Набор реагентов для одновременного качественного выявления ДНК Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum, Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV (Human betaherpesvirus 5), HSV1 (Human alphaherpesvirus 1), HSV2 (Human alphaherpesvirus 2) методом мультиплексной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «UROGEN-Тест-12» по ТУ 21.20.23-023-97638376-2020 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 2 закупки, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
| Закупка | Окончание подачи | Нач. цена |
|---|---|---|
| Поставка медицинских расходных материалов
№ 0387200002826001048 · БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА - ЮГРЫ "ОКРУЖНАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА" · Ханты-Мансийский автономный округ — Югра |
10.11.2026 | 1 487 744 ₽ |
| на поставку изделий медицинского назначения для клинико-диагностической лаборатории (ЗПП)
№ 0321500000626000302 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ "ГЕОРГИЕВСКАЯ РАЙОННАЯ БОЛЬНИЦА" · Ставропольский край |
13.11.2026 | 919 251 ₽ |
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
T e c T T J j ^
Генетика нового поколения
УТВЕРЖДАЮ
Генеральный директор
ООО «ТестГен»
^ Д. Н. Тороповский
«24» марта 2022 г.
И Н С Т Р У К Ц И Я
Набор реагентов для одновременного качественного
выявления ДНК
Chlamydia trachomatisj Mycoplasma genitalium.
Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma urealyticum.
Trichomonas vaginalis. Mycoplasma hominis, Ureaplasma
parvum, Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV
(Human betaherpesvirus 5), HSVl (Human
alphaherpesvirus 1), HSV2 (Human alphaherpesvirus 2)
методом мультиплексной полимеразной цепной
реакции в режиме реального времени
«UROGEN-TecT-12»
ТУ 21.20.23-023-97638376-2020
Илп/'иа ч л т ол m 'УС\пп
--- стр. 2 ---
€ 4
Содержание
Введение......................................................................................................4
1. Назначение .............................................................................................7
2. Принцип метода..................................................................................10
3. Состав набора реагентов....................................................................13
4. Характеристики набора реагентов...................................................17
5. Перечень рисков, связанных с применение,м
набора реагентов «иКООЕК-Тест-12» ...............................................20
6. Меры предосторожности при работе с набором ...........................33
7. Оборудование и материалы, необходимые
при работе с набором..............................................................................36
8. Анализируемые образцы ...................................................................37
9. Проведение анализа............................................................................41
10. Регистрация и интерпретация результатов ..................................44
11. Информация о стабильности медицинского изделия .................50
12. Условия хранения, транспортирования
и эксплуатации набора............................................................................50
13. Утилизация........................................................................................51
14. Гарантийные обязательства, контакты.........................................52
Приложение А.........................................................................................53
--- стр. 3 ---
Введение
Инфекционные заболевания урогенитального тракта являются
одной из^ причин снижения качества жизни и нарушения
репродуктивной функции человека. Своевременная диагностика
урогенитальных инфекций способствует сокращению уровня
заболеваемости благодаря эффективной лекарственной терапии, что
улучшает качество жизни.
Целевым аналитом. выявляемым при помощи набора
реагентов «UROGEN-TeCT-12», являются специфичные участки
геномной ДНК микроорганизмов Chlamydia trachomatis. Mycoplasma
genitalium. Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma urealyticum. # A
Trichomonas vaginalis. Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum. ^ ^
Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV (Human hetaherpesvirus
5). HSVl (Human alphaherpesvirus I), HSV2 (Human alphaherpesvirus
2).
Материалом для проведения исследования служат пробы
ДНК. выделенные из клинического материала больного -
отделяемое (соскоб) уретры, цервикального канала, влагалища,
первая порция свободно выпущенной мочи, секрет предстательной
железы (при наличии показаний).'
Научная обоснованность целевого аналита заключается в его
специфичности (уникальности последовательности ДНК) в
отношении геномов микроорганизмов Chlamydia trachomatis.
Mycoplasma genitalium. Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma
urealyticum. Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma
parvum, Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV (Human
hetaherpesvirus 5), HSVÎ (Human alphaherpesvirus I), HSV2 (Human
alphaherpesvirus 2). A ^
Chlamydia trachomatis - неподвижные грамотрицательные
бактерии, являющиеся облигатными внутриклеточными паразитами
эукариотических клеток, принадлежат к семейству Chlamydiacea.
Обладают тропизмом к цилиндрическому эпителию и способны
поражать слизистую оболочку уретры, цервикального канала,
прямой кишки, ротоглотки и конъюнктивы глаз^.
Trichomonas vaginalis — одноклеточный микроорганизм,
относится к типу простейших, семейству Trichomonadidae,
облигатный паразит, получающий важнейшие питательные
компоненты из секрета половых путей путём фагоцитоза
эпителиоцитов и симбионтных микроорганизмов^.
Mycoplasma genitalium. Mycoplasma hominis, Ureaplasma
urealyticum и Ureaplasma parvum - условно-патогенные
микроорганизмы, которые способны вызывать уретрит, цервицит.
цистит, воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ),
а также осложнения течения беременности, послеродовые и
послеабортные осложнения“ *.
Neisseria gonorrhoeae - грамотрицательный диплококк
бобовидной формы, относится к семейству Neisseriacea. Приводит к
развитию инфильтративных и дегенеративных процессов слизистой
оболочки органов урогенитальной и репродуктивной систем,
прямой кишки, ротоглотки, конъюнктивы^
Gardnerella vaginalis - вид анаэробных бактерий, являющийся
возбудителем гарднереллеза, который может появляться на фоне
болезней, передающихся половым путем: гонореи, хламидиоза,
трихомониаза. Размножение микроорганизмов провоцирует
воспаление слизистой, нарушение микрофлоры и при отсутствии
лечения - развитие бесплодия^.
Candida albicans - условно-патогенные микроорганизмы,
являющиеся факультативными анаэробами и обладающие
тропизмом к тканям, богатым гликогеном (в частности, к слизистой
оболочке влагалища). К осложнениям относятся воспалительные
‘ Клинические рекомендации: Ведение больных инфекциями,
передаваемых половым путем и урогенитальными инфекциями. Российское
общество дерматовенерологов и косметологов. М. Деловой экспресс. - 2012 г.
4
2 Клинические рекомендации: Хламидийная инфекция. Министерство
здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
^ Клинические рекомендации: Урогенитальный трихомониаз.
Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
^ Клинические рекомендации: Урогенитальные заболевания, вызванные
Ureaplasma spp., М. Hominis. Министерство здравоохранения Российской
Федерации. 2016 г.
^ Клинические рекомендации; Гонококковая инфекция. Министерство
здравоохранения Российской Федерации, 2016 г.
* Клинические рекомендации; Бактериальный вагиноз. Министерство
здравоохранения Российской Федерации. 2016 г
5
--- стр. 8 ---
Таблица 3 - Состав формы комплектации «UROGEN-TecT-12-
ми»
№
пп
------------7----------------------------------------
Название
реагента Описание
Количество,
объём
ПЦР-буфер 5х Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
1 152 мкл
2 Праймер-микс MU 2х прозрачная жидкость
сиреневого цвета
1 пробирка,
960 мкл
3 ПКО Прозрачная бесцветная
жидкость
I пробирка.
192 мкл
4 ОКО Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
500 мкл
Таблица 4 - Состав формы комплектации «UROGEN-TecT-12-
TNGC»
Таблица 5 - Состав формы комплектации «UROGEN-TecT-l2-
CHV»
№
пп
Название
реагента Описание
Количество,
объём
1 ПЦР-буфер 5х Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
1 152 мкл
2 Праймер-микс TNGC 2х Прозрачная жидкость
сиреневого цвета
1 пробирка,
960 мкл
3 ПКО Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
192 мкл
4 ОКО Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
500 мкл
№
пл
Название
реагента Описание
Количество,
объём
1 ПЦР-буфер 5х Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка,
1 152 мкл
2 Праймер-микс CHV 2х Прозрачная жидкость
сиреневого цвета
1 пробирка.
960 мкл
Л ПКО Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка.
192 мкл
4 ОКО Прозрачная бесцветная
жидкость
1 пробирка.
500 мкл
7
i #
14
ПЦР-буфер готов к использованию и содержит все основные
реагенты, включая термостабильную ДНК-полимеразу с «горячим
стартом», дезоксинуклсотидтрифосфаты, урацил-ДНК-гликозидазу
и оптимизированный буфер.
Праймер-микс MU готов к использованию и содержит
мультиплексную смесь праймеров и зондов:
1. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Mycoplasma genitalium. Детекция осуществляется по каналу
FAM/Green.
2. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Ureaplasma urealylicum. Детекция осуществляется по каналу
ROX/Orange.
3. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Mycoplasma hominis. Детекция осуществляется по каналу
Cy5/Red.
4. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Ureaplasma parvum. Детекция осуществляется по каналу
Cy5.5/Crimson.
5. Праймеры и зонд к КВМ. Детекция осуществляется по
каналу HEX/Yellow.
Праймер-микс TNGC готов к использованию и содержит
мультиплексную смесь праймеров и зондов:
1. Праймеры и зонд к специфично.му участку геномной ДНК
Trichomonas vaginalis. Детекция осуществляется по каналу
FAM/Green.
2. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Neisseria gonorrhoeae. Детекция осуществляется по каналу
ROX/Orange.
3. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Gardnerella vaginalis. Детекция осуществляется по каналу
Cy5/Red.
4. Праймеры и зонд к специфично.му участку геномной ДНК
Candida albicans. Детекция осуществляется по каналу
Cy5.5/Cnmson.
5. Праймеры и зонд к КВМ. Детекция осуществляется по
каналу HEX/Yellow.
Праймер-микс CHV готов к использованию и содержит
мультиплексную смесь праймеров и зондов:
15
--- стр. 9 ---
1. праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
Chlamydia trachomatis. Детекция осуществляется по каналу
FAM/Green.
2. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
CMV (Human betaherpesvirus 5). Детекция осуществляется по
каналу ROX/Orange.
3. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
HSVÎ (Human alphaherpesvirus I). Детекция осуществляется
по каналу Cy5/Red.
4. Праймеры и зонд к специфичному участку геномной ДНК
HSV2 (Human alphaherpesvirus 2). Детекция осуществляется
по каналу Cy5.5/Crimson.
5. Праймеры и зонд к КВМ. Детекция осуществляется по
каналу HEXATellow.
