Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вирусов простого герпеса I (HSV I) и II (HSV II) типов методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме "реального времени" "АмплиПрайм® HSV I / HSV II" по ТУ 21.20.23-084-09286667-2020 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2021/15296 от 17.09.2021 · класс риска 2б

Производитель: ООО "НекстБио" (Россия)

Вид изделия: Вирус простого герпеса 1 и 2 тип нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 173 контракта, медианная цена за единицу 9 093 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 2 ---
АмплиПрайм IVD
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вирусов 
простого герпеса I (HSV I) и II (HSV II) типов методом полимеразной цепной реакции 
с детекцией в режиме «реального времени» «АмплиПрайм® HSVI / HSVII»
по ТУ 21.20.23-084-09286667-2020
«АмплиПрайм® HSV I / HSV II»
ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ
ООО «НекстБио», Россия, 111394,  
г, Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2,  
тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru
50637
20.07.2021


--- стр. 3 ---
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ..................................................................3
1. НАЗНАЧЕНИЕ................................................................................................................4
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА .........................  5
2.1. Формы выпуска, состав и комплектность...............................................................5
2.2. Принцип метода........................................................................................................7
2.3. Прослеживаемость значений калибраторов К1 HS, К2 HS..................................8
3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА.................................................................................................8
3.1. Внутренний контроль качества................................................................................8
3.2. Рекомендуемые контрольные материалы............................................................10
4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ
......................................................11
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ .........................................11
6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ........................................13
6.1. Взятие исследуемого материала...........................................................................13
6.2. Предварительная обработка исследуемого материала.....................................14
6.3. Экстракция ДНК из исследуемых образцов..........................................................15
6.4. Амплификация, детекция продуктов амплификации, анализ и интерпретация
результатов.....................................................................................................................16
7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ......................................................................................17
7.1. Мазки со слизистой оболочки влагалища.............................................................17
7.2. Соскобы эпителия со слизистой оболочки цервикального канала
...................18
7.3. Соскобы эпителия со слизистой оболочки уретры.............................................18
7.4. Соскобы эпителия со слизистой оболочки прямой кишки..................................19
7.5. Мазки со слизистой оболочки ротоглотки.............................................................19
7.6. Мазки с конъюнктивы.............................................................................................20
7.7. Моча.........................................................................................................................20
7.8. Слюна......................................................................................................................21
7.9. Секрет предстательной железы............................................................................22
7.10. Цельная кровь......................................................................................................22
7.11. Спинномозговая жидкость (ликвор)...................................................................23
7.12. Мазки с пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений кожи и
слизистых оболочек.......................................................................................................23
7.13.Эякулят.................................................................................................  23
8. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
..............................................................................24
8.1. Экстракция ДНК из исследуемого материала.....................................................24
8.2. Подготовка реагентов для амплификации...........................................................24
8.3. Внесение проб ДНК, проведение амплификации и детекции............................25
8.4. Анализ и вычисление результатов........................................................................27
8.5. Интерпретация результатов..................................................................................28
8.6. Возможные ошибки.................................................................................................29
8.7. Диагностическое значение полученного результата
..........................................30
9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА ................................................31
9.1. Предел обнаружения..............................................................................................31
9.2. Линейный диапазон измерения и предел измерения
.........................................31
9.3. Аналитическая специфичность..............................................................  31
9.4. Воспроизводимость и повторяемость измерения...............................................32
9.5. Правильность измерения.......................................................................................33
9.6. Диагностическая чувствительность и диагностическая специфичность...........33
9.7. Оценка влияния интерферирующих веществ и ДНК человека..........................35
10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА.... 36
10.Юрок годности.........................................................................................................36
10.2. Транспортирование............................................................................................36
10.3. Хранение...........................................................................    36
11. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ..................................................................................36
12. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ...............38
50637
20.07.2021


--- стр. 4 ---
список СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ
HSV
ct
вко
гэ
ДНК
ДНКаза
дНТФ
ИППП
Набор/
АмплиПрайм®
HSVI/HSVI1
ПК
К1 HS
К2 HS
ОК
ОКО
ПЦР
РУ
УДГ
- Herpes simplex virus (вирус простого герпеса)
- Cycle threshold (пороговый цикл)
- внутренний контрольный образец
- геномные эквиваленты
- дезоксирибонуклеиновая кислота
- дезоксирибонуклеаза
- дезоксирибонуклеотидтрифосфат
- инфекции, передаваемые половым путем
- Набор реагентов для выявления и количественного определения 
ДНК вирусов простого герпеса I  (HSV I) и I I  (HSV II) типов 
методом полимеразной цепной реакции с детекцией в режиме 
«реального времени» «АмплиПрайм® HSV I  / HSV II» по ТУ
21.20.23-084-09286667-2020
- положительный контроль
- положительный контрольный образец, ДНК-калибратор
- положительный контрольный образец, ДНК-калибратор
- отрицательный контроль
- отрицательный контрольный образец
- полимеразная цепная реакция
- регистрационное удостоверение
- урацил-ДНК-гликозилаза
НАИМЕНОВАНИЕ ИЗДЕЛИЯ
Набор реагентов для выявления и количественного определения ДНК вирусов 
простого герпеса I (HSV I) и II (HSV II) типов методом полимеразной цепной реакции 
с детекцией в режиме «реального времени» «АмплиПрайм® HSV I / HSV II» 
по ТУ 21.20.23-084-09286667-2020.
Далее по тексту употребляется краткое наименование: Набор реагентов 
«АмплиПрайм® HSV 1  / HSV II», а также сокрагцение Набор реагентов.
50637
20.07.2021


--- стр. 5 ---
1.1. Набор реагентов «АмплиПрайм® HSVI/HSVII» предназначен для 
выявления и количественного определения ДНК вирусов простого герпеса I (HSV I) и 
II (HSV II) типов в биологическом материале {соскобный материал или отделяемое 
слизистых оболочек урогенитального тракта (мазки со слизистой оболочки 
влагалища, соскоб эпителия со слизистой оболочки цервикального канала и соскоб 
эпителия со слизистой оболочки уретры), прямой кишки, ротоглотки, конъюнктивы; 
моча, слюна, секрет предстательной железы, цельная кровь, ликвор; отделяемое 
пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений кожи и слизистых 
оболочек, эякулят) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией 
продуктов амплификации в режиме «реального времени».
1.2. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из 
исследуемого материала с помощью наборов реагентов, рекомендованных в 
разделе инструкции «Дополнительное оборудование и материалы».
1.3. Функциональное назначение: Набор предназначен для диагностики in vitro 
(выявление и количественное определение ДНК вирусов простого герпеса I (HSV I) и 
II (HSV II) типов методом ПЦР в биологическом материале человека).
1.4. Показания к проведению исследования: Набор реагентов используется в 
клинической лабораторной диагностике для исследования биологического 
материала, полученного от лиц с подозрением на герпесвирусную инфекцию вне 
зависимости от формы и стадии заболевания всех групп населения, в том числе при 
скрининге заболеваний органов репродуктивной системы и при обследовании лиц с 
иммунодефицитными состояниями, а также для мониторинга терапии при 
рецидивирующей форме заболеваний, вызванных вирусами простого герпеса I и II 
типов. Результаты ПЦР-исследования учитываются в комплексной диагностике 
заболевания.
1.5. Применение набора реагентов не зависит от популяционных и 
демографических аспектов.
1.6. Потенциальные пользователи: Набор реагентов должен использоваться 
только квалифицированным, обученным (в области клинической лабораторной 
диагностики) персоналом (врачи клинической лаборатории и медицинские 
лабораторные техники, обученные молекулярным биологическим методикам).
1.7. Применять набор реагентов строго по назначению согласно инструкции по 
применению.
1.8. Противопоказания к применению: Нарушение целостности упаковки, 
истекший срок годности, несоблюдение требований инструкции.
50637
20.07.2021


