Набор реагентов для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови «МагноПрайм® DrySpot» по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 --- IVD__ • • • • АмплиПрайм / Набор реагентов для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови «МагноПрайм® DrySpot» по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023 МагноПрайм® DrySpot ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ mJ ООО «НекстБио», Россия, 111394, г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2, тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru А НекстБИО Биотехнологическая компания --- стр. 3 --- ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИИ И ОБОЗНАЧЕНИЙ........................................................................................3 1. НАЗНАЧЕНИЕ.........................................................................................................................................4 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА................................................................................................................4 2.1. Состав и комплектность................................................................................................................4 2.2. Принцип метода..............................................................................................................................5 2.3. Техническое обслуживание и ремонт.......................................................................................5 3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА..........................................................................................................................5 3.1.Отрицательный и положительный контроли экстракции ДНК.............................................5 3.2. Контроль ингибирования..............................................................................................................5 3.3. Мониторинг лаборатории на наличие контаминации ...........................................................6 4. ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА......................................................................................................................6 5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ....................................................................7 6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ..................................................................9 6.1. Взятие исследуемого материала.................................................................................................9 6.2. Предварительная подготовка исследуемого материала.......................................................9 6.3. Автоматическая методика экстракции ДНК ...........................................................................10 6.4. Ручная методика экстракции ДНК.............................................................................................10 7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ.............................................................................................................11 7.1. Сухие пятна крови.........................................................................................................................11 7.2. Цельная кровь................................................................................................................................11 8. ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА..................................................................12 8.1. Предварительная подготовка исследуемого материала (только для сухих пятен крови).................................................................................................................................................12 8.2. Автоматическая методика экстракции....................................................................................12 8.3. Ручная методика экстракции с использованием магнитного штатива .............................14 8.4. Ручная методика экстракции с использованием центрифугирования .............................16 8.5. Хранение очищенной ДНК..........................................................................................................18 9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА ........................................................................18 9.1. Чистота экстрагированной ДНК.................................................................................................18 9.2. Влияние интерферирующих веществ и ДНК человека .........................................................18 10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА..............................19 10.1. Срок годности...............................................................................................................................19 10.2. Транспортирование....................................................................................................................19 10.3. Хранение.......................................................................................................................................19 11. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ...........................................................................................................19 12. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ДОКУМЕНТАЦИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ ....................................20 Версия 09.01.24-1 --- стр. 4 --- список СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ вко - внутренний контрольный образец ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ДНКаза - дезоксирибонуклеаза НК - нуклеиновые кислоты ОКО - отрицательный контрольный образец экстракции ПКО - положительный контрольный образец ПЦР - полимеразная цепная реакция РУ - регистрационное удостоверение ТУ - технические условия ДНК-карта (FTA-карта) - карта для сбора образцов биоматериала НАИМЕНОВАНИЕ ИЗДЕЛИЯ Набор реагентов для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови «МагноПрайм® DrySpot» по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023. Далее по тексту употребляется краткое наименование: Набор реагентов «МагноПрайм® DrySpot», а также сокращение Набор реагентов. Версия 09.01.24-1 --- стр. 5 --- 1. НАЗНАЧЕНИЕ 1.1. Набор реагентов «МагноПрайм® DrySpot» предназначен для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови для последующего исследования методом ПЦР. Набор может использоваться для ручной экстракции с использованием магнитного штатива или центрифугирования^ а также совместно с автоматическими станциями для экстракции нуклеиновых кислот, при условии, что запрограммирована последовательность действий, изложенная в инструкции по применению набора. 1.2. Материалом для проведения экстракции служат пробы биологического материала, указанного в разделе инструкции «Исследуемый материал». 1.3. Функциональное назначение: Набор реагентов предназначен для использования в качестве вспомогательного средства для диагностики in vitro (выделение ДНК из биологического материала для дальнейшего исследования методом ПЦР). 1.4. Показания к проведению исследования: Набор реагентов используется в клинической лабораторной диагностике, как вспомогательное средство для выделения ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови и последующего исследования методом ПЦР. Может быть использован в комплексном анализе при скрининге новорожденных детей на наследственные заболевания. 1.5. Применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 2.1. Состав и комплектность Набор выпускается в единой форме. Состав набора и комплектность поставки указаны в таблицах 1 и 2 соответственно. Набор предназначен для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови для последующего исследования методом ПЦР. Набор рассчитан на проведение экстракции ДНК из 96 образцов, включая контроли. Форма может быть использована как для ручной экстракции, так и совместно с автоматическими станциями для экстракции НК. Таблица 1 Состав набора Компонент Объем, мл Количество Описание Реагент s' Опасно 46,0 1 флакон Раствор для пробоподготовки. Прозрачная жидкость^. Буфер L' Опасно 53,0 1 флакон Лизирующий раствор. Прозрачная жидкость^. Буфер W 2' Опасно 75,0 2 флакона Раствор для отмывки. Прозрачная жидкость. Буфер W3' Опасно 75,0 1 флакон Раствор для отмывки. Прозрачная жидкость. Буфер Е1 15,0 1 флакон Раствор для элюции. Прозрачная жидкость. мгс 1,1 1 пробирка Сорбент (магнетизированная силика). Суспензия. Реагент А 1,1 1 пробирка Вспомогательный реагент для проведения лизиса. Прозрачная жидкость. ^ Реагенты содержат опасные вещества. Информацию по опасным веществам и мерам предосторожности при работе с реагентами см. в разделе инструкции «Меры предосторожности и предупреждения». ^ При хранении Реагента S и Буфера L возможно образование осадка в виде кристаллов. Версия 09.01.24-1 --- стр. 6 --- Таблица 2 Комплектность набора Компонент Формат Количество Набор реагентов - 1 Инструкция по применению набора в электронном виде^ на официальном сайте Производителя: www.nextblo.ru - Краткое руководство по применению набора в бумажном виде 1 Паспорт качества в электронном виде на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru - 2.2. Принцип метода Материалом для выделения ДНК могут служить сухие пятна крови, предварительно обработанные Реагентом S, или цельная кровь. Исследуемый образец обрабатывается лизирующим раствором в присутствии частиц магнетизированной силики - магнитного сорбента. В результате происходит деструкция клеточных мембран и других биополимерных комплексов и высвобождение ДНК. Растворенная ДНК связывается с частицами сорбента, в то время как другие компоненты лизированного биологического материала остаются в растворе и удаляются при осаждении сорбента на магнитном штативе/стержне или с использованием центрифуги и с последующими отмывками сорбента. При добавлении буфера для элюции ДНК к магнитному сорбенту происходит переход ДНК с поверхности силики в раствор, который затем отделяется от частиц сорбента магнитной силой либо центрифугированием. 2.3. Техническое обслуживание и ремонт Набор не подлежит техническому обслуживанию и ремонту. 3. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Контроль этапа экстракции ДНК осуществляется одновременно с оценкой достоверности результатов этапа амплификации. 3.1. Отрицательный и положительный контроли экстракции ДНК Для оценки качества получаемых результатов каждая группа экстрагируемых образцов должна включать контрольные образцы, если они предусмотрены для проведения исследования согласно инструкции к используемому набору реагентов для проведения амплификации: - отрицательный контрольный образец экстракции (ОКО) для подтверждения отсутствия ложноположительных результатов и контроля контаминации. В качестве ОКО используют реагент, входящий в состав набора реагентов для проведения амплификации; - положительный контрольный образец (ПКО), если он предусмотрен для проведения ПЦР-исследования. В качестве ПКО используют реагент, входящий в состав набора реагентов для проведения амплификации. Результаты для контролей должны соответствовать заданным критериям валидности, указанным в инструкции по применению набора реагентов для проведения амплификации. 3.2. Контроль ингибирования Для оценки влияния ингибиторов на результаты амплификации в ПЦР-исследовании может использоваться экзогенный"^ и эндогенный^ ВКО. Экзогенный ВКО необходимо добавить в каждый исследуемый и контрольный образец согласно инструкции по применению набора реагентов для проведения амплификации. ВКО проходит все стадии экстракции совместно с анализируемыми образцами. Результаты исследования ВКО должны соответствовать заданным критериям валидности, указанным в инструкции по применению набора для проведения амплификации. ^ Печатная версия инструкции доступна по запросу по телефону (495) 620-08-73. ^ ВКО, входящий в состав набора реагентов для проведения амплификации. ^ В качестве эндогенного ВКО используются мишени, предусмотренные набором реагентов для проведения амплификации. Версия 09.01.24-1 --- стр. 9 --- - Использовать одноразовые неопудренные перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во время работы с образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по окончании работы. Все операции проводятся только в перчатках для исключения контакта с организмом человека. - Не есть, не пить и не курить в процессе использования набора. Избегать вдыхания паров, контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой. Не глотать. - При контакте немедленно промыть пораженное место большим количеством воды и при плохом самочувствии обратиться за медицинской помощью. При попадании внутрь, рвоту не вызывать, прополоскать рот водой, обратиться к врачу при плохом самочувствии. - Входящие в состав набора реагенты Реагент S, Буфер L, Буфер W2 и Буфер W3 содержат опасные вещества, указанные в таблице 3. Заявления об опасности и меры предосторожности, требуемые при работе с данными реагентами, приведены в таблице 3. Расшифровка кодов для заявлений об опасности и мер предосторожности представлена в таблице 4. Таблица 3 Заявления об опасности и меры предосторожности при работе с Реагентом S, Буфером L, Буфером W2 и Буфером W3 Реагент Опасные вещества Заявления об опасности Меры предосторожности РеагентS гуанидин тиоцианат, тритон Х-100, 