Набор реагентов для определения общей активности креатинкиназы в сыворотке и плазме крови кинетическим УФ-методом «Креатинкиназа-Ново» (жидкая форма) по ТУ 9398-307-23548172-2011 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2012/13120 от 28.02.2012 · класс риска 1

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Общая креатинкиназа ИВД, набор, ферментный спектрофотометрический анализ

В госконтрактах 44-ФЗ: 239 контрактов, медианная цена за единицу 6 219 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ»
П рик азом  Р о сзд р а в н а д зо р а  Г ен ер ал ьн ы й  ди р ек тор
о т___________2 0_ _г. № _______ ^__3AQj:<BeKTop-BecT»
М .Д . Х усаи н ов 
2011 г.
ИНСТРУКЦИЯ
п о п р и м ен ен и ю  Н а б о р а  р еаген т ов  для о п р ед ел ен и я  о б щ е й  акти вн ости 
к реати н ки н азы  в сы в ор отк е и п л азм е крови к и н ети ч еск и м  У Ф -м ет о д о м 
« К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф о р м а )»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Н а б о р  р еаген т ов  К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф ор м а) п р ед н азн ач ен  для количе­
ств ен н ого о п р ед ел ен и я  о б щ е й  ак ти вн ости  креатин ки назы  в сы в ор отк е и п лазм е крови ч ел о ­
века к и н ети ч еск и м  У Ф -м е т о д о м  в к л и н и к о -д и а гн о сти ч еск и х  и б и о х и м и ч еск и х  л абораториях, 
и н а у ч н о -и ссл ед о в а т ел ь ск о й  практике.
1.2. Н а б о р  в ы п уск ается в т р ёх  вари антах к ом п л ек тац ии , в за в и си м о ст и  от объ ём а ра­
бо ч его  р аств ора р еагентов: вариан т 1  (5 0  м л); вариант 2 (1 0 0  м л ) или вариант 3 а в т о .
В ари ан т 3 а в т о  п р ед н а зн а ч ен  дл я п р о в ед ен и я  ан ал и за н а автом ати ч еск и х б и о х и м и ч е­
ск их ан ал изаторах, о б ъ ё м  к о м п о н ен т о в  и и х р асф асов к а о п р ед ел я ет ся  вм ести м остью  кар­
тр и дж ей  для д а н н о й  м о д ел и  ан али затора.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
К р еати н к и наза к атал и зи р ует в п р и сутств и и  А Д Ф  и к р еати н ф осф ата си н тез А Т Ф , ко­
торы й с уч аст и ем  гек сок и н азы  ф о сф о р и л и р у ет  гл ю к о зу  с о б р а зо в а н и ем  гл ю к озо-6-ф осф ата. 
В п р и сутстви и  г л ю к о зо -6 -ф о сф а т д еги д р о г ен а зы  п р о и сх о д и т  реакция ок и сл ен и я  гл ю к озо-6- 
ф осф ата и соп р я ж ен н ая  с н ей  реакци я в о сстан ов л ен и я  Н А Д Ф  в Н А Д Ф Н . С к орость в осста­
н овления Н А Д Ф  п рям о п р оп о р ц и о н а л ь н а  ак ти вн ости  к реати н ки н азы  и и зм ер яется ф отом ет­
р и ческ и при д л и н е волны  3 4 0  нм .
И н с т р у к ц и я  с о с т а в л е н а  с о т р у д н и к а м и  З А О  « В е к т о р - Б е с т » :  н а ч .  о т д е л а ,  к . б . и .  
Л . В .  Г а е в о й  и  в е д .  н а у ч н ы м  с о т р у д н и к о м  Т . И .  С у м е н к о .


--- стр. 2 ---
В  состав  н а б о р а  входя т:
-  р еаген т 1: б у ф ер н ы й  р аств ор , pH  6 ,7 ± 0 ,2 , со д ер ж а щ и й  и м и д а зо л , 0 ,0 9  моль/л; a -D - 
гл ю к озу, 0 ,0 2  м оль/л; м агн и я ац етат, 0 ,2 0  м оль/л; д и а д ен о зи н п ен т а ф о сф а т , 2 ,0  мкмоль; аде- 
н о зи н м о н о ф о сф а т , 1,0 м м оль; гек сок и н аза, 6 0 0  Е; (З -н и к оти н ам и даден и н ди н ук леоти д ф осф ат 
(Р -Н А Д Ф ), 0 ,4  м м оль; N -а ц ет и л ц и ст еи н , 4 ,0  ммоль; эти л ен д и а м и н т ет р а у к су сн о й  кислоты  д и - 
н атр и евую  сол ь, 2 ,0  м м ол ь/л ; натрия а зи д , 0,1%  -  2 ф л акон а (п о  2 0  м л ) (вариан т 1); 2 ф лако­
на (п о 4 0  м л) (вари ант 2 ) или 1-4 к ар тр и дж а (вариан т 3 а в т о ) ;
-  р еа ген т 2: и м и д а зо л , 2 0 ,0  м м оль; к р еати н ф осф ат, 6 ,0  м м оль; гл ю к озо-6-
ф о сф а т д еги д р о ген а за , 4 0 0  Е; аден ози нди ф осф ат, 0 ,4  м м оль; н атри я а зи д , 0,1%  -  2 ф лакона 
(п о 5,0 м л) (вари ан т 1); 2 ф л акон а (п оЮ  м л) (вариант 2 ) или 1-4 к ар тр и дж а (вариант 3 а в т о ) .