--- стр. 6 ---
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
2.1. Формы выпуска, состав и комплектность
Набор выпускается в трёх формах (состав форм и комплектность поставки см. в 
таблице 1 и 2 соответственно). Все формы выпуска предназначены для проведения 
амплификации ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме 
«реального времени». Для проведения полного исследования необходимо 
использовать наборы реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные в разделе 
«Дополнительное оборудование и материалы».
Форма выпуска 1 включает смесь для проведения ПЦР, раскапанную под 
прослойку парафина по пробиркам объемом 0,2 мл. Форма предназначена для 
применения совместно с амплификаторами планшетного и роторного типа и 
рассчитана на проведение исследования 100 образцов, включая контроли.
Форма выпуска 2 включает смесь для проведения ПЦР в пробирке объемом 
1,5 мл для дозирования в любые типы пробирок. Форма предназначена для 
применения совместно с амплификаторами планшетного и роторного типа и 
рассчитана на проведение исследования 100 образцов, включая контроли. Форма 
может быть использована совместно с автоматическими станциями для 
приготовления и дозирования реакционных смесей.
Форма выпуска 3 включает смесь для проведения ПЦР, раскапанную под 
прослойку парафина по стрипованным (12,5 стрипов по 8 пробирок) пробиркам 
объемом 0,2 мл. Форма предназначена для применения совместно с 
амплификаторами планшетного типа и рассчитана на проведение исследования 100 
образцов, включая контроли.
Таблица 1
Состав форм выпуска набора
Компонент Объем, мл Количество Описание
Форма выпуска 1
ПЦР-смесь
H S V I/H S V II 0,01 100 пробирок
Буферный раствор со специфическими  
праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами и  
дНТФ. Прозрачная жидкость, раскапана под  
парафин.
ПЦР-буфер-К 1,20 1 пробирка
Буферный раствор с термостабильной ДНК-  
полимеразой Taq, сульфатом магния и урацил-  
ДНК-гликозилазой.
Прозрачная жидкость красного цвета.
К1 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец, ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
К2 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец. ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
50637
20.07.2021


--- стр. 7 ---
Компонент Объем, мл Количество Описание
ОКО 1,10 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
к- 0,26 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
Форма выпуска 2
ПЦР-смесь
H S V i/H S V Il 1,20 1 пробирка
Буферный раствор со специфическими  
праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами и  
дНТФ.
Прозрачная жидкость.
ПЦР-буфер'Н 0,65 1 пробирка
Буферный раствор с термостабильной ДНК-  
полимеразой Тар, сульфатом магния и урацил-  
ДНК-гликозилазой.
Прозрачная жидкость.
К1 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец, ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
К2 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец, ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
ОКО 1,10 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
к- 0,26 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
Форма выпуска 3
ПЦР-смесь
H S V I/H S V II 0,01
100 пробирок  
{12,5 стрипов по  
8 пробирок)^
Буферный раствор со специфическими  
праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами и  
дНТФ.
Прозрачная жидкость, раскапана в стрипованные  
пробирки под парафин белого цвета.
ПЦР-буфер-К 1,20 1 пробирка
Буферный раствор с термостабильной ДНК-  
полимеразой Тар. сульфатом магния и урацил-  
ДНК-гликозилазой.
Прозрачная жидкость красного цвета.
К1 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец, ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
К2 HS 0,12 1 пробирка
Положительный контрольный образец, ДНК-  
калибратор.
Прозрачная жидкость.
ОКО 1,10 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
К- 0,26 1 пробирка Отрицательный контрольный образец.  
Прозрачная жидкость.
Таблица 2
Комплектность набора
Компонент Ф ормат Количество
Набор реагентов (форма выпуска  
1,2 или 3) - 1
Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном сайте  
Производителя: www.nextbio.ru -
Краткое руководство по  
применению набора в бумажном виде 1
Комплект вкладышей к набору в бумажном виде 1
Паспорт качества в электронном виде на официальном сайте  
Производителя; www.nextbio.ru
-
' Пробирки с голубым парафином не используются.  
Версия 06.07.21
50637
20.07.2021


--- стр. 10 ---
детектироваться ДНК HSVI и/или HSVIl. В случае несоответствия результата, 
полученного для контрольного образца, заданным критериям валидности, 
положительные результаты для исследуемых образцов в постановке считаются 
недостоверными, необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить исследование всех исследуемых образцов, в 
которых обнаружена ДНК HSV I и/или HSV II и контроля, начиная с этапа экстракции.
Отрицательный контрольный образец (К-) тестируется, начиная с этапа 
амплификации, и позволяет контролировать возможную контаминацию другими 
образцами или ампликонами. В пробирке с отрицательным контролем не должно 
детектироваться ДНК HSV I и/или HSV II. В случае несоответствия результата, 
полученного для контрольного образца, заданным критериям валидности, 
положительные результаты для исследуемых образцов в постановке считаются 
недостоверными, необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации 
источника контаминации и повторить исследование всех исследуемых образцов, в 
которых обнаружена ДНК HSV ! и/или HSV II и контроля, начиная с этапа 
амплификации.
В качестве положительного контроля используются реагенты К1 HS и К2 HS, 
входящие в состав набора. В случае несоответствия результатов для 
положительных контролей заданным критериям валидности, результаты для всех 
образцов в постановке считаются недостоверными, требуется повторить 
исследование всех исследуемых образцов и контролей, начиная с этапа ПЦР.
3.1.2. Анализ калибровки
Количественная оценка концентрации ДНКН5\/1 и/или HSVI1 в исследуемых 
образцах проводится относительно количественно охарактеризованных 
калибровочных образцов К1 HS и К2 HS. Исследование калибровочных образцов 
К1 HS и К2 HS проводится параллельно с исследованием образцов, начиная с этапа 
ПЦР. Определение концентрации ДНК производится в соответствии с заданными 
значениями концентраций калибровочных образцов К1 HS и К2 HS и полученными 
значениями порогового цикла (Ct) для калибровочных образцов К1 HS и К2 HS и 
исследуемых образцов. Эффективность калибровки укладывается в заданный 
диапазон. Если эффективность калибровки не укладывается в граничные значения, 
следует повторить исследование с этапа ПЦР.
50637
20.07.2021


