Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека "РусГенТест МагСет Цито" по ТУ 21.20.23-001-87575640-2021, серия 01 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор СЙЭи\<НаноДиагностика» Демкин В.В. 2022 ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ Набора реагентов для выделения нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека «РусГенТест МагСет Цито» по ТУ 21.20.23-001-87575640-2021, серия 01 --- стр. 2 --- I. НАИМЕНОВАНИЕ Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека «РусГенТест МагСет Цито» по ТУ 21.20.23-001-87575640-2021, серия 01 (далее по тексту - набор, набор реагентов, набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито»). 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА Полное наименование Набор реагентов для выделения нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека «РусГенТест МагСет Цито» по ТУ 21.20.23-001-87575640-2021, серия 01 Сокращенное наименование Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» Каталожный номер В-001 Количество исследований Набор реагентов рассчитан на выделение НК из 100 образцов, включая контроли. Метод экстракции Метод осаждения и сорбции на магнитных частицах Общее время проведения анализа 20 минут Состав набора реагентов 1. Магнитный сорбент - 1 пробирка (1,5 мл) 2. Раствор-С - 1 флакон (30,0 мл) 3. Раствор для отмывки - 1 флакон (30,0 мл) 4. Раствор для элюции - 1 флакон (15,0 мл) 5. Инструкция - 1 шт. Готовность реагентов набора к использованию Реагенты набора требуют дополнительного смешивания Воспроизводимость результатов исследования Внутрисерийная и межсерийная воспроизводимость результатов исследования с использованием набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» подтверждена в ходе проведения испытаний внутри одной серии и на разных сериях набора реагентов и составляет 100%. Коэффициент вариации значений при исследовании одного и того же образца после эксзракции НК не превышает 8 %. Повторяемость результатов исследования Повторяемость результатов исследования с использованием набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» подтверждена путём сравнения результатов, полученных при исследовании одних и тех же образцов в разные дни, разными операторами, и составляет 100%. Коэффициент вариации значений при исследовании одного и того же образца после экстракции НК не превышает 8 %. Тип анализируемого образца Биологический материал человека, полученный при взятии мазков со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокроты, промывных вод бронхов (ПВБ) или броихоальвеолярного лаважа (БАЛ), фекалий Объем анализируемого образца 100 мкл Объем готового препарата НК 100 м кл Условия транспортирования Транспортирование наборов реагентов должно осуществляться в соответствии с ГОСТ Р 51088 и правилами перевозки грузов, всеми видами крытого транспорта, в условиях, обеспечивающих сохранность: - при температуре от +2°С до +25 °С на протяжении всего срока годности или при темперазуре от +25®С до +37 °С до 5 суток; - при относительной влажности не выше 70 %; - в условиях, исключающих действие агрессивных сред, прямых солнечных лучей и влаги. Замораживание не допускается. Наборы реагентов, транспортированные с нарушением указанных условий, применению не подлежат. --- стр. 3 --- Условия хранения Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» хранят в упаковке изготовителя при температуре от +2°С до +25®С. Срок годности набора реагентов 18 месяцев при соблюдении режима хранения и транспортирования Сведения о производителе Общество с ограниченной ответственностью «Нанодиагностика», Адрес; Россия, г. Москва, площадь Академика Курчатова, дом 2, стр.1, тел. 8 (499) 196-21-11 Сведения об уполномоченном представителе производителя Общество с ограниченной ответственностью «ПЦР Диагностика», Адрес: Россия, г. Нижний Новгород, Сергиевская ул. д. 24/43, помет. 7 ком. 1, тел. 8-800-600-60- 46, e-mail: pcrd-info@yandex.ru 3. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» предназначен для выделения нуклеиновых кислот коронавируса SARS-COV-2 из образцов биологического материала человека, полученных при взятии мазков со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокроты, промывных вод бронхов (ПВБ) или бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), фекалий для последующего исследования методом обратной транскрипции (ОТ) и полимеразной цепной реакции (ПЦР). ^Для профессионального применения в диагностики in vitro в качестве вспомогательного средства на ^преаналитическом этапе исследования; для использования как в ручном, так и в автоматическом режиме. Набор предназначен для обследования всех групп населения любого возраста без градации по демографическому или популяционному признаку. Функциональное назначение: Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» используется как вспомогательное средство в диагностике. 4. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ Клиническая лабораторная диагностика. Для диагностики in vitro. Набор реагентов может быть использован в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений, лечебных и лечебно-профилактических учреждений здравоохранения и других организаций лечебного профиля. Безопасность работы лабораторий должна быть обеспечена в соответствии с требованиями законодательства в сфере санитарно-эпидемиологического благополучия. 5. ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ ПОЛЬЗОВАТЕЛИ W Набор реагентов предназначен для профессионального использования медицинскими работниками ДЛ со средним и высшим медицинским образованием (врач клинико-диагностической лаборатории, медицинский техник-лаборант), прошедшими обучение по работе с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности), поскольку коронавирус SARS-CoV-2 относится ко II группе патогенности. Только для профессионального применения. Н ч 6. ПОКАЗАНИЯ к ПРИМЕНЕНИЮ Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» может быть использован в клинической лабораторной диагностике для выявления коронавируса SARS-CoV-2 - возбудителя коронавирусной инфекции COVID-19, потенциально вызывающей острый респираторный синдром. Определение коронавируса SARS-CoV-2 показано для лиц, контактировавших с заболевшими COVID-19, а также лиц с клинической симптоматикой ОРВИ с подозрением на инфекцию COVID-I9 и лиц без симптомов ОРВИ в очагах инфекции с целью раннего выявления SARS-CoV-2 для предотвращения дальнейшего распространения инфекции. Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» предназначен для экстракции нуклеиновых кислот коронавируса SARS-COV-2 из образцов биологического материала человека для последующего исследования методами амплификации нуклеиновых кислот (МАНК), которое может быть использовано в клинической лабораторной диагностике специфической патологии. Тип исследования (количественный, качественный) зависит от используемого набора реагентов для амплификации нуклеиновых кислот коронавируса SARS-COV-2 и указан в инструкции пользователя к --- стр. 4 --- используемому набору реагентов для амплификации нуклеиновых кислот коронавируса SARS-COV- 2. Экстракцию нуклеиновых кислот методом сорбции на силиканизированных частицах магнитного сорбента проводят ручным и автоматизированным способами. Яабор реагентов предназначен для однократного применения. 7. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПАТОЛОГИЯ, СОСТОЯНИЕ ИЛИ ФАКТОР РИСКА - лица с клинической симптоматикой ОРВИ; -лица с подозрением на инфекцию COVID-19; - лица, контактировавших с заболевшими COVID-19; - лица без симптомов ОРВИ, находившиеся в очагах инфекции с целью раннего выявления SARS-CoV- 2 для предотвращения дальнейшего распространения инфекции. 8. ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ Противопоказаний к применению нет. I 9. ДЕМОГРАФИЧЕСКИЕ И ПОПУЛЯЦИОННЫЕ АСПЕКТЫ ||^Применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. to. ПОБОЧНЫЕ ДЕЙСТВИЯ Не применимо для данного медицинского изделия (МИ). II. ПРИНЦИП МЕТОДА Метод выделения нуклеиновых кислот с использованием набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» основан на связывании нуклеиновых кислот с магнитным сорбентом в присутствии хаотропных солей и их последуюшей элюцией в низкосолевом растворе. На первом этапе при термической обработке происходит деструкция клеточных мембран, вирусных или бактериальных оболочек и органелл за счет обработки лизирующим раствором (раствором-С), выход свободных нуклеиновых кислот в раствор и их связывание с частицами магнитного сорбента, в то время как другие компоненты лизированного биологического материала остаются в растворе и удаляются после осаждения сорбента магнитной силой или центрифугированием. На втором этапе магнитный сорбент отмывают раствором для отмывки от остатков реагентов, использованных на предыдущем этапе, и от других примесей. На заключительном этапе НК элюируют с поверхности ,сорбента в раствор. При добавлении к магнитному сорбенту раствора для элюции происходит переход К в раствор с поверхности сорбента, который в последующем отделяется от раствора НК магнитной силой или центрифугированием. Элюат, содержащий высокоочищенный препарат нуклеиновых кислот, используют для ПЦР-исследования. Набор реагентов позволяет выделять нуклеиновые кислоты как в ручном режиме (на магнитном штативе или с применением центрифуги), так и в автоматическом режиме с использованием открытых роботизированных станций: 1. Система для автоматического выделения и очистки нуклеиновых кислот из биологического материала Auto-Pure 96 ф. ООО «Хапчжоуская компания инструментов Аошэн» (РУ № РЗН 2022/16430); Процессор магнитных частиц для очистки нуклеиновых кислот, клеток и белков KingFisher Flex ф. «Термо Фишер Сайентифик Ой» (РУ № ФСЗ 2009/05562); Станция дозирующая автоматическая Microlab STARIet ф. «Гамильтон Бонадуц АГ» (РУ № РЗН 2018/6981); Анализатор автоматический модульный Тесап Freedom EVO ф. «ТЕКАН ШваГш АГ» (РУ № ФСЗ 2008/03047). 