Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации кортизола в сыворотке крови (Кортизол-ИФА-БЕСТ) по ТУ 9398-613-23548172-2016 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2018/6848 от 01.03.2018 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Общий кортизол ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 205 контрактов, медианная цена за единицу 7 722 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
• /
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор 
АО «Вектор-Бест»
по применению набора реагентов для иммуноферментного определения 
концентрации кортизола в сыворотке крови 
(Кортизол-ИФА-БЕСТ)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации кортизола в 
сыворотке крови «Кортизол-ИФА-БЕСТ» предназначен для определения концентрации кор­
тизола в сыворотке крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Набор рассчитан на проведение анализа в дублях 41 неизвестного образца, 6 калиб­
ровочных образцов и 1  контрольного образца, всего 96 определений при использовании всех 
стрипов планшета.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода
Метод определения основан на твердофазном конкурентном иммуноферментном анализе 
с применением моноклональных антител. В лунках планшета, при добавлении исследуемого 
образца и конъюгата, во время инкубации происходит конкурентное связывание сывороточно­
го кортизола и кортизола, конъюгированного с пероксидазой, с моноклональными антителами 
к кортизолу, иммобилизованными на внутренней поверхности лунок. Во время инкубации с 
раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание раствора в лунках. Степень окраски 
обратно пропорциональна концентрации кортизола в анализируемых образцах. После измере­
ния оптической плотности раствора в лунках на основании калибровочного графика рассчи­
тывается концентрация кортизола в анализируемых образцах.
2.2. Состав набора
В состав набора входят:
-  планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов, «ломающихся» по 1 лунке) с иммо-
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: директором НИИ СД  
М.Ю. Рукавишниковым, нач. лаборатории Н.Н. Сорокиной.


--- стр. 2 ---
/
билизованными на внутренней поверхности лунок моноклональными антителами к кортизолу, 
готовый для использования -  1  шт.;
-  калибровочные образцы, содержащие известные количества кортизола -  0; 50; 150; 
300; 600 и 1200нмоль/л, аттестованные относительно NIST Standard Reference Material®971; 
концентрации кортизола в калибровочных образцах могут несколько отличаться от указанных 
величин, точные величины указаны на этикетках флаконов; готовые для использования -  6 
флаконов (по 0,5 мл);
-  контрольный образец на основе инактивированной сыворотки крови человека с из­
вестным содержанием кортизола, аттестованный относительно NIST Standard Reference Mate- 
rial®971; готовый для использования -  1 флакон (0,5 мл);
-  конъюгат кортизола с пероксидазой хрена, готовый для использования -  1 флакон (13
мл);
-  концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Тх25) -  1  флакон 
(28 мл);
-  раствор тетраметилбензидина плюс (раствор ТМБ плюс), готовый для использования -  
1  флакон (13 мл);
-  стоп-реагент, готовый для использования -  1  флакон (12 мл);
-  наконечники для дозаторов на 2-200 мкл -  16 шт.
Принадлежности:
-  плёнка для заклеивания планшета -  1  шт.;
-  трафарет для построения калибровочного графика -  1 шт.;
-  ванночки для реагентов -  2 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность. Используемые в наборе моноклональные антитела обеспечивают 
высокую специфичность выявления кортизола.
Перекрестная реакция антител к кортизолу с другими стероидами приведена в таблице:
СТЕРОИД (концентрация, нмоль/л) Перекрестная реакция, %
Преднизолон (11097,50 нмоль/л) 6,00
11-Дезоксикортизол (57726,70 нмоль/л) 0,90
Кортикостерон (57726,70 нмоль/л) 0,60
Тестостерон (693433,20 нмоль/л) 0,08
Прогестерон (636010,90 нмоль/л) 0,07
Эстрадиол (734268,30 нмоль/л) 0,07
Эстриол (693529,40 нмоль/л) 0,07
3.2. * Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определений концентра­
ции кортизола в контрольном образце, не превышает 8%.
3.3. * Линейность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «линейность»