--- стр. 11 ---
3.1.3. Контроль ингибирования
Для контроля всех этапов исследования, эффективности экстракции ДНК и 
оценки влияния ингибиторов ПЦР предусмотрено использование экзогенного ВКО^, 
который добавляется в каждый исследуемый и отрицательный контрольный образец 
на этапе экстракции. Результаты исследования ВКО должны соответствовать 
заданным критериям валидности для положительных и отрицательных исследуемых 
образцов, указанным в разделе «Интерпретация результатов». Если в исследуемых 
образцах не обнаружена ДНК ВКО, то результаты исследования данных образцов 
считаются недостоверными, требуется повторить их анализ, начиная с этапа 
экстракции.
3.1.4. Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Рекомендуется раз в месяц проводить мониторинг лаборатории на контаминацию 
продуктами амплификации, исследуемыми образцами, положительными
контрольными образцами. Оценка наличия/отсутствия контаминации проводится 
путем исследования смывов с различных объектов: пипеток, рабочих поверхностей 
лабораторной мебели, оборудования и поверхностей помещений. Взятие и 
исследование смывов следует проводить согласно процедуре, описанной в МУ 
1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы
амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим 
микроорганизмы I-IV групп патогенности». При обнаружении контаминации 
необходимо провести обработку лаборатории моющими и дезинфицирующими 
растворами согласно указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09. Также для 
предотвращения контаминации лаборатории или в качестве мер по деконтаминации 
рабочих зон рекомендуется использовать раствор для дезактивации нуклеиновых 
кислот, например, «Олигатор» производства ООО «НекстБио», Россия.
3.2. Рекомендуемые контрольные материалы
В качестве контрольных материалов для проверки заявленных функциональных 
характеристик набора могут быть использованы зарегистрированные на территории 
Российской Федерации панели контрольных образцов, предназначенные для 
проведения внутреннего и внешнего контролей качества лабораторных 
исследований по обнаружению ДНК выявляемых типов вируса простого герпеса.
BKO-FL входит в состав набора реагентов, рекоуендованного Производителем для экстракции ДНК  
из исследуемого материала, или приобретается дополнительно.
50637
20.07.2021


--- стр. 12 ---
4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Набор применяется только для диагностики in vitro.
4.2. Набор предназначен для работы только с исследуемым материалом, 
указанным в разделе «Назначение». Исследование других видов биологического 
материала может привести к получению недостоверных результатов.
4.3. Непригодными для исследования являются образцы цельной крови, взятые в 
пробирки с гепарином в качестве антикоагулянта и образцы цельной крови, 
содержащие кровяной сгусток или подвергшиеся заморозке.
4.4. Получение достоверных результатов обеспечивается выполнением 
требований, предъявляемых к взятию, транспортированию и хранению образцов 
исследуемого материала (см. раздел «Исследуемый материал»).
4.5. С помощью набора возможно ПЦР-исследование только проб ДНК, 
экстрагированных из исследуемого материала совместно с внутренним контрольным 
образцом - BKO-FL. Без использования ВКО невозможно провести оценку 
валидности постановки.
4.6. Набор предназначен для профессионального применения. Набор должен 
использоваться только квалифицированным, обученным (в области клинической 
лабораторной диагностики) персоналом (врачи клинической лаборатории и 
медицинские лабораторные техники, обученные молекулярным биологическим 
методикам).
4.7. При работе с набором следует использовать только амплификаторы с 
системой детекции флуоресцентного сигнала, характеристики которых 
удовлетворяют требования, указанные в разделе «Дополнительное оборудование и 
материалы».
5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ
5.1. Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно­
биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие 
возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно- 
эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями 
паразитарных болезней», СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические 
требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным 
объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, 
почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных 
помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических 
(профилактических) мероприятий» и методических указаний МУ 1.3.2569-09
50637
20.07.2021


--- стр. 13 ---
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации 
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV 
групп патогенности».
5.2. При работе необходимо всегда выполнять следующие требования:
- Применять набор строго по назначению в соответствии с данной инструкцией. 
Отклонение от прописанных процедур и порядка действий может привести к 
получению недостоверных результатов анализа.
- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ следует 
проводить в отдельных помещениях (зонах) в соответствии с МУ 1.3.2569-09. Не 
возвращать образцы, оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена 
предыдущая стадия процесса.
- Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, 
организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08.
- Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реагенты, используя 
дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08.
- Удалять неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а 
также использованные реагенты, упаковку^, биологический материал®, включая 
материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, в 
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21.
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих 
продукты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, 
поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, 
оборудования и реагентов.
- Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для 
автоматических дозаторов с фильтром. Одноразовую пластиковую посуду 
(пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, 
содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для 
обеззараживания медицинских отходов.
- Набор предназначен для однократного применения для проведения ПЦР- 
исследования указанного количества образцов (см. раздел «Формы выпуска, состав 
и комплектность»).
® Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, использованные реагенты,  
упаковка относятся к классу опасности медицинских отходов Г.
® Биологический материал, включая инструменты и предметы, загрязненные материалом, относятся к  
классу опасности медицинских отходов Б.
50637
20.07.2021


--- стр. 16 ---
6.2.1.4. Микроцентрифужные одноразовые полипропиленовые плотно 
закрывающиеся пробирки объемом 1,5 мл.
6.2.1.5. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема с 
фильтром до 1000 мкл.
6.2.1.6. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема без 
фильтра до 200 мкл.
6.2.1.7. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл с 
ускорением не менее 10 000 д.
6.2.1.8. Вортекс.
6.2.1.9. Автоматический дозатор переменного объема на 1000 мкл.
6.3. Экстракция ДНК из исследуемых образцов
6.3.1. Набор реагентов для экстракции ДНК, зарегистрированный в РФ и 
соответствующий следующим требованиям:
- набор позволяет выделять ДНК из биологического материала ((соскобный 
материал или отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта (мазки со 
слизистой оболочки влагалища, соскоб эпителия со слизистой оболочки 
цервикального канала и соскоб эпителия со слизистой оболочки уретры), прямой 
кишки, ротоглотки, конъюнктивы; моча, слюна, секрет предстательной железы, 
цельная кровь, ликвор; отделяемое пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных 
поражений кожи и слизистых оболочек)) для последующего исследования методом 
полимеразной цепной реакции;
- набор не относится к экспресс-методам экстракции ДНК;
- состав набора включает внутренний контрольный образец;
- набор позволяет исследовать образцы объемом не менее 50 мкл;
- набор позволяет проводить элюцию очищенной ДНК в объеме не менее 100 мкл.
В ходе проведения клинических испытаний валидацию прошли следующие 
наборы реагентов для экстракции ДНК: «АмплиПрайм РИБО-преп» вариант 100 
(РУ № ФСР 2012/14017), «МагноПрайм ФАСТ» (РУ № РЗН 2019/8043), «МагноПрайм 
ЮНИ» (РУ № РЗН 2019/8955), «АмплиПрайм ДНК-сорб-В»^ (РУ № ФСР 2012/14019).
6.3.2. Реагент BKO-FL (ООО «НекстБио», Россия) - при использовании наборов 
реагентов для экстракции «АмплиПрайм РИБО-преп», «МагноПрайм ЮНИ», 
«АмплиПрайм ДНК-сорб-В».
6.3.3. Дополнительные материалы и оборудование, необходимые для 
экстракции ДНК, - согласно инструкции к набору реагентов для экстракции ДНК.
’’ Используется только для экстракции ДНК из эякулята.  
Версия 06.07.21
50637
20.07.2021


--- стр. 17 ---
6.4. Амплификация, детекция продуктов амплификации, анализ и 
интерпретация результатов
6.4.1. Одноразовые полипропиленовые пробирки, свободные от ДНКаз, 
следующих видов (при работе с формой выпуска 2):
- завинчивающиеся пробирки и крышки к ним или плотно закрывающиеся 
пробирки объемом 1,5 мл - для приготовления реакционной смеси;
- тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с выпуклой или плоской 
оптически прозрачной крышкой или пробирки объемом 0,2 мл в стрипах по 8 шт. с 
прозрачными крышками - для проведения ПЦР при использовании прибора 
планшетного типа;
- тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с плоской крышкой или 
пробирки для ПЦР объемом 0,1 мл в стрипах по 4 шт. с крышками ~ для проведения 
ПЦР при использовании прибора роторного типа.
6.4.2. Одноразовые наконечники, свободные от ДНКаз, для дозаторов 
переменного объема с фильтром до 100 мкл.
6.4.3. Штативы для пробирок объемом 0,2 мл или 0,1мл (в соответствии с 
используемыми пробирками для ПЦР).
6.4.4. Бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс).
6.4.5. Вортекс.
6.4.6. Автоматические дозаторы переменного объема.
6.4.7. Станция автоматическая с модулем для приготовления и дозирования 
реакционных смесей и комплект расходных материалов к ней согласно инструкции 
Производителя, - при работе с формой выпуска 2 в случае приготовления 
реакционных смесей с использованием автоматической станции.
6.4.8. Программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцентного 
сигнала в режиме «реального времени» роторного типа (например, Rotor-Gene Q), либо 
планшетного типа (например, QuantStudio 5 или С1000 Touch в комплекте с модулем 
CFX96), зарегистрированные в РФ и соответствующие следующим требованиям:
- наличие независимых каналов флуоресцентной детекции для флуорофоров 
РАМ, R6G, Су5 с характеристиками, указанными в таблице 4.
Таблица 4
Требуемые характеристики каналов флуоресцентной детекции
Канал для 
флуорофора
Длины волн, нм
Возбуждения Детекции
Минимум Максимум Минимум Максимум
РАМ 450 470 510 530
R6G 515 532 545 580
Су5 620 640 660 690
50637
20.07.2021


--- стр. 18 ---
- для приборов планшетного типа наличие подогреваемой крышки с 
температурой более 100°С;
- точность поддержания температуры < ±0,4“С;
- скорость нагрева не менее 2“С/сек;
- скорость охлаждение не менее 1°С/сек.
6.4.9. Холодильник от 2 до 8 °С.
6.4.10. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки в соответствии 
с МУ 1.3.2569-09.
6.4.11. Емкость для сброса наконечников.
7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
Материалом для исследования служат:
- соскобный материал или отделяемое слизистых оболочек урогенитального 
тракта (мазки со слизистой оболочки влагалища, соскобы эпителия со слизистой 
оболочки цервикального канала и соскобы эпителия со слизистой оболочки уретры);
- соскоб эпителия со слизистой оболочки прямой кишки;
- отделяемое слизистых оболочек ротоглотки (мазки);
- отделяемое конъюнктивы (мазки);
- моча (осадок первой порции утренней мочи);
- слюна;
- секрет предстательной железы;
- цельная кровь;
- спинномозговая жидкость (ликвор);
- отделяемое пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений кожи и 
слизистых оболочек (мазки);
- эякулят.
Взятие, предварительную обработку, транспортирование и хранение 
исследуемого биологического материала следует проводить в соответствии с 
нижеперечисленными требованиями, несоблюдение которых может привести к 
получению некорректных результатов исследования.
7.1. Мазки со слизистой оболочки влагалища
Взятие материала провести из заднебокового свода влагалища с помощью 
стерильного одноразового зонда-тампона или универсального зонда в пробирку с 
транспортной средой с муколитиком в соответствии инструкцией по применению 
зонда. Необходимо максимально полно собрать отделяемое. Рабочую поверхность 
зонда поместить в транспортную среду, обломав пластиковую основу. Допустимо 
минимальное присутствие примесей в виде слизи и крови.
50637
20.07.2021


--- стр. 22 ---
у мужчин при мочеиспускании необходимо освободить наружное отверстие 
мочеиспускательного канала, полностью оттянув кожную складку. Для анализа 
отбирают первую порцию утренней мочи в количестве 15-25 мл в специальный 
сухой стерильный флакон на 50-60 мл.
Допускается хранение образцов мочи до проведения предобработки:
- при температуре от 2 до 8 °С - в течение 1 суток;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 недели;
- при температуре не выше минус 68 °С - длительно.
При осуществлении сбора мочи в емкость с транспортной средой или реагентами 
для консервации и стабилизации, хранение образцов мочи до проведения 
предобработки проводить согласно инструкции к используемой емкости для сбора.
Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.
7.7.2. Предварительная обработка
Флакон с мочой взболтать. Перенести 1 мл мочи, используя наконечник с 
фильтром, в стерильную одноразовую пробирку объемом 1,5 мл. Центрифугировать 
5 минут при 10 тыс д. При наличии большого количества солей ресуспендировать 
только верхний слой осадка солей в объеме 1 мл и затем снова концентрировать. 
Используя вакуумный отсасыватель с колбой-ловушкой, полностью удалить 
супернатант, используя для каждого образца отдельный наконечник без фильтра, не 
захватывая осадок. К осадку добавить транспортную среду, до конечного объема 0,2 
мл, тщательно перемешать содержимое на вортексе.
Допускается хранение предварительно обработанных образцов мочи до 
проведения ПЦР-исследования:
- при температуре от 2 до 8 °С - в течение 1 суток;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 недели;
- при температуре не выше минус 68 °С - длительно.
Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.
7.8. Слюна
Перед получением слюны следует провести трехкратное полоскание полости рта 
физиологическим раствором. Слюну забирать в одноразовые сухие стерильные 
пробирки на 2 мл в количестве не менее 1,0 мл.
Пробирку плотно закрыть крышкой, не допуская зазора и смятия внутренней 
части крышки, и промаркировать.
Условия хранения материала:
- при комнатной температуре - в течение 6 часов;
- при температуре от 2 до 8 °С - в течение 1 суток;
50637
20.07.2021


--- стр. 23 ---
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С — в течение 1 недели;
- при температуре не выше минус 68 “С — длительно.
7.9. Секрет предстательной железы
Перед получением секрета предстательной железы головку полового члена 
обработать стерильным ватным тампоном. Секрет простаты забрать после 
предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с 
надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. 
После окончания массажа предстательной железы ее секрет в количестве 0,5-1 мл 
собрать в одноразовую стерильную сухую пластиковую пробирку объемом 2 мл или 
стерильный сухой контейнер объемом 50-60 мл.
Пробирку плотно закрыть крышкой, не допуская зазора и смятия внутренней 
части крышки, и промаркировать.
При невозможности получить секрет сразу после массажа простаты собрать 
первую порцию мочи (в которой содержится секрет предстательной железы) в 
количестве 15-25 мл (см. порядок забора мочи).
Допускается хранение образцов секрета предстательной железы до проведения 
ПЦР-исследования:
- при комнатной температуре - в течение 6 часов;
- при температуре от 2 до 8 °С - в течение 1 суток;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 недели;
- при температуре не выше минус 68 °С - длительно.
Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.
7.10. Цельная кровь
Взятие крови следует производить натощак или через 3 часа после приема пищи 
из локтевой вены одноразовой иглой диаметром 0,8-1,1 мм в специальную 
вакуумную систему типа «Vacuette®» с раствором ЭДТА или цитрата натрия. После 
взятия крови пробирку следует плавно несколько раз перевернуть вверх дном, 
чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом (в противном 
случае кровь свернется, и экстракция ДНК станет невозможной!). После плавного 
перемешивания пробирку поместить в штатив.
Условия хранения материала:
- при температуре от 20 до 25 °С - в течение 6 часов с момента получения
материала для количественного определения и в течение 12 часов - для
качественного определения;
- при температуре от 2 до 8 “С - в течение 1 суток.
Недопустимо замораживание образцов цельной крови!
50637
20.07.2021


--- стр. 24 ---
7.11. Спинномозговая жидкость (ликвор)
Спинномозговую жидкость (ликвор) получают с помощью одноразовых игл, в 
одноразовые пластиковые сухие пробирки объемом 2,0 мл в количестве не менее 
1,0 мл.
Пробирку плотно закрыть крышкой, не допуская зазора и смятия внутренней 
части крышки, и промаркировать.
Условия хранения и транспортирования материала:
- при комнатной температуре - в течение 6 часов;
- при температуре от 2 до 8 °С ~ в течение 1 суток;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 месяца;
- при температуре не выше минус 68 °С - длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
7.12. Мазки с пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных поражений 
кожи и слизистых оболочек
Перед взятием материала кожные элементы очищают ватным тампоном, 
смоченным эфиром или спиртом, затем прокалывают их у основания стерильной 
иглой или тонким капилляром пастеровской пипетки. Для ускорения поступления 
материала элемент сверху надавливают пинцетом. Корку или верхнюю часть 
везикул отделяют от кожи иглой, скальпелем. Исследуемый материал помещают в 
пробирку с транспортной средой.
Биологический материал, помещенный в транспортную среду, хранить и 
транспортировать согласно следующим требованиям:
- при комнатной температуре (до 25 °С) - в течение 45 дней;
- при температуре от 2 до 8 “С - в течение 4 месяцев;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 года;
- при температуре не выше минус 68 °С - длительно;
либо согласно инструкции к используемой транспортной среде.
Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.
7.13. Эякулят
Получение спермы осуществляют в специальный сухой стерильный контейнер на 
50-60 мл.
Условия хранения и транспортирования материала:
- при комнатной температуре — в течение 6 часов;
- при температуре 2-8 °С — в течение 1 суток;
- при температуре от минус 24 до минус 16 °С — в течение 1 недели;
- при температуре не выше минус 68 °С — длительно.
Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала.
50637
20.07.2021


--- стр. 27 ---
8.3.2. Внести в подготовленные пробирки с реакционной смесью контрольные 
образцы.
При проведении качественного анализа:
а) положительный контроль ПЦР - в одну пробирку для образца К2 внести 10 мкл 
К2 HS.
б) отрицательный контроль экстракции - в одну пробирку для образца ОК внести 
10 мкл пробы, экстрагированной из ОКО.
в) отрицательный контроль ПЦР - в одну пробирку для образца К- внести 10 мкл 
реагента К-.
При проведении количественного анализа:
а) Образец К1 - в одну пробирку внести 10 мкл К1 HS.
б) Образец К2 - в одну пробирку внести 10 мкл К2 HS.
в) отрицательный контроль экстракции (ОК) - в одну пробирку для образца ОК 
внести 10 мкл пробы, экстрагированной из ОКО.
г) отрицательный контроль ПЦР (К-) - в одну пробирку для образца К- внести 10 
мкл реагента К-.
8.3.3. Запрограммировать амплификатор с системой детекции в режиме 
«реального времени» для выполнения единой программы амплификации и детекции 
флуоресцентного сигнала (см. таблицу 6).
Таблица 6
Единая программа амплификации и детекции флуоресцентного сигнала
Цикл Температура, ®С Время Детекция по каналам для 
флуорофоров
Количество
циклов
1 50 15 мин — 1
2 95 15 мин — 1
3 95 10 с —
4560 20 с РАМ, R6G3, Су5
Примечание: с использованием единой программы можно одновременно 
проводить в одном приборе любое сочетание тестов, включая тесты с обратной 
транскрипцией и амплификацией. При одновременном проведении нескольких 
тестов детекция флуоресцентного сигнала назначается и по другим используемым 
каналам, помимо указанных в таблице. В случае если в одном приборе 
одновременно проводятся тесты только для выявления ДНК, можно удалить из 
данной программы первый шаг обратной транскрипции (50 “С - 15 мин) для 
экономии времени.
® Детекция сигнала для флуорофора R6G осуществляется по каналу детекции для аналогичных  
флуорофоров HEX, JOE, Yellow, VIC.
50637
20.07.2021