Прохождение реакции по HEX/Yellow Ct<32 говорит о
достаточном качестве забора материала, эффективности экстракции
нуклеиновых кислот и отсутствии ингибиторов ПЦР. При
отсутствии реакции по каналу HEX/Yellow или Ct>32 и
одновременном отсутствии реакции по каналам специфики
FAM/Green, ROX/Orange, Cy5/Red и Cy5.5/Crimson результат
следует считать невалидным, для данного исследуемого образца
необходимо провести повторное исследование, начиная с выделения
ДНК. В случае повторения невалидного результата, заново
произвести забор биоматериала у данного пациента.
Положительный контрольный образец (ПКО) готов к
использованию и представляет собой смесь [ыазмидных ДНК с
синтетическими вставками амплифицируемых фрагментов ДНК:
участок гена СОМТ человека, специфичные фрагменты ДНК
Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Neisseria gonorrhoeae,
Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis,
Ureaplasma parvum, Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV
(Human betaherpesvirus 5), HSVI (Human alphaherpesvirus 1), HSV2
(Human alphaherpesvirus 2).
Отрицательный контрольный образец (ОКО) готов к
использованию и представляет собой деионизованную воду,
свободную от ДНКаз.
В составе набора отсутствуют лекарственные средства для
медицинского применения, вещества человеческого или животного
происхождения.
4. Характеристики набора реагентов
4.1 Технические и функциональные характеристики
t
Наи.менование показателя ' Характеристики и нормы
I Технические харя 1стеоистики
^ . 1 .Внешний вид
1.1.1 Форма комплектации «UROGEN-TecT-l2-96» для проведения 96 реакций
каждого мультиплекса (MU - Mycoplasma genitalium, L'reaplasma urealyiicum,
Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum; TNGC - T richom onas vag in a lis, N e isse ria
gonorrhoeae. G a rd n e re lla vag in a lis, C a n d id a a lb ica n s: CHV C h la m y d ia (rachom atis,
C M V (H um an b etaherpesviru s 5), H S V I (H um an a lp h ah erp esviru s 1), H S V 2 (H um an
a lp h ah e rp e sviru s 2)
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость
Праймер-микс MU Прозрачная жидкость сиреневого цвета
Праймер-.микс TN'GC Прозрачная жидкость сиреневого цвета
Праймер-микс CHV Прозрачная жидкость сиреневого цвета
ПКО Прозрачная бесцветная жидкость
ОКО Прозрачная бесцветная жидкость
1.1.2 Форма комплектации «UROGEN-TecT-12-MU» для проведения 96 реакций
каждого мультиплекса (MU - M yco p la sm a gen italiu m . U reaplasm a u realyiicu m ,
M yco p la sm a hom inis. U reap lasm a parvum t)
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость
Шаймер-микс MU Прозрачная жидкость сиреневого цвета
ПКО Прозрачная бесцветная жидкость
iOKO Прозрачная бесцветная жидкость
■РГ.1.3 Форма комтзектации «UROGEN-TecT-12-TNGC» для проведения 96 реакций
каждого мультиплекса (TNGC - T rich om onas vag in a lis. N e isse ria gonorrhoeae.
G a rd n e re lla v a g in a lis. C a n d id a a lb ica n s)
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость
JbafiMep-MHKC TNGC Прозрачная жидкость сиреневого цвета
JIKO Прозрачная бесцветная жидкость
OKO Прозрачная бесцветная жидкость
1.1.4 Форма комплектации «UROGEN-Tecr-12-CHV для проведения 96 реакций
каждого мультиплекса (CHV - C h la m y d ia trach om atis, C M V (H um an b etaherpesviru s 5).
H S V } (H um an a lp h ah erp esviru s 1). H S V 2 (H um an alp h ah erp esviru s 2)
ПЦР-буфер Прозрачная бесцветная жидкость
Праймер-микс CHV Прозрачная жидкость сиреневого цвета
16 17
--- стр. 10 ---
пко Прозрачная бесцветная жидкость
око Прозрачная бесцветная жидкость
1.2. Комплектности
В соответствии с п. 1.4 ТУ 21.20.23-023-97638376-2020
1.3. Маркировка В соответствии с п. 1.5 ТУ 21.20.23-023-97638376-2020
1.4. Упаковка В соответствии с п. 1.6 ТУ 2 .20.23-023-97638376-2020
2. Функциональные хаоа 1Сгеристики
Положительный результат
с ПКО
Регистрация роста сигнала флуоресценции в пробирках
с ПКО по каналам FAM/Green Ct<35, ROX/Orange Ct
<35, Cy5/Red Ct <35, Cy5.5/Crimson Ct <35 и
HEXA'eilow Ct<35.
Отрицательный результат
с ОКО
В пробирках с ОКО по каналам FAM/Green,
HEX/Yellow, ROX/Orange, CyS/Red, Cy5.5/Crimson Ct не
указан
Прохождение реакции в
пробирках с СОП-КОЧ-
UROGEN-12
В пробирках с COII-K04-UROGEN-12 по каналам
FAM, HEX, ROX, Су5, Су5.5 во всех повторностях
(не менее 4) Ct >28 и при значении стандартного
отклонения в повторностях COIT-K04-UROGEN-
12 не более 3%.
Прохождение реакции в
пробирках с СОП-КОС-
URCXЗEN-12
В пробирках с COn-KOC-UROGEN-12 по каналам
FAM, ROX, Су5. Су5.5 не указан, по каналу HEX
Ct <26.
Ш Ф
4.2.1
4.2 Характеристики аналитической эффективности
Аналитическая чувствительность и аналитическая
1. Форма KOMiLieicrauHH «LKOGEN-TecT-12-96» для проведения 96 реакций
каждого мультиплекса (MU \4ycoplasm a gen italiu m . U reap lasm a urealyticum ,
M yco plasm a hom inis, U reaplasm a parvum \ TNGC - T rich om onas vag in a lis, N e isse ria
gonorrhoeae. G a rd n e re lia vag in a lis, C a n d id a a lb ica n s: CHV C h la m yd ia trach om atis,
С М У (H um an hetaherpesviru s 5). H S V l (H um an a lp h ah e rp e sviru s I), H S l'2 (H um an
alph ah erD esvirus 2)
Аналитическая
специфичность
Специфичен по отношению к ДНК C h la m yd ia trach om atis,
U reaplasm a u realyticu m . T rich om onas v a g in a lis. N e isse ria
g on orrhoeae. M yco p lasm a g e n ita liu m . M yco p lasm a hom inis,
U reap lasm a parvum , G a rd n e re lla vag in a lis. C a n d id a
a lb ica n s. C M V (H um an b etaherpesviru s 5). H S V I (H um an
a lp h ah erp esviru s I), H S l '2 (H um an a lp h ah erp esviru s 2).
Показано отсутствие неспецифических положительных
результатов амплификации при наличии в образце ДИК
L a c to b a cillu s spp.; E sc h e ric h ia c o li: S taph ylococcus aureus:
Streptococcu s a g a la ctia e . Treponem a p a llid u m . Toxoplasm a
g o n d ii, H P V I6 , H P V I8 .
18
Ь
Аналитическая
чувствительность
Не менее 500 копий на 1 .мл ДНК C h la m y d ia trach om atis,
U rea p la sm a u realyticu m , T rich om onas v a g in a lis. N e isse ria
gon orrho eae. M yco p lasm a g e n ita liu m . M yco p lasm a hom inis.
U rea p la sm a parvum . G a rd n e re lla v a g in a lis. C a n d id a
a lb ica n s. C M l'(H u m a n b etaherpesviru s 5). H S V I (H um an
a lp h a h e rp e sviru s // H S V 2 (H um an alp h ah e rp e sviru s 2\
2. Форма комплектации «lIROGEN-TecT-12-.ML» для проведения 96 реакций с
мультиплексом Mi; { M U - M yco p la sm a g e n ita liu m , U rea p la sm a u re a lyticu m .
M y co p la sm a h o m in is, U re a p la sm a p a rvu m )
)
Аналитическая
специфичность
Специфичен no отношению к ДНК M yco p lasm a gen ita liu m .
M yco p la sm a hom inis. U reap lasm a parvum . U reaplasm a
u realyticu m . Показано отсутствие неспецифических
положительных результатов амплификации при наличии в
образце ДНК L a c to b a c illu s spp.; E sch e rich ia c o li:
S tap h ylo co ccu s aureus: Streptococcu s a g alactia e , Treponem a
p a llid u m . T oxoplasm a g o n d ii, H P V 1 6 . Н Р У 1 8 . C h la m yd ia
trach om atis. T richom onas v a g in a lis, N e isse ria g on orrho eae
G a rd n e re lla v a g in a lis. C a n d id a a lb ica n s. С М У (H um an
b etaherpesviru s 5). H S T l (H um an a lp h ah erp esviru s l). H S \'2
(H um an a lp h ah e rp e sviru s 2).
Аналитическая
чувствительность
He менее 500 копий на 1 мл“ ДНК U reap lasm a
u realyticu m , .M ycoplasm a gen italiu m . .M ycoplasm a hom inis,
U rea p la sm a parvum .
3. Форма комп.зекгаиии «UROGEN-TecT-12-TNGC» для проведения 96
реакций с мультиплексом TNGC {T rich o m o n a s v a g in a lis, N e isse ria gon orrho eae,
G a rd n e re lla v a g in a lis, C a n d id a a lb ica n s)
Аналитическая
специфичность
Специфичен по отношению к ДНК T richom onas v a g in a lis.
N e isse ria g on orrhoeae, G a rd n e re lla vag in a lis. C a n d id a
a lb ica n s. Показано отсутствие неспецифических
положительных результатов амплификации при наличии в
образце ДНК L a c to b a c illu s spp.; E sch e rich ia co li:
S tap h ylococcu s aureu.s: Streptococcu s ag alactia e. Treponem a
p a llid u m , T oxoplasm a g o n d ii, H P V I6 . Н Р У 1 8 . C h la m yd ia
trach om atis, U reap lasm a u realyticu m . M ycoplasm a
g en ita liu m , M ycopla.sm a hom inis. U reaplasm a parvum . C M V
(H um an betaherpesviru s 5). IIS V ! (H um an a lph ah erpesvirus
1). HSV'2 (H um an a lp h ah erp esviru s 2).
Аналитическая
чувствительность
He менее 500 копий на I .мл'^ ДНК T richom onas v a g in a lis.
N e isse ria gonorrhoeae. G a rd n e re lla vag in a lis, C a n d id a
a lb ica n
при выделении ДНК рекомендуемыми наборами реагентов (см. п. 9.1
Инструкции) из образца объёмом 100 мкл и объёме элюата не более 50 мкл.
" При выделении ДНК рекомендуемыми наборами реагентов (см. п. 9.1
Инструкции) из образца объёмом 100 мкл и объёме элюата не более 50 мкл.