К он еч н ы е к он ц ен тр ац и и  в р абоч ем  р аств ор е реаген тов:
- и м и дазол ь н ы й  б у ф ер , p H  6 ,8  -  0,1 м оль/л;
- к р еати н ф осф ат -  3 0 ,0  м м оль/л;
- р- НАДФ  -  2,0 ммоль/л;
- А Д Ф  -  2 ,0  м м оль/л;
- А М Ф  -  5 ,0  м м оль/л;
- гек сок и н аза -  3 0 0 0  Е/л;
- г л ю к о зо -6 -ф о с ф а т д е ги д р о г е н а за  -  2 0 0 0  Е/л;
- N -а ц ети л ц и стеи н  -  2 0 ,0  м м оль/л;
- д и а д ен о зи н п ен т а ф о сф а т  -  0,01 м м оль/л.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3 .1 . Л и н ей н о сть . Л и н ей н ая  обл асть  о п р ед ел ен и я  о б щ е й  ак ти вн ости  креатинкиназы  -  в 
д и а п а зо н е о т 5 0  д о  160 0  Е /л. О тк л он ен и е о т « л и н ей н о ст и »  - н е б о л е е  5% .
3 .2 . Ч ув ст в и тел ь н ость  о п р ед ел ен и я  -  н е б о л е е  4 0  Е /л.
3 .3 . К о эф ф и ц и ен т  вари ац ии  резул ь татов о п р ед ел ен и й  -  н е б о л е е  5% .
3 .4 . Н ор м ал ьн ы е вели чи н ы  о б щ ей  ак ти вн ости  креати н ки н азы  в сы воротке, плазм е 
крови (при  тем п ер а т у р е + 3 7  °С):
-  ж ен щ и н ы  о т  5 0  д о  165 Е/л;
-  м уж ч и н ы  о т  5 0  д о  190 Е /л.
3 .5 . Р ек о м ен д у ет ся  в к аж д ой  л абор ат ор и и  при и сп о л ь зо в а н и и  н а б о р а  уточ н ить ди ап а­
зо н  н орм альны х в ел и ч и н  о б щ е й  ак ти вн ости  креати нкин азы  у  о б с л е д у е м о г о  к он ти нген та л ю ­
дей .
2.2. Состав набора
JL


--- стр. 3 ---
4 .1 . П отен ц и ал ь н ы й  ри ск  п р и м ен ен и я  н а б о р а  -  к л асс 1.
4 .2 . Р еаген т 1  и р еа ген т  2 со д ер ж а т  т о к си ч еск о е с о е д и н е н и е  -  натрия ази д. П ри работе 
с эти м и  реаген там и  и р а б о ч и м  р аств ор ом  р еаген т ов  с л е д у е т  и зб ега т ь  п оп адан и я  растворов на 
к ож у и сл и зи сты е; п ри  п о п а д а н и и  н ем ед л ен н о  пром ы ть п о р а ж ен н о е м ест о  бол ьш и м  количе­
ством  п р о то ч н о й  воды .
4 .3 . П ри  р а б о т е с н а б о р о м  н е о б х о д и м о  со б л ю д а т ь  «П р ави л а устр ой ств а, техники 
б езо п а сн о ст и , п р о и зв о д ст в ен н о й  сан и тар и и , п р о т и в о эп и д ем и ч еск о го  р еж и м а  и личной ги­
гиены  при р а б о т е в л а б о р а т о р и я х  (о т д ел ен и я х , о т д ел а х ) са н и т а р н о -эп и д ем и о л о ги ч еск и х  уч­
р еж д ен и й  си ст ем ы  М и н и ст ер ст в а  зд р а в о о х р а н ен и я  С С С Р » (М о ск в а , 1981 г.).
4 .4 . П ри  р а б о т е с н а б о р о м  с л е д у е т  н адевать о д н о р а зо в ы е р ези н о в ы е или пластиковы е 
перчатки, так как о бр азц ы  сы в оротк и  к рови ч ел ов ек а с л е д у е т  рассм атр и вать как п отен циаль­
н о и н ф и ц и р ов ан н ы е, сп о со б н ы е  д л и т ел ь н о е врем я сохр ан я ть  и п ер едав ать В И Ч , ви рус геп а­
тита или л ю б о й  д р у г о й  в о зб у д и т ел ь  ви р усн ы х и нф ек ци й .
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ,
НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
-  П ол уав т ом ат и ч еск и й  и ли  автом атич ески й  б и о х и м и ч еск и й  ан ализатор (дл и н а волны 
3 4 0  нм , тер м о ста т и р у ем а я  к ю в ета с д л и н о й  о п ти ч еск о го  п ути  10 м м );
-  п и п етк и , п о зв о л я ю щ и е отби р ать  объ ём ы  ж и д к о ст и  4 0  и 1 0 0 0  мкл;
-  п р оби р к и  стек лян н ы е в м ест и м о ст ь ю  5 ,0 -1 0  мл;
-  тер м остат , п о д д ер ж и в а ю щ и й  тем п ер а ту р у  + 3 7 ± 0 ,5  °С;
-  перчатки р ези н ов ы е или п ластиковы е;
-  сек ун д ом ер ;
-  в о д а  ди сти л л и р ов ан н ая .
