Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов простого герпеса 1 и 2 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК ВПГ-1/ВПГ-2) по ТУ 9398-278-23548172-2011 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2012/13313 от 11.04.2012 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Вирус простого герпеса 1 и 2 тип нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 43 контракта, медианная цена за единицу 12 393 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
/
«УТВЕРЖ ДАЮ »
Генеральный директор 
АО «Вектор-Бест»
М. Д. Хусаинов 
2023 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов
для дифференциального выявления ДНК вирусов простого герпеса 1  и 2 типов 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК ВПГ-1/ВПГ-2»
(комплект 1)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «РеалБест ДНК ВПГ-1/ВПГ-2» предназначен для дифференциально­
го выявления ДНК вирусов простого герпеса (ВПГ) 1  и 2 типов, методом полимеразной цеп­
ной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме 
реального времени.
Комплект 1  предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами: 
«CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их 
аналогами.
Набор реагентов может быть применён в клинической практике для анализа клиниче­
ского материала.
Выделение ДНК вирусов простого герпеса 1  и 2 типов из клинических проб прово­
дится с помощью наборов «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 2», «Реал­
Бест ДНК-экстракция 3» или «РеалБест экстракция 100».
Комплект 1  рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг­
мента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В.К и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной Л.В.


--- стр. 2 ---
праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по- 
I следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресцен­
ции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря ис­
пользованию специфичного для данного участка ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 гибридизационных 
ДНК- зондов, которые в ходе реакции связываются с одной из цепей ДНК, обеспечивая так­
же дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5’ конце флуоресцент­
ный краситель, а на 3’ конце -  гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсив­
ность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’-3' 
нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’ конца и происходит 
разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к воз­
растанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции за­
висит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания 
флуоресценции определяется исходным количеством бактериальной ДНК в образце.
Учет эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
ВПГ-1 и ВПГ-2 из клинических проб совместно с предварительно внесенным внутренним 
контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
-  положительный контрольный образец универсальный (ПКО) -  на основе плазмид- 
ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций, в том числе ДНК ВПГ-1 и 
ВПГ-2 -  1  пробирка (1,0 мл);
~ готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная ~ 96 пробирок.
Набор дополнительно комплектуется:
-оптической плёнкой -  1,5 листа.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  определение 100 копий ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 в стандартных 
образцах предприятия -  100%.
3.2. Специфичность определения ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 (по стандартной панели пред­
приятия отрицательных ДНК-экстрактов) -  100%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис­
кажению результатов ПЦР,
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).


--- стр. 3 ---
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабора­
торий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, 
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»).
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени:
«СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия)
или их аналог;
-  ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» 
фирмы СП «РТС», Россия);
-  холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С;
-  микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия);
-  пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен­
ным объёмом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин­
ляндия);


--- стр. 8 ---
Всего прошито, пронумеровано и 
скреплено печатью листов.
Директор по технологии и качеству 
АО “Вектор-Бест”
Масяго А.В. 
20 г.


--- стр. 9 ---
/
«УТВЕРЖ ДАЮ »
Генеральный директор
по применению набора реагентов
для дифференциального выявления ДНК вирусов простого герпеса 1  и 2 типов 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК ВПГ-1/ВПГ-2»
(комплект 2)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «РеалБеет ДНК ВПГ-1/ВПГ-2» предназначен для дифференциально­
го выявления ДНК вирусов простого герпеса (ВПГ) 1 и 2 типов, методом полимеразной цеп­
ной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме 
реального времени.
Комплект 2 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как 
роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), 
«Rotor-Gene Q» (фирма Qiagen, Германия), так и планшетного типа: «CFX96» (фирма Bio-Rad, 
США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами.
Набор реагентов может быть применён в клинической практике для анализа клиниче­
ского материала.
Выделение ДНК вирусов простого герпеса 1  и 2 типов из клинических проб прово­
дится с помощью наборов «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 3», «Реал­
Бест ДНК-экстракция 2» или «РеалБест экстракция 100».
Комплект 2 рассчитан на проведение анализа 100 образцов, включая контрольные об­
разцы.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг-
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором  
по производству Ткачевым В.К и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А.В.


--- стр. 10 ---
мента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг 
праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по­
следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой.
В основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресцен­
ции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря ис­
пользованию специфичного для данного участка ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 гибридизационных 
ДНК- зондов, которые в ходе реакции связываются с одной из цепей ДНК, обеспечивая так­
же дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5’ конце флуоресцент­
ный краситель, а на 3’ конце -  гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсив­
ность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5’-3’ 
нуклеазной активности Taq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5’ конца и происходит 
разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к воз­
растанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции за­
висит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания 
флуоресценции определяется исходным количеством бактериальной ДНК в образце.
Учет эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
ВПГ-1 и ВПГ-2 из клинических проб совместно с предварительно внесенным внутренним 
контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
-  положительный контрольный образец универсальный (ПКО) -  на основе плазмид- 
ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК возбудителей инфекций, в том числе ДНК ВПГ-1 и 
ВПГ-2 -  1  пробирка (1,0 мл);
-  реакционная смесь для ПЦР (PC), лиофилизированная -  10 пробирок, каждая на 10 
определений;
-  раствор для восстановления (РВ) -  2 флакона (по 2,0 мл).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Чувствительность -  определение 100 копий ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 в стандартных 
образцах предприятия -  100%.
3.2. Специфичность определения ДНК ВПГ-1 и ВПГ-2 (по стандартной панели пред­
приятия отрицательных ДНК-экстрактов) -  100%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к ис­
кажению результатов ПЦР,
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
2


--- стр. 11 ---
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабора­
торий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, 
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности 
ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных 
УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами 
дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»).
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени роторного 
типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), «Rotor- 
Gene Q» (фирма Qiagen, Германия) или планшетного типа: «CFX96» (фирма Bio-Rad,"CHIA), 
«ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог;
-  ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» 
фирмы СП «РТС», Россия);
-  холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С;
-  микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия);