовления конкретной серии 
питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной воды, кипятят 2-3 мин до полного 
расплавления агара, фильтруют через ватно-марлевый фильтр, енова доводят до кипения, 
охлаждают до температуры 45-50 °С и разливают в стерильные чашки Петри слоем 5-6 мм. 
После застывания среды чашки подсушивают.
Готовая питательная среда в чашках Петри прозрачная, розового цвета. Среду необ­
ходимо использовать в день приготовления. Хранить до посева в темноте !
8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Наличие характерно окрашенных колоний энтеробактерий на плотной питательной 
среде в результате роста культур, выделенных из исследуемых образцов регистрируют визу­
ально.
9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Для получения достоверных результатов посевы образцов производить не менее, чем 
в трех повторностях.
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
«Агар Эндо-ГРМ» необходимо хранить в герметично закрытой упаковке в сухом за­
щищенном от света месте при температуре от 2 до 30 °С.
Срок годности -  2 года.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей ин­
струкции по применению.


--- стр. 6 ---
В ф |
Состав:
панкреатический гидролизат рыбной муки (ПГРМ)
п о  ТУ 480-00001927-27-93......................................... 12,0 г
экстракт пекарных дрожжей (Yeast Extract, Sanofi
Diagnostics Pasteur, Франция)............................... 1,0 г
натрий хлористый по ГОСТ 4233-77,....................... 3,4 г
Д- (+)-лактоза, 1-водная по ТУ 6-09-2293-79.......... Ю,0 г
сульфит натрия безводный по ГОСТ 5644-75 ......... 0,8 г
натрий фосфорнокислый 2-зам. 12 водный по
ГОСТ 4172-76............................................................^ 0»5г
фуксин основной для микробиологических целей
по ТУ 6-09-3804-82................................................... 0,2 г
агар микробиологический по ГОСТ 17206-84 или 
агар импортный, соответствующий ГОСТ 17206-84 (10,0±2,0)*^ г
Расчет на 1 л воды дистиллированной по ГОСТ 6709-72.
Описание. Мелкодисперсный порошок сиреневого цвета, гигроско! 
светочувствителен.
Растворимость. Препарат в количестве, указанном на этикетке для приго­
товления конкретной серии питательной среды, должен полностью раств(||)ять- 
ся при перемешивании в 1 л дистиллированной воды при кипячении в те|(ение 
3 мин. Определение растворимости проводят визуально.
Прозрачность и тщетность. Раствор препарата, полученный как указано 
на этикетке для приготовления конкретной серии питательной среды, должен 
быть прозрачным, розового цвета. Определение проводят визуально.
pH От 7,2 до 7,6. (2 % раствор, потенциометрически; ГФ XI, выц.1, с.
113).
Потеря в массе при высушивании.
Около 0,15-0,20 г препарата (точная навеска) сушат при темпер  
(100±2) °С в течение 2 часов. Потеря в массе должна быть не более 7 % (Г 
ВЫП.1, С. 176).
ЖУ
атурё
Варыфование величины связано с различной прошюстью студня агара,
—___:_I I