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Н егем ол и зи р ов ан н ая  сы воротк а, геп ар и н и зи р ов ан н ая  и Э Д Т А  п лазм а крови. С ы во­
ротку крови с л е д у е т  о т д ел и т ь  о т  ф ор м ен н ы х эл ем ен т о в  крови н е п о зд н е е , ч ем  ч ер ез 1  ч п о ­
сл е взятия крови.
О бразц ы  сы в ор отк и , п лазм ы  крови м о ж н о  хр ан и ть при к ом н атн ой  тем п ер атур е (+ 1 8 - 
25 °С ) н е б о л е е  4 -8  ч, при тем п ер а т у р е + 2 -8  °С  -  н е б о л е е  2 с у т  или при тем п ер атур е м ин ус 
2 0  °С  и н и ж е -  н е б о л е е  1  м ес. П о в т о р н о е р азм ор аж и в ан и е о б р а зц о в  сы воротк и  крови н е д о ­
п ускается.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
1 1


--- стр. 4 ---
7 .1 . П р и го т о в л ен и е р а б о ч его  раств ор а р еагентов.
С о д ер ж и м о е о д н о г о  ф л ак он а с р еаген т ом  1  о б ъ ед и н и т ь  с со д ер ж и м ы м  о д н о го  ф лако­
н а с р еаген том  2. П ер ем еш а т ь  в р уч н ую .
П р и готов л ен н ы й  р а б о ч и й  раств ор р еаген т ов  м о ж н о  хр ан и ть  в п л о тн о  закры том  виде 
при тем п ер атур е + 2 -8  °С  н е б о л е е  3 н е д  или при к ом н атн ой  т ем п ер а т у р е (+ 1 8 -2 5  °С ) не б о л ее
3 сут.
7 .2 . П ер ед  н ач ал ом  р абот ы  к ю в ету п ол уав том ати ч еск ого и л и  ав том атич еского б и о х и ­
м и ч еск ого ан ал и затор а и р а б о ч и й  р аств ор  р еаген тов  н агр еть д о  тем п ер атур ы  + 3 7  °С . П ри и з­
м ер ен и и  о п т и ч еск о й  п л о т н о ст и  п о ст о я н н о  п оддер ж и в ат ь  т ем п ер а т у р у  + 3 7 ± 0 ,2  °С .
7 .3 . П р о в ед ен и е ан ал и за н а п ол уав том ати ч еск ом  б и о х и м и ч еск о м  анализаторе.
В н ести  в т ер м о ст а т и р у ем у ю  к ю в ет у п ол у а в то м а ти ч еск о го  б и о х и м и ч еск о го  анализа­
тор а, п о д д ер ж и в а ю щ у ю  т ем п ер а т у р у  + 3 7 ± 0 ,2  °С , 10 0 0  м кл п о д о г р е т о г о  р абоч его раствора 
р еаген тов, д о б а в и т ь  4 0  м кл а н а л и зи р у ем о й  сы воротк и  или п лазм ы  к рови, тщ ательно п ер е­
м еш ать и вклю чить сек у н д о м ер .
П р и м еч ан и е. В  за в и си м о ст и  от о б ъ ем а  и сп о л ь зу ем о й  к ю веты  к ол и ч ество рабоч его 
раствора р еаген т ов  и ан а л и зи р у ем о й  сы воротк и  или п лазм ы  к рови  м о ж ет  бы ть п р оп ор ц и о­
нально и зм е н е н о  (с о о т н о ш е н и е  о б ъ е м а  сы воротк и  крови (п л азм ы ) к о б ъ е м у  р абоч его р аств о­
ра р еаген т ов  состав л я ет 1:25).
7 .3 .1 . Ч ер ез 2 м и н  и зм ер и т ь  о п ти ч еск у ю  п л о тн о сть  а н а л и зи р у ем о й  п р обы  при дл и н е 
волны  3 4 0  нм  п роти в в о зд у х а . П ов тор и ть и зм ер ен и я  3 р аза с и н тер вал ом  врем ени  1  м ин 
(т о ч н о !).
7 .3 .2 . Р ассчитать и зм е н е н и е  о п ти ч еск ой  п л о тн о сти  ан а л и зи р у ем о й  пробы  за  1  м ин 
(Д Е  /м и н ) п о ф орм уле:
АЕ /м и н  - ДЕп / 1,
где: ДЕп -  и зм е н е н и е  о п т и ч еск о й  п л отн ости  п р обы , е д . о п т. плотн.; 
t -  и н тер в ал  в р ем ен и  м еж д у  и зм ер ен и я м и , м ин .