19
--- стр. 11 ---
TT
4. Форма комгиектации «lJROGEN-Tecr-12-CHV» для проведения 96 реакций I
с мультиплексом CHV {C h la m yd ia tra ch o m a tis, C M V (H u m a n beta h erp esviru s 5), \
H S V l (H u m a n a lD h a h ero esviru s I). H S V 2 (H u m a n a lp h a h e rp e sviru s 2)
•
Аналитическая
специфичность
Специфичен по отношению к ДНК C h la m yd ia trach om atis,
е м у (H um an betaherpesviru s 5), H S V l (H um an
a lp h ah erp esviru s I). H S V 2 (H um an a lp h ah erp esviru s 2).
Показано отсутствие неспецифических положительных
результатов амплификации при наличии в образце ДНК
L a c to b a cillu s spp.; E sch e rich ia c o li; S taph ylococcus aureus'.
Streptococcu s ag alactia e. Treponem a p a llid u m . Toxoplasm a
g o n d ii, H P V I6 , H P V 1 8 . U reaplasm a urealyticu m .
T richom onas v a g in a lis. N e isse ria gon orrhoeae, M ycoplasm a
g en ita liu m . M yco p la sm a hom inis, U reap lasm a parvum .
G a rd n e re lla v a g in a lis, C a n d id a a lb ica n s.
Аналитическая
чувствительность
He менее 500 копий на 1 мл'^ ДНК C h la m yd ia trach om atis,
C M V (H um an betaherpesviru s 5). H S V l (H um an
a lp h ah erp esviru s 1). H S V 2 (H um an a lp h ah e rp e sviru s 2)
t •
4.2.2 Прецизионность в условиях повюряемости
Для оценки прецизионности в условиях повторяемости
использовали стандартные образцы предприятия:
- COn-UROGEN-12, готов к использованию и представляет
собой смесь плазмидных ДНК с синтетическими вставками
амплифицируемых фрагментов ДНК: участок гена СОЛ/7* человека,
специфичные фрагменты ДНК Chlamydia trachomatis, Ureaplasma
urealyticum, Trichomonas vaginalis, Neisseria gonorrhoeae,
Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum,
Candida albicans, Gardnerella vaginalis, CMV (Human betaherpesvirus
5), HSVl (Human alphaherpesvirus 1), HSV2 (Human alphaherpesvirus
2) и гена COM!' человека (контроль взятия материала) в 'ГЕ буфере
(10 мМ Трис, 1 мМ ЭДТА) с концентрацией 1 000 копий на 6 мкл
(167 000 копий/мл) каждой.
COn-K04-UROGEN-12, готов к использованию и
представляет собой смесь плазмид с синтетическими вставками
последовательностей, комплементарных мишеням Chlamydia
trachomatis. Mycoplasma genitalium. Neisseria gonorrhoeae.
При выделении ДНК рекомендуемыми наборами реагентов (см. п. 9.1
Инструкции) из образца объё.мом 100 мкл и объёме элюата не более 50 мкл.
При выделении ДНК рекомендуемыми наборами реагентов (см. п. 9.1
Инструкции) из образца объёмом 100 мкл и объёме элюата не более 50 мкл.
20
Ureaplasma urealyticum, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma hominis,
Ureaplasma parvum, Gardnerella vaginalis, Candida albicans, CMV
(Human betaherpesvirus 5), HSVl (Human alphaherpesvirus 1), HSV2
(Human alphaherpesvirus 2) и гена СОЛ/Г человека в ТЕ буфере (10
мМ Трис, 1 мМ ЭДТА) с концентрацией 4 167 копий в мл каждой.
COn-KOC-UROGEN-12, готов к использованию и
представляет собой раствор геномной ДНК человека, выделенный
из клеточной линии Jurkat с концентрацией 1 000 копий на 6 .мкл
(167 000 копий/мл).
Контрольные образцы COri-UROGEN-12. СОП-КОЧ-
UROGEN-12, COri-KOC-UROGEN-I2 был исследован в количестве
10 повторов каждой фор.мой комплектации набора реагентов
«UROGEN-TecT-12».
Данные по повторяемости получают внутри лаборатории для
конкретного оборудования и внутри конкретной партии набора
реагентов.
Процедуру выделения ДНК из контрольных образцов
проводили с использованием следующих, рекомендованных в
инструкции по применению, наборов реагентов для выделения
ДНК;
- Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материала "НК-Экстра" по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019.
производства ООО «ТестГен», Россия (Регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/15428 от 24.09.2021 г.).
- Реагент для сбора, транспортирования и выделения ДНК из
клинического материала «ДНК-Фаст» по ТУ 21.20.23-016-97638376-
2019, производства ООО «ТестГен», Россия (регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/14885 от 27 июня 2021 года).
- Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
«ПРОБА-НК» по ТУ 9398-035-46482062-2009, производства ООО
"НПО ДНК-Технология". Россия, (Регистрационное удостоверение
№ ФСР 2010/08867 от 13.10.2016 г.).
Для оценки прецизионности в условиях повторяемости
рассчитывают среднее арифметическое выборки, дисперсию,
среднеквадратическое отклонение и коэффициент вариации по
полученным значениям в повторах контрольных образцов.
--- стр. 12 ---
Результаты исследования показали, что коэффициент
вариации в условиях повторяемости набора «иКОСЕК*Тест-12» для
всех форм комплектации составляет не более 4%.
4.2.3 Прецизионность в условиях воспроизводимости
Оценку воспроизводимости тест-системы проводят
аналогично расчёту прецизионности в условиях повторяемости,
однако для тестирования используют различные наборы из партии
набора реагентов, реакции ставят в разных лабораториях, разные
операторы, в разные дни, на разных ПЦР-амплификаторах (Блок
воспроизводимости 1, Блок воспроизводимости 2, Блок
воспроизводимости 3, Блок воспроизводимости 4).
Процедуру выделения ДНК из контрольных образцов
проводили с использованием следующих, рекомендованных в
инструкции по применению, наборов реагентов для выделения
ДНК:
- Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материала "НК-Экстра" по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019,
производства ООО «ТестГен», Россия (Регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/15428 от 24.09.2021 г.).
- Реагент для сбора, транспортирования и выделения ДНК из
клинического материала «ДНК-Фаст» по ТУ 21.20.23-016-97638376-
2019, производства ООО «ТестГен», Россия (регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/14885 от 27 июня 2021 года),
- Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
«НРОБА-НК» по ТУ 9398-035-46482062-2009, производства ООО
"НПО ДНК-Технология", Россия, (Регистрационное удостоверение
№ ФСР 2010/08867 от 13.10.2016 г.).
При проведении исследований прецизионности в условиях
воспроизводимости наблюдалась полная внутрипостановочная,
межпостановочная и межсерийная воспроизводимость. Результаты
исследования показали, что коэффициент вариации в условиях
повторяемости набора «UROGEN-Tecт-12» для всех форм
комплектации составляет не более 6%.
4.2.4 Интерферирующие вещества и ограничения по
использованию анализируемого материала
Влияние потенциально интерферирующих веществ на работу
набора реагентов «UROGEN-Tecт-12» было проверено в ходе
проведения клинических испытаний в отношении потенциально
• #
интерферирующих веществ, которые будут встречаться при
процедуре забора клинического материала в следующих
концентрациях;
Эндогенные интерферирующие вещества:
1) Ге.моглобин - 100 мг/мл;
2) Гиалуроновая кислота - 50 мг/мл.
Экзогенные интерферирующие вещества:
3) Хлоргексидин - 0.05 г/мл;
4) Мирамистин (бензилдиметил[3 (миристоиламино)
пропил]аммония хлорида моногидрат) - 0,1 мкг/мл;
5) Клотримазол - 200 мг/мл.
На основании результатов исследования потенциально
интерферирующие вещества, встречающиеся при процедуре
выделения ДНК из клинического материала, оцениваемые при
концентрациях, которые, как ожидается, будут встречаться при
нормальном использовании набора реагентов «UROGEN-Tecт-12»,
не оказывают влияние на результат анализа.
Ограничения по испо.зьзоваиию анализируемого
материала:
- анализируемый материал не подлежит использованию при
нарушении условий хранения и транспортировки (температура,
продолжительность, многократное замораживание-оттаивание);
- не допускается использование образцов, загрязнённых
посторонним биологическим материалом.
4.2.5 Оценка кросс-контаминации
Проведена оценка кросс-контаминации набора реагентов
«иКООЕК-Тест-12» в соответствии с ГОСТ Р 51352-2013 с
использованием двух высокотитражных положительных и трех
отрицательных образцов по отношению к каждому исследуемому
м и кроорган изму.
Всего было проведено пять постановок, в которых
положительные и отрицательные образцы были расставлены в
шахматном порядке.
Процедуру выделения ДНК проводили с использованием
следующих, рекомендованных в инструкции по применению,
наборов реагентов для выделения ДНК:
- Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материа^за "НК-Экстра" по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019.
22 2 Я
--- стр. 13 ---
производства ООО «ТестГен», Россия (Регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/15428 от 24.09.2021 г.).
- Реаге;!т для сбора, транспортирования и выделения ДНК из
клинического материала «ДНК-Фаст» по ТУ 21.20.23-016-97638376-
2019, производства ООО «ТестГен», Россия (регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/14885 от 27 июня 2021 года),
- Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
«ПРОБЛ-ИК» по ТУ 9398-035-46482062-2009, производства ООО
"НПО ДНК-Технология", Россия, (Регистрационное удостоверение
№ ФСР 2010/08867 от 13.10.2016 г.).
Для проведения ПЦР-исследования набором реагентов
«UROGEN-TecT-l2» были использованы амплификаторы,
рекомендуемые в инструкции по применению исследуемого набора
реагентов:
- Амплификатор детектирующий ДТпрайм (ООО «НПО ДНК-
Технология». Россия);
- Амплификатор CFX 96 («Bio-Rad», США);
- Амплификатор Rotor-Gene Q («Qiagen», Германия);
- Амплификатор QuantStudio 5 («Thermo Fisher Scientific»,
США).
При соблюдении требований инструкции по применению
переноса высоких концентраций или перекрестного
загрязнения от образца к образцу не наблюдалось. В серии из 5
повторов все отрицательные образцы дали отрицательный
результат.
