Набор реагентов с принадлежностями для качественного иммуноферментного определения суммарных антител к Treponema pallidum в сыворотке, плазме крови и ликворе человека "СифилисИФА-суммарные антитела" по ТУ 21.20.23-280-98539446-2017 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2018/7224 от 30.05.2018 · класс риска 2б

Производитель: ООО "Компания Алкор Био" (Россия)

Вид изделия: Treponema pallidum общие антитела ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 317 контрактов, медианная цена за единицу 15 614 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ» 
аяьный директор 
Шания Алкор Био» 
Полынцев Д.Г. 
Ш> 0.  2019 г.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ 
Медицинского изделия для диагностики in vitro  
Набора реагентов с принадлежностями для качественного 
иммуноферментного определения суммарных антител к Treponem a pallidum  в 
сыворотке, плазме крови и ликворе человека 
«СифилисИФА-суммарные антитела»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «СифилисИФА-суммарные антитела» предназначен для 
качественного иммуноферментного определения суммарных антител к Treponema pallidum  
{Т. pallidum) в сыворотке, плазме (с цитратом натрия, гепарином или ЭДТА) крови и ликворе 
человека.
1.2. Сифилис -  хроническое системное инфекционное заболевание с разнообразными 
клиническими проявлениями (поражения кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, 
нервной системы) и последовательной сменой стадий болезни.
Возбудителем сифилиса является бактерия вида Treponema pallidum  (бледная трепонема), 
относящаяся к семейству Spirochaetaceae -  грамотрицательный анаэроб, облигатный 
внутриклеточный паразит, обладающий высоким сродством к тканям лимфатических узлов.
Заражение происходит преимущественно при половых контактах, но возможно также 
трансплацентарное заражение (врожденный сифилис), риск которого повышен при заражении 
матери во время беременности или за год до ее наступления. Гораздо реже встречаются 
трансфузионный (при переливании крови), бытовой (при бытовых контактах) и профессиональный 
(заражение медицинского персонала при выполнении профессиональных обязанностей) пути 
передачи.
Основная роль в диагностике сифилиса принадлежит серологическим методам, в основе 
которых лежит выявление в крови антител к Т. pallidum, первые из которых появляются через 2-4 
недели после заражения. Самым доступным и щироко используемым в качестве скринингового и 
подтверждающего тестов является метод ИФА, обладающий высокими показателями 
чувствительности и специфичности.
1.3. Функциональное назначение набора «СифилисИФА-суммарные антитела» -  скрининг 
суммарных антител к Т. pallidum в сыворотке, плазме крови и ликворе человека.
1.4. Набор «СифилисИФА-суммарные антитела» предназначен для однократного
применения.
1.5. Набор «СифилисИФА-суммарные антитела» предназначен для лабораторной
диагностики in vitro, для профессионального применения персоналом, имеющим квалификацию для 
выполнения диагностических исследований in vitro после специального образования и обучения.


--- стр. 2 ---
Исследования могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, 
биологическим или иным образованием (врач КДЛ, биолог, медицинский технолог и т.д.).
1.6. Набор «СифилисИФА-суммарные антитела» предназначен для обследования всех 
групп населения без градации по демографическому или популяционному признаку.
1.7. Противопоказания к применению набора «СифилисИФА-суммарные антитела» 
отсутствуют.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
В наборе «СифилисИФА-суммарные антитела» использован «сэндвич»-вариант твердофазного 
иммуноферментного анализа. Для реализации этого варианта использованы рекомбинантные антигены 
TpN15, TpN17, TpN47, которые иммобилизованы на твердой фазе (внутренняя поверхность лунок), 
а также конъюгированы с пероксидазой хрена. В лунках, при добавлении исследуемого образца и 
конъюгата рекомбинантнък антигенов TpN15, TpN17 и TpN47 с пероксидазой хрена, во время 
инкубации одновременно происходит иммобилизация иммуноглобулинов классов А, G и М к Г. 
pallidum,  содержащихся в исследуемом образце, на твердую фазу и связъшание образовавшегося 
комплекса с конъюгатом. Несвязавшиеся компоненты удаляются промывкой (Рисунок 1).
