Набор реагентов "ДС-ИФА-Тироид-Тиреоглобулин" Тест-система иммуноферментная для количественного определения тиреоглобулина по ТУ 9398-127-05941003-2007 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 2 закупки, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 14 --- I УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора от_ № ' 2 0 УТВЕРЖДАЮ Заместитель генер ^ ого директора ООО «Научно-про (одственное объеди 1Гёнй^<Диа] стические системы» О.Н. Шлюндин 2 0 1 2 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов «ДС-ИФ А-Т ироид-Т иреоглобул ин» Тест-система иммуноферментная для количественного определения тиреоглобулина 1. Назначение 1.1. Н абор реагентов «Д С -И Ф А -Т ироид-Т иреоглобулин» предназначен для количественного определения содерж ания тиреоглобулина (ТГ) в сы воротке крови человека методом им муноф ерментного анализа (И Ф А ). 1.2. Тиреоглобулин - больш ой йодированны й, гликозилированны й белок с молекулярной массой 660 кДа, продуцируется клеткам и щ итовидной ж елезы . Н а его поверхности происходит синтез горм онов трийодтиронина (ТЗ) и тироксина (Т4). Тиреоглобулин - форма хранения тиреоидны х гормонов во внеклеточном коллоиде щ итовидной ж елезы. У 75% здоровы х лю дей часть ТГ из щ итовидной ж елезы поступает в кровь. У населения регионов, испытываю щ их деф ицит йода, средний уровень ТГ повы ш ен. В связи с этим с 1994 года данны й показатель используется как один из индикаторов зобной эндем ии. Вы сокая концентрация ТГ в сыворотке крови определяется при многих заболеваниях щ итовидной ж елезы: гипертиреоз, тиреоидит, диф ф еренцированная карцином а щ итовидной ж елезы. О ценка уровня ТГ служ ит основны м критерием ведения и пож изненного наблю дения больных, оперированны х по поводу рака щ итовидной ж елезы . П осле проведения тироидэктомии происходит быстрое сниж ение содерж ания ТГ. П оследую щ ее нарастание концентрации этого м аркера в сы воротке крови свидетельствует о рецидиве заболевания. Тестирование на ТГ необходимо такж е для правильной диагностики и лечения гипотиреоза новорож денны х. В некоторы х образцах сы вороток присутствую т циркулирую щ ие антитела к ТГ. Наличие аутоантител приводит к лож ноотрицательны м результатам при определении ТГ. П оэтому параллельно с оценкой содерж ания ТГ образцы сы вороток необходим о тестировать на наличие антител к нему. 1.3. Н абор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40 неизвестны х проб, одна проба контрольной сы воротки, ш есть стандартны х калибровочны х проб и одна проба для определения оптической плотности Т М Б -С убстратного раствора при одноврем енном использовании всех стрипов планш ета (всего 96 определений). В случае дробного прим енения набора необходим о обязательное использование всех стандартны х калибровочны х проб. --- стр. 15 --- 2.1. Принцип действия. В наборе «Д С -И Ф А -Т ироид-Т иреоглобулин» прим енен «сэндвич»-вариант твердоф азного ИФ А. Для реализации его использованы два м оноклональны х антитела с разной специф ичностью к двум доменам м олекулы тиреоглобулина: первы е антитела им м обилизованы на твердой фазе, вторые (меченны е пероксидазой хрена) входят в состав конъю гата. В лунках, при добавлении исследуемого образца и конъю гата анти-Т Г-пероксидаза, во время инкубации одноврем енно происходит им м обилизация ТГ, содерж ащ егося в исследуемом образце, и связы вание его с конъю гатом. К оличество связавш егося конъю гата прям о пропорционально количеству тиреоглобулина в исследуемом образце. Во время инкубации с ТМ Б происходит окраш ивание раствора в лунках. С тепень окраски прямо пропорциональна концентрации связанного конъю гата анти-Т Г-пероксидаза. После измерения оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчиты вается концентрация ТГ в исследуем ы х пробах. 