Набор реагентов для определения концентрации гликозилированного гемоглобина (HbA1c) в цельной крови иммунотурбидиметрическим методом (ГЛИКОЗИЛИРОВАННЫЙ ГЕМОГЛОБИН-ВИТАЛ) по ТУ 9398-012-94568735-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от №
Ё О П И Я
УТВЕРЖДАЮ
т^ ^ '•'^ н е р а л ь н ы ^ директор
- £ Г/ / : : У .4
о «Вита:л Девелопмент Корпорэйшн»
Е.Н.Схолль-Энгбертс
2011 г.
V O 'Р \\ ■ ''ч
ИНСТРУКЦИЯ
енению набора реагентов для определения концентрации
козилированного гемоглобина (HbAlc) в цельной крови
иммунотурбидиметрическим методом
(Гликозилированный гемоглобин - Витал)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов Гликозилированный гемоглобин - Витал предназначен для количественного
определения процентного содержания гликозилированного гемоглобина (HbAlc) в цельной крови человека
иммунотурбидиметрическим методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и
научно-исследовательской практике.
Определение содержания HbAlc в цельной крови человека имеет важное значение для ранней
диагностики сахарного диабета, для длительного контроля за состоянием больных диабетом, т.к. уровень
HbAlc отражает среднюю концентрацию глюкозы в крови на протяжении предшествующих 4-8 недель, а
также для контроля за эффективностью проводимого лечения. Высокий уровень HbAlc свидетельствует о
недостаточной коррекции содержания глюкозы в крови. Содержание H bA lc обычно выражают в процентах
от общей концентрации гемоглобина.
Набор рассчитан для проведения 80 определений при расходе 350 мкл реагента 1 и 125 мкл
рабочего реагента на один анализ.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1, Принцип метода
Для определения концентрация гликозилированного гемоглобина использован метод
иммунотурбидиметрического анализа. Гемоглобин и гликозилированный гемоглобин (HbAlc) одинаково
адсорбируются на поверхности частиц латекса. При взаимодействии поликлональных козьх антител к
иммуноглобулину G мыщи с комплексом, образованным монокллональными мышиными антителами к
HbAlc и молекулами HbAlc, адсорбированными на частицах латекса, возникает агглютинация, степень
которой пропорциональна количеству молекул HbAlc. Агглютинация увеличивает оптическую плотность
исследуемой пробы, которая регистрируется фотометрически при длине волны 670(580-690) нм. Величину
содержания HbAlc в анализируемых пробах (в %) определяют по калибровочному графику.
2.2. Состав набора:
- реагент 1; латекс (глициновый буфер [глицин, натрия гидроокись, кислота соляная; 20
ммоль/л], pH 7,8; латекс полимерный, 0,13%; натрия азид, 0,95 г/л}, готов к использованию - 4 флакона
(по 7,5 мл);
- реагент 2; буфер {глициновый буфер [глицин, натрия гидроокись, кислота соляная; 80
ммоль/л], pH 7,8; натрия азид, 0,95 г/л} - 1 флакон (9,5 мл);
--- стр. 2 ---
- реагент 3: антитела [натрия хлорид, 154 ммоль/л; антитела моноклональные мышиные к
гликозилированному гемоглобину человека, 50 мг/л; антитела поликлональные козьи к
иммуноглобулину G мыши, 0,8 мг/л; натрия азид, 0,95 г/л] -1 флакон (0,5 мл);
- реагент 4: гемолизирующий реагент (натрия азид, 0,95 г/л), готов к использованию - 1
флакон (200 мл).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейная область определения концентрации H bA lc - в диапазоне от 4 до 12%, отклонение от
«линейности» - не более 10 %.
Чувствительность определения - не более 3%.
Коэффициент вариации результатов определений - не более 8 %.
Карбомилированный гемоглобин в концентрации до 7,5 ммоль/л, ацетилированный гемоглобин в
концентрации до 5 ммоль/л, билирубин в концентрации до 855 мкмоль/л и триглицериды в концентрации
до 22,8 ммоль/л не мешают определению содержания HbAlc иммунотурбидиметрическим методом.
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным сывороткам,
аттестованным данным методом.
Нормальные величины концентрации HbAlc в цельной крови у здоровых людей составляют менее
6%. Контролируемый уровень глюкозы в крови у больных диабетом - при содержании HbAlc в цельной
крови от 6 до 7%, Неконтролируемый уровень глюкозы в крови у больных диабетом - при содержании
HbAlc в цельной крови более 8%,
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин содержания HbAlc в
цельной крови для обследуемого контингента людей.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Реагенты содержат токсичный компонент - натрия азид. При работе с ними следует соблюдать
осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые. В случае из попадания на кожу и слизистые
следует промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует
выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту,
Меры предосторожности - соблюдение «Правила устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
При работе с набором необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к.
