Набор реагентов "PrenatFISH® для флуоресцентной гибридизации in situ" "PrenatFISH®" по ТУ 21.20.23-001-42874316-2021 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- на метафазных клетках, а для проведения анализа необходима культивация клеток, которая зани мает не менее 2 недель. Изменение количества хромосом не приводит к изменению геномных последовательностей, но вызывает нарушение дозы генов, что в свою очередь приводит к дисрегуляции клеточных процес сов. Идентификация анеуплоидий возможна по ключевым хромосомным участкам, которые традици онно используются цитогенетиками для их визуализации. Идентификация таких хромосом, как 18, X и Y осуществляется по специфичной альфа-сателлитной ДНК - D18Z1, DXZ1 и DYZ3, располо женных на центромерах соответствующих хромосом. Каждая хромосома в норме содержит только одну центромеру, по этой причине подсчет количества центромер считается объективным подходом в идентификации анеуплоидий. В случае с 13 и 21 хромосомами данный подход применять невоз можно, т.к. они имеют идентичные последовательноети альфа-сателлитной ДНК. Для их идентифи кации используются уникальные последовательности ДНК. Хромосомные регионы 13ql4 и 21q22.2 являются ключевыми областями для манифестации синдрома Патау и синдрома Дауна, соответ ственно. По этой причине многие ученые выбирают данные области для идентификации и подсчета количества копий 13 и 21 хромосом. Визуализация специфических хромосомных областей основана на принципе комплементарности (соответствия) меченной ДНК (входящей в тест-системы) и ДНК- мищени (исследуемая область хромосомы). Фрагменты ДНК, меченные флуорохромами, в процессе гибридизации диффундируют в область комплементарных последовательностей и закрепляются на них за счет образования водородных связей. По завершению гибридизации проводят отмывку пре паратов от избыточного количества ДНК-зондов и дополнительно окрашивают красителем DAPI. Данный краситель используется в качестве общего красителя ДНК, позволяя разграничить области ядер разных клеток, что является важным при подсчете основных сигналов меченной ДНК. Таким образом, в качестве аналита выступают участки ДНК, специфичные хромосомам 13, 18, 21, X и Y. Влияние интерферирующ их веществ Интерферирующие вещества гемоглобин (в концентрации 1000 мг/дл), билирубин (в концентра ции 60 мг/дл) и триглицериды (в концентрации 50 мг/дл) не оказывают влияния на результаты ана лиза в исследованных концентрациях. --- стр. 3 --- СОСТАВ И КОМ ПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА Набор реагентов «PrenatFISH® для флуореецен гной гибридизации in situ» “PrenatFISH®” по ТУ 21.20.23-001-42874316-2021, в составе: 1) ДНК-зонды (13/21) 2) ДНК-зонды (18/X/Y) 3) Комплектующие: 3.1) Краситель DAPI (DAPI) 3.2) Пепсин сухой (ПС) 3.3) Буфер пепсина (БП) 3.4) Буфер цитратно-солевой с игепалом 1 (БИ-1) 3.5) Буфер цитратно-солевой с игепалом 2 (БИ-2) 3.6) Буфер цитратно-солевой (БЦ) 3.7) Буфер фосфатно-солевой (БФ) 3.8) Буфер фосфатно-солевой с формальдегидом и хлоридом магния (БФ-Ф) - 1 флакон (200 мл); 3.9) Буфер цитратно-солевой с игепалом 3 (БИ-3) - 1 флакон (200 мл). 4) Инструкция по применению ~ 1 экз. 5) Паспорт -1 экз. - 1 пробирка (0,1 мл); - 1 пробирка (0,1 мл); - 1 пробирка (0,3 мл); - 4 пробирки (по 20 мг); - 4 флакона (по 50 мл); - 1 флакон (200 мл); - 2 флакона (по 200 мл); - 1 флакон (200 мл); - 2 флакона (по 200 мл); Компоненты набора упакованы в общую коробку. Коробка содержит инструкцию по примене нию, а также Паспорт, которые вложены в коробку. Ф ункциональные характеристики изделия: • Набор реагентов позволяют провести исследование 10 образцов, с использованием комплек тующих. • Компоненты набора реагентов готовы к применению. Комплектующие набора реагентов №№3.1, 3.4-3.9 готовы к применению. Содержимое комплектующего набора№ 3.2 (Пепсин сухой (ПС)) требуется перенести во флакон комплектующего № 3.3 (Буфер для пепсина (БП)) непосредственно перед использованием. М етоды стерилизации изделия Изделие не требует стерилизации. Программное обеспечение работы изделия Отсутствует. Техническое обслуживание и ремонт изделия Изделие не требует технического обслуживания и не подлежит ремонту. --- стр. 4 --- ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ в основе работы набора лежит качественный метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH). Настоящее изделие применяется для оценки количества клинически значимых аутосом и половых хромосом плода (пренатальный скрининг) с целью выявления таких аномалий, как трисомия 13 хро мосомы (Синдром Патау), трисомия 18 хромосомы (Синдром Эдвардса), трисомия 21 хромосомы (Синдром Дауна), моносомия X хромосомы (Синдром Шерешевского-Тёрнера), кариотип 47, XXY (Синдром Клайнфельтера), а также другие анеуплоидии половых хромосом (X и Y). Материал для исследования получают из амниотической жидкости плода (методом амниоцентеза, то есть аспира ции околоплодных вод). Полученные образцы клеток фиксируют и наносят на предметные стекла для последующей пробоподготовки. ДНК-зонды, входящие в состав набора - раствор двунитевых