Набор реагентов "МилаЛаб-ИФА-АНТИ-HCV" Тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусу гепатита С, набор диагностический по ТУ 9398-216-05941003-2013 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2014/1775 от 15.07.2014 · класс риска 3

Производитель: ООО "НПО "Диагностические системы" (Россия)

Вид изделия: Вирус гепатита С общие антитела ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 1 145 контрактов, медианная цена за единицу 10 868 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
_
_
I
0.Н. Шлюндин
« жердей, ___2013 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов
«МилаЛаб-ИФА-АНТИ-НСУ»
Тест-система иммуноферментная для выявления
антител к вирусу гепатита С,
набор диагностический
Введенавпервые

--- стр. 2 ---
Содержание
1. Назначение
.................................................................................. ..
П. Состав набора
............................................................................. ..
III. Аналитические и диагностические характеристики ............................ ..
IIV. Меры предосторожности ............................................................................
V. Инструкции по безопасности
....................................................... ..
VI. Необходимые материалы и оборудование, не поставляемые с набором
реагентов .......................................................................................
\/11.Отбор и подготовка образцов
..........................................................
VIII. ПОДГОТОВКЕ! реагентов ................................................................ ..
1Х. Проведение анализа ................................................................... ..
Х. Учст результатов .........................................................................
XI. Ограничения теста.........................................................................
Х11. Срок годности. Условия хранения и транспортирования ................... ..
Х111.Объяснение символов ................................................................ ..
XIV. СПИСОК литературы .................................................................. ..
Приложение 1
................................................................................. ..
Приложение2
................................................................................. ..
Приложен ие 3
..................................................................................
10
10
10
11
11
13
15

--- стр. 3 ---
Набор реагентов выпускается в трех комплектах:
комплект
1
рассчитан на проведение 96 (один разборный планшет) определений, включаяконтрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного (по одномустрипу) использования набора или для одновременной постановки 96 определений наавтоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа, возможна 3-
кратная постановка на автоматических анализаторах (разборность 32 х З).
комплект N9 2 рассчитан на проведение 192 (два разборных планшета) определений, включаяконтрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного использованиянабора или для одновременной постановки 192 (96 x 2) определений на автоматическиханализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа;комплект N9 3 рассчитан на проведение 480 (пять разборных планшетов) определений,
включая контрольные, предназначен для ручной постановки с возможностью дробного
использования набора или для одновременной постановки 480 (96 х 5) определений наавтоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа.
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «МилаПаб-ИФА-АНТИ-НСУ» - тест-система иммуноферментная длявыявления антител класса IgG И IgM к вирусу гепатита С в сыворотке (плазме) крови,иммуноглобулинах и других препаратах, приготовленных из сыворотки (плазмы) кровичеловека. Рекомендуется для первичной лабораторной диагностики гепатита С и обследования
доноров крови.
Н. СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ «МилаЛаб-ИФА-АНТИ-НСУ»
Таблица 1
и
Форма выпуска
_Характеристики реагентов I
Комплект 1 Комплект 2
к
Комплект 3
I
полистироловый и
С п
лунках которого 1 2 5
планшет
разборный, в
С
Иммуносорбент -96-луночный
сорбированы: смесь рекомбинантных антигенов вируса планшет планшета планшетовгепатита С — соте, N__S3, NS4, _NS5.
__
Конъюгат готовый, жидкий — смесь коньюгатов 3 флаконаантител K иммуноглобулинам IgG И IgM человека, 25 О Млконъюгированньтх с пероксидазой хрена. 1 флакон 1 флакон алиПрозрачная или опалесцирующая жидкость Цвета от 14,0 Mn 25,0 ,желтого до оранжевого. флакон
60,0 мл
г
К+ (контрольный положительный образец), —
'
I
сыворотка (плазма) крови человека, содержащая 2 флакона1 флакон 1 флаконантитела к вирусу гепатита С, не содержащая HBsAg и по 3,0 мл3,0 мл 3,0 млантитела к ВИЧ -1,2, инактивированная. илиПрозрачная или слегка опалесцирующая малинового 1 флакон
цвета жидкость. 5,0 Mn
_
Готовый к применению реагент.
_ _ д __
К- (контрольный отрицательный образец), - сыворотка(плазма) крови человека, не содержащая HBsAg, 1 флакон 2 флакона 4 флаконаантитела к вирусу гепатита С и антитела K ВИЧ-1,2; 3,0 Mn по 3,0 мл по 3,0 млинактивированная. или или илиПрозрачная или слегка опалесцирующая зеленого
1 ФЛаКОН 2 флакона 2 ‘1NTaK0Ha
Цвета жидкость 5,0 мл по 5,0 мл по 5,0 мл
_Го_товый к применению реагент.
__ _ __ _ _ _
_
БР (блок-раствор) — розового Цвета жидкость. 1 флакон 1
флакон 2 флаконаДопустимо образован_ие_осадка. 20,0 мл 20,0 мл 20,0 мл

