Набор реагентов "Тест-система иммуноферментная для количественного определения СА19-9 в сыворотке крови человека" "ИФА-СА19-9" по ТУ 9398-243-70423725-2016 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2018/7104 от 28.04.2018 · класс риска 2б

Производитель: АО "ЭКОлаб" (Россия)

Вид изделия: Раковый антиген 19-9 (СА19-9) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 16 контрактов, медианная цена за единицу 3 990 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
В.Ю. Борисов
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов
«Тест-система иммуноферментная для количественного определения СА19-9
в сыворотке крови человека»
"ИФА-СА19-9’'
Регистрационное удостоверение №РЗН2018/7104 от 28.04.2018 г.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «Тест-система иммуноферментнгш для количественного определения 
СА19-9 в сыворотке крови человека» «ИФА-СА19-9» предназначен для количественного опреде­
ления СА-19-9 в сыворотке крови человека с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) на 
твердофазном носителе при "ручной" постановке и с использованием ИФА-анализаторов.
Для однократного применения набора по назначению.
Для клинической лабораторной диагностики in vitro.
Показания и противопоказания к применению изделия
Изделие предназначено для обследования больных при диагностике различных видов опу­
холей ЖКТ, печени, яичников, операбельности опухоли и исследовании эффективности терапии.
Противопоказаний не существует.
Описание целевого аналита, сведения о его научной обоснованности
Углеводный антиген СА19-9 известен также как сиалированный антиген Льюиса (сиалил 
Льюис'^); модифицированный остатком сиаловой кислоты антиген групп крови системы Льюиса. 
Он представляет собой тетрасахарид, который в организме может быть связан с разнообразными 
гликопротеинами и гликолипидами, в том числе с муцинами и ганглиозидами.
В норме показатель на С А 19-9 должен составлять от О  до 37 ЕД/мл и для мужчин, и для 
женщин. Если концентрация белка будет равна О  ЕД/мл или антиген вообще отсутствует в крови, 
то патологических процессов в организме нет. Если по результатам исследования на онкомаркер 
С А 19-9 наблюдается повышенный показатель, то это может указывать на развитие доброкаче­
ственных заболеваний: Воспалительные процессы в кишечнике: панкреатит Холангит муковисци- 
доз, непроходимость желчевыводящих путей. Повышение маркера во многих случаях связывают с 
патологическими процессами, происходящими в печени или желчном пузыре. Именно в этих ор­
ганах происходит метаболизм данного белка. При нарушении функции печени, застое желчи ути­
лизация онкомаркера снижается. Незначительные отклонения в работе данных органов отражают­
ся на уровне СА 19-9 в крови.
Повышение концентрации СА19-9 на мембранах клеток слизистых оболочек желудочно- 
кишечного тракта и в биологических жидкостях ассоциируется с аденокарциномами различных 
отделов ЖКТ и холоангиокарциномой. Значительное усиление синтеза СА19-9 связано с особен­
ностями развития опухоли и играет существенную роль в ее прогрессировании, в частности, в 
процессе образования метастаз.
Количественное измерение уровня СА19-9 в сыворотке крови традиционно используется 
для исследования различных видов опухолей эпителия ЖКТ, в первую очередь, карциномы под­
желудочной железы. Также определение СА19-9 применяется в лабораторных исследованиях 
бронхоальвеолярной аденокарциномы или аденокарциномы яичников. СА19-9 наиболее эффекти­
вен, как прогностический маркер, в частности, при определении операбельности опухоли, а также 
при составлении прогноза после операции и исследовании эффективности терапии.


--- стр. 2 ---
СОСТАВ И КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА
Иммуносорбент Моноклоналъные антитела к СА19-9, адсорбирован­
ные в лунках стрипов 96-луночного разборного по­
листиролового планшета для иммунологических 
реакций с плоским дном
12 стрипов
допускается раздельная упаковка стрипов (по 1-4 стрипа в пакете)
Калибровочные 
пробы (КП 1-6)
Пробы, содержащие известную концентрацию 
СА19-9 (ориентировочные значения концентрации 
СА19-9 в КП1 - 0 МЕ/мл, в КП2 - 25 МЕ/мл; в КПЗ 
- 75 МЕ/мл; в КП4 - 150 МЕ/мл; в КП5 - 300 
МЕ/мл; в КП6 - 600 МЕ/мл; точные значения кон­
центраций указываются на этикетках флаконов для 
каждой серии набора); прозрачная или слегка опа­
лесцирующая жидкостъ красного цвета.
