Набор реагентов для качественного и количественного определения и генотипирования ДНК вирусов папилломы человека высокого канцерогенного риска методом ПЦР с детекцией в режиме "реального времени" (Amplitech HPV ST (R)) по ТУ 21.20.23-018-19926214-2022 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 1 закупка, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
| Закупка | Окончание подачи | Нач. цена |
|---|---|---|
| Поставка реагентов и расходных материалов для диагностики ВПЧ(централизованная лаборатория)
№ 0348300029126000358 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ МОСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ "ДОМОДЕДОВСКАЯ БОЛЬНИЦА" · Московская область |
09.11.2026 | 5 673 600 ₽ |
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 11 ---
АННОТАЦИЯ.......................................................................................................................................2
1 НАЗНАЧЕНИЕ ПРОГРАММЫ..................................................................................................4
2 УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ..........................................................................4
3 ПРИНЦИП РАБОТЫ..................................................................................................................4
4 ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ................................................................................................5
4.1 Загрузка.................................................................................................................................5
4.2 Установка и запуск..............................................................................................................5
4.3 Заполнение данных и обозначение образцов ............................................................5
4.4 Сортировка образцов, функция «Фильтр»..................................................................7
4.5 Обработка данных и выдача результатов ................................ 7
4.6 Очистка внесённых данных и результатов ..................................................................8
4.7 Сохранение результатов в виде бланка-отчёта........................................................9
4.8 Завершение программы..................................................................................................10
4.9 Информация о программе..............................................................................................10
4.10 Удаление программы....................................................................................................10
5 СООБЩЕНИЯ ОПЕРАТОРУ..................................................................................................10
5.1 Оценка достоверности результатов исследования ................................................10
5.2 Результаты анализа исследуемых образцов............................................................11
6 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...................................................................................................13
7 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДЦЕРЖКА..............................................................................................15
СОДЕРЖАНИЕ
Атр1НесЬ НРУ 8Т зоП РО В .11.07.22
--- стр. 12 ---
#
1 НАЗНАЧЕНИЕ ПРОГРАММЫ
Программное обеспечение «Amplitech HPV ST soft» версии 1.0 предназначено для
автоматической обработки данных, полученных в программном обеспечении
детектирующего амплификатора, и автоматической интерпретации и выдачи
результатов исследования в виде отчёта при применении набора реагентов
«Amplitech HPV ST (R)» производства ООО «Амплитек».
ПО предназначено для применения в клинико-диагностических лабораториях,
использующих в своей работе набор реагентов «Amplitech HPV ST (R)».
2 УСЛОВИЯ ВЫПОЛНЕНИЯ ПРОГРАММЫ
ПО предназначено для применения на персональных компьютерах.
Для работы ПО требуются технические и программные средства, указанные в
таблице 1.
Таблица 1
Требования к составу технических и программных средств
Технические средства Программные средства
Персональный компьютер со следующими
характеристиками;
- процессор с тактовой частотой не менее
1.5 ГГц.
- оперативная память объёмом не менее
4 Гб.
- наличие свободного пространства на
жёстком диске объёмом не менее 2 Гб.
- Операционная система Microsoft Windows
10 (для 32- или 64-разрядной системы) и
выше;
- Программная платформа Microsoft.NET
Runtime 6.0.8 и выше;
- Программная платформа
Microsoft.AspNetCore.App 6.0.8 и выше;
- Распространяемый компонент Microsoft
Visual C++ 2015-2022 Redistributable
Принтер для печати бланка-отчёта
(опционально)
-
Пользователь ПО (оператор) должен являться сотрудником клинико-
диагностической лаборатории и обладать практическими навыками работы с
персональным компьютером.
3 ПРИНЦИП РАБОТЫ
В качестве исходных данных ПО использует значения порогового цикла
амплификации (СЦ исследуемых образцов и контролей, полученных по
соответствующим каналам детекции в программном обеспечении используемого
детектирующего амплификатора.
После внесения значений Ct в соответствующие столбцы ПО, обозначения
образцов и нажатия кнопки «Интерпретировать данные» ПО проводит расчёт
концентрации специфических мишеней, оценку полученных значений для контролей
на соответствие заданным критериям и интерпретацию результатов. При
необходимости ПО позволяет формировать бланк-отчёт с полученными
результатами.
Amplitech HPV ST soft PO B.11.07.22
--- стр. 13 ---
4 ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОГРАММЫ
4.1 Загрузка
Загрузить архив с инсталлятором ПО с сайта производителя по ссылке:
http://www.amplitech.ru/resources/. Распаковать архив.