2.2. Состав набора реагентов «ДС-ИФА-Тироид-Тиреоглобулин» 2. Характеристика набора Таблица 1 Х арактеристики реагентов Ф орма выпуска И м м уносорбент - планш ет полистироловы й разборны й (12 стрипов по 8 лунок каж дый, разборность до 1 лунки) с им м обилизованны м и на внутренней поверхности лунок м оноклональны м и антителам и к ТГ. 1 шт. К онъю гат - м оноклональны е антитела к ТГ человека, м еченны е пероксидазой хрена. П розрачная или опалесцирую щ ая розового цвета ж идкость. В качестве консервантов содерж ит: 0,1% проклин 300, 0,004% гентам ицина сульфат. 1 флакон 12,0 мл К алибратор 0, К алибратор 1, К алибратор 2, К алибратор 3, К алибратор 4, К алибратор 5 - стандартны е калибровочны е пробы, аттестованны е по сертиф ицированном у реф еренсном у м атериалу ТГ C R M 457 BCR (Брю ссель), содерж ащ ие известное количество ТГ. П розрачны е или слегка опалесцирую щ ие светло-ж елтого цвета ж идкости. Значения концентраций ТГ в калибровочны х пробах указаны на этикетках ф лаконов и в аналитическом паспорте качества. В качестве консервантов содерж ат: 0,1% проклин 300, 0,004% гентам ицина сульфат, 0,1% фенол. 6 флаконов по 0,5 мл (К алибратор 0 - 2,0 мл) К онтрольная сы воротка - сы воротка с известны м содерж анием ТГ. П розрачная или слегка опалесцирую щ ая светло-ж елтого цвета ж идкость. Значение концентрации ТГ в сы воротке указано на этикетке ф лакона и в аналитическом паспорте качества. В качестве консервантов содерж ит: 0,1% проклин 300, 0,004% гентам ицина сульфат, 0,1% фенол. 1 флакон 0,5 мл П Р (концентрат х 25) - пром ы вочны й раствор, концентрат. П розрачная или слегка опалесцирую щ ая, бесцветная или светло-ж ёлтого цвета ж идкость. 1 флакон 50,0 мл ТМ Б-С убстратный раствор - прозрачная бесцветная ж идкость. 1 флакон 14,0 мл С топ-реагент/0,2М - серная кислота в концентрации 0,2 моль/л. П розрачная бесцветная ж идкость. 1 флакон 25,0 мл Бланк для построения калибровочной кривой 1 шт. И нструкция по прим енению 1 шт. Д ополнительно в ком плект поставки могут быть вклю чены: - кры ш ка к полистироловы м 96-луночны м планш етам или защ итная пленка для ИФ А планш етов; - одноразовы е наконечники; --- стр. 16 --- / т» - пластиковые ванночки для жидких реагентов; - пластиковая скрепка для закрывания пакета с иммуносорбентом или полиэтиленовый пакет с замком. 3. Аналитические и диагностические характеристики набора 3.1. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая концентрация тиреоглобулина в сыворотке крови составляет 1,5 нг/мл. 3.2. Специфичность. Для определения кросс-реактивности в образец сыворотки с известной концентрацией ТГ добавляли кросс-реагенты, указанные в таблице 2. Таблица 2 Кросс-реагент Кросс-реактивность, % тиреоглобулин 100 трииодтиронин 0.007 тироксин 0.248 3.3. Коэффициент вариации результатов определения уровня тиреоглобулина в одном и том же образце не превышает 8 % . 3.4. Линейность. Зависимость концентрации ТГ имеет линейный характер в диапазоне концентраций калибровочных проб №1-№5. Значение «линейности» должно находиться в пределах от 90 до 110%. 3.5. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» ТГ - соответствие измеренной концентрации ТГ, предписанной в пробе, полученной путем смешивания равных объемов калибровочной пробы №4 и контрольной сыворотки. Процент открытия составляет от 90 до 110%. 