Наборы реагентов in vitro для иммуноферментного анализа — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 16 ---
Proinsulin ELISA, Mercodia A B
Расчет вручную
1 . На логарифмической бумаге построить калибровочную кривую зависимости оптической плотности от
концентрации проинсулина в калибраторах, за исключением нулевого калибратора,
2. По калибровочной кривой рассчитать концентрации проинсулина в исследуемых образцах.
Пример рабочего протокола
Лунки Содержимое лунок ОП450 Среднее значение
концентрации
1 А-В Нулевой калибратор, 0 пмоль/л 0,070/0,069
1 C-D Калибратор 1 ; 3,3 пмоль/л* 0,156/0,163
1 E-F Калибратор 2; 11 пмоль/л* 0,347/0,354
1 G-H Калибратор 3; 44 пмоль/л* 1,157/1,176
2 А-В Калибратор 4; 132 пмоль/л* 2,862/2,831
2C-D Неизвестный образец 1 0,208/0,208 5,25
2 E-F Неизвестный образец 2 0,252/0,254 7,07
2G-H Неизвестный образец 3 0,563/0,589 19,8
3 А-В Неизвестный образец 4 1,592/1,571 63,2
* Концентрация указана на этикетках флаконов
Калибровочная кривая
Здесь показана типичная калибровочная кривая. Не используйте эту кривую для определения результатов
реального исследования.
10 .0 ;
О1 Л
с:
о
1 .0
0 .1
0 .0
1 0 1 0 0
Проинсулин (пмоль/л)
10 00
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тестов, клинический диагноз не должен быть основан на результатах только
одного теста, он должен ставиться терапевтом после проведения всех клинических исследований.
Применение этого метода исследования у людей, которым уже проводят инсулинотерапию осложняется за
счет образования антител, направленных против инсулина, которые могут оказывать влияние на результаты
анализа.
Проведению анализа не мешает использование образцов с признаками выраженной липемии, гемолиза или
иктерических образцов.
Ожидаемые значения
В соответствии с GLP {good laboratory practice) каждой лаборатории рекомендуется самостоятельно
определять диапазон ожидаемых значений. Приводим ориентировочные результаты, которыми лаборатория
может руководствоваться до накопления достаточного количества данных для выработки собственных
норм.
Концентрация проинсулина в сыворотке крови 112 обследованных здоровых индивидов составила в
среднем 10 пмоль/л, медиана 7 пмоль/л, диапазон значений для центральных 95% выборки обследованных;
3,3 - 28 пмоль/л.
© 1 [сревол на русский язык ЗЛО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, c-mail: info@analytica.rii
--- стр. 17 ---
Proinsulin ELISA, Mercodia A B
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Чувствительность
Предел определения < 0,5 пмоль/л рассчитан, как концентрация нулевого калибратора + 2 SD.
Открытие
При добавлении известного количества проинсулина в пробу измеряемое увеличение концентрации
составляет 97 % от ожидаемого.
Прозонный эффект
Образцы с концентрацией проинсулина вплоть до 80 О О О пмоль/л могут быть измерены без получения
ложно заниженного результата.
Воспроизводимость
Каждый образец анализировали по 4 параллельных определения в семи различных экспериментах.
Образец Среднее,
пмоль/л внутри одного
эксперимента, %
Коэффициент вариации
между разными
экспериментами, % суммарно, %
1 7,3 3,2 3,9 5,1
2 20,7 3,2 5,2 6,1
3 65,6 2,5 4,2 5,0
Специфичность
Инсулин
С-пептид
< 0,003%
< 0,006%
Проинсулин des (64-65)
Проинсулин split (65-66)
Проинсулин des (31-32)
Проинсулин split (32-33)
84%
90%
95%
95%
Калибровка
ИФА набор фирмы Mercodia Proinsulin ELISA откалиброван против Международного референсного реагента
для проинсулина человека IRR 84/611.
Фактор пересчета
1 мкг/л соответствует 110 пмоль/л.
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной
процедуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой Mercodia
АВ, могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ слагает с себя всякую установленную
законом предполагаемую ответственность, включая предполагаемую гарантию на пригодность набора к
продаже и к использованию.
При этом фирма Mercodia АВ и ее уполномоченные дистрибьюторы не будет нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
© 1 [ерсш)л на русский язык ЗАО «ЛИЛЛИ'ГИКЛ», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, c-mail: inlb'it/janalytica.rii
--- стр. 18 ---
Proinsulin ELISA, Mercodia A B
СХЕМА ПОСТАНОВКИ АНАЛИЗА
Набор Mercodia Проинсулин ИФА
Внесение калибраторов и образцов 50 мкл
Добавление буфера для анализа 50 мкл
Инкубация 1 час при температуре 18-25
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесение раствора конъюгата 100 мкл
Инкубация 1 час при температуре 18-25 “ С
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесение субстрата ТМБ 200 мкл
Инкубация 15 минут
Внесение стоп-раствора 50 мкл
Встряхните 5 секунд для обеспечения
перемешивания
Измерение ОП450
В ни м ан ие! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и с : - К .И . Б л а н к
В с е г о n p o ' i v - . i e p o о,
1г;рошиурова;0:
! "ОйТЬЮ ч У .. ___
© Персвол на русский я ;1ык ЗЛО «ЛИЛЛИТИКЛ». Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: infoi^;anatylica.rii
--- стр. 22 ---
Ultrasensitive Insulin ELISA, Mercodia A B
Пример рабочего протокола
Лунки Содержимое лунок
Среднее значение
ОП4 5 0 концентрации
__________инсулина, мЕд/л
1 А-В Нулевой калибратор 0,071/0,073
1 C-D Калибратор 1* 0,087/0,088
1 E-F Калибратор 2* 0,186/0,188
1 G-H Калибратор 3* 0,405/0,424
2 А-В Калибратор 4* 1,172/1,241
2C-D Калибратор 5* 2,262/2,290
2 E-F Неизвестный образец 1 0,466/0,470 3,5
2G-H Неизвестный образец 2 1,987/1,926 17,0
3 А-В Неизвестный образец 3 0,327/0,317 2,2
* Концентрации указаны на этикетке флаконов (как правило, диапазон следующий: 0; 0.15; 1 ; 3; 10; 20 мЕд/л)
Калибровочная кривая
Здесь показана типичная калибровочная кривая. Не используйте эту кривую для расчета полученных вами
результатов.
0,1 1
Инсулин (мЕд/л)
10
ФАКТОР ПЕРЕСЧЁТА
1мкг/л = 29 мЕд/л; 1 мЕд/л = 6,0 пмоль/л.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как для всех диагностических тестов, окончательный клинический диагноз не может быть поставлен по
результатам единичного теста, но должен делаться врачом после оценки всех имеющихся результатов
клинических исследований.