кровь человека является потенциально инфицированным материалом, способным длительное время
сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ,
НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
спектрофотометр, длина волны 670 нм, термостатируемая кювета с длиной оптического пути 10
мм или автоматический (полуавтоматический) биохимический анализатор открытого типа, длина
волны 670 (580-690) нм;
секундомер;
пипетки полуавтоматические одноканальные, со сменными наконечниками, позволяющие
отмерять объемы жидкости 5-40 мкл, 5-200 мкл и 200-1000 мкл;
пробирки стеклянные вместимостью 3,0-5,0 мл;
вода дистиллированная;
физиологический раствор (0,9% NaCl);
перчатки резиновые или пластиковые;
масштабно-координатная бумага;
набор калибраторов «Гликозилированный гемоглобин-Калибратор-Витал» (4 уровня).
--- стр. 3 ---
6. АНАЛЮИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Свежая цельная кровь человека, антикоагулянт-ЭДТА.
Образцы цельной крови можно хранить при температуре 2-8'’С не более 48 ч; не замораживать.
7. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Компоненты набора и исследуемые образцы цельной крови выдержать при комнатной температуре
(18-25°С) в течение времени не менее 30 мин.
Реагент 1 и реагент 4 готовы к использованию. Непосредственно перед использованием реагент 1
следует перемешать!
Приготовление рабочего реагента.
Содержимое флакона с реагентом 3 количественно перенести во флакон с реагентом 2 и аккуратно
перемешать, избегая вспенивания.
Приготовленный рабочий реагент можно хранить при температуре 2-8°С не более 1 мес.
Построение калибровочного графика.
Калибраторы, входящие в состав набора «Гликозилированный гемоглобин-Калибратор-Витал»,
приготовить (растворить) в соответствии с инструкцией по использованию этого набора.
Подготовить 5 пробирок вместимостью 3,0 мл. Внести в каждую пробирку по 1,0 мл реагента 4.
Добавить в соответствзтощую пробирку по 20 мкл соответствующего калибратора из наборов капибраторов
(4 уровня), в пятую пробирку добавить 20 мкл физиологического раствора (нулевая точка калибровки).
Тщательно перемешать содержимое пробирок и инкубировать при температуре 18-25®С в течение времени
не менее 5 мин до полного завершения гемолиза (гемолизат).
Приготовить 5 пробирок вместимостью 3,0 мл, внести в каждую пробирку по 350 мкл
предварительно перемешанного реагента 1, добавить в соответствующую пробирку по 10 мкл полученного
гемолизата, пробы тщательно перемешать и инкубировать при температуре 37°С в течение 5 мин (точно!).
Добавить в каждую пробирку по 125 мкл рабочего реагента, тщательно перемешать, инкубировать при
температуре 37®С в течение 5 мин (точно!), перемешать и измерить оптическую плотность калибровочных
проб против нулевой точки калибровки при длине волны 670 (580-690) нм в кювете с длиной оптического
пути 10 мм.
Построить на масштабно-координатной бумаге калибровочный график в полулогарифмических
координатах, откладывая на оси абсцисс (логарифмическая) значения содержания гликозилированного
гемоглобина в калибраторах, а на оси ординат (линейная) - значения соответствующих величин
оптических плотностей калибраторов.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Приготовить необходимое количество пробирок вместимостью 3,0 мл для анализируемых проб и
одну пробирку вместимостью 3,0 мл для контрольной (холостой) пробы.
Во все пробирки внести по 1,0 мл реагента 4. В пробирки для опытных проб добавить по 20 мкл
анализируемых образцов цельной крови человека, содержащих HbAlc, в пробирку для контрольной
(холостой) пробы - 20 мкл физиологического раствора. Тщательно перемешать содержимое пробирок и
инкубировать при температуре 18-25°С в течение времени не менее 5 мин до полного завершения гемолиза
(гемолизат).
Приготовить необходимое количество (по числу анализируемых проб) пробирок вместимостью 3,0
мл для опытных проб и 1 пробирку вместимостью 3,0 мл для контрольной (холостой) пробы. Внести в
каждую пробирку по 350 мкл предварительно перемешанного реагента 1, добавить в каждую пробирку для
опытных проб по 10 мкл гемолизата, полученного из опытных проб и контрольной (холостой) пробы,
тщательно перемешать и инкубировать при температуре 37°С в течение 5 мин (точно!). Добавить в каждую
пробирку по 125 мкл рабочего реагента, тщательно перемешать, инкубировать при температуре 37°С в
течение 5 мин (точно!), перемешать и измерить оптическую плотность опытных проб против контрольной
(холостой) пробы при длине волны 670 (580-690) нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.