Набор реагентов для выделения ДНК из клинических образцов (РеалБест ДНК-экспресс) по ТУ 9398-412-23548172-2013 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2015/2300 от 22.01.2015 · класс риска 1

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Набор для экстракции/изоляции нуклеиновых кислот ИВД

В госконтрактах 44-ФЗ: 326 контрактов, медианная цена за единицу 3 939 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ» 
Генеральный диреетор 
АО «Вектор-Бест»
М.Д. Хусаинов
« . 2021 г.
. » etr- TOP
ИНСТРУКЦИЯ
ПО применению набора реагентов для выделения ДНК из клинических образцов
«РеалБест ДНК-экспресс»
по ТУ 9398-412-23548172-2013
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор реагентов «РеалБест ДНК-экспресс» (далее по тексту -  набор) предназначен 
для транспортировки биопроб и выделения ДНК из соскобов эпителиальных клеток со 
слизистой цервикального канала, уретры, влагалища, ротоглотки, конъюнктивы глаза, а 
также спермы, слюны и мочи человека.
1.2. Набор может быть применён в клинической практике при диагностике различных 
инфекционных заболеваний человека методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
1.3. Набор рассчитан на выделение ДНК из 100 образцов, включая контрольные 
образцы.
1.4. Набор адаптирован только для применения с ПЦР-наборами серии «РеалБест» для 
выявления ДНК методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
Набор «РеалБест ДНК-экспресс» содержит комплект готовых для применения 
пробирок с расфасованным транспортным раствором и пробирок с расфасованным 
лизирующим раствором.
Пробирки с транспортным раствором предназначены для забора и транспортировки 
биологических проб. Лизирующий раствор -  это многокомпонентный раствор, содержащий 
внутренний контрольный образец (ВКО).
Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: директором по производ­
ству Ткачевым В.К. и нач. отделения производство ПЦР-наборов Трухиной А.В.


--- стр. 2 ---
После того, как биологическая проба в транспортном растворе доставляется в лабора­
торию, часть ее переносится в пробирку с лизирующим раствором. Прогрев пробы при 98 °С 
в лизирующем растворе приводит к лизису клеток, выходу ДНК в раствор. После этого про­
ба готова к постановке реакции ПЦР.
При планировании вьщеления ДНК следует предусмотреть, чтобы при каждом вьщеле- 
НИИ наравне с биологическими пробами процедуру вьщеления проходили отрицательный кон­
трольный образец и положительный контрольный образец (ПКО), который является компонен­
том наборов серии «РеалБест» для ПЦР-анализа.
2.2. Состав набора
В состав набора входят:
-  транспортный раствор -  100 пробирок (по 300 мкл);
-  лизирующий раствор с ВКО -  100 пробирок (по 500 мкл);
-  отрицательный контрольный образец (ОКО) -  2 флакона (по 1,0 мл).
3. ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
3.1. Тест на отсутствие ингибирования по четырем отрицательным биопробам из СОП 05- 
2-440 -  100%. Набор соответствует техническим условиям по критерию отсутствия ингиби­
рования, если во всех четырех биопробах (100%) определяется наличие ВКО (значение Ct 
ВКО по каналу РАМ меньше или равно 40).
3.2. Эффективность вьщеления ДНК Mycoplasma hominis  -  100%. Эффективность 
выделения ДНК Mycoplasma hominis  определяется по четырем образцам с концентрацией 100 
копий в пробе, приготовленным из лиофилизированной смеси, содержащей ДНК Mycoplasma  
hominis  из СОП 05-2-440, как процентное содержание образцов, определённых как 
положительные при ПЦР анализе.
3.3. Эффективность вьщеления ДНК, определенная на 95 положительных образцах со- 
скобов эпителиальных клеток урогенитального тракта, ротоглотки, конъюнктивы глаза, а 
также образцов спермы, слюны и мочи - 100% (интервал 97%-100%, с доверительной веро­
ятностью 90%);
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание!  Несоблюдение описанных ниже требований может привести к  
искажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора -  класс 1 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности {опасности)  и возбудителями паразитарных 
болезней».


--- стр. 3 ---
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
вьщеления ДНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы лабора­
торий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, 
содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе­
ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За­
прещается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Вьщеление ДНК следует проводить в ламинарных боксах II класса защиты с 
включенным ламинарным потоком.
4.7. Для выделения ДНК необходимо использовать только одноразовые наконечники с 
фильтром.
4.8. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.9. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все ра­
бочие поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп 
в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами де­
зинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор «ДП-2Т»; 1-3% раствор «Диабак»; 
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»; 0,5-2% раствор «Велтолен»).
4.10. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици­
рующими средствами с последующей утилизацией (см. МУ-287-113-00 «Методические ука­
зания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинско­
го назначения»).
4.11. Утилизацию или уничтожение, дезинфекцию наборов реагентов следует прово­
дить в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к 
обращению с медицинскими отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезин­
фекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
-  ламинарный бокс 2 класса биологической защиты (бокс абактериальной воздушной 
среды типа БАВп-01-«Ламинар-с», фирма Ламинарные системы, Россия или аналогичный);
-  холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С;
-  микроцентрифуга типа «Eppendorf» с максимальной скоростью вращения не менее 
8000 об/мин («MiniSpin», фирма Eppendorf, Германия или аналогичная);
-  встряхиватель для пробирок вихревой типа «Вортекс» («Bio-Vortex V-1 plus», фирма