О бщ ую  активность креатинкиназы  {А), Е/л, в ан ализи р уем ом  обр азц е определить по  
ф ормуле:
1. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
А  =  ( Д £ / л < м н ) х Р ,
где: А£' /  мин -  с р е д н е е  а р и ф м ети ч еск ое зн а ч ен и е и зм ен ен и я  оп ти ч еск ой  п л отн о­
сти  ан ал и зи р уем ой  п р о б ы  за  1  м и н , е д . оп т. п л отн ./м и н ;
Ф актор п ер есч ет а  (F ) о п р ед ел я ет ся  п о ф орм уле:
1 L


--- стр. 5 ---
• >
F =  ( V x  1 0 0 0 ) / ( f  X  v x ^ )  = (1 ,0 4 0  X  1000)7(6,3 x 0 ,0 4 0 x  1) = 4 1 2 7 , 
где: V  -  конечны й объ ем  реагентов в кю вете, мл;
V -  о б ъ ем  а н а л и зи р у ем о й  п р обы , мл;
е -  к о эф ф и ц и ен т  м ол я р н ой  э к с т и н ц и и  Р- Н А Д Ф  в у сл о в и я х  оп р ед ел ен и я  (6,3 л х 
моль"' X  см '');
i  - д л и н а  о п т и ч еск о го  п ути , см ;
1 0 0 0  -  к о эф ф и ц и ен т  п ер есч ет а  дл я вы раж ен ия о б щ е й  ак ти вн ости  креатинкиназы
в Е/л.
П р и м еч ан и е. 1  Е /л =  1 6 ,6 7  н м ол ь /(л х с ).
7 .4 . П р о в ед ен и е ан ал и за н а автом ати ч еск ом  б и о х и м и ч еск о м  ан ал изатор е.
П р о в ед ен и е ан ал и за н а автом ати ч еск ом  б и о х и м и ч еск о м  ан ал и затор е п роводи ть п о с о ­
о тв етств ую щ и м  загр узоч н ы м  л и стам , п р едостав л ен н ы м  п р ед п р и я ти ем -и зготов и т ел ем  н а б о ­
ра, согл асн о и н ст р ук ц и и  п о п р и м ен ен и ю .
О п р ед ел ен и е ак ти в н ости  о б щ е й  к реатинкиназы  п р о в ести  на ан ал ити ч еск ом  б и о х и м и ­
ч еск ом  ан ал и затор е, и сп о л ь зу я  о сн о в н ы е параметры :
Д л и н а  волн ы  в д и а п а зо н е 3 4 0  нм
И зм ер ен и е п р оти в В о з д у х а  или воды
М е т о д  и зм ер ен и я К и н ети к а
Е д и н и ц а  и зм ер ен и я Е /л
Ч и сл о зн ак ов  п о с л е  зап ятой 0
И зм ен ен и е о п т и ч еск о й  п л отн ости В о зр а ст а ет
Т ем п ер ат ур а +  3 7 + 0 ,2  °С
С о о т н о щ ен и е о б р а зе ц  :  р абоч и й  раствор 
р еаген тов
1  :2 5
В рем я и н к убац и и  (считы ван ия) > 3
В ер х н и й  п р ед ел  а б с о р б ц и и  р еаген та 
п роти в в оды
0,4 А
Ф актор 4 1 2 7
Л и н ей н о ст ь от 5 0  д о  16 0 0  Е /л
8. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
8 .1 . Н а б о р  р еа ген т о в  К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая  ф о р м а ) д о л ж ен  хран иться в уп а­
ковке п р едп р и я ти я -и зготов и т ел я  при тем п ер атур е + 2 -8  °С  в т е ч е н и е  в сего  срок а год н ост и 
(1 2  м ес). Д о п у ск а ет ся  х р а н ен и е н а б о р а  при т ем п ер а ту р е д о  + 2 5  °С  н е б о л е е  10 сут. Зам ор а­
ж и ван и е к о м п о н ен т о в  н а б о р а  н е д о п у ск а ет ся .


--- стр. 6 ---
8 .2 . Р а б о ч и й  р аств ор  р еа ген т о в  м ож н о^храни ть в п л о тн о  закры том  в и де при тем п ер а­
тур е + 2 -8  °С  н е б о л е е  3 н е д  и ли  при  к ом н атн ой  тем п ер а т у р е (+ 1 8 -2 5  °С ) н е б о л е е  3 сут.
8.3. Д л я п р о в ед ен и я  ан ал и за и сп ол ьзов ать н егем о л и зи р о в а н н у ю  сы в ор отк у крови, ге- 
п ар и н и зи р ов ан н ую  и Э Д Т А  п л а зм у  крови.
8.4. О бр азц ы  сы в ор отк и , плазм ы  крови м о ж н о  хр ан и ть п р и  к ом н атн ой  тем п ер атур е не 
б о л ее 4 -8  ч, при т ем п ер а т у р е + 2 -8  °С  -  н е б о л е е  2 су т  и л и  п ри  т ем п ер а ту р е м и н ус 20 °С и 
н и ж е -  не б о л е е  1  м ес.
П о в т о р н о е р азм о р а ж и в а н и е о б р а зц о в  сы воротк и, п лазм ы  к рови н е доп уск ается.
8.5. К ач еств о н а б о р а  м о ж е т  п роверяться п о о теч еств ен н ы м  и зар убеж н ы м  к онтроль­
ны м сы вороткам , аттестов ан н ы м  дан н ы м  м ет о д о м .
8.6. В  т о м  с л у ч а е, к о гд а  в ел и ч и н а ак ти вн ости  о б щ ей  креати н ки н азы  в ан ализир уем ы х 
о б р а зц а х  сы в ор отк и , п лазм ы  крови превы ш ает 100 0  Е /л , о б р а зе ц  с л е д у е т  р азв ести  ф и зи о л о ­
гич ески м  р аств ор ом  в 10 раз (2 0  м кл и ссл е д у е м о г о  о б р а зц а  +  180 м кл ф и зи ол оги ч еск ого р ас­
твора), п овтор и ть ан ал из и п о л у ч ен н ы й  р езул ь тат ум н о ж и ть  н а 10.
