Реагенты IN VITRO для исследования специфических белков плазмы крови — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
=== файл: Инструкция_руководство__o36539_I.pdf ===
--- стр. 3 ---
нтисыворотка к белкам плазмы человека
(есть применения
(фмная антисыворотка к белкам плазмы человека подходит для выявления
1Спу>ощих белков в сьеоротке и других жидкостях человеческого тела при помощи
ких методов.
воротка к белку Бенса-Джонса (свободные к или Л-цепи) выпадают только при
самого белка, т е в присутствии свободных лямбда-цепей иммуноглобулина. Они
т наличие реакций с неповрежденным иммуноглобулином, так как данная
._ сыворотка показывает наличие только тех антител, которые соответствуют
Ьм детерминантам антиген лямбда-цепей в неповрежденном иммуноглобулине
этект и пояснения
и м в белковом составе плазмы (дислротеинемия) часто являются следствием
1М4ИЙ. частично из-за нарушения синтеза белка или его метаболизма, частично из-
«п нарушений.
пенное определение белка в плазме позволяет выявить индикаторы, необходимые
шюстики. а также дают информацию по протеканию болезни
бное описание находится в использованной литературе (см список литературы - 1,
О
IDBa методики
рление белков в плазме человеческой крови при помощи антисыворотки к белкам
человека основано на специфической реакции между антигеном и
рювующим антителом, которые образуют нерастворимый иммунопреципитат
■к протекает в жидкостях, преимущественно в гелевой среде, таких как агар или
рмйгель
1ГГИВЫ
^ггавляемые материалы
|«оротка для человеческого С5 (кролик), код OSFZ
тка для человеческого СЗ Активатора (кролик), код OTNS
а для человеческого C1q (кролик), код OTNT
а для человеческого lgD/5-цепь (кролик), код OTND
ка к белку Бенса-Джонса/свободным к-цепям (коза), код OTNN
к белку Бенса-Джонса/свободным А-цепям (коза), код OTNO
флакону с 1 мл каждого реагента
|ф|чная иммунная сыворотка к белкам плазмы человека является жидкой животной
рткой и производится во время вакцинации различных животных человеческими
ПИ
Вмощи специальной процедуры из антисыворотки удаляются неустойчивые
Шяющие Неспецифичные антитела большей частью удаляются при помощи
Пювых частиц, связанных носителем (твердо-фазная иммуноадсорбция)
Ваоротка консервируется путем фильтрации и добавлением азида натрия (< 1 г/л).
Моротка к белкам Бенса-Джонса/свободным к-цепям и белкам Бенса-
^саободным 1-цепям также содержит тимерфонат* натрия в качестве консерванта
евном. моноспецифическая антисыворотка к белкам плазмы человека содержит
А набор антител (максимальный диапазон расхождения ± 20 %). Титр антител (Т)
Епяется при помощи одинарной радиальной иммунодиффуэии со стандартными
швительными процедурами от Dade Behring Marburg GmbH и напечатан на наклейках
фок Титр показывает сколько мг антигена осаждаются 1 мл каждой из антисывороток
юэоеом геле Для антисыворотки к человеческому lgD/5-цепи определение
пания титра в мг/мл невозможно, поэтому содержание дается в ед./мл (ед. =
«|в. 1 ед означает содержание соответствующего белка в 1 мл пула сыворотки
•ого взрослого человека).
тмлмеркуритио)-бензолсульфоновая кислот, соль натрия
|Гпреждения и меры предосторожности
1Ько для 1П vitro диагностики
|вржит азид натрия Рекомендуется работать с веществом аккуратно.
■ыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия
ая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
юопасные соединения
втовка реактивов
ьворотка обычно используется в неразбавленном состоянии. В случае очень низкой
•гтрации белка в плазме, антисыворотку допускается разводить (исключая
■киение уровня содержания антител),
ение и устойчивость
мворотка к белкам плазмы человека может использоваться до даты, указанной на
(йке, при условии хранения при температуре от +2 до +8*С. После первого
ьзования флакона, его необходимо плотно закрыть и хранить при температуре от +2
ГС
)бы
1ССледования используйте наиболее свежие (находящиеся на хранении максимум 8
при температуре от *2 до +8 *С) или замороженные пробы человеческой сыворотки
лазмы. а также мочи, экстрактов или других используемых жидкостей из организма
ые пробы можно использовать как в разведенном, так и в концентрированном виде, в
«мости от требуемого результата. Высоко липемические или гемолитические пробы
■ усложнить процесс оценки. Присутствие больших концентраций моющего вещества
т предотвратить образование иммунопреципитатов. Некоторые физиологические
1ия должны быть усреднены в реакционной среде, например
знь pH приблизительно 6,5 - 9,0
ржание соли: приблизительно 0.05 - 0,25 моль/л
жализе специальных искусственных белковых проб человеческой сыворотки,
эива и прочих секретов, в которых содержание белков значительно увеличено при
щи специальных условий обработки, невозможно полностью исключить
пнительных реакций с подобными белками Подобные «нехарактерные» реакции
зляются очень слабо и не оказывают влияния на выполнения конкретного
здования
годика
ная диффузия обеспечивает качественное выявление или идентификацию
«тных белков в сыворотке или плазме крови В основном используется процедура
рлони (Ouchterlony) в агаровом или агарозном геле®.
<1ммуноэлектрофорезв анализируемый материал разделяется до иммунодиффуэии в
ЗОЙ среде посредством электрофореза®. В более чувствительном двумерном
■ноэлектрофорезе Кларка и Фримана (Clarke и Freeman) электроиммунодиффузия
эеодится после отделения гелевой среды с антителами®
из нормальной сыворотки рекомендуется проводить параллельно с контролем при
лчных процедурах качественного выявления.
ЮК
Титр антител антисыворотки
мг/мл
\ 4,0
Активатор 0,6
0,76
800 ед/мл'
2. In Ritzmann SE, Daniels JC, eds. Serum Protein Abnormalities. Diagnostic and Clinical
Aspects New York: Alan R Liss, Inc.. 1982
3 In Ritzmann Se, ed Protein Abnormalities New York Alan R Liss, Inc., 1982 (Vol. 1), 1982
(Vol 2), 1983 (Vol. 3).
4. In: Putnam FW ed. The Plasma Proteins. New York. Academic Press, 1975 (Vol 1, Vol 2),
1977 (Vol. 3), 1984 (Vol. 4)
5. Schwick HG et al. Qualitative Plasmaprotein-Bestimmung durch Immunprazipitation. In:
Behringwerke AG, Frankfurt, ed LaboratoriumsblBtter, 1971 (Vol. 3).
6. Clarke MHG et al Qualitative Immunoelectrophoresis of human serum proteins Clin Set
1968, 35, 403
Dade Behmg Martxjg GmbH
Emil-von-Bebnng-Str
76 35041 Марбург, Германия
http //WWW dadebehring com
Дистрибьютор в США Dade Behring Inc
Ньюарк, DE 19714US A
Редакция Июль 2001
четом смеси обычной сыворотки. 100 ед соответствуют содержанию белка в 100 мл
1Н0Й перемешанной человеческой сыворотки)
Асок литературы
Thomas L, Hrsg. Labor und Diagnose Frankfurt/Main: TH Books Verlagsgesellschaft mbH,
--- стр. 4 ---
Антисыворотка к человеческому фибронектину
пасть применения
ИТ для ш vitro диагностики для количественного определения фибронектина в плазме
1челоеека при помощи систем BN*
кпект и пояснения
■иная концентрация фибронектина в плазме может быть причиной шока, тяжелых
ций вроде сепсиса, цирроза печена, недоедания, ожогов, диссеминированное
рсосудистое сверть 1вание (DIC), острый панкреатит, а также после травм или крупных
Относительное падение концентрации фибронектина в плазме служит
■галем тяжелых форм, а увеличение - принято считать хорошим знаком
мпрация фибронектина в плазме может использоваться для мониторинга состояния
Повышенный уровень концентрации фибронектина в плазме крови беременных
рн указывает на вероятность преэклампсии^. Анализ фибронектина в асцитической
кти используется для определения причин асцита злокачестеенных или
жвчественных
нова методики
шунохимических реакциях белки в плазме человеческой крови формируются в
1Мые комплексы со специфическими антителами. Это приводит к рассеиванию
Кящего через образец света Интенсивность рассеивания света зависит от
ктрации соответствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со
дртной заданной концентрацией
нгтивы
вставляемые материалы
мсыворотка для человеческого фибронектина, код OUND
Пробирка с 2 мл реагента
«сывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации
N0 8 вьюоко очищенным человеческим фибронектином. При помощи специальной
НУры из антисыворотки удаляются неустойчивые составляющие Большая часть
организмов удаляется путем фильтрации и добавления азида натрия в качестве
рванта (< 1 г/л) После твердофазной иммуноадсорбции очищенная антисыворотка
ряется и корректируется особым образом для достижения максимального
втствия требованиям систем BN* Титр антител определяется при помощи
тьмой иммунодиффузии и наносится на этикетки пробирок Титр отражает количество
1н в мг, которые осядут в агарозном геле при добавлении 1 мг соответствующей
ыаоротки
|треждения и меры предосторожности
лько для ш vitro диагностики.
держит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно
ыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия
вя в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
юоласные соединения.
уговка реагентов
исыворотка готова к применению и может использоваться без дополнительной
товки
мне и устойчивость
ниеость при температуре от +2 до +8 *С
годности указан на этикетке,
ниеость после открытия.
эли при температуре от *2 до +8 *С, если плотно закрыть сразу после использования
потвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами);
емя хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
нение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
ваются на его активности. В подобных случаях, антисыворотку необходимо
1ьтровать перед использованием. Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с
|ром пор около 0,45 мкм. Не замораживайте реактивы Устойчивость в приборе:
й по 8 часов либо аналогичный период времени (максимум 40 часов);
ма BN‘ 1 1
• устойчивости в приборе может быть увеличено применением антииспарительных
ж BN* И (код OVLE) в соответствии с руководством:
ма BN ProSpec®
»устойчивости в приборе - в соответствии с руководством
ходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
ма BN*
жовый стандарт PY (чвлов ), код OUID
елковый контроль PY (челов ). код OWSY
зер реакции, код OUMS
бавитель, код OUMT
Антииспарительная пробка (доп.), код OVLE
■пные запчасти и оборудование, олисаннью в руководстве по системе BN*
^ б ы
здящими являются пробы человеческой плазмы, цитратной или EDTA плазмы в
м виде (хранение не более 8 дней при температуре от *2 до -i-e’C). Образцы могут
ггься до 1 года при температуре -20 *С, в случае, если они были заморожены в
1ие 24 часов после сбора, при условии отсутствия повторной заморозки. Липемические
амороженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть отцентрифугированы
пнут приблизительно на 15 ООО х г) до анализа. Цитратная плазма в среднем
1вляется на 17% при добавлении цитратиого раствора. Гепариниэированная плазма
сследования на фибронектин не подходит.
годика
ючания
зращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробнь 1х
1УКЦИЙ.
I используйте реагенты с истекшим сроком годности.
}ред использованием реагентов в системах BN’A/BN* 100, выдержите их при
ЭТНОЙ температуре (от 15до *25 *). Для систем BN* Н или BN ProSpec® данный шаг
о пропустить
окол испытания для систем BN*
холы испьгганий приведены в руководстве и программном обеспечении прибора. Все
'эия выполняются системой автоматически
ет референсной кривой
(ренсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки. Расчет
эводится автоматически сериями, образуется раствор N Белкового стандарта PY с N
ааителем. Референсную кривую можно использовать для точности контролей,
лмер, МЯ Белковый контроль PY, остается в пределах соответствующего
жгельного интервала Новая референсная кривая создается при каждой смене
1и реактивов
юдование проб, взятых у пациентов
13ЦЫ автоматически разбавляются в соотношении 1 20 при помощи N Разбавителя и
ряются. Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследование
ю повторить с более высокой или более низкой степенью разбавления проб См
руководство по системе BN’ для получения сведений о повторных измерениях с другими
степенями разбавления
Внутренний контроль качества
Анализ МЯ Белковый стандарт PY должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования флаконов с реагентом, а так же для
каждого измерения проб Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как и
тестируемые образцы. Заданное значение и доверительный интервал для контроля даны
соответствующей Таблице приписанных значений.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
По причинам технического характера и/ипи из-за старых образцов, результаты, попученны
для контрольного образца, и результаты внутрилабораторных исследований могут
отличаться в зависимости от методики анализа Поэтому может возникнуть необходимостк
произвести оценку этих результатов методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
Нижеследующий эталонный интервал подходит для проб цитратной плазмы здоровых
Белок 2,5 - 97,5 Процеитиль
Фибронектин 0.25 - 0.4 г/л
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте PY Стандартные диапазоны
измерений дамы в руководстве по эксплуатации системы BN
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Актисыворотка.
Точность
Следующие коэффициенты вариации (CV) были получены с использованием N
Белок
Внутри анализа
(п=30) CV 1%1
Между анализами
(п=10)
Ср значение (г/л) Ср. знач. [г/л] CV[%]
Фибронектин 0,22 1,8 0,22 1,5
Сопоставление методов
Было проведено исследование 60 образцов плазмы с N Антисывороткой к человеческому
фибронектину на системе BN* (у) и радиальная иммунодиффузия (х) (NOR Patigen’*).
Сопоставление результатов выявило следующие сведения
Белок Количество Линейная рвфвссия Коэффициент
образцов корреляции
Фибронектин 46 y(BN*) = 0,96x(RID) + 0,01 г/л 0,93
Примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собой
типичные результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для
человеческого фибронектина.
Список литературы
1 Sandberg L, VanReken D, Waiwaiku К, et al. Plasma fibronectin levels in acute and recoverii
malnourished children. Clin Physiol Biochem 1985; 3: 257-S4.
2 O’Brien WF The prediction of preeclampsia. Clin Obstel Gynecol 1992; 35: 351-64.
3 Colli A, Buccino G, Cocciolo M, et al. Diagnostic accuracy of fibronectin in the differential
diagnosis of ascites Cancer 1986; 58 2489-93
BN ProSpec зарегистрированная торговая марка Dade Behnng Marburg GmbH a США.
Германии и других странах
* BN является торговой маркой Dade Behring Marburg GmbH в США
** Partigen зарегистрированная торговая марка Dade Behring Marburg GmbH в Германии и
других странах
Dade Behring Marburg GmbH
Emil-von-Behnng-Str 76
D-35041 Марбург
Дистрибьютор в США Dade Behring Inc
Ньюарк, DE 19714 США.
Редакция Октябрь 2002
--- стр. 5 ---
[Антисыворотка к человеческому фибронектину
inacTb применения
1мг для 1П vitro диагностики для количественного определения фибронектина в плазме
■человека при помощи систем BN*.
рспект и пояснения
ШВнная концентрация фибронектина в плазме может быть причиной шока, тяжелых
Нний вроде сепсиса, цирроза печена, недоедания, ожогов, диссеминированное
{ркосудистое свертывание (DIC), острый панкреатит, а также после травм или крупных
|к|ий Относительное падение концентрации фибронектина в плазме служит
Втвлем тяжелых форм, а увеличение - принято считать хорошим знаком.
|^прация фибронектина в плазме может использоваться для мониторинга состояния
щя Повышенный уровень концентрации фибронектина в плазме крови беременных
|рн указывает на вероятность преэклампсии^ Анализ фибронектина в асцитической
■ста используется для определения причин асцита злокачественных или
рвачоствеиных
нова методики
имунохимических реакциях белки в плазме человеческой крови формируются в
{МЫВ комплексы со специфическими антителами Это приводит к рассеиванию
Нящего через образец света Интенсивность рассеивания света зависит от
^(фации соответствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со
рртной заданной концентрацией
1КТИВЫ
■ставляемые материалы
всыворотка для человеческого фибронектина, код OUND
1яробирка с 2 мл реагента.
Всывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации
■СВ высоко очищенным человеческим фибронектином При помощи специальной
■уры из антисыворотки удаляются неустойчивые составляющие Большая часть
Врганизмов удаляется путем фильтрации и добавления азида натрия в качестве
рванта (< 1 г/л). После твердофазной иммуноадсорбции очищенная антисыворотка
|ряется и корректируется особым образом для достижения максимального
втствия требованиям систем BN* Титр антител определяется при помощи
Вьной иммунодиффузии и наносится на этикетки пробирок Титр отражает количество
Вн в мг, которые осядут в агарозном геле при добавлении 1 мг соответствующей
Вворотки
ртреждения и меры предосторожности
1ГЬко для in vitro диатостики.
■ержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
|ыхать и не допускать контакта с кожей или слизисть 1ми оболочками. Азид натрия
вя в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
юоласные соединения,
гговка реагентов
всыворотка готова к применению и может использоваться без дополнительной
тоеки
•ние и устойчивость
1чивость при температуре от +2 до +8 ’С:
годности указан на этикетке,
йивость после открытия
впи при температуре от +2 до +8 °С, если плотно закрь 1ть сразу после использования
(отвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами);
вмя хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
нение, однако, они не вызваны зафяэнением раствора микроорганизмами и не
ваются на его активности. В подобных случаях, антисыворотку необходимо
ьтровать перед использованием. Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с
ром пор около 0.45 мкм Не замораживайте реактивы Устойчивость в приборе
4 по 8 часов либо аналогичный период времени (максимум 40 часов);
ма BN* II
I устойчивости в приборе может быть увеличено применением антииспаритепьных
« BN* II (код OVLE) в соответствии с руководством;
ма BN ProSpec®'
I устойчивости в приборе - в соответствии с руководством
(одимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
ма BN*
ковый стандарт PY (челов.), код OUID
}лковый контроль PY (челов ), код OWSY
lep реакции, код OUMS
Завитель код OUMT
Актииспарительная пробка (доп.), код OVLE
1ные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системе BN*
)бы
дящими являются пробы человеческой плазмы, цитратной или EDTA плазмь! в
м виде (хранение не более 8 дней при температуре от +2 до +8°С). Образцы могут
гься до 1 года при температуре -20 *С, в случае, если они были заморожены в
ie 24 часов после сбора, при условии отсутствия повторной заморозки Липемические
мороженные пробы, мутнью после оттаивания, должны быть отцектрифугированы
1нут приблизительно на 15 ООО х г) до анализа Цитратная плазма в среднем
аляется на 17% при добавлении цитратного раствора. Гепаринизированная плазма
следования на фибронектин не подходит.