молекул ДНК, меченных флуорохромами, наносят на поверхность клеток и выполняют температур ную обработку (денатурация при плюс 72°С и гибридизация при плюс 37°С). На стадии денатура ции происходит расхождение комплементарных нитей ДНК исследуемых клеток и ДНК-зондов набора. На стадии гибридизации происходит ренатурация меченной ДНК со специфической ДНК клеток, соответствующей анализируемым областям генома. По завершению гибридизации препа раты отмывают от излишков ДНК-зондов и заключают в защитную среду с красителем DAPI. Ана лиз препаратов проводят под флуоресцентным микроскопом. Идентификация анеуплоидий проис ходит на основе визуальной информации о количестве и локализации флуоресцентных сигналов в ядрах интерфазных клеток. Каждый флуоресцентный сигнал указывает на расположение одной ко пии соответствующей хромосомы. В норме каждая исследуемая клетка содержит по два сигнала 13, 18 и 21 хромосомы, а также два сигнала X хромосомы в случае женского кариотипа или по одному сигналу X и Y хромосомы в случае мужского кариотипа. Скрининг анеуплоидий плода по 13, 18, 21, X и Y хромосомам является социально значимой задачей, т.к. нарушения количества данных хромосом приводит к рождению детей с множественными пороками развития. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Чувствительность и специфичность набора определялась на архивных клинических образцах предоставленных испытательной лабораторией и подтверждены на стандартных образцах предпри ятия. Таблица 1. Аналитические и диагностические характеристики Набор реагентов «PrenatFlSH® для флуоресцентной гибридизации in situ» "PrenatFISH®" по ТУ 21.20.23-00 F 42874316-2021. Характеристики Чувствительность Специфичность Способ расчета Значение Способ расчета Значение Аналитические характеристики Аналитическая чувствитель ность определяется на препа ратах, содержащих клетки с анеуплоидией по 13, 18, 21, X или Y хромосомам человека, как отношение количества клеток с выявленной анеупло идией к общему количеству истинно анеуплоидных кле ток. Величина выражается в процентах. 100% Аналитическая специфич ность определяется на пре паратах, содержащих клетки без анеуплоидии по 13, 18, 21, X и Y хромосо мам человека, как отноше ние количества клеток без выявленных анеуплоидий к общему количеству ис тинно нормальных клеток. Величина выражается в процентах. 100% Диагностические характеристики Диагностическая чувствитель ность определяется как отно шение количество пациентов с полученными положитель ными тестами к общему коли честву пациентов с истинно положительными тестами. Ве личина выражается в процен тах. 100% Диагностическая специ фичность определяется как отношение количество па циентов полученными с отрицательными тестами к общему количеству паци ентов с истинно отрица тельными тестами. Вели чина выражается в процен тах. 100% --- стр. 5 --- Повторяемость и воспроизводимость результатов анализа составляет 100%. Влияние интерферируюпдих веществ на результаты анализа. Интерферирующие вещества: - гемоглобин (в концентрации 1000 мг/дл); - билирубин (в концентрации 60 мг/дл); - триглицериды (в концентрации 50 мг/дл); не оказывают влияния на результаты анализа. ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Для FISH-исследований с использованием набора применяют образцы клеток амниотической жидкости (культивированных и некультивированных). Для всех протоколов отбор материала осуществляется в профильных ЛПУ (Лечебно-профилак тические учреждения) квалифицированными медиками. Возможно использование готовых, а также уже исследованных препаратов, имеющихся в распоряжении медицинских организаций. Сбор биологического материала должен производиться в соответствии с ГОСТ Р 53079.4-2008 «Обеспечение качества клинических лабораторных исследований». Образцы клеток амниотической жидкости получают путем амниоцентеза на 15-20 неделе бере менности. Образцы до исследования рекомендуется хранить при температуре +2+8° С. Для получения до стоверных результатов рекомендуется производить фиксацию или культивирование клеток в мини мально возможные сроки после забора образцов клеток, но не позднее 48 часов от момента сбора образцов. Клетки, фиксированные фиксатором Карнуа (3:1), можно хранить в течение одного года при температуре -20°С. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ №4н от 6 июня 2012 г.), ГОСТ 31508. Реагенты, входящие в состав комплектующих набора (БИ-1, БИ-2, БИ-3, БФ, БФ-Ф, БЦ), со держат натрия азид в безопасной концентрации. Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение правил "Инструкции по мерам про филактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических ла бораториях лечебно-профилактических учреждений" (Утв. Минздравом СССР 17 января 1991 г.), ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003). Не допускается использование набора и его компонентов после истечения срока годности или при наличии видимых дефектов. При работе с набором следует использовать лабораторную одежду, перчатки и защитные очки для защиты кожных покровов и глаз от прямых контактов с компонентами набора.