1-тиоглицерол Н302, H 3li, Н312, Н315, Н319, Н332, Н411, Н412, EUH032 Р261, Р264, Р270, Р271, Р273, Р280, Р303+Р361+Р353, Р305+Н351+Р338, Р312, Р332+Р313, Р337+Р313, Р362+Р364, Р501 Буфер L изопропанол, гуанидин гидрохлорид, гуанидин тиоцианат, тритон Х-100, 1-тиоглицерол Н225, Н302, Н311, Н312, Н315, Н319, Н332, Н336, Н411, Н412, EUH032 Р210, Р233, Р241, Р242, Р261, Р264, Р270, Р271, Р273, Р280, Р303+Р361+Р353, Р305+Р351+Р338, Р312, Р332+Р313, Р337+Р313, Р362+Р364, Р370+Р378, Р403+Р235, Р501 Буфер W2 изопропанол Н225, Н319, Н336 Р210, Р233, Р241, Р242, Р261, Р264, Р271, Р280, Р303+Р361+Р353, Р305+Р351+Р338, Р312, Р337+Р313, Р370+Р378, Р403+Р235, Р501 Буфер W3 изопропанол Н225, Н319, Н336 Р210, Р233, Р241, Р242, Р261, Р264, Р271, Р280, Р303+Р361+Р353, Р305+Р351+Р338, Р312, Р337+Р313, Р370+Р378, Р403+Р235, Р501 Таблица 4 Расшифровка кодов для заявлений об опасности и мер предосторожности Заявления об опасности Н225: Легковоспламеняющаяся жидкость и пар. Н302: Вредно при проглатывании. Н311: Токсично при контакте с кожей. Н312: Вредно при контакте с кожей. Н315: Вызывает раздражение кожи. Н319: Вызывает серьезное раздражение глаз. Н332: Вредно при вдыхании. Н336: Может вызывать вялость или сонливость. Н411: Токсично для водных организмов с долгосрочными последствиями. Н412: Вредно для водных организмов с долгосрочными последствиями. EUH032: При контакте с кислотами освобождаются очень токсичные газы. Меры предосторожности Р210: Хранить вдали от источников тепла, горячих поверхностей, искр, открытого пламени и других источников воспламенения. Не курить. Р233: Хранить в плотно закрытой таре. Р241: Использовать взрывобезопасное электрическое оборудование. Р242: Используйте только неискрящие инструменты. Р261: Избегать вдыхания паров. Р264: Вымойте руки после работы тщательно. Р270: Не еаь, не пить и не курить в процессе использования этого продукта. Р271: Используйте только на открытом воздухе или в хорошо вентилируемом помещении. Р273: Избегать попадания в окружающую среду. Р280: Пользоваться защитными перчатками и средствами защиты глаз. Р303+Р361+Р353: ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ (или волосы): Немедленно снять всю загрязненную одежду. Промыть кожу водой или принять душ. Р305+Р351+Р338: ПРИ ПОПАДАНИИ В ГЛАЗА: Осторожно промыть глаза водой в течение нескольких минут. При наличии контактных линз, снять их и продолжить промывание водой. Р312: Обратиться к врачу при плохом самочувствии. Р332+Р313: При раздражении кожи: обратиться к врачу. Р337+Р313: Если раздражение глаз не проходит, обратиться за медицинской консультацией. Р362+Р364: Снять загрязненную одежду и выстирать ее перед повторным использованием. Р370+Р378: В случае пожара: Использовать огнетушитель для тушения. Р403+Р235: Хранить в прохладном, хорошо вентилируемом месте. Р501: Утилизировать содержимое в соответствии с национальными правилами СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно- эпидемиологические требования к содержанию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой воде и питьевому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, эксплуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий»^ _________________________________________ Версия 09.01.24-1 --- стр. 10 --- - Остальные реагенты, входящие в состав набора, содержат натрия азид в концентрации не более 0,1 % и, соответственно, не классифицируются как опасные и не требуют соблюдения специальных мер предосторожности, кроме указанных в данном разделе. - Листы безопасности реагентов Реагент S, Буфер L, Буфер W2 и Буфер W3 доступны по запросу. - Использование набора по назначению и соблюдение вышеперечисленных мер предосторожности исключает негативное воздействие на организм человека. При аварийных ситуациях возможно причинение вреда при попадании на кожу и слизистую оболочку глаз, при вдыхании и при проглатывании. 5.4. Специфические воздействия набора на организм человека: - Канцерогенный эффект отсутствует. - Мутагенное действие отсутствует. - Репродуктивная токсичность отсутствует. 6. ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ 6.1. Взятие исследуемого материала 6.1.1. Карты для сбора образцов биоматериала «ДНК-карта» (FTA-карта), рекомендованные производителем для сбора, хранения и транспортировки образцов капиллярной и венозной крови человека для последующего исследования методом ПЦР. 6.1.2. Скарификатор (ланцет) стерильный, одноразовый. 6.1.3. Вакуумные пробирки для взятия крови с антикоагулянтом (раствором ЭДТА или цитратом натрия). 6.1.4. Двухсторонняя игла для взятия крови в вакуумную пробирку, одноразовая, стерильная. 6.2. Предварительная подготовка исследуемого материала 6.2.1. Ламинарный бокс класс биологической безопасности II тип А. 6.2.2. Автоматический перфоратор или ручной дырокол, позволяющие выбивать бумажные диски диаметром 3,0; 3,2 или 6,0 мм. 6.2.3. Вортекс. 6.2.4. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл с ускорением не менее 10 000 g. 6.2.5. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся пробирки и крышки к ним или плотно закрывающиеся пробирки объемом 1,5 мл, свободные от ДНКаз. 6.2.6. Термостат для пробирок типа «Эппендорф» с возможностью нагрева не менее чем до 80 ®С. 6.2.7. Одноразовые наконечники, свободные от ДНКаз, для дозаторов переменного объема с фильтром до 100 мкл, до 200 мкл и до 1000 мкл. 6.2.8. Штативы для пробирок объемом 1,5 мл. 6.2.9. Автоматические дозаторы переменного объема. 6.2.10. Холодильник от 2 ®С до 8 '’С. 6.2.11. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки в соответствии с МУ 1.3.2569-09. 6.2.12. Одноразовые пластиковые контейнеры для сброса и инактивации материалов. Версия 09.01.24-1 9 --- стр. 11 --- 6.3. Автоматическая методика экстракции ДНК ВНИМАНИЕ! При работе с набором следует использовать только одноразовые полипропиленовые пробирки и наконечники, сертифицированные на отсутствие ДНКаз. 6.3.1. Ламинарный бокс класс биологической безопасности II тип А. 6.3.2. Вортекс. 6.3.3. Автоматическая станция для экстракции НК, зарегистрированная в РФ и удовлетворяющая следующим требованиям: - возможность реализации последовательности этапов экстракции, описанной в разделе «Экстракция ДНК из исследуемого материала» (п. 8.2.2.); - наличие системы дозирования жидкостей; - наличие магнитного штатива или магнитных стержней для сбора магнетизированной силики; - наличие термостата или термошейкера с возможностью нагрева не менее чем до 80 '’С; - наличие системы перемешивания жидкостей шейкированием или пипетированием. В ходе проведения испытаний валидацию прошли следующие автоматические станции для экстракции нуклеиновых кислот: Microlab STARIet (РУ N9 РЗН 2018/6981), KingFisher Flex (РУ № ФСЗ 2009/05562), Auto-Pure 96 (РУ № РЗН 2022/16430), Nexor 96 (РУ № РЗН 2022/18023). 