4.2 Установка и запуск
После распаковки архива выбрать инсталлятор ПО х86 или х64 соответственно для
32- или 64-разрядной операционной системы и запустить его двойным кликом, далее
следовать указаниям по установке.
Примечание - В случае возникновения проблем при установке ПО проверить наличие и
характеристики технических и программных средств, необходимых для работы ПО, в
соответствии с таблицей 1.
После установки ПО на рабочем столе автоматически будет создан ярлык для
запуска ПО (см. рисунок 1).
Рисунок 1
4.3 Заполнение данных и обозначение образцов
Столбцы таблицы с наименованием каналов детекции флуоресцентного сигнала
(РАМ, R6G, ROX, Суб, Суб.5) следует заполнять путём копирования столбца со
значениями Ct непосредственно из программного обеспечения используемого
амплификатора с детекций флуоресцентного сигнала в режиме «реального времени»,
либо из файла экспорта данных в Microsoft Excel, соблюдая при этом соответствие
каналов для флуорофоров. Аналогичным образом копируется обозначение образцов
в столбец «Образец».
Значения Ct в столбцы с наименованием каналов детекции флуоресцентного
сигнала и обозначение образцов также можно вносить вручную.
Примечание - В ПО предусмотрено копирование данных без заголовков столбцов. Если
при внесении данных был скопирован заголовок, он будет проигнорирован.
При внесении скопированных значений Ct по столбцам ПО автоматически добавит
необходимое количество образцов, присвоит им порядковые номера и определит
порядок реакционных смесей (см. рисунок 2).
I
Amplitech HPV ST soft РО В.11.07.22
--- стр. 14 ---
Образец
Образец 1
Образец2
ОбраэецЗ
Смесь
HPV ST (R)-1
HPVST{R)-2
HPV ST (R).1
HPVST(R>2
HPV ST (RH
HPVST(R>2
Рисунок 2
При внесении скопированных обозначений образцов (обозначения должны быть
скопированы без пустых строк между ними) ПО автоматически добавит необходимое
количество образцов и определит порядок реакционных смесей (см. рисунок 3).
Образец Смесь
HPVST(RH
А
HPVST{R)*2
HPV ST (RH
В
HPV ST (R>2
HPV ST (R>1
C
HPVST(R>2
Рисунок 3
Добавлять образцы возможно построчно путём нажатия на кнопку «Добавить
образец» (рисунок 4) в блоке кнопок управления в верхнем правом углу окна
программы.
©
Рисунок 4
Для обозначения контрольных образцов необходимо кликнуть правой кнопкой
мыши на образец в столбце «Образец» и выбрать из выпадающего списка вид
контроля (см. рисунок 5):
• «ПК HPV ST» - положительный контроль,
• «ОК» - отрицательный контроль.
Amplitech HPV ST soft PO B .11.07.22
--- стр. 27 ---
0 АМПЛИТЕК
Amplitech HPV ST (R)
Набор реагентов для качественного и количественного
определения и генотипирования ДНК вирусов папилломы
человека высокого канцерогенного риска методом ПЦР с
детекцией в режиме «реального времени»
(Amplitech HPV ST (R))
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
?
IVD REF P012-0 48
--- стр. 28 ---
т
ВВЕДЕНИЕ............................................................................................................................................3
1 НАЗНАЧЕНИЕ..............................................................................................................................4
1.1 Область применения.........................................................................................................4
2 СОСТАВ.........................................................................................................................................4
3 ПРИНЦИП МЕТОДА...................................................................................................................5
3.1 Прослеживаемость значений положительного контроля ПК HPV ST.................5
4 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ ......................................................6
5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.............................................................................................6
6 ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ...................................................................................................8
7 ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ..................................................... 9
7.1 Автоматизированная экстракция ДНК и подготовка к проведению ПЦР с
использованием автоматической станции «Amplitech Е1». Проведение ПЦР и
детекции............................................................................................................................................9
7.2 Экстракция ДНК и ручная подготовка к проведению ПЦР. Проведение ПЦР и
детекции..........................................................................................................................................11
8 УЧЁТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.....................................................................12
9 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ.........................................................................................................14
10 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА.......................................................................................................15
10.1 Контроли, используемые в процессе исследования ..........................................15
10.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации .........................................15
10.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований.........................15
11 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА ..................................................15
11.1 Предел обнаружения....................................................................................................15
11.2 Диапазон измерения и предел измерения.............................................................16
11.3 Аналитическая специфичность..................................................................................16
11.4 Прецизионность измерения.........................................................................................18
11.5 Правильность измерения............................................................................................18
11.6 Диагностические характеристики..............................................................................18
11.7 Корреляция......................................................................................................................18
12 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ. ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
....................................................................................................................................................19
12.1 Срок годности..................................................................................................................19
12.2 Хранение..........................................................................................................................19
12.3 Транспортирование......................................................................................................19
12.4 Эксплуатация..................................................................................................................19
13 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ...............................................................................................20
14 БИБЛИОГРАФИЯ...................................................................................................................20
15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ..........................20
16 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ........................................................................................21
17 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА...........................................................................................21
18 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ............21
СОДЕРЖАНИЕ
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22
--- стр. 29 ---
1. Настоящая инструкция по применению версии 22.11.22 распространяется на
медицинское изделие «Набор реагентов для качественного и количественного
определения и генотипирования ДНК вирусов папилломы человека высокого
канцерогенного риска методом ПЦР с детекцией в режиме «реального времени»
(Amplitech HPV ST (R))» по ТУ 21.20.23-018-19926214-2022 (далее - набор).
