Наборы реагентов для диагностики in vitro — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2009/05440 от 06.11.2009 · класс риска 1

Производитель: "Монобайнд, Инк." (Соединенные Штаты)

Вид изделия: Свободный тироксин ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Свободный трийодтиронин ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Пролактин ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 31 контракт, медианная цена за единицу 20 328 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 3 ---
5. Старайтесь расположить штатив с исследуемыми образцами таким образом, чтобы при заборе образцов исключит) 
возможность их случайного попадания в рабочий планшет или растворы реагентов.
6. Обратите внимание на процесс пипетирования при внесении образцов и других реагентов. Избегайте прикосновение 
наконечника к стенкам или дну лунки.
7. Следите за точностью Вашего пипетирования. Возможные вариации от ячейки к ячейке при раскапывании не должны превышат 
2%. Дозаторы должны быть аттестованы на сходимость результатов пипетирования (рекомендуется проводить не реже 1  раза в месяц) 
особенно в тех случаях, когда объем анализируемой пробы (или другого реагента) не превышает 50 мкл. Лучше работать влажныл 
наконечником, так как при первом заборе образца сухим наконечником, некоторые белковые компоненты могут в н ел  
адсорбироваться. Чтобы свести к минимуму возможные вариации из-за разного времени инкубации, вносите реагенты с одной и то! 
же скоростью, например, если Вы добавили субстрат за 30 секунд, то и останавливающий реакцию раствор надо внести за такое ж <  
время. При коротком времени инкубации с сыворотками (30 минут) и при высокой температуре в помещении на конечном результат 
реакции может сказаться время внесения образцов; при этом контрольные образцы, внесенные до исследуемых, могут дават) 
завышенные результаты.
8. Оптимизируйте промывание и режим работы с микропланшетом. Слишком сильный вакуум может подсушить белково< 
покрытие в ячейке, инактивировав его, а слишком слабый приведет к тому, что останутся капельки жидкости. Поэтому н ад «  
отрегулировать Ваше промывочное устройство. Не оставляйте ячейки сухими между стадиями добавления реагентов. Д аж ( 
минимальное высушивание ведет к потерям ферментативной активности. Если в ходе работы возникли непредвиденные задержки 
заполните ячейки промывающим раствором.
9. Рекомендуется, чтобы все сыворотки анализировались в дублях. Разброс между результатами для одного клинического образц; 
более 5% не допускается. С целью снижения стоимости одного исследования в лаборатории с устойчивыми показателями контрол: 
качества допускается проведение анализа стандартов без дублей и расчет результатов по ранее построенной стандартной кривой 1  
течение двух недель при обязательной постановке контролей.
10. Не используйте в качестве инкубатора системы с конвективным нагревом. Планшет должен прогреваться равномерно по всей площади
1 1. Одной из причин получения неудовлетворительных результатов при использовании твердофазных наборов являетсз 
использование шейкеров-инкубаторов, которые не обеспечивают необходимую интенсивность встряхивания. При этом покрытая 
антителами поверхность лунки не полностью омывается инкубационной смесью и поэтому не принимает участия I  
иммунохимической реакции. Следствием этого является снижение связывания и ухудшение качества аналитической системы.
12. Температурный режим инкубации также является фактором, оказывающим влияние на протекание иммунохимической реакции 1  
пробирке. Низкая температура в лаборатории (менее 18 °С) приводит к тому же результату, что и плохое встряхивание.
13. Инкубируйте планшеты с субстратом в темноте. Таким образом Вы сможете избежать краевых эффектов на планшете.
14. Регулярно проверяйте точность работы Вашего оборудования. У Вас не будет хороших результатов без качествен но г <  
оборудования: от микропипеток и наконечников до микропланшетного ридера.
1 5. Результаты анализа должны иметь должную точность и воспроизводимость, независимо от того, кто из лаборантов выполняв' 
анализ. Рекомендуется, чтобы лаборант работал одновременно не более чем с двумя планшетами. Необходимо наличие постоянн< 
действующей внутрилабораторной системы контроля качества анализов и участие лаборатории в какой-либо системе внешней 
контроля качества анализов.
Постановка контрольных материалов
Обязательным условием проведения ИФЛ является постановка контрольных материалов и калибраторов. Контрольньи 
материалы ставятся в каждой серии опытов.
Контроль качества в медицинской лаборатории -  это статистический процесс, используемый для наблюдения и оценю 
результатов исследования проб пациентов. Статистический процесс требует:
1) регулярного исследования контрольных материалов вместе с пробами пациентов;
2) сравнения результатов измерения контрольных материалов с рассчитанными статистическими пределами.
Контрольный материал (КМ) -  это максимально приближенный к человеческому образец, в идеале изготовленный из крови, моч1  
или спинномозговой жидкости человека. Он может быть жидким или лиофилизированным и содержать один или более аналитов I  
известной концентрации. КМ должны анализироваться так же, как пробы пациентов. Контрольный материал обычно содержи-