ОД И ка
»чания
эащайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
кций
используйте реагенты с истекшим сроком годности.
>ед использованием реагентов в системах BNW BN* 100. выдержите их при
гной температуре (от 15 до +25 “) Для систем BN* II или BN ProSpec® данный шаг
пропустить
кол испытания для систем BN*
колы испытаний приведены в руководстве и программном обеспечении прибора. Все
1ИЯ выполняются системой автоматически,
г референсной кривой
«нсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки. Расчет
юдится автоматически сериями, образуется раствор N Белкового стандарта PY с N
жителем Референсную кривую можно использовать для точности контролей.
иер, N/T Белковый контроль PY, остается в пределах соответствующего
ктельного интервала. Новая референсная кривая создается при каждой смене
I реактивов
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:20 при помощи N Разбавителя и
измеряются. Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследование
можно повторить с более высокой или более низкой степенью разбавления проб См
руководство по системе BN* для получения сведений о повторных измерениях с другими
степенями разбавления
Внутренний контроль качества
Анализ МЯ Белковый стандарт PY должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования флаконов с реагентом, а так же для
каждого измерения проб. Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как и
тестируемые образцы Заданное значение и доверительный интервал для контроля дань
соответствующей Таблице приписанных значений
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
По причинам технического характера и/или из-за старых образцов, резупьтать), полученн!
для контрольного образца, и результаты внутрилабораторных исследований могут
отличаться в зависимости от методики анализа Поэтому может возникнуть необходимое
произвести оценку этих результатов методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
Нижеследующий эталонный интервал подходит для проб цитратной плазмь! здоровых
Белок 2,5 - 97,5 Процентиль
Фибронектин 0 25 - 0 4 г/л
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте PY Стандартные диапазоны
измерений даны в руководстве по эксплуатации системы BN.
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Актисыворотка
Точность
Следующие коэффициенты вариации (CV) были получены с использованием N
Белок
Внутри анализа
(п=30) CV [%]
Между анализами
(п=10)
Ср значение (г/л) Ср. знач (г/л] CV [%]
Фибронектин 0,22 1,8 0,22 1,5
Сопоставление методов
Было проведено исследование 60 образцов плазмы с N Антисывороткой к человеческому
фибронектину на системе BN* (у) и радиальная иммунодиффузия (х) (NOR Patigen**)
Сопоставление результатов выявило следующие сведения-
Белок Количество
образцов
Линейная рефессия Коэффициент
корреляции
Фибронектин 46 y(BN*) = 0,96x(RID)+0,01 г/л 0,93
Примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собой
типичные результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для
человеческого фибронектина
Список литературы
1 Sandberg L, VanReken D, Waiwaiku К, el al Plasma fibronectin levels in acute and recoverii
malnourished children Clin Physiol Biochem 1985, 3: 257-64.
2. O'Brien WF The prediction of preeclampsia. Clin Obstet Gynecol 1992; 35; 351-64.
3. Colli A, Buccino G, Cocciolo M, et al. Diagnostic accuracy of fibronectin in the differential
diagnosis of ascites. Cancer 1986; 58 2489-93.
BN ProSpec зарегистрированная торговая марка Dade Behring Marburg GmbH в США,
Германии и других странах
* BN является торговой маркой Dade Behring Marburg GmbH в США
“ Partigen зарегистрированная торговая марка Dade Behring Marburg GmbH в Германии и
других странах
--- стр. 6 ---
нтисыворотка к белкам плазмы человека
пасть применения
{фгнная антисыворотка к белкам плазмы человека подходит для выявления
Ьтствующих белков в сыворотке и других жидкостях человеческого тела при помощи
рхимических методов.
шворотка к белку Бенса-Джонса {свободные к или А-цепи) выпадают только при
НИИ самого белка, т в. в присутствии свободных лямбда-цепей иммуноглобулина Они
■взывают наличие реакций с неповрежденным иммуноглобулином, так как данная
■пая сыворотка показывает наличие только тех антител, которые соответствуют
тым детерминантам антиген лямбда-цепей в неповрежденном иммуноглобулине
юпект и пояснения
пения в белковом составе плазмы (диспротеинемия) часто являются следствием
■еаний, частично из-за нарушения синтеза белка или его метаболизма, частично из-
очих нарушений.
ствениое определение белка в плазме позволяет выявить индикаторы, необходимые
Цатостики, а также дают информацию по протеканию болезни.
обное описание находится в использованной литературе (см. список литературь! - 1,
14).
юва методики
веление белков в плазме человеческой крови при помощи антисыворотки к белкам
в ы человека основано на специфической реакции между антигеном и
втствующим антителом, которые образуют нерастворимый иммунопреципитат,
есс протекает в жидкостях, преимущественно в гелевой среде, таких как агар или
вный гель.
ЙГТИВЫ
оставляемые материалы
ыворотка для человеческого С5 (кролик), код OSFZ
Ьворотка для человеческого СЗ Активатора (кролик), код OTNS
Ыворотка для человеческого C1q (кролик), код OTNT
ыворотка для человеческого lgD/5-цепь (кролик), код OTND
ыворотка к белку Бенса-Джонса/свободным к-цепям (коза), код OTNN
ьворотка к белку Бенса-Джонса/свободным А-цепям (коза), код OTNO
ному флакону с 1 мл каждого реагента
ю
|фичная иммунная сыворотка к белкам плазмы человека является жидкой животной
юткой и производится во время вакцинации различных животных человеческими
ми
омощи специальной процедуры из антисыворотки удаляются неустойчивые
вляющие. Неспецифичные антитела большей частью удаляются при помощи
«новых частиц, связанных носителем (твердо-фазная иммуноадсорбция),
ыворотка консервируется путем фильтрации и добавлением азида натрия (< 1 г/л),
ыворотка к белкам Бенса-Джонса/свободным к-цепям и белкам Бенса-
а/свободным 1-цепям также содержит тимерфонат* натрия в качестве консерванта,
зеном. моноспецифическая антисыворотка к белкам плазмы человека содержит
й набор антител (максимальный диапазон расхождения ± 20 %). Титр антител (Т)
ляется при помощи одинарной радиальной иммунодиффузии со стандартными
говительными процедурами от Dade Behring Marburg GmbH и напечатан на наклейках
рок Титр показывает сколько мг антигена осаждаются 1 мл каждой из антисывороток
озовом геле. Для антисыворотки к человеческому lgD/6-цвпи определение
жания титра в мг/мл невозможно, поэтому содержание дается в ед./мл (ед. =
ца, 1 ед. означает содержание соответствующего белка в 1 мл пула сыворотки
вого взрослого человека).
ипмеркуритио)-бензолсульфоновая ююлот, соль натрия
треждения и меры предосторожности
ько для 1П vitro диагностики.
[ержит азид натрия Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
апать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид натрия
1я в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
оопасные соединения.
(товка реактивов
ыворотка обычно используется в неразбавленном состоянии В случае очень низкой
ттрации белка в плазме, антисыворотку допускается разводить (исключая
1шение уровня содержания антител)
1ние и устойчивость
ыворотка к белкам плазмы человека может использоваться до даты, указанной на
лке. при условии хранения при температуре от +2 до +8“G. После первого
ьзования флакона, его необходимо плотно закрыть и хранить при температуре от +2
С
бы
следования используйте наиболее свежив (находящиеся на хранении максимум 8
|ри температуре от +2 до +8 °С) или замороженные пробы человеческой сыворотки
1аэмы, а также мочи, экстрактов или других используемых жидкостей из организма,
le пробы можно использовать как в разведенном, так и в концентрированном виде, в
1МОСТИ от требуемого результата. Высоко липемические или гемолитические пробы
усложнить процесс оценки. Присутствие больших концентраций моющего вещества
предотвратить образование иммунопреципитатов. Некоторые физиологические
■1Я должны быть усреднены в реакционной среде, например:
нь pH: приблизительно 6,5 - 9,0
жание соли: приблизительно 0,05 - 0,25 моль/л.
<ализе специальных искусственных белковых проб человеческой сыворотки,
ива и прочих секретов, в которых содержание белков значительно увеличено при
специальных условий обработки, невозможно полностью исключить
нительных реакций с подобными белками Подобные «нехарактерные» реакции
пяются очень слабо и не оказывают влияния на выполнения конкретного
ювания
одика
ая диффузия обеспечивает качественное выявление или идентификацию
}тных белков в сыворотке или плазме крови. В основном используется процедура
пони (Ouchterlony) в агаровом или агарозном геле®.
имуноэлектрофорезе анализируемый материал разделяется до иммунодиффузии в
>й среде посредством электрофореза® В более чувствительном двумерном
юэлектрофорезе Кларка и Фримана (Cfarke и Freeman) электроиммунодиффузия
зодится после отделения гелевой среды с антителами®.
3 нормальной сыворотки рекомендуется проводить параллельно с контролем при
•1НЫХ процедурах качественного выявления.
)K
Титр антител антисыворотки
мг/мл
4,0
ктиватор 0,6
0,75
800 ед/мл'
2. In: Ritzmann SE, Daniels JC, eds Serum Protein Abnormalities. Diagnostic and Clinical
Aspects. New York Alan R. Liss, inc., 1982.
3. In: Ritzmann SE, ed. Protein Abnormalities. New York: Alan R. Liss, Inc., 1982 (Vol. 1), 1982
(Vol 2), 1983 (Vol. 3).
4 In. Putnam FWed. The Plasma Proteins New York: Academic Press, 1975 (Vol. 1, Vol. 2),
1977 (Vol 3), 1984 (Vol. 4).
5. Schwick HG et al Qualitative Plasmaprotein-Bestimmung durch Immunprazipitation In:
Behringwerke AG, Frankfurt, ed Laboratonumsblatter, 1971 (Vol 3)
6 Clarke MHG et al. Qualitative Immunoelectrophoresis of human serum proteins. Clin Sa.
1968; 35, 403
етом смеси обычной сыворотки, 100 ед соответствуют содержанию белка в 100 мл
ой перемешанной человеческой сыворотки)
СОК литературы
'homas L, Hrsg. Labor und Diagnose Frankfurt/Main TH Books Verlagsgesellschaft mbH,
--- стр. 7 ---
N Латекс SAA
Область применения
!Ипкгы для tn vitro диагностики для количественного определения сывороточного
■поида А (SAA) в сыворотке человеческой крови и гепариниэированной плазме при
мощи мефелометрического имунноанализа на системах BN* II и BN* ProSpec®.
Ьнспект и пояснения
jtAявляется остро-фазным белком, который, в ответ на воспалительный, инфекционный, а
Ш1 и не инфекционный процесс, показывает сильное увеличение концентрации в течение
вшльхих часов Прирост может достигать до 1000 раз от исходной концентрации. SAA
ОЮгся к высокоплотным лилопротеинам (HDL) и может изменять их метаболизм во
|М 1В0Спаления Одним из самых важных аспектов SAA является то. что продукты
ЙНН8 могут откладываться в различных органах из-за фибрилл амилоида А (АА). что
1Впся серьезным осложнением при хронических воспалительных процессов
|ипя С-реактива протеина (CRP), выявление SAA полезно при диагностике
ельмых процессов, обеспечивая их активность, а также мониторинг за данными
и их лечение. Однако, анализ SAA более точен, по сравнению с CRP анализом,
овании пациентов с вирусными инфекциями, реакциями отторжения к пересадке
{особенно для пациентов с иммунодефицитом), а также для пациентов, проходящих
от муковисцидоза кортикоидами'^, В случае воспалительного артрита, SAA
т поведение, сходное с ходом протекания болезни^. Параллельное определение
и SAA позволяет повысить диагностическую чувствительность при выявлении
i * У пациентов с АА амилоидоэом протекание болезни может быть улучшено при
направленном на возращение уровня SAA к нормальному^
методики
полистирола, нагруженные антителами, характерными для человеческого SAA при
с пробами, содержащими SAA, афегируются При облучении светом агрегат
световой пучок Интенсивность рассеивания света зависит от концентрации
щего белка е пробе Оценка выполняется путем сравнения со стандартной
концентрацией.
ВЫ
«ые материалы
SAA, код OQMP
к Реагент, 3 пробирки по 2 мл в каждой
t Стандарт SY (чвлов ). 3 пробирки по 0.5 мл в каждой
^Контроль SY (челов ), 4 пробирки по 0,5 мл в каждой
^Дополнительный Реагент, 3 пробирки по 1,3 мл е каждой
I и стандартизация
к Реагент состоит из лиофилизированных частиц полистирола, нагруженных
I (овцы) к человеческому SAA.
к Стандарт SY {челов.) производится из сыворотки человеческой крови с повышенным
ем содержания SAA. Концентрация SAA в восстановленном стандарте указана на
к Контроль SY {челов.) произеодится из сыворотки человеческой крови с повышенным
ем содержания SAA. Концентрация SAA в восстановленном стандарте указана на
а по концентрациям N SAA Стандарта SY и N SAA Контроля SY выполнена в
с 1м Интернациональным Стандартом 1997 для сывороточного амилоида А
^Дополнительный Реагент состоит из буферного раствора глицина NaCi с
^пением пирролидона и растворителя
веиовленный N SAA Реагент Гентамицин 6,25 мг/л, амфотерцин 0.625 мг/л
■еиовленный N SAA Стандарт SY, восстановленный N SAA Контроль SY
B»N SAA Дополнительный Реагент, азид натрия < 1 г/л
■(преждения и меры предосторожности
>ько для in vitro диагностики.
яержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно
|ЫХ8ть и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия,
1ВЯ 8 контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
■оопасные соединения.
щдый образец донорской крови для производства N SAA Реагента, N SAA Стандарта
■ т .) и N SAA Контроля SY (челов.) проверяется на HBsAg, анти-HCV, анти-HIVI и
■MV2 методами, утвержденными Управлением по контролю за продуктами и
регвами (США) Только образцы с отрицательными результатами используются для
•одстеа
т менее, пока отсутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
108МИ (сыворотка и плазма), взятыми у человека, и продукцией, полученной из крови
ика. стоит обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для
М с биологически опасными веществами^
«говка реактивов
А Реагент; Растворите лиофипизированное содержимое пробирки 2 мл
плированной воды. Реагент готов к использованию через 15 минут после
мовления Перед первым использованием аккуратно перемешайте
^Стандарт SY (челов.) и N SAA Контроль SY (челов.): Растворите лиофипизированное
шо«|Юе пробирки 0.5 мл дистиллированной воды. Перед первым использованием
гно перемешайте Стандарт и контроль готовы к использованию через 60 минут после
•новления
^Дополнительный Реагент раствор готов к использованию
1мие и устойчивость
зние при температуре от +2 до +8 *С:
годности указан на наклейке
wwocTb после открытия:
ШИ (восстановленные N SAA Реагент, N SAA Стандарт SY, N SAA Контроль SY, а
N SAA Дополнительный Реагент), при условии хранения при температуре от *2 до +8°
«ко. необходимо плотно закрывать пробирку сразу после использования
иораживайте реактивы,
чивость в приборе:
нее пяти дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени
мание Устойчивость в приборе зависит от используемой системь! BN*, а также
вторных условий Для получения более подробной информации см руководство по
гатации систем BN* II и BN ProSpec®. Устойчивость в системе BN* ProSpec® N SAA
ОЛЯ SY указана в руководстве по эксплуатации системы
(одимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
ма BN* II или BN ProSpec®
5авитель, код OUMT
щее средство SCS, код OQUB
Антииспарительная пробка (доп ), код OVLE
«ые запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN* II и BN*
5ы
дящими являются пробы человеческой сыворотки и гепариниэированной плазмы,
аежие (хранение не более 8 дней при температуре от +2 до -«-8'’С). либо в
хкенном виде Образцы могут храниться при температуре ниже -25 "С до 3 месяцев,
ми были заморожены в течение 24 часов после забора, при условии отсутствия
1Н0Й заморозки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не содержать
w6o частиц или следов фибрина после центрифугирования Липемические или
женные пробы, мутные после оттаивания, должны быть очищены
фугированием (10 минут приблизительно на 15.000 х г) до анализа.
Методика
примечания
1. Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подрое
инструкций.
2. Не используйте реагенты с истекшим сроком годности.
3. Только компоненты (реагент, стандарт, контроль и дополнительный реагент) из набор
одинаковым номером партии могут использоваться совместно, не используйте компоне
с различными номерами партии.