--- стр. 4 ---
ПР (промывочный раствор) — концентрат фосфатно-
солевого буферного раствора c ТВИном (ФСБ-Т).
Прозрачная или слегка опалесцирующая бесцветная
или светло-жёлтого цвета жидкость. Допустимо
образование осадка, полностью растворяющегося при
_
температуре от 35 до 39 и встрякивании.
_
ТМБ-Субстратный раствор, готовый к применению.
Прозрачная бесцветная жидкость. Возможно наличие
окраски
или
СБ - субстратнЬ1й буферный раствор, цитратный буфер,
содержащий раствор перекиси водорода.
Прозрачная бесцветная жидкость.
Хромоген ТМБ раствор, содержащий 3,3’,5,5’-
тетраметилбензидин. Прозрачная бесцветная жидкость.Возможно наличие окраски.
Стоп-реагент - раствор серной кислоты. Прозрачная
бесцветная жидкость.
Крышка к полистироловым 96—луН0чным планшстам
или защитная пленка для ИФА планшетов
‘Пластиковая скрепка или полиэтиленовый пакет C
3aM KOM Zip- Lock
_
иммуносорбентом.
__
ДЛЯ закрывания ПЭКСТЗ С
ПЛЗСТИКОВЗЯ ванночка ДЛЯ ЖИДКИХреагентов
O,}lHOpa30BbI€ наконечники
1 флакон
50,0 мл
или
1 флакон
120‚0мл
1 флакон
14,0 мл
1 флакон
25,0 мл
1 флакон
2,5 Mn
ш
1 флакон
I I
25,0 мл
или
1 флакон
50,0 мл
1
2
2..
16
2 флакона
по 50,0 мл
или
1 флакон
120,0 мл
1 флакон
25,0мл
1 флакон
25,0 мл
1 флакон
2,5 мл
2 флакона
по 25,0 Mn
ИЛИ
1 флакон
50,0 Mn
2
4
'4
_
3,2,
4 флакона
по 50,0 мл
ИЛИ
2 флакона
по 120,0 Mn
3 флакона
по 25,0 Mn
или
1 флакон
60,0 Mn
3 флакона
по 25,0 Mn
или
2 флакона
по 50,0 Mn
3 флакона
по 2,5 Mn
или
2 флакона
по 3,5 Mn
4 флакона
и
g
no 25,0 Mn
или
2 флакона
__
по 50,0 Mn
5
10
3
10'
"80
Набор комплектуется готовыми реагентами или концентрированными растворами. Имеется
цветовая кодировка реагентов. Реагенты помещают в коробку картонную, куда вкладываютинструкцию по применению.
III. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
(см. Приложение2 к данной инструкции).
IV.МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора — класс 3 (Приказ Министерства
здравоохранения РФ N9 4H OT 06 июня 2012 г.).
4.2.Достоверность результатов зависит от правильного выполнения следующих правиллабораторной практики:
о Постановку ИФА следует проводить в помещении с температурой от 18 до 24 °С.
4