• f
4.3 Характеристики клинической эффективности
Диагностические характеристики испытуемого набора
каждой формы комплектации по отношению к каждому
исследуемому аналиту в образцах клинического материала человека
(мазки из влагалища, соскоб из цервикального канала, соскоб из
уретры, клеточный осадок мочи, секрет предстательной железы)
приведены в Таблицах 7-10
Таблица 7 - Диагностические характеристики набора
реагентов «UROGEN-Tecт-12» в форме комплектации «UROGEN-
Тест-12-96»
Вил
исслслуем
ою
материала
Мазки со
слизистой
оболочки
влага.1ища
Исследуемы
й аналит
Количество
наболю-
дений с
положительн
ыми
пообами
Количество
наболю-
дений с
отрицатсльн
ыми
пообами
Диагностическая
чувствительность
с доверительной
вероятностью 95 %
Диагностическая
специфичность
с доверительной
вероятностью 95
%
Chlamydia
trachomaUs 12 80
100%
(95% ДИ 73,54%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,49%-
100%)
Ureaplasma
urealyiicum И 78
100%
(95% ДИ 76,84%-
100%)
100%
(95%ДИ;95,38%-
100%)
Trichomonas
vaginalis 10 82
100%
(95%ДИ:69.!5%-
100%)
100%
(95% ДИ 95.60%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 10 82
100%
(95%ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
Mycoplasma
genitalium 16 76
100%
(95%ДИ:79,41%-
100%)
100%
(95% ДИ 95Д6%-
100%)
Mycoplasma
hominis 10 82
100%
(95%ДИ;69.15%-
100%)
100%
(95%ДИ:95.60%-
100%)
Ureaplasma \ 0pan'urn 74
100%
(95»/оДИ,81.47%-
100%)
100%
(95%ДИ:95,14%-
100%)
Candida
albicans 10 82
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
Cardnerella
vaginalis 12 80
100%
(95% ДИ 73,54%.
100%)
100%
(95% ДИ 95.49%-
100%)
CMV 1
(Human \ IQ
betaherpes\ir \
us 5) 1
82
100“ /о
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
HSCI i
(Human 1 IQ
alphaherpesv
irus II !
82
100%
(95% ДИ 69.15%-
100“/о)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
24 25
--- стр. 14 ---
HSV2
(Human
alphaherpesY
irus 2)
12 80
100%
(95% /IH .73,54%-
100%)
100% ;
(95% AH;95.49%- :
100%) '
C0CK06 H 3
uepBHKSuib
Horo
KBHaia
Chlamydia
trachomatis 10 66
100%
(95% flM :69.15% -
100%)
100% ;
(95% AH:94.56%- '
100%)
Ureaplasma
urealyticum 10 66
100%
(95% ilH 69,15%-
100%)
100%
(95% AH.94,56%-
100%)
Trichomonas
vaginalis 6 70
100%
(95% m 54,07%-
100%)
100%
(95% AH 94.87% .
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 8 68
100%
(95% ZIH-63,06%-
100%)
100%
(95% AH:94,72%- ,
100%) 1
Mycoplasma
genitaUum 6 70
100%
(95% HH:54,07%-
100%)
100% 1
(95% AH:94,87%- :
100%)
Mycoplasma
hominis 10 66
100%
(95% AH:69,15% -
100%)
100%
(95% AH;94,56% - i
100%) i
Ureaplasma
parvum 8 68
100%
(95% AH 63,06%-
100%)
100%
(95% AH;94.72% -
100%)
Candida
albicans 10 66
100%
(95% AM :69,15%-
100%)
100%
(95% AH.94.56%-
100%)
Gardnerella
vaginalis 10 66
100%
(95% AH-69.15%-
100%)
100%
(95% AH 94,56%-
100%)
CMV
(Human
beiaherpesvir
us 5)
8 68
100%
(95% AM:63,06%-
100%)
100%
(95% AH:94,72%- ,
100%) ,
HSVI
(Human
alphaherpesv
irus 1)
8 68
100%
(95% AH:63,06%-
100%)
100%
(95% AH:94,72% -
100%) 1
HSV2
(Human
alphaherpesv
irus 2)
8 68
100%
(95% AH 63,06%-
100%)
-----------------------------------1
100% !
(95% AH:94,72% -
100%)
COCKO6 H 3
ypeipbi
Chlamydia
trachomatis 8 58
100%
(95% AH.63,06%-
100%)
100%
(95% AH 93.84%-
100%)
Ureaplasma
urealyticum 6 60
100%
(95% AH 54,07%-
100%)
100%
(95% AH.94.04%-
100%)
Trichomonas
vaginalis 10 56
100%
(95% AH:69,15% -
100%)
100%
(95% AH;93.62%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 10 56
100%
(95% AH:69,15%-
100%)
100%
(95% AH;93.62% - !
100%) 1
Mycoplasma 10 56 100% 100% ;
riepB aiinopuH fl
CB060.]HO
B binym eH H
oii
M04MÖa4C
MHTb6
genitalium (95% A H :69,15% -
100% )
(95% A H :93,62% -
100% )
Mycoplasma
hominis 4 62
100%
(95% A H :39,76% -
100% )
100%
(95% A H :94.22% -
100% )
Ureaplasma
parvum 6 60
100%
(95% A H :54,07% -
100% )
100%
(95% A H -94,04% -
100% )
Candida
albicans 6 60
100%
(95% A H :54.07% -
100% )
100%
(95% A H :94,04% -
100% )
Gardnerella
vaginalis 10 56
100%
(95% A H :69,15% -
100% )
100%
(95% A H :93.62% -
100% )
CMV
(Human
beiaherpesvir
us 5)
8 58
100%
(95% A H :63.06% -
100% )
100%
(95% A H :93,84% -
100% )
HSVI
(Human
alphaherpesv
irus li
8 58
100%
(95% A H :63,06% -
100% )
100%
(95% A H :93,84% -
100% )
HSV2
(Human
alphaherpesv
irus 2)
8 58
100%
(95% A H ;63,06% -
100% )
100%
(95% A H :93,84% -
100% )
Chlamydia
trachomatis 10 54
100%
(95% A H .69,15% -
100% )
100%
(95% A H :93,40% -
100% )
Ureaplasma
urealyticum 8 56
100%
(95% A H :63,06% -
100% )
100%
(95% A H :93,62% -
100% )
Trichomonas
vaginalis 8 56
100%
(95% A H ;63,06% -
100% )
100%
(95% A H ;93.62% -
100% )
Neisseria
gonorrhoeae 12 52
100%
(95%6bTH
AH.K)6bTH.00:73,54
% -sK).0100% )
100%
(95% A H ;93,15% -
100% )
Mycoplasma
genitalium 4 60
100%
(95% A H ;39.76% -
100% )
100%
(95% A H ;94,04% -
100% )
Mycoplasma
hominis 12 52
100%
(95% A H 73.54% -
100%)
100%
(95% A H :93,15% -
100% )
Ureaplasma
parvum 8 56
100%
(95% A H :63,06% -
100% )
100%
(95% A H :93,62% -
100% )
Candida
albicans 8 56
100%
(95% A H :63,06% -
100% )
100%
(95% A H ;93,62% -
100% )
Gardnerella
vaginalis 6 58
100%
(95% AH: 54,07% -
100% )
100%
(95% A H ;93.84% -
100% )
CMV 1 g
(Human
56 100%
(95% A H ;63.06% -
100%
(95% A H ;93.62% -
26 27
--- стр. 15 ---
heiaherpesvir
us 5)
100%) 100%) '
H s n
(HuAian
alphaherpesr
in a a
8 56
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100% ;
(95% ДИ:93,62%-
100%)
HSV2
{Human
alphaherpesr
ints 2>
6 58
100%
(95% ДИ:54,07%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,84%. ,
100%) 1
Секрет
предстатсл
ьной
железы
Chlamydia
irachomaiis 6 46
100%
(95% ДИ 73,54%-
100%)
100%
(95%ДИ:92,29%- ■
100%)
Ureaplasma
urealyticum 6 46
100%
(95%ДИ:76,84%-
100%)
100% 1
(95%ДИ.92,29%-
100%)
Trichomonas
vaginalis 6 46
100%
(95% ДИ:69,15%-
100%)
100% 1
(95% ДИ 92,29%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 4 48
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100% 1
(95%ДИ:92,60%- !