Краткое наименование набора: Amplitech HPV ST (R).
Набор следует применять в соответствии с действующей версией инструкции по
применению. Для удобства работы в лаборатории допускается использовать
действующую версию краткого руководства по применению набора.
2. Вирусы папилломы человека (ВПЧ) представляют собой группу из более чем 100
близкородственных безоболочечных двухцепочечных ДНК-вирусов семейства
Papillomaviridae. ВПЧ инфицируют эпителиальные клетки кожи и слизистых оболочек.
Не менее 35 типов ВПЧ поражают слизистую оболочку половых органов человека, что
может вызывать доброкачественную пролиферацию тканей и/или неопластическую
трансформацию эпителия с последующим развитием рака. По способности вызывать
злокачественное перерождение эпителия, можно выделить две группы ВПЧ - «ВПЧ
низкого канцерогенного риска» и «ВПЧ высокого канцерогенного риска» (ВПЧ ВКР).
К ВПЧ ВКР относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 типы. ВПЧ
ВКР являются главной этиологической причиной развития рака шейки матки и
предшествующей ему тяжелой дисплазии. Суммарно 14 типов ВПЧ ВКР
обнаруживаются в 95 % случаев рака шейки матки.
ВВЕДЕНИЕ
Т
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22
--- стр. 30 ---
Набор предназначен для качественного и количественного определения и
генотипирования ДНК вирусов папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного
риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 типов) в биологическом
материале человека, полученном в рамках профилактического ВПЧ-скрининга,
диспансерного мониторинга пациентов с ВПЧ-инфекцией, диагностики ВПЧ-инфекции
при онкопатологии шейки матки и при воспалительных заболеваниях мочеполовой
системы у женщин. Определение и генотипирование ДНК ВПЧ ВКР с помощью набора
проводится методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной Детекцией в режиме
«реального времени».
Материалом для проведения ПЦР-исследования служат образцы ДНК,
экстрагированной из:
• соскобов эпителия со слизистой оболочки цервикального канала (эктоцервикса
и эндоцервикса) и мазков со слизистой оболочки влагалища, помещённых в
транспортную среду, не предназначенную для жидкостной цитологии;
• соскобов эпителия со слизистой оболочки цервикального канала (эктоцервикса
и эндоцервикса), помещённых в среду для жидкостной цитологии.
1.1 Область применения
Набор предназначен для лабораторной диагностики in vitro ВПЧ-инфекции,
вызываемой 16,18, 31,33, 35, 39, 45, 51,52, 56, 58, 59, 66, 68 типами ВПЧ (выявление,
количественное определение и генотипирование ДНК ВПЧ 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45,
51,52,56, 58, 59, 66, 68 типов).
Набор может применяться в клинико-диагностических лабораториях.
1 НАЗНАЧЕНИЕ
2 СОСТАВ
Состав набора^ указан в таблице 1 и 2.