Применение теста к исследованию пациентов, находящихся на лечении, осложнено тем фактом, что такая
терапия обычно приводит к образованию анти-инсулиновых антител, которые могут влиять на результаты
анализа.
Проведению анализа не мешает использование образцов с признаками выраженной лилемии, гемолиза или
ию-ерических образцов.
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 20Ю тел.; 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: inlo@analylica.ru
--- стр. 23 ---
Ultrasensitive Insulin ELISA, Mercodia A B
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В соответствии с правилами надлежащей лабораторной практики (GLP), каждой лаборатории
рекомендуется самостоятельно определять диапазон ожидаемых значений. Приводим ориентировочные
результаты, которыми лаборатория может руководствоваться до накопления достаточного количества
данных для выработки собственных норм.
У 137 здоровых индивидов в образцах, взятых натощак, среднее арифметическое значение концентрации
инсулина равнялось 9,2 мЕд/л, медиана - 6,9 мЕд/л, диапазон значений для центральных 95% выборки
обследованных: 2-25 мЕд/л.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность
Минимально определяемая концентрация составляет 0,07 мЕд/л. Рассчитана на основании значения
оптической плотности нулевого калибратора плюс удвоенное среднее квадратичное отклонение.
Открытие
При добавлении известного количества инсулина в пробу измеряемое увеличение концентрации составляет
97-107 % от ожидаемого {в среднем 102 %).
Прозонный эффе1Л '
Образцы с концентрацией инсулина вплоть до 800000 мЕд/л могут быть измерены без ложного занижения
результата.
Точность
Каждый образец анализировали по 6 параллельным определениям в шести различных экспериментах.
Образец Среднее,
мЕд/л
Коэффициент вариации
в пределах
постановки, %
между
постановками, % в целом,%
1 5,7 5,3 2,7 6,0
2 8,2 4,2 3,9 5,8
3 15,5 5,1 1,8 5,4
Специфичность
Бы ли обнаружены следующие перекрестные реакции:
С-пептид < 0,01 %
Проинсулин < 0,01 %
Проинсулин des (31-32) < 0,5 %
Проинсулин split (32-33) < 0,5 %
Проинсулин des (64-65) 98 %
Проинсулин split (65-66) 56 %
Инсулин ЛизПро (Humalog®, Eli Lilly) < 0,006 %
Инсулин аспарт < 0,006 %
Инсулиноподобный фактор роста IGF-I < 0,02 %
Инсулиноподобный фактор роста IGF-II < 0,02 %
Инсулин кры сины й 0,7 %
Инсулин мышиный 0,3 %
Инсулин свиной 374 %
Инсулин овечий 48 %
Инсулин бычий 31 %
КАЛИБРОВКА
Набор фирмы Mercodia Ultrasensitive Insulin ELISA откалиброван против 1-го Международного референсного
препарата 66/304.
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной
процедуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой Mercodia
АВ, могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ отказывается от предоставления
гарантий выраженных явно, подразумеваемых или установленных законом, включая предполагаемую
гарантию на пригодность набора к продаже и к использованию.
При этом фирма Mercodia АВ и ее уполномоченные дистрибьюторы не будут нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
© Перевод )ia русский язык ЗАО «ЛЯЛЛИТИКЛ», Москва, 20Ш тел.; 737-0363. факс: 737-0365. c-mail; info^tinalynca.ru
--- стр. 24 ---
Ultrasensitive Insulin ELISA, Mercodia A B
КРАТКАЯ СХЕМА ПРОТОКОЛА АНАЛИЗА
Mercodia Ultrasensitive insulin ELISA
Внесите калибраторы и образцы 25 мкп
Внесите ферментный конъюгат 100 мкл
Инкубируйте 1 час при 18-25 °С на шейкере
Промойте 6 раз
Внесите субстрат ТМБ 200 мкл
Инкубируйте 30 минут
Внесите стоп-реагент 50 мкл
Встряхивайте 5 секунд для
перемешивания
Измерьте О П д в о
В ним ани е! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
Всего [гроиумзропуно,
npO;i:Hvp';^i3hO и Ci'pe'iiiSiiO
печатью . .-, —
© 11сревол на русский язык ЗАО «ЛИЛЛИТИКА», Москва, 20С 9 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, c-mail: inIo(it^analytica,rvi
--- стр. 28 ---
Iso-Insulin ELISA, Mercodia A B
Пример рабочего протокола
Лунки Содержимое лунок ОП450
Среднее значение
концентрации
1 А-В Нулевой калибратор, 0 мЕд/л 0,066/0,067
1 C-D Калибратор 1 , 3 мЕд/л 0,084/0,087
1 E-F Калибратор 2, 10 мЕд/л 0,161/0,165
1 G-H Калибратор 3. 30 мЕд/л 0,595/0,599
2 А-В Калибратор 4, 100 мЕд/л 2,377/2,347
2C-D Неизвестный образец 1 0,270/0,272 16,4
2 E-F Неизвестный образец 2 1,146/1,192 53,6
2G-H Неизвестный образец 3 2,044/2,150 92,7
Калибровочная кривая
Ниже приведен пример типичной калибровочной кривой. Не используйте эту кривую для расчета полученных
вами результатов.
И н с у л и н ( м Е д / л )
ПЕРЕСЧЁТ ЕДИНИЦ
1мкг/л = 29 мЕд/л; 1 мЕд/л = 6,0 пмоль/л
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как для всех диагностических тестов, окончательный клинический диагноз не может быть поставлен по
результатам единичного теста, но должен делаться врачом после оценки всех имеющихся результатов
клинических исследований.
Применение теста к исследованию пациентов, находящихся на лечении, осложнено тем фактом, что такая
терапия обычно приводит к образованию анти-инсулиновых антител, которые могут влиять на результаты
анализа.
Проведению анализа не мешает использование образцов с признаками выраженной липемии, гемолиза или
иктерических образцов.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
По правилам надлежащей лабораторной практики, каждая лаборатория должна установить свой
собственный интервал ожидаемых значений. Приведенными ниже результатами можно руководствоваться
до тех пор, пока лаборатория не накопит достаточного количества собственных данных.
© Персвол на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
--- стр. 29 ---
Iso-Insulin ELISA, Mercodia A B
Ha 90 образцах были проведены сравнительные исследования наборов Mercodia Iso-Insulin ELISA и
Mercodia Insulin ELISA. Найденные величины показали хорошую корреляцию двух методов, г=0,98.