100%)
Mycoplasma
genilalium 4 48
100%
(95%ДИ:79,41%-
100%)
100%
(95% ДИ 92.60%-
100%)
M ycoplasma
hominis 10 42
100%
(95%ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95%ДИ:91,59%-
100%)
Ureaplasma
panu m 4 48
100%
(95% ДИ-81,47%-
100%)
100%
(95% ДИ-92.60%-
100%)
Candida
albicans 6 46
100%
(95%ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95%ДИ:92,29%-
100%)
Gardnerelia
vaginalis 4 48
100%
(95% ДИ 73,54%-
100%)
100%
(95%ДИ:92,60%-
100%)
C M l'
(Human
belaherpesvir
US 5)
6 46
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95%ДИ92Д9%-
100%)
H Sl'l
(Human
alphaherpes\-
irus li
6 46
100%
(95%ДИ;69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 92Д9%-
100%)
HSV2
(Human
alphaherpesv
irus 21
6 46
100%
(95% ЛИ 73,54%-
100%)
100%
(95%ДИ:92,29%-
100%)
Таблица 8 - Диагностические характеристики набора реагентов
««UROGEN-TecT-12» в форме комплектации «UROGEN-TecT-12-MU»
^ %
Вил
исслелуем
ого
материала
Исследуемы
й аналит
Количество
наболю-
дений с
положительн
ыми
пробами
Количество
наболю-
дений с
отрииательн
ыми
пробами
Диагностическая
чувствительность
с доверительной
вероятностью 95 %
Диагностическая
специфичность
с доверительной
вероятностью 95 %
Мазки со
слизистой
оболочки
алагалиша
Ureaplasma
urealylicum 14 78
100%
(95% ДИ.76,84%-
100%)
100%
(95%ДИ:95,38%-
100%)
M ycoplasma
genilalium 16 76
100%
(95%ДИ;79.41%-
100%)
100%
(95%ДИ:95,26%-
100%)
Mycoplasma
hominis 10 82
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ:95,60%-
100%)
Ureaplasma
pan u m 18 74
100%
(95%ДИ 8!,47%-
100%)
100%
(95% ДИ.95,14%-
100%)
Соскоб из
цсрвикаль
ного
канала
Ureaplasma
urealylicum 10 66
100%
(95%ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ: 94.56%-
100%)
M ycoplasma
genilalium 6 70
100%
(95% ДИ: 54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ:94.87%-
100%)
M ycoplasma
hominis 10 66
100%
(95% ли 69,15%-
100%)
100%
(95%ДИ;94.56%-
100%)
Ureaplasma
panu m 8 68
100%
(95% ЛИ 63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ:94,72%-
100%)
Соскоб из
уретры
Ureaplasma
urealylicum 6 60
100%
(95% ЛИ 54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ:94,04%-
100%)
M ycoplasma
genilalium 10 56
100%
(95%ДИ:69.15%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,62%-
100%)
M ycoplasma
hominis 4 62
100%
(95% ДИ:39.76%-
100%)
100%
(95%ДИ:94,22%-
100%)
Ureaplasma
pan u m 6 60
100%
(95% ДИ 54.07%-
100%)
100%
(95%ДИ:94,04%-
100%)
Первая
порция
свободно
выпушенк
ой мочи
Ureaplasma
urealylicum 8 56
100%
(95% ДИ 63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ:93,62%-
100%)
M ycoplasma
genilalium 4 60
100%
(95% ЛИ:39,76%-
100%)
100%
(95% ДИ.94,04%-
100%)
M ycoplasma
hominis 12 52
100%
(95% ДИ 73.54%-
100%)
100%
(95%ДИ:93.15%-
100%)
Ureaplasma | ^
panum 56
100%
Г95% ЛИ 63.06%-
100% '
(95%ДИ:93.62%^
?я 29
--- стр. 16 ---
100%) 100%)
Секрет
предстатсл
ьной
железы
Ureaplasma
ureafylicum 6 46
100%
(95% ДИ:54.07%-
100%)
100%
(95%ДИ;92,29%-
100%)
M ycoplasma
genitalium 4 48
100%
(95% ДИ 39,76%-
100%)
100%
(95% ДИ 92.60%-
100%)
.Mycoplasma
hominis 10 42
100%
(95% ДИ 69.15%-
100%)
100%
(95%ДИ 91.59%-
l00%)
Ureaplasma
parvum
4 48
100%
(95% ДИ;39,76%-
100%)
100%
(95% ДИ 92,60%-
100%)
Таблица 9 - Диагностические характеристики набора реагентов ^ ^
Вил
исследуем
ого
материала
Исследуемы
й аналит
Количество
наболю-
дений с
положительн
ыми
лообами
Количество
наболю-
дсний с
отрицательн
ыми
пробами
Диагностическая
чувствительность
с доверительной
вероятностью 95 %
Диагностическая
специфичность
с доверительной
вероятностью 95 %
Мазки со
слизистой
оболочки
влагалища
Trichomonas
vaginalis
10 82
100%
(95% ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95.60%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 10 82
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
{95% ДИ 95,60%-
100%)
Candida
albicans 10 82
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
Gardnerella
vaginalis 12 80
100%
(95% ДИ 73.54%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,49%-
100%)
Соскоб из
иервика.1ь
кого
канала
Trichomonas
vaginalis 6 70
100%
(95% ДИ 54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ 94.87%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 8 68
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ 94,72%-
100%)
Candida
albicans 10 66
100%
(95% ДИ 69.15%-
100%)
100%
(95% ДИ 94,56%-
100%)
Gardnerella
vaginalis 10 66
100%
(95% ДИ 69.15%-
100%)
100%
(95% ДИ 94.56%-
100%)
Соскоб из
, уретры
Trichomonas
vaginalis 10 56
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 93,62%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 10 56
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 93,62%-
100%)
Candida
albicans 6 60
100%
(95% ДИ 54.07%-
100%)
100%
(95% ДИ 94,04%.
100%)
Gardnerella
vaginalis 10 56
100%
(95%ДИ 69.15%-
100%)
100%
(95% ДИ 93.62%-
100%)
Первая
порция
свободно
выпушенн
ой мочи
Соскоб из
уретры
Trichomonas
vaginalis 8 56
100%
(95% ДИ 63.06%-
100%)
100% "1
(95%ДИ:93,62%- 1
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 12 52
100%
(95% ДИ 73,54%.
100%)
100%
(95% ДИ 93.15%-
100%)
Candida
albicans 8 56
100»/ô
(95% ДИ 63,06%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,62%-
100%)
Gardnerella
vaginalis 6 58
100%
(95% ДИ 54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ:93,84%-
100%)
Секрет
предстател
ьной
железы
Trichomonas
vaginalis 6 46
100%
(95%ДИ:54.07%.
100%)
100%
(95%ДИ:92,29%-
100%)
Neisseria
gonorrhoeae 4 48
100%
(95% ДИ 39,76%-
100%)
100%
(95% ДИ 92,60%- ;
100%) :
Candida
albicans 6 46
100%
(95% ДИ 54,07%-
100%)
100% 1
(95%ДИ:92^9%. |
100%)
Gardnerella
vaginalis 4 48
100%
(95% ДИ.39,76%-
100%)
100%
(95%ДИ:92,60%- '
100%) 1
Таблица 10 - Диагностические характеристики набора реагентов
«UROGEN-TecT-12» в (Ьооме комплектации «UROGEN-TecT-12-CHV»
Вид
исслел>'ем
ого
материа.та
HccaejiyeMbi
R ananHT
Количество
наболю-
дений с
положительн
ыми
пробами
Количество
наболю-
лений с
отрицательн
ыми
пробами
Диагностическая
чувствительность
с доверительной
вероятностью 95 %
Диагностическая
специфичность
с доверительной
вероятностью 95 %
Мазки со
слизистой
оболочки
влагалища
Chlamydia
trachomatis 12 80
100%
(95% ДИ:73,54%-
100%1
100%
(95% ДИ:95,49%-
100%)
C M l'
(Human
betaherpesvir
us 5)
10 82
100%
(95% ДИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ 95,60%-
100%)
HSVI
(Human
alphaherpesv
irus H
10 82
100%
(95%ЛИ 69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ:95.60%-
100%)
HSl'2
(Human
alphaherpesv
irus 2)
12 80
100%
(95%ДИ:73,54%-
100%)
100%
(95%ЛИ:95,49%-
100%)
Соскоб из
цервикаль
ного
какала
Chlamydia
trachomatis 10 66
100%
(95%ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ:94.56%-
100%)
C M l 8 68 100% 100%
31
--- стр. 17 ---
(Human
heiaherpesvir
us 5)
(95%ДИ:63,06%-
100%)
(95% ДИ 94,72%-
100%)
i/sn
(Human
alphaherpesy
irus 11
8 68
100%
(95% ДИ;63.06%-
100%)
100%
(95%ДИ;94.72%-
100%)
HSV2
(Human
alpliaherpesv
irus 2)
8 68
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95%ДИ;94,72%-
100%)
Chlamydia
irachomaiis 8 58
100%
(95%ДИ:63.06%-
100%)
100%
(95% ДИ 93,84%-
100%)
CMV
(Human
hetaherpesvir
us 5)
8 58
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ:93,84%- А
100%)
Соскоб из
уретры HSVI
(Human
alphaherpesv
irus 1)
8 58
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ;93,84%-
100%)
HSV2
(Human
alphaherpesv
irus 2)
В 58
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95% ДИ:93,84%-
100%)
Первая
порция
свободно
вьшущекн
ой мочи
Chlamydia
irachomaiis 10 54
100%
(95% ДИ:69,15%-
100%)
100%
(95% ДИ:93,40%-
100%)
CMl'
(Human
beiaherpesvir
8 56
100%
(95% ДИ:63.06%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,62%-
100%)
HSVI
(Human
alphaherpesv
8 56
100%
(95% ДИ:63,06%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,62%-
100%)
HSV2
(Human
alphaherpesv
6 58
100%
(95% ДИ;54,07%-
100%)
100%
(95%ДИ:93,84%-
100%)
Секрет
прслстател
ьной
железы
1
1
1
1
Chlamydia
irachomaiis
6 46
100%
(95% ДИ;54,07%-
100%)
100%
(95%ДИ;92.29%-
100%)
CMV
(Human
beiaherpesvir
6 46
100%
(95%ДИ:54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ:92,29%-
100%)
HSVI
(Human
alphaherpesv 6 46
100%
(95% ДИ:54,07%-
100%)
100%
(95% ДИ:92,29%-
100%)
HSV2
(Human
alphaherpesv
irus 2)
6 46
100%
(95% ДИ;54,07%-
100%)
100%
(95%ДИ;92.29%-
100%)
5. Перечень рисков, связанных с применением набора реагентов
«UROGEN-TecT-12»
В пограничную зону риска вошли опасности:
1.
2.
3.
4.
5.
6.
32
потеря функциональных свойств реагентов, входящих в
набор, из-за транспортирования, хранения или эксплуатации
в несоответствующих условиях;
перекрестная контаминация образцов;
загрязнение материалов ингибирующими веществами;
контаминация реакционных смесей с образцами исследуемой
ДНК содержимым из пробирки ПКО или продуктами ПЦР;
невыполнение требований по пробоподготовке, проведению
анализов и утилизации вследствие работы с набором
неквалифицированным персоналом;
использование непригодного для применения набора
(использование по истечению срока годности или при
нарушении упаковки).
В области недопустимой зоны риски не выявлены.
Совокупный остаточный риск применения медицинского
изделия Набор реагентов для одновременного качественного
выявления Д1-1К Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium,
Neisseria gonorrhoeae, Ureaplasma urealyticum, Trichomonas
vaginalis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma parvum, Gardnerella
vaginalis, Candida albicans, CMV (Human belaherpesvirus 5), HSVÎ
(Human alphaherpesvirus 1), HSV2 (Human alphaherpesvirus 2)
методом мультиплексной полимеразной цепной реакции в режиме
реального времени «UROGEN-TecT-12» является допустимым,
польза от его применения превышает риск.
6. Меры предосторожности при работе с набором
Класс в зависимости от потенциального риска применения -
26 - в соответствии с номенклатурной классификацией
медицинских изделий, утверждаемой приказом Министерства
здравоохранения Российской Федерации от 06.06.2012 N 4н.
Все составные части и реагенты, входящие в состав набора
реагентов «UROGEN-TecT-12», относятся к 4 классу опасности
(вещества малоопасные) в соответствии с ГОСТ 12.1.007-76 «ССБТ.
Вредные вещества. Классификация и общие требования
безопасности».
33
--- стр. 18 ---
Реагенты, входящие в набор «иКООЕК-Тест-12», обладают
низкой упругостью пара и исключают возможность ингаляционного
отравления.
Реагенты, входящие в набор «UROGEN-Tecт-12», не
токсичны, поскольку готовятся путём смешивания отдельных
нетоксичных компонентов.
Работу с материалом, заражённым или подозрительным на
заражённость, проводят в соответствии с требованиями СанПиН
3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по
профилактике инфекционных болезней".
Необходи.мо одновременно обеспечить и соблюдать
персоналом правила биологической безопасности и требования к
организации и проведению данных работ с целью предотвращения
контаминации нуклеиновыми кислотами и (или) ампликонами
исследуемых проб помещений и оборудования.