№ 1  - 1,0 мл в 1 фл. 
№ 2 - 0,4 мл в 1 фл. 
№ 3 - 0,4 мл в 1 фл. 
№ 4 - 0,4 мл в 1 фл. 
№ 5 - 0,4 мл в 1  фл. 
№ 6 - 0,4 мл в 1  фл.
Контрольный по­
ложительный об­
разец (К+)
Проба, содержащая СА19-9 в известном диапазоне 
концентраций (указывается на этикетке флакона для 
каждой серии набора); прозрачная или слегка опа­
лесцирующая жидкость красного цвета.
0,4 мл в 1 фл.
Конъюгат Моноклональные антитела к СА19-9, меченные пе­
роксидазой хрена; прозрачная или слегка опалесци­
рующая жидкость синего цвета, возможно наличие 
осадка.
15 мл в 1 фл.
40-кратный кон­
центрат отмыва­
ющего буферного 
раствора 
[ОР(х40)1
Прозрачная или слегка опалесцирующая бесцветная 
пенящаяся жидкость, возможно наличие белого 
осадка.
25 мл в 1 фл.
Раствор индика­
торный (РИ)
Субстратный раствор, содержащий тетраметилбен- 
зидин (ТМБ) и перекись водорода; прозрачная бес­
цветная жидкость.
15 мл в 1  фл
Стоп-реагент Прозрачная бесцветная жидкость. 15 мл в 1 фл.
Одноразовые наконечники для автоматических пипеток (16 шт.)
Клейкая пленка для планшетов (4 шт.).
Примечания. Набор включает все реагенты, необходимые для постановки ИФА, кроме  
очищенной (дистиллированной или деионизированной) воды.
Набор укомплектован принадлежностями: 
вспомогательными пластиковыми емкостями (4 шт.),
Компоненты набора упакованы в коробку, в коробку вложена инструкция по применению и 
бланк калибровочного графика.
ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Базовый вариант комплектации позволяет одномоментное дублированное исследование 48 
образцов, включая калибровочные и контрольные (на каждый образец используется 2 лунки, при 
этом на калибровочные и контрольные образцы используется 14 лунок). Предусмотрена возмож-
Число стрипов 2 4 6 8 10 12
Число иссл. обр. 1 2-9 10-17 18-25 26-33 34-41
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ
Используется «сэндвич» вариант ИФА с двумя видами моноклональных антител, получен­
ных к разным эпитопам СА19-9. Моноклональные антитела к одному из эпитопов антигена нане­
сены на поверхность лунок иммуносорбента, антитела к другому эпитопу связаны с ферментом 
(пероксидазой) и входят в состав конъюгата. При внесении в лунки иммуносорбента исследуемого


--- стр. 3 ---
/
образца сыворотки и конъюгата происходит образование комплекса /антитело иммуносорбента/- 
/СА19-9/-/антитело конъюгата/. Наличие этого комплекса выявляется по цветной реакции с ТМБ. 
Интенсивностъ окрашивания реакционной смеси пропорционалъна концентрации СА19-9 в образ­
це.
ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Сыворотка крови человека объемом не менее 20 мкл.
Образцы до исследования можно хранить не более 3 сут при температуре от 2 до 8°С и 3 
мее при температуре минус 20°С или более низкой. Допускаетея только однократное заморажива­
ние-размораживание образцов. Размороженные образцы перед исследованием тщательно переме­
шать. Не допускается использование для исследования образцов е повышенным еодержанием ли­
пидов или с признаками гемолиза, и с видимым микробным проростом.
Образцы, содержащие осадок, перед анализом центрифугировать в течение 10-15 мин при 
2500-3000 об/мин.
Сбор биологического материала должен производиться в соответствии с ГОСТ Р 53079.4- 
2008 «Обеспечение качества клинических лабораторных исследований».
АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чуветвительность (минимальная определяемая концентрация СА19-9) - не более
1  МЕ/мл.
