Набор реагентов для диагностики in vitro педиатрических вирусных инфекций методом иммуноферментного анализа — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2010/07291 от 30.06.2010 · класс риска 1

Производитель: "EUROIMMUN AG" (Германия)

Вид изделия: Вирус кори антитела класса иммуноглобулин М (IgМ) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Вирус кори антитела класса иммуноглобулин G (IgG) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА) · Парвовирус В19 антитела класса иммуноглобулин М (IgМ) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

Назначение: предназначен для количественного и полуколичественного определения антител к возбудителям педиатрических вирусных инфекций в сыворотке, плазме крови и спинномозговой жидкости человека в клинико-диагностических лабораториях и в научно-исследовательской практике

В госконтрактах 44-ФЗ: 5 контрактов, медианная цена за единицу 33 553 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 4 ---
Anti-Parvovirus в 19 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG
Автоматизация процесса проведения анализа
Процесс разведение образцов и вся процедура анализа может быть полностью автоматизирована и  
выполнена ИФА анализатором. Условия инкубации, запрограммированные в соответствующем 
авторизированном фирмой EUROIMMUN программном обеспечении, могут слегка отличаться от описанных 
в инструкции к данному набору. Проверка качества совместной работы данного набора EUROIMMUN ELISA 
и таких автоматических систем как EUROIMMUN Analyser I  и DSX Dynex показала хорошие результаты. 
Документы, подтверждающие качество, доступны по запросу.
Возможно использование автоматических открытых систем других производителей, однако проверка 
качества совместной работы должна быть выполнена пользователем.
СХЕМА ВНЕСЕНИЯ ОБРАЗЦОВ И КОНТРОЛЕЙ
_ D _
Е _
L .
и
1
сз
pos
neg
Р 1
Р2
РЗ
Р4
Р5
Р6
Р7
Р8
Р9
Р 10
Р 1 1
Р12
Р 13
Р 14
Р 15
Р16
Р 17
Р 18
Р19
Р20
Р21
Р22
Р23
Р24
С1
С2
СЗ
04
pos
neg
Р  1
Р2
РЗ
Р4
Р5
Р6
Р7
Р8
Р9
Р 10
Р 1 1
Р 12
Р 13
Р14
Р15
Р 16
Р17
Р  18
10
Р 19
Р20
Р21
Р22
Р23
Р24
1 1 12
Представленная выше схема представляет собой пример внесения проб:
- на стрипах 1-4 - для полуколичественного определения lgG-антител в 24 образцах пациентов (от Р 1  до
Р 24);
- на стрипах 7-10 - для количественного определения lgG-антител в 24 образцах пациентов (от Р 1  до Р 
24).
В  соответствующие лунки вносят и инкубируют калибраторы (от С 1 до 04), положительный контроль (pos.), 
отрицательный контроль (neg.), а также образцы пациентов. Для повышения достоверности результатов 
каждую анализируемую пробу рекомендуется вносить и  анализировать в дублях, используя для каждого 
образца по две лунки.
Можно отламывать любое количество лунок. Это позволяет привести в соответствие используемое 
количество лунок и  количество исследуемых образцов и, таким образом, свести к минимуму расход 
реагентов.
Положительный и  отрицательный контрол и предназначены для внутреннего контроля качества результатов 
анализа. Их следует использовать при каждой постановке анализа,
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ 
Полуколичественный анализ:
Результаты можно оценить полуколичественно, рассчитывая соотношение ОП в лунке с контрольным 
образцом или в лунке с образцом пациента и ОП в лунке с калибратором 3. Для расчета этого соотношения 
используйте следующую формулу;
«  О П  контрол ьного образца или образца пациента
Отношение (RATIO) =
----------------------=----------------------------------------------ОП калибратора 3
Фирма EUROIMMUN рекомендует следующую интерпретацию результатов:
Отношение (RATIO) < 0,8*
Отношение (RATIO) в интервале от> 0,8 до < 1,1; 
Отношение (RATIO) >1,1:
Отрицательный результат 
Пограничный результат 
Положительный результат
В случае пограничного результата необходимо взять у пациента дополнительный образец крови через 7 
дней и повторить тест в параллели с первым образцом. По результатам теста обоих образцов можно делать 
заключение об изменениях концентрации антител.
Количественный анализ
Для определения концентрации антител в исследуемых образцах строится калибровочная кривая методом 
«от точки к точке» (point-to-point). По оси Y откладывают значения измеренной оптической плотности 
четырех калибраторов, по оси X -  соответствующие концентрации антител в МЕ/мл в этих калибраторах. 
При компьютерной обработке данных также используется способ построения калибровочной кривой «от
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва. 2010 тел.: 737-0363, факс; 737-0365. e-mail: info@analytica.ru


