Набор реагентов для определения концентрации холестерина липопротеидов высокой плотности в сыворотке (плазме) крови энзиматическим колориметрическим методом с иммуноингибированием, без осаждения (HDL-холестерин-ВИТАЛ) по ТУ 9398-006-94568735-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
У Т В Е Р Ж Д Е Н А
Приказом Росздравнадзора
от Д у . е-.Ш^}2009 г. №
Гене
ООО
\ ,'^5к=5-
директор
Девелопмент Корпорэйшн»
Е.Н.Схолль-Энгбертс
2009 г.}> i> */^{'к.С
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения концентрации холестерина липопротеидов
высокой плотности в сыворотке (плазме) крови энзиматическим колориметрическим методом
с иммуноингибированием, без осаждения
(H D L -хол естерин-ВИТ А Л )
1. Н А З Н А Ч Е Н И Е
Набор реагентов H D L-холестерин-ВИТАЛ предназначен для количественного
определения концентрации холестерина липопротеидов высокой плотности (H D L -холестерин) в
сыворотке (плазме) крови человека энзиматическим колориметрическим методом с
иммуноингибированием, без осаждения в клинико-диагностических и биохимических
лабораториях и научно-исследовательской практике.
Липопротеиды высокой плотности (H D L) - антиатерогенная липидная фракция. Кроме
H D L, в периферической крови содержатся липопротеиды низкой плотности (L D L ),
липопротеиды промежуточной плотности (ID L ), липопротеиды очень низкой плотности (V H D L)
и хиломикроны. Низкий уровень H D L -холестерина является положительным прогностическим
признаком для пациентов с атеросклерозом и ишемической болезнью сердца.
Набор рассчитан для проведения 50 или 100 определений при расходе 0,9 мл реагента 1 и
0,3 мл реагента 2 на один анализ.
2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А Б О Р А
2.1. Принцип метода
Антитела против Р-липопротеидов человека, входящие в состав реагента 1 , связывают все
фракции липопротеидов, кроме HD L. Образовавшийся иммунный комплекс не взаимодействует
с ферментами, входящими в состав реагента 2. Холестеринэстераза и холестериноксидаза,
взаимодействуют только с H D L -холестерином. При гидролизе H D L-холестерина
холестеринэстеразой образуется свободный холестерин, который окисляется кислородом воздуха
под действием холестериноксидазы с образованием эквимолярного количества перекиси
водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с
образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации
H D L-холестерина в анализируемой пробе.
К о П . - й ; р Щ А
fc>H
•согро'»'»''/
____'
r.
--- стр. 2 ---
т
2.2. Состав набора:
- реагент 1: {H E P E S (К,К-бис[2-гидроксиэтил-2-аминоэтансульфоновая] кислота, 30
ммоль/л; пероксидаза, 2400 Ел/л; 4-аминоантипирин, 0,9 ммоль/л; козьи антитела к
человеческому [3-липопротеину, 10 мг/л; аскорбатокисдаза, 2700 Ед/л}, pH 7,0, готов к
использованию - 1 флакон (45 мл) или 2 флакона (по 45 мл);
- реагент 2: (H E P E S (N,N-биc[2-гидpoкcиэтил-2-aминoэтaнcyльфoнoвaя] кислота, 30
ммоль/л; холестериноксидаза, 20000 Ед/л; N-этил-N-(2-гидpoкcи-3-cyльфoпpoпил)-3,5-
диметокси-4'фтороанилин, F-DAOS, 0,8 ммоль/л; холестеринэстераза, 4000 Ед/л}, pH 7,0, готов к
использованию - 1 флакон (15 мл) или 2 флакона (по 15 мл);
- калибратор (лиофилизированная сыворотка крови человека, концентрация HDL-
холестерина после растворения в 3,0 мл дистиллированной воды указана в паспорте на набор и
на этикетке флакона) - 1 флакон.