Таблицам
Состав набора
Компонент Номинальный
объём, мл Кол-во Внешний вид
96-луночный делимый планшет с
Планшет с реагентами HPV ST (R) 1 шт. реагентами, заклеенный
защитной плёнкой
Плёнки для планшета - 2 шт. Клейкие плёнки
ОК
(Буферный раствор)
0,8 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
ПК HPV ST
(Раствор, содержащий генно-инженерные
конструкции с фрагментами ДНК ВПЧ и ДНК
внутреннего контроля)
0,8 1 пробирка Прозрачная бесцветная
жидкость
В бумажном виде и электронном
Инструкция по применению 1 шт. виде по адресу;
Ьйр://\ллллл/.атрН1есЬ.ги/ге8оигсе5/
Краткое руководство - 1 шт. В бумажном виде
^ Набор упакован в коробку из картона.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22
--- стр. 31 ---
Номинальным ^Компонент Кол-во объем, мл Внешний вид
Паспорт - 1 шт. В электронном виде^ по адресу:
http://www.amplltech.ru/qualitv/
Программное обеспечение
«Amplitech HPV ST soft» в. 1.0
В электронном виде по адресу;
http://www.amplitech.ru/resources/
Руководство оператора - 1 шт. В электронном виде по адресу;
http://www.amplitech.ru/resources/
Таблица 2
Расположение реагентов в планшете
Ряды пробирок Реагент Внешний вид
А, С, Е, G
Смесь HPV ST (R)-1
(Реакционная ПЦР-смесь со специфическими
праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами,
термостабильной ДНК-полимеразой, дНТФ. солями)
Гель от светло-голубого до
синего цвета на дне пробирок
В. D, F, Н
Смесь HPV ST (R)-2
(Реакционная ПЦР-смесь со специфическими
праймерами, флуоресцентно-мечеными зондами,
термостабильной ДНК-полимеразой, дНТФ. солями)
Гель от бесцветного до светло-
лилового цвета на дне пробирок
Набор рассчитан на проведение исследования 48 образцов, включая контроли.
3 ПРИНЦИП МЕТОДА
Исследование с помощью набора проводится методом ПЦР с гибридизационно-
флуоресцентной детекцией продуктов амплификации в режиме «реального
времени». Детекция продуктов ПЦР и раздельное выявление мишеней (ДНК ВПЧ ВКР
определённого типа и внутреннего контроля (ВК)) обеспечивается применением в
двух реакционных смесях для ПЦР флуоресцентно-меченых олигонуклеотидов,
сигналы от которых регистрируются по пяти различным каналам флуоресцентной
детекции, соответствующим флуорофорам РАМ, R6G, ROX, Су5, Су5.5. Для
выявления ВПЧ используются ДНК-мишени, находящиеся в областях генов Е6 и Е7.
В качестве ВК используется участок ДНК ß-глобинового гена человека.
Линейная зависимость между исходной концентрацией ДНК-мишени в
исследуемом образце и циклом начала экспоненциального увеличения
флуоресцентного сигнала (порогового цикла, Ct) позволяет определять концентрацию
ДНК ВПЧ в образце относительно положительного контроля ПК HPV ST (образца с
известной концентрацией ДНК-мишеней), который проходит этап экстракции ДНК и
ПЦР одновременно с исследуемыми образцами. Определение концентрации ДНК
ВПЧ производится в соответствии с заданными значениями концентраций ПК HPV ST
и полученными значениями Ct для ПК HPV ST и исследуемых образцов.
3.1 Прослеживаемость значений положительного контроля ПК HPV ST
Концентрация клонированных фрагментов ДНК ВПЧ в ПК HPV ST составляет
5 lg ±0,5 lg копий/мл. Концентрация определяется с помощью установленной
производителем методики выполнения измерений на основе метода лимитирующих
разведений [1,2].
2 в случае отсутствия доступа к Интернету обратитесь в службу технической поддержки по телефону
(495) 374-13-46 для запроса о предоставлении бумажной версии паспорта.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция B.22. 11.22
--- стр. 32 ---
Для работы с набором требуются оборудование и материалы, указанные в
таблице 3.
Таблица 3
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором
Необходимое оборудование и материалы в случае
4 НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
автоматизированной подготовки к
________проведению ПЦР ________ ручной подготовки к проведению ПЦР
• автоматическая станция пробоподготовки
«Amplitech Е1» («Амплитек», Россия; РУ № РЗН
2022/16981);
• программируемый амплификатор с
системой детекции флуоресцентного сигнала в
режиме «реального времени» (ДТпрайм (ООО
«НПО ДНК-Технология»; РУ № ФСЗ
2011/10229), CFX96 (Bio-Rad Laboratories, Inc.;
РУ № ФСЗ 2008/03399), Applied Biosystems
QuantStudio 5 (Life Technologies Holdings Pte.
Ltd.; Py № P3H 2019/8446));
• холодильник c камерой, поддерживающей
температуру от 2 "С до 8 °С;
• ёмкость дня сброса использованных
материалов;
• перчатки медицинские, одноразовые,
неопудренные.
