Набор реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови (метод Райтмана-Френкеля) (АСТ-РФ-ОЛЬВЕКС) по ТУ 9398-033-44276594-2006 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- BERHA Руководитель по надзору социально УТВЕРЖДАЮ ,Л ^ ;A Г iiO г■ I^ ;;ч У м y ; ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови унифицированным методом (метод Райтмана-Френкеля) (АСТ-РФ-ОЛЬВЕКС) Рекомендована к утверждению Научно-экспертным Советом по медицинским изделиям Назначение Набор АСТ-РФ-ОЛЬВЕКС предназначен для количественного определения активно сти аспартатаминотрансферазы (ACT) в сыворотке крови человека унифицированным мето дом с фиксированным временем инкубации в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 1000 определений при конечном объеме реакционной смеси 3,05 мл. Инструкция составлена директором по науке ООО «Ольвекс Диагностикум», к.б.н. ЗА.Тупиковой и заведующим кафедрой клинической лабораторной диагностики СПбМА- ПО, д.м.н,, профессором А.В.Козловым. --- стр. 2 --- ACT катализирует реакцию переаминирования между L-аспартатом и а-кетоглу- таратом с образованием оксалоацетата. Об активности фермента судах по приросту оксало- ацетата, образующего с 2,4-динитрофенилгидразином окрашенные пидразоны. Активность ACT пропорциональна количеству образовавшихся гидразонов, которое определяется фотометрически при длине волны 537 (500-560) нм. Состав набора В состав набора реагентов входят следующие компоненты: - реагент 1 (буфер-субстратная смесь), содержащая аспартат натрия, 100 ммоль/л; а-кетоглутаровую кислоту, 2,0 ммоль/л; натрий фосфорнокислый однозамещенный, 19 ммоль/л; натрий фосфорнокислый двузамещенный, 81 ммоль/л; азид натрия, 0,5 г/л; на трия гидроокись 2,0 ммоль/л, pH 7,4, готов к применению -1 флакон (250 мл); - реагент 2 (раствор 2,4-ДНФГ), содержащий 2,4-динитрофенилгидразин, 1,0 ммоль/л; соляную кислоту, 1,0 моль/л, готов к применению - 1 флакон (250 мл); - реагент 3 (натрия гидроокись) концентрат, содержащий гидроокись натрия, 4,0 моль/л -1 флакон (250 мл); - калибратор, содержащий пируват натрия, 1,0 ммоль/л; азид натрия, 0,5 г/л; готов к применению - 1 флакон (5,0 мл). Аналитические характеристики Линейная область определения активности ACT - в диапазоне от 0,03 до 1,67 мкмоль/(схл), отклонение от линейности - не более 10%. Чувствительность определения - не более 0,01 мкмоль/(сх л). Коэффициент вариации результатов определений - не более 10%. Окраска стабильна не более 2 часов. Качество набора может проверяться при помощи отечественных или зарубежш* 1х кон трольных сывороток, аттестованных данным методом. Нормальные величины активности ACT в сыворотке крови составляют от 0,03 до 0,19 мкмоль/(схл) или 0,1-0,68 ммоль/(чхл). Принцип метода --- стр. 3 --- Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных вели чин для обследуемого контингента. Анализируемые образцы Сыворотка крови без следов гемолиза. Меры предосторожиости Потенциальный риск применения набора - класс 2а. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. В состав компонентов набора входят азид натрия, соляная кислота и натрия гидро окись. Следует избегать их попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При попадании внутрь следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту. При работе с набором необходимо соблюдать "Правила устройства, техники безопас ности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.). При работе с набором следует использовать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека являются потенциально инфицированным мате риалом, способным длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель инфекции. Оборудование, материалы и реагенты: - Спектрофотометр, длина волны 537 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 500-560 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм; - термостат, поддерживающий температуру +37±1°С; - колбы вместимостью 100 мл; - секундомер; - пипетки, позволяюпще отбирать объемы жидаости 0,004-0,6 мл; 2,5 мл и 5,0 мл; - пробирки стеклянные химические вместимостью 5,0-10 мл; --- стр. 4 --- - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые. Подготовка к анализу Реагенты 1,2 и калибратор готовы к применению. Перед определением содержимое флакона 3 (или аликвоту) разводят дистиллированной водой, свободной от карбонатов, в соотношении 1:9. Полученный рабочий раствор реагента 3 можно хранить при комнатной температуре (+18-25°С) в плотно закрытом полиэтиленовом флаконе не более 3 месяцев. Построение калибровочного графика Подготовить пробы в соответствии с таблицей 1. Таблица 1 № пробы Калибратор, мл Вода дис тиллиро ванная, мл Реагент 2, мл Ферментативная активность мкмоль/(схл) ммоль/(чхл) 1 0,004 0,596 0,500 0,022 0,08 2 0,020 0,580 0,500 0,112 0,40 3 0,050 0,550 0,500 0,278 1,00 4 0,100 0,500 0,500 0,556 2,00 - 5 0,200 0,400 0,500 1,112 4,00 6 0,300 0,300 0,500 1,668 6,00 контроль - 0,600 0,500 - - Пробы тщательно перемешать и выдержать в течение 20 минут при комнатной темпе ратуре (+18-25‘ ‘С), после этого добавить во все пробирки по 5,0 мл рабочего раствора реа гента 3 и снова перемешать, оставить на 10 минут для развития окраски и измерить оптиче- --- стр. 9 --- Приказом Росздравнадзора от 2011 г. № УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор Диагностикум" ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови (метод Райтмана-Френкеля) (АСТ-РФ-ОЛЬВЕКС) (Взамен инструкции, утвержденной 07.08.2006 г.) Назначение Набор «АСТ-РФ-ОЛЬВЕКС» предназначен для количественного определения актив ности аспартатаминотрансферазы (ACT) в сыворотке крови человека с фиксированным вре менем инкубации в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно- исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 200, 400 и 1 О О О определений при конечном объеме реакционной смеси 3,05 мл. Принцип метода ACT катализирует реакцию переаминирования между L-аспартатом и а-кетоглу- таратом с образованием оксалоацетата. Об активности фермента судят по приросту оксало- ацетата, образующего с 2,4-динитрофенилгидразином окрашенные гидразоны. Активность ACT пропорциональна количеству образовавшихся гидразонов, которое определяется фотометрически при длине волны 537 (500-560) нм. --- стр. 10 --- Состав набора В состав набора реагентов входят следующие компоненты: - реагент 1 (буфер-субстратная смесь), содержащая аспартат натрия, 100 ммоль/л; а-кетоглутаровую кислоту, 2,0 ммоль/л; натрий фосфорнокислый однозамещенный, 19 ммоль/л; натрий фосфорнокислый двузамещенный, 81 ммоль/л; азид натрия, 0,5 г/л; на трия гидроокись 2,0 ммоль/л, pH 7,4, готов к применению - 1 флакон (50 мл), или 1 флакон (100 мл), или 1 флакон (250 мл), или 2 флакона (по 50 мл); - реагент 2 (раствор 2,4-ДНФГ), содержащий 2,4-динитрофенилгидразин, 1,0 ммоль/л; соляную кислоту, 1,0 моль/л, готов к применению -1 флакон (50 мл), или 1 флакон (100 мл), или 1 флакон (250 мл); - реагент 3 (натрия гидроокись) концентрат, содержащий гидроокись натрия, 4,0 моль/л - 1 флакон (50 мл), или 1 флакон (100 мл), или I флакон (250 мл); - калибратор, содержащий пируват натрия, 1,0 ммоль/л; азид натрия, 0,5 г/л; готов к применению - 1 флакон (2,0 мл) или 1 флакон (5,0 мл). Аналитические характеристики Линейная область определения активности ACT - в диапазоне от 0,03 до 1,67 мкмоль/(сх л), отклонение от линейности - не более 10%. Чувствительность определения - не более 0,01 мкмоль/(с х л). Коэффициент вариации результатов определений - не более 10%. Окраска стабильна не более 2 часов. Качество набора может проверяться при помощи отечественных или зарубежных кон трольных сывороток, аттестованных данным методом. Нормальные величины активности ACT в сыворотке крови составляют от 0,03 до 0,19 мкмоль/(с X л) или 0,1 -0,68 ммоль/(ч х л). Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных вели чин для обследуемого контингента. Анализируемые образцы Сьшоротка крови без следов гемолиза. --- стр. 11 --- Меры предосторожности Потенциальный риск применения набора - класс 1. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. В состав компонентов набора входят азид натрия, соляная кислота и натрия гидро окись. Следует избегать их попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При попадании внутрь следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту. При работе с набором необходимо соблюдать "Правила устройства, техники безопас ности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР" (Москва, 1981 г.). При работе с набором следует использовать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека являются потенциально инфицированным мате риалом, способным длительное время сохранять или передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель инфекции. Оборудование, материалы и реагенты: - Спектрофотометр, длина волны 537 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны 500-560 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм; - термостат, поддерживающий температуру +37±1°С; “ колбы вместимостью 100 мл; - секундомер; - пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,004-0,6 мл; 2,5 мл и 5,0 мл; - пробирки стеклянные химические вместимостью 5,0-10 мл; - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые. Подготовка к анализу Реагенты 1, 2 и калибратор готовы к применению. Перед определением содержимое флакона 3 (или аликвоту) разводят дистиллированной водой, свободной от карбонатов, в соотношении 1:9. 3 --- стр. 12 --- Полученный рабочий раствор реагента 3 можно хранить при комнатной температуре (+18-25®С) в плотно закрытом полиэтиленовом флаконе не более 3 месяцев. Построение калибровочного графика Подготовить пробы в соответствии с таблицей 1. Таблица 1 № пробы Калибратор, мл Вода дис тиллиро ванная, мл Реагент 2, мл Ферментативная активность мкмоль/(схл) ммоль/(чхл) 0,004 0,596 0,500 0,022 0,08 0,020 0,580 0,500 0,112 0,40 0,050 0,550 0,500 0,278 1,00 0,100 0,500 0,500 0,556 2,00 0,200 0,400 0,500 1,112 4,00 0,300 0,300 0,500 1,668 6,00 контроль 0,600 0,500 Пробы тщательно перемешать и выдержать в течение 20 минут при комнатной темпе ратуре (+18-25°С), после этого добавить во все пробирки по 5,0 мл рабочего раствора реа гента 3 и снова перемешать, оставить на 10 минут для развития окраски и измерить оптиче скую плотность проб против контрольной пробы через 10 минут при длине волны 537 (500- 560) нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм. Построить калибровочный график, откладывая на оси ординат значения оптической плотности для каждой пробы, а на оси абсцисс - соответствующие им значения активности ACT.