Планшет с 
рекомбинантны 
ми антигенами 
TpN15,TpN17, 
TpN47 
к Т . pallidum
Конъюгат TpN 15- 
TpN17-TpN47- 
пероксидаза
Антитела к Т. 
pallidum
Рисунок 1. Схема анализа
Во время инкубации с раствором ТМБ происходит окрашивание раствора в лунках. Степенъ 
окраски прямо пропорционалъна количеству антител к Т. pallidum в анализируемых пробах. После 
измерения оптической плотности раствора в лунках наличие антител к Т. pallidum в каждом образце 
оценивают относителъно ОПкрит.


--- стр. 3 ---
2.2. Состав и комплектация набора
Набор «СифилисИФА-суммарные антитела» выпускается в четырех комплектациях':
Комплектация №1: на 96 определений при проведении анализа вручную или на
автоматическом анализаторе «Alisei Q.S.» SEAC, Италия (далее «Alisei») в дубликатах 45 
неизвестных проб или в монопликатах 90 неизвестных проб при использовании всего комплекта 
стрипов одновременно.
Комплектация №2: на 192 определения при проведении анализа вручную или на
автоматическом анализаторе «Alisei» в дубликатах 90 неизвестных проб или в монопликатах 180 
неизвестных проб при использовании всего комплекта стрипов одновременно.
Комплектация №3: на 480 определений при проведении анализа вручную или на
автоматическом анализаторе «Alisei» в дубликатах 225 неизвестных проб или в монопликатах 450 
неизвестных проб при использовании всего комплекта стрипов одновременно.
Комплектация №4; на 960 определений при проведении анализа вручную или на
автоматическом анализаторе «Alisei» в дубликатах 450 неизвестных проб или в монопликатах 900 
неизвестных проб при использовании всего комплекта стрипов одновременно.
Обратите внимание, что при каждой постановке анализа на каждом планшете обязательно 
нужно определять оптические плотности (ОП) отрицательной контрольной пробы, положительной 
контрольной пробы и раствора ТМБ в соответствии со схемой маркировки лунок (п.7.2.1.1.)-
Примечание: в случае дробного пргшенент набор может быть использован только в течение  
двух месяцев после вскрытия компонентов набора.
Основной состав:
комплект из двенадцати 8-луночных стрипов в рамке с иммобилизованными на 
внутренней поверхности лунок рекомбинантными антигенами TpN15, TpN17, TpN47, маркирован 
«Стрипы с рекомбинантными антигенами Т. pallidum» -  1, 2, 5 или 10 упаковок в зависимости от 
варианта комплектации (Таблица 1);
отрицательная контрольная проба (ОКП) на основе водно-солевого раствора, не 
содержащая антител к Т. pallidum. Флакон маркирован «Отрицательная контрольная проба» -1,2 
или 4 флакона (по 0,8 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
положительная контрольная проба (ПКП) на основе водно-солевого раствора, 
содержащая антитела к Т. pallidum. Флакон маркирован «Положительная контрольная проба» -1,2 
или 4 флакона (по 0,8 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
конъюгат рекомбинантных антигенов TpN15, TpN17 иТрМ47 с пероксидазой хрена, 
маркирован «Конъюгат Е» -  1, 2, 4 или 8 флаконов (по 16 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
концентрированный водно-солевой раствор для промывки лунок, маркирован «Буфер 
Н (20Х)» -  1, 2 флакона (по 50 мл) или 3, 5 флаконов (по 100 мл) в зависимости от варианта 
комплектации (Таблица 1);
раствор тетраметилбензидина, содержащий тетраметилбензидин, перекись водорода и 
стабилизаторы, маркирован «Раствор ТМБ» -1,2  флакона (по 14 мл) или 1, 2 флакона (по 100 мл) в
^Допускается постановка анализа на других автоматических анализаторах для ИФА открытого типа, за 
информацией о необходимой комплектации набора и программе проведения анализа обращайтесь к 
производителю набора «СифилисИФА-суммарные антитела» в ООО «Компания Алкор Био», тел/факс: 
8(812)677-8779.