--- стр. 5 ---
о Нельзя использовать реагенты из наборов разных серий или смешивать их приприготовлении растворов, кроме:
- неспецифических компонентов (ПР (концентрат <25)‚СБ) которые взаимозаменяемы вовсех тест-системах производства ООО «НПО «Диагностические системы»;
- стоп-реагента, который может быть взаимозаменяемым в зависимости от молярностираствора;
- за более детальной информацией относительно других реагентов обратитесь в нашуслужбу поддержки пользователей по телефону бесплатной линии 8-800-555-0300 (доб. 7647,7655) или по E—mai1: info@npods.nnov.ru.
о Нельзя использовать реагенты после истечения срока годности, указанного на упаковке.о Перед использованием все реагенты выдержать при температуре от 18 до 24 °С в течение30 мин.
о Рабочие растворы готовить осторожно, исключая какое-либо загрязнение.
о Нельзя проводить тест в присутствии реактивных паров (кислота, щелочь, альдегиды) илипыли, которые могут повлиять на ферментативную активность конъюгатов.
о Лабораторная посуда должна быть тщательно промыта; предпочтительно применениематериалов одноразового использования.
о Перед использованием пластиковые ванночки для жидких реагентов ополоснуть водой
дистиллированной. Посуду для работы с субстратной смесью (ванночки, флаконы и т.д.) вслучае повторного использования необходимо сразу после работы промыть водой
дистиллированной, затем 7О% раствором этилового спирта и ополоснуть водой
дистиллированной.
о Иммуносорбент допускается хранить в промежутках между отдельными операциями неболее 10 мин (нельзя допускать высыхания лунок планшета).
о Ферментативная реакция особо чувствительна к ионам металлов. Нельзя допускатьконтакта металлических предметов с растворами конъюгатов или субстратов.
о Необходимо использовать новый наконечник для каждого образца или реагента.
о Промывка лунок - важный этап в данной процедуре: необходимо соблюдать
рекомендованное количество циклов промывки и убедиться, что лунки полностью
заполняются. Не допускать остатка жидкости в лунках после промывки. Неправильно
проведенный этап промывки может привести к неточным результатам.
о Нельзя использовать одну и ту же емкость для приготовления конъюгата и растворов.
о Необходимо использовать только валидированные пипетки и оборудование.
о Нельзя изменять процедуру проведения анализа.
о Необходимо использовать дистиллированную воду.
о Нельзя подвергать реагенты воздействию тепла или света во время инкубации и хранения.
V. ИНСТРУКЦИИ ПО БЕЗОПАСНОСТИ
о Всереагенты набора предназначены для диагностики “invitro”.
о Сыворотки (плазмы) крови человека, используемые при приготовлении отрицательного
контрольного образца были протестированы и определены нереактивными в отношении
поверхностного антигена гепатита В (НВЗАЁ), антигена р24 ВИЧ-1 и антител к гепатиту С иВИЧ-1‚2.
0 Сыворотки (плазмы) крови человека, используемые при приготовлении положительногоконтрольного образца были протестированы и определены нереактивными в отношенииповерхностного антигена гепатита В (HBSAg), антигена р24 ВИЧ-1 и антител к ВИЧ-1,2.
о При работе с реагентами набора (К-‚К+) и исследуемыми образцами нужно обращаться
как с потенциально опасными материалами, т.к. ни один известный метод тестирования неможет гарантировать отсутствие инфекционных агентов.
о В помещении с иммунодиагностическими материалами нельзя употреблять пищу, пить,курить, применять косметику.
о Нельзя пипетировать ртом.

--- стр. 6 ---
о При работе с исследуемыми образцами необходимо обращаться как с потенциальноопасными материалами, т.к. ни один известный метод тестирования не может гарантироватьотсутствие инфекционных агентов.
о При работе с набором реагентов и исследуемыми образцами необходимо использоватьспецодежду и одноразовые перчатки, тщательно промывать руки после работы с ними.0 Необходимо избегать расплескивания образцов или растворов, содержащих образцы. Прирасплескивании немедленно дезинфицировать поверхность 3 % раствором хлорамина Б.
о Необходимо избегать контакта субстратного буфера, хромогена, стоп-реагента с кожей ислизистыми.
о После проведения ферментативной реакции необходимо нейтрализовать и/илиавтоклавировать растворы, отходы или любые жидкости, содержащие биологические образцы
до сброса в канализацию. Твердые отходы (использованные планшеты, наконечники кдозаторам, флаконы, лабораторная посуда, одноразовые перчатки и т.д.) должны бытьобеззаражены автоклавированием в течение часа при температуре от 124 до 128 °С поддавлением 1,5 кГ/см2 (О,15 МПа). Допустимо обеззараживание твердых отходов способом
погружения в 3% раствор хлорамина Б (длительность дезинфекции не менее
1 часа) илидругого разрешенного к промышленному выпуску и применению в РФ дезинфицирующего
средства. Жидкие отходы (промывочные воды) следует обеззараживать добавлением сухогохлорамина Б из расчета 30 г/л (длительность дезинфекции — не менее 2 ч) или кипячением втечение 30 мин, или автоклавированием в течение 1 ч под давлением 1,5 кГ/см2 (О,15 МПа) притемпературе от 124 до 128 °С. Инструменты и оборудование до и после работы необходимо
протирать 2 раза 70 % этиловым спиртом.
о При утилизации и уничтожении все реагенты и материалы, являющиеся отходами,
должны быть обработаны в соответствии с действующими нормативами (СанПиН 2.1.7.2790-10, СП 1.3.2322-08).
VI. НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ, НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ СНАБОРОМ РЕАГЕНТОВ
о Автоматические или полуавтоматические, регулируемые или предварительноустанавливаемые одноканальные или многоканальные пипетки с изменяемым объемом дляотбора жидкостей.
о Одноразовые наконечники для пипеток переменного объема.
о Инкубатор микропланшетный или термостатируемый шейкер (37,0 д: 1,0) °С.
о Устройство для промывания планшетов (вошер).
о Градуированные цилиндры: 25 мл, 100 мл, 1000 мл.
о Дистиллированная или деионизированная вода.
с микропланшетный ридер с возможностью измерения оптической плотности (ОП) прифильтрах 4О5нм, 450 нм И 620-680 нм.
о Для постановки ИФА в автоматическом режиме - любая модель ИФА-анализаторов
открытого типа (например, автоматический анализатор типа «TECAN Freedom
производства фирмы «TECAN», Швейцария).
0 За более детальной информацией обратитесь в нашу службу поддержки пользователей потелефону бесплатной линии 8-800-555-0300 (доб. 7647, 7655) или по E—mail: info@np0ds.nnov.ru.
VII. ОТБОР И ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Сбор образцов крови должен проводиться в соответствии с надлежащей практикой методомвенопункции. В качестве исследуемых образцов могут быть использованы сыворотка (плазма)
крови человека, иммуноглобулины и другие препараты, приготовленные из сыворотки (плазмы)
крови человека. Для исключения ложных результатов нельзя подвергать исследуемые образцы
термоинактивированию, необходимо отбирать и хранить их в условиях, предотвращающихбактериальный рост. Образцы можно хранить в соответствии с требованиями существующихнормативных документов. Сыворотку от эритроцитов или плазму от сгустка следует отделитькак можно быстрее, чтобы избежать гемолиза. 1`емолиз может повлиять на рабочие
характеристики теста. Исследование образцов с выраженным бактериальным ростом,гемолизом и гиперлипидемией не допускается, т. к. может дать неправильный результат.
6