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей
молекулярно-биологические (ПЦР) исследования клинического
материала с соблюдением санитарно-эпидемических правил
СанПиН 2.1.3684-21 от 28.01.2021 "Санитарно-эпиде.чиологическис
требования к содержанию территорий городских и сельских
поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьево.му
водоснабжению населения, атмосферному воздуху, почвам, жилым
помещениям, эксплуатации производственных, общественных
помещений. организации и проведению санитарно
противоэпидемических (профилактических) мероприятий".
Следовать реко.мендация.м, изложенным в МУ 287-113, МУ
1.3.2569-09.
При работе всегда следует выполнять следующие требования: ^ ^
- удалять неиспользованные реактивы в соответствии с *
СанПиН 2.1.3684-21 от 28.01.2021 "Санитарно-эпидемиологические
требования к содержанию территорий городских и сельских
поселений, к водным объекта.м. питьевой воде и питьевому
водоснабжению населения, атмосферному воздуху, почвам, жилым
помещениям, эксплуатации производственных, общественных
помещений, организации и проведению санитарно
противоэпидемических (профилактических) мероприятий";
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после а.мплификации
(пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо открывание
пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это может
привести к контаминации продуктами П1ДР лабораторной зоны,
оборудования и реагентов.
1. применять набор строго по назначению, согласно данной
инструкции;
2. допускать к работе с набором только специально обученный
персонал (специалист с высшим медицинским или
биологическим образованием, прошедший обучение на
лицензированных курсах специализации по работе с ПВА 111-
IV групп патогенности и по ПЦР-диагностике, а также
лаборанта со средним специальным медицинским
образованием);
3. не использовать набор по истечении срока годности;
4. избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой.
При контакте немедленно промыть поражённое место водой
и обратиться за медицинской помощью.
Необходимых мер предосторожности в отношении влияния
магнитных полей, внешних электрических воздействий,
электростатических разрядов, давления или перепадов давления,
перегрузки. источников термического воспламенения не
предусмотрено.
В составе набора отсутствуют вещества человеческого или
животного происхождения. обладающие потенциальной
инфекционной природой, поэтому меры предосторожности против
любых специальных, несвойственных рисков при использовании
или реализации изделия не предусмотрены.
35
--- стр. 19 ---
7. Оборудование и материалы, необходимые при работе с
набором
Рабата с набором реагентов для мультиплексной ПЦР
«UROGEN-TecT-12» осуществляется в рабочей зоне 3 (для
приготовления реакций) (МУ 1.3.2569-09).
Оборудование для проведения мультиплексной ПЦР:
1. ПЦР-бокс биологической безопасности II и III класса
зашиты (например, «БМБ-П-«Ламинар-С»-1.2», «Ламинарные
системы», Россия).
2. Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком». Россия). Л
3. Набор электронных или авто.матических дозаторов
переменного объема (например, «Eppendorf», Германия).
4. Холодильник от 2 °С до 8 °С с морозильной камерой не
выше минус 16 °С.
5. Амплификатор''* с флуоресцентной детекцией в режиме
реального времени по каналам, соответствующим флуорофорам
FAM/Green, HEX/Yellow, ROX/Orange, Cy5/Rad, Cy5.5/Crimson
например, CFX96 (BioRad, США), «ДТпрайм» («ДНК-Технология»,
Россия), Rotor-Gene Q («Qiagen», Германия), QuantStudio 5 (Thermo
Fisher Scientific, США).
Материалы и реаюнты, не входящие в состав изделия:
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
только одноразовые стерильные пластиковые расходные материалы,
имеющие специальную маркировку «DNase-free».
1. Одноразовые наконечники с аэрозольным барьером до
1000 мкл, 200 мкл, 20 мкл и 10 мкл (например, «Axygen», ^
США).
2. Одноразовые пробирки Эппендорф на 1,5 мл;
3. Тонкостенные одноразовые пробирки с оптически
прозрачной крышкой для ПЦР:
- пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл.
Амплификаторы должны обслуживаться, калиброваться и
использоваться в соответствии с рекомендация.ми производителя. Использование
данного набора в неоткалиброванном приборе может оказать влияние на рабочие
характеристики теста.
36
- пробирки для ПЦР объёмом 0,2 мл в стрипах.
- планшеты для ПЦР с оптически прозрачной плёнкой
(например, «Axygen», США).
4. Отдельный халат и одноразовые перчатки без талька.
5. Ёмкость с дезинфицирующим раствором.
6. Штативы «рабочее место» для пробирок объёмом 0,2 мл или
для стрипованных пробирок объёмом 0,2 мл (например,
«ИнтерЛабСервис». Россия).
7. Набор для выделения ДНК из клинического .материала (см.
пункт 9.1 Инструкции)
8. При проведении анализа с использованием первой порции
свободно выпущенной мочи в качестве транспортной среды для
добавления к клеточному осадку мочи рекомендуется использовать
«Реагент для транспортировки и хранения клинического материала
'Транспортная среда с муколитиком (ТСМ)" по ТУ 9398-098-
01897593-2009», производства ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора. Россия (регистрационное удостоверение № ФСР
2009/05514 от 13.03.2019).
8. Анализируемые образцы
Тип анализируемого образца
Биологическим материалом для исследования являются:
1. Соскобы эпителиальных клеток (из уретры, цервикального
канала, заднего свода влагалища);
2. Клеточный осадок первой порции свободно выпущенной
мочи;
3. Секрет предстательной железы.
8.1 Процедура получения Kvlиничecкolo материала
ВНИМАНИЕ! Перед началом работы следует ознакомиться с
методическими рекомендациями «Взятие, транспортировка,
хранение клинического материала для ПЦР-диагностики».
разработанными ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва, 2012.
Забор клинического материала и его упаковку осуществляет
работник медицинской организации, обученный требованиям и
правилам биологической безопасности при работе и сборе
37
--- стр. 20 ---
материала, подозрительного на зараженность микроорганизмами III
группы патогенности.
Забрр материала на исследование
Соскобное отделяемое слизистых оболочек
урогенитального тракта (цервикального канала, уретры,
влагалища).
Забор материала осуществляют с помощью специальных
стерильных одноразовых инструментов - урогенитальных зондов,
цитощёток или тампонов, в зависимости от источника клинического
материала. После взятия клинического материала погрузить
рабочую часть зонда в пробирку объёмом 1,5-2,0 мл, содержащую ^
300-500 мкл стерильного физиологического раствора или ™
транспортную среду, предназначенную для транспортирования и
хранения образцов биоматериала для ПЦР-исследования или
реагент для выделения нуклеиновых кислот (например, «ДНК-
Фаст» (производства ООО «ТестГен»). Если инструкция к набору
реагентов предусматривает, оставить рабочую часть зонда в
пробирке с транспортной средой, отломив её в области насечки. В
случае отсутствия насечки или если оставление зонда не
предусмотрено инструкцией, погрузить рабочую часть зонда в
среду, и, прижав её к внутренней стенке пробирки, вращать зонд 5-
10 сек., после чего зонд удалить, а пробирку плотно закрыть. Перед
проведением процедуры экстракции нуклеиновых кислот осадить
капли материала со стенок пробирки и внутренней части крышки
центрифугированием (1 500 - 3 000 g), после чего аккуратно
перемешать содержимое пробирки на вортексе, избегая
разбрызгивания и попадания материала на внутреннюю часть
крышки. А
Особенности взятия материала из уретры * ^
Женщины накануне обследования не должны проводить
туалет половых органов и спринцевание. Для получения
объективного результата необходи.мо, чтобы исследуемый материал
содержал воз.можно большее количество эпителиальных клеток и
минимальное количество слизи и примеси крови. Неправильное
взятие биоматериала может привести к недостоверному результату
и, вследствие этого, необходимости повторного взятия
биоматериала.
Перед взятием биоматериала пациенту рекомендуется
воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 ч.
Непосредственно перед взятием био.материа.’1а необходимо
обработать наружное отверстие уретры тампоном, который можно
смочить стерильным физиологическим раствором.
При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать
через 15-20 мин. после мочеиспускания, при отсутствии выделений
необходимо провести .массаж уретры с помощью зонда для взятия
биоматериала. В уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5
см, у детей материал для исследования берут только с наружного
отверстия уретры.
Особенности взятия материала из влагалища
Материал должен быть взят до проведения мануального
исследования. Зеркало перед .манипуляцией можно смочить горячей
водой, применение антисептиков для обработки зеркала
противопоказано. Соскоб берут с заднебокового свода влагалища. У
девочек взятие материала производят со слизистой оболочки
преддверия влагалища, а в отдельных случаях - из заднего свода
влагалища через гименальные кольца.
Особенности взятия материала из цервикального канала.
Перед взятием .материала необходимо удалить ватным
тампоном слизь и затем обработать шейку матки стерильным
физиологическим раствором. Зонд вводят в цервикальный канал на
глубину о,5-1.5 см. При извлечении зонда необходимо полностью
исключить его касание стенок влагалища.
Ограничение метода - местное применение лекарственных
препаратов, УЗИ вагинальным датчиком менее чем за 24 часа до
исследования.
Моча
Для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в
количестве не меньше 20-30 мл в специальный сухой стерильный
контейнер на 50 мл.
Предварительная обработка проб.
Взбалтывают контейнер с мочой. Переносят 1 мл мочи,
используя наконечник с фильтром, в стерильные пробирки объёмом
1,5 мл. центрифугируют 5 мин. при 10 000 g, при наличии большого
количества солей ресуспендируют только верхний слой осадка
солей в объеме 1 мл и затем снова концентрируют. Используя
38 39
--- стр. 21 ---
вакуумный аспиратор с колбой-ловушкой, полностью удаляют
супернатант, не захватывая осадок. К осадку добавить
транспортную среду до конечного объема 0,2 мл, тщательно
перемешать содержимое на вортексе.
В качестве транспортной среды для добавления к клеточному
осадку мочи рекомендуется использовать «Реагент для
транспортировки и хранения клинического материала
"Транспортная среда с муколитиком (ТСМ)" по ТУ 9398-098-
01897593-2009», производства ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии
Роспотребнадзора. Россия (регистрационное удостоверение № ФСР
2009/05514 от 13.03.2019).
Секрет предстательной железы
Перед взятием секрета простаты головка полового члена
обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным
физиологическим раствором. Секрет простаты берётся после
предварительного массажа простаты через прямую кишку. Врач
проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными
движения.ми от основания к верхушке. Затем из кавернозной части
выдавливается простатический секрет, который собирается в
стерильную емкость (сосуды с широким горлом, пробирки).
Условия транспортирования, хранения и утилизации
исходного клинического материала:
- при температуре от 2 до 8 °С - не более 24 ч.