Таким образом, ожидаемые значения, полученные для набора Mercodia Insulin ELISA, могут бы ть
использованы также в наборе Mercodia Iso-Insulin ELISA.
У 137 здоровых индивидов в образцах, взятых натощак, среднее арифметическое значение концентрации
инсулина равнялось 10 мЕд/л, медиана 7 мЕд/л и диапазон значений для центральных 95% выборки
обследованных: 2 -2 5 мЕд/л
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
Предел определения
Предел определения 1 мЕд/л рассчитан как концентрация нулевого калибратора + 2 S.D.
Открытие
При добавлении известного количества инсулина в пробу измеряемое увеличение концентрации составляет
101 % от ожидаемого.
Прозонный эффект
Образцы с концентрацией инсулина вплоть до 2000 мЕд/л могут быть измерены без ложного занижения
результата.
Точность
Каждый образец анализировали по 4 параллельных определения в восьми различных экспериментах.
Образец Среднее,
мЕд/л
Коэффициент вариации
в предепах
постановки, %
между
постановками, %
в целом,%
1 15,9 3,0 3,9 4,9
2 53,2 2,8 3,0 4,1
3 90,9 3,2 3,0 4,4
Специфичность
Бы ли обнаружены следующие перекрестные реакции:
Инсулин 100%
Инсулин ЛизПро (Humalog®, Eli Lilly) 89%
Инсулин acnapT 80%
Инсулин детемир 22%
Инсулин гларгин 44%
Инсулин глулизин 100%
С-пептид <0,1%
Проинсупин 54%
Проинсупин des (64-65) 66%
Проинсупин split (65-66) 78%
Проинсулин des (31-32) 58%
Проинсулин split (32-33) 56%
И нсул и но подобный фактор роста IGF-I < 0,02%
Инсулиноподобный фактор роста IGF-II < 0,02%
Инсулин крысиный 71%
Инсулин мышиный 49%
Инсулин свиной 306%
Инсулин овечий 131%
Инсулин бычий 58%
Калибровка
Набор фирмы Mercodia
препарата 66/304.
Iso-Insulin ELISA откалиброван против 1-го Международного референсного
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной
процедуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой Mercodia
АВ, могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ слагает с себя всякую установленную
законом предполагаемую ответственность, включая предполагаемую гарантию на пригодность набора к
продаже и к испопьзованию.
1 Icpcmvi на русский язык ЗЛО «ЛНАЛИ'ГИКЛ», Москва, 2009 тел.; 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info^analytica.ru
--- стр. 30 ---
Iso-Insulin ELISA, Mercodia A B
при этом фирма Mercodia AB и ее уполномоченные дистрибьюторы не будет нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
КРАТКАЯ СХЕМА ПРОТОКОЛА АНАЛИЗА
Mercodia Iso-Insulin ELISA
Внесите стандарты и образцы 25 мкл
Добавьте раствор конъюгата 50 мкл
Инкубируйте 1 час при 18-25 °С на шейкере
Промойте 6 раз
Внесите субстрат 2 0 0 мкл
Инкубируйте 15 минут при 18-25 °С
Добавьте стоп-реагент 50 мкл
Встряхивайте 5 секунд для
перемешивания
Измерьте при ОП450
Вн и м ан и е! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
В с е г о
npoJiJKypo^ia'iO и : :
п е ч а т ь ю . . . . ' ^_ _ _л и с л о п .
© Пере иол iia русский язык ЗАО «А11АЛИГИКЛ». Москва. 2009 тел.: 737-0363, факх: 737-0365, c-mail; info@analytica.rii
--- стр. 33 ---
Mercodia Ultrasensitive C-peptide ELISA, Mercodia A B
ВЗЯТИЕ И ХРАНЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Сыворотка крови
Возьмите кровь из вены, дайте ей свернуться и отделите сыворотку центрифугированием. Образцы можно
хранить при температуре 2-8 °С до трех дней. Для более длительного хранения их можно заморозить и
хранить при температуре -20 °С. Следует избегать повторного замораживания и оттаивания образцов.
Плазма крови
Возьмите кровь из вены в пробирки, содержащие гепарин или ЭДТА в качестве антикоагулянта, и отделите
фракцию плазмы. Образцы можно хранить при температуре 2-8 до трех дней. Для более длительного
хранения их можно заморозить и хранить при температуре -20 °С, Следует избегать повторного
замораживания и оттаивания образцов.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
Компоненты набора и образцы перед использованием необходимо выдержать при комнатной температуре.
Построение калибровочного графика необходимо проводить для каждого независимого эксперимента. Каж
дое определение калибраторов и исследуемых образцов выполняйте в дубликатах,
1 Подготовьте рабочий раствор конъюгата и промывочного буфера,
2, Подготовьте необходимое количество лунок согласно количеству исследуемых образцов и контро
лен в дубликатах.
3, Внесите по 25 мкл образцов и калибраторов в соответствующие лунки.
4, Внесите по 50 мкл буфера для анализа в каждую лунку.
5, Инкубируйте на шейкере (700-900об/мин) в течение 1 часа при комнатной температуре (18-25 “С).
6, Промойте планшет 6 раз с помощью автоматического промывочного устройства*
После финального промывания переверните планшет и энергично постучите им по впитывающей
бумаге.
7, Внесите по 100 мкл ферментного конъюгата в каждую лунку,
8, Инкубируйте 1 час при комнатной температуре (18-25 ® С ).
9, Промойте как описано выше.
После финального промывания переверните планшет и энергично постучите им по впитывающей
бумаге.
10, Внесите по 200 мкл субстрата ТМБ в каждую лунку.
11, Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (18-25 °С),
12, Добавьте по 50 мкл стоп-реагента в каждую лунку.
Поместите планшет на шейкер примерно на 5 секунд для достоверности перемешивания.
13, Измерьте оптическую плотность при 450 нм и оцените результаты. Измерения проводите в течение
30 минут после внесения стоп-реагента.
П рим ечание! Во избежание контаминации между раствором ферментного конъюгата и субстратом
ТМБ рекомендуется использовать при их внесении разные дозаторы.
* производитель рекомендует выполнять этап промывки с использованием автоматического промы
вочного устройства. Не включайте в процедуру промывки стадию замачивания.
Если процедура промывки выполняется вручную это необходимо делать или пипеткой, или приспо
соблением для ручной промывки.
Отберите реакционную смесь и добавьте в каждую лунку по 400 мкл промывочного буфера пипет
ко й или наполните ячейки с помощью ручного промывающего устройства. Отберите жидкость пол
ностью и повторите 5 раз. Избегайте длительного замачивания в процессе промывки.
ВНУТРЕННИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для внутреннего контроля качества в рутинной работе должны использоваться коммерчески доступные
контроли (например, контроль маркеров диабета фирмы Mercodia, кат, № 10-1164-01) и/или внутренние
контрольные сыворотки с низкой, средней и высокой концентрацией инсулина. Контрольные материалы
должны анализироваться как неизвестные образцы. Результаты исследования, а также номера лотов, даты
приготовления растворов, ОП бланков, калибраторов и контролей необходимо документировать.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Компьютерный способ расчета
Для расчета концентраций С-пептида могут использоваться компьютерные программы расчета
зависимости концентрации от оптической плотности калибраторов, за исключением нулевого калибратора,
с применением кубического сплайна.
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва. 2009 тел,: 737-0363, факс; 737-0365, e-mail: info';rt;analylica,ru
--- стр. 34 ---
Mercodia Ultrasensitive C-peptide ELISA, Mercodia A B
Расчет вручную
1 . На логарифмической бумаге построить калибровочную кривую зависимости оптической плотности
от концентрации С-пептида в калибраторах, за исключением нулевого калибратора.
2. По калибровочной кривой рассчитать концентрации С-пептида в исследуемых образцах.
Пример расчета
Лунки Обозначение Ад50 Средняя концентрация,
пмоль/л
1 А-В калибратор 0 0,086/0,090
1 C-D Калибратор 1 (5,5 пмоль/л)* 0,136/0,133
1 E-F Калибратор 2 (18,5 пмоль/л)* 0,237/0,237
1 G-H Калибратор 3 (70 пмоль/л)* 0,702/0,728
2 А-В Калибратор 4 (140 пмоль/л)* 1,405/1,419
2C-D Калибратор 5 (280 пмоль/л)* 2,862/2,945
2 E-F исследуемый образец 1 0,193/0,204 14
2G-H исследуемый образец 2 0,374/0,391 35
3 А-В исследуемый образец 3 0,980/0,951 97
* Концентрации указаны на этикетках флаконов
Калибровочная кривая
Ниже приводится типичная калибровочная кривая. Не используйте эту кривую для расчета полученных
вами результатов.
10.0 ..................................
1 .0
0 .1
0.0
1 0 1 0 0
Опептид (пмоль/л)
1000
ОГРАНИЧЕНИЯ
Как и для всех диагностических тестов, клинический диагноз не должен быть основан на результатах только
одного теста, он должен ставиться терапевтом после проведения всех клинических исследований.
Проведению анализа не мешает использование образцов с признаками выраженной липемии, гемолиза
или иктерических образцов.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В соответствии с GLP (good laboratory practice) каждой лаборатории рекомендуется самостоятельно
определять диапазон ожидаемых значений. Приводим ориентировочные результаты, которыми
лаборатория может руководствоваться до накопления достаточного количества данных для выработки
собственных норм.
Концентрация С-пептида в сыворотке крови 136 обследованных здоровых индивидов составила в среднем
742 пмоль/л (2,2 мкг/л), медиана 628 пмоль/л (1,9 мкг/л), диапазон значений для центральных 95% выборки
обследованных: 343 - 1803 пмоль/л (1,0 - 5,4 мкг/л).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность
Минимально определяемая концентрация составляет 1,5 пмоль/л (0,0045 мкг/л). Рассчитана на основании
значения оптической плотности нулевого калибратора плюс удвоенное среднее квадратичное отклонение.
1еревол на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363. факс; 737-0365, e-mail; info@analytica.ru
--- стр. 35 ---
Mercodia Ultrasensitive C-peptide ELISA, Mercodia A B
Образец Среднее значение,
пмоль/л
Коэффициент вариации
в пределах
постановки, %
между
постановками, %
в целом, %
1 37 3,8 5,5 6,7
2 60 2 , 6 4,2 5,0
3 143 2,5 1 , 6 2,9
Открытие. Сыворотка крови: открытие составило 93- 103 % (среднее значение 99 %).
П ро зо н н ы й э ф ф е к т , В образцах с концентрацией до 36 нмоль/л не отмечалось ложно заниженных
результатов.
В о с п р о и з в о д и м о с т ь . Каждый образец анализировали в 4 повторах в 5 разных постановках.
Специфичность
Инсулин < 0,0006%
Проинсулин < 1,8%
Проинсулин des (64-65) 74%
Проинсулин split (65-66) 10%
Проинсулин des (31-32) 3%
Проинсулин split (32-33) 2%
Калибровка. И ФА набор Mercodia С~пептид ультрачувствительный откалиброван относительно
Международного референсного реагента для С-пептида IRR C-peptide 84/510.
Фактор пересчета. 1 мкг/л соответствует 331 пмоль/л.
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики получены при точном соблюдении инструкции. Любые
изменения или модификации проведения анализа, не рекомендованные Mercodia АВ, могут отразиться на
полученных результатах. В этом случае Mercodia АВ освобождается от всех обязательств
декларированных, подразумеваемых или установленных законом, включая косвенные гарантии торговли
или пригодности для использования.
При этом фирма Mercodia АВ и ее уполномоченные дистрибьюторы не будет нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
СХЕМА ПОСТАНОВКИ АНАЛИЗА
Набор Mercodia С-пептид ИФА ультрачувствительный
Внесение калибраторов и образцов 25 мкл
Добавление буфера для анализа 50 мкл
Инкубация 1 час при температуре 18-25 °С
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесение раствора конъюгата 1 0 0 мкл
Инкубация 1 час при температуре 18-25 °С
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесение субстрата пероксидазы 2 0 0 мкл
Инкубация 30 минут
Внесение стоп-реагента 50 мкл
Встряхните 5 секунд для обеспечения
перемешивания
Измерение ОП450
Вни м ан ие! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
© 11еренол на русский язык ЗАО «ЛНАЛИ"1'ИКЛ», Москиа, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: iafoiir'analytica.ru
--- стр. 36 ---
Mercodia Oxidized LDL ELISA, Mercodia A B I
УТВЕРЖ ДАЮ
льный директор
(АНАЛИТИКА»
' / Прищепа
^^ёкабря 2009 г.
И Н С Т Р У К Ц И Я п о П Р И М Е Н Е Н И Ю
Набор peai ентов для определения липопротеина низкой плотности
(Mercodia Oxidized L D L ELISA)
производства фирмы Mercodia AB (Швеция)
M e r c o d i a O x i d i z e d L D L E L I S A
Набор рассчитан на 96 определений
НАЗНАЧЕНИЕ
Иммуноферментный набор Mercodia Oxidized LDL предназначен для количественного определения in vitro
окисленных липопротеинов низкой плотности (окисленных ЛПНП) в сыворотке или плазме крови человека.