--- стр. 4 ---
зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
стоц-реагент, 3,59% раствор соляной кислоты, маркирован «Стоп-реагент» -1,2  флакона 
(по 50 мл) или 3, 5 флаконов (по 100 мл) в зависимости от варианта комплектации (Таблица 1);
одноразовая ванночка - 2 шт для комплектаций №1, №2 или 4 шт для комплектаций
№3, №4;
одноразовый наконечник - 16 шт для комплектаций №1, №2 или 32 шт для 
комплектаций №3, №4.
Принадлежности:
пакет закрывающийся полиэтиленовый (при упаковке стрипов в пакет из 2-слойного 
полиэтилена) -1,2,5  или 10 шт.
Таблица 1
Кат. номер 200-50 200-51 200-52 200-53
Название
компонента
Цветовая
кодировка
компонента
Комплектация
№1
Комплектация
№2
Комплектация
№3
Комплектация
№4
Стрипы с 
рекомбинантными 
антигенами Т. 
pallidum
- 1  шт 2 шт 5 шт 10 шт
Отрицательная 
контрольная проба 
(ОКП)
Жидкость 
желтого цвета 1  фл - 0,8 мл 1  фл - 0,8 мл 2 фл по 0,8 мл 4 фл по 0,8 мл
Положительная 
контрольная проба 
(ПКП)
Жидкость
красного
цвета
1  фл - 0,8 мл 1  фл - 0,8 мл 2 фл по 0,8 мл 4 фл по 0,8 мл
Конъюгат Е
Жидкость
темно­
зеленого
цвета
1  фл - 16 мл 2 фл по 16 мл 4 фл по 16 мл 8 фл по 16 мл
Буфер Н (20Х)
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1  фл - 50 мл 2 фл по 50 мл 3 фл по 100 мл 5 фл по 100 мл
Раствор ТМБ
Прозрачная 
бесцветная 
или светло- 
голубого 
цвета, или 
светло-бурого 
цвета 
жидкость
1  фл - 14 мл 2 фл по 14 мл 1  фл - 100 мл 2 фл по 100 мл
Стоп-реагент
Прозрачная
бесцветная
жидкость
1  фл - 50 мл 2 фл по 50 мл 3 фл по 100 мл 5 фл по 100 мл
Одноразовая
ванночка - 2 шт 2 шт 4 шт 4 шт
Одноразовый
наконечник - 16 шт 16 шт 32 шт 32 шт
В комплект поставки входят; набор реагентов, принадлежности, инструкция по 
применению, паспорт.


--- стр. 5 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность (предел обнаружения антител к Т. pallidum).  
Определяется как диагноз Внутреннего контрольного образца «Внутренний контрольный образец 
IgA к Т. pallidum»  (ВКО TpN), содержащего минимальный уровень IgA к Т. pallidum.  Набор 
«СифилисИФА-суммарные антитела» определяет ВКО TpN как положительный образец. 
Определяется как диагноз разведения Первого международного стандарта «WHO International 
Standard H' IS for human anti-syphilis plasma IgG and IgM», код 05/132 (NIBSC, Великобритания) с 
минимальной концентрацией антител классов G и М к Г. pallidum. Набор «СифилисИФА- 
суммарные антитела» определяет разведение MC с концентрацией 0,0188 МЕ/мл как 
положительный образец. Предел обнаружения антител классов G и М к Г. pallidum в наборе 
«СифилисИФА-суммарные антитела» не превышает 0,0188 МЕ/мл.
3.2. Аналитическая специфичность. Определяется как способность теста обнаруживать 
только аналит в присутствии интерферирующих факторов в исследуемом материале. Наличие 
антикоагулянтов (цитрат натрия, гепарин или ЭДТА) в пробах не оказывает негативного 
воздействия на результаты анализа с помощью набора «СифилисИФА-суммарные антитела».
Антитела к Borrelia burgdorferi, Trichomonas vaginalis, Herpes Simplex Virus, Chlamydia  
trachomatis и ревматоидный фактор не имеют перекрестной реактивности в анализе с помощью 
набора «СифилисИФА-суммарные антитела».