--- стр. 5 ---
Anti-Parvovirus В 19 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG
точки к точке». Ниже приведен пример типичной калибровочной кривой. Пожалуйста, не используйте эту 
кривую для определения концентрации антител в образцах пациентов,
С т а н д а р г т м а я  к а л и б р о в о ч н а я  к р и в а я
Если ОП образца пациента лежит выше величины ОП для калибратора 1  (с концентрацией 200 МЕ/мл), 
результат следует выражать как “>200 МЕ/мл". Такой образец рекомендуется развести 1:400 и 
протестировать повторно, а результат, полученный по калибровочной кривой (в МЕ/мл), умножить на 
коэффициент разведения 4.
Верхняя граница интервала нормальных значений неинфицированных людей (уровень отсечения, cut-off), 
рекомендованная фирмой EUROIMMUN, составляет 5 международных единиц (МЕд)/мл. EUROIMMUN 
рекомендует следующую интерпретацию результатов:
< 4 МЕ/мл: Отрицательный результат
от ^ 4 до < 6 МЕ/мл: Пограничный результат
> б МЕ/мл: Положительный результат
В  случае пограничного результата необходимо взять у пациента дополнительный образец крови через 7 
дней и  повторить тест в параллели с первым образцом. По результатам теста обоих образцов можно делать 
заключение об изменениях концентрации антител.
Для определений, проводящихся в дубликатах, следует использовать в расчетах среднее значение двух 
величин. Если эти две величины существенно расходятся между собой, анализ образца следует повторить.
При постановке диагноза кроме результатов серологических исследований всегда необходимо учитывать 
клинические признаки пациента.
ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
Калибровка: Контроли к набору Antl-Parvovirus В19 ELISA (IgG) откалиброваны в международных 
единицах (ME) с использованием Международной референсного стандарта ВОЗ NIBSC code 01/602 
(Международный стандарт плазмы на антитела к Парвовирусу В19, откалиброванный для человека). 
Стандарт NIBSC code 01/602 имеет концентрацию специфических антител 77 МЕд на ампулу и  
ресуспендируется до концентрации 77 МЕд/мл.
Для каждой группы тестов, выполненных на наборах определенной серии, величины ОП калибраторов и 
международные единицы, определенные для положительного и отрицательного контролей, должны лежать 
в пределах, установленных для наборов этой серии. Протокол с установленными значениями входит в 
состав набора. Если обнаружены отклонения контрольных значений от значений, указанных в  
спецификации, результаты теста могут быть ошибочными и тест следует повторить.
Активность фермента, входящего в состав набора, зависит от температуры, поэтому, если не используется 
термостат, значения ОП могут варьировать. Чем выше температура воздуха в помещении (от +18°С до 
+25°С) во время инкубации с субстратом, тем выше значение ОП.
Антигены: Источником антигена в данном наборе служит рекомбинантный структурный белок вируса 
экспрессированный в эукариотические клетки.
Линейность: Линейность теста исследовали, используя серию разведений сыворотки пациента с высокой 
концентрацией антител. Результаты теста Anti-Parvovirus В19 ELISA (IgG) имеют линейный характер в  
диапазоне концентраций 2-184 МЕ/мл.
Аналитическая чувствительность: Предел определения антител в наборе Anti-Parvovirus В19 ELISA 
(IgG) рассчитан на основании значения оптической плотности образца, не содержащего аналита, плюс 
утроенное среднее квадратичное отклонение, и является наименьшим определяемым титром антител. 
Минимальная определяемая концентрация антител в наборе Anti-Parvovirus 819 ELISA (IgG) составляет 
приблизительно 0,1 МЕд/мл.
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва. 2010 тел.: 737-0363, факс; 737-0365, e-mail: info@anaiyttca.ru