4. Лиофилизированные реагенты не должны использоваться до полного восстановления
менее 15 минут для N SAA Реагента, и не менее 60 минут для N SAA Стандарта SY и N :
Контроля SY)
5. Для анализа SAA на системе BN* II необходимо использовать дополнительную ротор
кювету. Данный анализ можно проводить с N Высокоточным CRP и N Латекс Цистатином
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови и плазмы включен в руководство, так же кг
Программное обеспечение для соответствующего оборудования Все дейст
выполняются системой автоматически
Расчет референсной кривой
Рефервнсньге кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Рас
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N SAA Стандарта
Разбавителем Стандартные растворы должны бьиь использованы в течение получг
Приписанное значение дано во вложенной таблице Для ввода приписанных значени
систему BN ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (
OVLP) Референсмую кривую можно использовать в течение 1 недели и дольше, е
контролируется точность, например, N SAA Контроль SY остается в преде
соответствующего интервала доверия Новая референсная кривая создается при каж,
смене партии реактивов
Точнь 1й диапазон измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N £
Стандарта SH Стандартные значения указаны а соответствующем руководстве
эксплуатации системы BN*
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:400 с N Разбавителем. Раствс
должны быть исследованы в течение 2 часов
Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследование можно повторит
более высокой или более низкой степенью разбавления проб. Повторные исследовани
дальнейшим разбавлением проб описаны в руководстве по системам BN*.
Внутренний контроль качества
Анализ N SAA Контроля SY должен проводиться после каждого расчета референс!
кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для каждого иэмврег
проб Как и пробы пациентов, N SAA Контроль SY автоматически разводится в cooтнoшe^
1:400 с N Разбавителей и должен быть использован в течение 30 минут. Приписан!
значение N SAA Контроля SY напечатано на наклейке пробирке. Интервал доверия [
приписанных значений составляет ±20 %. Для ввода приписанных значений в систему
ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код OVLP) Данн
приписанные значения предназначены для использования в качестве контроля точное
анализа. При использовании в цепях контроля точности, пользователь должен ввее
конечную концентрацию и интервалы доверия во время предварительной настройки
Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала довер!
контрольный анализ необходимо повторить Если отклонение подтверждается повтори!
измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая Результаты пациента
должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции.
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анали;
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализе
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 миь
приблизительно 15 ООО х г) должны быть исключены из испьп'аний
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторнг
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбраннс
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку эт
результатов методом удельных заданных значений
Эталонный интервал
в популяции с нормальным уровнем CRP в сыворотке (95 процентиль = 5,0 мг/л, п = 483),!
процентиль для N Латекс SAA составил 6,4 мг/л
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный эталонный интервал,
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной групг
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувстэительность теста определяется по нижней границе эталонной кривой и поэто»
зависит от концентрации белка в N SAA Стандарте SY
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не выявлена.
Точность
На системах BN* были измерены три концентрации SAA (приблизительно 7 мг/л, 55 мг/л
192 мг/л) при помощи N Латекс SAA. Точность была вычислена при помощи дисперсионно
анализа (п = 40) в соответствии с рекомендациями NCCLS Guideline ЕР5-А® при этс
коэффициент вариации внутри анализа лежал в интервале от 4,3 до 6,2%, а CV меж;
анализами лежал в интервале от 2,8 до 4,7%. Общий CV лежал между 5,4 и 6,4%.
Примечание
Значения, ссыпающиеся на особые рабочие характеристики анализа, являютс
стандартными значениями и не должны приниматься за спецификации N Латекса SAA
Список литературы
1, Malle Е, De Beer FC Human serum amyloid A (SAA) protein: a prominent acute-phase reacta,
for clinical practice. Eur J Clin Invest 1996; 26; 427-35
2. Yamada T Serum Amyloid A (SAA): a concise review of biology, assay methods and clinic
usefulness Chn Chem Lab Med 1999: 37 381-8
3 Cunnane G, Grehan S, Geoghegan S, et al Serum Amyloid A in the assessment of ear
inflammatory arthritis J Rheumatol 2000, 27 58-63
4 Hogarth MB, Gallimore R, Savage P, et al. Acute phase proteins, C-reactive protein and serui
amyloid A protein, as prognostic markers in the elderly inpatient Age Ageing 1997, 26: 153-8.
5 Gillmore JD. Lovat L8. Persey MR. et al Amyloid load and clinical outcome In AA amyloidosis i
relation to circulating concentration of serum amyloid A protein. Lancet 2001, 358 24-9.
6. Poole S, Walker D, Gaines Das RE, et al. The first international standard for serum amyloid <
protein (SAA). Evaluation in an internartional collaborative study. J Immunol Methods 1998, 21^
1-10.
7. U.S. Department of Health and Human Services CDC, Biosafety In Microbiological am
Biomedical Laboratories, HHS Publication (CDC) 93-8395: 1999, Section II; 8-16
8 National Commitee for Clinical Laboratory Standards Evaluation of Precosion Performance о
Clinical Chemistry Devises; Approved Guideline NCCLS document EP5-A (ISBN 1-56238-368-X)
NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898, USA, 1999.
--- стр. 8 ---
Латекс IgE моно
ласть применения
внты для in vitfo диагностики для количественного определения IgE в сыворотке
веческой крови, гепариниэироеанной или EDTA плазме. при помощи
вяометрического имунноанализа на системах BN*
нспект и пояснения
этвечает за клиническую картину, наблюдаемую при аллергиях немедленного типа При
фшчесхих заболеваниях, таких как атопический дерматит или астма, концентрация IgE
воротке соответствует интенсивности воздействия аллергена и отражает остроту
томов
м образом определение уровня IgE может помочь при диагностировании аллергических
певаний' Измерение уровня IgE в сыворотки особенно важно в детстве в целях
печения превентивных мер в случав обнаружения симптомов аллергий
ничение повышенный уровень IgE может быть полезен при дифференцировании
•месхих и не атопических болезней Однако, полученные результаты должны всегда
матриваться с учетом результатов клинических и других лабораторных исследований,
сак низкий уровень IgE не всегда указывает на отсутствие аллергии, а повышенный
ень не всегда его подтверждает Для выявления аллергии могут потребоваться другие
иальные исследования
паразитических болезнях уровень IgE в сыворотки таюке заметно возрастает' В очень
их случаях концентрация IgE миепомы чрезмерно высока. При унаследованном
тодефиците, особенно клеточной системы, развившемся иммунодефиците, уровень
повышается, однако некоторые разновидности иммунодефицита ассоциированы с
тл не выявляемым уровнем IgE. Таким образом определение IgE важно для
реренциальной диагностики иммунодефицита'.
нова методики
it^bi полистирола, нагруженные антителами, характерными для человеческого IgE при
(ении с пробами, содержащими человеческий IgE, агрегируются. При облучении светом
■ат рассеивает световой пучок. Интенсивность рассеивания света зависит от
антрации соответствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со
»артной заданной концентрацией
1КТИВЫ
(оставляемые материалы
текс IgE ионо. код OQTG
робирки по 3 мл в каждой
гекс IgE моно Реагент состоит из суспензии частиц полистирола, нагруженных
клональными антителами к IgE (мышь) Консервант
гекс IgE моно Реагент Гентамицин сульфат 6,96 мг/л, амфотерцин 0,625 мг/л
(упреждения и меры предосторожности
}лько для in vitro диагностики
(ждый образец донорской крови для производства N Латекс lgG3 или lgG4
юверяется на HBsAg, анти-HCV, анти-HIVI и анти-Н1\/2 методами, утвержденными
•равлением по контролю за продуктами и лекарствами (США). Только образцы с
рицательными результатами используются для производства Тем не менее, пока
сутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
0лиэами(сыворотка и плазма), взятыми у человека, и продукцией, получемой из крови
лоеека, стоит обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для
|боты с биологически опасными веществами .
отовка реактивов
текс IgE монореагент поставляется готовым к использованию Раствор необходимо
атно перемешать перед использованием
ение и устойчивость
«чивость при от +2 до +8 *С
годности указан на наклейке
1чивость после открытия
ре недели, если плотно закрыть сразу после использования и хранить при
»ратуре от +2 до +8 *С.
мораживайте реактивы
живость в приборе.
мее пяти дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени,
ечание: Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN*, а также
>аторных условий. Для получения более подробной информации см. руководство по
уатации систем BN" II и BN ProSpec®
ходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
>ма BN'
жовый стандарт SL (челов). код OQIM
елкоеый контроль SUL (челов ), код 0Q1N
елкоеый контроль SL/M (челов ), код OQIO
елкоеый контроль SUH (челов.), код OQIP
|бавитвль. код ОиМТ
юлнительмый реагент L, код OQTD
Антиисларительная пробка (доп.), код OVLE
иные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*
)бЫ
Здящими являются пробы человеческой сыворотки либо свежие (хранение не более 7
при температуре от +2 до +8"С), либо в замороженном виде как образцы плазмы
иниэированной и EDTA плазма. Образцы могут храниться при температуре ниже -18
3 месяцев, если они были заморожены в течение 24 часов после забора, при условии
ггвия повторной заморозки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не
жать каких-либо частиц или следов фибрина после центрифугирования,
лические или замороженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть очищены
ифугированием (10 минут приблизительно на 15.000 х г) до анализа
ОД И ка
ечания
»ращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
укций,
используйте реагенты с истекшим сроком годности.
ред использованием реагентов в системах BN*A/BN* 100, выдержите их при
инатной температуре (от 15 до +25 *) При работе с системами BN* II и BN ProSpec®
обы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8® С, можно использовать сразу
системах BN* А и BN* 100 пробы должны анализироваться приблизительно при
ипературе окружающей среды (максимальное отклонение З'С), так как результаты
черений используются для создания референсной кривой
жол испытания для систем BN*
жол испытания для сыворотки крови и плазмы включен в руководство, так же как и
аммное обеспечение для соответствующего оборудования Все действия
1НЯЮТСЯ системой автоматически,
гг референсной кривой
ренсные кривые строятся при помощи мультточечной калибровки Расчет
водится автоматически сериями, образуется слабый раствор N Белкового стандарта
N Разбавителем Растворы должны быть использованы в течение 4 часов
ренсную кривую можно использовать в течение 4 недель и может использоваться
JB если контролируется точность, например, МЯ Белковый контроль SL/L, М и Н
1тся в пределах соответствующего интервала доверия Новая референсная кривая
ется при каждой смене партии реактивов
4Й диапазон измерений зависит от концентрации анапита в каждой партии N
вый стандарт SL. Стандартные значения указаны в соответствующем руководстве по
/атации системы BN*
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1.20 с N Разбавителем. Раство
должны быть исследованы в течение 4 часов Для результатов, находящихся вне диапазс
измерений, исследование можно повторить с более высокой степенью разбавления npi
Повторные исследования с дальнейшим разбавлением проб описаны в руководстве
системам BN*
Внутренний контроль качества
Анализ МЯ Белкового контроля SL/L, М, Н должен проводиться после каждого расч«
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же д
каждого измерения образцов. Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, ка
тестируемые образцы. Заданное значение и доверительнь 1й интервал для конгтроля дане
соответствующей Таблице приписанных значений
Если результат контрольнь 1х измерений лежит за пределами интервала довер!
контрольнь 1Й анализ необходимо повторить Если отклонение подтверждается повтори!
измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая Результаты пациента
должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции
Офаничения анализа
Влияние ревматоидных факторов (до 2400 МЕ/мл) подавляется использовак
Дополнительного Реагента L Однако, в некоторых случаях, высокий уровень воздейСТЕ
ревматоидных факторов может влиять на получаемые результаты Подобные образ
необходимо анализировать при помощи другого метода Мутные пробы и содержащиес!
них частицы могут повлиять на результаты анализа. Пробы, содержащие осадок, долж
быть центрифугированы перед анализом. Лилемические пробы, которые не очищаю-<
центрифугированием (10 минут приблизкттельно 15,000 х г) должны быть исключены
испытаний. В пробах с очень высоким уровнем IgE, например, определяемых г
паразитических болезнях или с IgE миеломами, не было обнаружено выделения антиге
до максимальной исследованной концентрации (ок. 40 000 МЕ/мл), измеренной п
степени разбавления 120 Несмотря на то, что у моноклонального иммуноглобули
эпитопная структура, отличающаяся от структуры поликлонального иммумоглобупи!
существует вероятность, что ниже данного уровня из образцом IgE миелом мож
получить достоверные результаты Это является следствием эффекта крюка при высо 11
дозировках Подобные образцы должны бьп-ь исследованы со степенью разбавлен
1 100 .
После измерения образцов с концентрацией IgE свыше 40 000 МЕ/мл на системах BN*
BN* 100 и BN* II, не рекомендуется сразу выполнять процедуру по определению IgE, i
как это может дать завь 1шенные результаты. В подобных случаях, тест следует повторит!
Образць!, взять!в у пациентов, могут содержать гетерофильные антитела, которые мО!
оказать влияние на иммунологический анализ и стать причиной завь!шеннь!х и
заниженнь!х результатов Данньы тест бь!л разработан с целью минимизировг
воздействие со сторонь! гетерофильнь!х антител Тем не менее, полное исключен
подобного влияния из проб всех пациентов не гарантируется. Необходимо обращатьс»
должной осторожностью с результатами анализа несоответствующими клиническ
картине и истории болезни пациента.
Из-за матричнь!х эффектов, отличающиеся реэультать! для контроля и лабораторн!
опытные результать! исследования проб могут означать их зависимость от вь!браннс
метода исследования Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку эт
результатов методом удельнь!х заданных значений
Эталонный интервал
у здоровых людей уровень IgE покаэь!вает широкий спектр распределения и не следу
правилам нормального распределения. Концентрация IgE в сь!ВОротке крови детей оче
сильно зависит от возраста Значения, олределяемь!е у взрослых наблюдаются у детей
10 лет Более высокие значения наблюдаются у детей 10-15 лет ■ ’ * Концентрацию око
100 МЕ/мл следует принимать за верхний предел доверительного интервала.
Референсмыв значения для IgE сыворотки МЕ/мл
Новорожденные <1,5
Дети до 1 года < 15
Дети (1 -5 лет) < 60
Дети (6 • 9 лет) < 90
Дети (10- 15 лет) < 200
Взрослые < 100
Данные значения бь!ли получень! при всестороннем анализе (448 детей, 200 взросль!х)
Европе^"*.
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственнь!й эталонный интервал,
учетом многих переменных, которью могут отличаться для каждой изученной групг
жителей
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувствительность теста определяется по нижней границе эталонной кривой и поэто!
зависит от концентрации белка в N Белковом Стандарте SL
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не вь!яелена
Точность
Измерения на точность бь!ли выполнены при помощи оценки в 3 уровней контрольнс
материала и 2 уровней пулов сь!ВОротки человека на консистенцию в соответствии
рекомендациями NCCLS ЕР5-А® Коэффициент вариации между анализами составил от 1
до 4,1%, в то время как для исследований внутри анализа он составил от 1,7 до 3,0%.
Сопоставление методов
Бь!л о Проведено исследование 70 проб сьюоротки от 14 до 855 МЕ/мл при помощи мето,
нефелометрического иммуноанализа и сравнемь! с результатами, полученнь!ми п|
помощи N Латекс IgE моно анализа. Коэффициент корреляции составил 1,0, значение
пересечения 6,1 МЕ/мл и уклон 1,0.
Примечание
Значения, ссь!лающиеся на особью рабочие характеристики анализа, являют,
стандартными значениями и не должны приниматься за спецификации N Латекса IgE мон
Список литературы
1. Winter WE, Hardt NS, Fuhrman S. Immunoglobulin E importance in parasitic infections a!
hypersensitivity responses
Arch Pathol Lab Med 2000; 124: 1382-5
2. U S. Department of Health and Human Services CDC, Biosafety in Microbiological and Biom&
cal Laboratones, HHS Publication (CDC) 93-8395, 1999; Section II, 8-16,
3 Dat! F, Ringel KP Reference values for serum IgE in healthy non-atopic children and adults.
Clin Chem 1982; 28: 1556 (Abstract).
4, Ringel KP, Dati F, Buchholz E. IgE-Normalwerte bei Kindem.
LaboratoriumsblBtter 1982; 32; 26-34.
5 National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of Precision Performance
Clinical Chemistry Dev!ces; Approved Guideline NCCLS document EP5-A (ISBN 1-56238-36
X). NCCLS, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898, USA, 1999
--- стр. 9 ---
N Латекс ASL
Збласть применения
(вличественное определение антител к стрегттолизину О (ASL) в человеческой плазме,
шаринизированной плазме и ЕОТА-плазме при помощи систем BN‘ и BN ProSpec®.
кмврения антител к стрептолизину О помогают при диагностике заболеваний,
мываемых стрегттококкоеыми бактериями, и предоставляет эпидемиологическую
Иформэцию по данным заболеваниям. Патогенные стрептококки обычно ассоциируются с
Нациями ероде импетиго, инфекциями мочевыводящих путей, ревматизм и
Малевания почек
Сонспект и пояснения
Ь*»унохимическое выявление определенных антител для метаболитов стрептококков
редоставляет ценную информацию по перенесенным стрептококковым инфекциям
Иаматиэм. скарлатина, тонэилит, гло-мерулонефрит/, и т.п.)'*^. Несмотря на то, что
1)гчаи ревматизма в некоторых регионах снизились, прирост легких или некпинических
цгчаев требует более подробных измерений при помощи серологических методов При
встировании антител к различным экзоэнзимам стрептококков и стрептолизину О.