3.6. Клиническая проверка. Концентрацию ТГ измеряли в сыворотке крови, взятой у 350 здоровых людей в возрасте от 21 до 40 лет. Измеренная концентрация не превышала 67,8 нг/мл. 3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения концентраций ТГ, соответствующие нормальным значениям для конкретной территории. 4. Меры предосторожности Достоверность результатов зависит от правильного выполнения следующих правил лабораторной практики: 4.1. Постановку ИФА следует проводить в помещении с комнатной температурой от 18 до 24 ” С. 4.2. Нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их при приготовлении растворов, кроме: - неспецифических компонентов (ПР (концентрат х 25), ТМБ-Субстратный раствор. Стоп- реагент), которые взаимозаменяемы во всех наборах для исследования гормонов и онкомаркеров, производства ООО «НПО «Диагностические системы». 4.3. Нельзя использовать реагенты после истечения срока годности, указанного на упаковке. 4.4. Растворы готовить осторожно, исключая какое-либо загрязнение. 4.5. Нельзя проводить ферментную реакцию в присутствии реактивных паров (кислота, щелочь, альдегиды) или пыли, которые могут повлиять на активность конъюгатов. 4.6. Лабораторная посуда должна быть тщательно промыта; предпочтительно применение материалов одноразового использования. 4.7. Ферментная реакция особо чувствительна к ионам металлов. Нельзя допускать контакта металлических предметов с растворами конъюгатов или субстрата. 4.8. Необходимо использовать чистый наконечник для каждого образца или реагента. 4.9. Промывка лунок - важный этап проведения анализа: необходимо соблюдать рекомендованное количество циклов промывки и убедиться, что лунки полностью заполняются --- стр. 17 --- раствором. Не следует допускать остатка ж идкости в лунках после пром ы вки. Н еправильно проведенный этап пром ы вки м ож ет привести к неточным результатам . 4.10. Н ельзя использовать одну и ту же ванночку для внесения конъю гата и ТМ Б- Субстратного раствора. 4.11. Н еобходимо использовать только валидированны е дозаторы и оборудование. 4.12. Н ельзя изм енять процедуру проведения анализа. 4.13. Н ельзя подвергать реагенты воздействию вы сокой тем пературы или прямого солнечного света. 5. Инструкция по безопасности 5.1. Все реагенты набора предназначены для лабораторной диагностики. 5.2.С ы воротки крови человека, используем ы е при приготовлении К онтрольной сыворотки, были протестированы и определены нереактивны м и в отнош ении антигена вируса гепатита В (HBsA g), антител к вирусу гепатита С, антител к В И Ч -1,2 и антигена р24 ВИЧ-1. 5.3.В пом ещ ении с им м унодиагностическим и материалами нельзя употреблять пищу, пить, курить, прим енять косметику. 5.4.Н ельзя пипетировать ртом. 5.5.П ри работе с исследуем ы м и образцам и необходим о обращ аться как с потенциально опасными м атериалами, т.к. ни один известны й метод тестирования не мож ет гарантировать отсутствие инф екционны х агентов. 5.6.При работе с лю бы м оборудованием , которое контактирует с исследуемы ми образцами, необходимо обращ аться как с потенциально опасны м и материалами. 5.7.П ри работе с набором реагентов и исследуемы ми образцам и необходимо использовать спецодеж ду и одноразовы е перчатки, тщ ательно пром ы вать руки после работы с ними. 5.8.Н еобходимо избегать расплескивания образцов или растворов, содерж ащ их образцы. При расплескивании немедленно дезинф ицировать поверхность 3 % раствором хлорам ина Б. 5.9.Н еобходимо избегать контакта Т М Б-С убстратного раствора, стоп-реагента с кожей и слизистыми. 