Набор реагентов для определения концентрации молочной кислоты в цельной крови (с депротеинизацией), в сыворотке и плазме крови энзиматическим колориметрическим методом (ЛАКТАТ-ВИТАЛ) по ТУ 9398-257-52145831-2002 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖ ДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от 2011 г. №
'v" .S пЧ
|^4<Вйтал Дев^!^^ент Корпорэйшн»
1 ‘^ ч л й 'а ь г р .т :? ' К г к 'V '4 . V I It •
\ S / У C ' O f ' & o r M p f ' J и
'холль-Энгбертс
2011 г.
ИНСТРУКЦИЯ
у ^\л^^применемй'1^ i^ o p a реагентов для определения концентрации молочной кислоты
крови (с депротеинизацией), сыворотке и плазме крови
энзиматическим колориметрическим методом
(Лактат-Витал)
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор Лактат-Витал предназначен для количественного определения концентрации молочной
кислоты (лактата) в цельной крови (с депротеинизацией), сыворотке и плазме крови в клинико-
диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.
Набор выпускается в двух видах - лиофилизированном (вариант 1) и жидком (вариант 2) и
рассчитан на проведение 50 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на один анализ.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Молочная кислота под воздействием лактатоксидазы в присутствии кислорода расщепляется на
пировиноградную кислоту и перекись водорода. Последняя в присутствии 4-аминоантипирина и п -
хлорфенола под воздействием пероксидазы образует хинониминовое соединение, окраска которого
пропорциональна содержанию лактата в анализируемой пробе и измеряется фотометрически при длине
волны 505 (490-520) нм.
СОСТАВ НАБОРА
В состав набора входят:
Вариант 1 .
- реагент 1 : буфер, pH 7,5, состоящий из трис-НС1, 50 ммоль/л; п-хлорфенола, 6,0 ммоль/л -
1 флакон (50 мл);
- реагент 2: лиофилизированная смесь (конечная концентрация в рабочем реагенте:
лактатоксидаза, 200 Е/л; пероксидаза, 2000 Е/л; 4-аминоантипирин, 0,4 ммоль/л; бычий сывороточный
альбумин, 0,4%) - 5 флаконов;
- реагент 3: кислота хлорная, 3,3%, готова к использованию - 1 флакон (30 мл);
- калибратор: калибровочный раствор молочной кислоты с концентрацией 3,3 ммоль/л; готов к
применению - ) флакон (1,0 мл).
Вариант 2.
- реагент 1 ; (трис-НС1, 50 ммоль/л; п-хлорфенол, 6,0 ммоль/л; калий железистосинеродистый, 0,1 ммоль/л,
pH 7,5) - 1 флакон (40 мл);
- реагент 2: (лактатоксидаза, 200 Е/л; пероксидаза, 2000 Е/л; 4-аминоантипирин, 0,4 ммоль/л;
аскорбатоксидаза, 200 Е/л) - 1 флакон (40 мл);
- реагент 3: кислота хлорная, 3,3%, готова к использованию - 1 флакон (30 мл);
- калибратор: калибровочный раствор молочной кислоты с концентрацией 3,3 ммоль/л; готов к
применению - 1 флакон (1,0 мл)
--- стр. 2 ---
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейная область определения концентрации молочной кислоты - в диапазоне от 0,6 до 13,3
ммоль/л, отклонение от "линейности" не превышает 5%.
Чувствительность определения - не более 0,3 ммоль/л.
Коэффициент вариации результатов измерений - не более 5%.
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным
сывороткам, аттестованным данным методом.
Калибратор в наборе восходит к стандартным материалам NIST.
Нормальные величины концентрации молочной кислоты в сыворотке (плазме) крови и цельной
крови человека составляют: венозная кровь - 0,5-2,2 ммоль/л, артериальная кровь - 0,5-1,6 ммоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для
обследуемого контингента.
ОБРАЗЦЫ
Цельная кровь (с депротеинизацией), сыворотка или плазма крови. В качестве антикоагулянта
необходимо использовать ЭДТА/фторид.
ф МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Меры предосторожности - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
При работе с кровью необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки,
так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные
длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной
инфекции.