--- стр. 5 ---
6.3.5. Перенести пробирки в центрифугу и центрифугировать при 8000 об/мин при 
комнатной температуре в течение 5 минут.
6.3.6. Перенести пробирки в штатив, из каждой пробирки отобрать надосадочную 
жидкость пипеткой (или вакуумным отсасывателем)  с отдельным наконечником, не задевая 
осадок.
6.3.7. При получении большого количества осадка промыть его, добавив 500 мкл 
транспортного раствора. Повторить процедуру перемешивания, центрифугирования и отби­
рания надосадочной жидкости (см. п. 6.3.4- 6.3.6).
6.3.8. В каждую пробирку с осадком клеток перенести полностью весь объём (500 мкл)  
раствора из соответствующей пробирки с лизирующим раствором.
6.3.9. Тщательно перемещать на вортексе в течение 10 секунд. Проба готова к проце­
дуре вьщеления (п. 7.7).
6.3.10. Транспортировать и хранить образцы соскобов эпителиальных клеток, а также 
образцы слюны, спермы и мочи следует:
-  при температуре от 18 до 25 ®С не более 2 часов;
-  при температуре от 2 до 8 ®С не более 1  суток;
-  при температуре минус (18-60)°С не более 2 недель.
6.4. Подготовка компонентов набора.
Извлечь из набора для ПЦР серии «РеалБест» флакон с ПКО.
7. ВЫДЕЛЕНИЕ ДНК
Перед началом работы необходимо достать набор из холодильника и выдержать при 
температуре от 18 до 25 °С не менее 30 мин.
Внимание! Для образцов мочи проводить выделение нуклеиновых кислот, начиная с п. 1.7.
7.1. Отобрать необходимое количество пробирок с лизирующим раствором (по числу 
подготовленных проб, включая отрицательный и положительный контроли). Промаркиро­
вать пробирки, установить их в штатив.
7.2. Коротким центрифугированием сбросить капли со стенок пробирок с транспорт­
ным раствором, содержащим анализируемый материал.
7.3. В пробирки, содержащие лизирующий раствор, внести по 100 мкл пробы*, ис­
пользуя наконечники с аэрозольным барьером.
*Перед внесением пробы аккуратным пипетированием ресуспендировать осадок из  
клеток, полученный в пробирке с транспортной средой после центрифугирования, чтобы в  
выделение попала суспензия клеток.
7.4. В пробирку положительного контроля выделения внести 100 мкл положительного


--- стр. 6 ---
'контрольного образца (ПКО).
7.5. В пробирку отрицательного контроля вьщеления внести 100 мкл отрицательного 
контрольного образца (ОКО).
7.6. Пробирки плотно закрыть крышками и тщательно перемешать содержимое проби­
рок на вортексе в течение 10 секунд.
7.7. Поместить пробирки в предварительно прогретый до 98 °С термостат и прогреть 
при температуре 98 °С в течение 15 мин.
7.8. После прогрева пробирки необходимо охладить до температуры от 18 до 25 пе­
ренести в центрифугу и центрифугировать при 8000 об/мин при температуре от 18 до 25 °С в 
течение 5 мин.
7.9. Полученный в результате центрифугирования супернатант использовать в качестве 
исследуемого образца ДНК для постановки амплификации.
Внимание! Выделенная ДНК может храниться при температуре от 2 до 8^С не бо­
лее 24 часов.
8. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
8.1. Транспортирование наборов должно проводиться при температуре от 2 до 8 °С. 
Допускается транспортирование наборов при температуре до 25 °С не более 10 сут.
Замораживание компонентов набора не допускается.
8.2. Набор реагентов «РеалБест ДНК-экспресс» должен храниться в упаковке предпри­
ятия-изготовителя при температуре от 2 до 8°С в течение всего срока годности (12 мес).
8.3. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции 
по применению набора.
Набор адаптирован только для применения с ПНР-наборами сепии «РеалБест»!
9. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ
9.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям нор­
мативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
9.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возник­
ших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, ли­
бо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
9.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио­
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив­
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого 
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.


--- стр. 7 ---
срок годности набора -  12 месяцев со дня выпуска.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест ДНК-экспресс», следует обра­
щаться в АО «Вектор-Бест» по адресу:
630117, г. Новосибирск-117, а/я 492,
тел. (383) 252-51-62, 227-60-30; тел./факс (383) 252-51-81, 252-51-77.
E-mail: Dlkobtk(^.vector-best. ru
Консультацию специалиста по работе с набором можно получить по тел.: (383) 252-51-75.
Начальник отделения 
АО «Вектор-Бест» А.В. Трухина
Директор по производству 
АО «Вектор-Бест» В.К. Ткачев