5.10. После проведения ф ерм ентной реакции необходим о нейтрализовать и/или автоклавировать растворы , отходы или лю бы е ж идкости, содерж ащ ие биологические образцы до сброса в канализацию . Тверды е отходы (использованны е планш еты, наконечники к дозаторам, флаконы , лабораторная посуда, одноразовы е перчатки и т.д.) долж ны бы ть обеззараж ены погруж ением в 6 % раствор перекиси водорода с 0,5 % синтетического м ою щ его средства или в 3 % раствор хлорам ина Б. Д лительность дезинф екции - не менее 1 ч. Д опустим о применение другого разреш енного к прим енению дезинф ицирую щ его средства. Т вёрды е отходы такж е следует обезвреж ивать автоклавированием в течение часа при тем пературе от 124 до 128 °С под давлением 1,5 кГс/см^ (0,15 М Па). Ж идкие отходы (промы вочны е воды ) следует обеззараж ивать добавлением сухого хлорам ина Б из расчета 30 г/л (длительность дезинф екции - не менее 2 ч) или кипячением в течение 30 мин, или автоклавированием в течение 1 ч под давлением 1,5 кГс/см^ (0,15 М Па) при температуре от 124 до 128 °С. И нструм енты и оборудование до и после работы необходимо протирать 2 раза 70 % этиловы м спиртом. 5.11. * -----------' Н екоторы е реагенты содерж ат 0,1% проклин 300. П роклин 300 0,1% - раздраж аю щ ее вещ ество. М ож ет вы звать сенсибилизацию при контакте с кож ей. При контакте с кожей промы ть область контакта больш им количеством м ы ла и воды. --- стр. 18 --- 6 . Оборудование и материалы, необходимые при работе с набором: - спектроф отом етр вертикального сканирования, позволяю щ ий изм ерять оптическую плотность раствора в лунках планш ета при длине волны 450 нм; - терм остатируем ы й ш ейкер, позволяю щ ий производить встряхивание со скоростью от 500 до 800 об/м ин при тем пературе (37,0 ± 0,5) °С; - устройство для пром ы вания планш етов (вош ер); - дозаторы пипеточны е полуавтом атические одноканальны е с изм еняем ы м объем ом отбора ж идкостей: на 5 -5 0 мкл; на 4 0 -2 0 0 мкл; на 2 0 0 -1 0 0 0 мкл; на 1000-5000 мкл с наконечникам и; - дозатор пипеточны й полуавтом атический восьм иканальны й, позволяю щ ий отбирать объемы ж идкости до 300 мкл, с наконечникам и; - цилиндр мерны й (200 мл, 500 мл); - стакан стеклянны й (500 мл); - вода дистиллированная; - бумага ф ильтровальная лабораторная; - перчатки резиновы е или пластиковы е. 7. Анализируемые образцы сывороток крови человека Д ля исклю чения лож ны х результатов нельзя подвергать исследуемы е образцы терм оинактивированию , необходим о отбирать и хранить их в условиях, предотвращ аю щ их бактериальны й рост. Недопустимо использование образцов с добавлением азида натрия в качестве консерванта! К аж ды й образец исследуем ой сы воротки следует отбирать новым наконечником! О тобранны е образцы хранить при тем пературе от 2 до 8 °С не более 3-х суток. Более длительное хранение допустим о при тем пературе не выш е минус 20 °С (образцы могут подвергаться зам ораж иванию и оттаиванию не более 1 раза). Н ельзя использовать образцы с бактериальны м ростом, вы раж енны м гемолизом и гиперлипидем ией. О бразцы сыворотки крови, содерж ащ ие агрегаты или осадок, необходим о осветлять центриф угированием при 1000-2000 об/мин в течение 15 мин при тем пературе от 4 до 8 “С. 8 . Подготовка реагентов для анализа Перед использованием все реагенты набора вы держ ать 30 мин при ком натной температуре. 