Измерение уровня липопротеинов важно в диагностике и лечении «липидных расстройств» при сахарном
диабете, атеросклерозе, различных заболеваниях печени и почек.
ВВЕДЕНИЕ
Окислительное превращение липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в окисленные липопротеины низкой
плотности (окисленные ЛПНП) в настоящее время признано ключевым моментом биологического процесса,
которы й начинает и ускоряет развитие жировой прослойки, раннего атеросклеротического поражения [1-5].
Экспериментальные исследования показали, что нативные ЛПНП становятся атерогенными после
превращения в окисленные ЛПНП, и что окисленные ЛПНП более атерогенны, чем нативные ЛПНП [1-5].
Окисленные ЛПНП найдены в макрофагах, происходящих из моноцитов, при атеросклеротических
поражениях, но не в нормальных артериях [6]. Захват ЛПНП в макрофаги не происходит с участием
классического рецептора ЛПНП Брауна и Гольдстайна [7]. В результате многочисленных исследований [1-
5,8] было установлено, что ЛПНП, главные переносчики холестерина в крови, должны первыми
превращаться в окисленные ЛПНП, так они могут узнаваться «чистильщиками» или рецепторами
окисленных ЛПНП на макрофагах, происходящих из моноцитов. Связывание окисленных ЛПНП с
макрофагами - необходимая стадия, с помощью которой окисленные ЛПНП вызывают аккумуляцию
холестерина в макрофаги, и, таким образом, превращают макрофаги в нагруженные липидами пенистые
клетки [8].
Holvoet et at. [9] впервые отчетливо показали, что у пациентов с поражениями коронарной артерии
существенно повышен уровень окисленных ЛПНП в плазме крови, и что сходный уровень циркулирующих
окисленных ЛПНП наблюдается у пациентов с устойчивыми поражениями коронарной артерии и у
пациентов с острыми коронарными синдромами. Они обнаружили, что уровень окисленных ЛПНП плазмы
существенно выше у больных со стойкой ангиной, с нестабильной ангиной и острым инфарктом миокарда
по сравнению с практически здоровыми контрольными субъектами того же возраста.
В публикации Holvoet [9-13] окисленные ЛПНП плазмы измеряли методом конкурентного
иммуноферментного анализа с использованием специфических мышиных моноклональных антител mAb-
4Е6. Следует отметить, что в наборе Mercodia Oxidized LDL используются те же самые специфические
мышиные моноклональные антитела mAb-4E6, которые использовал в своих измерениях Holvoet [9,10].
Однако, измерение с помощью набора Mercodia представляет собой иммуноферментный анализ
«сэндвич»-типа, в котором лунки микропланшетов покрыты связывающими антителами mAb-4E6.
Особого внимания заслуживают некоторые работы, проведенные клиническими исследователями с
использованием набора Mercodia Oxidized LDL. Hulthe и Fegerberg [11] показали взаимосвязь между
субклиническим атеросклерозом и уровнем циркулирующих окисленных ЛПНП: от уровня окисленных
ЛПНП зависит толщина средней оболочки стенки кровеносного сосуда и наличие бляшек в сонной и
бедренных артериях. Sigurdardottir, Fagerberg и Hulthe [12] показали повышенный уровень окисленных
ЛПНП у пациентов с метаболическим синдромом; в дополнение к этому повышенный уровень окисленных
ЛПНП у таких пациентов был ассоциирован с маленьким размером частиц ЛПНП. Kopprasch et al. [13]
© I крекол па русский язык ЗАО «ЛНЛЛИТИКЛ», М осква^ 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
--- стр. 41 ---
Mercodia Oxidized LDL ELISA, Mercodia A B
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
Как для всех диагностических тестов, окончательный клинический диагноз не может быть поставлен по
результатам единичного теста, но должен делаться врачом после оценки всех имеющихся результатов
клинических исследований.
Проведению анализа не мешали образцы с признаками гемолиза, липемические и иктерические образцы
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Общепринятые правила рекомендуют каждой лаборатории установить свою собственную область
ожидаемых значений.
Следующие результаты были получены при исследовании 149 случайно выбранных амбулаторных
пациентов из Стокгольма и близлежащих районов (Швеция).
Распределение окисленных ЛПНП
Частота (%)
25 3*5 45 55 65 75 S6 95 105 115
Окисленные ЛПНП (Ед/л)
Окисленные ЛПНП против общего холестерина
Окисленные ЛПНП
(Ед/л)
L D L
••
о . о с
Общий холестерин (ммоль/л)
При исследовании 149 случайным образом выбранных амбулаторных пациентов Стокгольма и
близлежащих районов (Швеция) были получены следующие результаты:
Среднее значение Средняя линия Диапазон изменений
Окисленные ЛПНП (Ед/л)* 61 59 26-117
Отношение холестерин/ЛПВП** 4.10 3.90 1.68-7.89
"Условные единицы. См. Раздел КАЛИБРОВКА.
''‘Данные измерения холестерина (ммоль/л) и ЛПВП (ммоль/л)
Распределение окисленных ЛПНП и отношение холестерин/ЛПВП
Окисленные ЛПНП,
Ед/л
Отношение
холестерин/ЛПВП
Пациент/Всего, (%)
Квартиль 1
Q 1 (26-49) 1.68-3.13 22/149 (14.8)
Q2 (50-59 1.68-3.13 10/149 (6.7)
Q3 (60-69) 1.68-3.13 5/149 (3.4)
Q4 (70-117) 1.68-3.13 0/149(0.0) i
© Псренод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.; 737-0363, факс: 737-0365, e-mai!: info@analylica.ru
--- стр. 42 ---
Mercodia Oxidized LDL ELISA, Mercodia A B
Квартиль 2
Q1 (26-49) 3.21-3.86 7/149 (4.7)
Q2 (50-59 3.21-3,86 17/149(11.4)
Q3 (60-69) 3.21-3.86 10/149 (6.7)
04(70-117) 3.21-3.86 3/149 (2.0)
Квартиль 3
Q1 (26-49) 3.87-4.79 7/149 (4.7)
Q2 (50-59 3.87-4.79 11/149 (7.4)
Q3 (60-69) 3.87-4.79 11/149 (7.4)
04(70-117) 3.87-4.79 9/149 (6.0)
Квартиль 4
01 (26-49) 4.80-7.89 1/149 (0,7)
02 (50-59 4.80-7.89 4/149 (2,7)
03 (60-69) 4.80-7.89 7/149 (4,7)
04 (70-117) 4.80-7.89 25/149 (16.8)
При исследовании 147 случайным образом выбранных амбулаторных пациентов Стокгольма и
близлежащих районов (Швеция) были получены следующие результаты:
Среднее значение Средняя линия Диапазон изменений
Окисленные ЛПНП (Ед/л)* 61 59 26-117
Отношение ЛПНП/ЛПВП** 2.51 2,36 0.55-5,56
•Условные единицы. См. Раздел КАЛИБРОВКА.