--- стр. 7 ---
ВФС 3 110
Азот аминогрупп аминокислот и низших пептидов.
(1,4±0,3) %. Определение проводят по ФС 42-344 ВС-90, используя 1р
5М-
■Щ :
М Л  экстракта препарата, приготовленного путем добавления к 1,00 г cyxoi  
препарата 100 мл дистиллированной воды, настаивания в течение 1 ч при 
пературе 18-25 °С и последующего фильтрования.
| е .
Натрия ХЛОРИД (15,0±2,5) %. Определение проводят по ФС 42-344 ВС-90, 
используя 0,5 мл экстракта, приготовление которого изложено в предыдз^ем 
разделе.
Прочность глупня срельт (250±30) г. Определение проводят в соот^Ьтст- ‘
IВИИ с " Методическими указаниями по применению физико-химических мето-
f ' ■  •дов контроля питательнь1х сред" (М., 1977). Для определения использую”! пре­
парат в количестве, указанном на этикетке, из расчета приготовления 1<|0 мл , 
конкретной серии питательной среды.
Показатель чувствительности, скорости роста и стабильности основных 
биологических свойств микроорганизмов. Питательная среда должна обеспе­
чивать на всех засеянных чашках Петри рост тест-штаммов Shigella i^Onnei 
“S form”. Shigella dysenteriae I 1362, Escherichia coli 3912/41 (055^K59),  
Escherichia coli 168/59 (0111:K58) через 18-20 ч инкубации при температуре 
(37+1) °С при посеве по 0,1 мл микробной взвеси культуры каждого тест-  
штамма из разведения 10'^, разбавленного стерильным 0,9 %-ным растфбром
7 i ■
хлористого натрия в соотношении 1:1 ( условно разведение 10‘ ). ;!
Колонии: S. dysenteriae I 1362 бесцветные, круглые, прозрачные, Д4р 
ром 1,0-1,5 мм;
Колонии S. sonnei “S form” бесцветные или слегка розового цвета, о<^ сла­
бо выраженным центром, круглые, прозрачные, диаметром 1,5-2,5 мм;
Колонии Е. соИ 3912/41 (055:К59) - круглые, малинового цвета с 
лическим блеском, диаметром 2,0-3,о мм; • ,
Колонии Е. coli 168/59 (0111:К58) - круглые, малинового цвета, nki 
ческий блеск колоний может быть неясно выражен, диаметром 1,5-2,5 мм1
;;'
'Л'.
Ш


--- стр. 8 ---
т ВФС.3110-1) 8‘С.4
Колонии Е. coli 168/59 (0111:К58) - круглые, малинового цвета, м^т|лл^: 
ческий блеск колоний может быть неясно выражен, диаметром 1,5-2,5 мм.
Определение показателей чувствительности, скорости роста и CTa6i|^HO- 
сти основных биологических свойств микроорганизмов:
1. Приготовление питательной среды 
Препарат в количестве, указанном на этикетке для приготовлени^ кон­
кретной серии питательной среды, размешивают в 1 л дистиллированной |воды,
i i
кипятят 2-3 мин до п олн ого расплавления агара, фильтруют через_^тно- 
марлевый фильтр, снова доводят до кипения, охлаждают до темпер рты  ^  
45-50 °С и разливают в стерильные чашки Петри по ГОСТ 25336^$:|!;|^|Щ  
ТУ 64-2-49-79 слоем 5-6 мм. После застывания среды чашки подсупшвают при
температуре (37+1) °С в течение 40-60 мин.
Готовая питательная среда в чашках Петри прозрачная, розового рета. 
Среду необходимо использовать в день приготовления. Хранить до побева в
темноте !
2. Подготовка тест-штаммов для контроля питательной среды.
Тест-штаммы S. sonnei fonn , S. dysenteriae I 1362, E. coli 3912/41
(055:K59), E. coli 168/59 (0111:K58) получают из ГИСК им. Л.А. Тараревича. 
Используемые для контроля среды тест-штаммы должны быть типичный по 
культуральнр-морфологическим, биохимическим и серологическим свойрс^ам.
Тест-штаммы хранят при температуре 2-8 °С в лиофилизированном с6-
[■
стоянии, или на среде Романова (Сборник инструкций, утвержденный пр1^азоЫ 
Минздрава СССР № 31 от 13.01.83) или на питательной среде следующего со­
става (г/л):
питательный бульон сухой (СПБ) по ФС 42- 15,0
и л и  ГРМ-бульон по ФС 42-3378-97 ................................ 20,0
агар микробиологический по ГОСТ 17206-84 ................. 3,0
вода дистиллированная ............................................. 1,0 л
pH 7,2±0,2
Пересевы культур со среды хранения на среду выращиванйя и вв 
среду хранения проводят через каждые 3 месяца, но не более четырех раз
ШМг