Повышение концентрации гемоглобина до 5 мг/мл, билирубина до 100 мкг/мл, 
сывороточного альбумина до 100 мг/мл или триглицеридов до 10 мг/мл в некоторых пробах 
сыворотки и плазмы крови, а так же повышение концентрации хлоридов, лактата, глюкозы, 
билирубина и общего белка в ликворе, не оказывают негативного воздействия на результаты 
анализа с помощью набора «СифилисИФА-суммарные антитела», но не следует использовать 
гемолизированные или мутные образцы.
3.3. Коэффициент вариации оптической плотности в одном и том же образце при 
определении антител к Т.pallidum с использованием набора «СифилисИФА-суммарные антитела» 
не превышает 8%.
3.4. Хук-эффект высоких концентраций. При использовании набора «СифилисИФА- 
суммарные антитела» хук-эффект высоких концентраций суммарных антител к Т. pallidum  не 
обнаружен вплоть до 4 ед. ОН.
3.5. Диагностическая чувствительность. Определяется как доля полученных 
положительных результатов в исследуемых образцах, содержащих антитела к Т.pallidum.
Диагностическая чувствительность набора «СифилисИФА-суммарные антитела» по 
Стандартной панели предприятия TpN (СПП TpN) из образцов сыворотки и плазмы (с цитратом 
натрия, гепарином и ЭДТА) крови человека, содержащих суммарные антитела к Т.pallidum (фирма 
ООО «Компания Алкор Био», Россия), или по «Антипаллидум-контрольная панель сывороток» 
(фирма АО «Вектор Бест») составляет 100%.
Диагностическая чувствительность набора «СифилисИФА-суммарные антитела» по выборке 
из 200 образцов, содержащих суммарные антитела к Т. pallidum,  с 95% доверительной 
вероятностью составляет 98,5%-100%:


--- стр. 6 ---
Количество исследованных 
образцов
Диагностическая 
чувствительность(с 
доверительной вероятностью 
95%)
Сыворотка крови 100 97,0%-100%
Плазма крови 75 96,2%-100%
Ликвор 25 88,7%-100%
3.6. Диагностическая специфичность. Определяется как доля полученных отрицательных 
результатов в исследуемых образцах, не содержащих антител к Т.pallidum.
Диагностическая специфичность набора «СифилисИФА-суммарные антитела» по 
Стандартной панели предприятия TpN (СПИ TpN) из образцов сыворотки и плазмы (с цитратом 
натрия, гепарином и ЭДТА) крови человека, не содержащих суммарные антитела к T.pallidum 
(фирма ООО «Компания Алкор Био», Россия), или по «Антипаллидум-контрольная панель 
сывороток» (фирма АО «Вектор Бест») составляет 100%.
Диагностическая специфичность набора «СифилисИФА-суммарные антитела» по выборке из 
200 образцов (в том числе перекрестно-реагирующих образцов беременных женщин, больных с 
ИППП и пациентов, в чьих пробах обнаружен ревматоидный фактор), не содержащих суммарные 
антитела к Т. pallidum, с 95% доверительной вероятностью составляет 98,5%-100%:
Клинический материал
Количество
исследованных
образцов
Диагностическая 
специфичность(с 
доверительной 
вероятностью 95%)
Сыворотка
крови
Перекрестно-реагирующие
образцы 60 95,1%-100%
Слепые образцы 40 92,8%-100%
Плазма крови 75 96,2%-100%
Ликвор 25 88,7%-100%
3.7. Ограничение теста. Пробы пациентов, принимающих накануне сдачи крови 
лекарственные средства, употребляющих соленую, жирную и острую пищу, употребляющих 
алкоголь, подверженных стрессам и физическому перенапряжению, для анализа с помощью набора 
«СифилисИФА-суммарные антитела» использовать недопустимо.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора — класс 26 (согласно Приказу Министерства 
здравоохранения РФ №4н от 06.06.2012 г.).
4.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
4.3. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории 
медицинские. Требования безопасности».
4.4. Допускать к работе с набором только специально обученный персонал.
4.5. Перед началом работы ознакомиться с инструкцией и применять набор строго по 
назначению.