**Данные измерения ЛПНП (ммоль/л) и ЛПВП (ммоль/л)
Распределение окисленных ЛПНП и отношение ЛПНП/ЛПВП
Окисленные ЛПНП,
Ед/л
Отношение
ЛПНП/ЛПВП
Пациент/Всего, (%)
Квартиль 1
01 (26-49) 0.55-1.79 19/147(13.0)
02 (50-59 0,55-1.79 12/147(8.2)
03 (60-69) 0.55-1.79 6/147 (4.1)
04(70-117) 0.55-1.79 0/147 (0,0)
Квартиль 2
01 (26-49) 1.79-2,33 10/147 (6,8)
02 (50-59 1.79-2.33 13/147(8.8)
03 (60-69) 1.79-2.33 10/147 (6,8)
04 (70-117) 1.79-2,33 3/147 (2.0)
Квартиль 3
01 (26-49) 2.36-3.08 8/147 (5.4)
02 (50-59 2.36-3,08 11/147(7,5)
03 (60-69) 2.36-3.08 10/147 (6.8)
04 (70-117) 2.36-3,08 8/147 (5.4)
Квартиль 4
01 (26-49) 3.09-5,56 0/147 (0.0)
02 (50-59 3.09-5.56 5/147 (3,4)
03 (60-69) 3.09-5.56 8/147 (5,4)
04 (70-117) 3.09-5.56 24/147(16,3)
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность
Чувствительность составляет <1 мЕд/л и рассчитана прибавлением 3 стандартных отклонений к нулевому
калибратору.
Открытие
При добавлении в пробы известного количества окисленного ЛПНП процент открытия составлял 85-107 %
(среднее значение - 95%),
© Перс вол на русский язык ЗАО «АНЛЛИ'ГИКЛ», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, c-mail: inro@analytica.rii
--- стр. 43 ---
Mercodia Oxidized LDL ELISA, Mercodia A B
Точность
Точность измерения рассчитывали из определения трех образцов в 3-8 повторах в 20 различных
тестированиях.
Образец Полученное
значение мЕд/л
Коэффициент вариации, %
В пределах
постановки
Между
постановками
В целом
1 8.5 5.5 6.2 8.3
2 19 7.3 4.0 8.3
3 32 6.2 4.0 7.4
Разведения
Образец Разведение Полученное значение
(мЕд/л)
Полученное
значение/Ожидаемое
значение
(Измерен ие1/Измерение 2)
Образец 1 1:3321 -
1:6642 19.9/18.3
1:13284 Э.4/9.5 0.94/1.04
Образец 2 1:3321 -
1:6642 20.6/20.4
1:13284 10.6/9.8 1.02/0.97
Образец 3 1:3321 29.1/32.0 1.07/0.97
1:6642 15.6/15.5 1.05/1.00
1:13284 7.7/8.0
Образец 4 1:3321 21.6/20.2 0.97/1.03
1:6642 10.4/10.4 1.08/1.12
1:13284 5.9/5,7
Образец 5 1:3321 15.9/15.7
1:6642 8.1/8.0 1.02/1.02
1:13284 4.0/4.4 1.02/1.13
Среднее соотношение «Полученное значение/Ожидаемое значение» составляет 1.03, диапазон изменений
-0.94-1.13.
Калибровка
Международный стандарт окисленных ЛПНП в настоящее время отсутствует. Набор Mercodia Oxidized LDL
откалиброван в условных единицах относительно стандарта фирмы Mercodia.
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной
процедуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой
Mercodia ЛВ, могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ отказывается от
предоставления гарантий выраженных явно, подразумеваемых или установленных законом, включая
предполагаемую гарантию на пригодность набора к продаже и к использованию.
При этом фирма Mercodia АВ и ее авторизованные дистрибьюторы не будут нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
Перевод на русский язык ЗЛО «ЛНЛЛИТИКЛ», Москва, 2009 тел.; 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@aiialytica.ru
--- стр. 44 ---
Mercodia Oxidized LDL ELISA. Mercodia A B
КРАТКАЯ СХЕМА ПРОТОКОЛА АНАЛИЗА
Mercodia Oxidized LDL ELISA
Внесите калибраторы и образцы 25 мкл
Внесите буфер для анализа 100 мкл
Инкубация 2 часа при температуре 18-25 °С
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесите ферментный конъюгат 100 мкл
Инкубация 1 час при температуре 18-25 °С
при встряхивании на планшетном шейкере
Промывка 6 раз
Внесите субстрат ТМБ 200 мкл
Инкубация 15 минут
Внесите стоп-реагента 50 мкл
Встряхивайте 5 секунд для обеспечения
перемешивания
Измерение при О П д ао
В н и м ани е! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
С
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
Перснод на русский язык ЗЛО «ЛНАЛИ'ГИКЛ». Москва. 2009 тел.: 737*0363, факс; 737-0365. e-mail; info@analylica.ru
--- стр. 49 ---
Аро(а) ELISA, Mercodia A B
ВНУТРЕННИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для внутреннего контроля качества следует ежедневно в постановку анализа включать внутренние
контрольные сыворотки с низкой, средней и высокой концентрацией Апо(а). Контрольные материалы
должны анализироваться как неизвестные образцы. Результаты исследования, а также номера лотов, даты
приготовления растворов, ОП бланков, калибраторов и контролен необходимо документировать.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Расчет с помощью компьютера
Чтобы рассчитать концентрацию Апо(а) можно провести компьютерную обработку данных зависимости
оптической плотности калибраторов, за исключением нулевого калибратора, от концентрации с
использованием кубической регрессии (сплайна). Умножьте концентрацию неизвестных образцов на
коэффициент разведения (например, х 2 0 2).
Расчет вручную
1 . На миллиметровой бумаге (в линейных координатах) постройте калибровочную кривую зависимости
оптической плотности калибраторов, за исключением нулевого калибратора, от концентрации Апо(а).
2. По калибровочной кривой рассчитать концентрации Апо(а) в контролях и исследуемых образцах.
3. Умножьте полученную концентрацию Апо(а) в контролях и исследуемых образцах на фактор
разведения (например, х 2 0 2).