• ПЦР-бокс;
• центрифуга-вортекс (РУ № ФС № 2005/518);
• дозаторы переменного объёма, механические
или электронные, с возможностью дозирования от
20 до 200 мкл (РУ № ФСР 2009/05681);
• штатив для ПЦР-планшетов (РУ № ФСЗ
2011/10287);
• программируемый амплификатор с системой
детекции флуоресцентного сигнала в режиме
«реального времени» (Дтпрайм (ООО «НПО ДНК-
Технология»; РУ № ФСЗ 2011/10229), CFX96 (Bio-
Rad Laboratories, Inc.; РУ № ФСЗ 2008/03399),
Applied Blosystems QuantStudio 5 (Life Technologies
Holdings Pte. Ltd.; РУ № P3H 2019/8446));
• холодильник c камерой, поддерживающей
температуру от 2 °С до 8 ®С;
• наконечники для дозаторов переменного
объёма, с фильтром, объёмом до 20 мкл,
одноразовые, свободные от ДНКаз;
• емкость для сброса использованных
материалов;
• перчатки медицинские, одноразовые,
неопудренные.________________________________
5 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Класс потенциального риска применения набора (согласно Приказу Министерства
здравоохранения РФ № 4н от 06.06.2012) - 26.
Работа должна проводиться в лаборатории, использующей методы амплификации
нуклеиновых кислот для исследования материала, с соблюдением требований ГОСТ
Р 52905 «Лаборатории медицинские. Требования безоласности», МУ 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации
нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы 1-1\/
групп патогенности», СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования
по профилактике инфекционных болезней».
При работе необходимо всегда выполнять следующие требования;
• Применять набор по назначению в соответствии с данной инструкцией.
Отклонение от прописанных процедур и порядка действий может привести к
получению недостоверных результатов исследования.
• К работе с набором допускается только персонал, обученный методам
молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической
лаборатории в соответствии с СанПиН 3.3686-21 (раздел IV).
• Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22
--- стр. 40 ---
Результат, полученный в ПО Интерпретация
клеток)». В случае если концентрация выявленного типа ВПЧ более верхней границы
диапазона измерения набора, то количественный результат выдаётся в виде: «более X 1д
(копий/10''5 клеток)».
Результат исследования считают достоверным, если получены валидные
результаты для контролей. В случае сбоя в прохождении контролей или их отсутствии
ПО «Amplitech HPV ST soft» сигнализирует о наличии ошибок анализа сообщениями:
«Невалидный ПК HPV ST» / «Контаминация ОК» / «Не найден контроль ПК HPV ST» /
«Не найден контроль ОК».
Если генотипирование выявленной ДНК ВПЧ с использованием набора
затруднено, то в описании результата добавляется фраза «Рекомендуется
генотипирующее исследование». В этом случае рекомендуется, при необходимости,
проводить дополнительное генотипирование ВПЧ с использованием набора
реагентов «Amplitech HPV GT (R)» или аналогичного набора реагентов для
проведения генотипирования ВПЧ ВКР.
9 ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ
Рекомендации по устранению возможных ошибок, получаемых для исследуемых
образцов и контролей в процессе исследования с помощью набора, указаны в
таблице 8.
Таблица 8
Рекомендации по устранению ошибок
Ошибка Возможная причина
возникновения Рекомендации по устранению
Невалидный ПК HPV ST Некорректное проведение
экстракции ДНК и/или ПЦР.
Повторить исследование для всех
образцов, начиная с этапа
экстракции ДНК.
Контаминация ОК
Контаминация реагентов
или исследуемых образцов
продуктами амплификации.
Предпринять меры по выявлению
и ликвидации источника
контаминации и повторить
исследование для всех образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.
1 Не найден контроль ПК
HPV ST
Отсутствие или
некорректное обозначение
контроля в ПО____________
Не найден контроль ОК
Отсутствие или
некорректное обозначение
контроля в ПО____________
Проверить
правильность
контролей.
отсутствуют,
наличие и
обозначения
Если контроли
повторить
исследование для всех образцов,
начиная с этапа экстракции ДНК.
Недостаточно
материала для анализа
Нарушения при взятии
и/или хранении
биоматериала.
Некорректное проведение
экстракции ДНК,
Наличие в образце
ингибиторов ПЦР.
Повторить исследование данного
исследуемого образца, начиная с
этапа экстракции ДНК. В случае
воспроизводимого результата
рекомендуется повторное взятие и
исследование биологического
материала.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22 14
--- стр. 41 ---
10 КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
10.1 Контроли, используемые в процессе исследования
10.1.1 Отрицательный и положительный контроли
Каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы:
• ОК для выявления контаминации в процессе проведения исследования;
• ПК HPV ST для контроля корректного прохождения исследования, а также для
количественного определения ДНК ВПЧ выявляемых с помощью набора типов и ДНК
ß-глобинового гена человека в биологическом материале.