Коэффициент вариации <8 %.
Процент открытия составляет 90-110%.
Зависимость ОН от концентрации СА19-9 сохраняет линейный характер в диапазоне от 0 
до 600 МЕ/мл; отклонение от линейноети в указанном диапазоне составляет менее 10%.
"Ноок-эффект" (обратно пропорциональная завиеимость ОН от концентрации аналита, воз­
никающая при высоких его концентрациях) не наблюдается до концентрации 8000 МЕ/мл.
Коэффициент регресеии:
для серии 01 от 08.2017 г. соетавил 0,9348;
для серии 02 от 08.2017г. составил 0,9334.
Коэффициент корреляции соетавил 0,939963.
Воспроизводимоеть результатов составила 100%.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Набор биологически безопасен, однако с иеследуемыми образцами необходимо обращаться 
как с потенциально инфицированным материалом.
Потенциальный риек применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ №4н от 6 июня 2012 
г.).
Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение правил "Инетрукции по ме­
рам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико- 
диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений" (Утв. Минздравом СССР 
17 января 1991 г.), ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003).
Набор реагентов, в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические 
требования к обращению с медицинскими отходами» относится к классу Б (эпидемиологически 
опасные отходы).
Утилизацию или уничтожение, дезинфекцию наборов реагентов следует проводить в соот­
ветствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 "Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с ме­
дицинскими отходами" и МУ 287-113 "Методические указания по дезинфекции, предетерилизаци- 
онной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения".
Стоп-реагент при попадании на незащищенную кожу и слизистые может вызывать химиче- 
екие ожоги. В случае попадания на кожу - немедленно промойте пораженный участок водой.


--- стр. 4 ---
/
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
1. Оборудование и материалы (для "ручной" постановки)
Дозаторы пипеточные (пипетки полуавтоматические одно- и многоканальные переменного 
объема) для внесения реагентов в лунки планшета с погрешностью дозирования не более 5 % с 
наконечниками полипропиленовыми одноразовыми.
Ручные, или автоматические промыватели, или восьми- и двенадцатиканальные пипеточ­
ные дозаторы для промывания лунок планшета.
Спектрофотометр вертикального сканирования для измерения оптической плотности в лун­
ках планшета при 450 нм и/или в двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине 
волны сравнения в диапазоне 620-650 нм.
Центрифуга лабораторная на 2,5-3,0 тыс. об/мин.
Термостат на 37 °С.
Холодильник бытовой.
Фильтровальная бумага.
Вода очинденная (дистиллированная или деионизированная).
Контейнер для сбора жидких отходов.
70 %-ный раствор спирта этилового и 6 %-ный раствор перекиси водорода (дез.растворы) 
или растворы иных дезинфектантов, разрешенных к применению СП 1.32322-08, кроме хлорсо­
держащих.
ИФА-анализатор.
Приготовление рабочих растворов реагентов для ИФА
Приготовление рабочего промывочного раствора
При выпадении осадка солей в ОР(х40) прогреть его при температуре 37°С до полного 
растворения осадка.
При постановке на полном планшете с использованием ИФА-анализаторов 25мл ОР(х40) 
довести очищенной водой до 1 л.
При дробной "ручной" постановке использовать соотношения объемов ОР(х40) и воды, 
указанные в табл. 1  для разного числа исполъзуемых стрипов.
Таблица 1.
Число стрипов 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
ОР(х40), мл 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 25
Вода очищенная, 
мл до 160 до
240
до
320
до
400
ДО
480
до
560
до
640
до
720
до
800
ДО
880
до
1000
Готовый рабочий промывочный раствор хранить при температуре от 2 до 8 "С не более 
190 сут, при температуре от 18 до 25 "С - не более 15 суток.
Примечание: Все реагенты, кроме отмывающего раствора, готовы к применению. Конъ­
югат перед использованием тщательно перемешать в течение двух-трех минут!