--- стр. 7 ---
Образцы сыворотки (плазмы) крови, содержащие агрегаты или осадок, необходимо осветлятьцентрифугированием.
Лиофильно высушенные препараты крови перед исследованием в тест-системе
разводить в соответствии с инструкцией по применению данного препарата. Жидкие препараты
крови использовать неразведенными, за исключением препаратов крови, содержащих
иммуноглобулины. Препараты крови, содержащие иммуноглобулины, необходимо
предварительно разводить в 50 раз рабочим ПР.
VIII. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ
1. Реагенты готовые к применению:
о Иммуносорбент. Каждый планшет, состоящий из 12 стрипов, упакован в
фольгированный пакет. Вскрыть фольгированный пакет и вынуть планшет. Взять необходимое
количество етрипов. Неиспользованные етрипы без рамки поместить обратно вфольгированный пакет (не удаляя силикагель!) и тщательно герметизировать. Для этого край
пакета следует свернуть 2-3 раза и закрепить, надев сверху скрепку для фольгированного
пакета или поместить фольгированный пакет со стрипами в полиэтиленовый пакет C замкомZip-Lock.
о К- - контрольный отрицательный образец
К+ - контрольный положительный образец
Конъюгат
БР - блок-раствор для рабочего разведения сывороток
Стоп-реагент, 0,2 моль/л
о ТМБ — Субстратный раствор (прикомплектации набора готовым ТМБ-Субстратным
раствором);
2. Реагенты, требующие предварительного приготовления
о Рабочий промывочный раствор (ПР). Содержимое флакона с концентратом (х 25)
промывочного раствора тщательно перемешать. Для приготовления рабочего промывочного
раствора необходимый объем концентрата (х25) промывочного раствора развести
соответствующим объемом воды дистиллированной (см. табл. 4 и 5). Полученный раствор
тщательно перемешать. Рабочий промывочный раствор, подготовленный к использованию,
хранить в чистой плотно закрытой емкости в течение 14 сут. при температуре от 18 до 24 °С
или 28 сут. при температуре от 2 до 8 "С.
о Субстратная смесь (СС). Готовить перед использованием. Необходимый объем ТМБ
развести соответствующим объемом СБ (см. табл. 2 и 3), тщательно перемешать до полного
растворения. Допустимо хранение СС не более 10 ч в защищённом от света месте при
температуре от 18 до 24 °С в чистых флаконах или специальной емкости, предназначенной для
постановки ИФА на автоматических анализаторах для иммуноферментного анализа открытого
типа.
3. Хранение неиспользованных реагентов.
После вскрытия флаконов и пакета е иммуносорбентом, оставшиеся неиспользованными
реагенты хранить в течение срока годности тест-системы.
IX. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Примечание: Перед использованием все реагенты набора выдержать в течение 30 мин
при температуре от 18 до 24 °С.
Необходимые объемы реагентов в зависимости от количества используемых стрипов или
планшета представлены в таблице 2:

--- стр. 8 ---
Таблица 2
Расход реагентов набора в зависимости от количества используемых стрипов
при ручной постановке ИФА
Рабочий промывочный
Количество
I _
раствор (ПР)
__
CC
использ емых Водастриг/св
5) дистиллированная ТМБ(мл) СБ (мл)
_
(МЛ)
_ .1
3,0
I
72,0 0,1 ' и
1,0
'-2
1
60 о
,
1440 1 00,21
и
2,0
3 9,0 216,0 0,3 3,0
4 12,0
`
288‚О I 0,4__' 4,0
` |
5 150
,
I
360,0
,
_
0,5, | 5,0
6_ 18,0
_
432,0
I ___0,6
_
6,0
I
____7
21,0
" I
504,0"
_
_0‚7 " | 7_,__0
` I
__
8 24,0"
E
__576,0 I
__
0,__8'"'
а
__8‚О " I
9 27,0 648,0 0,9
_
9,0
` 10' _30,0_ "
ъ _
720,0 |
__'_‘_
1,0_
_
10,0
11 33,0 792,0
'
1,1
I
11,0
"-12-" 40,0 '
_
960,0” ` 1,2 ` I
12,0
1. Во все лунки планшета внести по 60 мкл блок-раствора (БР). Внесение в лунки планшетов
блок-раствора осуществлять непосредственно перед добавлением контрольных и исследуемых
образцов. В зависимости от количества используемых стрипов рекомендуется внести в лунки
40 мкл контрольных образцов следующим образом:
1 стрип -
1 лунка К+ и 2 лунки К-
2 стрипа - 2 лунки К+ и 2 лунки К-
3 стрипа и более - 2 лунки K1 и З лунки К-
В зависимости от используемой автоматизированной системы возможно Изменять
порядок внесения и расположение контрольных образцов на планшете.
В остальнь1с лунки внести по 40 мкл исследуемых образцов. При использовании
термостата (процедура 2) после внесения образцов содержимое лунок тщательно перемешать
осторожным постукиванием по краям планшета. При внесении образцов цвет содержимого
лунок должен измениться е розового на желтый. Исключение составляют некоторые образцы,
имеющие pH близкий к нейтральному, при внесении которых цвет БР не изменится.
Внимание! Возможны две альтернативные процедуры инкубации планшета (процедура 1
термошейкер, процедура 2 -_ термостат). Очень важно, чтобы каждый этап постановки реакции
осуществлялся по одной и той же процедуре. Сочетание процедур инкубации не допускается.
2. Планшет инкубировать 30 МИН в термощейкере при 500 об/мин и температуре
(37,0 dc 1,0)°С (процедура 1), либо 60 мин в инкубаторе микр011ланщетном при температуре
(37,0 i 1,0)°С (процедура 2).
3. По истечении указанного времени содержимое лунок удалить в ёмкость для сбора
инфицированного материала (аккуратно, е помощью вошера или многоканальной пипетки) и
планшет промыть 4 раза рабочим ПР, заливая его до краев лунок (не менее 400 мкл в лунку),
выдерживая 40 с и удаляя промывочный раствор в ёмкость для сбора инфицированного
материала. Рекомендуется использование автоматического микропланшетного вошера.Недостаточная промывка может неблагоприятно повлиять на точность анализа.
8