2. 3. 4. 12. СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ В состав набора входят следующие реагенты: [ --- стр. 5 --- Реагент Магнитный сорбент Раствор-С « 1# Количество 1 пробирка 1 флакон Объем ,5 мл 30,0 мл Раствор для отмывки Раствор для элюции 1 флакон флакон Описание Суспензия темно- коричневого цвета, образующая осадок Прозрачная бесцветная жидкость без механических примесей. Допускается выпадение кристаллического осадка Состав компонента Суспензия магнетита (ф. Magen Biotechnology Со., Китай, кат. № С14121) - 2,5% в деионизированной воде; азид натрия (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. № 71289, CAS № 26628-22- 8) - 0,1%, 30,0 мл 15,0 мл Прозрачная бесцветная жидкость без механических примесей Прозрачная бесцветная жидкость без механических примесей Сорбирующий раствор, содержащий изопропанол (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. № 19516, CAS № 445382-14-9)-40%, гуанидина тиоционат (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. № G9277, CAS № 593-84-0) - 30%, хлорид натрия (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. №S7653,CAS№7647-14- 5) - 5%, азид натрия (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. № 71289, CAS№ 26628-22- 8)-0,1% в деионизированной воде 50% раствор ацетона (ф. Sigma-Aldrich, США, кат. № 179124, CAS№ 67-64- 10) в деионизированной воде Раствор ЭДТА (ф. Sigma- Aldrich, США, кат. № EDS, CAS № 60-00-4) - 0,03% в деионизированной воде, азид натрия (ф. Sigma- Aldrich, США, кат. № 71289, CAS № 26628-22-8) - 0, 1% Набор реагентов рассчитан на выделение НК из 100 образцов, включая отрицательные контроли. В комплект поставки входят: набор реагентов, инструкция по применению, паспорт качества. 13. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХАРАКТЕРИСТИКИ И ПОКАЗАТЕЛИ ПРАВИЛЬНОСТИ 13.1. Эффективность выделения нуклеиновых кислот Эффективность выделения нуклеиновых кислот (отношение между концентрацией РНК в образце после выделения к концентрации РНК в образце до выделения) составляет от 80 до 100%. 13.2. Чистота выделения нуклеиновых кислот Чистота выделения нуклеиновых кислот по показателю соотношения значений А260/А280 составляет не менее 1,7. 13.3. Воспроизводимость результатов исследования --- стр. 6 --- Внутрисерийная и межсерийная воспроизводимость результатов исследования с использованием набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» подтверждена в ходе проведения испытаний внутри одной серии и на разных сериях набора реагентов и составляет 100%. Коэффициент вариации значений при исследовании одного и того же образца после экстракции НК не превышает 8 %. 13.4. Повторяемость результатов исследования Повторяемость результатов исследования с использованием набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» подтверждена путём сравнения результатов, полученных при исследовании одних и тех же образцов в разные дни, разными операторами, и составляет 100%. Коэффициент вариации значений при исследовании одного и того же образца после экстракции НК не превышает 8 %. 13.5. Потенциально интерферирующие вещества Для оценки потенциальной интерференции были протестированы образцы различных видов биологического материала без добавления и с добавлением потенциально интерферирующих веществ: Интерферепт Концентрация интерферента Вид биологического материала Наличие интерференции Муцин 9 мг/мл Мазки со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокрота, ПВБ, БАЛ, фекалии Отсутствует Гемоглобин 0.21 г/мл Мазки со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокрота, ПВБ, БАЛ, фекалии Отсутствует Цельная кровь 50% Билирубин 171 мкмоль/л Фекалии Отсутствует Холестерин 13 ммоль/л Фекалии Отсутствует Рифампицин 17,5 мкг/мл ПВБ, БАЛ, фекалии Отсутствует Изониазид 7 мкг/мл Пиразинамид 39 мкг/мл Офлоксацин 5,2 мкг/мл Водный раствор хлоргексидина биглюконата 5% Мазки со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки Отсутствует Ксилометазолин, Назонекс, Пиносол, Оксиметазолин 5% Мазки со слизистой оболочки носоглотки Отсутствует 13.6. По результатам проведенных клинических испытаний в РФ подтверждены заявленные арактеристики эффективности медицинского изделия путем проведения выделения нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека, полученных при взятии мазков со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокроты, промывных вод бронхов (ПВБ) или бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ), фекалий, с последующим исследованием методом обратной транскрипции (ОТ) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) РНК SARS-CoV-2. 14. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ - Потенциальный риск применения набора реагентов - класс 3 (согласно Номенклатурной классификации медицинских изделий, утвержденной Приказом Министерства Здравоохранения Российской Федерации от 06.06.2012 № 4н). - Использовать только для диагностики in vitro. - Набор реагентов предназначен только для профессионального применения. - При работе с набором реагентов следует соблюдать требования ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности». - Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно-биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических правил СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней" и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы 1-1V групп патогенности». --- стр. 7 --- - при работе с набором реагентов необходимо обеспечить соблюдение персоналом правил биологической безопасности и требований к организации и проведению данных работ с целью предотвращения контаминации нуклеиновыми кислотами и (или) ампликонами исследуемых проб помещений и оборудования. - Все образцы, полученные для лабораторного исследования, следует считать потенциально инфицированными, и при работе с ними должны учитываться требования СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». - Не допускается использовать набор реагентов с истекщим сроком годности. - Не допускается использовать набор реагентов при нарушении условий транспортирования и хранения. - Не допускается использование реагентов из наборов разных серий. - Не допускается использовать набор реагентов при нарушении внутренней упаковки реагентов. - Выделение нуклеиновых кислот из образцов биологического материала человека с использованием набора реагентов следует проводить в боксированном помещении, оборудованном системой приточной и вытяжной вентиляции или боксе микробиологической безопасности II класса. Всё лабораторное оборудование, в том числе пипетки, штативы, лабораторная посуда и др., а также рабочие растворы должны быть строго стационарными. Запрещается их перемещение из одного помещения в другое. - Необходимо использовать одноразовые стерильные пластиковые расходные материалы, имеющие специальную маркировку RNase-free, DNase-free. - Для манипуляций с набором реагентов, пробами биологического материала и анализируемыми образцами (пробами выделенных НК) использовать одноразовые пробирки и наконечники для дозаторов с аэрозольным барьером, одноразовые перчатки без талька. Для каждой операции использовать новые наконечники с аэрозольным барьером. - При работе с набором реагентов использовать средства индивидуальной защиты (блузон и брюки или халат, шапочку, тапочки или сабо, очки защитные, полумаску, одноразовые неопудренные перчатки, нарукавники одноразовые) для предотвращения контакта с организмом человека. При использовании по назначению и соблюдении мер предосторожности контакт с организмом человека исключён. - Тщательно мыть руки по окончании работы. - В реагенте «Раствор-С» содержится гуанидина тиоционат, вызывающий ожоги и повреждения глаз, вреден при проглатывании. Не разбрызгивать! Следует избегать контакта реагентов набора с кожей, глазами и слизистыми оболочками. При попадании на них реагентов набора промыть большим количеством воды. В случае приема внутрь реагентов набора немедленно обратиться за медицинской помощью. - Изопропиловый спирт, входящий в состав реагента «Раствор-С», и ацетон, входящий в состав еагента «Раствор для отмывки», обладают раздражающим действием. Не проводить работы с данными реагентами в непосредственной близости от открытого огня. - В состав «Раствор для элюции» входит азид натрия в концентрации 0,1%. При попадании компонентов с ним на кожу: смыть большим количеством воды с мылом. При попадании в глаза: промыть глаза водой. При попадании в желудок: прополоскать рот водой. Получить консультацию у врача. - В случае приема внутрь реагентов набора немедленно обратиться за медицинской помощью. - Все компоненты, входящие в состав реагентов набора, в используемых концентрациях являются нетоксичными, вредного влияния на организм оператора не оказывают. - Набор реагентов не содержит материалов биологического происхождения, веществ в концентрациях, обладающих канцерогенным, мутагенным и влияющим на репродуктивную функцию человека действием. При использовании по назначению и соблюдении мер предосторожности набор реагентов безопасен. Все использованные материалы, инструменты и оборудование, рабочие поверхности дезинфицировать в соответствии с требованиями МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения». - Все поверхности в