Набор реагентов для предварительной ферментативной обработки антигенов - Bond Enzyme Pretreatment Kit [AR9551] — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖ ДАЮ » директор о Л айн» в А.В. 2011 г. МЛ ИНСТРУКЦИЯ по применению Набора для предварительной ферментативной обработки - Bond Enzyme Pretreatment Kit [AR9551], производства Лейка Микросистем Вертриеб Гмбх (Германия, Leica Mikrosysteme Vertrieb GmbH) 1.НАЗНАЧЕНИЕ 2.ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип действия 2.2. Состав набора 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ 9.УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ 10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА / --- стр. 2 --- 1.Назначение Набор для предварительной ферментативной обработки - Bond Enzyme Pretreatment Kit [AR9551], производства Лейка Микросистем Вертриеб Гмбх (Германия, Leica Mikrosysteme Vertrieb GmbH), предназначен для ферментативной демаскировки антигенов при проведении иммуногисто- и цитохимических исследованих фиксированных формалином и заключенных в парафин тканей в автоматическом иммуногистостейнере Bond-maX. 2. Характеристика набора 2.1 Принцип действия Основой иммуногистохимического (ИГХ) метода является иммунологическая реакция антигена и антитела. ИГХ-методы позволяют локализовать и идентифицировать клеточные и тканевые антигены, основываясь на их связывании с антителам. Набор для предварительной ферментативной обработки позволяет открыть эпитопы на молекуле антигена, которые были замаскированы при проведении фиксации ткани и заключении в парафин, таким образом делая эпитопы доступными для первичных антител. ^ Набор предназначен для использования в автоматическом иммуногистостейнере Bond-maX, способствует улучшению качества окраски препаратов при проведении иммуногистохимических исследований и снижает вероятность получения ложноотрицательных результатов. Перед обработкой образца антителами следует провести блокировку эндогенной пероксидазной активности и демаскировку антигенов, в ряде случаев необходима именно ферментативная демаскировка. Далее образец инкубируют с первичными антителами. Для определения первичных антител используют вторичные антитела коньюгированных с полимером сцепленным с пероксидазой (которые входят в состав полимерной системы) и направлены к первичным антителам. С полимером вторичных антител взаимодействует субстрат-хромогенная смесь. Для этого проводят инкубацию с субстрат-хромогенной смесью и DAB субстратным буфером. Образец докрашивают гематоксилином и заключают под покровное стекло. 2.2 Состав набора 1 . Концентрат фермента, в состав которого входит протеолитический фермент протеиназа К W (17 мг/мл) и стабилизатор, объем 1 мл. ^ 2. Раствор для разведения фермента, в состав которого входит нитратный буфер, сурфактант и 0,35% ProClin 950, объем 200 мл. 3. Три контейнера Bond открытого типа, объем 7мл. Перед использованием необходимо готовить рабочий раствор фермена, разведение подбирается индивидуально, в соответсвии с особенностями исследуемого антигена. 3. Аналитические и диагностические характеристики Данный набор необходим для улучшения качества иммуногистохимического окрашивания, которое широко используется как в клинической практике для дигностики различных заболеваний и, главным образом, в дифференциальной диагностике опухолей, так и в научно-исследовательской работе. 4. Меры предосторожности • Этот продукт предназначен для диагностики in vitro. • Никогда не пипетируйте ртом и избегайте контакта кожи и слизистых мембран с реагентами или образцами. Если реагенты или образцы соприкоснулись с чувствительными участками, промойте их обильным количеством воды и обратитесь к врачу. --- стр. 3 --- с образцами тканей и материалами, контактировавшими с ними, следует обращаться как с потенциально инфекционными и обеззараживать в соответствии с федеральными, государственными и местными инструкциями. Минимизируйте загрязнение реагентов микробами, иначе может произойти неспецифическое окрашивание. Изменения внешнего вида реагентов, такие как выпадение осадка или обесцвечивание указывают на нестабильность и непригодность. В таких случаях реагент не должен использоваться. 5. Оборудование и материалы Для проведения ферментативной демаскировки с помошью настоящего набора необходимо следующее оборудование и материалы; 1) лабораторная посуда 2) де-ионизированная вода 3) батарея для депарафинизации и регидратации 4) микротом или микротом-криостат для нарезания гистологических срезов 5) термостолик для расправления парафиновых срезов 6) предметные и покровные стекла 7) адгезивы (для прилипания гистологичексого среза к стеклу) 8) автоматический иммуногистостейнер Bond-maX (проведение демаскировки запрограммировано в приборе) 9) среды для заключения гистологических препаратов 10) световой микроскоп (для визуализации результатов окрашивания) 6. Анализируемые образцы Образцы тканей, биопсии, участки органов. 7 . Проведение иммуногистохимического анализа 1) Разместить срезы на стеклах, покрытых адгезивом. 2) Провести депарафинизацию в ксилоле или его заменителях. 3) Регидратировать через серию спиртов. 4) Промыть текущей водопроводной водой. 5) Провести процедуры демаскировки антигена. В соответствии с инструкциями к первичным антителам, для ряда антигенов показана ферментативная демаскировка, которую можно выполнить с использованием настоящего набора по программе прибора Bond-maX. 6) Промыть де-ионизированной водой. 7) Нейтрализовать эндогенную пероксидазу, используя пероксидазный блок, 5 мин. 8) Промыть 2 раза по 5 мин TBS буфером. 9)Инкубировать срезы 5 минут с протеиновым блоком . 10) Промыть 2 раза по 5 мин TBS буфером. 11) Обвести срезы гидрофобным карандашом 12)Инкубировать срезы с оптимально разведенными первичными антителами (время инкубации см. в инструкции, приложенной к первичным антителам). 13) Промыть 2 раза по 5 мин TBS буфером. После депарафинизации, демаскировки и инкубации с первичными антителами для визуализации следует использовать систему детекции на основе пероксидазы или набор визуализации на основе полимера, сцепленного с пероксидазой.. 8 . Регистрация результатов Оценить качество ферментативной демаскировки возможно только после проведения всей