Набор реагентов для выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Chlamydia trachomatis/Ureaplasma species) по ТУ 9398-259-23548172-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор АО «В^тоо-Бест» М.Д. Хусаинов « i’ г ^ . 2021 г. “ — ^ -----------------; ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК Chlamydia trachomatis / Ureaplasma species» (комплект 1) 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «РеалБест ДНК Chlamydia trachomatis / Ureaplasma species» предна значен для выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species, выделенной из клинических проб, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Вьшеление ДНК из клинических проб проводится с помощью наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» и «РеалБест экстракция 100». Комплект 1 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler» и «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК- Технология», Россия) или их аналогами. Комплект 1 рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные об разцы. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода. Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмен та ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комлементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных после довательностей с этих праймеров Taq-полимеразой. Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор^Бест»: Директором по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухинои А. В. --- стр. 2 --- в основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфич ного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, кото рый в ходе реакции связьшается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специ фичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'конце флуоресцентный краситель, а на 3'конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе по лимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'экзонуклеазной активности Taq- полимеразы, зонд расщепляется с 5'конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце. Учёт эффективности вьщеления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species из образцов обеспечивается выделением ДНК из клинических проб совместно с предвари тельно внесённььм неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО). 2.2. Состав набора: - положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмид- ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК ряда герпес вирусов и возбудителей ИППП, в том числе ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species - 1 пробирка (1,0 мл); - готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок. Набор дополнительно комплектуется: - оптической плёнкой - 1,5 листа. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Чувствительность - выявление 100 копий ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species в стандартных образцах предприятия - 100%. 3.2. Специфичность выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species (по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис кажению результатов ПЦР. 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012 № 4н). --- стр. 3 --- 4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять эта пы выделения ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с ма териалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки. 4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За прещается их перемещение между рабочими местами. 4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для пипеток. 4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз ных образцов. 4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»). 4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици рующими средствами с последующей утилизацией. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени: «1Q iCycler», «iQ5 iCycler», «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог; - ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» фирмы СП «РТС», Россия); - холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С; - пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен ным объёмом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин ляндия); --- стр. 8 --- Всего прошито, пронумеровано и скреплено печатью листов. Дирекго^,^а?*еаа4йлогии и качеству АО Мас^г^. В. ‘ О ^ ^ г. --- стр. 9 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор АО «Вектор-Бест» М.Д. Хусаинов - 2021 г. • B h K T O P |1 .ш ш Е ^ г; ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени РеалБест ДНК Chlamydia trachomatis / Ureaplasma species (комплект 2) 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «РеалБест ДНК Chlamydia trachomatis / Ureaplasma species» предна значен для выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species, вьщеленной из клинических проб, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Выделение ДНК из клинических проб проводится с помощью наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» и «РеалБест экстракция 100». Комплект 2 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), так и планщетного типа: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами. Комплект 2 рассчитан на проведение анализа 100 образцов, включая контрольные об разцы. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода. Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фрагмен та ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комлементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных после довательностей с этих праймеров Taq-полимеразой. Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А.В. --- стр. 10 --- в основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфич ного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, кото рый в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специ фичность метода. ДНК-зонд содержит на 5' конце флуоресцентный краситель, а на 3' конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе по лимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3' экзонуклеазной активности Taq- полимеразы, зонд расщепляется с 5'конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце. Учёт эффективности выделения ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species из образцов обеспечивается выделением ДНК из клинических проб совместно с предвари тельно внесённым неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО). 2.2. Состав набора: - положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмид- ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК ряда герпес вирусов и возбудителей ИППП, в том числе ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species - 1 пробирка (1,0 мл); - реакционная смесь для ПЦР (PC), лиофилизированная - 10 пробирок, каждая на 10 определений; - раствор для восстановления (РВ) - 2 флакона (по 2,0 мл). 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Чувствительность - выявление 100 копий ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species в стандартных образцах предприятия - 100%. 3.2. Специфичность выявления ДНК Chlamydia trachomatis и ДНК Ureaplasma species (по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис кажению результатов ПЦР. 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012 Хо 4н). 4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с --- стр. 11 --- микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять эта пы выделения ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с ма териалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки. 4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За прещается их перемещение между рабочими местами. 4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для пипеток. 4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз ных образцов. 4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»). 4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици рующими средствами с последующей утилизацией. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия) или план шетного типа: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог; - ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» фирмы СП «РТС», Россия); - холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 ®С; - микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия); - пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен ным объемом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин ляндия);