лаборатории ежедневно подвергать влажной уборке с применением дезинфицирующих/моющих средств. --- стр. 8 --- в|1н - Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постановка ПЦР, до начала и после завершения работ необходимо подвергать ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин. - Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов. 15. НЕОБХОДИМОЕ ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - ламинарный бокс (класс биологической безопасности И тип А); - твердотельный термостат для пробирок объемом 1,5 - 2,0 мл с возможностью термостатирования при +65 °С; - центрифуга для пробирок 0,2 и 1,5-2 мл с модулем вортекса со скоростью вращения 2400 об/мин; - микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» со скоростью вращения до 13000 об/мин; - магнитный щтатив для пробирок типа «Эппендорф» объёмом 1,5-2 мл (не обязателен при использовании протокола с центрифугированием или автоматизированной станцией); - вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной жидкости; - одноразовые полипропиленовые закрывающиеся пробирки объемом 1,5 - 2,0 мл; - дозаторы полуавтоматические одноканальные с переменным объёмом отбора жидкостей: от 0,5 до 10 мкл, от 10 до 100 мкл, от 100 до 1000 мкл; - одноразовые наконечники к дозаторам полуавтоматическим с аэрозольным барьером, свободные от |ДНКаз. РНКаз, объемом 20 мкл, 200 мкл, 1000 мкл; - одноразовые наконечники к дозаторам полуавтоматическим без аэрозольного барьера, объемом до 200 мкл; -деионизованная стерильная вода свободная от ДНКаз, РНКаз; - штативы для пробирок и наконечников; - холодильник от +2 °С до +8 °С, с морозильной камерой от минус 24 °С до минус 16 °С; - отдельный халат и одноразовые перчатки; - емкость для сброса наконечников, пробирок и других расходных материалов; - комплект средств для обработки рабочего места; - автоматизированная станция (при ее использовании). 16. УКАЗАНИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ Набор регентов должен применяться согласно инструкции по применению, утвержденной в установленном порядке. 15.1 Условия применения набора реагентов: - температура окружающей среды (15 - 25) °С; - относительная влажность воздуха (не более 70) %. абор реагентов не имеет предыдущих модификаций, находящихся в обращении. Набор реагентов не подлежит техническому обслуживанию и ремонту. 17. АНАЛИЗИРУЕМЫЙ БИОМАТЕРИАЛ Материалом для исследования являются образцы биологического материала человека, полученные при взятии мазков со слизистой оболочки носоглотки и/или ротоглотки, мокроты, промывных вод бронхов или бронхоальвеолярного лаважа, фекалий. Взятие, транспортирование, хранение, предварительную обработку и передачу исследуемого материала в другие организации осуществляют согласно методическим документам, регламентирующим выполнение исследований в соответствии с требованиями «Временные методические рекомендации профилактика, диагностика и лечение новой коронавирусной инфекции (COVID-I9) Версия 16 (18.08.2022), МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности» и СанПиН 3.3686-21 "Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней". Информацию о порядке взятия, условиях транспортирования и хранения исследуемого материала, необходимости и порядке его подготовки к экстракции нуклеиновых кислот смотрите в инструкции к используемому набору реагентов для проведения амплификации. --- стр. 9 --- I 18. ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ НК Проверить пробы биологического материала на пригодность. Непригодными для исследования являются образцы: гемолизированные, липимичные, немаркированные или несущие нечитаемую маркировку, для которых не указаны дата получения материала, хранившиеся и транспортировавшиеся с нарушением требований, установленных для данного типа биологического материала, с нарушением целостности и/или герметичности контейнеров. В случае непригодности доставленного образца необходимо уведомить врача, назначившего исследование, и рекомендовать повторное взятие материала с соблюдением всех перечисленных правил. Если повторное взятие таких образцов материала невозможно, при оформлении результата ПЦР-исследования необходимо отразить возможность влияния нарушения правил преаналитического этапа на полученный результат. Пробы клинического материала, хранившиеся в холодильнике/морозильнике, перед анализом прогреть до температуры 20 - 28 °С. Исследуемые образцы непосредственно перед выделением НК тщательно гомогенизировать на вортексе, капли материала с внутренней части крышки убрать кратковременным центрифугированием при минимальных скоростях. 