6.3.4. Комплект расходных материалов для автоматической станции для экстракции НК согласно инструкции Производителя. 6.3.5. Холодильник от 2 "С до 8 “С. 6.3.6. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки в соответствии с МУ 1.3.2569-09. 6.3.7. Одноразовые пластиковые контейнеры для сброса и инактивации материалов. 6.4. Ручная методика экстракции ДНК 6.4.1. Одноразовые полипропиленовые завинчивающиеся пробирки и крышки к ним или плотно закрывающиеся пробирки объемом 1,5 мл, свободные от ДНКаз. 6.4.2. Одноразовые наконечники, свободные от ДНКаз, для дозаторов переменного объема с фильтром до 100 мкл, до 200 мкл и до 1000 мкл. 6.4.3. Одноразовые наконечники для дозаторов переменного объема без фильтра до 200 мкл. 6.4.4. Штативы для пробирок объемом 1,5 мл. 6.4.5. Магнитный штатив для пробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл - при проведении экстракции с использованием магнитного штатива (см. раздел «Экстракция ДНК из исследуемого материала», п. 8.3.2.). 6.4.6. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл с ускорением не менее 10 000 g - при проведении экстракции с использованием центрифугирования (см. раздел «Экстракция ДНК из исследуемого материала», п. 8.4.2.). 6.4.7. Ламинарный бокс класс биологической безопасности II тип А. 6.4.8. Вортекс. 6.4.9. Термостат для пробирок типа «Эппендорф» с возможностью нагрева не менее чем до 80 **С. Версия 09.01.24-1 10 --- стр. 12 --- 6.4.10. Вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидкости. 6.4.11. Автоматические дозаторы переменного объема. 6.4.12. Холодильник от 2 до 8 "С. 6.4.13. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки в соответствии с МУ 1.3.2569-09. 6.4.14. Одноразовые пластиковые контейнеры для сброса и инактивации материалов. 7. ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ Материалом для исследования служат: - сухие пятна крови; - цельная кровь. Взятие, предварительную обработку, транспортирование и хранение исследуемого биологического материала следует проводить в соответствии с нижеперечисленными требованиями, несоблюдение которых может привести к получению некорректных результатов исследования. 7.1. Сухие пятна крови Сухие пятна крови получают путем нанесения на ДНК-карту (FTA-карту) нативной капиллярной крови, прикладывая ДНК-карту к скарифицированному участку кожи, либо путем нанесения на ДНК-карту венозной крови, предварительно отобранной в вакуумные пробирки для взятия крови с антикоагулянтом (раствором ЭДТА или цитратом натрия). Примечание: взятие образцов крови у пациентов, последующее изготовление сухих пятен крови, их транспортировка и хранение проводится в соответствии с Инструкциями производителей к ДНК-картам, рекомендованным для этого. 7.2. Цельная кровь Взятие крови проводится натощак или через 3 часа после приема пищи в пробирку с антикоагулянтом (раствором ЭДТА или цитрата натрия). ВНИМАНИЕ! Недопустимо использовать гепарин в качестве антикоагулянта. Для тщательного перемешивания крови с антикоагулянтом необходимо несколько раз перевернуть пробирку. Допускается хранение образцов цельной крови до проведения ПЦР-исследования: - при температуре от 18 X до 25 - в течение 2 часов с момента получения материала; - при температуре от 2 "С до 8 '’С - в течение 3 суток с момента получения материала. ВНИМАНИЕ! Недопустимо замораживание образцов цельной крови. ВНИМАНИЕ! Предварительная подготовка цельной крови (обработка Реагентом S) не требуется. Версия 09.01.24-1 11 --- стр. 13 --- 8. ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА Экстракция ДНК должна проводиться при нормальных показателях микроклимата клинико-диагностической лаборатории^: - температура окружающего воздуха от 20 до 28 X ; - относительная влажность от 40% до 75%. 8.1. Предварительная подготовка исследуемого материала (только для сухих пятен крови) ВНИМАНИЕ! Перед экстракцией необходимо провести предобработку сухих пятен крови. 8.1.1. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл для каждого тест-бланка (исследуемого образца). Промаркировать. 8.1.2. Выбить с помощью автоматического перфоратора или ручного дырокола бумажный диск из сухого пятна крови. Для получения одного препарата ДНК необходимо из тест-бланка выбить 3 диска диаметром 3,0 мм (допускается использование трех дисков диаметром 3,2 мм) или 1 диск диаметром 6,0 мм. ВНИМАНИЕ! Выбитые диски должны быть полностью пропитаны кровью. Рекомендуется выбивать диски из центральной области пятна, не захватывая область ограничивающей краски. Примечание: перед выбиванием дисков для каждого нового образца рекомендуется сделать 2-3 высечки на чистом участке фильтровальной бумаги, что позволит снизить риск контаминации нового образца фрагментами от предыдущих высечек. По завершении процедуры выбивания дисков проведите обработку лезвия перфоратора согласно инструкции к нему. 8.1.3. Поместить выбитые диски в промаркированные пробирки для исследуемых образцов. Примечание: Реагент S (если хранился при температуре от 2 “С до 8 ®С) прогреть при температуре 75 °С до полного растворения кристаллов. Перемешать взбалтыванием. 8.1.4. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл для исследуемых образцов по 400 мкл Реагента S. Тщательно перемешать содержимое пробирок на вортексе. 8.1.5. Поместить пробирки в термостат с температурой 75 °С на 15 минут, перемешивая каждые 2 минуты. 8.1.6. Центрифугировать в течение 3 минут при 10 000 g. 8.1.7. Отобрать полностью надосадочную жидкость, не упираясь наконечником в диски. Перенести в чистые пробирки. Примечание: процедуру пробоподготовки необходимо проводить непосредственно перед экстракцией ДНК. Предобработанный материал хранению не подлежит. 8.1.8. Далее провести экстракцию в соответствии с п. 8.2, 8.3 или 8.4. 8.2. Автоматическая методика экстракции ВНИМАНИЕ! При использовании автоматической станции для экстракции НК необходимо ознакомиться с инструкцией по эксплуатации данной автоматической станции и запрограммировать последовательность действий, указанную в п. 8.2.2. ВНИМАНИЕ! Если в состав набора для проведения амплификации включены ВКО, отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы^®, то их необходимо использовать на стадии экстракции согласно инструкции по применению данного набора. ® Указаны допустимые нормы температуры и относительной влажности воздуха в рабочей зоне производственных помещений в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Результаты постановки контролей используются при оценке достоверности результатов ПЦР-исследования биологических образцов. Анализ и оценка результатов для контролей проводится согласно инструкции к набору реагентов для проведения амплификации. Версия 09.01.24-1 12 --- стр. 14 --- 8.2.1. Подготовка к проведению процедуры экстракции ДНК 8.2.1.1. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы. Промаркировать. 8.2.1.2. Перемешать взбалтыванием Буфер L, Буфер W2, Буфер W3 и Буфер Е1. 8.2.1.3. Перемешать Реагент А, ВКО, ПКО, ОКО и осадить капли на вортексе. 8.2.1.4. Полностью ресуспендировать содержимое пробирки с МГС на вортексе. Сбросить капли с крышки пробирки вручную (без центрифугирования), затем открыть пробирку и дополнительно перемешать пипетированием с помощью дозатора. 8.2.1.5. Приготовить в отдельной пробирке объемом 1,5 мл смесь Реагента А, МГС и ВКО, добавив компоненты в объемах из расчета на один образец: 10 мкл Реагента А, 10 мкл МГС и 10 мкл ВКО^^ также учитывая запас - на один образец больше. Перемешать смесь и осадить капли на вортексе. Примечание: допускается внесение всего содержимого пробирок с Реагентом А, МГС и объема ВКО“, необходимого для проведения исследования 96 образцов, в Буфер L. Полученную смесь тщательно перемешать взбалтыванием. Смесь хранить не более 2 месяцев при температуре от 2 °С до 8 ®С. ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем ВКО для расчета объема смеси реагентов, если при проведении экстракции одновременно используются несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 8.2.2. Процедура экстракции ДНК 8.2.2.1. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл или ячейку картриджа (в зависимости от модели автоматической станции) для исследуемых и контрольных (если они предусмотрены для проведения исследования) образцов: а) по 30 мкл подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и по 500 мкл Буфера L или б) по 530 мкл подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L. ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем приготовленной смеси, используемый для одного образца, если при проведении экстракции ВКО не используется, либо одновременно используется несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 8.2.2.2. Внести в пробирки исследуемые^^ и контрольные образцы, используя для каждого образца отдельный наконечник. Образцы вносят в следующих объемах: - надосадочная жидкость после предобработки сухих пятен крови - 300 мкл; - цельная кровь - 100 мкл; - контрольные образцы - 100 мкл. 8.2.2.3. Перемешать содержимое пробирок. 8.2.2.4. Прогреть пробирки при температуре 60 ®С в течение 10 мин. Перемешать содержимое пробирок. 8.2.2.5. Поместить пробирки в магнитный штатив или опустить в пробирки магнитный стержень на 2 мин. Требуемый объем ВКО для одного образца смотрите в инструкции к используемому набору реагентов для проведения амплификации. Для образцов сухих пятен крови необходимо произвести предобработку согласно разделу «Предварительная подготовка сухих пятен крови». Версия 09.01.24-1 13 --- стр. 18 --- 8.4.2.1. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл для исследуемых и контрольных образцов: а) по 30 мкл подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и по 500 мкл Буфера L или б) по 530 мкл подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L. ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем приготовленной смеси, используемый для одного образца, если при проведении экстракции ВКО не используется, либо одновременно используется несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 8.4.2.2. Внести в пробирки исследуемые^® и контрольные образцы, используя для каждого образца отдельный наконечник. Образцы вносят в следующих объемах: - надосадочная жидкость после предобработки сухих пятен крови - 300 мкл; - цельная кровь -100 мкл; - контрольные образцы -100 мкл. 8.4.2.3. Перемешать содержимое пробирок. 8.4.2.4. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 ®С на 10 мин. Перемешать содержимое пробирок и осадить капли на вортексе. 8.4.2.5. Центрифугировать в течение 1 мин при 10 000 g. 8.4.2.6. По внутренней стенке пробирки осторожно отобрать надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник без фильтра на 200 мкл для каждой пробы. 8.4.2.7. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2. Перемешать содержимое пробирок на вортексе. 8.4.2.8. Центрифугировать в течение 1 мин при 10 000 g. 8.4.2.9. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 8.4.2.6. 8.4.2.10. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2. Перемешать содержимое пробирок на вортексе. 8.4.2.11. Центрифугировать в течение 1 мин при 10 000 g. 8.4.2.12. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 8.4.2.6. 8.4.2.13. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W3. ВНИМАНИЕ! После добавления Буфера W3 содержимое пробирок не перемешивать. 8.4.2.14. Центрифугировать в течение 1 мин при 10 000 g. 8.4.2.15. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 8.4.2.6 8.4.2.16. Добавить в пробирки по 100 мкл Буфера Е1, перемешать на вортексе. 8.4.2.17. Поместить пробирки в термостат с температурой 80 ®С на 5 мин, перемешивая каждые 2 мин. 8.4.2.18. Центрифугировать в течение 1 мин при 10 000 g. 8.4.2.19. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке ПЦР. ВНИМАНИЕ! Внесение ДНК в реакцию необходимо провести незамедлительно после центрифугирования. Если в течение 3 мин после центрифугирования проба не внесена в реакцию, необходимо провести повторное центрифугирование. 8.4.2. Процедура экстракции ДНК Для образцов сухих пятен крови необходимо произвести предобработку согласно разделу «Предварительная подготовка сухих пятен крови». Версия 09.01.24-1 17 --- стр. 19 --- Очищенная ДНК может храниться при температуре от 2 до 8 в течение недели, при температуре от минус 24 "С до минус 16 в течение 6 месяцев и при температуре не выше минус 68 в течение года. Для этого необходимо, не захватывая магнетизированную силику, перенести надосадочную жидкость в новую пробирку. 8.5. Хранение очищенной ДНК 9. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 9.1. Чистота экстрагированной ДНК Чистота выделения ДНК составляет не менее 1,6 при соотношении поглощения при длинах волн 260 и 280 нм (260/280). 9.2. Влияние интерферирующих веществ и ДНК человека Влияние интерферирующих веществ, потенциально содержащихся или присутствующих в исследуемом материале, на эффективность экстракции ДНК при использовании набора «МагноПрайм® DrySpot» отсутствует. Это было показано при добавлении к образцам биологического материала интерферирующих веществ, представленных в таблице 5, в максимально возможной концентрации. Таблица 5 Интерферирующие вещества, использованные при тестировании набора «МагноПрайм® DrySpot» Вид биоматериала Интерферент Концентрация интерферента в образце Сухие пятна крови Гемоглобин 200 мг/мл Билирубин 0,2 мг/мл Триглицериды 5 мг/мл ЭДТА 992,8 мг/мл Компонент разметки ДНК-карты - ДНК человека 5,0x10® кл/мл Цельная кровь Гемоглобин 200 мг/мл Билирубин 0,2 мг/мл Триглицериды 5 мг/мл ЭДТА 992,8 мг/мл ДНК человека 5,0x10® кл/мл Версия 09.01.24-1 18 --- стр. 20 --- 10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА 10.1. Срок годности Срок годности набора составляет 12 месяцев от даты изготовления. После вскрытия реагенты использовать до истечения срока годности набора. Набор с истекшим сроком годности применению не подлежит. 