4.6. Стоп-реагент представляет собой 3,59% раствор соляной кислоты. Избегать 
разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу и 
слизистые необходимо промыть пораженный участок большим количеством проточной воды.


--- стр. 7 ---
4.7. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или плаетиковые 
перчатки, разрешенные к применению на территории РФ, т.к. производные крови, входящие в 
состав набора, и исследуемые образцы являются потенциально инфицированным материалом, 
способным длительное время сохранять и передавать возбудителей различных вирусных инфекций.
4.8. Химичеекая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, 
должны быть соответетвующим образом маркированы и храниться отдельно. Поскольку ИФА 
чувствителен к ионам металлов, контакт металлических предметов с компонентами набора 
недопустим.
4.9. Для обработки посуды и оборудования рекомендуется использовать дезинфицирующие 
средства на основе третичных аминов, четвертичных аммониевых соединений (ЧАС) или епиртов и 
разрешенные к применению на территории РФ. Использование дезинфицирующих средств на 
основе активного кислорода и хлора возможно лишь на предстерилизационном этапе, с 
последующей термичеекой стерилизацией.
4.10. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в 
помещениях, предназначенных для работы с наборами.
4.11. Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя 
дезинфицирующие средства в соответствии с МУ-287-113 «Методические указания по 
дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.12. Удалять неиспользованные реактивы в соответетвии с требованиями СанПиН
2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению е медицинскими
отходами».
4.13. Все использованные одноразовые материалы и остатки образцов должны быть
подвергнуты обработке дезинфицирующими средствами с последующей утилизацией в
соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологичеекие требования к 
обращению с медицинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции, 
предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
4.14. После использования стрипы, контрольные пробы, образцы и вее расходные 
материалы, которые контактировали с образцами во время обработки, хранения или анализа 
(флаконы, перчатки, наконечники и т.д.) должны собираться отдельно и стерилизоваться в 
автоклаве с последующей утилизацией в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10. 
Вместо автоклавирования наконечники могут быть стерилизованы дезинфицирующим средством, 
после утилизированы в соответетвии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10.
4.15. Во время процедуры ручной промывки планшета еодержимое лунок необходимо 
выбрасывать в контейнер с дезинфицирующим раствором на основе третичных аминов, ЧАС или 
спиртов.
4.16. Не использовать набор по истечении ерока годности.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
- спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую
плотность раствора в лунках при длинах волн 450 нм, 405 нм и 600-630 нм^;
^ Допускается использование автоматических анализаторов для ИФА открытого типа с аналогичными  
характеристиками, за информацией о необходимой комплектации набора и программе проведения анализа обращайтесь  
к производителю набора «СифилисИФА-суммарные антитела» в ООО «Компания Алкор Био», тел/факс: (812) 677-  
8779.


--- стр. 8 ---
прибор для встряхивания рамки со стрипами (термостатируемый шейкер), 
позволяющий производить встряхивание со скоростью 400-800 об/мин при температуре 
+37 °С2;
- автоматическое промывочное устройство(вошер) для иммунологических планшетов^’^;
- пипетки полуавтоматические одноканальные ео сменными одноразовыми
наконечниками'^ с изменяемым объемом отбора жидкоетей: на 5-50 мкл; 20-200 мкл; 100- 
1000 мкл; 1000-5000 мкл;
- пипетка полуавтоматическая восьмиканальная со сменными одноразовыми
наконечниками'^, позволяющая отбирать объемы жидкости до 300 мкл;
- цилиндр мерный, позволяющий отмерять 50-500 мл;
- стакан стеклянный подходящего объема;
-  вода дистиллированная или очищенная деионизованная^;
- бумага фильтровальная;
-  перчатки резиновые или пластиковые;
-  дезинфицирующий раствор на основе третичных аминов, ЧАС или спиртов;
- контейнер для дезинфекции;
-  ванночки для внесения реагентов восьмиканальной пипеткой.
Дополнительно для проведения анализа в термостате:
термостат, поддерживающий температуру +37 °С^.