8.7. Д ля о т б о р а  и д о б а в л ен и я  ан ал и зи р уем ы х п р о б  и к о м п о н ен т о в  н абор а р ек о м ен д у ­
ется и сп ол ьзов ать п о л у а в то м а ти ч еск и е пи п етк и  с о  см ен н ы м и  н ак он еч н и к ам и , аттестованны е 
п о зн ач ен и ю  ср е д н е й  д о зы  и с х о д и м о с т и  резул ь татов п и п ети р ов ан и я .
8 .8. Д л я  п ол у ч ен и я  н а д еж н ы х  резул ь татов н е о б х о д и м о  ст р о г о е  с о б л ю д ен и е ин струк ­
ции п о п р и м ен ен и ю  н абор а.
П о в оп р осам , к асаю щ и м ся  к ачества н а б о р а  К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф орм а), с л е ­
д у е т  обращ аться в З А О  « В е к т о р -Б е с т »  п о адр есу:
6 3 0 5 5 9 , Н о в о си б и р ск а я  обл асть . Н ов о си б и р ск и й  р а й о н , п. К ол ь ц ов о, а/я 121, 
тел. (3 8 3 ) 2 2 7 -6 7 -6 4 , 2 2 7 -7 5 -5 0 , тел ./ф ак с (3 8 3 ) 3 6 3 -1 3 -4 6 .
В ед . научн ы й  со т р у д н и к  о т д е л а  б и о х и м и и 
З А О  « В ек т о р -Б ест »
Н ачальник о т д ел а  б и о х и м и и 
З А О  «В ек т о р -Б ест » , к .б .н .
" С -
« С О Г Л А С О В А Н О »
Зав. к аф едр ой  к л и н и ч еск ой 
л абор ат ор н ой  диагностики|^^;^,;^^^^^^^
Г Б О У  д п о  р м А п о  m i l
М и н здр ав соц р азв и ти я  Росс
Т .Н . С ум ен к о
Л .В . Гаевая
Подпись^
удостоверяю: 
Специалистяо ш
П о д п и с ь
а л и с у ю  к щ ш РМАПО
?0_года
Д . М . Н . ,  п р о ф е с с о р  В .В . Д ол гов 
< i^ _» f f c / y t I Q f - f ' f г.


--- стр. 7 ---
.» I  *  а


--- стр. 8 ---
УТВЕРЖДЕНА
П риказом  Р о сзд р а в н а д зо р а
от 2 0  г. №
«УТВЕРЖДАЮ»
Г ен ер ал ьн ы й  ди р ек тор
-ЗА О Ц <В ектор-Б ест»
М .Д . Х усаи н ов 
2 0 1 1 г .
ИНСТРУКЦ
п о п р и м ен ен и ю  Н а б о р а  р еаген т ов  для о п р ед ел ен и я  о б щ е й  активн ости 
к реати нки назы  в сы в ор отк е и п л азм е крови к и н ети ч еск и м  У Ф -м ет о д о м 
« К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф о р м а )»
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Н абор  р еа ген т о в  К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф ор м а) п р едн азн ач ен  для количе­
ствен н ого о п р ед ел ен и я  о б щ е й  ак ти вн ости  к реатинкиназы  в сы в ор отк е и п лазм е крови ч ел о­
века к ин ети ч еск и м  У Ф -м е т о д о м  в к л и н и к о-д и агн ости ч еск и х и б и о х и м и ч еск и х  лабораториях, 
и н ауч н о-и ссл едов ател ь ск ой  практике.
1.2. Н абор  в ы п уск ается в т р ёх  вари антах к ом п л ек тац и и , в зав и си м ост и  о т об ъ ём а  ра­
боч его р аств ора р еагентов: вари ант 1  (5 0  м л); вариант 2 (1 0 0  м л ) или вариант 3 а в т о .
В ари ан т 3 а в т о  п р ед н а зн а ч ен  для п р о в ед ен и я  ан ал иза н а ав том ати ч еск и х б и о х и м и ч е­
ских ан ал изатор ах, о б ъ ём  к о м п о н ен т о в  и и х р асф асов к а о п р ед ел я ет ся  вм ести м остью  кар­
тр идж ей  дл я д а н н о й  м о д ел и  ан ализатора.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип действия
К реати н к и наза к атал и зи р ует в п р и сутств и и  А Д Ф  и к р еати н ф осф ата си н т ез А Т Ф , к о­
торы й с уч асти ем  гек сок и н азы  ф о сф о р и л и р у ет  гл ю к о зу  с о б р а зо в а н и ем  гл ю к озо-6-ф осф ат а. 
В п р и сутстви и  гл ю к о зо -6 -ф о сф а т д еги д р о ген а зы  п р о и сх о д и т  реакция ок и сл ен и я гл ю к озо-6- 
ф осф ата и соп р я ж ен н ая  с н ей  реак ция в осстан ов л ен и я  Н А Д Ф  в Н А Д Ф Н . С к орость в осста­
новлен ия Н А Д Ф  п рям о п р оп ор ц и он ал ь н а ак ти вности креати н ки н азы  и и зм ер яется ф о то м ет­
рически при д л и н е волны  3 4 0  нм.