10.1.2 Внутренний контроль
Для контроля качества экстракции ДНК и оценки влияния ингибиторов на
результаты амплификации используется эндогенный ВК - ДНК человека (участок ß-
глобинового гена), который присутствует в каждом исследуемом биологическом
образце и ПК HPV ST. Невалидные результаты амплификации для ВК
свидетельствует о присутствии ингибиторов ПЦР в образце, плохом качестве взятия
и/или хранения биоматериала, некорректном проведении экстракции ДНК.
10.2 Мониторинг лаборатории на наличие контаминации
Для выявления возможной контаминации лаборатории продуктами амплификации,
исследуемыми и контрольными образцами рекомендуется раз в месяц исследовать
смывы с рабочих поверхностей лабораторной мебели, оборудования и поверхностей
помещений согласно процедуре, указанной в МУ 1.3.2569-09. При обнаружении
контаминации необходимо провести мероприятия по её устранению согласно
указаниям, описанным в МУ 1.3.2569-09.
10.3 Внутренний контроль качества лабораторных исследований
Рекомендуется проводить контроль качества выполнения исследований с
использованием панелей контрольных образцов, предназначенных для проведения
внутреннего и внешнего контролей качества лабораторных исследований по
количественному определению и генотипированию ДНК ВПЧ, либо сравнительным
исследованием с использованием зарегистрированных в РФ наборов реагентов для
количественного определения и генотипирования ДНК ВПЧ в биологическом
материале методом ПЦР.
11 ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА®
11.1 Предел обнаружения
Предел обнаружения набора указан в таблице 9.
5 Заявленные аналитические характеристики набора, кроме аналитической специфичности, проверены
с использованием стандартных образцов предприятия, содержащих векторы со специфическими
последовательностями выявляемых типов ДНК ВПЧ.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция B.22. 11.22 15
--- стр. 42 ---
Таблица 9
Предел обнаружения
Мишень Предел обнаружения,
копий/мл 95 %-ый ДИ, копий/мл
ДНК ВПЧ 16 типа 1000 674- 1300
ДНК ВПЧ 18 типа 1000 689-1308
ДНК ВПЧ 31 типа 1000 714-1401
ДНК ВПЧ 33 типа 1000 695-1370
ДНК ВПЧ 35 типа 1000 700-1375
ДНК ВПЧ 39 типа 1000 668-1282
ДНК ВПЧ 45 типа 1000 712-1373
ДНК ВПЧ 51 типа 1000 700-1368
ДНК ВПЧ 52 типа 1000 626-1213
ДНК ВПЧ 56 типа 1000 707-1384
ДНК ВПЧ 58 типа 1000 664-1309
ДНК ВПЧ 59 типа 1000 644-1263
ДНК ВПЧ 66 типа 1000 654-1235
ДНК ВПЧ 68 типа 1000 715-1385
11.2 Диапазон измерения и предел измерения
Диапазон измерения набора составляет от 2000 до 200000000 копий ДНК ВПЧ
типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66, 68 в 1 мл исследуемого образца
для всех заявленных видов биологического материала. Предел измерения набора
совпадает с нижней границей диапазона измерения набора.
11.3 Аналитическая специфичность
По анализу результатов /л зШсо выбранные олигонуклеотиды позволяют
гарантировано дифференцировать ВПЧ типов 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58,
59, 66, 68 как между собой, так и с другими известными типами ВПЧ. При этом
подобранные праймеры и зонды на 100% совпадают с опубликованными
последовательностями выявляемых типов ВПЧ, представленными в базе МСВ1 по
состоянию на 04 августа 2021 г.
Аналитическая специфичность набора оценивалась при тестировании
микроорганизмов, указанных в таблице 10, и геномной ДНК человека. ДНК
микроорганизмов исследовалась в концентрации не менее 1-10® копий/мл, геномная
ДНК человека - в концентрации 1 мкг/мл. По итогам тестирования
ложноположительных результатов выявлено не было.
Таблица 10
Микроорганизмы, используемые для оценки аналитической специфичности
Наименование Наименование Наименование
Candida albicans ВПЧ 6 типа ВПЧ 45 типа
Chlamydia trachomatis ВПЧ 11 типа ВПЧ 51 типа
Mycoplasma genitalium ВПЧ 16 типа ВПЧ 52 типа
Neisseria gonorrhoeae ВПЧ 18 типа ВПЧ 56 типа
Trichomonas vaginalis ВПЧ 26 типа ВПЧ 58 типа
Mycoplasma hominis ВПЧ 31 типа ВПЧ 59 типа
Escherichia coli ВПЧ 33 типа ВПЧ 66 типа
Amplitech HPV ST (R) Инструкция В.22. 11.22 16
--- стр. 43 ---
Наименование Наименование Наименование
Treponema pallidum ВПЧ 35 типа ВПЧ 68 типа
Ureaplasma parvum ВПЧ 39 типа ВПЧ 73 типа
- ВПЧ 44 типа ВПЧ 82 типа
11.3.1 Потенциально интерферирующие вещества
Потенциально интерферирующие вещества (ингибиторы ПЦР) и их максимальные
концентрации в образце, для которых оценивалось их ингибирующее влияние на ПЦР,
перечислены в таблице 11.