--- стр. 4 ---
множество различных аналитов. КМ нормального уровня содержит нормальные концентрации определяемого аналита. К I V  
патологического уровня содержит повышенное или сниженное по сравнению с нормальными пределами количество этоп 
аналита.
Обычно для контроля аналитического процесса необходимо по крайней мере ежедневное проведение анализа КМ нормального I  
патологического уровня для каждого аналита. В случае если получены результаты, сильно отличающиеся от паспортных, следуе' 
проверить еще раз правильность постановки ИФА и, исключив возможность ошибки в проведении анализа и интерпретацш 
полученных результатов, обратиться к производителю тест-систем.
АЛГОРИТМ ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА 
Подготовка к анализу
1 . Перед анализом каждый образец должен быть выдержан при комнатной температуре, и тщательно перемешан.
2. Установите необходимое количество стрипов в рамку из расчета постановки стандартов, образцов и контролей в дублях п л ю <  
одна лунка для бланка. Оставшиеся стрипы верните в пластиковый пакет с осушителем и герметично закройте.
3. В  лунку Бланк добавьте в соответствующем шаге протокола 100 мкл субстрата и 100 мкл стоп-реагента.
4. Для предотвращения загрязнения субстратного раствора часть раствора, необходимую для анализа, перенесите в чистьп 
пластиковый сосуд, предварительно вымытый этанолом и затем дистиллированной водой высокой очистки.
5. Промывочный раствор готовится смешиванием концентрата с 450 мл дистиллированной воды.
1. Пипеткой добавьте 25 мкл стандартов, контролей и проб пациентов в соответствующие лунки пла ншета.
2. Добавьте 200 мкл конъюгата в каждую лунку.
3. Инкубируйте в течение 120 минут при 37°С не закрывая планшет.
4. Используя автоматическую или ручную технику промывки планшета, удалите содержимое всех лунок, промойте тр| 
раза промывочным буфером. Удалите остатки жидкости. Для данной процедуры рекомендуется автоматическая моюща* 
система.
5. Немедленно добавьте 100 мкл раствора субстрата в каждую лунку.
6. Инкубируйте при комнатной температуре (20-28°С) в течение 15 минут.
Замечание: избегайте попадания прямого солнечного света на планшет во время инкубации.
7. Добавьте 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку в той же последовательности, что и субстрат.
в.Осторожно перемешайте планшет, избегая разбрызгивания.
9. Измерьте величины поглощения содержимого ячеек при 450 нм. Измерение микропланшета должно быть произведен« 
в течение 60 минут после добавления останавливающего раствора.
РАСЧЕТ
Рассчитайте среднее значение оптической плотности стандартов и образцов (А). Вычтите Бланк (Ас ) из всех значений. 
Пересчитайте результаты по формуле:В/В0  х 100 =(А-АС /А0 - Ас ) х 100, 
где А0  - значение оптической плотности нулевого стандарта.
Используйте значение индекса В/В0 х 100 для построения кривой в логарифмических координатах на полулогарифмическо» 
бумаге и расчета концентрации эстрадиола.
Результаты могут быть рассчитаны автоматически с использованием аппроксимаций - 4-х параметрической, Сплайны,
Если полученная концентрация выше высшего стандарта, разведите образец нулевым стандартом и проанализируйте е г <  
повторно. Умножьте результат на фактор разведения.
Возможные причины возникновения проблем при проведении ИФА
Повышенный ф он
1 . Недостаточная промывка и/или удаление жидкости из ячеек после промывки. Растворы, содержащие биотин или коньюга-  
стрептавидина с пероксидазой хрена могут повышать фон при недостаточной промывке ячеек.
2. Контаминация раствора субстрата ионами металлов или окисляющими реагентами, обуславливающими голубую окраску субстрата
3. Загрязнение дозатора, резервуара диспенсера или раствора субстрата коньюгатом стрептавидина с пероксидазой хрена.
4. Неправильное разбавление коньюгата стрептавидина с пероксидазой хрена. Конъюгат стрептавидина с пероксидазой хрен; 
может содержать глицерин, увеличивающий вязкость раствора, что затрудяет его точное дозирование.
5. Хромогенный субстрат находился на свету перед использованием, что вызвало его окрашивание.


--- стр. 5 ---
6. Неправильное время и/или температура инкубации.
7. Испарение содержимого ячеек во время инкубации.
8. Неправильное количество ферментного коньюгата или хромогенного субстрата, внесенное в ячейки. 
Повышенные оптические плотности образцов/ стандартов
1 . Стандарты разбавлены сывороткой, супернатантом культуры или другой неподходящей средой.
2. Неправильное разбавление ферментного коньюгата.
3. Микропланшет был накрыт пленкой во время инкубации с хромогенным субстратом.
4. Превышение времени инкубации.
5. Проведение инкубации при 37°С вместо инкубации при комнатной температуре.
6. Высокая температура в помещении (более 28°С).
7. Контаминация наконечника, резервуара диспенсера или раствора субстрата ферментным конъюгатом.
8. Хромогенный субстрат находился на свету перед использованием.
Отсутствие или слабое развитие окраски
1 . Реагенты не достигли комнатной температуры (25±2°С) перед началом анализа.
2. Неправильное хранение компонентов набора (например, не при 2-8°С).
3. Проведение инкубации с ферментным коньюгатом при 37°С вместо инкубации при комнатной температуре.
4. Пропущена одна из инкубаций.
5. Стандарты разбавлены сывороткой, супернатантом культуры или другой неподходящей средой.
6. Высыхание ячеек микропланшета в ходе проведения анализа.
7. Использование неподходящего хромогенного субстрата или стоп-раствора.
8. Низкая температура в помещении (<22°С).
9. Истечение срока годности реагентов.
10. Ячейки микропланшета поцарапаны наконечником дозатора или промывающего устройства.
11. Использование несоответствующей длины волны считывания.
12. Неправильное разбавление ферментного конъюгата.
13. Несоблюдение методики сбора образцов.
14. Определение аналита в матриксе, для которого тест-система не была оптимизирована.