И н с т р у к ц и я  с о с т а в л е н а  с о т р у д н и к а м и  З А О  « В е к т о р - Б е с т » :  н а ч .  о т д е л а ,  к . б . н .  
Л .  В .  Г а е в о й  и  в е д .  н а у ч н ы м  с о т р у д н и к о м  Т .  И .  С у м е н к о .


--- стр. 9 ---
В со ста в  н а б о р а  входят:
-  р еа ген т 1: б у ф ер н ы й  р аств ор , pH  6 ,7 ± 0 ,2 , со д ер ж а щ и й  и м и д а зо л , 0 ,0 9  моль/л; a -D - 
гл ю к озу, 0 ,0 2  м оль/л; м агни я ац етат, 0 ,2 0  м оль/л; д и а д ен о зи н п ен т а ф о сф а т , 2 ,0  мкм оль; аде- 
н о зи н м о н о ф о сф а т , 1,0 м м оль; гек сок и н аза, 6 0 0  Е; (3-н и к оти н ам и даден и н ди н ук л еоти д ф осф ат 
(Р -Н А Д Ф ), 0 ,4  м м оль; N -а ц ет и л ц и ст еи н , 4 ,0  ммоль; эти л ен д и а м и н т ет р а у к су сн о й  кислоты  д и - 
н атри евую  сол ь, 2 ,0  м м ол ь/л ; н атрия а зи д , 0,1%  -  2 ф л ак он а (п о  2 0  м л ) (вариан т 1); 2 ф лако­
на (п о 4 0  м л) (вари ан т 2 ) и л и  1-4 к артри дж а (вариан т 3 авто)-,
-  р еаген т 2: и м и д а зо л , 2 0 ,0  м м оль; к р еати н ф осф ат, 6 ,0  м м оль; гл ю к озо-6-
ф о сф а т д ег и д р о г ен а за , 4 0 0  Е; аден ози н ди ф осф ат, 0 ,4  м м оль; н атри я а зи д , 0,1%  -  2 ф лакона 
(п о  5 ,0  м л) (вари ан т 1); 2 ф л ак он а (п о  10 м л) (вари ант 2 ) или 1-4 к ар тр и дж а (вариант 3 авто).
К о н еч н ы е к он ц ен тр ац и и  в р а б о ч ем  р аств ор е реагентов:
- и м и дазол ь н ы й  б у ф ер , p H  6 ,8  -  0,1 м оль/л;
- к р еа ти н ф о сф а т -  3 0 ,0  м м оль/л;
- Р- Н А Д Ф  -  2 ,0  м м оль/л;
- А Д Ф  -  2 ,0  м м оль/л;
- А М Ф  -  5 ,0  м м оль/л;
- гек сок и н аза -  3 0 0 0  Е/л;
- г л ю к о зо -6 -ф о с ф а т д е ги д р о г е н а за  -  2 0 0 0  Е/л;
- N -а ц ети л ц и стеи н  -  2 0 ,0  м м оль/л;
- д и а д ен о зи н п ен т а ф о сф а т  -  0,01 м м оль/л.
3 . А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е  И  Д И А Г Н О С Т И Ч Е С К И Е  Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И
3 .1 . Л и н ей н ость . Л и н ей н ая  обл асть  о п р ед ел ен и я  о б щ е й  ак ти вн ости  креатинкиназы  -  в 
д и а п а зо н е о т 5 0  д о  1600 Е /л. О тк л он ен и е о т  « л и н ей н о ст и »  - н е б о л е е  5% .
3 .2 . Ч ув ств и тел ьн ость о п р ед ел ен и я  -  н е б о л е е  4 0  Е /л.
3 .3 . К о эф ф и ц и ен т  вари ац и и  р езул ь татов о п р ед ел ен и й  -  н е б о л е е  5% .
3.4. Н орм альн ы е вел и ч и н ы  о б щ ей  ак ти вн ости  к реати н ки н азы  в сы в оротк е, п лазм е 
крови (при т ем п ер а ту р е + 3 7  °С):
-  ж ен щ и н ы  от 5 0  д о  165 Е/л;
-  м уж ч и н ы  о т  5 0  д о  190 Е /л.
3 .5 . Р ек о м ен д у ет ся  в к аж д ой  л абор ат ор и и  при и сп о л ь зо в а н и и  н а б о р а  уточ н и ть д и ап а­
зо н  норм альны х в ел и ч и н  о б щ е й  ак ти вн ости  к реати нкин азы  у  о б с л е д у е м о г о  к онти н ген та л ю ­
дей .
2.2. Состав набора


--- стр. 11 ---
7 .1 . П р и го т о в л ен и е р а б о ч его  раств ор а р еагентов.
С о д ер ж и м о е о д н о г о  ф л ак он а с р еаген т ом  1  о б ъ ед и н и т ь  с со д ер ж и м ы м  о д н о го  ф лако­
на с р еаген т ом  2. П ер ем еш ат ь  в р уч н ую .
П р и готовл ен н ы й  р а б о ч и й  р аств ор  р еаген тов  м о ж н о  хр ан и ть в п л о тн о  закры том  ви де
при т ем п ер а ту р е + 2 -8  °С  н е б о л е е  3 н е д  или при к ом н атн ой  т ем п ер а т у р е (+ 1 8 -2 5  °С ) не б о л ее
3 сут.