•обходимо уделить внимание к ASL. как к чувствительному показателю, который в 60-
84 случаев повышен. Первую реакцию данного антитела можно заметить уже на вторую
т третью неделю после обострения с пиками через каждые 4-5 недель
)снова методики
ввокупность частиц полистирола, покрытых стрептолизином О, при смешении с пробами,
ферхащими человеческий антистрегттолизин О, афегируется При облучении саетом
iperar рассеивает световой пучок Интенсивность рассеивания света зависит от
квентрации соответствующего белка в пробе. Оценка выполняется путем сравнения со
Пндартной или известной концентрацией
■еактивы
редоставляемые материалы
Латекс ASL. код OPBU03, содержащий
я 2 мл. N Латекс ASL N Латекс ASL, код OPBU05, содержащий
я3.5мл, N Латекс ASL
к>став
Латекс ASL состоит из суспензии частиц полистирола, нафуженных стрептолизином О
аюервант
афотерицин 0,56 мг/л, гентамицин 5,63 мг/л
радупреждения и меры предосторожности
Только для in vitro диагностики
Содержит человеческий материал. Кахщый донор или донорный орган был
ютестирован и был получен отрицательный результат по анализу на наличие вируса
•«унодефицита (HIV) 1 и 2, вируса гепатита В (HBV) и вируса гепатита С (HCV) либо при
1М0ЩИ методов, соответствующих директиве по in vitro диагностике для Евросоюза, либо
ггодами, утвержденными Управлением по контролю за продуктами и лекарствами
ША) Так как ни один из известных тестов не может дать 100 % гарантии отсутствия
фекционных агентов, со всеми анализами, взятыми у человека, следует обращаться с
1ЛЖН0Й осторожностью
здготовка реагентов
Латекс ASL готов к применению и может использоваться без дополнительной
дготовки Перед первым использованием необходимо аккуратно перемешать
мнение и устойчивость
внить при от +2 до +8 *С Сро к годности указан на наклейке;
ггьре недели, если плотно закрыть сразу после использования и хранить при
мпературе от +2 до +8 *С Не замораживайте реактивы
тойчивость в приборе Не менее одной недели (по 8 часов в день) или сопоставимый
омежуток времени. Примечание Устойчивость е приборе зависит от используемой
стемы BN*. а также лабораторных условий Для получения более подробной
формации см руководство по эксплуатации систем BN’ II и BN ProSpec®
(Обходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
(стема BN*
Рввматолошческий стандарт SL, код OQKZ
Г Ревматологический контроль SL/1 и 2, код OQDB и OQDC
Цополнительный реагент/Осахщающий, код OUMU
Растворитель, код OUMT
Г И Актииспарительная пробка (доп.). код OVLE
сгулные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*.
робы
1ДХ0ДЯЩИМИ являются пробы человеческой плазы, гепаринизированной плазмы или
»ТА-плаэмы, либо саежие (хранение не более 8 дней при температуре от +2 до +8‘С).
бо в замороженном виде Образцы сыворотки и плазмы могут храниться до трех
сяцев при температуре -20 *С, в случав, если они были заморожены в течение 24 часов
еле сбора и при хранении не повторялось несколько циклов разморозки и
иораживания. Пробы сыворотки должны быть полностью свернувшимися и не
держать каких-либо частиц или следов фибрина после центрифутроаания
шемические или замороженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть
ищены центрифугированием (10 минут приблизительно на 15.000 х г) до анализа.
етодика
«мечания
1ращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
струкций
ютокол испытания для систем BN*
отокол испытания для сыворотки крови и плазмы включен е руководство, так же как и
офаммное обеспечение для соответствующего оборудования Все действия
полняются системой автоматически
счет эталонной кривой
ференсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
эиэводится автоматически сериями, образуется слабый раствор N Ревматологического
зндарта SL с N Разбавителем. Растворы должны быть использованы в течение 4 часов,
ференсную кривую можно использовать е течение 4 недель и может использоваться
пьше, если контролируется точность, например, N/T Ревматологический контроль SL/1 и
/2 остается в пределах соответствующего интервала доверия,
звая рефренсная кривая создается при каждой смене партии реактивов
следование проб, взятых у пациентов
1разцы автоматически разбавляются в соотношении 1:400 при помощи N Разбаеителя.
створы должны быть исследованы в течение 4 часов. Для результатов, находящихся
9 диапазона измерений, исследование можно повторить с более высокой или более
зкой степенью разбавления проб Повторные исследования с дальнейшим
збавлением проб описаны в руководстве по системам BN*
Внутренний контроль качества
Анализ N/T Ревматологического контроля SL/1 и SL/2 должен проводиться после кахщого
расчета референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же
для каждого измерения образцов сыворотки или плазмы. Контрольные пробы исследуются
и оцениваются так же, как и тестируемые образцы. Заданное значение и доверительный
интереал для контроля даны в соответствующей Таблице приписанных значений. Для
ввода приписанных значений е систему BN ProSpec® можно воспользоваться
информационным компакт-диском (код OVLP).
Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия,
контрольный анализ необходимо повторить. Если отклонение подтверхщается повторным
измерением, должна быть вычислена новая реферемсная кривая Результаты пациента не
должны бьпь оглашены, пока причина отклонений не устаноелена и не устранена.
Результаты
Оценка выполняется анализатором автоматически в МЕ/мл
Ограничения анализа
Концентрации билирубина до 600 мг/л и свободного гемоглобина до 10 г/л не оказывают
воздействия на измерения Воздействия со стороны широко раслространемных лекарств
не выялено Мутные пробы и содержащиеся е них частицы могут повлиять на результаты
анализа Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно 15 ООО х г) и пробы инактивированные нафвванием должны быть
исключены из испытаний Ошибочное повышение уровня ASL может наблюдаться е
образцах, взятых у пациентов с моноклональной гаммопатией (например,
макроглобулимаэмия Вальденштрома) Подобные образцы необходимо анализировать
при помощи другого метода
Компания Dade Behring провела тестирование на использование данных реагентов с
различными анализаторами а целях оптимизации производительности и соответствия
требованиям, предьявпяемых к продукции. Компания не поддерживает пользовательские
изменения, так как они могут повлиять на производительность системы и результаты
анализа За использование рекомендаций, отличающихся от приведенных здесь, или
реагентов, не входящих в комплект поставки Dade Behnng, вместо оригинальных
ответственность лохадтся на пользователя. Полученные результаты анализов всегда
должны интерпретироваться совместно с чией болезни, клинической картиной пациента, а
так же с результатами других медицинских обследований
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих
результатов методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
Содержание ASL зависит от возраста пациента®, геофафического положения и
частотности стрептококковых инфекций в данной области. При исследовании 458 доноров
крови из центральной Европы были получены значения до 408 МЕ/мл (95 процектиль) при
помощи N Латекс ASL.
Кроме того, кахщая лаборатория определяет свой собственный эталонный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей
Так как отдельно взятый результат не дает данных об изменении содержания ASL,
единственным возможным решением является повторение анализа через одну-две
недели
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность теста определяется по нижней фанице эталонной кривой и поэтому
зависит от концентрации веществ, определяемых при анализе в N Ревматологическом
стандарте SL Стандартные диапазоны измерений даны в руководстве по эксплуатаф 1и
системы BN
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не выявлена.
Точность
Следующие коэффициенты вариации (CV) были получены с использованием N Латекс
ASL на системе BN*.
Точность (П = 40)
Проба Ср. значение Внутри анализа Между Об1Щ1й
(МЕ/мл) CV (%) анализами CV (%)
N/T Ревматолог, конфоль SL1 135 1,4 1.9 2,3
NЯ Ревматолог контроль SL2 414 1,7 2,3 2,7
Пул Сыворотки 1 131 1,8 1.8 2.6
Пул Сыворотки 2 476 3,5 0,3 3,6
Пул Сыворотки 3 1198 2,5 1,8 3,0
Оценка результатов (10 раз по 4 измерения за каждый) была проведена при помощи
дисперсионного анализа.
Сопоставление методов
78 образцов сыворотки с содержанием ASL от 59,5 МЕ/мл до 1370 МЕ/мл были
проанализированы при помощи системы BN* и N Латекс ASL (жидк.) (у) и. параллельно, с
N Латекс ASL (лиофилизир.) (X). Сопоставление результатов выявило следующие
сведения: у = 1,07 х - 20 МЕ/мл, коэффициент корреляции г = 0,96.
Примечание
Значения, ссылающиеся на особые рабочие характеристики анализа, являются
стандартными значениями и не должны приниматься за спецификации N Латекса ASL
Список литературы
1. Hahn RG, Knox LM, Forman ТА Evaluation of poststreptococcal illness. Am Fam Physician
2005, 71 1949-54
2. Hedersledt B, Holm S. Wadstrom T Antibodies of the li-streptococcal infections Medical
Laoralory (ed Behringwerke AG, Marburg, Germany) 1979: 7 24-8
3. Dillon HC, Avery Reeves MS Strepiococcal immune responses in nephritis after skin
infections. Am J Med 1974, 56. 333-46.
4. U S. Department of Health and Human Services CDC, Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories, HHS Publication (CDC) 93-8395; 1999; Section II; 8-16.
5. Renneberg J, Sdderstrom M, Prellner K, et al. Age-related variations in anti-streptococcal
antibody levels. Eur J Clin MiCTObiol Infect Dis. 1989; 8: 792-5.
6. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Evaluation of Precision Performance of
Clinical Chemistry Devices, Approved Guideline. CLSI document EP5-A (ISBN 1-56238-368-X).
CLSI, 940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087-1898, USA, 1999.
--- стр. 10 ---
ia6op N Латекс СОТ
Область применения
ри in-vitro диагностике для количественного определения углеводо-дефицитного
шсферрина (СОТ) в сыворотке крови человека с помощью нефелометрического
■1«уноанализа на системах BN* II и BN ProSpec® для выявления хронически
ггущего потребления алкоголя,
Ьнспект и пояснения
шкым компонентом трансферрима сыворотки крови является гликопротеин с
пекулярной массой около 80 кД, содержащий две полисахаридных боковых цепи На
ркдой боковой цепи есть по 2 окончания сиаловой кислоты Однако, трансеферрин
воротки крови человека также может встречаться в различных изоформах с
еличной степенью гликолизации’.
1Трасиалоформа с двумя углеводными боковыми цепями на каждой с двумя
ончаниями сиаловой кислоты преобладает у 90% здоровых людей' Молекулы
«нсферрина только с одной боковой углеводной цепью (дисиалотранферрин) или
же без боковых цепей (асиалотрансферрин) встречаются в большем количестве у
здей, регулярно употребляющих алкоголь^. Эти и другие структурно измененные
оформы трансферрима вызываются чрезмерным потреблением алкоголя и более
вестно как СОТ (углеводо-дефицитный трамсферрим).
к правило, ежедневное употребление 50 - 60 г этилового спирта в течение двух
дель приводит к повышенному уровню содержания СОТ. Повышенный уровень СОТ
якет позднее нормализоваться в случае воздержания от употребления алкоголя от
ух до четырех недель, в зависимости от уровня С0+^.
ределение уровня СОТ позволяет упростить выявление хронической алкогольной
висимости у пациентов, осуществлять мониторинг изменений в потреблении
коголя и воздержании от дальнейшего потребления. Различные исследования
казали, что уровень СОТ является одним из явных признаков, указывающих на
одолжительное употребление алкоголя^’® ’® .
кке некоторые болезни, не вызываемые алкоголем, могут повышать уровень СОТ,
пример, хронический активный гепатит, билиарный цирроз печени, отказ в работе
чени и очень редкий синдром COG (углеводо-дефицитный гликопротеин)' ^
исчет процентного содержания СОТ в растворах СОТ и трансферрина позволяет
нимизировать влияние уровня содержания трансферрина, железа и дисфункции
чени от легких до форм средней тяжести на результат анализа СОТ Также точность
агностирования возможно увеличить используя комбинацию СОТ и y-GT (Г-
«омилтрансфераза)®
снова методики
>авнительный анализ
овень СОТ сравнивается с частицами полистирола, покрыть 1ми СОТ, на наличие
язей с моноклональными антителами к человеческому СОТ, которью также, в свою
вредь, привязываются к частицам полистирола. При наличии СОТ в пробе, агрегация
утствует или наблюдается незначительная агрегация частиц полистирола В случае
угствия СОТ в пробе частицы полистирола агрегируются. Чем выше концентрация
IT в образце, тем меньше рассеивается пучок света. Оценка выполняется путем
ввнения со стандартной заданной концентрацией.
^активы
«доставляемые материалы
бор N Л атекс СОТ. код OPCS
:0Т Реагент 1, три пробирки по 0.9 мл в каждой
:0Т Реагент 2, три пробирки по 0.9 мл в каждой
:0Т Дополнительный реагент 1, три пробирки по 2 мл в каждой
IDT Стандарт SL, три пробирки по 1 мл в каждой
:0Т Контроль SI./1, три пробирки по 1 мл в каждой
:0Т Контроль SL/2, три пробирки по 1 мл а каждой
ютав и стандартизация
:0Т Реагент 1 состоит из суспензии частиц полистирола, нагруженных углеводо-
1»ицитным трансферрином (<0,017 г/л).
ЖТ Реагент 2 состоит из суспензии частиц полистирола, нагруженных
жжлональными антителами анти-CDT (мышь) (<0,009 г/л).
ЮТ Дополнительный реагент состоит из буферного фосфатного физиологического
лвора с добавлением полиэтилен гликоль сорбит монолаурата (5 г/л) и EDTA {<0,2
ль/п).
ЮТ Стандарт SL (человеческий) состоит из матрицы стабилизированной сыворотки
ювеческой крови и углеводо-дефицитного трансферрина. Концентрация СОТ задана
юсительно очищенного СОТ. Приписанное значение дано во вложенной таблице.
ЮТ Контроль SL/1 и N СОТ Контроль SL/2 (человеческий) состоят из матрицы
|билизированной сыворотки человеческой крови и углеводо-дефицитного
«сферрина. Концентрация СОТ задана относительно N СОТ Стандарта SL.
невоенное значение и интервал доверия для N СОТ Контроль SL/1 и N СОТ
проль SL/2 приведены в таблице ниже. Она также содержит концентрацию
исферрина и процентное содержание СОТ для измерений с N СОТ Контролем SL/1
1/2. Калибровка концентрации трансферрима проведена с использованием N
ткового стандарта SL. Процентное содержание СОТ вычисляется из
гтветсеующих данных о концентрации СОТ и трансферрина.
•сервант
ЮТ Реагент 1 и N СОТ Реагент 2 Гемтамицин 6,25 мг/л, амфотерцин 0,625 мг/л
ЮТ Дополнительная присадка N СОТ Стандарт SL, N СОТ Контроль SL/1 и N СОТ
гроль SL/2
щ соды < 1 г\л.
едупреждения и меры предосторожности
Только для in vitro диагностики.
Содержит азид соды. Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. При
лизации через сливную систему, смыть большим количеством воды. Азид соды
упая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может
>азоеывать взрывоопасные соединения.
Каждый образец крови, предназначенный как для производства N СОТ Реагента 1 и
ЮТ Реагента 2, так и для N СОТ Контроля SL/1 и SL/2 был протестирован на
иген гепатита, анти-HCV, аити-HlVI и анти-Н1\/2. Только образцы с отрицательными
ультатами используются для производства. Тем не менее, пока отсутствие
будителей инфекции не будет подтверждено, со всеми анализами, взятыми у
ювека, стоит обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для
юты с биологически опасными веществами®,
дготовка реагентов
•тенты, стандарт и контроль готовы к использованию и не требуют предварительной
1Г0Т0ВКИ. Перед первым использованием необходимо аккуратно перемешать.
анение и устойчивость
щите реагенть! вдали от солнечного света!
}нить при от *2 до ^6 X :
ж годности указан на этикетке;
ойчивость после открытия.
• недели для всех реагентов, стандартов и контролей, если плотно закрыть сразу
ле использования и хранить при температуре от *2 до +8* С Не замораживайте
кстивы.
•бильность в системах BN* II и BN ProSpec®:
менее трех дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени
Примечание Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN*, а также
лабораторных условий. Для получения более подробной информации см руководство
по эксплуатации систем BN* II и BN ProSpec®. Устойчивость в системе BN* ProSpec® N
СОТ Контроля SL/1 и SL/2 указаны в руководстве по эксплуатации системы.
Необходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект
поставки
Система BN* II или BN ProSpec®
N Дополнительный реагент L, код OQTD
N Разбавитель, код OUMT
BN’ II Антииспарительная пробка (доп.), код OVLE
Дополнительно, для выявления трансферрина:
N Антисыворотка для человеческого трансферрина, код OSAX
N Белковый стандарт SL, код OQIM
N/T Белковый контроль SL/L, М, Н, коды OQIN, OQIO, OQIP (для подтверждения
точности обнаружения транферрина)
N Буфер реакции, код OUMS
Доступные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*
Пробы
Подходящими являются пробы человеческой сыворотки либо свежие (хранение не
более 7 дней при температуре от +2 до +8°С), либо в замороженном виде Образцы
могут храниться до трех месяцев при температуре -20 *С, в случае, если они были
заморожены в течение 24 часов после сбора и при хранении не повторялось несколько
циклов разморозки и замораживания Сыворотка должна быть полностью
свернувшейся и не содержать каких-либо частиц или следов фибрина после
центрифугирования. Липемические или замороженные пробы, мутные после
оттаивания, должны быть очищены центрифугированием (10 минут приблизительно на
15.000 X г) до анализа.
Методика
Примечания
1. Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
инструкций.
2. Реактивы и пробы, хранящиеся при температуре от +2 до +8 *С, могут быть сразу
использованы для анализа в системах BN* II и BN ProSpec®.