Проведение ИФА ("ручная" постановка)
Перед работой извлечь набор из холодильника, вскрыть упаковку и вьщержать все реагенты 
перед проведением анализа не менее 30 мин при температуре от 18 до 25°С (пакет с иммуносор­
бентом вьщерживать при указанной температуре до вскрытия!). Жидкие реагенты тщательно пе­
ремешать. Извлечь из пакета планшет, вскрыв выше замка «zip-lock», и установить на рамку не­
обходимое для проведения ИФА количество стрипов. Неиспользованные стрипы немедленно по­
местить обратно в пакет с влагопоглотителем, удалить из него воздух, плотно закрыть «zip-loek» и 
поместить в холодильник.
Исследуемые образцы, в которых ранее бьша определена концентрация СА19-9 более 600 
МЕ/мл, предварительно развести в КП1 (концентрация СА19-9 должна попадать в диапазон от 
25 МЕ/мл до 600 МЕ/мл).
Внимание! Соблюдение указанных ниже температуры и времени инкубации планше­
тов на каждой стадии постановки крайне важно для получения достоверных результатов.


--- стр. 5 ---
Таблица 2. Рекомендуемая схема внесения образцов при использовании 12 стрипов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
А КП1 КП1 И02 И02 ИОЮ ИОЮ ИОЮ ИОЮ И026 И026 И034 И034
В КП2 КП2 ИОЗ ИОЗ ИОН ИОН ИОЮ ИОЮ И027 И027 ИОЗ 5 И035
С КПЗ КПЗ И04 И04 И012 ИОЮ ИО20 ИО20 И028 И028 И036 И036
D КП4 КП4 И05 И05 И013 И013 И021 И021 И029 И029 И037 И037
Е КП5 КП5 И06 И06 ИОН И014 И022 И022 ИОЗО ИОЗО ИОЗ 8 ИОЗ 8
F КП6 КП6 И07 И07 ИОН ИОН И023 И023 И031 И031 И039 И039
G К+ К+ И08 И08 ИОН ИОЮ И024 И024 И032 И032 ИО40 ИО40
Н И01 И01 И09 И09 И017 И017 И025 И025 ИОЗЗ ИОЗЗ И041 И041
1. Внести в лунки планшета (как можно ближе ко дну каждой лунки) по 10 мкл контроль­
ных проб и исследуемых образцов в соответствии со схемой их внесения.
2. Добавить в каждую лунку по 100 мкл конъюгата.
Внимание! Максимальная воспроизводимость результатов обеспечивается соблю­
дением одного и того же порядка внесения реагентов. Общее время внесения образцов и  
конъюгата не должно превышать 15 мин. В противном случае калибраторы следует вно­
сить в отведенные для них лунки после пипетирования первой половины проб. Если для  
анализа используется больше одного планшета, калибровку следует выполнять для каждого  
планшета.
3. Инкубировать планшет в термостатируемом шейкере при температуре 37° С и вращении 
со скоростью 500 об/мин в течение 60 минут.
4. По окончании инкубации удалить содержимое лунок в контейнер для сбора жидких от­
ходов и промыть лунки 5 раз отмывающим буферным раствором, заполняя лунки до краев и вы­
держивая их каждый раз по 30 с. По окончании промывки остатки раствора удалить из лунок, по­
стукивая перевернутым планшетом по сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаге.
5. Внести во все лунки по 100 мкл РИ и вьщержать стрипы 15-20  мин в защищенном от 
света месте при температуре от 18 до 25°С.
6. Добавить по 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку, соблюдая последовательность и 
скорость внесения в них РИ и не более чем через 15 мин приступить к учету результатов.
Регистрация и учет результатов
Результаты ИФА регистрировать спектрофотометрически, измеряя оптическую плотность 
(ОП) при двух длинах волн - 450 нм и 620-650 нм. При отсутствии референс-фильтра на 620-650 
нм оптическую плотность измерять при длине волны 450 нм, а выведение спектрофотометра на 
нулевой уровень ("бланк") осуществлять по воздуху.
Результаты ИФА учитывать при следующих условиях:
ОП450Н М  КП6- более 0,500
ОП450Н М  КП1 - менее 0,100.
В противном случае исследование необходимо повторить.
Построить калибровочную кривую методом кусочно-линейной интерполяции по точкам, 
ординатами которых являются полученные в ИФА значения ОП КП, а абсциссами - концентрации 
СА19-9 в этих пробах, указанные на этикетках флаконов, и определить по данной кривой концен­
трации СА19-9 в К+ и исследованных образцах (для разведенных образцов полученную по графи­
ку концентрацию СА19-9 необходимо умножить на степень разведения образца).