7 .2 . П ер ед  началом  р а б о т ы  к ю в ету п ол у а в то м а ти ч еск о го  или  автом атич еского б и о х и ­
м и ч еск ого ан ал и затор а и р а б о ч и й  раств ор р еаген т ов  н агреть д о  тем п ер атур ы  + 3 7  °С . П ри и з­
м ер ен и и  оп ти ч еск о й  п л о тн о сти  п о ст о я н н о  п оддер ж и в ат ь  т ем п ер а т у р у  + 3 7 ± 0 ,2  °С .
7.3 . П р о в ед ен и е ан ал и за н а п ол уав том ати ч еск ом  б и о х и м и ч е с к о м  ан ализаторе.
В н ест и  в т ер м о ст а т и р у ем у ю  к ю в ет у п ол у а в то м а ти ч еск о го  б и о х и м и ч еск о го  анализа­
тор а, п о д д ер ж и в а ю щ у ю  т ем п ер а т у р у  + 3 7 ± 0 ,2  °С , 10 0 0  м кл п о д о г р е т о г о  р а б о ч его  раствора 
р еаген тов, д о б а в и т ь  4 0  мкл ан а л и зи р у ем о й  сы в оротк и  или п лазм ы  крови , тщ ательно п ер е­
м еш ать и вклю чи ть сек у н д о м ер .
П р и м еч ан и е. В за в и си м о ст и  о т о б ъ ем а  и сп о л ь зу ем о й  к ю веты  колич ество р абоч его 
раствора р еа ген т о в  и а н ал и зи р уем ой  сы в оротк и  или п лазм ы  к рови  м о ж ет  бы ть п р оп ор ц и о­
нально и зм е н е н о  (с о о т н о ш е н и е  о б ъ е м а  сы в оротк и  крови (п л азм ы ) к о б ъ е м у  р абоч его раств о­
ра р еаген т ов  состав л я ет 1:25).
7 .3 .1 . Ч ер ез 2 м и н  и зм ер и ть  о п т и ч еск у ю  п л о тн о сть  а н а л и зи р у ем о й  п робы  при д л и н е 
волны  3 4 0  нм  п р оти в в о зд у х а . П ов тор и ть и зм ер ен и я  3 р аза с и н тер вал ом  врем ени  1  м ин 
(точ н о!).
7 .3 .2 . Р ассчи тать и зм е н е н и е  о п ти ч еск о й  п л о тн о сти  ан а л и зи р у ем о й  пробы  за 1  м ин 
(ДЕ /м и н ) п о ф орм уле:
А Е /м и н  =  Д Е п/ t ,
где: АЕп -  и зм е н е н и е  о п т и ч еск о й  п л отн ости  п р обы , е д . о п т. п лотн .; 
t -  и н тервал в р ем ен и  м е ж д у  и зм ер ен и я м и , м ин .
О бщ ую  активность креатинкиназы  {А), Е/л, в ан ализи р уем ом  обр азц е определить по  
формуле:
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
А  =  ( А £  /  м и н) X  F,
где: А Б  / мин  -  с р е д н е е  а р и ф м ети ч еск ое зн а ч ен и е и зм ен ен и я  оп ти ч еск ой  п л о тн о ­
сти ан ал и зи р уем ой  п р о б ы  за  1  м и н , е д . оп т. п л отн ./м и н ;
Ф актор п ер есч ет а  (F ) о п р ед ел я ет ся  п о ф орм уле:


--- стр. 12 ---
F =  ( V x  1 0 0 0 )/(£  X  vx^)  = (1 ,0 4 0  X  1000)7(6,3 x 0 ,0 4 0 x  1) = 4 1 2 7 , 
где: V  -  конечны й объ ем  реагентов в кю вете, мл;
V -  о б ъ ем  ан а л и зи р у ем о й  п р обы , мл;
S -  к о эф ф и ц и ен т  м ол я р н ой  э к с т и н ц и и  Р- Н А Д Ф  в у сл о в и я х  о п р едел ен и я  (6,3 л х 
м ол ь '’  X  см ’');
-  д л и н а  о п т и ч еск о го  п ути , см;
1000 -  к о эф ф и ц и ен т  п ер есч ета  для вы раж ения о б щ е й  ак ти вн ости  креатинкиназы
в Е/л.
П ри м еч ан и е. 1  Е /л =  1 6 ,6 7  н м оль /(л х с ).
7 .4 . П р о в ед ен и е ан ал и за на автом ати ч еск ом  б и о х и м и ч еск о м  ан ал изатор е.
П р о в ед ен и е ан ал и за н а автом атич еском  б и о х и м и ч еск о м  ан ал и затор е п роводи ть по с о ­
о тв етств ую щ и м  загр узоч н ы м  ли стам , п р едостав л ен н ы м  п р ед п р и я ти ем -и зготов и т ел ем  н а б о ­
ра, со гл а сн о  и н ст р ук ц и и  п о п р и м ен ен и ю .