3. Чтобы получить процентное содержание СОТ в образце на системе BN* II или в BN
ProSpec®, помимо концентрации СОТ, необходимо указать концентрацию
трансферрина, что может быть реализовано при помощи анализа трансферрина на
системах BN*.
4 Ввод содержания трансферрина для N СОТ Контроля SL/1 и SL/2 упрощает
вычисление процентного содержания СОТ для индивидуальных контрольных
измерений Не подходит для контроля качества анализа трансферрина,
произведенного системами BN*.
Протокол испытания для систем BN*
протокол испытания для сыворотки крови включен в руководство, так же как и
программное обеспечение для соответствующего оборудования. Все действия
выполняются системой автоматически.
Расчет эталонной кривой
Рефереисные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N CDT Стандарта
SL с N Разбавителем Растворы должны быть использованы в течение 4 часов.
Приписанное значение дано во вложенной таблице. Для ввода приписанных значений
в систему BN ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код
OVLP). Референсная кривая может использоваться в течение 2 недель. Референсную
кривую можно использовать сверх указанного срока, если контролируется точность,
например, N СОТ Контроль уровня SL71 и SL/2 остаются в пределах соответствующего
интервала доверия. Новая референсная кривая создается при каждой смене партии
реактивов. Точный диапазон измерений зависит от концентрации протеина в каждой
партии N СОТ Стандарт SL. Стандартные диапазоны измерений даны в руководстве по
эксплуатации системы BN.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:5 с N Разбавителем. Растворы
должны бьпь исследованы в течение 4 часов. Ввод вручную коэффициента
разбавления проб, отличного от 1:5 недопустимо.
Внутренний контроль качества
Анализ N СОТ Контроля SL/1 и SL/2 должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для
каждого измерения образцов сыворотки или плазмы. Контрольные пробы исследуются
и оцениваются так же, как и тестируемые образцы. Приписанное значение и интервал
доверия указаны во вложенной таблице. Для ввода приписанных значений в систему
BN ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код OVLP).
Указанные приписанные значения предназначены для использования в лаборатории в
качестве контроля при оценке точности и референсных кривых. При использовании в
целях контроля точности, пользователь должен ввести конечную концентрацию и
интервалы доверия во время предварительной настройки. Если результат контрольных
измерений лежит за пределами интервала доверия, контрольный анализ необходимо
повторить Если отклонение подтверждается повторным измерением, должна быть
вычислена новая референсная кривая. Результаты пациента не должны быть
оглашень!, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Результаты
Оценка выполняется автоматически в мг/л или в любых единицах, определяемых
пользователем системы BN’ Также, вычисление процентного содержания СОТ было
встроено в программное обеспечение, поставляемое с системами BN* В случав
одновременного выявления СОТ и трансферрина из одного и того же образца, можно
получить данные по процентному содержанию СОТ.
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно на 15 ООО х г) должны быть исключены из испытаний. Образцы, взятые
у пациентов, могут содержать гетерофильные антитела, которые могут оказать
влияние на иммунологический анализ и стать причиной завышенных или заниженных
результатов. Данный тест был разработан с целью минимизировать воздействие со
стороны гетерофильных антител Тем не менее, полное исключение подобного
влияния из проб всех пациентов не гарантируется.
Компания Dade Behring провела тестирование на использование данных реагентов с
различными анализаторами в целях оптимизации производительности и соответствия
требованиям, предъявляемых к продукции Компания не поддерживает
пользовательские изменения, так как они могут повлиять на производительность
системы и результаты анализа. Пользователь по собственному усмотрению при
утверждении измерений может использовать данные инструкции, реагенть!, не
входящие в комплект поставки Dade Behring.
Полученные результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно с
историей болезни, клинической картиной пациента, а так же с результатами других
медицинских обследований.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку
этих результатов методом удельных заданных значений.
При исследовании 561 образцов сыворотки крови, взятых у здоровых взрослых людей
из центральной Европы, исключая результаты с повышенным уровнем потребления
--- стр. 11 ---
Антисыворотка для легких целей человеческого иммуноглобулина
)ласть применения
Г8НТ ДЛЯ In vitro диагностики для количественного определения связанных и свободных
ких цепей типов к и I в иммуноглобулине сыворотки крови человека и в моче с
менением системы BN*
>нспект и пояснения
цектрация легких цепей иммуноглобулина в сыворотке определяется концентрацией
одных молекул иммуноглобулина, как правило, концентрацией IgG, IgA и IgM.
•лонения от данного поведения наблюдаются в случае, если в сыворотке представлены
бедные легкие цепи или свободные тяжелые цепи. Помимо данных случаев,
ышенное или пониженное содержание иммуноглобулина с легкой цепью может быть
еано разрастанием (поликлональной или моноклональной природы) или уменьшением
ичества здорового иммуноглобулина. В то время, как поликлональный иммуноглобулин
азывает наличие легких цепей типа к и I с достаточно постоянным соотношением 2:1,
юклональный иммуноглобулин показывает наличие только одного вида цепей (к или I).
1ышенная эмиссия моноклонального иммуноглобулина или легких цепей свободного
■уноглобулина приводит к изменению соотношения легких цепей к/1 Если отношение к/1
юклонального гаммалатии
> время, как молекулы иммунглобулина не проходят цельный гломерулярный
».трационмый барьер, свободные цепи иммуноглобулина фильтруются через клубочки
«торно всасываются а трубочки Повышенная концентрация свободиь 1х легких цепей
1уноглобулина, например произведенные моноклональными клетками плазмы, может
вышать предел реадсорбции трубочек и привести выделению свободных легких цепей
>чу Обнаружение свободных легких целей иммуноглобулина в моче (белки Бенса-
1нса) является важным показателем наличия моноклональной гаммопатии и может
зльэоеаться как для диагностики, так и для наблюдения за протеканием болезни^ ^
;нова методики
: иммунохимических реакциях белки в сыворотке или моче человека формируются в
|унные комплексы со специфическими антителами. Это приводит к рассеиванию
юдящего через образец света. Интенсивность рассеивания света зависит от
^ентрации соответствующего белка а пробе Оценка выполняется путем сравнения со
адартной заданной концентрацией.
активы
или
доставляемые материалы
■писыворотка для легких цепей человеческого 1д, тип к, код OWHG
■гтисыворотка для легких цепей человеческого Ig, тип I, код OWHH
дному флакону с 2 мл каждого реагента,
тав
ттисывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации
WKOB высоко очищенным человеческим иммуноглобулином с L-цепями. При помощи
«иальной процедуры из антисыворотки удаляются неустойчивые составляющие,
ьшая часть микроорганизмов удаляется путем фильтрации и добавления азида натрия
честве консерванта (< 1 г/л). После твердофазной иммуносорбции очищенная
унная сыворотка проверяется и корректируется особым образом для достижения
жмального соответствия требованиям систем BN*
> антител (Т) определяется при помощи радиальной иммунодиффузии и наносится на
етки пробирок. Титр отражает количество антиген в мг, которые осядут в агарозном
' при добавлении 1 мг сосгаетствующей антисыворотки.
дупреждения и меры предосторожности
олько для ш vitro диатостики.
Держит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно
|дыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия
пая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
«оопасные соединения
готовка реагентов
гтисыворотка готова к применению и может использоваться без дополнительной
ОТОВКИ
пение и устойчивость
ойчивость при температуре о т +2 до +8 *С
{годности указам на этикетке;
ойчивость после откры тия
цели при температуре от +2 до +8 *С, если плотно закрыть сразу после использования
едотвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами);
ремя хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
гтнение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
ыааются на его активности. В подобных случаях, антисыворотку необходимо
«льтровать перед использованием. Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с
lepoM пор около 0,45 мкм Не замораживайте реактивы.
ойчивость в приборе:
ей по 8 часов либо аналогичный период времени (максимум 40 часов);
ема BN‘ II
1Я устойчивости в приборе может быть увеличено применением антииспарительных
«ж BN* II (код OVLE) в соответствии с руководством:
-eMa BN ProSpec®:
м устойчивости 8 приборе - в соответствии с руководством
бходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
■ема BN*
1ЛК0ВЫЙ стандарт SL (челоа ), код OOIM
Белковый контроль SUL, М и Н(челов ), код OQIN, OQIO и OQIP
Белковый контроль 1С(челов ), код OQLW
фер реакции, код OUMS
обавитель, код OUMT
II/Ытииспарительная пробка (доп.), код OVLE
упные запчасти и оборудование, описанные е руководстве по системе BN*
обы
исследования используйте наиболее сеежие (находящиеся на хранении максимум 6
I при температуре от +2 до +8 *С) или замороженные пробы человеческой сыворотки
5Х0ДИМ0 избегать повторной заморозки Сыворотка должна быть полностью
нувшейся и не содержать каких-либо частиц или следов фибрина после
рифугирования Липемические или замороженные пробы, мутные после оттаивания,
сны быть отцектрифугированы (10 минут приблизительно на 15 ООО х г) до анализа,
кие произвольные или взятые по графику образцы мочи подходят для тестирования
ю цепей иммуноглобулина. Образцы мочи не должны быть заморожены Каждая проба
I должна быть центрифугирована перед анализом
тодика
мечания
бращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
рукций.
е используйте реагенты с истекшим сроком годности.
еред использованием реагентов в системах 8N*A/BN* 100, выдержите их при
итной температуре (от 15 до +25 *С) Для систем BN* II или BN ProSpec® данный шаг
ю пропустить
гокол испытания для систем BN*
хжолы испытаний приведены в руководстве и программном обеспечении прибора. Все
твия выполняются системой автоматически.
»ет референсной кривой
вренсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N Ревматологически
стандарт SL с N Разбавителем. Референсную кривую можно использовать для точностк
контролей, например, N/T Белковый контроль SL/L, М и Н или N/T Белковый контроль L(
остаться в пределах соответствующего доверительного интервала Новая референсная
кривая создается при каждой смене партии реактивов.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы сыворотки автоматически разбавляются в соотношении 1 20 при помощи N
Разбавителя и измеряются. Для результатов, находящихся вне диапазона измерений,
исследование можно повторить с более высокой или более низкой степенью разбавлен!
проб. Легкие цепи иммуноглобулина в пробах мочи измеряются без разбавления при
помощи специальных протоколов. Для результатов, находящихся вне диапазона
измерений, исследование можно повторить с более высокой степенью разбавления про
См руководство по системе BN* для получения сведений о повторных измерениях с
другими степенями разбавления.
Внутренний контроль качества
Анализ N/T Белкового контроля SL/L. М, Н должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для
каждого измерения образцов Для определения уровня содержания легких цепей
иммуноглобулина в образцах мочи, необходимо использовать МЯ Белковый контроль L'
Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как и тестируемые образцы.
Заданное значение и доверительный интервал для контроля даны в соответствующей
Таблице приписанных значений
Результаты
Резупьтать! анализируются автоматически при помощи логит-лог функции. Также
программное обеспечение систем BN* позволяет рассчитывать частное кЛ
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
Антисыворотка для легких цепей иммуноглобулина реагирует как со связанными, так и с
свободными легкими цепями. Поэтому, при исследовании образцов необходимо
использовать соответствующие методы (САР электрофорез, иммунофиксацию,
определение иммуноглобулина), чтобы исключить отсутствие значительного количества
связанных L-цепей перед принятием результата анализа как свидетельства о наличии
свободнь 1х L-цепей (белки Бенса-Джонса). Нефелометрический анализ человеческого
легких цепей иммуноглобулина, типов к и I, не может заменить электрофореза или
электрофореза с иммунофиксацией при диагностике моноклональной гаммапатии При
подсчете свободных легких цепей иммуноглобулина в образцах мочи, необходимо прин»
во внимание, что антигены, содержащиеся в них, могу иметь эпитопную структуру,
отличную от поликлональной в связанных легких цепях иммуноглобулина в N Белковых
стандартах Поэтому результаты исследований, полученные при различном разбавлени
проб, могут различаться. Получаемая концентрация должна использоваться только в
качестве приблизительных значения для определенного пациента® Одновременное
наличие двух моноклональных иммуноглобулинов с различным типом легких цепей могу
обеспечить попадание частного к/1 в доверительный интервал. Результаты должны
интерпретироваться совместно с клинической картиной пациента и другими
лабораторными данными. Образцы мочи с чрезмерно высокой концентрацией легких це
иммуноглобулина могут выдавать чрезмерно низкий результат измерения в подобном
случае, в соответствии с клиническими и лабораторными данными, рекомендуется
провести повторный анализ с большей степенью разбавления. Необходимо выполнить
проверку на пригодность результатов измерений легких цепей иммуноглобулина в моче®
По причинам технического характера и/или из-за старых образцов, результаты, получен!
для контрольного образца, и результаты внутрилабораторных исследований могут
отличаться в зависимости от методики анализа Поэтому может возникнуть необходимое
произвести оценку этих результатов методом удельных заданных величин
Эталонный интервал
Нижеследующий эталонный интервал подходит для проб сыворотки здоровых взрослых
людей
Белок 2,5 - 97 Процентиль
Ig/L цепь, тип к'
Ig/L цепь, тип Г
Частное к/1
1,7 -3 ,7 г/л
0,9-2,1 г/л
1,35-2,65 г/л
• Доверительные интервалы для легких цепей 1д, типов kui.e моче были пересчитан
При исследовании мочи, верхние пределы доверительного диапазона выделения
иммуноглобулина/1-цепи расположены ниже диапазона обнаружения методом
нефелометрического иммуноаналаза Доверительный интервал для частного кЛ мочи
составляет от 0,75 до 4,5.
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал,
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте SL. Стандартные диапазоны
измерений даны в руководстве по эксплуатации системы 6N.
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Антисыворотка к человеческому
иммуноглобулину/1-цепи, типов к и I Обе антисыворотки реагируют как со связанными, т
и со свободными 1 ч4епями соответствующего типа
Точность
При исследовании N Антисыворотки к человеческому иммуноглобулину/1-цвпи, типов к v
на системе BN*. были получены следующие коэффициенты вариации (CV):
Белок Внутри анализа Между анализами
(п=30)
Ср значение Гг/п)
CV[%1 (л=10)
Ср значение [г/л1
CV [%]
Ig/L цепь, тип к 2,80 2,0 2,73 3,3
tq/L цепь, тип 1 1,62 1,9 1,52 2,9
Сопоставление методов
Было проведено исследование 50 образцов сыворотки с N Антисывороткой к
человеческому иммуноглобулинуЛ.-цепи, типов к и I на системе BN* (у) и радиальная
иммунодиффузия (ж) (M-Partigen** lg/L-цепь, типов к и I) Сопоставление результатов
выявило следующие сведения.
Белок Линейная рефессия Коэффициент
корреляции
Ig/L цепь, тип к y(BN*) = 0,90x(RID) + 0,14r/n 0,97
Iq/L цепь, тип 1 у (BN*) = 0,90 X (R ID )+0,09 г/л 0,98
примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собо
типичные результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для легких
цепей человеческого иммуноглобулина, типов к и I.
--- стр. 12 ---
N Латекс Lp(a) Реагент
Область применения
'Патенты для in vitro диагностики для количественного определения липопротеина (а)
|р(а)] в сыворотке человеческой крови и гепаринизированной плазме при помощи
|^^лометрического имунноанапиэа на системах BN* Измерение уровня Lp(a] помогает
•мвлять риск сердечно-сосудистых заболеваний у различных групп населений при
Ппользоеании совместно с клинической оценкой.
Конспект и пояснения
Ма) состоит из двух компонентов липопротеина низкой плотности (LDL) и гликопротеина
^ТОлипопротеина [Аро(а)] связанных дисульфидными мостиками. Концентрация Lp(a) е
Ш т индивидуальна, так как aaancvTT от генетических факторов; вариационный интервал
► иаселения достаточно велик'. Повышенная концентрация Lp(a) является индикатором
|п а коронарной болезни сердца (CHD) ® Определение уровня Lp(a) может
■поставить необходимую информацию по пациентам, в чей семье наблюдались
1волввания CHD или уже болеющим
Основа методики
Ъстицы полистирола, нагруженные антителами, характерными для человеческого Lp(a)
pi смешении с пробами, содержащими Lp(a). агглютируют При облучении светом афегат
рвсаивает световой пучок Интенсивность рассеивания света зависит от концентрации
Ра) в пробе. Оценка выполняется путем сравнения со стандартной заданной
|И<»<трацивй
^активы
Омоставляемые материалы
|Латвкс Lp(a) Реагент, код OQHL
ргфобирки по 2 мл в каждой
Йьтекс Lp(a) Реагент состоит из лиофилиэированных частиц полистирола, нагруженных
■вмталами (кроликов) Lp(a) с добавлением у-глобулина
Ьсарвант
Ifleraxc Lp(a) Реагент после восстановления, азид натрия < 1 г/л
^пулраждения и меры предосторожности
I Только для in vitro диагностики
(Содержит азид натрия Рекомендуется работать с веществом аккуратно
кадыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия.
Пупая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
(ршоопасные соединения
(Каждый образец донорской крови для производства N Латекс Lp(a) Реагента
кпряется на HBsAg, анти-HCV, анти-HIVI и aHTH-HIV2 методами, утвержденными
|равлением по контролю за продуктами и лекарствами (США) Только образцы с
^радетельными результатами используются для производства. Тем не менее, пока
Вутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
|пиэами(сыворотка и плазма), взятыми у человека, и продукцией, полученой из крови
роеека. стоит обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для
Йоты с биологически опасными веществами^.
|рготовка реактивов
Швтекс Lp(a) Реагент смешайте лиофилиэированное содержимое пробирки с 2 мл
1Гиллированной воды и оставьте на 30 минут перед использованием Перед первым
рюльэованием необходимо аккуратно перемешать.