Таблица 11
Потенциально интерферирующие вещества
Исследуемый
материал Интерферент Активный
компонент
Тип интерфе-
рента
Концентрация
вещества в
образце
Обоснование
исследованной
концентрации
Мазки/
соскобы
Мирамистин®
Бензилдиметил [3-
(миристоиламино)
пропил] аммоний
хлорид
моногидрат
Антисептиче
ское средство
для местного
применения
0,001 %
10 % от
рекомендован
ной дозы
транспортной
среде, не
предназначен
ной для
жидкостной
цитологии
Гель-смазка
интимная
Contex Wave
увлажняющий
с пантенолом
Глицерин Лубрикант 15% Объём в
образце в
условиях
Цельная кровь -
Эндогенная
субстанция
5 % V/V
«наихудшего
случая»
Муцин Очищенный белок 150 м кг/мл
Мирамистин®
Бензилдиметил [3-
(миристоиламино)
пропил] аммоний
хлорид
моногидрат
Антисептиче
ское средство
для местного
применения
0,001 %
10 % от
рекомендован
ной дозы
Соскобы
эпителия в
среде для
жидкостной
Гель-смазка
интимная
Contex Wave
увлажняющий
с пантенолом
Глицерин Лубрикант 15%
Объём в
образце в
условиях
«наихудшего
случая»
цитологии Жидкость
консервирую
щая BD
SurePath™
Метанол
Среда для
жидкостной
цитологии
90%
Цельная кровь -
Эндогенная 5 % V/V
Муцин Очищенный белок субстанция 150 м кг/мл
Наличие возможного ингибирующего эффекта оценивалось путём проведения
процедуры экстракции® ДНК ВПЧ из модельных образцов биологического материала,
в которые добавлялись потенциальные интерференты в концентрациях согласно
таблице 11 и стандартные образцы предприятия, содержащие ДНК ВПЧ выявляемых
типов в концентрации 2000 копий/мл и ДНК ВК (ДНК человека) в концентрации
100000 копий/мл. Далее с экстрагированными образцами проводили ПЦР с детекцией
в режиме «реального времени» с использованием набора реагентов «Amplitech HPV
ST (R)».
® Экстракция проводилась с использованием набора реагентов «ДНК-ВПЧ (R)» (ООО «Амплитек»),
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22 17
--- стр. 44 ---
в результате испытаний подтверждено, что влияние исследованных потенциально
интерферирующих веществ на ПЦР, проводимую с использованием набора
«Amplitech HPV ST (R)», отсутствует.
11.4 Прецизионность измерения
Коэффициент вариации повторяемости CVn значений концентрации,
характеризующий внутрисерийную повторяемость измерений с использованием
набора, не превышает 5 %.
Коэффициент вариации воспроизводимости C Vb значений концентрации,
характеризующий межсерийную воспроизводимость измерений с использованием
набора, не превышает 10 %.
11.5 Правильность измерения
Систематическая погрешность, характеризующая правильность измерения с
использованием набора, не превышает 15 %.
11.6 Диагностические характеристики
Значения диагностической чувствительности (ДЧ) и диагностической
специфичности (ДС) набора с доверительной вероятностью 95 % указаны в
таблице 12.
Таблица 12
Диагностические характеристики
Исследуемый материал
Количество образцов
положит, отрицат. ДЧ,% ДС,%
Мазки со слизистой оболочки влагалища в
транспортной среде, не предназначенной для 80 80 95,5-100 95,5-100
жидкостной цитологии
Соскобы эпителия со слизистой оболочки
цервикального канала в транспортной среде, не 140 142 97,4-100 97,4-100
предназначенной для жидкостной цитологии
Соскобы эпителия со слизистой оболочки
цервикального канала в среде для жидкостной 80 80 95,5-100 95,5-100
цитологии
11.7 Корреляция
Корреляция экспериментальных значений концентраций, полученных при
исследовании образцов биологического материала с использованием набора
реагентов «Amplitech HPV ST (R)» и референтного набора реагентов, представлена
на рисунке 2.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция B.22.11.22 18
--- стр. 45 ---
• 0 .9 9 S J I 0.0101
«'•0.9Ш
&I 600
•»«JJO
ё
& 2.00
■i
2.00 iX X > Л .0 0 S .O O 6.00
Amplitech HPV ST (R), lg (копий/10^клеток)
12 УСЛОВИЯ
НАБОРА
Рисунок 2
ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
12.1 Срок годности
Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления.