8.1. И м м уносорбент. Внимание: во избежание конденсации влаги внутри лунок необходимо выдержать иммуносорбент нри комнатной температуре в закрытом пакете не менее 30 минут! Вскры ть ф ольгированны й пакет, отступив 1,0 см от края пакета. В ы нуть из пакета рамку и необходимое количество стрипов, вставить стрипы в рамку. П акет с неиспользованны м и стрипам и тщ ательно герм етизировать с пом ощ ью скрепки для фольгированного пакета (не удаляя осуш итель!). Д ля этого край пакета следует свернуть 2-3 раза и закрепить, надев сверху скрепку для ф ольгированного пакета. И ли пом естить вскрытый ф ольгированны й пакет с им м уносорбентом в полиэтиленовы й пакет с замком. 8.2. П Р - рабочий пром ы вочны й раствор. С одерж им ое ф лакона с концентратом ПР тщ ательно перемеш ать. Д ля приготовления рабочего П Р необходим ое количество концентрата промывочного раствора развести в 25 раз водой дистиллированной (наприм ер, к 10 мл концентрата ПР добавить 240 мл воды). П олученны й раствор тщ ательно перемеш ать. 8.3. К онъю гат - готов к прим енению . 8.4. С тандартны е калибровочны е пробы - готовы к прим енению . 8.5. К онтрольная сы воротка - готова к применению . 8.6. Т М Б-С убстратны й раствор - готов к прим енению . 8.7. С топ-реагент - готов к прим енению . --- стр. 19 --- / 9.1. С тандартны е калибровочны е пробы и контрольную сы воротку вносить по 50 мкл в двух повторах. Реком ендуется оставить 2 лунки для изм ерения ОП Т М Б -С убстратного раствора. В остальны е лунки внести по 50 мкл исследуем ы х образцов сы вороток крови в дубликатах. Внимание! Время внесения образцов не должно превышать 10 минут! 9.2. Во все лунки, кроме лунок с контролем Т М Б -С убстратного раствора, внести по 100 мкл конъю гата, стрипы планш ета закры ть кры ш кой или защ итной пленкой и инкубировать 60 минут при тем пературе (37,0 ± 0,5) °С на ш ейкере при встряхивании со скоростью от 500 до 800 об/мин. 9.3. По истечении указанного врем ени содерж им ое лунок удалить с пом ощ ью вош ера (или м ногоканальной пипетки) в ём кость для сбора инф ицированного м атериала, им муносорбент промыть 5 раз рабочим ПР, заливая его до краев лунок (не менее 300 мкл в лунку) и удаляя промывочный раствор с пом ощ ью вош ера (или м ногоканальной пипетки) в ёмкость для сбора инф ицированного м атериала. По окончании пром ы вки тщ ательно удалить остатки ж идкости из лунок постукиванием рамки со стрипам и в перевернутом полож ении по ф ильтровальной бумаге. Не допускать остатка ж идкости в лунках планш ета. 9.4. Во все лунки отм ы того планш ета нем едленно внести по 100 мкл ТМ Б-С убстратного раствора и вы держ ать от 20 до 30 мин в тем ноте при ком натной тем пературе. 9.5. Реакцию остановить добавлением во все лунки планш ета по 150 мкл стоп-реагента, встряхнуть стрипы на ш ейкере в течение 5-10 секунд и провести учет результатов. Время между остановкой реакции и изм ерением ОП не долж но превы ш ать 20 мин. 9.6. Спектрофотометрический контроль внесения сывороток и реагентов при постановке тест-системы «ДС-ИФА-Тироид-Тиреоглобулии» на автоматических ИФА- анализаторах. К онтроль внесения конъю гата реком ендуется проводить при длинах волн 540 (550) нм, критерий: ОП > 0,500. 10. Регистрация результатов Регистрацию результатов проводить спектроф отом етрически при длине волны 450 нм. 9. Проведение анализа 11. Учет результатов Реакцию следует учиты вать, если среднее значение ОП в лунках с контролем ТМ Б- Субстратного раствора - не более 0,1. Н еобходимо построить калибровочны й график по средним величинам ОП «К алибратора О»; «Калибратора 1»; «К алибратора 2»; «К алибратора 3»; «К алибратора 4»; «К алибратора 5». На бланке для построения калибровочной кривой по оси абсцисс X отклады ваю т соответствую щ ие значения концентрации ТГ, вы раж енной в нг/мл, по оси ординат Y отклады ваю т средние значения ОП