3. А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е И Д И А Г Н О С Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И
Линейная область определения концентрации H D L -холестерина - в диапазоне от 0,15 до
4,66 ммоль/л, отклонение от «линейности» - не более 5 % .
Чувствительность определения - не более 0,1 ммоль/л.
Коэффициент вариации результатов определений - не более 5 % .
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным
сывороткам, аттестованным данным методом.
Нормальные величины концентрации H D L -холестерина в сыворотке или плазме крови
составляют 1,4 - 1,55 ммоль/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин H D L-
холестерина для обследуемого контингента людей.
4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Меры предосторожности - соблюдение «Правила устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
При работе с набором необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые
перчатки, т.к. кровь человека является потенциально инфицированным материалом, способным
длительное время сохранять и передавать ВИ Ч , вирусы гепатита или любой другой возбудитель
вирусной инфекции.
5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы ,
Н Е О Б Х О Д И М Ы Е П Р И Р А Б О Т Е С Н А Б О Р О М :
Автоматический биохимический анализатор или спектрофотометр, длина волны 600
(593)/700 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
термостат, поддерживающий температуру 37±0,1 °С ;
- секундомер;
пипетки полуавтоматические одноканальные, позволяющие отмерять объемы
жидкости 10 мкл, 300 мкл и 900 мкл;
пробирки стеклянные вместимостью 3,0-5,0 мл;
вода дистиллированная;
физиологический раствор (0,9% NaCl);
перчатки резиновые или пластиковые.
--- стр. 3 ---
6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы
Свежая сыворотка или гепаринизированная плазма крови. Образцы сыворотки или плазмы
крови можно хранить при температуре 2-8°С не более 7 суток; при необходимости более
длительного хранения (до 6 недель) - при температуре минус 70°С и ниже. Повторное
замораживание образцов не допускается.
7. П О Д Г О Т О В К А К А Н А Л И З У
Компоненты набора и исследуемые образцы сыворотки (плазмы) крови выдержать при
комнатной температуре (18-25°С) в течение времени не менее 30 мин.
Подготовка реагентов
Реагент 1 и реагент 2 готовы к использованию.
Подготовка калибратора
Во флакон с калибратором внести 3,0 мл дистиллированной воды и перемешать до
полного растворения лиофилизата при осторожном перемешивании при комнатной температуре.
Приготовленный калибратор можно хранить при температуре 2-8°С не более 7 сут.
8. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А
Компоненты реакционной смеси отобрать в количествах, указанных в таблице.
Таблица
Отмерить, мл Опытная проба Калибровочная
проба
Контрольная
(холостая) проба
Сыворотка (плазма) крови 0,01 - -
Реагент 1 0,9 0,9 0,9
Калибратор - 0,01 -
Ф
Пробы тщательно перемешать, инкубировать при температуре 37°С в течение 5 мин
(точно) и измерить величину оптической плотности (О П ) опытных проб и калибровочной пробы
(О П1) против контрольной (холостой) пробы при длине волны 600(593)/700 нм в кювете с длиной
оптического пути 10 мм. Во все пробирки добавить по 0,3 мл реагента 2, пробы тщательно
перемешать, инкубировать при температуре 37°С в течение 5 мин (точно) и повторно измерить
величину ОП анализируемых проб и калибровочной пробы (О П2) против контрольной (холостой)
пробы при длине волны 600(593)/700 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.
Вычислить разность ОП для каждой опытной пробы и для калибровочной пробы по
формуле:
Д0П=0П2 - О П 1
Концентрацию H D L -холестерина (С, ммоль/л) в анализируемых пробах сыворотки или
плазмы крови рассчитать по формуле:
С ~ (ДОПоп • ДОПкал)^Скал
где: ДОПоп - величина разности ОП анализируемых проб сыворотки или плазмы крови,
ед. опт. плоти.;
ДОПкал - величина разности ОП калибровочной пробы, ед. опт. плотн.;
Скал “ концентрация H D L -холестерина в калибраторе, ммоль/л.