--- стр. 28 ---
8.3.4. Установить пробирки или стрипы в ячейки реакционного модуля прибора.
Примечание - Рекомендуется перед постановкой в амплификатор планшетного
типа осадить капли со стенок пробирок на вортексе.
8.3.5. Запустить выполнение программы амплификации с детекцией 
флуоресцентного сигнала.
8.3.6. Прибор проводит регистрацию флуоресцентного сигнала автоматически в 
режиме «реального времени».
8.4. Анализ и вычисление результатов
ВНИМАНИЕ! Обработку данных {флуоресцентных кривых), полученных в 
программном обеспечении прибора, используемого для проведения ПЦР с 
детекцией в режиме «реального времени», проводить согласно инструкции по его 
применению. Рекомендуемые параметры для обработки данных указаны во 
вкладыше, прилагаемом к набору.
ВНИМАНИЕ! Количественный анализ результатов возможно проводить только в 
автоматическом режиме с использованием программного обеспечения FRT-Manager 
версии 2.0 или выше (ООО «ИнтерЛабСервис», Россия, РУ № РЗН 2019/8870) 
согласно руководству пользователя, выбрав методику, указанную во вкладыше, 
прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на официальном 
сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу: https://www.interlabservice.ru/service/frt/.
Обработка и расчет результатов происходит на основании наличия (или 
отсутствия) пересечения кривой флуоресценции S-образной (сигмообразной) формы 
с установленной на соответствующем уровне пороговой линией, что определяет 
наличие (или отсутствие) для данной пробы ДНК значения порогового цикла (Ct) в 
соответствующей графе таблицы результатов. Параметры обработки 
флуоресцентных кривых зависят от используемой модели амплификатора (см. 
вкладыш к набору и инструкцию по применению амплификатора).
Кривые накопления флуоресцентного сигнала анализируются по четырем 
каналам детекции (см. таблицу 7).
Таблица 7
Детекция флуоресцентного сигнала
Канал для  
флуорофора FAM R6G Су5
Продукт
амплификации flHKHSVi flHKHSVN днквко
50637
20.07.2021


--- стр. 29 ---
На основании полученных значений порогового цикла (Ct) и заданных значений 
концентраций для калибраторов строится калибровочная кривая, по которой 
проводится расчет значений концентрации геномных эквивалентов ДНК выявляемых 
типов вируса простого герпеса в 1 мл исследуемых и контрольных образцов.
8.5. Интерпретация результатов
Интерпретацию результатов проводят в двух вариантах:
- вручную в соответствии с таблицей 8 и вкладышем, прилагаемым к набору. 
Результат исследования считают достоверным, если результаты, полученные для 
контрольных образцов, соответствуют критериям валидности, указанным в 
таблице 10;
- в автоматическом режиме с использованием программного обеспечения FRT 
Manager версии 2.0 или выше {ООО «ИнтерЛабСервис», Россия, РУ № РЗН 
2019/8870) согласно руководству пользователя, выбрав методику, указанную во 
вкладыше, прилагаемом к набору. Руководство пользователя размещено на 
официальном сайте ООО «ИнтерЛабСервис» по адресу: 
https://www.interlabservice.ru/service/frt/. Используемые в программном обеспечении 
алгоритм интерпретации результатов для исследуемых образцов и критерии 
валидности результатов, полученных для контролей, представлены в таблицах 9 и 
10 соответственно.
Таблица 8
Интерпретация результатов для исследуемых образцов 
при проведении качественного анализа
Результат Интерпретация
Значение Ct по каналу для флуорофора Су5 отсутствует  
или определено выше граничного^®, при этом значения Ct  
по каналам для флуорофоров РАМ и R6G отсутствуют.
Невалидный!
Сбой ВКО! Требуется повторить  
анализ
Значение Ct по каналам для флуорофоров РАМ и/или R6G  
определено не выше граничного. При этом кривая  
флуоресценции данной пробы по данному каналу  
пересекает пороговую линию на участке характерного  
экспоненциального подъема флуоресценции.
ДНК HSV I и/или ДНК HSV II  
обнаружена
Значения Ct по каналам для флуорофоров РАМ и R6G  
отсутствуют, а по каналу для флуорофора Су5 определено  
значение Ct не выше граничного.
ДНК выявляемых типов вируса  
простого герпеса не обнаружена
50637
20.07.2021


--- стр. 30 ---
Интерпретация результатов для исследуемых образцов 
при проведении количественного анализа
Результат Интерпретация
Значение Ct по каналу для флуорофора Су5 отсутствует  
или определено выше граничного^\ при этом значения Ct  
по каналам для флуорофоров FAWI и R6G отсутствуют.
Невалидный!
Сбой ВКО! Требуется повторить  
анализ
Рассчитанное значение концентрации ДНК HSV 1  и/или  
ДНК HSV II (ГЭ/мл) меньше нижнего предела линейного  
диапазона измерения набора
ДНК HSV 1  и/или ДНК HSV II  
обнаружена в концентрации  
менее 2x10^ ГЭ/мл
Рассчитанное значение концентрации ДНК HSV 1  и/или  
ДНК HSV II (ГЭ/мл) находится в пределах линейного  
диапазона измерения набора
ДНК HSV 1  и/или ДНК HSV II  
обнаружена в концентрации  
ГЭ/мл
Рассчитанное значение концентрации ДНК HSV 1  и/или  
ДНК HSV II (ГЭ/мл) выше верхнего предела линейного  
диапазона измерения набора
ДНК H S V I и/или ДНК HSV II  
обнаружена в концентрации  
более 1x10^ ГЭ/мл
Значения Ct по каналам для флуорофоров FAM и R6G  
отсутствуют, а по каналу для флуорофора Су5 определено  
значение Ct не выше граничного
ДНК выявляемых типов вируса  
простого герпеса не обнаружена
Таблица 10
Критерии валидности для контрольных образцов
Контроль
Результаты амплиф икации по каналу для ф луороф ора
FAM R6G Суб
ОКО
(отрицательный  
контроль экстракции)
Значение Ct отсутствует
Определено значение Ct  
не больше граничного
К- (отрицательный  
контроль ПЦР) Значение Ct отсутствует
К1 HS (К1) Определено значение Ct
К2 HS (К2) Определено значение Ct не выше граничного^''
К1 HS (К1)  
К2 HS (К2)
Показатель эффективности (Е) для калибраторов укладывается в диапазон
0 ,8 - 1,2
8.6. Возможные ошибки
8.6.1. Для отрицательного контроля (ОКО) по каналу для флуорофора FAM и 
R6G/HEX/JOE/VIC определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна 
контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов 
или исследуемых образцов на каком-либо этапе исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить 
исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых типов 
вируса простого герпеса, начиная с этапа экстракции ДНК.
50637
20.07.2021