При использовании для расчетов концентраций СА19-9 компьютерного или встроенного в 
спектрофотометр программного обеспечения в настройках выбрать подходящий метод аппрокси­
мации (четырех- или пятифакторные регрессионные модели с преобразованиями осей и др.).
Полученные значения концентраций СА19-9 в исследуемых образцах учитывать только при 
условии попадания полученного значения концентрации СА19-9 в К+ в диапазон концентраций, 
указанный на этикетке флакона.


--- стр. 6 ---
Интерпретация результатов
Содержание СА19-9 в сыворотке крови здорового взрослого человека не превышает 
37 МЕ/мл.
Примечание. Каждой лаборатории следует самостоятельно определить нормальную кон­
центрацию СА19-9 с учетом используемого оборудования, способа взятия крови и методики ана­
лиза.
ПОСТАНОВКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИФА-АНАЛИЗАТОРОВ
Подготовить прибор в соответствии с инструкцией по эксплуатации, ввести программу 
анализа, соответствующую используемому набору, и провести анализ.
СРОК г о д н о с т и
Срок годности набора - 18 месяцев. Набор с истекшим сроком годности применению не 
подлежит.
ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ
Хранение
Хранение наборов должно осуществляться в холодильных камерах или холодильниках, 
обеспечивающих регламентируемый температурный режим, в упаковке предприятия-изготовителя 
при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности.
После вскрытия упаковок неиспользованные реагенты допускается хранить в плотно за­
крытых упаковках в холодильных камерах или холодильниках, обеспечивающих регламентируе­
мый температурный режим, при температуре от 2 до 8 “С в течение 3 мес.
Т ранспортирование
Транспортирование наборов - при температуре от 2 до 8°С транспортом всех видов в кры­
тых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте 
данного вида. Допускается транспортирование при температуре от 9 до 25°С в течение 15 суток.
УСЛОВИЯ ОТПУСКА
Для учреждений здравоохранения.
ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Набор реагентов «Тест-система иммуноферментная для количественного определения 
СА19-9 в сыворотке крови человека» «ИФА-СА19-9», соответствует ТУ 9398-243-70423725-2016, 
Национальным стандартам РФ и нормативным документам в части требований безопасности и 
эффективности.
По вопросам, касающимся качества набора "ИФА-СА-125", следует обращаться по адресу 
142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1-1а, ЗАО "ЭКОлаб"; тел. (49643) 3-23- 
11, факс (49643) 3-30-93 - отдел сбыта, (49643) 3-37-30 - ОБТК.
При предъявлении рекламации по поводу несоответствия физических и специфических 
характеристик набора реагентов заявленньш для проведения объективного расследования произ­
водителем причин несоответствия потребителъ должен предоставить:
1. набор реагентов той серии, на которую предъявляется рекламация;
2. все спорные исследуемые образцы пациентов;
3. протоколы анализа с указанием наименования, серии и сроков годности исполъзованного 
набора реагентов.
протоколы исследования с использованием других методов/наборов реагентов с указанием серии, 
сроков годности, производителя примененных наборов реагентов.


--- стр. 7 ---
Директор ЗАО "ЭКОлаб" по научной работе
/ "СОГЛАСОВА 
Г енеральн 
«
ШПЕЛ-МЕДЦЕНТ 
20 г.
С.Г. Марданлы
Л1.К. Варнавичус
КРАТКАЯ СХЕМА ПОСТАНОВКИ ИФА 
(”ИФА- СА19-9”)
Использовать только после тщательного ознакомления с инструкцией!
Внести в соответствии со схемой постановки по 10 мкл КП 1-6, К+, исследуемых образцов
Внести по 100 мкл конъюгата в каждую лунку
Инкубация 1  ч, при 37°С и 500 об/мин
Промыть 5 раз отмывающим буферным раствором
Внести по 100 мкл РИ в каждую лунку
Инкубация 15-20 мин, при 18-25°С в защищенном от света месте
Внести по 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку
Измерить ОП при 450 нм (референс 620-650 нм)