Набор реагентов для определения концентрации холестерина липопротеидов низкой плотности в сыворотке (плазме) крови энзиматическим колориметрическим методом с селективной защитой, без осаждения (LDL-холестерин-ВИТАЛ) по ТУ 9398-005-94568735-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖ Д ЕН А
Приказом Росздравнадзора ^тор
пмент Корпорэйшн»
] j l ___Е.Н.Схолль-Энгбертс
2009 г.
Ф
И Н С Т Р У К Ц И Я
по применению набора реагентов для определения концентрации холестерина липопротеидов
низкой плотности в сыворотке (плазме) крови энзиматическим колориметрическим методом
с селективной защитой, без осаждения
(L D L -холестерин-ВИТАЛ)
Ф
1. Н А З Н А Ч Е Н И Е
Набор реагентов LD L-холестерин-ВИТАЛ предназначен для количественного
определения концентрации холестерина липопротеидов низкой плотности (LD L-холестерин) в
сыворотке (плазме) крови человека энзиматическим колориметрическим методом с селективной
защитой, без осаждения в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-
исследовательской практике.
Липопротеиды низкой плотности (LD L) - проатерогенная липидная фракция. Кроме LDL,
в периферической крови содержатся липопротеиды высокой плотности (HDL), липопротеиды
промежуточной плотности (ID L), липопротеиды очень низкой плотности (V LD L) и
хиломикроны. Высокий уровень L D L -холестерина связан с повышенным риском сердечно
сосудистых заболеваний.
Набор рассчитан для проведения 50 или 100 определений при расходе 0,9 мл реагента 1 и
0,3 мл реагента 2 на один анализ.
2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А БО РА
2.1. Принцип метода
При добавлении к анализируемому образцу реагента I образуется комплекс, который
защищает LD L -холестерин от ферментов - холестеринэстеразы и холестериноксидазы,
взаимодействующих с остальными фракциями липопротеидов. Образующаяся в ходе реакции
перекись водорода разрушается каталазой. При добавлении реагента 2 происходит
высвобождение LD L-холестерина из комплекса; натрия азид инактивирует каталазу. При
гидролизе оставшегося в растворе LD L-холестерина холестеринэстеразой образуется свободный
холестерин, который окисляется кислородом воздуха под действием холестериноксидазы с
образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Под действием пероксидазы
перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта.
Интенсивность окраски пропорциональна концентрации L D L -холестерина в анализируемой
■ > иI/-
--- стр. 2 ---
ф
ф
2.2. Состав набора:
- реагент 1: {H EP ES (N,N-биc[2-гидpoкcиэтил-2aминoэтaнcyльфoнoвaя] кислота, 25
ммоль/л; холестериноксидаза, 5000 Ед/л; холестеринэстераза, 5000 Ед/л; Ы-(2-гидрокси-3-
сульфопропил)-3,5-диметоксианилин, HDAOS, 0,64 ммоль/л; каталаза, 1000000 Ед/л;
аскорбатоксидаза, 5 Ед/л}, pH 6,8, готов к использованию - 1 флакон (45 мл) или 2 флакона (по
45 мл);
- реагент 2: (blEPES (N,N-биc[2-гидpoкcиэтил-2-aминoэтaнcyльфoнoвaя] кислота, 25
ммоль/л; пероксидаза, 20000 Ед/л; 4-аминоантипирин, 0,9 ммоль/л; натрия азид, 0,095%}, pH 7,0,
готов к использованию - 1 флакон (15 мл) или 2 флакона (по 15 мл);
- калибратор (лиофилизированная сыворотка крови человека, концентрация LDL-
холестерина после растворения в 1,0 мл дистиллированной воды указана в паспорте на набор и
на этикетке флакона) - 1 флакон.
3. А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е И Д И А ГН О С Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И
Линейная область определения концентрации LD L-холестерина - в диапазоне от 0,2 до
7,50 ммоль/л, отклонение от «линейности» - не более 5 %.
Чувствительность определения - не более 0,1 5 ммоль/л.
Коэффициент вариации результатов определений - не более 5 %.