--- стр. 9 ---
4. Во все лунки планшета внести по 100 мкл готового конъюгата и инкубировать в течение20 мин в термошейкере при 500 об/мин при температуре (37,0 21: 1,0)°С (процедура 1), либо 20
мин в инкубаторе микропланшетном при температуре (37,0 i 1,0)°С (процедура2) после чегопланшетпромыть4 раза рабочим ПР, как указано в п.3.
5. Во все лунки планшета внести по 100 мкл СС или ТМБ - Субстратного раствора (в
зависимости от комплектации) и выдержать 20 мин при температуре от 18 до 24 °С взащищённом от света месте или 15 мин при температуре (37,0 i 1,0)°C B защищённом от светаместе.
6. Реакцию остановить добавлением в лунки по 150 мкл Стоп-реагента и через 2-3 минутыпровести учет результатов.
Далее ем. раздел 1Х.
Схема проведения ИФА приведена в Приложении 2.
7. Проведение анализа в автоматическом режиме на анализаторе открытого типа«TECAN Freedom EVOlyzer» производства фирмы «TECAN», Швейцария (возможна
постановкана других ИФА-анализаторах открытого типа).
ТаблицаЗ
Расход реагентов набора в зависимости от количества используемых стрипов или нацелый планшет при постановке ИФА на автоматических анализаторах дляиммуноферментного а_нализаоткрытого типа
Количество Рабочий промывочный раствор =
Су_бстратная___смесь
используемых ПР Вода ТМБ Cb
стрипов (конц. х 25) (мл) дистиллированная (мл) (мл)
(мл)
_
4
(только для комплекта 16,0 384,0 0,65 6,5Не 1)
8
(только для комплекта 32,0 768,0 1,2 12,0
N9 1)
12
„ 40,0 960,0 1,2 12,0(целыи планшет)
__ _ __ __ __ __
7.1. Задать программу проведения ИФА и включить анализатор.7.2. Приготовленный рабочий промывочный раствор залить в предназначенную для негоемкость, остальные рабочие растворы и реагенты поместить в специальные контейнеры илиемкости, контрольные образцы К+ и К- - во флаконах, исследуемые образцы - во флаконах илипробирках в объеме не менее 300 мкл установить в соответствующие штативы анализатора. В
анализатор поместить необходимое количество планшетов. Далее постановку проводить всоответствии с инструкцией по применению ИФА-анализатора и программой проведения ИФА.7.3. 110окончании анализа прибор выдает протокол по результатам исследования, в которомдается характеристика каждого исследуемого образца и контрольных образцов К+ и К-.
7.4. Далее учет результатов проводить аналогично п. 1Х.
8. Спектрофотометрический контроль внесения сывороток и реагентов при постановкетест-системы «МилаЛаб-ИФА-АНТИ-НСУ»на автоматических ИФА-анализаторах:8.1.Контроль внесения образцов сывороток рекомендуется проводить при двух длинах волн450 и 620 нм, критерий: ОП 0,180.
8.2. Контроль внесения конъюгата рекомендуется проводить при двух длинах волн 450 и 620нм, критерий: ОП 0,350
8.3. Контроль внесения СС рекомендуется проводить при длине волны 540 нм,критерий: 011 0,040.

--- стр. 10 ---
Х. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Учет результатов провести спектрофотометрически при двух длинах волн — 450 нм И приреференс-длине волны в диапазоне от 620 до 680 нм с настройкой прибора по «воздуху».Допустим учёт результатов при одной длине волны - 450 нм.
Наличие определяемых антител к вирусу гепатита С оценивается сравнением оптической
плотности (ОП), измеряемой для каждого образца, с расчетной величиной ОП критической.
Результаты анализа учитывать, если среднее значение ОП с К- (ОП К-ср) He более 0,2*‚
значение ОП в лунках с К+ _ не менее 1,5.
ОП крит. рассчитывать по формуле:
ОП крит. = ОП К- ср + А,
где А ш коэффициент, определяемый методом статистической обработки результатов
постановки ИФА на предприятии-изготовителе.
* Значения ОП К- и исследуемых образцов сывороток ниже 0,00 (со знаком «—») при расчетах ОПкрит. и
анализе результатов считать равными нулю.
Исследуемые образцы расценивать как положительные, если ОП 2 ОПкрит.
Исследуемые образцы расценивать как отрицательные, если ОП < ОПкрит.
Положительно реагирующие образцы необходимо исследовать повторно в данном тесте
пс менее чем в двух лунках. Если хотя бы один из повторных анализов даёт положительный
результат - образец считать положительным. При отрицательных результатах повторного
исследования образец считать отрицательным. Все положительные образцы должны быть
исследованы в подтверждающих ИФА-тестах (предпочтительно “ДС-ИФА-АНТИ-НСУ-
СПЕКТР-ОМ"), в иммуноблотинге или в ПЦР.
Х1. ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТА
оНеобходимо внимательно прочитать инструкцию по применению до проведения теста ичётко ее соблюдать, обратив особое внимание на этапы внесения образцов и реагентов,
отмывки планшета и на время стадий инкубации.
о Для анализа следует использовать только неразведенные образцы сыворотки или плазмы.
о Заключение о положительной реактивности образцов к вирусу гепатита С не должно быть
основано на единственном положительном результате тестирования. Все положительныеобразцы должны быть проверены в подтверждающих тестах — ИФА, иммуноблотинге или ПЦР.
оОтрицательные результаты могут быть получены, если количество антител к вирусу
гепатита С в образце ниже уровня чувствительности теста или если они отсутствуют на той
стадии болезни, в которой образец был отобран. Отрицательный результат при скрининге не
исключает возможность процесса и инфицирования вирусом гепатита С.
оРазличия в результатах тестирования различными тестами образцов от пациентов,
зараженных вирусом гепатита С, могут быть вызваны отличиями в иммунологических реакциях
в зависимости от вида используемых антигенов.
оИзменчивость вируса гепатита С пс позволяет исключить возможность
ложноотрицательных результатов. Ни один из известных методов тестирования не может дать
полную гарантию, что вирус гепатита С отсутствует.
ХП. СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ
Срок годности указан на упаковке набора. Набор с истекшим сроком годности
использованию не подлежит.
Хранение - в сухом, защищенном от света месте при температуре от 2 до 8 °С.
Транспортирование - при температуре от 2 до 8 °С. Допустимотранспортированиеот 9 до 20 °С
и нс более IO суток. Замораживание не допускается.
Рекламации на специфические и физические свойства набора направлять в адрес
предприятия-изготовителя — ООО «11аучно-производственпос объединение «Диагностические
системы» 603093 Россия, г. Нижний Новгород, ул. Яблоневая, д. 22, тел./факс: (831) 434-86-83
или тел.: (831) 434-97-12. E-mail: info@np_o__c__ls.nn0v.ru_, www.npods.r_u__.
Для проведения расследования и получения объективных выводов по заявленной
рекламации необходимо предоставление:
10

--- стр. 11 ---
1. рекламационного набора,
2. всех образцов кроводач пациента,3. протоколов исследований с использованием других методов с указанием серии, сроковгодности.
4. протоколов исследований с использованием референтных тестов с указанием серии,сроков годности.
хпъовъяснвнив символов
Ь
Только для лабораторного использования (in vitro diagnostic)
A-AA} Производитель
l ._
I п“: п Каталожныйномер
Количествоопределений
Номер партии (серии)
Температурные пределы хранения
Срок годности дата/месяц/гол
Использовать инструкцию по применению
СОДСРЖИТ 1<a10Luee вещество
XIV. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
См. Приложение 1 к данной инструкции.
Директор по производству
ООО «Научно-производственное объединение
«Диагностические системы»
/7
В.К.Пименов
М.Ф. Баллюзек
% Ф.А. Тугушева
Зам. Главного врача по медицинской части, д.м.н.‚проф.
Зав. клинико-диагностической лабораторией
СПб больницы РАН,д.м.н. ‚и
11

--- стр. 12 ---
Приложение 1
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЬП
1. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. Санкт-Петербург, 1998.-С.201-245
2. Кузина Л.У.‚Ястребова O.II. H др. Сравнительная оценка результатов определения антителк вирусу гепатита С при использовании различных иммуноферментных тест-систем иподтверждающих тестов// Вопросы вирусологии.-2ОО4. N96-C.4l—44.
3. IIar.N92262704. Российская Федерация. Набор антигенов для определения антител квирусу гепатита С «ДС-НСУ-антигеньт/ Бурков А.Н. и др. — Заявлено 06.10.2004. -N2 2004129264. w Зарегист. 20.10.2005.
4. Colin C., Lanoir D., Tauzet S. et.al. Sensibility and apeci?city of third-generation hepatitis Cvirus antibody detection assays: an analysis of literature// J.Vira1Hepatitis. — 200l.—V.8-p.87-95.
5. Ulanova Т.1.‚Puzyrev V.F., Kulikova L.V., Bochkova G.B., Golubeva I.F., Obriadina A.P.,Burkov A.N. А new anti-HCV EIA based on recombinant antigens derived from different sequenccsvariants of hepatitis C virus//15-th Europcan Congress of Clinical Microbiology and InfectiousDiseases/ — Copcngagen, Denmark, 2005.—P.203.
6. Bochkova G.B., Puzyrev V.F., Obriadina A.P., Burkov A.N., Ulanova T.I. The evaluation of the
ELISA kit “EIA-anti-HCV”with new recombinant antigens.// 20-th European Congress of ClinicalMicrobiology and Infectious Diseases/ — Vienna, 2010.-P.l l8.
7. Bochkova G.B., Fomina S., Puzyrev V.F., Obriadina A.P., Burkov A.N., Ulanova. T.I. Thc
evaluation of the ELISA kit “DS-EIA-anti—l-lCV— SPECTR-GM" as supplemental assay forconfirmation of anti-HCV screening positive results //2l—th European Congress of ClinicalMicrobiology and Infection Diseases. — Milan, May 7-1 О, 201 1. — Р.2235.
8. Evaluation of MONOLISA HCV Ag—Ab ULTRA. MiDAS, London 2006:l-I9.
12