--- стр. 6 ---
Anti-Parvovirus В 19 ELISA (IgG), EUROIMMUN AG
Перекрестная реактивность: Качество используемого антигена обеспечивает высокую специфичность 
ИФА. Данный ИФА тест не показал наличия перекрестной реактивности с сыворотками, содержащими 
антитела (IgG) к следующим возбудителям заболеваний:
Параметр Аденовирус Chlam.
pneum.
ЦМВ ВЭБ-КА ВПГ-1 Грипп А Грипп В
п 12 12 12 12 12 12 12
Anti-Parvovirus В19 
ELISA (IgG) 0 0 0 0 0 0 0
Параметр Корь Паротит Mycoplasma
pneumoniae
Пул
парагрипп
Helicobacter 
pylori_______
РСВ Краснуха
12 12 12 12 12 12 12
Anti-Parvovirus В19 
EUSA (IgG)________
Параметр Toxoplasma gondi B3B Yersinia ent.
п 12 12 12
Anti-Parvovirus В19 
ELISA (IgG) 0 0 0
Вещества, мешающие определению: Проведению анализа не мешали образцы с признаками гемолиза, 
липемические и  иктерические образцы с концентрациями гемоглобина вплоть до 10 мг/мл, триглицеридов -  
до 20 мг/мл и билирубина -  до 0,4 мг/мл.
Воспроизводимость: Воспроизводимость теста исследовали, определяя коэффициент вариации (CV) 
результатов анализа трех сывороток с концентрациями антител, попадающими на разные участки 
калибровочной кривой. Величины CV внутри одного опыта определяли при 20 параллельных измерениях 
каждой сыворотки. Величины CV в разных опытах получали, проводя по 4 параллельных измерения каждой 
сыворотки в течение 6 различных дней.
Вариабельность внутри одного опыта, n = 20
Сыворотка Среднее CV
(МЕ/мл) (%)
1 21 7,7
2 18 2,5
3 10 2,7
Вариабельность в разных опытах, п = 4 х 6
Сыворотка Среднее CV
(МЕ/мл) (%)
1 23 6,0
2 18 1,6
3 10 2,1
Специфичность
исследовали с
и чувствительность: Образцы 68 клинически охарактеризованных пациентов
помощью набора EUROIMMUN Anti-Parvovirus В19 ELISA (IgG) и другого
п = 68 Другой коммерческий ИФА набор
Положительные Пограничные Отрицательные
Anti-Parvovirus В19 
EUSA (IgG)
Положительные 48 0 0
Отрицательные 0 1 19
Референсный интервал: Уровни IgG-антител к парвовирусу В19 анализировали, используя данный ИФА 
набор EUROIMMUN на панели из 500 здоровых доноров крови. При уровне отсечения (cut-off), равном 5 
МЕ/мл, в полном соответствии с известным уровнем иммунитета взрослого населения 67,8% всех доноров 
оказалось положительными на IgG- антитела к парвовирусу В19.
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Парвовирус 819 один из наиболее мелких («parvo» маленький) из известных вирусов, его геном составляет 
от 5000 до 5500 пар оснований. Это одноцепочечный ДНК-вирус диаметром от 21 до 23 нм из семейства 
парвовирусов (Parvoviridae). Капсид вируса имеет икосаэдрическую форму и  состоит из двух структурных 
белков (главный и минорный структурные полипептиды). До открытия бокавируса (bocavirus) в 2005 году 
парвовирус В19 оставался единственным патогенным для человека вирусом рода Эритровирусов. Этот 
вирус патогенен только для человека и размножается преимущественно в гематопоэтических клетках 
человека (например, предшественниках эритроцитов). Парвовирус был открыт в образцах донорской крови в
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА». Москва, 2010 тел.: 737-0363, ф акс: 737-0365, e-mail: 1пГо1'^апа1> И са.ги