--- стр. 3 ---
-  отклонение от расчётной величины концентрации кортизола при разведении калибровочных 
образцов, содержащих 1200; 600 и 300 нмоль/л в 2 раза и калибровочного образца 150 
нмоль/л кортизола -  в 3 раза. Процент «линейности» составляет 90-110%.
3.4. * Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» -  
соответствие измеренной концентрации кортизола предписанной в пробе, полученной путём 
смешивания равных объёмов контрольного образца и калибровочного образца 150 нмоль/л. 
Процент «открытия» составляет 90-110%.
3.5. * Чувствительность. Минимально определяемая концентрация кортизола рассчитан­
ная на основании среднего арифметического значения оптической плотности калибровочного 
образца Во минус 2о (о -  среднее квадратичное отклонение от среднего арифметического зна­
чения), не превышает 5,0 нмоль/л.
3.6. Клиническая проверка. Концентрация кортизола, измеренная в сыворотке крови, 
взятой с 9 до 11 ч, у 110 условно здоровых мужчин и женщин в возрасте 20-50 лет, находилась 
в диапазоне 190 -  670 нмоль/л.
3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения 
концентрации кортизола, соответствующие нормальным у обследуемого контингента людей.
3.8. Хук-эффект высоких концентраций не бьш обнаружен вплоть до концентрации кор­
тизола 14000 нмоль/л.
*по ГОСТ Р 51352-2013.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 №
4н).
4.2. Стоп-реагент и раствор тетраметилбензидина плюс обладают раздражающим дей­
ствием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп- 
реагента и раствора тетраметилбензидина плюс на кожу и слизистые необходимо промыть по­
ражённый участок большим количеством проточной воды. Калибровочные и контрольный об­
разцы содержат фенол. Конъюгат содержит проклин 150.
4.3. При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности, 
принятые при работе с потенциально инфекционным материалом. Основные правила работы 
изложены в «Инструкции по мерам профилактики распространения инфекционных заболева­
ний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учре­
ждений», утвержденной Минздравом СССР 17 января 1991 г. и в методических указаниях МУ 
287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерили­
зации изделий медицинского назначения», утв. департаментом госсанэпиднадзора Минздрава


--- стр. 4 ---
РФ от 30.12.1998.
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые 
перчатки, так как образцы сыворотки крови человека следует рассматривать как потенциально 
инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирусы гепатита 
или возбудителей других инфекций.
4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, 
должны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно.
4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в поме­
щениях, предназначенных для работы с наборами.
4.7. Для дезинфекции посуды и материалов, контактировавщих с исследуемыми и кон­
трольными образцами, рекомендуем использовать дезинфицирующие средства, не оказываю­
щие негативного воздействия на качество ИФА, не содержащие активный кислород и хлор, 
например, комбинированные средства на основе ЧАС, спиртов, третичных аминов. Использо­
вание дезинфицирующих средств, содержащих активный кислород и хлор (Н 2О2, деохлор, 
хлорамин), приводит к серьезному искажению результатов.
4.8. При использовании набора образуются отходы классов А, Б, В и Г, которые класси­
фицируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21 «Сани­
тарно-эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских посе­
лений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному возду­
ху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, 
организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприя­
тий» и МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке 
и стерилизации изделий медицинского назначения».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
-  Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения 
оптической плотности растворов в лунках планшета в двухволновом режиме: при основной 
длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620 нм - 655 нм; допускается измерение 
при длине волны 450 нм;
-  шейкер термостатируемый орбитального типа, позволяющий производить встряхива­
ние с частотой 400-800 об/мин и температуре 37 ± 1  °С;
-  холодильник бытовой;
-  промывочное устройство для планшетов;
-  дозаторы полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным 
объёмом со сменными наконечниками, позволяющие отбиратъ объёмы жидкости от 5 до