10.2. Транспортирование Набор транспортировать при температуре от 2 X до 25 "С всеми видами крытых транспортных средств в термоконтейнерах с хладоэлементами или в авторефрижераторах. Не допускается замораживание реагентов. Набор, транспортированный с нарушением указанного температурного режима, применению не подлежит. 10.3. Хранение Набор хранить при температуре от 2 "С до 25 X в течение всего срока годности набора. Не допускается замораживание реагентов. Реагенты после вскрытия хранить в тех же условиях, что и реагенты до вскрытия. Невскрытые и вскрытые реагенты стабильны в течение срока годности, указанного на этикетке, при соблюдении указанных условий хранения. Смесь, приготовленную из Буфера L, Реагента А, ВКО и МГС, хранить при температуре от 2 "С до 8 X не более 2 месяцев. Набор, хранившийся с нарушением указанного режима хранения, применению не подлежит. 11. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие характеристик набора требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора реагентов «МагноПрайм® DrySpot» направлять в адрес производителя ООО «НекстБио»: 111394 г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2, тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru. При выявлении нежелательных реакций при использовании набора, фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при обращении и эксплуатации набора, рекомендуется направить сообщение по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию (в Российской Федерации - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим за ко нодател ьством. Консультацию по работе с набором, а также по вопросам, касающимся качества набора, можно получить по контактам, указанным на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru. Версия 09.01.24-1 19 --- стр. 21 --- Лист регистрации изменений Изм. Номера листов Всего листов в документе Номер извещения об изменении Изменения внес Датаизменённ ых заменённ ых новых аннулиро ванных 1 - 2 -2 0 21 - 21 09286667.065. 1/2-2024 Мудракова П.Н. 09.01.24 Версия 09.01.24-1 21 --- стр. 28 --- ♦ • • • • о ДНекстБИО/ Ьистехиояо ичсс> ^ ^ ^oмлaниp Краткое руководство ВНИМАНИЕ! Перед использованием набора реагентов необходимо ознакомиться с инструкцией по его применению. Инструкция размещена в электронном виде на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru (для ее получения необходим доступ в интернет). Печатная версия инструкции доступна по запросу по телефону (495) 620-08-73. по применению набора реагентов для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови «МагноПрайм® DrySpot» по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023 МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ ^ сухие пятна крови; цельная кровь. МагноПрайм® DrySpot REF 113-Z mJ ООО «НекстБио», Россия, 111394, г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2 тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru IVD ХРАНЕНИЕ очищ енной ДНК TcuMwpatvpa Длительность хранения ' 2 "С ...8 “С 7 дней -2 4 "С...-1 6 “С 6 месяцев -68 X 12 месяцев соаАв Реагент Описание объем, мл Количество Заявления об опасности^ РеагентS Прозрачная жидкость 2 46,0 1 флакон Н302; Вредно при проглатывании, Н311: Токсично при контакте с кожей, Н319: Вызывает серьезное раздражение глаз, Н332: Вредно при вдыхании, Н411: Токсично для водных организмов с долгосрочными последствиями, EUH032: При контакте с кислотами освобождаются очень токсичные газы. Буфер L Прозрачная жидкость^ 53,0 1 флакон H225: Легковоспламеняющаяся жидкость и пар, H302: Вредно при проглатывании, H311: Токсично при контакте с кожей, Н319: Вызывает серьезное раздражение глаз, H332: Вредно при вдыхании, Н411: Токсично для водных организмов с долгосрочными последствиями, EUH032: При контакте с кислотами освобождаются очень токсичные газы. Буфер W2 Ф Ф Прозрачная жидкость 75,0 2 флакона Н225: Легковоспламеняющаяся жидкость и пар, Н319: Вызывает серьезное раздражение глаз, Н336: Может вызвать вялость или сонливоаь. Буфер W3 Ф Ф Прозрачная жидкость 75,0 1 флакон Н225; Легковоспламеняющаяся жидкость и пар, Н319: Вызывает серьезное раздражение глаз, Н336: Может вызвать вялость или сонливость. Буфер Е1 Прозрачная жидкость 15,0 1 флакон - МГС Суспензия 1,1 1 пробирка - ОКО Прозрачная жидкость 1,1 1 пробирка - Набор реагентов рассчитан на экстракцию ДНК из 96 образцов, включая контроли. ХРАНЕНИЕ КОМПЛЕКТНОСТЬ Условия хранения набора 2 “С... 25 “С Компонент Фариш Набор реагентов - Инструкция по применению набора в электронном виде по адресу: www.nextbio.ru Краткое руководство в бумажном виде Паспорт качества в электронном виде по адресу: www.nextbio.ru 1 ВНИМАНИЕ! При работе с набором следует соблюдать меры предосторожности, описанные в инарукции по применению набора. ^ При хранении Реагента S и Буфера L возможно образование осадка в виде кристаллов. Версия 22.10.23-1 --- стр. 29 --- ПРЕДВАРИТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА (ТОЛЬКО ДЛЯ СУХИХ ПЯТЕН КРОВИ)_______ ВНИМАНИЕ! Перед экстракцией необходимо провести предобработку сухих пятен крови. 1. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл для каждого тест-бланка (исследуемого образца). Промаркировать. 2. Выбить с помощью автоматического перфоратора или ручного дырокола бумажный диск из сухого пятна крови. Для получения одного препарата ДНК необходимо из тест-бланка выбить 3 диска диаметром 3,0 мм (допускается использование трех дисков диаметром 3,2 мм) или 1 диск диаметром 6,0 мм. ВНИМАНИЕ! Выбитые диски должны быть полностью пропитаны кровью. Рекомендуется выбивать диски из центральной области пятна, не захватывая область ограничивающей краски. Примечание: перед выбиванием дисков для каждого нового образца рекомендуется сделать 2-3 высечки на чистом участке фильтровальной бумаги, что позволит снизить риск контаминации нового образца фрагментами от предыдущих высечек. По завершении процедуры выбивания дисков проведите обработку лезвия перфоратора согласно инструкции к нему. 3. Поместить выбитые диски в промаркированные пробирки для исследуемых образцов. Примечание: Реагент S (если хранился при температуре от 2 *С до 8 *С) прогреть при температуре 75 "С до полного растворения кристаллов. Перемешать взбалтыванием. 4. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл для исследуемых образцов по 400 мкл Реагента S. Тщательно перемешать содержимое пробирок на вортексе. 