- при температуре минус 18 до минус 22 °С - не более месяца.
ВНИМАНИЕ! Избегать повторного замораживания и
оттаивания образцов.
Учёт, хранение, передача и транспортирование клинического
материала, подозрительного на наличие урогенитальных инфекций,
должны осуществляться в соответствии с действующими санитарно-
эпидемиологическими правилами по безопасности работы с
.микроорганизмами 1П-1У групп патогенности (опасности) (СП
1.3.3118-13) и действующи.ми санитарными правилами о порядке
учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-
IV групп патогенности.
Утилизация клинического материала (класс В), как
чрезвычайно эпидемиологически опасных отходов, осуществляется
в соответствии с СанПиН 2.1.3684-21.
4 0
9. Проведение анализа
Установка, монтаж, настройка, калибровка медицинского
изделия для ввода в эксплуатацию не требуется.
ВНИМАНИЕ! При работе с ДНК необходимо использовать
%)Лько одноразовые стерильные пластиковые расходные материалы,
имеющие специальную маркировку «DNase-free». Обязательно
использовать отдельный наконечник с аэрозольным барьером для
каждого компонента реакции.
ВНИМАНИЕ! Компоненты реакционной смеси следует
смешивать непосредственно перед проведением анализа.
(). ^ 9.1 Выделение ДНК из клинического материала
Рекомендуется использование следующих комплектов для
экстракции:
- Набор реагентов для выделения ДНК/РНК из клинического
материала "НК-Экстра" по ТУ 21.20.23-013-97638376-2019,
производства ООО «ТестГен», Россия (Регистрационное
удостоверение № РЗН 2021/15428 от 24.09.2021 г.).
- Реагент для сбора, транспортирования и выделения ДНК из
¿клинического материала «ДНК-Фаст» по ТУ 21.20.23-016-97638376-
>'2019, производства ООО «ТестГен», Россия (регистрационное
. удостоверение № РЗН 2021/14885 от 27 июня 2021 года),
- Комплект реагентов для выделения нуклеиновых кислот
(ПРОБЛ-НК/ПРОБА-НК-ПЛЮС) по ТУ 9398-035-46482062-2009,
производства ООО "НПО ДНК-Технология", Россия,
(Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/08867 от 13.10.2016
г.).
Во время процедуры выделения ДНК необходимо строго
^ соблюдать протокол и требования инструкции применяемого набора
реагентов.
Условия возможного хранения анализируемых образцов
ДНК
- при +2 .. .+8°С - не более суток (24 ч),
- при -18 ...-22°С - не более месяца,
- при минус 80°С - длительно.
9.2. Проведение ПЦР
Подготовка компонентов набора для ПЦР
Перед приготовление.м реакций необходимо произвести
влажную уборку ПЦР-бокса, а также оборудования и материалов,
41
--- стр. 22 ---
находящихся в нем, с применением дезинфицирующих средств,
пригодных для использования в ПЦР-лабораториях, включить УФ-
лампу на 20-30 мин.
1. Тщательно перемешать содержимое пробирок с выделенной
для анализа ДНК, ГЩР-буфером, Праймер-миксами, ОКО и ПКО.
переворачивая каждую пробирку 10 раз или перемешивая на
вортексе на низкой скорости в течение 3-5 сек., затем осадить капли
с крышек пробирок коротким центрифугированием.
2. Отобрать необходимое количество пробирок объёмом 0,1-
0,2 мл для ПЦР из расчёта для каждого используемого
мультиплекса: количество исследуемых образцов^^ + 1 ПКО + 1
ОКО.
В зависимости от необходимости выявления конкретных
микроорганизмов и используемого варианта комплектации набора,
каждый образец ставится с одним или несколькими мультиплексами
(праймер-миксами). В таблице 11 приведена схема расположения
ПЦР-пробирок при использовании трёх мультиплексов.
Для приготовления каждой реакции необходимо:
1. ПЦР-буфер-4 мкл,
2. Соответствующий праймер-микс (МО, ТЫОС или СНУ) -
10 мкл,
3. Образец (исследуемый образец ДНК, ПКО. ОКО) - 6 мкл.
Общий объем реакции - 20 мкл.
ВНИМАНИЕ! Запрещено изменять объём реакции. При
изменении объёма чувствительность метода резко снижается!
Протокол проведения ПЦР
Готовить реакционные пробирки необходимо согласно
таблице 11 в следующем порядке:
1. Промаркировать пробирки на 0,2 мл для ПЦР. Для каждого
мультиплекса берётся необходимое количество пробирок для
исследуемых образцов + I ПКО + 1 ОКО.
Таблица 11 - Схема расположения пробирок для ПЦР
Мультиплекс Образец
1
Образец
п ПКО о к о
ми
{Mycoplasma genitalium.
Ureaplasma ureaiyücum.
Mycolplasma hominis.
Ureaplasma parvum)
О О о о
TNGC
(Trichomonas vaginalis,
Neisseria gonorrhoeae.
Gardnerella vaginalis. Candida
albicans)
О О о о
СНУ
(Chlamydia trachomatis.
Human betaherpesvirus 5
CMV. Human
alphaherpesvirus /, Human
alphaherpesvirus 2 HSVI.
HSV2)
О о о о
Для повышения точности рекомендуется анализировать каждый образен
в двух повторах.
42
2. Внести в каждую пробирку по 4 мкл ПЦР-буфера'^.
3. Внести по 10 .мкл Праймер-миксов (МП, TNGC, или СНУ) в
пробирки для соответствующих .мультиплексов (таблица 11).
4. Внести в соответствующие пробирки для исследуемых
Ьбразцов по 6 мкл выделенной ДНК. В пробирки для ПКО и ОКО
ДНК не вносится.
6. Внести в соответствующие
используемого мультиплекса по 6 мкл ПКО.
7. Внести в соответствующие
используемого мультиплекса по 6 мкл ОКО.
8. Для сброса капель со стенок отцентрифугировать пробирки
в течение 1-3 секунд на микроцснтрифуге-вортексе.
9. Установить пробирки в реакционный модуль прибора для
ПЦР в реально.м вре.мени. Рекомендуется устанавливать пробирки
пробирки
пробирки
каждого
каждого
Рекомендуется сначала приготовить смесь праймер-микса и ПЦР-буфера
для каждого мультиплекса в отдельной пробирке на 1,5-2,0 мл из расчёта: (п-3)х4
мкл ПЦР-буфера - (п-З)хЮ мкл соответствующего праймер-микса, где п -
количество образцов. Перемешать на вортексе, осадить капли коротки.м
Чентрифугированием и внести по 14 мкл в ПЦР-пробирки для соответствующего
мультиплекса согласно таблице 4.
43
--- стр. 23 ---
r r
ПО центру термоблока для равномерного прижима пробирок
нагревающей крышкой.
10. Запрограммировать прибор для выполнения
соответствующей программы амплификации и детекции
флуоресцентного сигнала, соблюдая инструкцию для используемого
прибора. Протокол ПЦР указан в таблице 12.
Таблица 12 - Протокол ПЦР
Интерпретация результатов выполняется по значениям С1
каналов РАМ/Сгссп. ROX/Orange, НЕХ/Уе11о\у, Су5/Кес1,
Су5.5/Сг1гп5оп (табл. 13).
Таблица 13 - Интерпретация результатов по каналам РАМ/Огееп.
Стадия Температура, “С Время,
мингсек
Каналы
детекции
Всего
цик.юв
1 95 02:00 1
2 95 00:15 564 00:15
3
95 00:05
4064 00:15
FAM/Green,
ROX/Orange,
HEX/Yellow,
Cy5/Red,
Cv5.5/Crimson
Мультиплекс
(праймер-
микс)
Кана.1, соответствующий ф.1УОрофору
FA.M/
Creen
ROX/
Oranec
<'у5/
Red
Су5.5/
Crimson
ПКХ/
УеПон
ми Mycoplasma
genitalium
Ureaplasma
urealyticitm
Mycoplasm
a hominis
Ureaplasma
parvum
КВМ (Г С П
СОМТ
человека)
^ TNGC Trichomonas
vaginalis
Neisseria
gonorrhoeae
Gardnerella
vaginalis
Candida
albicans
КВМ (ген
СОМТ
че.ювека)
CHV Chlamydia
trachomatis
Human
betaherpesvirus
5
CMV
Human
alphaherpes
virus 1
HSi'l
Human
alphaherpes
virus 2
HSV2
КВМ (ген
СОМТ
человека)
11. Указать количество и идентификаторы образцов, отметить
расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их
установкой.
12. Удостовериться, что в параметрах оптических измерений
программы амплификации задействованы каналы детекции
РАМ/Сгееп, НЕХ/Уе11о\у. КОХ/Огап§е, Су5/Яес1 и Су5.5/Спгп50п.
13. Запустить ПЦР с детекцией флуоресцентного сигнала.
14. По окончании выполнения профаммы приступить к
анализу результатов.
10. Регистрация и интерпретация результатов
Регистрацию результатов проводят по завершении ПЦР
автоматически с помощью програ.м.много обеспечения
используемого прибора.
Рекомендации по установке пороговой линии
Для амплификаторов любых моделей пороговая линия
устанавливается индивидуально для каждого канала на уровне,
соответствующе.м 10-20% от максимального уровня флуоресценции,
полученного для положительного контрольного образца в
последне.м цикле амплификации.
44
Сначала оценивают прохождение реакции и значения С1 в
л контрольных образцах. Интерпретацию результатов в исследуемых
-^образцах начинают только при правильно.м прохождении ПКО и
1 ОКО.
Интерпретация результатов в контрольных образцах
Для отрицательного и положительного контрольных образцов
Юлжны быть получены следующие результаты (табл. 14).
Таблица 14 - Результаты исследования для отрицательного и
1
Внесен
ный
матери
ал
Выбранный ф.туорофор
FAM/Green
{Chlamydia
trachomatis.
Trichomonas
vaginalis.
Mycoplasma
genitalium)
HEX/
Yellow
(KBM)
ROX/Orange
{Ureaplasma
urealyticum.
Neisseria
gonorrhoeae.
Human
betaherpesvirus
5)
Cy5/Red
{Mycoplasm
a hominis.
Gardnerella
vaginalis.
Human
alphaherpes
virus 1
Cy5.5/Crimso
n (Ureaplasma
parvum.
Candida
albicans.
Human
alphaherpesvi
rus 2
ОКО отсутствует отсутст
вуст или отсутствует отсутствует отсутствует
ПКО Ct <35 Ct <35 Ct<35 Ct <35 Ct <35
45
--- стр. 24 ---
При получении для олрицательного контрольного образца
значенр^й. отличающихся от указанных в таблице 14, результаты
всей постановочной серии считают недостоверными. В этом случае
необходимо проведение специальных мероприятий для устранения
возможной контаминации.