--- стр. 8 ---
8.6. Инкубировать планшет в защищенном от света месте в течение 15 мин при встряхива­
нии на шейкере с частотой 650 об/мин и температуре 37±1 °С.
8.7. Внести во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и рас­
твор тетраметилбензидина плюс, по 100 мкл стоп-реагента; встряхнуть планшет на шейкере в 
течение 10-15 сек, при этом содержимое лунок окрашивается в желтый цвет.
8.8. Измерить величину оптической плотности растворов в лунках стрипов на спектро­
фотометре вертикального сканирования в двухволновом режиме: при основной длине волны 
450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620 нм - 655 нм; допускается измерение при 
длине волны 450 нм.
Время между остановкой реакции и измерением оптической плотности не должно пре­
вышать 10 мин.
9. УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Вычислить средние арифметические значения оптической плотности для каждой па­
ры лунок, содержащих калибровочные, контрольный и анализируемые образцы.
9.2. Построить в линейных координатах калибровочный график зависимости среднего 
арифметического значения оптической плотности (ед. опт. плотн.) от концентрации кортизола 
в калибровочных образцах (нмоль/л).
9.3. Определить концентрацию кортизола в контрольном образце и анализируемых об­
разцах по калибровочному графику.
9.4. Результаты анализа исследуемых образцов учитывать, если вычисленное по калибровоч­
ному графику значение концентрации кортизола в контрольном образце соответствует указан­
ному диапазону концентраций на этикетке флакона.
9.5. При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно от­
ражающих изменение концентрации кортизола в сыворотке крови, необходимо использовать 
наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя).
Примечание: Образцы, содержащие гемоглобин в концентрации до 5,3 г/л; билирубин в концен­
трации до 1,97 мг/дл; триглицериды в концентрации до 12,9 г/л и белок в концентрации до 57,5 г/л  
пригодны для использования.
10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспортных 
средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида, 
при температуре от 2 до 8 °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не 
более 10 суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться при 
температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо­


--- стр. 9 ---
дильниках, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной реги­
страцией температуры.
10.3. Срок годности набора -  12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
10.4. Дробное использование набора может быть реализовано в течение всего срока год­
ности. В случае дробного использования набора:
-  неиспользованные стрипы хранить в плотно закрытом пакете при температуре от 2 до 
8 °С в течение всего срока годности набора;
-  калибровочные и контрольный образцы, конъюгат, концентрат фосфатно-солевого бу­
ферного раствора с твином, раствор ТМБ плюс и стоп-реагент после вскрытия хранить в 
плотно закрытых флаконах при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности набо­
ра;
-  промывочный раствор хранить при температуре от 2 до 8 °С не более одного месяца 
или при температуре от 18 до 25 °С не более 7 дней.
10.5. Построение калибровочного графика необходимо проводить для каждого незави­
симого эксперимента, а также рекомендуется определение концентрации кортизола в кон­
трольном образце.
10.6. При постановке ИФА нельзя использовать компоненты из наборов разных серий 
или смешивать их при приготовлении растворов, кроме неспецифических компонентов (рас­
твор ТМБ плюс, ФСБ-Тх25, стоп-реагент), которые взаимозаменяемы в наборах АО «Вектор- 
Бест».
Нельзя использовать реагенты из наборов других фирм-производителей.
10.7. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции 
по применению набора.
11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям нор­
мативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возник­
ших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо 
действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио­
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной 
и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого де­


--- стр. 10 ---
фекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества набора «Кортизол-ИФА-БЕСТ», следует обращаться 
в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово, а/я 121, 
тел. (383) 227-67-64, тел. (383) 363-23-77.
E-mail: vbobtk(^,vector-best, ru
Нач. лаборатории НИИ СД 
АО «Вектор-Бест»
Директор НИИ СД 
АО «Вектор-Бест»
Н.Н. Сорокина
М.Ю. Рукавишников