Следует избегать контакта анализируемого образца и рабочего реагента с кожей пальцев из-за
высокого содержания лактата, в связи с чем для отбора реагентов и анализируемых проб необходимо
использовать полуавтоматические пипетки, а так же надевать резиновые или пластиковые перчатки,
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
Спектрофотометр, длина волны 505 нм, полуавтоматический или автоматический биохими
ческий анализатор открытого типа или фотоэлектроколориметр, длина волны 490-520 нм,
кювета с длиной оптического пути 10 мм;
- центрифуга, развивающая ускорение 900 g;
секундомер;
пипетки полуавтоматические одноканальные со сменяемыми наконечниками, позволяющие
отбирать объемы жидкости 0,01; 0,05; 0,2; 0,5; 1,0 и 2,0 мл;
пробирки вместимостью 5,0 мл;
колба стеклянная вместимостью 50 мл;
физиологический раствор (0,9% раствор NaCl);
перчатки резиновые или пластиковые;
вода дистиллированная.
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Приготовление рабочего реагента
Лля варианта 1 : В колбе стеклянной вместимостью 50 мл растворить содержимое одного флакона
реагента 2 в 10 мл реагента 1 и выдержать после полного растворения лиофилизата при комнатной
температуре (+18-25®С) в течение 10 мин.
Полученный рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8°С не более 14 дней.
Для варианта 2: Смешать в колбе конической вместимостью 100 мл необходимое количество
реагента 1 и реагента 2 в соотношении 4:1, Тщательно закрыть флаконы с реагентами 1 и 2
непосредственно после каждого использования.
--- стр. 3 ---
Полученный рабочий реагент можно хранить при температуре +2-8°С не более 14 дней.
Реагент 3 и калибратор готовы к использованию.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Цельная кровь
Подготовить по одной пробирке вместимостью 5,0 мл для каждой анализируемой пробы цельной
крови (опытные пробы), одну пробирку для калибратора (калибровочная проба) и одну пробирку для
контрольной (холостой) пробы. Во все пробирки внести по 0,5 мл реагента 3. В пробирки с опытными
пробами добавить по 0,05 мл анализируемой крови; в пробирку с калибровочной пробой - 0,05 мл
калибратора, в пробирку с контрольной (холостой) пробой - 0,05 мл дистиллированной воды. Содержимое
пробирок тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре в течение 1 0 мин. После
окончания инкубации центрифугировать только опытные пробы при 900 g в течение 5-10 мин при
комнатной температуре; супернатант отделить.
Внести в пробирки вместимостью 5,0 мл реагенты и анализируемые пробы в количествах,
указанных в таблице 1 .
Таблица 1
Отмерить, мл Опытная проба Калибровочная
проба
Контрольная (холостая)
проба
Супернатант 0,2 - -
Раствор для
калибровочной пробы
- 0,2 -
Раствор для
холостой пробы
- - 0,2
Рабочий реагент 2,0 2,0 2,0
Ф
Содержимое пробирок перемешать и инкубировать в течение 10 мин при комнатной температуре
(+18-25°С) или 5 мин при +37°С. Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против
контрольной (холостой) пробы при длине волны 505 (490-520) нм в кювете с длиной оптического пути 1 0
мм. Окраска стабильна в течение 20 мин после окончания инкубации.
Сыворотка (плазма) крови
Подготовить по одной пробирке вместимостью 5,0 мл для каждой анализируемой пробы сыворотки
(плазмы) крови (опытные пробы), одну пробирку для калибратора (калибровочная проба) и одну пробирку
для контрольной (холостой) пробы.
Внести в пробирки реагенты и анализируемые пробы в количествах, указанных в таблице 2.
Таблица 2
Отмерить, мл Опытная проба Калибровочная проба Контрольная (холостая)
проба.
Рабочий реагент 1,0 1 > 0 1,0
- 0,01 -
Cbiii....W 1 i::i V;i.'.;;'-;via) G.ul
ч ' . , - j ироСирок nepe.MJ;;^;iгь и инкубировать 1 0 miih при ко.миатиоП тсмпер^г: \ рг или 5 мин
при J ; оптическую .;.;о'гиос'1Ь опытно;! и к:;-'-:1ср01зичии;'| iipttG мр(''пц- (мтромьиой
(холостой) пробы при длине волны 505 (490-520) нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.
Оптическая плотность стабильна не более 20 мин после окончания инкубации.
РАСЧЕТЫ
Концентрацию молочной кислоты в сыворотке (плазме) крови и цельной крови определить по
формуле:
р
^ ОП
с=
------ X 3,3
F^ кал
где: С - концентрация молочной кислоты в анализируемой пробе, ммоль/л;
Е О П - оптическая плотность опытной пробы, ед. опт. плотн;