После вскрытия реагенты ПК HPV ST, ОК использовать до истечения срока
годности набора. После снятия защитной плёнки реагенты Смесь HPV ST (R)-1, Смесь
HPV ST (R)-2 использовать в течение 24 ч.
12.2 Хранение
Набор хранить при температуре от 2 °С до 8 °С в защищённом от солнечного света
месте. Планшет с реагентами HPV ST (R) беречь от влаги. Допускается хранить набор
при температуре от 8 "“С до 25 °С не более 5 суток.
Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия.
Не допускается оставлять реагенты на рабочем столе станции более чем на 24 ч.
12.3 Транспортирование
Набор транспортировать при температуре от 2 °С до 8 °С всеми видами крытых
транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в
авторефрижераторах. Допускается транспортировать набор при температуре от 8 °С
до 25 °С не более 10 суток.
12.4 Эксплуатация
Реагенты, входящие в состав набора, готовы к использованию.
Пробирки планшета с реагентами предназначены для однократного
использования.
Исследование образцов с использованием набора должно проводиться при
температуре от 18 до 25 и относительной влажности воздуха от 25 % до 75 %.
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22 19
--- стр. 46 ---
13 ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ
В настоящей инструкции применены следующие сокращения:
Ct
HPV
в.
ВК
впч
ВПЧ ВКР
ди
ДНК
ДНКаза
ОК
ПК
ПО
ПЦР
- cycle threshold (пороговый цикл)
- human papillomavirus
- версия
- внутренний контроль
- вирус папилломы человека
- вирус папилломы человека высокого канцерогенного риска
- доверительный интервал
- дезоксирибонуклеиновая кислота
- дезоксирибонуклеаза
- отрицательный контроль
- положительный контроль
- программное обеспечение
- полимеразная цепная реакция
14 БИБЛИОГРАФИЯ
1. Taswell С. Limiting dilution assays for the determination of immunocompetent cell
frequencies // J. Immunology, - 1981. - Vol. 126. - P. 1614-1619.
2. Allen G. Rodrigo. Paul C. Goracke, Kiarash Rowhanian, James I. Mullins. Quantitation
of target molecules from polymerase chain reaction-based limiting dilution assays // AIDS
research and human retroviruses. - 1997. - Vol. 13 (9). - P. 737-742.
15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ
ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты,
наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды.
Требования к изделиям и поддерживающей документации
ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы
испытаний
ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для
диагностики in vitro для профессионального применения
ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Изделия медицинские для диагностики in vitro. Оценка
стабильности реагентов для диагностики in vitro
ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при
маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной
документации. Часть 1. Основные требования
Amplitech HPV ST (R) Инструкция в.22.11.22 20
--- стр. 47 ---
16 ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям,
указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного
срока годности при соблюдении условий его транспортирования, хранения и
применения.
Рекламации на качество набора направлять в адрес производителя: ООО
«Амплитек», 109235, Москва, ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42,
тел. (495) 374-13-46, e-mail: support@amplitech.ru .
Сообщения о неблагоприятных событиях (инцидентах), возникших при работе с
набором и не указанных в данной инструкции, следует направлять производителю по
указанному выше адресу и в уполномоченный регуляторный орган согласно
действующему законодательству.
17 ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА
Консультацию по вопросам по работе с набором и его качеству можно получить по
контактам, указанным на официальном сайте производителя: www.amplitech.ru .
18 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
ы Л Изготовитель
гО
IVD
О Н
LOT
REF
Дата изготовления
Медицинское изделие для
диагностики in vitro
Обратитесь к инструкции по
применению
Содержимого достаточно для
проведения п тестов
Номер по каталогу
Код серии
Использовать до
Предел температуры
Не допускать воздействия
солнечного света
Беречь от влаги
tJ
Общество с ограниченной ответственностью «Амплитек»
(ООО «Амплитек»),
Россия, 109235, Москва.
ул. 1-я Курьяновская, д. 34, стр. 8, этаж 1 пом. II ком. 42
тел. (495) 374-13-46, www.amplitech.ru ,
e-mail: support@amplitech.ru
Amplitech HPV ST (R) Инструкция B.22. 11.22 21
--- стр. 48 ---
Лист регистрации изменений
Атр1КесЬ HPV 8Т (Р) Инструкция 22