Дополнительно для проведения анализа на анализаторе «АИзе!»:
-  автоматический иммуноферментный анализатор «АНзе!»^;
- многоцелевые полипропиленовые пробирки 12x75 вместимостью 5 мл^;
-  концентрированный водный раствор Триала, 5000-Iqшный концентрат, маркирован «Триал»^.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
6Л. Эквивалентность образцов сыворотки и плазмы крови человека, еодержащей
антикоагулянты (цитрат натрия, гепарин или ЭДТА), подтверждена на 25 положительных и 25 
отрицательных образцах каждого вида в анализе с помощью набора «СифилисИФА-суммарные 
антитела».
6.2. Забор крови из вены осуществляют с соблюдением правил асептики. После 
формирования сгустка сыворотку отделяют путем центрифугирования. Забор крови для получения 
плазмы осуществляют в пробирку, содержащую антикоагулянт (цитрат натрия, гепарин или ЭДТА). 
После центрифугирования сыворотку или плазму переносят в отдельную пробирку.
6.3. Взятие образца ликвора производят в строгом соответствии с утвержденной в 
установленном порядке процедурой. Пробу помещают с соблюдением правил асептики в пробирки 
с пробками, свободные от частиц пыли, без ЭДТА и фторида.
^ При использовании автоматического промывочного устройства необходимо тщательно следить за его состоянием,  
периодически проверять емкости и соединительные шланги для промывочных буферов на наличие микробиологи­
ческого зароста и других загрязнений, проводить техническое обслуживание в соответствии с рекомендациями про­
изводителя оборудования
Повторное использование наконечников не допускается. При внесении каждого образца необходимо использовать  
новый наконечник
^ В соответствии с ГОСТ 6709-72 «Вода дистиллированная. Технические условия» необходимо периодически  
контролировать качество воды, используемой для приготовления растворов  
^ Компоненты, не входящие в состав набора; поставляются по отдельному заказу.


--- стр. 9 ---
/
6.4. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированную или мутную 
' сыворотку и плазму, а также образцы сыворотки, содержащие азид натрия.
6.5. Образцы сыворотки и плазмы крови разрешается хранить при температуре +2...8°С не 
более 5-ти суток; при необходимости более длительного хранения рекомендуется аликвотировать 
образец и хранить в замороженном виде при температуре -20 С и ниже. Не допускается повторное 
замораживание образца.
6.6. Образцы ликвора разрешается хранить при температуре -1-2...8°С не более 7-ми суток. 
При исследовании в пределах 1 часа пробу не охлаждают. При исследовании в пределах 3-х часов - 
хранить на льду. Замораживание не рекомендуется.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
7.1. Подготовка реагентов
7.1.1. Стрипы. Перед вскрытием пакет со стрипами необходимо выдержать при комнатной 
температуре (-ь18...25°С) не менее 30 минут. Вскрыть пакет и переставить на свободную рамку 
необходимое количество стрипов.
7.1.2. Контрольные пробы готовы к использованию.
7.1.3. Конъюгат Е готов к использованию.
7.1.4. Промывочный раствор. Необходимое количество буфера Н (20Х) развести 
дистиллированной или очищенной деионизованной водой в 20 раз.
Например: 50 мл буфера Н (20Х) -ь 950 мл воды. Тщательно перемешать, избегая 
пенообразования.
7.1.5. Раствор тетраметилбензидина (ТМБ) готов к использованию.
7.1.6. Стоп-реагент готов к использованию.
7.1.7. Рабочий раствор Триала. Необходимое количество концентрированного раствора 
Триала развести дистиллированной или очищенной деионизованной водой в 5000 раз.
Например: 1 мл Триала + 4999 мл воды. Тщательно перемешать, избегая пенообразования.
7.1.8. Все реагенты перед проведением анализа должны быть тщательно перемешаны и 
доведены до комнатной температуры (-И8...25°С).
7.2. Постановка анализа
7.2.1. Ручная постановка
На странице 15 приведена схема проведения анализа при ручной постановке.
7.2.1.1. Составить протокол маркировки лунок
Примечание: ОКП пробу обязательно раскапывать в дубликатах. ПКП обязательно  
раскапывать в трипликатах!