--- стр. 9 ---
ВФС 3 110- m .s M
I пассаж
Лиофилизированные культуры тест-штаммов S. sonnei “S i'jpnn”,  
S. dysenteriae 1 1362, E. coli 3912/41 (055:K59), E. coli 168/59 (0111:K58) из ампул 
или со среды хранения высевают в пробирку по ГОСТ 25336-82 с питательным 
бульоном и на чашку Петри с питательным агаром (СПА по
ФС 42- или ГРМ-агаром по ФС 42-3377-97) и инкубируют при Teivtiiepa-
lype (37±1) °С в течение 18-20 ч.
Выросшую на указанных средах культуру каждого тест-штамма 11фове- 
ряют визуально на чистоту роста и отсутствие диссоциации ("Методические ре­
комендации к контролю питательных сред по биологическим показателя^:|. М;; tl
1980).
II пассаж:
Культуры тест-штаммов S. sonnei “S fonn”, S. dysenteriae 1 1362, E. coli 
3912/41 (055:K59), E. coli 168/59 (0111:K58) пересевают в две пробирки и чаппсу 
Петри с питательным агаром (в случае отсутствия роста на плотной среде для 
последующего пассажа используют культуру, выращенную в бульоне). После 
инкубации посевов в течение 18-20 ч при температуре (37±1) °С выросшие 
культуры проверяют на чистоту роста и используют для контроля.
!
Готовят стандартную взвесь культуры каждого тест-штамма, соотаетст-
I '
вующую 10 единицам по стандартному образцу мутности (ОСО 42-28-59|-85), с 
использованием стерильного 0,9 %-ного раствора натрия хлористого. Получен­
ные взвеси культур десятикратными разведениями (4,5 мл 0,9 %-ного райтвора 
натрия хлористого с 0,5 мл микробной взв'еси) доводят до разведеник Ю "^. 
Микробную взвесь каждой культуры из разведения разбавляют в сротно-
■ •f'i- •
шении 1:1 стерильным 0,9 %-ным раствором натрия хлористого (условно 
Денис 10'^) и используют доя контроля среды. В процессе разведения 
взвеси в следующую пробирку производят новой стерильной пипеткой в: 
мостью 1 мл 2 класса точности по ГОСТ 20292-91.
П№
разве-
енРс
!
естй-
/ И 5 ; *
( ■


--- стр. 11 ---
ВФ.J , 1  1  о - 9Ж
С.7
. 1 '.  v j •
1СКИХ
1. Приготовление питательной средь! изложено в п. 1 раздела "Покдйтеж , 
чувствительности, скорости роста и стабильности основных биоло
I*свойств микроорганизмов". |
2. Подготовка тест-штамма для контроля среды j i
Тест-штамм S. aureus Wood-46 получают из ГИСК им. Л.А. Тарафвича.
Используемый для контроля среды тест-штамм должен быть типичным по 
культурально-морфологическим и биохимическим свойствам.
Условия хранения и лодготовку тест-пгтамма S. aureus Wood-46 
троля питательной среды проводят в соответствии с п. 2 раздела "По: 
чувствительности, скорости роста и стабильности основных биоло 
свойств микроорганизмов". Для контроля среды используют микробную 
культуры из разведения 10‘\
3. Посев и учет результатов. L  
По 0,1 мл микробной взвеси тест-штамма S. aureus Wood-46 из развфдения
10 *  засевают на две чашки Петри с агаром Эндо-ГРМ и 2 чашки Петри с пита­
тельным агаром. Через 18-20 ч инкубации при температуре (37±1) °С визуально 
учитывают результаты. На агаре Эндо-ГРМ рост тест-штамма S. aureus Wood-46 
должен отсутствовать; на питательном агаре должен наблюдаться сплошной
рост культуры. j I
!; ■
i iУпаковка. По 400 т в банке вместимостью 500 мл из полиэтилена в^Юоко- 
го давления по ГОСТ 16337-77 базовой марки 15803-020, рецептура добадки 07 
светозапщщающая, с крышкой из того же полиэтилена.
_LLБанки должны быть герметично завинчены самогерметизируюпршися 
крышками типа 1.1.40 по ОСТ 64-2-218-84.
Крышки банок должны быть герметизированы парафино-канифо^пьной 
смесью (соотношение парафина по ГОСТ 23683-79 и канифолей по  
ГОСТ 19113-84-85:15).
Единица измерения 1 кг.