^■«ение и устойчивость
■рмчивость при температуре от *2 до +8 °С
рвк годности указан на наклейке
Ирнчивость после открытия
пдвли (восстановленный N Латекс Lp(a) Реагент), если плотно закрыть сразу после
■ользования и хранить при температуре от +2 до +8* С.
I вмораживайте реактивы
арйчивость в приборе
вменее пяти дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени,
рямчание: Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN*. а также
Йорэторных условий Для получения более подробной информации см руководство по
■«луатации систем BN* II и BN ProSpec®
вабходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
втмаВМ*
1р(8) стандарт SY (челов.), код OQCV
1ф(8) Контроль SY (челов ), код OQCW
каэбавитель, код OUMT
ГМ Антииспарительмая пробка (дол ), код OVLE
Вгупные запчасти и оборудование описанные в руководстве по системам 8N*
входящими являются пробы человеческой сыворотки и гепаринизированной плазмы,
во свежие (хранение не более 7 дней при температуре от *2 до +8°С), либо в
вюроженном виде Образцы могут храниться до 1 месяца при температуре -20 ‘С е
foe. если они были заморожены в течение 24 часов после сбора, при условии
В)тствия повторной заморозки Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не
р р ка ть каких-либо частиц или следов фибрина после центрифугирования
вцайствие д р уги х вещ еств
мень концентрации следующих веществ не оказывает влияния на исследования N
ш с Lp(a): триглицерид до 11,6 г/л, свободный гемоглобин до 10 г/л, билирубин до 600
fti Не обнаружено взаимодействия с препаратами Аспирин®, (3-эстрадиолом (эстроген),
ауаюм. правастатином или симвастатином. Высоко липемические или замороженные
0^ . мутные после оттаивания, должны быть отцентрифугированы (10 минут
вблиэитвльно на 15.000 х г) до анализа
1етодика
миечания
Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
ррукций
Ив используйте реагенть! с истекшим сроком годности
]Ьюфилизированные реагенты запрещается использовать до полного восстановления
1 менее 30 минут после добавления дистиллированной воды).
Перед использованием реагентов в системах BN*A/BN* 100, выдержите их при
■вшой температуре (от 15 до +25 •С). При работе с системами 8N* II и BN ProSpec®
вбы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8° С. можно использовать сразу.
■ системах BN* А и BN* 100 пробы должны анализироваться приблизительно при
■вратуре окружающей среды (максимальное отклонение 2”С), так как результать!
ирений используются для создания референсной кривой
■гмол испытания для систем BN*
0ПЖОП испытания для сыворотки крови и плазмы включен е руководство, так же как и
огреммное обеспечение для соответствующего оборудования Все действия
полняются системой автоматически,
счет референсной кривой
ференсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
■вводится автоматически сериями, образуется раствор N Lp(a) Стандарта SY с N
Ййвителем. Растворы должны быть использованы в течение 2 часов. Референсную
■ую можно использовать в течение 2 недели и может использоваться дольше, если
аролируется точность, например, N Lp(a) Контроль SY остается в пределах
тетствующего интервала доверия Новая референсная кривая создается при каждой
смене партии реактивов Точный диапазон измерений зависит от концентрации npOTei
каждой партии N Lp(a) Стандарта SY Стандартные значения указаны в «Особых рабо
характеристиках»
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1 400 с N Разбавителем Раств'
должны быть исследованы в течение 2 часов Для результатов, находящихся вне
диапазона измерений, исследование можно повторить с более высокой или более низ
степенью разбавления проб Повторные исследования с дальнейшим разбавлением г
описаны е руководстве по системам 6N*.
Внутренний контроль качества
Анализ N Lp(a) Контроля SY должен проводиться после каждого расчета референсно!;
кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для каждого иэмере
проб Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как и тестируемые обра
Приписанное значение и доверительный интервал указаны на этикетке. Для
удовлетворения федеральным, областным и муниципальным требованиям, возможно
потребуется использовать дополнительные материалы для контроля качества. Если
результат контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия, контрольн
анализ необходимо повторить Если отклонение подтверждается повторным иэмеренк
должна быть вычислена новая референсная кривая. Результаты пациента не должны
оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции.
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием ^ 0 минут
приблизительно 15 ООО х г) должны быть исключены из испытаний.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранногс
метода исследования Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку а
результатов методом удельных заданных значений.
N Латекс Lp(a) не был исследован с парами образцов, подобранными по возрасту, в
популяции болезни При оценке уровня Lp(a) как фактора риска, пациенты не должны
болеть острыми воспалительными заболеваниями, так как острая фаза может привест
повышению концентрации Lp(a)^
Эталонный интервал
Концентрация Lp{a) в сыворотке здоровых людей как правило имеет ассиметричное
распределение и может превышать 1 г/л, а также могут различаться в зависимости от
расовой принадлежности. Доверительные интервалы для Lp(a) были рассчитаны по
анализам сыворотки здоровых доноров крови. Полученные результаты приведены в
аблице ниже
___________________________________________________________________________
Концентрация Lp(a) (г/л)
Популяция И того М уж чины Ж енщ ины
п 25 -75% 5-95% п 25 -75% 5-95% п 25 -75% 5-95
:вропеоиды В2в 0.04-0.30 <0,02-0,72 331 0,05-0,32 <0,02-0,54 297 0.04-0.24 <0,02-(
|\фро.
американцы
142 0.15-0.51 0.04-1,09 78 0.04-1.09 0,04-1,14 64 0.17-0,50 0,02-1
Патино-
американцы
39 0.04-0.24 0.02-0.53 18 0,02-0,53 0,02-0,53 21 0,03-0,23 0.02-0
Данные значения носят справочный характер. Каждая лаборатория определяет свой
собственный эталонный интервал, с учетом многих переменных, которые могут отлича
для каждой изученной группы жителей. Концентрация Lp(a) в 0,3 г/л, соответствующая
процентилю среди мужчин европеоидной расы5, часто используется как
дифференцированный уровень кардиального риска.
Особые рабочие характеристики
Рабочие характеристики для N Латекса Lp(a) были определены с использованием chcti
BN* А, BN* 100, BN* II и BN ProSpec®.
Диапазон измерений
Диапазон измерений для N Латекс Lp(a) составляет от 0.1 до 1.6 г/л для раствора 1 4С
Точный диапазон измерений зависит от концентрации аналита в стандарте и может
отличаться в различных партиях
Чувствительность
Аналитическая чувствительность для исследования составляет 0,002 г/л. Аналитическг
чувствительность определена по нижнему измеряемому уровню аналита, отличимый а
нуля. Значение вычисляется по 2 стандартным отклонениям выше среднего сигнала пр
копиях N Раэбааителя.
Специфичность
Не выявлено взаимодействия между N Латекс Lp(a) и аполипопротеином В (< 1%).
Перекрестная реакция с плазминогеном составляет <5%. Гетерогенность порядка Аро(.
оказывает незначительное влияние на извлечение Lp(a) из N Латекс Lp(a)®.
Точность
Точность внутри анализов была определена оценкой N Lp(a) Контроля SY и 6 образов
Внутри анализа (п=20)
N Lp(a)
Контроль
Образец
пациента 1
Образец
пациента 2
Образец
пациента 3
NLp(8)
Контроль
Пул 1 Пул 2 П)
вреднее
жачение (г/л)
0,43 0,29 0,61 1.77 0.40 0,29 0,57 1,
5D (г/л) 0,03 0,01 0,02 0,04 0,01 0,01 0,01 0,
:v (%) 4.1 2,1 2.4 2,1 2,6 1,8 2,1 2
Точность между анализами была определена оценкой N Lp(a) Контроля SY и 5 образов
М еж ду анализам и (п=10!
N Lp(a)
Контроль
Образец
пациента 1
Образец
пациента 2
Образец
пациента 3
N Lp{8)
Контроль
Образец
пациента 4
Обрг
пацие
::реднее
жаченне (г/п)
0,43 0.28 0.59 1,75 0,43 0.17 0.{
5D {г/л| 0,01 0.06 0,01 0.02 0.02 0,01 о.с
:v(%) 3.1 3.5 3,5 2.8 5 3 4.4 4,.
Сопоставление методов
Было проведено исследование 86 проб сыворотки с от 0,02 до 1,31 г/л при помощи N
Латекс Lp(a). Для сравнения, эти пробы были также исследованы методом
нефелометрического иммуноанапиза, представленным на рынке. Коэффициент
корреляции составил 0,96. анализ рефессии по методу Баблока (Bablok) показал эначе»
у-пересечения -0.005 г/л и уклон 0,92
Примечание
Значения, ссылающиеся на особые рабочие характеристики анализа, являются
стандартнь 1ми значениями и не должны приниматься за спецификации N Латекса Lp(a)
Реагента
--- стр. 13 ---
I Антисыворотка для человеческого IgG подклассов 1 - 4
бласть применения
III vitro диатостики и количественного определения содержания IgG подклассов 1 - 4 в
■ротке человеческой крови при помощи системы BN* 100.
|нспект и пояснения
^антитела человека состоят из четырех подклассов lgG1, tgG2, lgG3 и lgG4,
■ммические свойства подклассов IgG уже были описаны подробно' ” . Структурные
1МЧИЯ между IgG подклассами заключены в различиях биологически важных функций,
■ как распознавание антигена, активация комплемента и связывание рецепторов
ночной поверхности
■гм исследования показали, что отклонения от доверительного интервала в уровнях
|в сыворотке могут указывать на различные состояния болезни^. Пониженная
е
грация lgG1 чаще является следствием общего иммунодефицита, нежели дефицита
пенного подкласса Дефицит исключительно lgG2 проявляется при
Нщивирующих вирусных и бактериальных инфекциях и указывает на слабую борьбу
■■мой системы Низкий уровень lgG2 был обнаружен в сыворотке пациентов с
Ьгаваниями верхних дыхательных путей и бронхо-легочными заболеваниями^ Низкий
■ень и 1gGl. и lgG2 был обнаружен при нефротическом синдроме, и особенно ярко
при хроническом нефрите . Дефицит lgG3 проявляется при вирусных
Ьлеваниях мочевыводящей системы . У пациентов с хроническими бронхо-легочными
рпеваниями и бронхоэктаэией, очень низкий уровень lgG4 в сыворотке кроеи"
■нения 8 уровнях IgG подклассов также наблюдались у пациентов с аутоиммунными
|влеваниями. неврологическими симптомами и ВИЧ инфекциями^
№ова методики
киммунохимических реакциях белки в сь1Воротке человеческой крови формируются в
■жью комплексы со специфическими антителами, которые рассеивают проходящий
■8 образец свет Интенсивность рассеивания света зависит от концентрации
■ветствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со стандартной
|1нной концентрацией
^активы
или
или
или
■поставляемые материалы
Ьггисыворотка для человеческого IgG I, код OQGA
(итисыворотка для человеческого lgG2, код OQGB
Ытжьгворотка для человеческого lgG3, код OQGC
■гисыворотка для человеческого lgG4, код OQGD
■ному флакону с 1,5 мл каждого реагента
стае
■сывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации овец
■со очищенными человеческими подклассами IgG. При помощи специальной
цедуры из антисыворотки удаляются неустойчивые составляющие Большая часть
фоорганизмов удаляется путем фильтрации и добавления азида натрия в качестве
серванта (< 1 г/л). Антисыаоротка, очищенная при помощи иммуноадсорбции,
■еряется и корректируется особым образом для достижения максимального
светствия требованиям систем BN* Концентрация белка в N Антисыворотке указана на
■дупреждения и меры предосторожности
Только для in vitro диагностики.
Содержит азид натрия Рекомендуется работать с веществом аккуратно
Не вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия
|упая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
мвоопасные соединения
■готовка реактивов
1нтасыеоротка готова к использованию и не требует дополнительной подготовки
мение и устойчивость
■нить при температуре от +2 до +8 *С. срок годности указан на этикетке,
айчивость поспе_открывания.
■ели при температуре от +2 до +8 'С, если плотно закрыть сразу после использования
радотвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами),
время хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
нутнение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
вываются на его активности. В этом случае, антисыворотку необходимо очистить
4Трифугированием (10 минут приблизительно на 15 ООО х г) или профильтровать до
■лиза Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с размером пор около 0,45 мкм
{рйчивость в приборе
Ытисыворотка к человеческому IgGI и lgG2 3 дня по 8 часов либо аналогичный период
змени (максимум 24 часа);
Антисыворотку к человеческому lgG3 и lgG4 необходимо хранить при температуре от *2
48*С и убирать сразу после использования
обходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
стема BN* 100
зелкоеый стандарт SL (челов ). код OQIM
Г Белковый контроль SUI. М и Н(чвлов), код OQIN, ООЮ и OQIP
^фер реакции, код OUMS
’азбавитепь. код OUMT
]ополнительныйреагент/Осаждающий. код OUMU
ступные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN* 100.
робы
я исследования используйте наиболее саежие (находящиеся на хранении максимум 8
9й при температуре от +2 до +8 *С) или замороженные пробы человеческой сыворотки,
бегайте повторной заморозки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не
держать каких-либо частиц или следов фибрина после центрифугирования
пемические или замороженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть
4внтрифугированы (10 минут приблизительно на 15 ООО х г) перед исследованием.
етодика
ммечания
Обращайтесь к соответствующему руководству по системе BN* 100 для подробных
Сфукций.
Не используйте реагенты с истекшим сроком годности
Перед использованием реагентов в системах BN* 100, выдержите их при комнатной
япературе (от 15 до +25 *С)
ютокол испытания для систем BN*
отоколы испытаний включены в руководство, так же как и программное обеспечение
етем BN* 100 Все действия выполняются системой автоматически
счетреференсной кривой
ференсные кривые строятся при мультиточечной калибровке Расчет производится
тематически серийными разведениями N Белкового стандарта SL с N Разбавителем,
ференсную кривую можно использовать для точности коктролей, например, N/T
лковый контроль SUL, М и Н, остается в пределах соответствующего доверительного
тервала. Новая референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов или
и использовании нового буфера реакций.
«ледование проб, взятых у пациентов
юбы автоматически разбавляются 1.100 (IgGI) или 1 ; 20 (lgG2, lgG3 и lgG4) с N
вбавителем и измеряются. Для результатов, находящихся вне диапазона измерений,
следование можно повторить с более высокой или более низкой степенью разбавления
об. Повторные исследования с дальнейшим разбавлением проб описаны в руководстве
системам BN' 100.
гутренний контроль качества
Т Белковый контроль SL/L, М и Н должен проверяться после каждого расчета
ференсиой кривой, после первого использования флакона с реагентом, а так же при
ИДОЙ новой серии образцов Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как
гесгируемь1е образцы
Заданное значение и доверительный интервал для контроля даны в соответствующей
Таблице прописанных значений Если результат контрольных измерений лежит за
пределами доверительного интервала, контрольный анализ необходимо повторить. Есл
отклонение подтверждается повторным измерением, должна быть вычислена новая
эталонная кривая Результанты пациента не должны бьггь оглашены, пока причина
отклонений не установлена и не устранена.
Заводские установки программного обеспечения системы BN* гарантируют идентификас
проб, реагирующих аномально Причинами могут быть мутность проб или чрезмерно
высокая скорость их реакции (например, наличие парапротеина).
Для каждого исследования сумма подклассов 1 - 4 должна быть вычислена и сравнена
общим IgG. Сумма подклассов 1 - 4 должна входить е интервал между 80% и 120% обш
IgG. В случае, если сумма выходит за пределы допустимого интервала IgG, то существу
вероятность наличия избыточного антигена, что должно быть рассмотрено подробнее.
Вычисление результатов
Результаты анализируются автоматически при помощи логистически-логарифмической
(логугг-лог) функции.
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно на 15 ООО х г) должны бьпъ исключены из испытаний. Полученные
результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно с историей болеэж
клинической картиной пациента, а так же с результатами других медицинских
обследований.
По причинам технического характера и/или из-за старых образцов, результаты,
полученные для контрольного образца, и результаты енутрилабораторных исследоеани
могут отличаться в зависимости от методики анализа Поэтому может возникнуть
необходимость произвести оценку этих результатов методом удельных заданных велич
Эталонный интервал
При анализе сыворотки крови здоровых взрослых и детей были получены следующие
эталонные интревалы (г/л)'^
Возраст IflGI lflG2 lgG3 lgG4
0 -1 месяца 2,4-10,6 0,87-4,1 0,14-0,55 0,04-0,55
1 •4 месяцев 1.8-6,7 0,38-2,1 0,14-0,70 <0,03-0,36
4 - 6 месяцев 1,8-7,0 0,34-2,1 0,15-0,80 <0,03-0,23
6 -1 2 месяцев 2.0-7,7 0,34-2.3 0,15-0,97 <0,03-0,43
1 -1 ,5 года 2.5-8,2 0.38 - 2,4 0,15-1,07 < 0,03 - 0,62
1 ,5 -2 года 2,9-8,5 0.45 - 2.6 0,15-1,13 <0,03-0,79
2 - 3 года 3,2-9,0 0,52-2,8 0,14 -1,20 <0,03-1,06
3 -4 года 3,5-9,4 0,63-3,0 0,13-1,26 <0,03-1,27
4 - 6 лет 3,7-10,0 0,72-3,4 0,13-1,33 <0,03-1,58
6 - 9 лет 4,0 - 10,8 0,85-4,1 0,13-1,42 <0,03-1,89
9 -1 2 лет 4,0-11,5 0,98-4,8 0,15-1,49 0,03-2,10
12 - 18 лет 3,7-12,8 1,06-6,1 0,18-1,63 0,04 - 2,30
Свыше 18 лет 4,9-11,4 1,50-6,4 0,20-1,10 0,08-1,40
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность теста определяется по нижней фанице эталонной кривой и поэтому
зависит от концентрации белка в N Белковом Стандарте SL. Стандартные диапазоны
измерений даны в руководстве по эксплуатации системы BN ■ 1 (X)
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Актисыворотка
Точность
Следующие коэффициенты вариации (CV) были получены с использованием N
Антисыворотки к человеческому IgG подклассов 1 - 4.