19. ПРОЦЕДУРА ЭКСТРАКЦИИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ [Внимание! В состав наборов реагентов для проведения ПЦР обычно входят положительный контрольный образец (flKO)t отрицательный контрольный образец (ОКО) и внутренний контрольный образец (ВКО), соответствующие выявляемому аналиту. ПКО и ОКО не добавляются при выделении РНК а используется в качестве контроля на этапе ПЦР. ВКО перед началом процедуры выделения добавляется во все анализируемые образцы, включая ОКО. ВКО предназначен для контроля экстракции в каждом конкретном образгщ. При использовании ПЦР-наборов с эндогенным внутренним контролем добавление ВКО на этапе выделения РНК не требуется. 18.1. ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ НА МАГНИТНОМ ШТАТИВЕ 1. Включить термостат, установить температуру +65 °С. 2. В случае выпадения осадка прогреть Раствор-С при температуре 65°С и тщательно перемешать до полного растворения кристаллов. 3. Отобрать и промаркировать необходимое для работы количество пробирок объёмом 1,5-2 мл (по количеству исследуемых образцов, включая пробирку для отрицательного контроля экстракции (ОКЭ), в качестве которого могут быть использованы Раствор для элюции или Деионизованная Л ’Астерильная вода, свободная от ДНКаз, РНКаз). * ™ 4. Подготовить и расставить в штативе пробирки с клиническими образцами. 5. В подходящей по объему емкости приготовить смесь, содержащую Раствор-С, тщательно ресуспендированный Магнитный сорбент и ВКО (при его использовании), из расчета 300 мкл I Раствора-С, 15 мкл Магнитного сорбента и 10 мкл ВКО на проведение одного выделения. Полученную смесь перемешать до получения гомогенного раствора. 6. В каждую подготовленную промаркированную пробирку объемом 1,5 или 2 мл внести по 325 мкл приготовленной смеси (по 315 мкл, если ВКО не используется). 7. Добавить в каждую пробирку по 100 мкл биологического материала, используя для каждого образца отдельный наконечник с аэрозольным барьером. В пробирку, промаркированную ОКЭ, внести 100 мкл Раствора для элюции или Деионизованную стерильную воду свободную от ДНКаз, РНКаз. Пробирки плотно закрыть. 8. Тщательно перемешать на вортексе 3-5 секунд. 9. Инкубировать в течение 5 мин при температуре 65 °С при постоянном (рекомендуется) или периодическом (2— 4 раза) перемешивании. Пробирки должны быть плотно закрыты во избежание их открывания в процессе прогрева. 10. По окончании инкубации достать пробирки из термостата и кратковременным центрифугированием осадить капли жидкости со стенок пробирок. И. Перенести пробирки на магнитный штатив на 30-60 сек. Через 30-60 сек. аккуратно не затрагивая магнитный сорбент удалить надосадочную жидкость с помошыо медицинского 9 --- стр. 10 --- отсасывателя с колбой-ловушкой, используя одноразовые наконечники для дозаторов без аэрозольного барьера до 200 мкл. Для каждой пробы использовать отдельный наконечник. 12. Добавить в каждую пробирку по 300 мкл Раствора для отмывки, пробирки плотно закрыть и перемешать на вортексе до полного ресуспендирования. 13. Кратковременным центрифугированием осадить капли жидкости со стенок пробирок. 14. Перенести пробирки на магнитный штатив на 30-60 сек. Через 30-60 сек. аккуратно не затрагивая магнитный сорбент удалить надосадочную жидкость с помощью медицинского отсасывателя с колбой-ловушкой, используя одноразовые наконечники для дозаторов без аэрозольного барьера до 200 мкл. Для каждой пробы использовать отдельный наконечник. На данном этапе необходимо как можно тщательнее отобрать надосадочную жидкость, так как в дальнейшем остатки Раствора для отмывки могут вызвать ингибирование ПЦР. 15. Добавить в каждую пробирку по 100 мкл Раствора для элюции, пробирки плотно закрыть и перемешать на вортексе. 16. Кратковременным центрифугированием осадить капли жидкости со стенок пробирок. 17. Инкубировать в течение 5 мин при температуре 65°С при постоянном (рекомендуется) или периодическом (2-4 раза) перемешивании. 18. Кратковременным центрифугированием осадить капли жидкости со стенок пробирок. 19. Перенести пробирки на магнитный штатив на 30-60 сек. Надосадочная жидкость содержит очищенные нуклеиновые кислоты, готовые для постановки обратной транскрипции и ПЦР. 20. Для хранения образцов рекомендуется перенести надосадочную жидкость в новые промаркированные пробирки. Допускается однократное замораживание и хранение очищенного препарата НК в течение суток при температуре +2...+8°С или в течение 1 года при температуре не выше минус 16 °С. I 18.2. ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ НА ЦЕНТРИФУГЕ I 1. Включить термостат, установить температуру +65 °С. 2. В случае выпадения осадка прогреть Раствор-С при температуре 65°С и тщательно перемешать до полного растворения кристаллов. 3. Отобрать и промаркировать необходимое для работы количество пробирок объёмом 1,5-2 мл (по количеству исследуемых образцов, включая ОКЭ). 4. Подготовить и расставить в штативе пробирки с клиническими образцами. 