Набор реагентов для определения активности лактатдегидрогеназы в сыворотке и плазме крови «ЛДГ-кинетика» по ТУ 9398-101-70423725-2008 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА <<УТВЕЕЩАЮ>>
) ¥ SjBc
Приказом Росздравнадзора Щ
Ш Марданлы
2008 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
АКТИВНОСТИ ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ В
СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ
(«ЛДГ-кинетика»)
1. Назначение
Набор предназначен для количественного определения активности лактатдегид-
рогеназы (ЛДГ) в сыворотке и плазме крови в клинико-диагностических и биохимиче
ских лабораториях.
Набор предназначен для проведения 80 определений при расходе 1,0 мл рабоче
го раствора реагентов на один анализ.
2. Характеристика
2 .1 . Принцип действия
Кинетическое спектрофотометрическое определение активности ЛДГ основано
на регистрации уменьшения оптической плотности опытного образца при 340 нм в ре
зультате протекания следующей реакции:
пируват + НАДН + if' > лактат + НАД"
Скорость окисления НАДН пропорциональна активности ЛДГ.
2 .2 . Состав набора
• Реагент 1 - субстратно-буферный раствор (трис (гидроксиметил) аминоме-
тан, 0,05 моль/л; этилендиаминтетрауксусной кислоты динатриевая соль (трилон-Б), 5,0
ммоль/л; натрия азид, 15,4 ммоль/л; натрий пировинограднокислый, 1,6 ммоль/л; на
трий хлористый, 0,2 моль/л), pH 7,4 - 4 флакона (по 20 мл).
• Реагент 2 - НАДН, 0,24 ммоль/л, лиофилизат - 4 флакона.
3. Аналитические и диагностические характеристики набора
Линейность в диапазоне от 90 Е/л до 2000 Е/л; отклонение - не более 5 %,
Чувствительность - не более 70 Е/л.
Коэффициент вариации результатов определения - не более 5 %.
Качество набора может быть проверено по отечественным или зарубежным кон
трольным сывороткам, аттестованным данным методом.
Н ормальные значения содержания лактатдегидрогеназы:
в сыворотке и плазме крови от 200 до 450 Е/л.
Рекомендуется в каждой лаборатории определить диапазон нормальных величин
для обслед> емого контингента.
--- стр. 2 ---
4. Меры предосторожности при работе с набором
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Реагент 1 содержит ядовитое вещество - натрия азид. При работе с ним следует
соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попада
нии немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды.
При проглатывании следует вьшить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
Меры предосторожности - соблюдение «Правил устройства, техники безопасно
сти, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены
при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических уч
реждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластико
вые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально
инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус ге
патита или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
5. Оборудование, материалы и реагенты
• Фотометрическое оборудование, длина волны 340 нм, термостатируемая кю
вета с длиной оптического пути 1,0 см;
• таймер;
• пипетки позволяющие отбирать объемы жидкости 1 О О О мкл и 10 мкл;
• вода дистиллированная;
• 0,9 % раствор натрия хлористого (физиологический раствор);
• перчатки резиновые или пластиковые.
6. Анализируемые образцы
Негемолизированная сыворотка, гепаринизированная или ЭДТА плазма крови.
Сыворотку и плазму крови можно хранить при температуре (2-8) ^С не более 1
сут.
7. Проведение анализа
7 .1. Приготовление рабочего раствора реагентов
К содержимому одного флакона с реагентом 2 добавить 5-7 мл реагента 1, пере
мешать круговыми движениями до полного растворения, не допуская пенообразования.
Полученный раствор перенести во флакон с реагентом 1, перемешать.
Рабочий раствор реагентов можно хранить при температуре (2-8) °С в темном
месте в плотно закрытом флаконе не более 10 сут.
7.2. Проведение анализа
Перед проведением анализа рабочий раствор реагентов довести до температуры
(37±1)^С.
Рабочий раствор реагентов и анализируемую пробу внести в кювету в количес
твах, указанных в таблице.
Таблица
Отмерить, мкл Опытная проба 1
Рабочий раствор реагентов 1000
Сыворотка (плазма) крови 10
^ При использовании кюветы меньшего объема расход реагентов
может быть уменьшен при сохранении указанных выше соотношений
--- стр. 3 ---
Перемешать и поместить в термостатируемое отделение при температуре (37 ±
1) Через 30 сек измерить оптическую плотность пробы {Е„^, Измерение оптической
плотности повторить 3 раза с интервалом в 1 мин.
8. Р егистрац и я результатов
Длина волны: 340 нм;
Длина оптического пути: 1,0 см;
Температура анагшза: (37 ± 1) ® С ;
Измерение: относительно воздуха.
9. У ч ет результатов реакции
Рассчитать изменение оптической плотности в минуту {АЕ\) для каждого опре
деления по формуле ( 1):
АЕ, = Е,-Е„ Щ = Е,-Е,, Щ^Е,-Е, (1),
где El - значение оптической плотности пробы после инкубации (задержка);
Е2,з,4 - значение оптической плотности пробы после 1,2,3 минуты реакции,
соответственно
Рассчитать среднее арифметическое значение изменения оптической плотности
в минуту ( АЕ^р t мин ) для анализируемой пробы по формуле (2):
,2),
’ 3
где , Л £2 , А£з - изменения оптической плотности проб в первую, вторую и
третью минуты реакции;
3 - количество минут, в течение которых проводилось измерение.
Рассчитать активность ЛДГ (А) по формуле (3):
А= А Е/мин X 16030 (3),
пл.;
где А - активность ЛДГ, Е/л;
А Е/мин - среднее изменение оптической плотности пробы в минуту, ед. опт.
16030 - фактор пересчета для выражения активности Д1Ц ", Е/л.
Коэффициенты пересчета: 1 Е/л ^16,67 нмоль/л/(с х л); 1 Е/л = 0,0167мккат/л;
1 Е/л = 0,06ммолъ/ч X л)
10. У словия хранения и эксплуатации набора
Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре
(2-8) °С в течение всего срока годности. Допускается хранение при температуре до 25
не более 5 сут. Замораживание компонентов набора не допускается.
Срок годности набора - 1 год.
Реагенты 1 и 2 после вскрытия флаконов можно хранить при температуре (2-8)
°С в темном месте в плотно закрытых флаконах в течение всего срока годности.
Рабочий реагент можно хранить при температуре (2-8) °С в темном месте в
плотно закрытых флаконах не более 10 сут.
При активности лактатдегидрогеназы выше 2000 Е/л (А Е/мин более 0,130) про
бу следует развести физиологическим раствором в 10 раз и полученный результат ум
ножить на 10.
--- стр. 4 ---
По вопросам, касающимся качества набора «ЛДГ-кинетика» следует об
ращаться по адресу 142530, Московская обл., г, Электрогорск, ул. Буденного, д,
1, ЗАО «ЭКОлаб»; тел/факс (49643) 3-30-93, 3-30-85 - отдел сбыта.
Начальник лаборатории
биохимии ЗАО «ЭКОлаб» Т. М. Сиренко
«СОГЛАСОВАНО»
Г енеральный директор
ЗАО «Вымпел-Медцентр»
кандитат мед. наук