Лунки промаркировать следующим образом:
А1-№ 1 - для измерения величины оптической плотности раствора ТМБ;
А2, В1-№ 2 - для измерения величины оптической плотности ОКП;
В2, С1, С2-№ 3 - для измерения величины оптической плотности ПКП.
Примечание: в наборе «СифилисИФА-суммарные антитела» рекомендовано проведение  
анализа в дубликатах. Это позволяет уменьшить вероятность ошибок и получить достоверные  
результаты. Допускается использование наборов для анализа образцов в монопликатах при условии  
своевременной поверки и обслуживания измерительного и промывочного оборудования, что  
позволяет в случае неисправности свести к минимуму их негативное влияние на результат  
анализа.


--- стр. 10 ---
7.2.1.2. Во все лунки, кроме лунки А1, внести по 90 мкл конъюгата Е.
7.2.1.3. Внести в соответствующие лунки по 10 мкл контрольных проб, в оставшиеся лунки - 
по 10 мкл исследуемых образцов в дубликатах или в монопликатах, осторожно перемешивая 
содержимое лунок с помощью пипетирования (не менее 3 раз). Цвет раствора при этом изменится с 
темно-зеленого на голубой.
Примечание: общее время внесения контрольных проб и исследуемых образцов не должно
превышать 15 минут, иначе время инкубации различных образцов будет значительно
различаться, что приведет к неправильным результатам.
7.2.1.4. Инкубировать стрипы. Возможны 2 варианта инкубации:
• Инкубирование стрипов в течение 30 минут при встряхивании в  
термостатируемом шейкере при температуре +37°С со скоростью 400-800 об/мин.
• Инкубирование стрипов в течение 30 минут без шейкирования при температуре  
+37°С в термостате (предварительно встряхнуть рамку аккуратным постукиванием в 
течение 20-30 секунд или на шейкере в течение 1-2 минут при комнатной 
температуре).
7.2.1.5. По окончании инкубации удалить содержимое лунок в контейнер с 
дезинфицирующим раствором на основе третичных аминов, ЧАС или спиртов и промыть лунки 8 
раз. При каждой промывке во все лунки добавить по 300 мкл промывочного раствора, 
приготовленного по п.7.1.4., выдержать в течение 30 секунд с последующим декантированием. 
После последнего декантирования тщательно удалить остатки жидкости из лунок постукиванием 
рамки со Стрипами в перевернутом положении по фильтровальной бумаге.
Допускается промывка лунок при помощи автоматического промывочного устройства. При 
автоматической промывке необходимо заполнять лунки полностью и следить за качеством аспирации.
7.2.1.6. Немедленно внести во все лунки по 100 мкл раствора ТМБ и инкубировать стрипы. 
Возможны 2 варианта инкубации с ТМБ:
• Инкубирование стрипов в темноте в течение 10 минут при встряхивании в  
термостатируемом шейкере при температуре +37°С со скоростью 400-800 об/мин.
• Инкубирование стрипов в темноте в течение 15 минут без шейкирования при  
комнатной температуре (+18...25 °С).
7.2.1.7. Добавить во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и 
раствор ТМБ, по 100 мкл стоп-реагента для остановки ферментной реакции, встряхнуть рамку 
аккуратным постукиванием в течение 20-30 секунд или на шейкере в течение 1-2 минут при 
комнатной температуре.
7.2.1.8. Если невозможно измерить оптическую плотность в лунках планшета 
непосредственно после выполнения п. 7.2.1.7., то следует иметь в виду, что окраска в лунках 
планшета стабильна не более 20 минут при комнатной температуре.
7.2.2. Постановка на анализаторе «Alisei»
Анализатор «Alisei» имеет полностью автоматизированный процесс проведения анализа: 
внесение реагентов, промывка, инкубирование, измерение оптической плотности, обработка 
результатов. Программа определения суммарных антител к Т.pallidum введена в память 
анализатора.
7.2.2.1. При каждой постановке анализа на каждом планшете обязательно нужно определять 
ОП ОКП, ПКП и раствора ТМБ.
1.2.1.2, В случае дробного применения набора необходимо извлечь контрольные пробы из