--- стр. 31 ---
8.6.2. Для отрицательного контроля (К-) по каналу для флуорофора FAM, и/или 
R6G/HEX/JOEA/IC и/или Суб определено значение порогового цикла (Ct). Вероятна 
контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, 
исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо 
предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить 
исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых типов 
вируса простого герпеса, начиная с этапа амплификации ДНК.
8.6.3. Если показатель эффективности Е для калибраторов не укладывается в 
диапазон 0,8 - 1,2, необходимо проверить правильность заданных концентраций 
калибраторов в соответствии с вкладышем к набору реагентов и правильность 
выбранного уровня пороговой линии. Если при правильно заданных концентрациях 
калибраторов и уровне пороговой линии показатель эффективности не 
укладывается в требуемый диапазон, следует повторить исследование, начиная с 
этапа ПЦР.
8.6.4. Для исследуемого образца определено значение порогового цикла, при
этом на графике флуоресценции отсутствует участок характерного
экспоненциального подъема (график представляет собой приблизительно прямую 
линию). Необходимо проверить правильность выбранного уровня пороговой линии 
или параметров расчета базовой линии. Если результат получен при правильном 
уровне пороговой линии (базовой линии), требуется повторно провести 
амплификацию и детекцию для этого образца.
8.6.5. В случае получения невалидных результатов требуется повторное
исследование образца, начиная с этапа экстракции ДНК. В случае воспроизводимого 
результата рекомендуется повторно провести взятие и исследование
биологического материала.
8.7. Диагностическое значение полученного результата
ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования 
пациента, на основании которых лечащий врач устанавливает диагноз и выбирает 
мероприятия по лечению пациента. Результаты, лолученные при использовании 
набора, следует рассматривать и интерпретировать в сочетании с данными других 
клинических и лабораторных исследований.
50637
20.07.2021


--- стр. 32 ---
9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
9.1. Предел обнаружения^^
Предел обнаружения набора «АмплиПрайм® HSVI/HSV1I» был определен с 
использованием пробит-анализа с 95%-ой доверительной вероятностью на каждом 
виде биоматериала с использованием наборов для экстракции, указанных 
в пункте 6.3.1. данной инструкции (см. таблицу 11).
Значения характеристики, указанные в таблице 11, достигаются при соблюдении 
правил, указанных в разделе «Исследуемый материал».
Таблица 11
Предел обнаружения набора
Тип HSV Предел обнаружения по  
Probit 95%, ГЭ/мл
95% -ый доверительный  
интервал, ГЭ/мл
HSV1 1x10^ 8,99x102-3,67x103
HSVII 1x10^ 7,69x102-2,98x103
9.2. Линейный диапазон измерения и предел измерения
Диапазон, в котором набор «АмплиПрайм® HSV I / HSV II» дает линейный ответ, 
находится в пределах от 2x10^ до 1x10"^ ГЭ/мл. Предел измерения набора является 
нижним пределом линейного диапазона измерения набора. Указанные значения 
характеристики достигаются при соблюдении правил, указанных в разделе 
«Исследуемый материал».
9.3. Аналитическая специфичность
Набор «АмплиПрайм® HSVI/HSVII»  обнаруживает фрагменты ДНК HSV I и 
HSV11.
Аналитическая специфичность набора оценивалась тестированием ДНК 
микроорганизмов (см. таблицу 12) и геномной ДНК человека. ДНК микроорганизмов 
в концентрации не менее 1x10^ ГЭ/мл и геномную ДНК человека в концентрации 
1 мкг/мл вносили в образцы биологического материала, не содержащие 
определяемые с помощью набора типы HSV.
Дополнительно подтверждалось отсутствие перекрестных реакций между 
выявляемыми тилами HSV при тестировании ДНК HSV в концентрации не менее 
1x10^ ГЭ/мл.
Предел обнаружения -  95%-ое положительное пороговое значение концентрации (концентрация  
ДНК определяемого микроорганизма, при которой 95% тестов дают положительный результат).
50637
20.07.2021


--- стр. 33 ---
Микроорганизмы, ДНК которых использовалась для оценки аналитической
специфичности
Микроорганизмы
Candida albicans Neisseria gonorrhoeae
Chlamydia trachom atis Neisseria subfiava
Escherichia coli Streptococcus agalactiae
Mycoplasm a genitalium Streptococcus pyogenes
Neisseria mucosa Staphylococcus aureus
Neisseria Sicca -
При тестировании образцов ДНК вышеперечисленных микроорганизмов и 
геномной ДНК человека, а также ДНК выявляемых типов HSV в высоких 
концентрациях с использованием набора перекрестных реакций выявлено не было.
9.4. Воспроизводимость и повторяемость измерения
Воспроизводимость и повторяемость измерений с помощью набора 
«АмплиПрайм® HSV I / HSV II» оценивали путем тестирования модельных образцов 
биологического материала, содержащих ДНК выявляемых типов вируса простого 
герпеса в трех диапазонах концентраций (см. таблицу 13 и 14). Модельные образцы 
были приготовлены разведением стандартных образцов предприятия, содержащих 
ДНК выявляемых типов вируса простого герпеса, в биологическом материале, не 
содержащем ДНК указанных типов вируса простого герпеса и каких-либо других 
возбудителей ИППП. Каждый образец проходил все этапы исследования 
(экстракцию ДНК, амплификацию ДНК и детекцию результатов).
Тестирование каждого разведения для оценки повторяемости проводилось в 16 
повторах, для оценки воспроизводимости - в 32 повторах.
Таблица 13
Повторяемость измерения
Тип HSV Исходное значение  
концентрации, ГЭ/мл
Среднее измеренное  
значение
концентрации, 1оаю
Стандартное  
отклонение  
(SD), 1одю
Коэффициент  
вариации (CV),
%
HSV I
от IxlO'* до 3x1 O'*
4,31 0,13 3,11
HSVil 4,26 0,14 3,23
HSV I
от 1x10^ до 3x10^
5,30 0,14 2,60
HSV II 5,28 0,15 2,77
HSV I
от 1x 106 до 3x106
6,31 0,08 1,29
HSV II 6,29 0,14 2,18
50637
20.07.2021


--- стр. 34 ---
Воспроизводимость измерения
Тип HSV Исходное значение  
концентрации, ГЭ/мл
Среднее измеренное  
значение
концентрации, loqio
Стандартное  
отклонение  
(SD), 1орю
Коэффициент  
вариации (CV),
%
HSVI
от 1x10'^ до ЗхЮ'*
4,29 0,14 3,19
HSV1I 4,31 0,13 3,07
HSV!
от 1x10^ до 3x10^
5,31 0,14 2,60
HSVII 5,29 0,14 2,71
HSVI
от 1x10® до 3x10®
6,31 0,17 2,72
HSVII 6,30 0,17 2,69
9.5. Правильность измерения
Правильность измерения с помощью набора «АмплиПрайм® HSV I / HSV II» была 
определена путем тестирования стандартных образцов предприятия в 40 повторах 
(см. таблицу 15).
Таблица 15
Правильность измерения
Микроорганизм Среднее значение  
измерения, 1одю
Установленное значение  
концентрации, 1одю
Систематическая  
погрешность (В)
1одю %
HSVI 5,72 5,70 0,02 0,34
HSVII 5,71 5,70 0,01 0,16
9.6. Диагностическая чувствительность и диагностическая специфичность
Для определения диагностических характеристик набора 
«АмплиПрайм® HSVI / HSVII» были использованы 200 образцов соскобного 
материала или отделяемого слизистых оболочек урогенитального тракта, 200 
образцов соскоба эпителия со слизистой оболочки прямой кишки, 200 образцов 
соскобного материала или отделяемого слизистых оболочек ротоглотки, 60 образцов 
отделяемого конъюнктивы, 60 образцов секрета предстательной железы, 60 
образцов мочи, 60 образцов слюны, 60 образцов цельной крови, 40 образцов 
ликвора, 200 образцов отделяемого пузырьковых высыпаний и эрозивно-язвенных 
поражений кожи и слизистых оболочек, 60 образцов эякулята.
В качестве референтного метода, с помощью которого устанавливали наличие 
или отсутствие ДНК определяемых типов вируса простого герпеса, использовались 
следующие наборы реагентов:
- Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов простого 
герпеса 1 и 2 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального 
времени (РеалБест ДНК ВПГ-1/ВПГ-2) по ТУ 9398-278-23548172-2011 (РУ № ФСР 
2012/13313);
50637
20.07.2021