5. Поместить пробирки в термостат с температурой 75 *С на 15 минут, перемешивая каждые 2 минуты. 6. Центрифугировать в течение 3 минут при 10 000 g. 7. Отобрать полностью надосадочную жидкость, не упираясь наконечником в диски. Перенести в чистые пробирки. Примечание: процедуру пробоподготовки необходимо проводить непосредственно перед экстракцией ДНК. Предобработанный материал хранению не подлежит. 8. Далее провести экстракцию в соответствии с п. 8.2, 8.3 или 8.4. АВТОМАТИЧЕСКАЯ МЕТОДИКА ЭКСТРАКЦИИ_____________________________________________________ ВНИМАНИЕ! При использовании автоматической станции для экстракции НК необходимо ознакомиться с инструкцией по эксплуатации данной автоматической станции и запрограммировать последовательность действий, указанную ниже. ВНИМАНИЕ! Если в состав набора для проведения амплификации включены ВКО, отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы^ то их необходимо использовать на стадии экстракции согласно инструкции по применению данного набора. 1. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы. Промаркировать. 2. Перемешать взбалтыванием Буфер L, Буфер W2, Буфер W3 и Буфер Е1. 3. Перемешать Реагент А, ВКО, ПКО, ОКО и осадить капли на вортексе. 4. Полностью ресуспендировать содержимое пробирки с МГС на вортексе. Сбросить капли с крышки пробирки вручную (без центрифугирования), затем открыть пробирку и дополнительно перемешать пипетированием с помощью дозатора. 5. Приготовить в отдельной пробирке объемом 1,5 мл смесь Реагента А, МГС и ВКО, добавив компоненты в объемах из расчета на один образец: 10 мкл Реагента А, 10 мкл МГС и 10 мкл BKO^ также учитывая запас - на один образец больше. Перемешать смесь и осадить капли на вортексе. Примечание: допускается внесение всего содержимого пробирок с Реагентом А, МГС и объема ВКО^, необходимого для проведения исследования 96 образцов, в Буфер L Полученную смесь т1цательно перемешатъ взбалтыванием. Смесь хранить не более 2 месяцев при температуре от 2 *С до 8 Т. ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем ВКО для расчета объема смеси реагентов, если при проведении экстракции одновременно используются несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 6. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл или ячейку картриджа (в зависимости от модели автоматической станции) для исследуемых^ и контрольных образцов, следующие реагенты/образцы: Добавляемый реагент / образец При внесении предварительно подготовленной смеси Реагента А, МГС и ВКО Смесь Реагента А, МГС и ВКО 30 мкл в каждую пробирку Буфер L 500 мкл в каждую пробирку Исследуемые образцы 100-300мкл® в пробирки для исследуемых образцов ОКО 100 мкл в пробирку для отрицательного контроля ПКО 100 мкл : в пробирку для положительного контроля При внесении предварительно подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L Смесь Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L 530 мкл в каждую пробирку Исследуемые образцы 100 - 300 мкл® : в пробирки для исследуемых образцов ОКО 100 мкл i в пробирку для отрицательного контроля ПКО 100 мкл 1 в пробирку для положительного контроля ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем приготовленной смеси, используемый для одного образца, если при проведении экстракции ВКО не используется, либо одновременно используется несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 7. Перемешать содержимое пробирок. 8. Прогреть пробирки при температуре 60 *С в течение 10 мин. Перемешать содержимое пробирок. 9. Поместить пробирки в магнитный штатив или опустить в пробирки магнитный стержень на 2 мин. ^ Результаты постановки контролей используются при оценке достоверности результатов ПЦР-исследования биологических образцов. Анализ и оценка результатов для контролей проводится согласно инарукции к набору реагентов для проведения амплификации. ^Требуемый объем ВКО для одного образца смотрите в инструкции к используемому набору реагентов для проведения амплификации. ® Для образцов сухих пятен крови необходимо произвести предобработку согласно разделу «Предварительная подготовка исследуемого материала (только для сухих пятен крови)». ®100 мкл цельной крови или 300 мкл надосадочной жидкости после предобработки сухих пятен крови. Версия 22.10.23-1 --- стр. 30 --- 0 10. Удалить надосадочную жидкость, не вынимая пробирки из магнитного штатива или не вытаскивая магнитный стержень из пробирок. 11. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2, перемешать содержимое пробирок. 12. Поместить пробирки в магнитный штатив или опустить в пробирки магнитный стержень на 2 мим. 13. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 10. 14. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2, перемешать содержимое пробирок. 15. Поместить пробирки в магнитный штатив или опустить в пробирки магнитный стержень на 2 мин. 16. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 10. 17. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W3 и удалить надосадочную жидкость, не вынимая пробирки из магнитного штатива или не вытаскивая магнитный стержень из пробирок. ВНИМАНИЕ! После добавления Буфера W3 содержимое пробирок не перемешивать. 18. Добавить в пробирки 100 мкл Буфера Е1, перемешать. 19. Прогреть пробирки при температуре 80 ”С в течение 5 мин с включенным перемешиванием. 20. Поместить пробирки в магнитный штатив или опустить в пробирки магнитный стержень на 2 мин. 21. Вынуть магнитный стержень с силикой из пробирок или при использовании магнитного штатива перенести надосадочную жидкость в новую пробирку или плашку. 22. Элюат содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке ПЦР. РУЧНАЯ МЕТОДИКА ЭКСТРАКЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МАГНИТНОГО ШТАТИВА ВНИМАНИЕ! Для внесения в пробирки реагентов, исследуемых и контрольных образцов использовать одноразовые наконечники с фильтрами. ВНИМАНИЕ! Если в состав набора для проведения амплификации включены ВКО, отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы^ то их необходимо использовать на стадии экстракции согласно инструкции по применению данного набора. 1. Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл, включая отрицательный (ОКО) и положительный (ПКО) контрольные образцы. Промаркировать. 2. Перемешать взбалтыванием Буфер L, Буфер W2, Буфер W3 и Буфер Е1. 3. Перемешать Реагент А, ВКО, ПКО, ОКО и осадить капли на вортексе. 4. Полностью ресуспендировать содержимое пробирки с МГС на вортексе. Сбросить капли с крышки пробирки вручную (без центрифугирования), затем открыть пробирку и дополнительно перемешать пипетированием с помощью дозатора. 