--- стр. 12 ---
i ► И Р  i
РУС-;Лй
I  ..... ■ !
__ 3-UJl-|08^^
ВФС ___________’  с 8
illБанки должны быть уложены в ящики из гофрированного картона по
I :ГОСТ 13841-95 (ящик № 40) или по ГОСТ 13516-86 (ящики № 50, 51, |52) в ^
один ряд по 20 шт. '
В каждый ящик вкладывают инструкцию по применению и упаковочный 
лист. Содержание упаковочного листа должно быть в соответстбии с  
РД 42-28-36-90. Масса нетто должна быть не более 8 кг.
Мяркировка. На каждую банку должна быть наклеена этикетка из б^^аги 
этикеточной по ГОСТ 7625-86. На этикетке банки должно быть указано: i|[|Eihm6 
нование и адрес предприятия-изготовителя, наименование продукции н! 
ском и английском языках, состав препарата, способ приготовления, ноЦёр 
рии, контрольный номер, масса упаковочной единицы, срок годности, ус^овйя 
хранения, регистрационный номер, штрих-код. Графическое оформление мар­
кировки банок по РД 42-28-36-90. :
Маркировка транспортной тары по ГОСТ 14192-77. На ящике должна 
быть предупредительная надпись "БИОПРЕПАРАТЫ!".
Транспортирование. Всеми видами крытого транспорта.
Хранение. В герметически закрытой упаковке в темном месте в помеще­
нии с относительной влажностью воздуха не более 60 % и температурой от 2 до
30 °с
Срок  годности -3 года.
Назначение - выделение' энтеробактерий из исследуемого материагЙ и йх 
дифференциация по признаку ферментации лактозы. |
Примечание: Реактивы, титрованные растворы, индикаторы, приведенные в 
настоящей ВФС, описаны в соответствующих разделах Госу-*»
ii. - й
rsm-


--- стр. 13 ---
ВФС C-SL
%
дарственной фармакопеи XI изд. вып. 2.
||щ)екгор ГНЦ 
1Икладной микробиологии
ИСПОЛНИТЕЛИ:
Исполнительный директор Отделения 
"Питательные среды”
3|ам. директора по научно-производственной 
работе ^  М.Н. Мартовецкий
г1|лавныи технолог 
Начальник ЦЗЛ
.1 I
1|ехнолог 1 категории
^  I
Научный сотрудник 
Инженер I категории 
Начальник ОБТК
<■ //•
Миронова
И.И. Марчихина
Шолохова 
Н.П. Приймак 
„ Н.К. Селезнева
зч Ьси.и\Т.И. Василенко
Директор ГИСК им. Л.А. Тар 
руководитель Национального 
рргана контроля МИБП __.В. Медуницын
1 9 ^ г
ав. лаборатории стандартизации 
НД ГИСК им. Л.А. Тарасовича Н.А. Озерецковский
[редседатель Г осударственного 
>армакопейного комитета
лдвный ученый секретарь 
осударственного Фармакопейного 
омитета
•S  • •
Крылов
199^ г
ова
\99$  г
'■  '.V -‘с У  •- ■
Г ,- ' :  "
й ■
I':
г
1C ' I .
Ь  -
I:
* -
Г
U:
|v
W.