--- стр. 7 ---
Anti-Parvovirus В 19 ELISA (IgG), EUROTMMUN AG
1974 году австралийским вирусологом Ивонной Коссарт (Yvonne Cossart). Свое название В 19 вирус получил 
по номеру сыворотки человека, в которой он был впервые найден и выделен. Вирус имеет крайне низкую 
вариабельность нуклеотидной последовательности, до настоящего времени были идентифицированы всего 
три генотипа вируса {генотипы 1-3). Парвовирус В19 характеризуется высокой устойчивостью по отношению 
к влиянию окружающей среды и детергентам. Этот вирус обладает тропностью к Р антигену группы крови -  
мембранному рецептору эритроцитов.
Инфекция, вызываемая парвовирусом В19, широко распространена по всему миру как инфекционная 
эритема (ее еще называют «пятая болезнь», мегалоэритема, болезнь Штиккера, синдром «следов от 
пощечин»), наиболее часто встречается в весенний период. Она может перерасти в эпидемию, особенно в 
детских садах, школах, семьях и  больницах. В центральной Европе локализация данного вируса 
описывается как эндемическая.
Распространение парвовируса В19 происходит контаю*ным, воздушно-капельным путем, через кровь или ее 
продукты, а также трансплацентарно. Инкубационный период вируса составляет 4-14, иногда 3-17 дней. 
Вирус может обнаруживаться в сыворотке крови между 3-м и 16-м днем после инфицирования, с 
появлением экзантемы человек перестает быть контагиозным.
Типичными симптомами продромальной фазы заболевания являются головная боль, зуд, миалгия и 
высокая температура. Антитела класса 1д М  к парвовирусу В19 (острая инфекция) встречаются во всех 
возрастных группах, но наиболее часто в возрасте от 6 до 15 лет Распространенность антител класса IgG к 
парвовирусу В19 увеличивается с возрастом, например, в Германии были получены следующие данные 35% 
для детей в возрасте 4-6 лет, 58% -  10-15 лет, 70% -  25-29 лет, и 79% в возрасте 65-59 лет,
У детей парвовирус 819 вызывает так называемую «пятую болезнь». Экзантема в основном начинается с 
интенсивного покраснения и опухания области щек (в форме бабочки; «следы от пощечин»). Отдельные 
крупные области характерной сыпи образуются на лбу и  вокруг ушей. Далее экзантема распространяется на 
разгибательную поверхность рук, бедер и  ног. Наиболее сильно экзантема поражает именно конечности, 
поверхности рук и ног, при этом высыпаний на туловище гораздо меньше, а слизистые оболочки не 
затрагиваются экзантемой вообще. Характер высыпаний в основном сетчатообразный иногда образуются 
гирляндоподобные розеолы. Экзантема сохраняется, как правило, от 6 дней до трех недель, стихает 
волнообразно. Наряду с экзантемой часто наблюдаются увеличение лимфоузлов и гриппоподобные 
симптомы. Иногда появляются такие симптомы как зуд, субфебрильная температура и артралгия. Как 
осложнение после перенесенной инфекции у детей может возникнуть симметричный артрит мелких 
суставов. Острая инфекция парвовируса 819 может сопровождаться также развитием следующих 
заболеваний; пурпура Шенлейна-Геноха, псвдоаппендицит, коксит, энтерит, миокардит, нейропатия 
плечевого сплетения и узловатая эритема.
У взрослых инфекция вызывает развитие таких осложнений как периферическая эритема и  артрит (острая 
симметричная полиартропатия), которую клинически достаточно трудно дифференцировать от хронического 
полиартрита. Возникновение 17-33% всех миокардитов может быть приписано перенесенной инфекции 
парвовируса В19.
Парвовирус В19 размножается в эритробластоцитах, вызывая временную анемию. Инфекция может 
вызвать серьезные осложнения и даже привести к летальному исходу у пациентов с ослабленным 
иммунитетом. Состояние «истинная эритроцитарная аплазия» описано для ВИЧ-инфицированных 
пациентов с хронической инфекцией парвовируса В19.
Трансплацентарная передача парвовируса В19 при беременности может привести, кроме ингибирования 
эмбрионального эритропоэза, к анемии, гипоксии и в крайнем случае даже к водянке плода (около 12% всех 
случаев) и смерти плода. Дальнейшие симптомы вызваны гипопротеинемией: отёк, экссудативный 
перикардит, плевральный выпот, асцит.
Клинически «пятую болезнь» очень часто трудно отличить от краснухи. По этой причине клиницисты при 
постановке диагноза полагаются на результаты серологической диагностики антител к парвовирусу (anti-B19 
IgM/IgG). У взрослых, в частности, пятое заболевание часто протекает с атипичной экзантемой.
Банки крови не тестируют свои образцы на парвовирус В19. Так как пациенты инфицированные В19 как 
правило не имеют симптомов в период контагиозности вируса, передача парвовируса В19 при 
гемотрансфузии вполне возможна. Исследования, проведенные в Германии и  Франции, показали, что 
процент вируса 819 в образцах заготовленной крови составляет от 0,01 до 0,03%. Так как выявление 
антигена В19 трудоемкий процесс, пациентам с высоким риском должны переливать только кровь с 
положительным результатом серодиагностики на антитела класса IgG к парвовирусу 819. Кровь, которая 
содержит IgG антитела к парвовирусу В19, уже не содержит самого вируса.
Так как инфекция парвовируса 819 имеет такое количество различных проявлений и  осложнений, 
необходимо серологическое подтверждение или опровержение при подозрении на острую инфекцию
© Перевод на русский язык ЗАО «ЛНА^''1ИТИКЛ». Москва, 2010 тел.; 737-0363, факс; 737-0365, e-mail: info^^analylica.ru