--- стр. 35 ---
- Набор реагентов для определения ДНК вируса простого герпеса (HSV) и 
цитомегаловируса (CMV) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для 
диагностики in vitro «АмплиПрайм® HSV / CMV» по ТУ 9398-017-09286667-2014 
(РУ № РЗН 2015/3485).
Результаты тестирования набора в сравнении с референтным методом 
приведенЫ'В таблице 16.
Таблица 16
Результаты тестирования образцов биологического материала с помощью
набора «АмплиПрайм® HSV I / HSV II»
Исследуемые образцы Результаты тестирования
Тип Количество Образцы АмплиПрайм®  
HSV I / HSV II
Наборы
сравнения
Соскобный материал или  
отделяемое слизистых оболочек  
урогенитального тракта
200
Положительных 100 100
Отрицательных 100 100
Соскобы эпителия со слизистой  
оболочки прямой кишки 200
Положительных 100 100
Отрицательных 100 100
Соскобный материал или  
отделяемое слизистых  
оболочек ротоглотки
200
Положительных 100 100
Отрицательных 100 100
Отделяемое конъюнктивы 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Моча 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Слюна 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Секрет предстательной железы 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Цельная кровь 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Ликвор 40
Положительных 20 20
Отрицательных 20 20
Отделяемое пузырьковых  
высыпаний и эрозивно­
язвенных поражений кожи и  
слизистых оболочек
200
Положительных 100 100
Отрицательных 100 100
Эякулят 60
Положительных 30 30
Отрицательных 30 30
Значения диагностической специфичности и чувствительности набора 
«АмплиПрайм® HSV I / HSV II» с доверительной вероятностью 95 %, рассчитанные 
исходя из полученных данных, приведены в таблице 17.
50637
20.07.2021


--- стр. 36 ---
Диагностические характеристики набора
Тип образцов Диагностическая  
специф ичность, %
Диагностическая  
чувствительность, %
Соскобный материал или  
отделяемое слизистых  
оболочек урогенитального  
тракта
100% (97,0-100) % 100% (97,0-100) %
Соскобы эпителия со  
слизистой оболочки прямой  
кишки
100% (97,0-100) % 100% (97,0-100) %
Соскобный материал или  
отделяемое слизистых  
оболочек ротоглотки
100% (97,0-100) % 100% (97,0-100) %
Отделяемое конъюнктивы 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100) %
Моча 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100)%
Слюна 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100) %
Секрет предстательной  
железы 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100) %
Цельная кровь 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100) %
Ликвор 100% (86,1-100) % 100% (86,1-100) %
Отделяемое пузырьковых  
высыпаний и эрозивно­
язвенных поражений кожи и  
слизистых оболочек
100% (97,0-100) % 100% (97,0-100) %
Эякулят 100% (90,5-100) % 100% (90,5-100) %
9.7. Оценка влияния интерферирующих веществ и ДНК человека
Влияние интерферирующих веществ, потенциально содержащихся или 
присутствующих в исследуемом материале, на эффективность ПЦР при использовании 
набора «АмплиПрайм® HSVI / HSVII» отсутствует. Не выявлено ингибирование 
реакции амплификации при добавлении к образцам отделяемого слизистой оболочки 
влагалища на этапе экстракции интерферирующих веществ, представленных в 
таблице 18, в максимально возможной концентрации для данных видов биоматериала:
Таблица 18
Интерферирующие вещества, использованные при тестировании набора
«АмплиПрайм® HSV I / HSV II»
Вид биоматериала Интерферент Концентрация интерферента в образце
отделяемое слизистой 
оболочки ротоглотки
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
мирамистин 0,001 % действующего вещества в 100 мкл
хлоргексидин 0,1% действующего вещества в 100 мкл
отделяемое конъюнктивы
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
моча
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
мочевина 0,033 ммоль/100 мкл
50637
20.07.2021


--- стр. 37 ---
Вид биом атериала И нтерф ерент Концентрация интерф ерента в образце
секрет предстательной 
железы
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
мочевина 0,033 ммоль/100 мкл
цельная кровь гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
слюна
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
ликвор гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
отделяемое пузырьковых 
высыпаний и эрозивно­
язвенных поражений кожи 
и слизистых оболочек
муцин 0,23 мг/100 мкл
гемоглобин 0,20 ммоль/100 мкл
мирамистин 0,001 % действующего вещества в 100 мкп
Ю.УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Срок годности
Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления. После 
вскрытия реагенты использовать до истечения срока годности набора. Набор с 
истекшим сроком годности применению не подлежит.
10.2. Транспортирование
Набор транспортировать при температуре от 2 до 8 °С всеми видами крытых 
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в 
авторефрижераторах. Не допускается замораживание реагентов.
Допускается транспортирование при температуре от 8 до 25 °С не более 3 суток.
Набор, транспортированный с нарушением указанного температурного режима, 
применению не подлежит.
10.3. Хранение
Набор хранить при температуре от 2 до 8 °С в защищенном от света месте в 
течение всего срока годности набора. Не допускается замораживание реагентов.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. 
Невскрытые и вскрытые реагенты стабильны в течение срока годности, указанного 
на этикетке, при соблюдении указанных условий хранения.
Набор, хранившийся с нарушением указанного режима хранения, применению не 
подлежит.
11.ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям, 
указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного 
срока годности при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и 
применения.
50637
20.07.2021


--- стр. 38 ---
Рекламации на качество набора «АмплиПрайм® HSVI/HSVII»  направлять в 
адрес производителя ООО «НекстБио»: 111394, г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2, 
тел. (495) 620-08-73, e-mail; info@nextbio.ru.
При выявлении нежелательных реакций при использовании набора, фактов и 
обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских 
работников при обращении и эксплуатации набора, рекомендуется направить 
сообщение по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную 
регулирующую организацию (в Российской Федерации - Федеральная служба по 
надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим 
законодательством.
Консультацию по работе с набором, а также по вопросам, касающимся качества 
набора, можно получить по контактам, указанным на официальном сайте 
Производителя: www.nextbio.ru.
50637
20.07.2021