При получении для положительного контрольного образца
значений, отличающихся от указанных в таблице 14, требуется
повторная постановка амплификации всей партии образцов. При
повторном получении для положительного контрольного образца
значений, отличающихся от указанных в таблице 14, необходимо
заменить реагенты. "
Интерпретация результатов в исследуемых образцах
Принципы интерпретации результатов отражены в таблицах
15-17.
Таблица 15 - Принцип интерпретации результатов для
мультиплекса MU {Mycoplasma genilaiium, Ureaplasma urealyticum.
Г . ________________ ; не обнаружена
I CtCy5/Red>35 не учитывается
Результат на наличие ДНК
M yco p la sm a hom in is
сомнительный
: Ct Cy5.5/Crimson Ö50, не учитывается ДНК U reap lasm a parvum
обнаружена
О Су5.5/Спт50п 1
отсутствует
ДНК U reap lasm a parvum
не обнаружена
О Су5.5/Спт8оп >35 ! не учитывается
Результат на наличие ДНК
U rea p la sm a parvu m
сомните.1ЬНЫй
О по всем каналам ' ^ж С1>35 специфики >35 или или отсутствует | отсутствует | 1
Результат невалидный
Таблица 16 - Принцип интерпретации результатов для
мультиплекса TNGC {Trichomonas vaginalis. Neisseria gonorrhoeae,
Значения Cl
Каналы специфики
(FAM/Green, ROX/Orange,
Cy5/Red, CyS.S/Crimson)
Канал КВМ
(HEX/Yellow)
Результат
Ct FAM/Green <35 не учитывается ДНК M yco p lasm a
g e n ila iiu m обнаружена
Ct FAM/Green отсутствует Ct<35
ДНК M yco p lasm a
g e n ila iiu m
не обнаружена
Ct FAM/Green >35 не учитывается
Результат на наличие ДНК
M yco p lasm a g e n ila iiu m
сомнительный
Ct ROX/Orange <35 не учитывается ДНК U reaplasm a
u realyticu m обнаружена
Ct ROX/Orange отсутствует Ct <35
ДНК U reaplasm a
u realyticu m
не обнаружена
Ct ROX/Orange >35 не учитываезся
Результат на назичие ДНК
U rea p la sm a u realyticu m
сомните«1ьный
Ct Cy5/Red <35 не учитывается ДНК M yco p lasm a h om in is
обнаружена
Ct Cy5/Red отсутствует а <35 ДНК M yco p lasm a hom in is
Значения Ct
Каналы специфики i у г/пкч D/^v^ Канал КВМ Результат
Ct FAM/Green <35 не учитывается ДНК T richom onas
v a g in a lis обнаружена
Ct FAM/Green отсутствует Ct <35
ДНК T richom onas
v a g in a lis
не обнаружена
Ct FAM/Green >35 не учитывается
Результат на наличие
ДНК T richom onas
v a g in a lis сомните.^1ьный
Ct ROX/Orange <35 не учитывается
ДНК N e isse ria
gon orrhoeae
обнаружена
Ct ROX/Orange отсутствует et <35
ДНК N e isse ria
gon orrhoeae
не обнаружена
Ct ROX/Orange >35 не учитывается
Результат на наличие
ДНК N e isse ria
gon orrhoeae
сомнительный
Ct Cy5/Red <35 не учитывается ДНК G a rd n e re lla
v a g in a lis обнаружена
Ct Cy5/Red отсутствует Ct<35 ДНК G a rd n e re lla
v a g in a lis не
4 6 47
--- стр. 26 ---
11. Информация о стабильности медицинского и:)лелия
Срок годности набора. 12 месяцев.
Срок годности набора после вскрытия. 12 месяцев.
г
12. Условия хранения, транспортирования и эксплуатации
набора
Хранение
Набор «иЯООЕК-Тест-12» в упаковке предприятия-
изготовителя хранить при температуре от минус 18 до минус 22°С в
течение всего срока годности набора, допускается хранение при
температуре от 2 до 8°С до 90 суток.
Допускается заморозка/оттаивание набора «ÍJROGEN-Tecт-
12» не более 10 раз.
После вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до
вскрытия.
Набор реагентов, хранившийся с нарушением
регламентированного режима, применению не подлежит.
Транспортирование
Транспортировать набор реагентов «иКОСЕТ^-Тест-12»
следует транспортом всех видов в крытых транспортных средствах в
соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте
данного вида.
Набор «иКООЕН-Тест-12» транспортировать при температуре
от минус 18 до минус 22 °С в течение всего срока годности набора.
Допускается транспортировка при температуре от 2 до 8°С до 30
суток, или при температуре окружающей среды от 15 до 25 °С не
более 5 суток.
Атмосферное давление не контролируется, т.к. не влияет на
качество изделия.
Для обеспечения соблюдения условий транспортирования на
протяжении всего срока транспортирования набор реагентов
помещается в термоконтейнер пенополиуретановый многоразового
использования для временного хранения и транспортирования с
подготовленными хладоэлементами. Тип, объём и количество
хладоэлементов, закладываемых в термоконтейнер с
транспортируемыми наборами реагентов, а также объём
термоконтейнера подбираются в зависимости от
продолжительности и условий транспортирования.
Наборы реагентов, транспортированные с нарушением
температурного режима, применению не подлежат.
Срок годности
Срок годности набора реагентов «иЯООЕЫ-Тест-12» - 12
месяцев со дня приемки ОТК предприятия-изготовителя при
температуре от минус 18 до минус 22®С, соблюдении всех условий
транспортирования и эксплуатации. Набор реагентов с истёкшим
сроком годности применению не подлежит.
Срок годности вскрытых компонентов набора
12 месяцев со дня приемки ОТК предприятия-изготовителя
при условии хранения при температуре от минус 18 до минус 22®С.
Срок годности приготовленных для работы компонентов
набора
1 час при соблюдении условий, препятствующих высыханию
компонентов, а также контаминации посторонним биологическим
материалом.
13. Утилизация
Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в
связи с истечением срока годности, подлежат утилизации в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21.
В соответствии с классификацией медицинских отходов
наборы относятся к классу А (эпидемиологически безопасные
отходы, приближенные по составу к твёрдым бытовым отходам).
Неиспользованные реактивы в соответствии с СанПиН 2.1 3684 21
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с
медицинскими отходами» собираются в одноразовую
маркированную упаковку любого цвета (кроме жёлтого и красного).
Оставшиеся после выполнения работ пробирки и материалы
утилизируют в соответствии с МУ 287-113 (Методические указания
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации
изделий медицинского назначения).
Жидкие компоненты (реагенты, реактивы) уничтожаются
сливом в канализацию с предварительным разбавлением реагента
50 51
--- стр. 27 ---
водопроводной водой 1:100 и вывозом остатков упаковок как
производственный или бытовой мусор.
Потребительская упаковка набора реагентов «UROGEN-Тсст-
12» подлежит механическому разрушению с вывозом остатков как
производственного или бытового мусора.
Персонал, осуществляющий уничтожение набора реагентов,
должен соблюдать правила безопасности проведения того или иного
способа уничтожения.
14. Гарантийные обязательства, контакты
Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора ^
«UROGEN-TecT-12» требованиям ТУ при соблюдении
установленных требований к транспортированию, хранению и
эксплуатации.
При возникновении претензий по качеству наборов,
нежелательных событий или инцидентов направлять информацию
по адресу:
Общество с Ограниченной Ответственностью «ТестГен»
(ООО «ТестГен»).
432072 г. Ульяновск. Инженерный 44-й проезд, дом 9, офис 13
Тел.:+7 (499) 705-03-75
www.testgen.ru
Служба технической поддержки:
Тел.:+7 927 981 58 81
E-mail: help@,testgen.ru
При ложение А
Инструкция по применению соответствует требованиям
Приказа Минздрава России от 09.01.2014 №2н. Приказа Минздрава
России от 19.01.2017 № 11н, ГОСТ 51088-2013.
I
■f
52
Обозначение Наименование документа
ГОСТ ISO 14971-2011
Изделия медицинские. Применение
менеджмента риска к медицинским
изделиям.
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики
ин витро. Реагенты, наборы реагентов,
тест-системы, контрольные материалы,
питательные среды. Требования к
изделиям и поддерживающей
документации.
ГОСТ РЕН 13612-2010 Оценка функциональных характеристик
медицинских изделий для диагностики in
vitro
ГОСТРИСО 23640-2015
Изделия медицинские для диагностики in
vitro. Оценка стабильности реагентов для
диагностики in vitro
ГОСТ Р 56894-2016 Сводный комплект технической
документации для демонстрации соответ
ствия общим принципам обеспечения
безопасности и основных функциональ
ных характеристик медицинских изделий
для диагностики in vitro
ГОСТРИСО 18113-1-
2015
Медицинские изделия для диагностики in
vitro. Информация, предоставляемая
изготовителем (маркировка). Часть 1.
Термины, определения и общие
требования.
ГОСТРИСО 18113-2-
2015
Медицинские изделия для диагностики in
vitro. Информация, предоставляемая
изготовителем(маркировка). Часть 2.
Реагенты для диагностики in vitro для
профессионального применения
ГОСТРИСО 23640-2015
Изделия .медицинские для диагностики in
vitro. Оценка стабильности реаген-тов
для диагностики in vitro
53
--- стр. 28 ---
|Ц
ГОСТРИСО 15223-1-
2020 '
ГОСТ 180 13485-2017
Изделия медицинские. Символы,
применяемые при маркировании на
медицинских изделиях, этикетках и в
сопроводительной документации. Часть
1. Основные требования ______________
Изделия медицинские. Системы
менеджмента качества. Требования для
целей регулирования
________________
Номенклатурная классификация
медицинских изделий по видам,
утвержденная приказом Министерства
здравоохранения Российской Федерации
от 06.06.2012 N 4н (в редакции приказа
Минздрава России от 25.09.2014 № 557н
«О внесении изменения в приложение №
1 к приказу Министерства
здравоохранения Российской Федерации
от 6 июня 2012 г. № 4н «Об утверждении
номенклатурной классификации
медицинских изделий»).
_______________
Примечание - Указанные выше стандарты были
действующими на момент утверждения инструкции по применению.
В дальнейшем, при пользовании документом, целесообразно
проверить действие ссылочных нор.мативных документов на
текущий момент. Если ссылочный документ заменён или изменён,
то при применении настоящего документа следует пользоваться
заменённым (изменённым) документом.
54