5. В подходящей по объему емкости приготовить смесь, содержащую Раствор-С, тщательно ресуспендированный Магнитный сорбент и ВКО (при его использовании), из расчета 300 мкл Раствора-С, 15 мкл Магнитного сорбента и 10 мкл ВКО на проведение одного выделения. ^ Полученную смесь перемешать до получения гомогенного раствора. # 1 6. В каждую подготовленную промаркированную пробирку объемом 1,5 или 2 мл внести по 325 мкл приготовленной смеси (по 315 мкл, если ВКО не используется). 7. Добавить в каждую пробирку по 100 мкл биологического материала, используя для каждого образца отдельный наконечник с аэрозольным барьером. В пробирку, промаркированную ОКЭ, внести 100 мкл Раствора для элюции или Деионизованную стерильную воду свободную от ДНКаз, РНКаз. Пробирки плотно закрыть. 8. Тщательно перемешать на вортексе 3-5 секунд. 9. Инкубировать в течение 5 мин при температуре 65 °С при постоянном (рекомендуется) или периодическом (2-4 раза) перемешивании. Пробирки должны быть плотно закрыты во избежание их открывания в процессе прогрева. 10. По окончании инкубации достать пробирки из термостата и осадить магнитный сорбент в течение 30 сек. при 12 000 об/мин. 11. Аккуратно не затрагивая магнитный сорбент удалить надосадочную жидкость с помощью медицинского отсасывателя с колбой-ловушкой, используя одноразовые наконечники для дозаторов без аэрозольного барьера до 200 мкл. Для каждой пробы использовать отдельный наконечник. 12. Добавить в каждую пробирку по 300 мкл Раствора для отмывки, пробирки плотно закрыть и перемешать на вортексе до полного ресуспендирования. 13. Осадить магнитный сорбент в течение 30 сек. при 12 000 об/мин. 10 --- стр. 12 --- 1 20. ОШИБКИ ПРИ РАБОТЕ В процессе пробоподготовки могут возникать проблемы, в той или иной степени влияющие на результат анализа. - Наличие сигнала по каналам детекции в образце ОКЭ свидетельствует о наличии контаминации. При выявлении контаминации необходимо предпринять меры по локализации и ликвидации её источника. - РНК разрушена: Препарат нуклеиновых кислот был подвергнут неоднократному замораживанию. Избегайте повторения циклов замораживания - оттаивания. Используйте свежий образец для выделения нуклеиновых кислот. Ненадлежащие условия хранения НК. Храните образцы в соответствии с инструкцией. - Низкий выход НК: Использован избыточный объём образца. Не используйте объёмы больше указанных в протоколе. Магнитный сорбент имеет ограниченную ёмкость. В случае, если полученное количество НК значительно меньше ожидаемого, разбавьте пробу в 2-10 раз для снижения расхода образца; Исходный материал не был полностью лизирован. Прогревайте лизирующий буфер перед использованием до полного растворения осадка. - ПЦР идёт с низкой эффективностью: Очищенный препарат НК содержит остатки раствора для отмывки. Максимально удаляйте Раствор для отмывки в соответствии с протоколом. 21. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ Транспортирование ^^^Транспортирование наборов реагентов должно осуществляться в соответствии с ГОСТ Р 51088 и правилами перевозки грузов, всеми видами крытого транспорта, в условиях, обеспечивающих сохранность: - при температуре от +2°С до +25 °С на протяжении всего срока годности или при температуре от +25°С до +37 °С до 5 суток; - при относительной влажности не выше 70 %; - в условиях, исключающих действие агрессивных сред, прямых солнечных лучей и влаги. Замораживание не допускается. Наборы реагентов, транспортированные с нарушением указанных условий, применению не подлежат. Хранение Набор реагентов «РусГенТест МагСет Цито» должен храниться в упаковке изготовителя при температуре от +2°С до +25°С и относительной влажности не выше 70 % в условиях, исключающих действие агрессивных сред, прямых солнечных лучей и влаги. Замораживание не допускается. После вскрытия набор реагентов должен храниться в указанных условиях хранения, пробирки с ^^^зеагентамн должны быть плотно закрыты. 22. СРОК ГОДНОСТИ Срок годности набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» составляет 18 месяцев с даты изготовления. Срок годности и условия хранения вскрытых реагентов соответствуют сроку годности и условиям хранения, указанным на этикетках для невскрытых реагентов. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит. 23. БЕЗОПАСНАЯ УТИЛИЗАЦИЯ Наборы реагентов, пришедшие в непригодность, в том числе в связи с истечением срока годности, подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 и МУ 1.3.2569-09. Уничтожение наборов реагентов осуществляется организациями, имеющими соответствующую лицензию, на специально оборудованных площадках, полигонах и в помещениях в соответствии с требованиями, предусмотренными существующими Федеральными законами, и с соблюдением обязательных требований по охране окружающей среды. Отходы, образующиеся в процессе использования набора реагентов, в том числе контаминированные биологическими образцами реагенты, относятся к классу Б (эпидемиологически опасные отходы) и подлежат обязательному обеззараживанию. Выбор метода обеззараживания определяется 12 --- стр. 13 --- возможностями организации, осуществляющей исследования с применением данного набора реагентов. Упаковка наборов реагентов относится к отходам класса А. Неиспользованные реагенты набора утилизируют разведением водой 1:100 с последующим сливом в канализацию; пустые флаконы утилизируют как бытовой мусор. В процессе использования и утилизации набора реагентов с истекшим сроком годности токсичные отходы не образуются. 24. ТРЕБОВАНИЯ К ОХРАНЕ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ Необходимо одновременно обеспечивать соблюдение персоналом правил биологической безопасности и требований к организации и проведению данных работ с целью предотвращения контаминации нуклеиновыми кислотами исследуемых проб помещений, оборудования, окружающей среды в соответствии с требованием санитарно- эпидемиологического законодательства. Все компоненты набора реагентов нетоксичны для человека в используемых концентрациях и безопасны для окружающей среды. Набор реагентов не требует специальных мер безопасности при воздействии таких предсказуемых факторов, как внешние электромагнитные поля, электростатические разряды, излучение (электромагнитное, ионизирующее, иное), атмосферное давление и его перепады, влажность и ..температура воздуха. Набор реагентов не требует специальных мер безопасности относительно риска электромагнитных помех, поскольку в состав набора реагентов не входят и в результате применения не появляются какие- либо источники излучения. Набор реагентов не содержит: лекарственных средств для медицинского применения, материалов животного и (или) человеческого происхождения, материалов, которые являются канцерогенными, мутагенными или токсичными, возможное выделение или вымывание которых приводит к сенсибилизации, аллергической реакции или отрицательно влияет на репродуктивную функцию. В составе изделия отсутствуют материалы, вступающие в непосредственный или опосредованный контакт с организмом пациента и персонала, использующего изделие, при выполнении требований эксплуатационной доку.ментации. 25. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие качества набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» требованиям нормативной и технической документации при соблюдении условий транспортирования, хранения и эксплуатации, установленных техническими условиями. - Безопасность и качество набора реагентов гарантируются в течение всего срока годности при ^^облюдении всех условий транспортирования, хранения и эксплуатации. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы. Производитель обязуется за свой счёт заменить изделие, технические и функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем. Производство имеет сертифицированную на соответствие требованиям стандарта ГОСТ ISO 13485:2017 (ISO 13485:2016) систему менеджмента качества. Производитель гарантирует высокий уровень безопасности окружающей среды при правильном использовании и утилизации изделий. По вопросам, касающимся качества Набора реагентов «РусГенТест МагСет Цито» следует обращаться к уполномоченному представителю производителя: ООО «ПЦР Диагностика», Адрес: Россия, г. Нижний Новгород, Сергиевская ул, д. 24/43, помещ. 7 ком. I, тел. 8-800-600-60-46, e-mail: pcrd- inFo@vandex.ru 26. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ Символ Описание символа 13 --- стр. 14 --- 27. ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ГОСТ Р 2.105-2019 Единая система конструкторской документации (ЕСКД). Общие требования к текстовым документам. ГОСТ ISO 14971-2021 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским изделиям. ГОСТ Р 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приёмка выпускаемой продукции. Основные положения. ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации. ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний. ГОСТ Р 53022.3-2008 Требования к качеству клинических лабораторных исследований, Ч.З. Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов. ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения. 14 --- стр. 15 --- гост Р ИСО 23640-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro. ГОСТ Р ИСО 15223-1-2020 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании медицинских изделий, на этикетках и в сопроводительной документации. Ч. 1. Основные требования. ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования безопасности. ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТ Р ЕН 13612-2010 Оценка функциональных характеристик медицинских изделий для диагностики in vitro. 15 --- стр. 16 --- Пронумеровано, прошито и