Пример расчета
Значения получены при использовании набора, произведенного за 8 недель до испытания
Лунки Обозначение А450
Средняя
концентрация, Ед/л*
1 2 3 4
1 А-В калибратор 0 0,161/0,064
1 C-D Калибратор 1** 0,194/0,197 62,6
1 E-F Калибратор 2** 0,535/0,537 224,2
1 G-H Калибратор 3** 1,129/1,131 565,6
2 А-В Калибратор 4** 1,835/1,837 1131,2
2C-D контроль L 0,239/0,242 83,8
2 E-F контроль Н 0,515/0,515 215,4
2G-H исследуемый образец 1 0,286/0,286 104,5
ЗА-В исследуемый образец 2 0,562/0,563 238,4
3C-D исследуемый образец 3 1,070/1,073 525,4
* Результат умножен на фактор разведения (х 202).
** Концентрации указаны на этикетке флаконов (как правило, диапазон следующий: 0.31; 1.11; 2.8; 5.6 Ед/л)
Пример калибровочной кривой
Ниже приводится (в качестве примера) типичная калибровочная кривая. Не используйте эту кривую для
расчета полученных вами результатов.
Лпо(.0 (Ед/л)
© 11сревол на русский я^ык ЗАО «ЛНАЛИ ГИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс; 737-0365, e-mail: info@aiuUylica.ru
--- стр. 50 ---
Аро(а) ELISA, Mercodia A B
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
Как для всех диагностических тестов, окончательный клинический диагноз не может быть поставлен по
результатам единичного теста, но должен делаться врачом после оценки всех имеющихся результатов
клинических исследований.
Проведению анализа не мешали образцы с признаками гемолиза, липемические и иктерические образцы.
СРАВНЕНИЕ С MERCODIA АРО(а) РИА
Бы ли проведены сравнительные исследования наборов ИФА Mercodia Апо(а) и РИА Mercodia Апо(а) на 45
образцах в 2 повторах в 2 экспериментах. Выявлена хорошая корреляция значений концентраций, опреде
ленных этими методами, г = 1,00
{см. рис. в оригинале, в разделе "Comparition with Mercodia Аро(а) RIA).
Таким образом, ожидаемые значения, определенные для набора Mercodia Апо(а) РИА, могут также исполь
зоваться и для набора Mercodia Апо(а) ИФА.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
В соответствии с GLP {good laboratory practice) каждой лаборатории рекомендуется самостоятельно
определять диапазон ожидаемых значений. Приводим ориентировочные результаты, полученные с
помощью набора Mercodia Апо(а) РИА, которыми лаборатория может руководствоваться до накопления
достаточного количества данных для выработки собственных норм.
Концентрацию Апо(а) определяли в трех различных выборках:
А Норма, п = 171, Швеция (европеоиды)
В Норма, п = 203, Канада (европеоиды и монголоиды, гетерогенная выборка)
С Пациенты с семейной гиперхолестеринемией (ГХ), п = 113, Канада (европеоиды и монголоиды,
гетерогенная выборка)
В группу нормы вошли индивиды, отобранные из общей популяции, не имевшие очевидных заболеваний
сердца и/или сосудов головного мозга.
Распределение приведено на рисунке (см. рисунок в оригинале инструкции).
В о всех трех обследованных группах не наблюдалось каких-либо возрастных или половых различий по
уровням Апо(а).
Не было выявлено достоверных различий в уровнях Апо(а) у групп нормы из 1ивеции и Канады.
У пациентов группы ГХ наблюдался достоверно более высокий уровень Апо(а), чем в группе нормы из того
же региона (р < 0,001, тест суммарного распределения Wilcoxon).
Для разных групп были найдены следующие концентрации аполипопротеина(а) для медианы, 75%, 85% и
95% выборки.
Медиана 75% 85% 95%
Ед/л Ед/л Ед/л Ед/л
Норма, Швеция 131 448 612 795
Норма,Канада 117 379 525 1044
ГХ, Канада 294 660 863 1544
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Чувствительность
Минимально определяемая концентрация составляет 0,05 Ед/л. Рассчитана на основании значения
оптической плотности нулевого калибратора плюс утроенное среднее квадратичное отклонение. Это
соответствует концентрации Апо(а) в образце 10 Ед/л при разведении образца 1/202.
Открытие
При добавлении в пробы известного количества Апо(а) открытие составило 96-111 % (среднее значение -
102%).
Прозонный эффект
В образцах с концентрацией до 9600 Ед/л не отмечалось ложно заниженных результатов, если образцы
были предварительно обработаны и разведены 1/202, как описано выше.
Воспроизводимость
Использовались образцы, сразу предварительно обработанные и разведенные 1/202, хранившиеся до
исследования при температуре минус 20 °С. Каждый образец анализировали в 4 повторах в 9 разных
постановках.
© 1 [срсвол на русский язык ЗЛО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: info@analytica.ru
--- стр. 51 ---
Аро(а) ELISA, Mercodia A B
Образец Среднее значение,
Ед/л
Коэффициент вариации
в пределах
постановки, %
между
постановками, % в целом, %
1 83 3,3 4,0 5,2
2 196 2,9 3,6 4,7
3 485 2,4 1,8 3,0
Также использовались образцы, предварительно обработанные и разведенные 1/202 перед каждым
исследованием. Каждый образец анализировали в 5 повторах в 5 разных постановках.
Образец Среднее значение,
Ед/л
103
251
744
Коэффициент вариации
в пределах
постановки, %
3,1
3,6
2,4
между
постановками, %
4,2
3,7
5,2
в целом,%
5,2
5,2
5,7
Специфичность
При добавлении плазминогена до концентрации 10 г/л не отмечалось перекрестной реакции в пределах
чувствительности анализа.(Клиническая концентрация плазминогена ниже 2,1 г/л).
Не отмечено перекрестной реакции с аполипопротеином В .
Калибровка
ИФА набор Mercodia Апо(а) откалиброван относительно высоко очищенного, аттестованного коммерческого
препарата Лп(а).
Концентрация аполипопротеина(а) выражена в Ед/л.
Выразить концентрацию Апо(а) в единицах массы не представляется возможным, поскольку существует по
крайней мере 6 различных изоформ, обладающих молекулярной массой от примерно 300 кДа до 900 кДа.
Таким образом, в каждом образце пациента содержатся различные изоформы в разных пропорциях.
Следовательно, не существует точного фактора пересчета единиц Апо{а) в миллиграммы Апо(а).
1 Ед Апо(а) приблизительно эквивалентна 0,7 мг белка Лп(а).