--- стр. 13 ---
Приложение 2
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Диагностическая чувствительностьДиагностическая чувствительность набора реагентов «МилаЛаб-ИФА-АНТИ-НСУ»
оценивалась при тестировании:
1. 439 образцов сывороток крови от пациентов, инфицированных вирусом гепатита С. Всеобразцы, содержащие антитела к вирусу гепатита С, определялись как позитивные.Чувствительность (95% CI): 439/439—100% (99,13% - 100%).
2. 14 коммерческих сероконверсионнь1х панелей (ВВ1, 1пс.; Zeptometrix, США). Полученные
данные представлены в таблице 1 (указано количество образцов в панели, определяемых какположительные, из общего количества образцов сероконверсионной панели).3. Стандартной панели сывороток, содержащих и He содержащих антитела к вирусу гепатитаС, «ДС-Стандартной панели-НСУ» (ООО «НПО «Диагностические системы», Россия) и ее
аналога. Чувствительность набора на панелях составила 1ОО%.
Все положительные образцы были подтверждены с помощью тест-системы «ДС-ИФА-AHT1/1—HCV—Cl'1EKTP-GM».
Таблица 1
Диагностическая чувствительность тест-систем при исследовании
сероконверсионных панелей
N9 I и Количество положительных результатов по сравнению с
ш
п/п Панель
_ __
количеством протестированных образцов
__I
«МилаЛаб-ИФА-
I
«Monolisa _/'\nti— <<ABb0tt AXSYM
п
_
AIITI/I-HCV»
A
HCV 1us»‘
_
HCV 2
1 вв1 PHV 906
5/7
" ` 5/7
С
не тестировалась
__
=
ВВ1 PHV_§11
__
ш
_
3/4*
1 ‘не тестировалась I
3
_
ZMC HCV 9046 4/5
‘
4/5
_ у
не тестировалась
I
E
4 i zMc HCV 9047' ' 4/"10 ` 3/10 "
Ё
не тестировалась 7
э 5 ZMC HCV 10057 I‘ 2/7
ш
2/7
и I
He тестировалась’
'6 z1v1cнею 10058
`
7/7
" `
7/7 Ё не тестировалась7 ZMC Hcv'10062 f ' "2/8
`
2/8
__
`
не тестировалась "С
8 ZMC HCV 10071
_
6/7"
_
"
4/7
` '
не тестировалась
9
I
ZM_C'I1CV 10185 4/5 _ и
4/5
п
_
не тестировалась
' " 37/60 ' i 33/60
__
—
"
I
10
I
ZMC HCV 6222
п
"1/8
п
и
не тестировалась 1/8 ч
I
1 1 ZMC HCV 6227
I
-2/7 "не тестировалась
__
2/7
ш
__12 ZMC IICV 9041 "
Ё
4/8
` `
не тестировалась j 4/8
`
13
2мс HCV.9044
; 2/6
"
_
He тестировалась '
_
2/6
5—14-
I
ZMC HCV 9058 п
ш
1/5 I
НС тестировалась ‘H0/5 ц
Итого 10/34 - 9/34
"‘образец N21 B панели отсутствует.1
Результаты НПО «Диагностические системы»2 Результаты LS Medizin Service, April 2007
13

--- стр. 14 ---
Специфичность
Специфичность набора реагентов «МилаЛаб-ИФА-АНТИ-НСУ» определялась приисследовании сывороток доноров крови (п=5О31). Специфичность (95% С1):5О14/5О31=99‚66%(99,46% — 99,79%).
Дополнительно были протестированы 579 образцов сывороток крови:I 372 образца сывороток крови от беременных женщин и больных с инфекционнымизаболеваниями;
I 207 образцов сывороток крови от клинических пациентов с различныминеинфекционными заболеваниями.
Специфичность на этой выборке (95% С1): 576/579=99,48% (98‚49%- 99,82%).Специфичность набора реагентов, определённая по Стандартной панели сывороток,содержащих и не содержащих антитела к вирусу гепатита С, «ДС-Стандартная панель-анти-HCV» (Россия), И ее аналогу, составила 1О0%.
Результаты представлены в таблице 2.
__ _ _
Таблица 2
Количество
„ДоверительныиИсследуемые Количество повторно Специфичность интервалкатегории образцов реактивных (95% CI)’
_ „ , .‚ .
образцов
а - . __ , .
Здоровые доноры 5031 17 99,66% 99,46% — 99,79%
Беременные женщины и
I I I
Сбольные с инфекционными 372 1 99,73% 98‚49% - 99‚95%заболеваниями
Клинические
пациенты с
различными 207 2 99,03 % 96‚58%- 99,74%неинфекционными
заболеваниями
_
д‘
_
__
_ _ _
I __ l
_
__
Итого 5610 20 99,64% 99,45% - 99,77%
Точность
Внутриплашечпая воспроизводимость была оценена при тестировании 3 положительныхобразцов в 25 повторах в рамках одной серии. Коэффициент вариации составил не более 8 %Внутрисерийная воспроизводимость анализа была оценена при тестировании 3
положительных образцов в 25 повторах на наборах реагентов одной и той же серии.Коэффициент вариации составил не более 10 %.
Межсерийная воспроизводимость анализа была оценена при тестировании 3 положительныхобразцов в 25 повторах па наборах реагентов З-х серий. Коэффициент вариации составил неболее 12 %.
14