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным
сывороткам, аттестованным данным методом.
Нормальные величины концентрации L D L -холестерина в сыворотке или плазме крови
составляют менее 3,37 ммоль/л. Содержание LD L-холестерина в диапазоне 3,37-4,15 ммоль/л
характеризует группу риска сердечно-сосудистых заболеваний, а содержание LD L-холестерина
более 4,15 ммоль/л свидетельствует о наличии патологии сердечно-сосудистой системы.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин LD L-
холестерина для обследуемого контингента людей.
4. М Е Р Ы П РЕД О С Т О РО Ж Н О С Т И
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Меры предосторожности - соблюдение «Правила устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые
перчатки, т.к. кровь человека является потенциально инфицированным материалом, способным
длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель
вирусной инфекции.
5. О БО РУ Д О ВА Н И Е И М А Т ЕР И А Л Ы ,
Н Е О Б Х О Д И М Ы Е П РИ Р А Б О Т Е С Н А БО РО М :
Автоматический биохимический анализатор или спектрофотометр, длина волны 600
(593)/700 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
- термостат, поддерживающий температуру 37±0,1°С;
- секундомер;
- пипетки полуавтоматические одноканальные, позволяющие отмерять объемы
жидкости 10 мкл, 300 мкл и 900 мкл;
- пробирки стеклянные вместимостью 3,0-5,0 мл;
- вода дистиллированная;
--- стр. 3 ---
ф
физиологический раствор (0,9% NaCl);
перчатки резиновые или пластиковые.
6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б РА ЗЦ Ы
Свежая сыворотка или гепаринизированная плазма крови. Образцы сыворотки или плазмы
крови можно хранить при температуре 2-8°С не более 2 сут; при необходимости более
длительного хранения (до 5 недель) - при температуре минус 70°С и ниже. Повторное
замораживание образцов не допускается.
7. П О Д ГО Т О ВКА К А Н А Л И ЗУ
Компоненты набора и исследуемые образцы сыворотки (плазмы) крови выдержать при
комнатной температуре (18-25°С) в течение времени не менее 30 мин.
Подготовка реагентов
Реагент 1 и реагент 2 готовы к использованию.
Подготовка калибратора
Во флакон с калибратором внести 1,0 мл дистиллированной воды и перемешать до
полного растворения лиофилизата при осторожном перемешивании при комнатной температуре.
Приготовленный калибратор можно хранить при температуре 2-8°С не более 7 сут.
8. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И ЗА
Компоненты реакционной смеси отобрать в количествах, указанных в таблице.
Таблица
Отмерить, мл Опытная проба Калибровочная
проба
Контрольная
(холостая) проба
Сыворотка (плазма) крови 0,01 - -
Реагент \ 0,9 0,9 0,9
Калибратор - 0,01 -
С
Пробы тщательно перемешать, инкубировать при температуре 37°С в течение 5 мин
(точно) и измерить величину оптической плотности (ОП) опытных проб и калибровочной пробы
(ОП]) против контрольной (холостой) пробы при длине волны 600(593)/700 нм в кювете с длиной
оптического пути 10 мм. Во все пробирки добавить по 0,3 мл реагента 2, пробы тщательно
перемешать, инкубировать при температуре Ъ1'^С в течение 5 мин (точно) и повторно измерить
величину ОП анализируемых проб и калибровочной пробы (ОП2) против контрольной (холостой)
пробы при длине волны 600(593)7700 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.
Вычислить разность ОП для каждой опытной пробы и для калибровочной пробы по
формуле:
Д0П=0П2-0П,
Концентрацию LD L-холестерина (С, моль/л) в анализируемых пробах сыворотки или
плазмы крови рассчитать по формуле:
С = (ДОПоп : А0Пкал)>=Скал
где; ДОПоп - величина разности ОП анализируемых проб сыворотки или плазмы крови,
ед. опт. плотн.;
ДОПкал - величина разности ОП калибровочной пробы, ед, опт, плотн,;
Скал - концентрация L D L -холестерина в калибраторе, ммоль/л.