Белок Внутри анализа
(n = 30) Mean value CV
(g/Ll [%]
Между анализами
(n = 10) Mean value CV{g/L
[%]
IqGI 6,03 2,1 5,70 4,4
igG2 3,54 2,6 3,06 3,7
lqG3 0,34 2,3 0,36 2,8
lqG4 0,63 2,6 0,60 3,8
Сопоставление методов
Было проведено исследование 60 образцов N Антисыворотки к человеческому IgG
подклассов 1 - 4 на системе BN* (у). Для сравнения, эти пробы были также исследован
методами радиальной иммунодиффуэии (RID) (х) представленными на рынке.
Сопоставление результатов выявило следующие сведения:
Белок Линейная рефессия Коэффициент корреляции
IgGI V (BN*) = 0,88 X (RID) + 0,32 г/л 0,98
lgG2 V (BN*) = 0,99 X (RID) + 0,07 г/л 0,99
lqG3 у (BN*) = 0,85 X (RID) + 0,06 г/л 0,93
lgG4 V(BN*)= 1,00 X (RID) + 0,02 Г/Л 0,98
Сумма уровней IgGI, lgG2, lgG3 и lgG4 каждого образца (у), заданная для каждого
отдельного подкласса системы BN‘, сравнивалась с общей концентрацией loG (х), такж
заданной в системе BN*. И было получено следующее линейное отношение ^ у = 0,91х
0,22 г/л. Коэффициент корреляции составил 0,97
Примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собой
типичные результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для
человеческого IgG подклассов 1 - 4
--- стр. 14 ---
il Антисыворотка к человеческому показателю коагуляции и С1 Интбито
)бласть применения
мгенть! для 1П vitro диагностики для количественного определения показателей
игуляции (фибриногена, анти-тромбина III и плаэминогена) в плазме человеческой крови
С1 Ингибиторе (С1 Инактиватор, С1 - ингибитор эстеразы) в плазме человеческой крови
сыворотке, при помощи систем BN*.
онспект и пояснения
окишенные концентрации фибриногена в плазме обычно вызываются воспалительными
юцессами, а также могут возникать после серьезных травм или хирургического
эвшательства («острофаэный протеин»). Также возможно образование опухолей с
этастаэами Пониженный уровень фибриногена в плазме может отразиться на
глощающих коагулопатиях, например, диссеминированное внутрисосудистое
юртывание, в основном, гиперфибринолиз, печеночный или генетический дефицит,
нидемиологические исследования показали, что повышенное содержание фибрина в
взме связано с повышенной угрозой атеросклероза'. Пониженный уровень антитромбина
обнаруживается при РВК, сепсисе и РВК, рецидивирующих венозных тромбозов ног,
неночмой недостаточности, нефрозов, генетического дефицита, а также у пациентов,
внимающих оральные контрацептивы на основе эстрогена. Пониженная концентрация
•титромбина III увеличивает риск тромбоэмболических осложнений^,
лышенный уровень плаэминогена может наблюдаться у пациентов с раком простаты, а
шжемный уровень в случаях печеночной недостаточности, при синдроме дыхательной
иостаточности новорожденных и при лечении фибримолиэа В общем случае,
•«унохимический анализ предоставляет ценную информацию при использовании
вместно с измерением активности отдельных показателей коагуляции (например, при
мещении или оральной актикоагулямтной терапии). При помощи иммунохимических
годов анализа фибриногена возможна оценка риска заболевания артериосклерозом^
I Ингибитор является важным стабилизатором классического метода активации
мплемента, он ингибирует активность протеазы серина С1 и С1г^. Измерение С1
гибитора помогает диагностировать наследственный ангионевротический отек
Овышенная пропускающая способность сосудов, вызывающая распухание тканей) и
дкую форму ангиоэдемы, связанной с лимфомой (рак лимфатических узлов),
иетический дефицит С1 Ингибитора приводит к ангионевротическому отеку (HANE) ®
тученмый С1 Ингибитор встречается при заболеваниях системы бета-клеток, а может
блюдаться при пониженном уровне С1 Ингибитора, например, при хронической
мфатической лейкемии, множественной миеломе и прочих злокачественных лифомах®
снова методики
1И иммунохимических реакциях белки в сыворотке или плазме человеческой крови
)рмируются в иммунные комплексы со специфическими антителами. Это приводит к
ссеиванию проходящего через образец света Интенсивность рассеивания света зависит
концентрации соответствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения
стандартной заданной концентрацией
еактивы
«доставляемые материалы
^нтисыворотка для человеческого фибриногена, код OSCA
^нтисыворотка для человеческого антитромбима III, код OSAY
^нтисыворотка для человеческого плазмимогена, код OSCB
^нтиcывopoткa для человеческого С1 Ингибитора, код OQEY
одному флакону с 2 мл каждого реагента.
или
или
или
тисывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации
5ЛИК0В высоко очищенными человеческими фибриногеном, антитромбином III,
азминогеном или С1 Ингибитором При помощи специальной процедуры из
гисыворотки удаляются неустойчивые составляющие. Большая часть микроорганизмов
аляется путем фильтрации и добавления азида натрия в качестве консерванта (< 1 г/л),
еле твердофазной иммуноадсорбции очищенная антисыворотка проверяется и
эреггируется особым образом для достижения максимального соответствия
эбованиям систем BN*. Титр антител определяется при помощи радиальной
мунодиффузии и наносится на этикетки пробирок. Титр отражает количество антиген в
которые осядут в агарозном геле при добавлении 1 мг соответствующей амтисыворотки.
едупреждения и меры предосторожности
Только для in vitro диатостики.
Содержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно;
вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид натрия
Тпая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
>ывоопасные соединения,
дготовка реагентов
^нтисыворотка готова к применению и может использоваться без дополнительной
1Г0Т0ВКИ
анение и устойчивость
гойчивость ПРИ температуре от *2 до *6 °
ок годности указан на этикетке;
гойчивость после открытия
вдели при температуре от +2 до +8 °С, если плотно закрыть сразу после использования
редотвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами);
время хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
|«утнение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
оываются на его активности. В подобных случаях, антисыворотку необходимо
[кильтровать перед использованием. Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с
мером пор около 0,45 мкм. Не замораживайте реактивы. Устойчивость в приборе.
.ней по 8 часов либо аналогичный период времени (максимум 40 часов); Система BN* II:
эмя устойчивости в приборе может быть увеличено применением антииспарительных
)бок BN* II (код OVLE) в соответствии с руководством,
стема BN ProSpec®;
5МЯ устойчивости в приборе - в соответствии с руководством.
обходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
стема BN*
)влковый стандарт PY (челов ), код OUID
Г Белковый контроль PY (челов ), код OWSY
)уфер реакции, код OUMS
’азбавитель, код OUMT
Дополнительный реагент/Осаждающий, код OUMU
• II Антииспарительная пробка (доп.), код OVLE
ступные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системе BN*.
эобы
я тестирования показателей коагуляции подходят образцы цитратной и EDTA плазмы.
Ингибитор выявляется как в цитратной плазме, так и в сыворотке человеческой кроеи
я исследований используйте наиболее свежие (находящиеся на хранении максимум 8
эй при температуре от +2 до +8 °) или замороженные пробы Образцы могут храниться
1 года при температуре -20”С, в случае, если они были заморожемь! в течение 24 часов
У1 0 сбора, при условии отсутствия повторной заморозки. Липемические или
юроженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть очищены
гтрифугированием (10 минут приблизительно на 15.000 х г) до анализа. Цитратная
эзма в среднем разбавляется на 17% при добавлении цитратиого раствора 6 случав
>б. взятых у пациентов проходящих курс лечения гепарином, воздействия не
элюдается.
2. Не используйте реагенты с истекшим сроком годности.
3. Перед использованием реагентов в системах BN'A/BN* 100, выдержите их при
комнатной температуре (от 15 до +25 ‘С). Для систем BN* II или BN ProSpec® данный i
можно пропустить.
Протокол испытания для систем BN*
Протоколы испытаний приведены в руководстве и программном обеспечении прибора,
действия выполняются системой автоматически
Расчет референсной кривой
Референсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
производится автоматически сериями, образуется раствор N Белкового стандарта PY (
Разбавителем
Референсную кривую можно использовать для точности контролей, например, МЯ
Белковый контроль PY, остается в пределах соответствующего доверительного иктерЕ
Новая референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов
Исследование проб, взятых у пациентов
Перед началом анализа образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:5
(антитромбин III, плазминогем и С1 Ингибитор) при помощи N Разбавителя и затем
анализируются. Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследован!
можно повторить с более высокой (антитромбин III, плазминоген и С1 Ингибитор и
фибриноген) или более низкой (фибриноген) степенью разбавления проб. См. руковод'
по системе BN* для получения сведений о повторных измерениях с другими степеням!-
разбавления.
Внутренний контроль качества
Анализ МЯ Белковый стандарт PY должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования флаконов с реагентом, а так же дл
каждого измерения проб сыворотки или плазмы. Контрольные пробы исследуются и
оцениваются так же, как и тестируемые образцы. Заданное значение и доверительный
интервал для контроля даны в соответствующей Таблице приписанных значений.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
N Антисыворотка к человеческому фибриногену также позволяет обнаружить продукты
распада фибриногена, поэтому иммунохимический анализ фибриногена не следует
использовать для образцов, содержащих большое количество продуктов распада,
например, образцы, взятые у пациентов, проходящих лечение фибринолитом’.
По причинам технического характера и/или из-за старых образцов, результаты, получв!
для контрольного образца, и результаты внутрилабораторных исследований могут
отличаться в зависимости от методики анализа Поэтому может возникнуть необходим-
произвести оценку этих результатов методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
Нижеследующий эталонный интервал подходит для проб цитратной плазмы здоровых
взрослых людей:
Белок 2,5 - 97,5 Процеитиль
Фибриноген (8)
Антитромбин III (9)
Плазминогем (10)
1,80-3,50 г/л
0,19-0,31 г/л
0,06 - 0,25 г/л
С1 Ингибитор: Были исследованы пробы цитратной плазмы, взятые у 399 здоровых
доноров, жителей Центрольной Европы. Был получен доверительный интервал (2,5 - 9
процеитиль); 0,18 - 0,32 г/л. Для N Антисыворотки к С1 Ингибиртору оценка 370 образц-
сыворотки показала интервал доверия (2,5 - 97,5 процектиль): 0,21 - 0,39 г/л.
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интерваг
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте PY. Типичные диапазоны
измерений приведены в руководстве по системам 8N*.
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Актисыворотка (для человеческого Антитромб!
Ill, плаэминогена и С1 Ингибитора), N Антисыворотка к человеческому фибриногену тa^
позволяет обнаружить продукты распада фибриногена’.
Точность
При исследовании N Антисыворотки к человеческому показателю коагуляции и С1
Ингибитору на системе BN*, были получены следующие коэффициенты вариации (CV):
Белок п
Внутри
анализа
Ср.значеиие
(г/л)
CV
[%]
п
Между
анализами
Ср. значение
(г/л)
CV
[%]
Фибриноген 30 2,03 2,7 10 2,06 2,6
Амтитромбин III 29 0,22 1.5 10 0,21 1,3
Плазминоген 30 0,094 1,5 10 0,095 3,5
С1 Ингибитор 30 0,23 1,5 10 0,24 1,6
Сопоставление методов
Образцы плазмы были проанализированы с применением N Амтисыворотки к
человеческому показателю коагуляции и С1 Ингибитору, а образцы сыворотки с
применением N Антисыворотки к человеческому С1 Ингибитору на системе BN' (у) и с
помощью метода радиальной иммунодиффузии (х) (Partigen**). Сопоставление
результатов выявило следующие сведения:
Белок Количество
образцов
Линейная рефессия Коэффици
корреляци
Фибриноген 28 у (BN*) = 1,04 X (RID) + 0,07 г/л 0,99
Антитромбин III 30 у (BN*) = 0,88 X (RID) + 0,03 г/л 0,90
Плазминоген 29 y(BN*) = 0,79x(RIO) + 0,03r/n 0,92
С1 Ингибитор 50 плазмы у (BN*) = 0,89 X (RID) + 0,03 г/л 0,95
С1 Ингибитор 50 сыворотки у (BN*) = 0,98 X (RID) + 0,02 г/л 0,96
Примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собой
типичные результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для
человеческого фибриногена, антитромбина III, плазминогена или С1 Ингибитора.
етодика
имечания
Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
лрукций
--- стр. 15 ---
N Антисыворотка для человеческого аполипопротеина
А-И и аполипопротеина
Область применения
Реагенты для количественного определения в лабораторных условиях аполипопротеина
А-П (АЛО А-П) и аполипопротеина Е (АПО Е) в сыворотке человеческой крови при помощи
BN'-систем
Конспект и пояснения
Аполипопротеин А-И - структурный белок альфа-липопротеинов высокой плотности (ЛВП)
•впадающий свойством связывания фосфолипидов. АПО А-И состоит из двух идентичных
белковых цепочек, связанных дисульфидным мостиком. Каждая цепочка состоит из 77
■иинокислот. Молекулярный вес димерной молекулы - 17440 а.е.м. Генетически
вязанных структурных модификаций АПО А-И не отмечено. В плазме человеческой крови
оодержатся различные изоформь! АПО А-И со схожими молекулярными весами и
■яиунологическими свойствами, но с разными изоэлектрическими точками
Синтез АПО А-И происходит в печени Процентная концентрация АПО А-И в
(ипопротеинах сыворотки человеческой крови; в хиломикронах, ЛКНП, ЛНП - в следовых
юличествах ЛВП2 - 10 %; ЛВПЗ-23% . Период полураспада АПО А-М в крови составляет
4 -5 дней ' Наблюдения за пациентами с сердечно-сосудистыми заболеваниями и
инфарктом миокарда не выявил соотношения между концентрацией АПО А-М и риском
юзникновения данных заболеваний (®). В некоторых НИЦ замеры АПО А-И проводятся
аля определения зависимости фракций ЛВП2 и ЛВПЗ от количества АПО А-1 и АПО А-1!
Люньшение концентрации АПО А-И прослеживается при Танжерской болезни (крайне
редкий дефект АПО А-1), у много курящих пациентов и при печеночной недостаточности
. Увеличение концентрации АПО А-И отмечается при чрезмерном потреблении алкоголя®.
Илолипопротеик Е имеет молекулярный вес 34 ООО а.е.м (299 аминокислот) и
синтезируется в печени. Приблизительно 10 - 20 % общего количества белка ЛКНП
состоит из АПО Е. Увеличение концентрации АПО Е свидетельствует о повышенной
юнцентрации высокоатерогенных продуктов распада хиломикронов и ЛКНП ("остатков”)®
Совместно с химическим исследованием АПО В, АПО Е рассматривается как параметр
1ЛЯ скрининга гиперлипопротеинаемий III типа’
Основа методики
1ри иммунохимических реакциях белки в сыворотке человеческой крови формируются в
1ммунные комплексы со специфическими антителами. Это приводит к рассеиванию
фоходящего через образец света. Интенсивность рассеивания пропорциональна
юнцентрации соответствующего белка в образце. Результат получается путем сравнения
XI стандартной, либо заранее известной концентрацией.
Реагенты
1редоставляемые материалы
4 Аполипопротеиновый тестовый набор А-Н, код OQBA
4 Антисыворотка для аполипопротеина человека А-И и
4 Дополнительный реагент А
ю одному флакону с 2 мл каждого реагента, либо
4 Аполипопротеиновый тестовый набор Е, код OQDL
4 Антисыворотка для аполипопротеина человека Е и
4 Дополнительный реагент А
ю одному флакону с 2 мл каждого реагента.
Состав
4 Антисыворотка - жидкая сыворотка крови животных. N Антисыворотка для
>полипопротеина человека АПО А-И получается путем введения кроликам высокочистого
еловеческого АПО А-И N Антисыворотка для аполипопротеина человека АПО Е
юлучается путем введения козлам высокочистого человеческого АПО Е. Неустойчивые
©мпоненты удаляются из N Антисыворотки для аполипопротеина человека АПО А-М
юсредством специальных процедур. Большая часть микроорганизмов удаляется путем
|>ипьтрации и добавления азида натрия в качестве консерванта (< 1 г/п) После
вердофаэной иммуноадсорбции очищенная антисыворотка проверяется и
юрректируется особым образом для достижения максимального соответствия
ребоваииям систем BN*. Концентрация белка в N Антисыворотке указана на флаконе
4 Дополнительный реагент А состоит из детергентов в буферном растворе
(онсерванты; 5-хлоро-2-метил-4-изотиазол-3-один (приблизительно 6 мг/л)
;-метил-4-иэотиазол-3-один (приблизительно 2 мг/л)
1редупреждения и меры предосторожности
I . Только для in vitro диагностики.
I Содержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
4е вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид натрия
ступая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
(зрывоопасные соединения.