О п р ед ел ен и е ак ти вн ости  о б щ ей  креатинкиназы  п р о в ести  н а автом атич еском  б и о х и ­
м и ч еск ом  ан ал и затор е, и сп ол ь зуя  о сн о в н ы е параметры :
Д л и н а  волны  в д и а п а зо н е 3 4 0  нм
И зм ер ен и е п роти в В о зд у х а  или воды
М ет о д  и зм ер ен и я К ин ети к а
Е д и н и ц а  и зм ер ен и я Е/л
Ч и сл о зн ак ов п о сл е запятой 0
И зм ен ен и е о п т и ч еск о й  п л отн остиВ о зр а ст а ет
Т ем п ер атур а +  3 7 ± 0 ,2  °С
С о о т н о щ ен и е о б р а зе ц  :  р абоч и й  раствор 
реаген тов
1  :2 5
В рем я и н к убац и и  (считы ван ия) > 3
В ер х н и й  п р ед ел  а б со р б ц и и  р еаген та 
п роти в воды
0,4 А
Ф актор 4 1 2 7
Л и н ей н о сть о т 50 д о  16 0 0  Е /л
8. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
8.1. Н абор  р еа ген т о в  К р еати н к и н аза-Н ов о (ж и дк ая ф ор м а) д о л ж ен  храниться в уп а­
ковке п р едп р и я ти я -и зготов и т ел я  при тем п ер атур е + 2 -8  °С  в т е ч ен и е в сего  срок а годн ост и 
(12 м ес). Д о п у ск а ет ся  х р а н ен и е н а б о р а  при тем п ер атур е д о  + 2 5  °С  н е б о л е е  10 сут. Зам ора­
ж и ван и е к ом п он ен тов  н а б о р а  н е доп уск ает ся .


--- стр. 13 ---
8.2. Р абоч и й  р аств ор  р еаген т ов  м о ж н о  .хранить в п л о тн о  закры том  ви де при тем п ер а­
тур е + 2 -8  °С  н е б о л е е  3 н е д  или при к ом н атн ой  т ем п ер атур е (+ 1 8 -2 5  °С ) н е б о л ее 3 сут.
8.3. Д ля п р о в ед ен и я  ан ал иза и сп ол ьзовать н егем о л и зи р о в а н н у ю  сы в оротк у крови, ге- 
п ар и н и зи р ов ан н ую  и Э Д Т А  п л азм у крови.
8.4. О бр азц ы  сы в ор отк и , плазм ы  крови м о ж н о  хран и ть п ри  к ом н атн ой  тем п ературе не 
б о л ее 4 -8  ч, при  т ем п ер а т у р е + 2 -8  °С  -  н е б о л е е  2 су т  или при т ем п ер атур е м ин ус 20 °С и 
н иж е -  н е б о л е е  1  м ес.
П о в т о р н о е р азм о р а ж и в а н и е о б р а зц о в  сы воротк и, п лазм ы  крови н е доп ускается.
8.5. К ач еств о н а б о р а  м о ж е т  п роверяться п о отеч еств ен н ы м  и зар убеж н ы м  контроль­
ным сы вороткам , аттестован н ы м  дан н ы м  м ет о д о м .
8.6. В  том  сл уч ае, к огд а вел и ч и н а акти вности  о б щ ей  креати н ки н азы  в анализируем ы х 
о бр азц ах сы в оротк и , п лазм ы  крови п ревы ш ает 100 0  Е /л , о б р а зе ц  сл е д у е т  развести ф и зи ол о­
гически м  р аств ор ом  в 10 раз (2 0  м кл и ссл е д у е м о г о  о б р а зц а  +  180 мкл ф и зи ол оги ч еск ого р ас­
твора), п овтори ть ан ализ и п ол уч ен н ы й  р езул ь тат ум н о ж и ть  н а 10.
8.7. Д ля о т б о р а  и д о б а в л ен и я  ан ал и зи р уем ы х п р о б  и к о м п о н ен т о в  н абор а р ек о м ен д у ­
ется и сп ол ьзов ать п ол уав том ати ч еск и е п ип етк и  с о  см ен н ы м и  н ак он еч ни к ам и , аттестованны е 
п о зн ач ен и ю  ср е д н е й  д о зы  и сх о д и м о с т и  р езул ь татов п и п ети р ован и я.
8 .8. Д ля п о л у ч ен и я  н а д еж н ы х  р езул ь татов н е о б х о д и м о  ст р о г о е со б л ю д е н и е  и н струк ­
ции п о п р и м ен ен и ю  н абора.
т
П о в оп р осам , к асаю щ и м ся  к ачества н абор а К р еати н к и н аза-Н ов о (ж идкая ф орм а), с л е­
д у ет  обращ аться в З А О  « В е к т о р -Б е с т »  п о адр есу:
6 3 0 5 5 9 , Н ов оси би р ск ая  обл асть , Н ов о си б и р ск и й  р ай он , п. К ол ь ц ов о, а/я 121, 
тел. (3 8 3 ) 2 2 7 -6 7 -6 4 , 2 2 7 -7 5 -5 0 , тел ./ф ак с (3 8 3 ) 3 6 3 -1 3 -4 6 .
В ед . н аучн ы й  сотр удн и к  от д ел а  б и о х и м и и 
З А О  « В ек т о р -Б ест »
Н ачальник о т д ел а  б и о х и м и и 
З А О  « В ек т о р -Б ест » , к .б.н .
П р ор ек тор  Г Б О У  В П О  Н Г М У 
М и н здр ав соц р азв и ти я 
п о л еч еб н о й  р а б о т е, д .м 
м .п .
Т .И . С ум ен к о
Л .В . Гаевая
Е.Л. Потеряева