5. Приготовить в отдельной пробирке объемом 1,5 мл смесь Реагента А, МГС и ВКО, добавив компоненты в объемах из расчета на один образец: 10 мкл Реагента А, 10 мкл МГС и 10 мкл ВКО^ также учитьшая запас - на один образец больше. Перемешать смесь и осадить капли на вортексе. Примечание: допускается внесение всего содержимого пробирок с Реагентом А, МГС и объема ВКО^, необходимого для проведения исследования 96 образцов, в Буфер L Полученную смесь тщательно перемешать взбалтыванием. Смесь хранить не более 2 месяцев при температуре от 2 "С до 8 * *С ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем ВКО для расчета объема смеси реагентов, если при проведении экстракции одновременно используются несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 6. Внести в каждую пробирку объемом 1,5 мл для исследуемых® и контрольных образцов, следующие реагенты/образцы: _ __ До 6«вл)1Смый регент / образец ___ ____ [ При внесении предварительно подготовленной смеси Реагента А, МГС и ВКО __ __ Смесь Реагента А, МГС и ВКО 30 мкл ; в каждую пробирку __ _____________ ________ каждую пробирку ________ _______Буфер L 500 мкл Исследуемые образцы 100-300мкл^® I в пробирки для исследуемых образцов ОКО ПКО 100 мкл 100 мкл в пробирку для отрицательного контроля в пробирку для положительного контроля При внесении предварительно подготовленной смеси Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L Смесь Реагента А, МГС, ВКО и Буфера L _______ 530 мкл : в каждую пробирку ______________ Исследуемые образцы___________ ___ ОКО ' 100 - 300 мкл^Р в пробирки для исследуемых образцов ПКО 100 мкл 100 мкл в пробирку для отрицательного контроля в пробирку для положительного контроля ВНИМАНИЕ! Необходимо скорректировать объем приготовленной смеси, используемый для одного образца, если при проведении экстракции ВКО не используется, либо одновременно используется несколько различных препаратов ВКО, либо добавляемый объем ВКО отличается от 10 мкл. 7. Перемешать содержимое пробирок. 8. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 *С на 10 мин. Перемешать содержимое пробирок и осадить капли на вортексе. 9. Перенести пробирки в магнитный штатив на 2 мин. 10. Без снятия пробирок с магнитного штатива, по внутренней стенке пробирки осторожно отобрать надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник без фильтра на 200 мкл для каждой пробы. 11. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2. Плотно закрыть крышки. 12. Перемешать содержимое пробирок и осадить капли на вортексе. 13. Поместить пробирки в обычный штатив, открыть крышки и переставить в магнитный штатив на 2 мин. 14. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 10. 15. Добавить в пробирки по 700 мкл Буфера W2. Плотно закрыть крышки. 16. Перемешать содержимое пробирок и осадить капли на вортексе. 17. Поместить пробирки в обычный штатив, открыть крышки и переставить в магнитный штатив на 2 мин. 18. Отобрать надосадочную жидкость аналогично п. 10. 19. Не вынимая пробирки из магнитного штатива, добавить в них по 700 мкл Буфера W3. ’ Результаты постановки контролей используются при оценке достоверности результатов ПЦР-исследования биологических образцов. Анализ и оценка результатов для контролей проводится согласно инарукции к набору реагентов для проведения амплификации. *Требуемый объем ВКО для одного образца смотрите в инструкции к используемому набору реагентов для проведения амплификации. ® Для образцов сухих пятен крови необходимо произвести предобработку согласно разделу «Предварительная подготовка исследуемого материала (только для сухих пятен крови)». ^°100 мкл цельной крови или 300 мкл надосадочной жидкости после предобработки сухих пятен крови. Версия 22.10.23-1 --- стр. 33 --- УТВЕРЖДАЮ Генеральный директор НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ЭКСТРАКЦИИ ДНК ЧЕЛОВЕКА ИЗ СУХИХ ПЯТЕН КРОВИ И ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ «МАГНОПРАЙМ® DRYSPOT» ПО ТУ 21.20.23-219-09286667-2023 Шаблон паспорта качества Лист утверждения --- стр. 34 --- ^.НекстБИО «в Биотс)«юлс'и-юская / “ <ом м ан.^н ООО «НекстБио», РоссияД11394, г. Москва, ул. Полимерная, д. 8, стр. 2, тел. (495) 620-08-73, e-mail: jnfo@nextbio.ru ПАСПОРТ КАЧЕСТВА № номер лота/113-Z МагноПрайм® DrySpot Набор реагентов для экстракции ДНК человека из сухих пятен крови и цельной крови «МагноПрайм® DrySpot» по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023 LOT гггг-мм-дд гггг-мм-дд Контроль качества проведен по ТУ 21.20.23-219-09286667-2023. 1. УПАКОВКА И МАРКИРОВКА НАБОРА Упаковка и маркировка набора указанной серии соответствуют требованиям ТУ 21.20.23-219-09286667-2023. 2. КОМПЛЕКТНОСТЬ ПОСТАВКИ Компонент Характеристика Норма Результаты контроля Набор реагентов «МагноПрайм* DrySpot» — в наличии соответствует Инструкция по применению набора в электронном виде на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru в наличии соответствует Краткое руководство по применению набора в бумажном виде в наличии соответствует Паспорт качества в электронном виде на официальном сайте Производителя: www.nextbio.ru в наличии соответствует 3. СОаАВ НАБОРА И ВНЕШНИЙ ВИД КОМПОНЕНТОВ Компонент Норма Результаты контроля Реагент S 1 флакон. Прозрачная жидкость. Допускается образование осадка в виде кристаллов. соответствует Буфер L 1 флакон. Прозрачная жидкость. Допускается образование осадка в виде кристаллов. соответствует Буфер W2 2 флакона. Прозрачная жидкость. соответствует Буфер W3 1 флакон. Прозрачная жидкость. соответствует Буфер Е1 1 флакон. Прозрачная жидкость. соответствует МГС 1 пробирка. Суспензия. соответствует Реагент А 1 пробирка. Прозрачная жидкость. соответствует 4. ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Показатель Норма Результаты контроля Эффективность экстракции* Выявление ДНК человека при исследовании модельных образцов, изготовленных с использованием стандартного образца предприятия «СОП 209-16 ДНК человека» и карты для сбора образцов биоматериала «ДНК-карта». соответствует * При тестировании набора совместно с набором реагентов для проведения амплификации «АмплиПрайм* ФЛОРОСКРИН®-Микоплазмы» (РУ № РЗН 2015/3164). Результаты тестирования исследуемых образцов и контролей исследования соответствуют критериям валидности, указанным в инструкции по применению набора для проведения амплификации «АмплиПрайм® ФЛОРОСКРИН®-Микоплазмы». 5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ Условия транспортирования Условия хранения Набор транспортировать при температуре от 2 “С до 25 ”С. Не допускается замораживание реагентов. Набор хранить при температуре от 2 *С до 25 ®С. Не допускается замораживание реагентов. Дата выдачи паспорта ХХ.ХХ.ХХ Должность печать подразделения подпись (расшифровка) --- стр. 35 --- JПронумеровано, скреплено и прошито аС- лист^а/ов)