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной проце
дуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой Mercodia АВ,
могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ отказывается от предоставления гарантий
выраженных явно, подразумеваемых или установленных законом, включая предполагаемую гарантию на
пригодность набора к продаже и к использованию.
При этом фирма Mercodia АВ и ее уполномоченные дистрибьюторы не будут нести материальную ответст
венность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования набо
ра.
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009 тел.: 737-0363, факс: 737-0365, c-maii: info@analytica.ru
--- стр. 52 ---
Аро{а) ELISA, Mercodia A B
КРАТКАЯ СХЕМА ПРОТОКОЛА АНАЛИЗА
Внесите калибраторы, предварительно
обработанные контроли и образцы
25 мкл
Внесите ферментный конъюгат 50 мкл
Инкубируйте 1 час при 18-25 °С на шейкере
Промойте 6 раз
Внесите субстрат ТМБ 2 0 0 мкл
Инкубируйте 15 минут
Внесите стоп-реагент 50 мкл
Встряхивайте 5 секунд для пере
мешивания
Измерьте ОП450
Вн и м ан и е! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
В с е г о П р о м у м г ПООУ:'С. I
npoajH ypo;K j,r[' и с к р е п л о н о j
п е ч а т ь ; о. .^ я^ 1сто г:. ’
Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 20Q 9 тел.; 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: inl'o@analytica.rii
--- стр. 53 ---
Diabetes-antigen Control (Low, High) / Human, Mercodia A B
УТВЕРЖДАЮ
льный директор
Ан а л и т и к а»
прищепа
< v^ /» А^^абря 2009 г.
И Н С Т Р У К Ц И Я по П Р И М Е Н Е Н И Ю
Контрольный материал на маркеры диабета
(Mercodia Diabetes-antigen Control (Low, High)/Human)
производства фирмы Mercodia A B (Швеция)
D i a b e t e s - a n t i g e n C o n t r o l ( L o w , H i g h ) I H u m a n
Набор из двух контрольных человеческих сывороток с низким и высоким содержанием инсулина, С-пептида
и проинсулина.
Набор состоит из двух контрольных сывороток
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор контрольных сывороток фирмы Mercodia Diabetes-antigen Control предназначен для двухуровневого
контроля человеческого инсулина, С-пептида и проинсулина. Он изготовлен на основе человеческой
сыворотки, содержащей человеческий инсулин, С-пептид и проинсулин.
РЕАГЕНТЫ
Каждый набор Mercodia Diabetes-antigen Control содержит 2 флакона лиофилизированной сыворотки; объем
сыворотки во флаконе после восстановления - 0,5 мл. Концентрации указаны ниже.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТА
Восстановите контроли путем добавления в каждый из двух флаконов по 500 мкл бидистиллированной
воды . Закройте флаконы резиновыми пробками и оставьте на 5 минут. Затем осторожно встряхивайте
флакон, пока не произойдет полное растворение его содержимого. Избегайте вспенивания.
СРОК годности и УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
Срок годности указан ниже. Храните набор до вскрытия упаковки при 2-8 *" С .
Восстановленные контрольные сыворотки сохраняют стабильность в течение 1 недели при 2-8 °С или 3
месяца при -20 °С. Избегайте повторного замораживания и оттаивания.
ПРОЦЕДУРА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
При выполнении анализов на инсулин, С-пептид и проинсулин используйте восстановленные сыворотки,
входящие в набор Mercodia Diabetes-antigen Control, вместо образцов пациентов.
Внимание! Набор содержит реагенты, несущие потенциальную инфекционную опасность!
Данный набор содержит компоненты, изготовленные на основе продуктов человеческой крови. Все
компоненты были исследованы с помощью иммунологических методов на наличие поверхностного антигена
гепатита В , антител к ВИЧ и вирусу гепатита С и показали отрицательные результаты. Тем не менее,
следует соблюдать все меры предосторожности, рекомендованные для работы с компонентами крови.
Перед работой ознакомьтесь, пожалуйста, с соответствующими инструкциями по безопасной работе в
клинико-диагностических лабораториях.
© Иерсиод на русский я'^ьгк ЗЛО «А11ЛЛИ'1’ ИКА», Москва, 2009 ■ |'с л .: 737-0363, факс; 737-0365, c-mail; inroi'f/^analylica.ru
--- стр. 54 ---
Diabetes-antigen Control (Low, High) / Human, Mercodia A B
ТАБЛИЦА ОЖИДАЕМЫХ ЗНАЧЕНИЙ
Срокам годности!
Низкий контроль (L) Серия №: 15558 Годен до 2011-05-02
Метод Среднее Интервал Единицы
Mercodia Insulin ELISA 7,7 6,3-9,2 мЕ/л
Mercodia C-peptide ELISA specific 543 443-644 пмоль/л
Mercodia Proinsulin ELISA 7,0 4,6-9,5 пмоль/п
Mercodia Iso-Insulin ELISA 9,1 7,3-10,9 мЕ/л
Высокий контроль (Н) Серия №: 15560 Годен до 2011-05-02
Метод Среднее Интервал Единицы
Mercodia Insulin ELISA 56,9 52,6-61,2 мЕ/л
Mercodia C-peptide ELISA specific 1903 1614-2193 пмоль/л
Mercodia Proinsulin ELISA 47,7 41,9-53,5 пмоль/л
Mercodia Iso-Insulin ELISA 57,6 45,7-69,5 мЕ/л
Анализы выполнены на фирме Mercodia АВ.
Приведенные величины применимы только к анализам, выполненным с помощью наборов фирмы
Mercodia АВ.
При использовании других методов могут быть получены иные результаты.
ГАРАНТИИ
Приведенные аналитические характеристики набора были получены при использовании указанной
процедуры анализа. Любые изменения или модификации процедуры, не рекомендованные фирмой Mercodia
АВ, могут повлиять на результаты; в этом случае фирма Mercodia АВ отказывается от предоставления
гарантий выраженных явно, подразумеваемых или установленных законом, включая предполагаемую
гарантию на пригодность набора к продаже и к использованию.
При этом фирма iVlercodia АВ и ее авторизованные дистрибьюторы не будут нести материальную
ответственность за непрямые убытки или убытки, произошедшие вследствие неправильного использования
набора.
Вни м ан и е! Перевод сделан с английского оригинала инструкции.
Н а ч а л ь н и к о т д е л а п р о д у к ц и и К .И . Б л а н к
© 1 1среьод па русский язык ЗЛО «АНАЛИТИКА», Москва, 20® тел.; 737-0363, факс; 737-0365, e-mail: inio@analytica.ru