стандартны х калибровочны х проб. П о полученны м точкам строят калибровочную кривую. К онтрольная сы воротка служ ит для проверки точности и достоверности результатов. П олученные величины концентраций ТГ в образцах считать достоверны м и, если вы численное по калибровочному графику значение концентрации ТГ в контрольном образце попадает в пределы, указанные на этикетке флакона. --- стр. 20 --- 12.1. Все реагенты набора предназначены для определения тиреоглобулина (ТГ) в сыворотке крови человека. Н абор не предназначен для определения тиреоглобулина (ТГ) в слю не, плазме и других образцах человеческого или ж ивотного происхож дения. 12.2. Н еправильное обращ ение с образцам и и изм енение процедуры теста м огут повлиять на результаты. 12.3. Д ля разведения образцов сы вороток с вы соким содерж анием Т иреоглобулина следует использовать только «К алибратор О». П рим енение других реагентов м ож ет привести к лож ным результатам. 12.4. Заклю чение о клиническом диагнозе не м ож ет бы ть основано только на результатах данного теста. Л ю бой лабораторны й результат является только частью общ ей клинической картины пациента. 12.5. Н абор не предназначен для тестирования образцов сы вороток крови новорож денны х. 12. Ограничения теста 13. Условия хранения и эксплуатации набора 13.1. Н абор реагентов долж ен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 "С в защ ищ енном от света месте в течение всего срока годности. Срок годности набора - 18 месяцев. 13.2. Т ранспортирование набора реагентов проводить при тем пературе от 2 до 8 °С. Допустимо транспортирование при тем пературе от 9 до 20 °С не более 10 суток. 13.3. В случае дробного использования ком поненты набора необходим о хранить следую щ им образом: - И м м уносорбент - пакет с неиспользованны м и стрипам и и силикагелем тщ ательно герметизировать. После первого вскры тия пакета им м уносорбент стабилен на протяж ении срока годности набора при тем пературе от 2 до 8 “С. - П Р - после вскры тия ф лакона оставш ийся неиспользованны м П Р (концентрат х 25) хранить во ф лаконе, плотно закрытом винтовой кры ш кой, на протяж ении срока годности набора при температуре от 2 до 8 °С. - Рабочий пром ы вочны й раствор, подготовленны й к использованию , хранить в чистой плотно закры той емкости в течение 14 сут. при ком натной тем пературе или 28 сут. при тем пературе от 2 до 8 °С. - К онъю гат - после вскры тия ф лакона оставш ийся неиспользованны м конъю гат хранить во флаконе, плотно закрытом винтовой кры ш кой, на протяж ении двух м есяцев при тем пературе от 2 до 8 °С . С тандартны е калибровочны е пробы - после вскры тия ф лакона оставш иеся неиспользованны м и калибровочны е пробы хранить во ф лаконах, плотно закрытых винтовы ми кры ш ками, на протяж ении двух м есяцев при тем пературе от 2 до 8 °С. - К онтрольная сы воротка - после вскры тия ф лаконов оставш ую ся неиспользованной контрольную сы воротку хранить во ф лаконе, плотно закры том винтовой кры ш кой, на протяж ении двух м есяцев при тем пературе от 2 до 8 °С. - Т М Б-С убстратны й раствор - после вскры тия ф лакона оставш ийся неиспользованны м ТМ Б- Субстратны й раствор хранить во ф лаконе, плотно закры том винтовой кры ш кой, на протяж ении двух м есяцев при тем пературе от 2 до 8 °С. - С топ-реагент - после вскры тия ф лакона оставш ийся неиспользованны м С топ-реагент хранить во ф лаконе, плотно закры том винтовой кры ш кой, на протяж ении срока годности набора при тем пературе от 2 до 8 °С. 13.4. Для получения надеж ны х результатов необходим о строгое соблю дение инструкции.