1одготовка реагентов
4 Антисыворотка и N Дополнительный реагент А готовы к применению и не требуют
Юполнитепьной подготовки.
(ранение и устойчивость
(ранить ПРИ температуре от +2 до +8 *С
ipOK годности указан на этикетке;
/стойчивость после открывания:
I недели при температуре от +2 до +8 “С, если плотно закрыть сразу после использования
I предотвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами),
Jo время хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
юмутнение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
жазываются на его активности. В подобных случаях, аитисыворотку необходимо
ггфильтровать перед использованием. Для данной цели подойдут одноразовые фильтры
: размером пор около 0,45 мкм Не замораживайте реактивы.
/стойчивость в приборе:
>дней по 8 часов либо аналогичный период времени (максимум 40 часов);
Система BN* И;
»рвмя устойчивости в приборе может быть увеличено применением антииспарительных
»робок BN* II (код OVLE) в соответствии с руководством,
Система BN ProSpec®
фвмя устойчивости в приборе - в соответствии с руководством.
Необходимые материалы, не включенные в комплект
поставки
Система BN*
4 Аполипопротеиновая стандартная сыворотка (человеческая), код OUPG
\полипопротеиновая контрольная сыворотка ИБС (человеческая), код OUPH
4 Буфер реакции, код. OUMS
4 Разбавитель, код OUMT
\нтииспарительмая пробка BN* II (опционально), код OVLE
Доступные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системе 8N*
Пробы
1ля исследования используйте наиболее свежие (находящиеся на хранении максимум 8
1ней при температуре от +2 до +8 *С) или замороженные пробы человеческой сыворотки.
Образцы могут храниться при температуре ниже -20 ’С до 3 месяцев, если они были
заморожены в течение 24 часов после забора, при условии отсутствия повторной
заморозки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-либо
частиц или следов фибрина после центрифугирования Липемические или замороженные
пробы, мутные после оттаивания, должны быть отцектрифугированы (10 минут
приблизительно на 15.000 х г) до исследования. Помимо этого, можно использовать
сильно разбавленные образцы либо комбинацию вышеуказанных способов.
Методика
прим ечания
1. Перед началом работы изучите руководство по системам BN*
2. Не используйте реагенты с истекшим сроком годности.
3. Перед использованием реагентов в системах BN’A/BN* 100, выдержите их при
комнатной температуре (от 15 до +25 ®С). Для систем BN* II или BN ProSpec® данный шаг
можно пропустить
Протокол испытания для систем BN'
Правила химического анализа приведены в руководстве и ПО прибора. Все шаги
выполняются системой автоматически
Расчет референсной кривой
Референснь 1е кривые строятся при мультиточечной калибровке. Расчет производится
автоматически серийными разведениями N Аполипопротеииовго стандарта SL с N
Разбавителем Референсную кривую можно использовать для точности контролей,
например, Аполипопротеиновый контроль сыворотки ИБС, остается в пределах
соответствующего доверительного интервала. Новая референсная кривая создается при
каждой смене партии реактивов.
Исследование проб, взятых у пациентов
Перед началом анализа образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:20 (АПО
А-И) или 1:5 (АПО Е) N разбавителем. Если полученные значения находятся вне
диапазона измерений, анализ можно повторить с использованием более сильно (АПО А-И
АПО Е) или менее сильно (АПО А-И) разбавленных образцов См. руководство по системе
6N* для получения сведений о повторных измерениях с другими степенями разбавления.
Внутренний контроль качества
Проводите анализ аполипопротеиновой контрольной сыворотки ИБС после каждой смены
референсной кривой, при первом использовании иммунной сыворотки и для каждой новой
серии образцов. Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же, как и
тестируемые образцы. Заданное значение и доверительный интервал для контроля даны
в соответствующей Таблице прописанных значений.
Результаты
Оценка выполняется автоматически по значениями логистически-логарифмической (логит
лог) функции.
Ограничения анализа
Помутнение образца и наличие сторонних частиц может влиять на результаты. Образцы с
посторонними примесями должны быть центрифугированы. В редких случаях чрезмерная
концентрация триглицеридов (например, в гиперлипемических образцах) может помешать
анализу АПО А-И и/или АПО Е. В этом случав образец должен быть протестирован
повторно с более высокой степенью разбавления.
По причинам технического характера и/или из-за старых образцов, результаты,
полученные для контрольного образца, и результаты внутрилабораторных исследований
могут отличаться в зависимости от методики анализа. По этой причине может возникнуть
необходимость оценки данных результатов относительно значений, характерных для
данного метода.
Эталонные интервалы
Для сыворотки пациентов с нормальной липидемией были определены следующие
Белок Номер Среднее значение Процентиль
2,5 - 97,5
АПО А-И 467 0,35 г/л 0,26 - 0,51 г/л
АПО Е 308 0,035 г/л 0,023-0,063 г/л
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Аполипопротеиновом стандарте. Типичные
диапазоны измерений приведены в руководстве по системам BN*.
Специфичность
Для каждого белка используется своя N Антисыворотка.
Точность
При исследовании N Антисыворотки для человеческого АПО А-И и АПО Е на системе BN*,
Белок
Внутренний анализ
п=30
Среднее ру
значение (г/л)
Промежуточный анализ
п=30
Среднее -о,.
значение (г/л) ' '
АПО А-И 0,41 1,9 0,38 1,6
АПО Е 0,031 2,9 0,039 4.1
Сопоставление методов
АПО А-И и АПО Е, а также на системе BN* (у) и коммерческим нефелометрическим
методом
Белок
Количество
образцов
сыворотки
Протекание
регрессии Баблоха
Коэффициент
корреляции
АПО А-И 95 у= 1,06 X - 0,023 г/л 0,92
АПОЕ 52 у= 1,14х-0,003г/л 0,95
Примечание
Значения, приведенные для особых рабочих характеристик теста, представляют собой
типичнью результаты и не являются спецификацией для N Антисыворотки для
человеческого аполипопротеина А-И или аполипопротеина Е.
--- стр. 16 ---
Латекс HCY
lacTb применения
iHvitro диатостике для количественмого определения общего гомоцистина (HCY) е
итке, гепаринизированной и EDTA плазме человека с помощью
йОметрического иммуноанализа на системах BN* И и 6N ProSpec® Устройство
■ает диагностировать и назначить лечение пациенту, с подозрением на
ГОмоцистенимию или гомоцистинурию
спект и пояснения
^истин - это аминокислота, получаемая из метионина, с добавлением фолиевой
1Ы, витамина В6 и В12 для дальнейшего метаболизма. Гомоцистин существует е
(ДНОМ, но, как правило, связан с белком. Мутация в генетическом коде ферментов,
(ченмых в метаболизм, таких как, MTHFR (редуктаэа 5,10-
интетрагидрофолат), приводит к гипергомоцистенимии''®. Фолиевая кислота,
ины 86 и 612 являются необходимыми факторами для разрушения связей
^им а. Нехватка этих витаминов вызывает повышение уровня гомоцистина в
e’"*. Гомозиготные мутации гена CBS (цистатионин В-синтаза) вызывают тяжелую
у гипергомоцистенимии, а также гомоцистеинурию. Гипергомоцистенимия, как
по, связана с повышенным риском ишемической болезни сердца, ее приступов,
ни периферийных артерий и тяжелого венозного трамбоэа' , на равнее с
кдениями нервных трубок и преэклампсии во время беременности®'^. Высокая
нтрация гомоцистина в крови вызывает эндотелиальную дисфункцию и сосудистых
веаниях®'* Гипергомоцистенимия чаще встречается у пожилых людей,
ьщикое, пациентов с почечными болезнями, диабетом или при жестком
(дении вегетарианской диеты'.
орые лекарства, такие как антиэпилептические, антифолатные, окись
ая анестезия и антагонисты витамина Bg, повышают уровень концентрации
(истина в крови человека'. При анализе образцов, взятых у пациентов,
щящих лечение с использованием S-аденозил-метионина, существует
>жность получить завышенные результаты по гомоцистину.
ова методики
«ительный анализ
нный гомоцистин в образце освобождается до свободного состояния воздействием
греитола, после чего при помощи фермента превращается в S-аденозил-
истин (SAH). Коагулированный S-аденоэилцистин (SAC), добавляемый на
ощем шаге, привязывает анта-SAH антитела к частицам полистирола При
ИИ SAH в пробе, агрегация отсутствует или наблюдается незначительная
ция частиц полистирола. В случае отсутствия SAH в пробе частицы полистирола
руются с SAC Чем выше концентрация SAH в образце, тем меньше рассеивается
света. Оценка выполняется путем сравнения со стандартной или известной
ттрацией.
тивы
кггавляемые материалы
W CC HCY, код ОРАХ (3 х 40 тестов)
’ Реагент, три пробирки по 1,7 мл в каждой
’ RA, три пробирки по 2,2 мл в каждой
’ SR А, три пробирки по 0,6 мл в каждой
■ SR В, три пробирки по 1,1 мл в каждой
а
' Реагент состоит из суспензии частиц полистирола, нагруженных
пональными антителами анти-SAH (мышь) (<0,1 г/л).
' RA состоит из буферного стабилизированного раствора с редуктором
греитолом (<0,5 г/л) и аденоэина (<20 мг/л).
' SR А состоит из буферного стабилизированного раствора с ферментом S-
зил-1-гомоцистин гидролазы (рекомбинант) (<100 кЕд/л).
' SR В состоит из буферного стабилизированного раствора конъюгата SAC со
м тиреоглобулином (PTG-SAC) (<0,1 г/л)
звант
' SR после смешивания с N HCY SR А и N HCY SR В: азид натрия < 1 г/л
преждения и меры предосторожности
ько для in vitro диагностики.
ержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно.
>1хать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид натрия
1Я в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может
звывать взрывоопасные соединения,
товка реактивов
■ Реагент и N HCY RA поставляются готовыми к использованию. N HCY Реагент
здимо аккуратно перемешать перед использованием.
' SR; при помощи пипетки поместите все содержимое пробирки с N HCY SR А в
зку с N HCY SR В и аккуратно перемешайте
ние и устойчивость
те реагенты вдали от солнечного света!
ть при от +2 до +8 “С:
одности указан на наклейке.
wBOCTb после открьп-ия.
ли (N HCY Реагент, N HCY RA и N HCY SR смесь), если плотно закрыть сразу
использования и хранить при температуре от +2 до +8°С.
юраживайте реактивы,
пьность в приборе:
Реагент, N HCY RA и N HCY SR смесь - не менее трех дней (по 8 часов в день)
поставимый промежуток времени.
!чание: Зависимость в приборе зависит от используемой системы BN’, а также
эторных условий. Для получения более подробной информации см. руководство
тлуатации систем BN* И и BN ProSpec®.
одимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
1стем BN* II или BN ProSpec®
(овый стандарт SL, код OQIM
лковый контроль SL/L, код OQIN
лковый контроль SL/L, код OQIN
лковый контроль SL/L, код OQIN
завитель, код OUMT
Антииспарительная пробка (доп.), код OVLE
1ные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*.
>Ы
максимально уменьшить 0 1нтез HCY в эритроцитах после забора проб,
гтельно рекомендуется готовить пробы следующим образом:
!щать все пробы крови (сыворотка и плазма) на лед сразу после забора,
ггавлять образцы при комнатной температуре перед центрифугированием
одить центрифугирование в течение часа, чтобы отделить плазму или сыворотку
ток крови
следования используйте наиболее свежив (находящиеся на хранении максимум 8
|ри температуре от +2 до +8 *С) или замороженные пробы человеческой
отки, а также гепариновые и EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота) пробы
»1. Образцы сыворотки и плазмы могут храниться до трех месяцев при
эатуре -20 "С, в случае, если они были заморожены в течение 24 часов после
и при хранении не повторялось несколько циклов разморозки и замораживания,
ютка должна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-либо частиц или
3 фибрина после центрифугирования. Липемические или замороженные пробы,
в после оттаивания, должны быть очищены центрифугированием (10 минут
изительно на 15.000 х г) до анализа. Для мониторинга пациента не рекомендуется
зэовать различные типы проб.
>дика
зчания
1. Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
инструкций
2. Реактивы и пробы, хранящиеся при температуре от +2 до +8 *С, могут быть сразу
использоеань! для анализа в системах BN* II и BN ProSpec®.
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови и плазмы включен в руководство, так же как и
Программное обеспечение для соответствующего оборудования. Все действия
выполняются системой автоматически
Расчет эталонной кривой
Референсные кривые строятся при мультиточечной калибровке Расчет производится
автоматически сериями, образуется слабый раствор N Ревматологический стандарт SL с
N Разбавителем Растворы должиь! быть использованы в течение 4 часов. Референсную
кривую можно использовать в течение 4 недель и может использоваться дольше, если
контролируется точность, например, N/T Ревматологический контроль SL/1 и SL/2
остается в пределах соответствующего интервала доверия. Новая рефренсная кривая
создается при каждой смене партии реактивов.
Точный диапазон измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N
Белковый стандарт SL. Стандартные значения указаны в соответствующем руководстве
по эксплуатации системы BN*. Стандартный диапазон измерений для проб, разведенных
в соотношении 15, от 2 до 64 мкмоль/л.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:5 с N Разбавителем. Растворы
должны быть исследованы в течение 4 часов. Для результатов, находящихся вне
диапазона измерений, исследование можно повторить с более высокой или более
низкой степенью разбавления проб. Повторные исследования с дальнейшим
разбавлением проб описаны в руководстве по системам BN*
Внутренний контроль качества
Анализ N/T Белкового контроля SL/L, М, Н должен проводиться после каждого расчета
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для
каждого измерения образцов. Контрольные пробы исследуются и оцениваются также,
как и тестируемые образцы. Заданное значение и доверительный интервал для контроля
даны в соответствующей Таблице предписанных значений. Если результат контрольных
измерений лежит за пределами интервала доверия, контрольный анализ необходимо
повторить. Если отклонение подтверждается повторным измерением, должна быть
вычислена новая референсная кривая, Результаты пациента не должны быть оглашены,
пока причина отклонений не установлена и не устранена
Результаты
Оценка выполняется автоматически в мкмоль/л или производной единице,
определяемой пользователем системы BN*
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно 15 ООО х г) и пробы инактивированные нагреванием должнь! быть
исключены из испытаний. Следующие вещества не оказывают значительного эффекта
(±20%) при использовании HCY метода, в случав, если они присутствуют в следующих
концентрациях: Билирубин до 600 мг/л, триглицерид до 4 21 ммоль, общая концентрация
протеина до 88 г/л.
Некоторые лекарства, такие как антиэпилептические, антифолатные, окись
азотная анестезия и антагонисты витамина В6, повышают уровень концентрации
гомоцистина в крови человека.
Пробы пациентов могут содержать ревматоидные и гетерофильные антител, что может
повлечь ошибочно завышенные или заниженные результаты иммуноанапиза. Данный
анализ разработан в целях минимизации влияния ревматоидных и гетерофильных
антител на результат исследования. Однако, полностью исключить их влияние не
представляется возможным.
Компания Dade Behring провела тестирование на использование данных реагентов с
различными анализаторами в целях оптимизации производительности и соответствия
требованиям, предъявляемых к продукции. Компания не поддерживает
пользовательские изменения, так как они могут повлиять на производительность
системы и результаты анализа.
Пользователь по собственному усмотрению при утверждении измерений может
использовать данные инструкции, реагенты, не входящие в комплект поставки Dade
Behring.Полученные результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно
с историей болезни, клинической картиной пациента, а так же с результатами других
медицинских обследований.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования.
Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих результатов методом
удельных заданных величин.
Исследования по сравнению сыворотки и плазмы методом N Латекс HCY для сыворотки
показали результаты более чем на 10% выше, чем для аналогичного анализа EDTA-
плазмы. Поэтому не рекомендуется сообщать результаты анализов для одного и того же
пациента попеременно либо по EDTA плазме, либо по сыворотке Между концентрацией
гомоцистина в EDTA и гепаринизированной плазме значительных различий выявлено не
было
Эталонный интервал
Концентрация гомоцистина в плазме или сыворотке крови здоровых людей может
изменяться в зависимости от возраста, пола, географического расположения, состояния
питания и генетических факторов. Научная литература предписывает эталонные
интервалы взрослых мужчин и женщин от 5 до 15 мкмоль/л. При исследовании 800
практически здоровых людей, 95 процектиль был выявлен уровень в 15.7 мкмоль/л
гомоцистина?.
При исследовании 193 образцов EDTA плазмы крови здоровых людей из центральной
Европы были получены значения от 4,9 до 15.0 мкмоль/л (2 5 95 процентиль) при
помощи N Latex HCY.
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный эталонный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувствительность теста определяется по нижней границе эталонной кривой и поэтому
зависит от концентрации веществ, определяемых при анализе в N Белковом Стандарте
SL. Аналитическая чувствительность рассчитывается при помощи среднего,
стандартного отклонения и коэффициентом вариации в 20% с N Разбавителем и N
Белковым стандартом SL - 1 . 160 (нижняя точка референсной кривой)
проанализированных при помощи системы BN*. Стандартная чуествительмость для
гомоцистина составляет 2 мкмоль/л.
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не выявлена. При помощи системы BN* II были
исследованы образцы плазмы стимулируемые различными концентрациями аденозина
(до 1 мМ), S-afleH03Hn-L-MeTH0HHH (до 0,5 мМ), L-цистатионин (до 2 мМ), L-цистин (до 5
мМ), L-метионин (до 0,4 мМ) или гомоцистин-тиолактон (до 0,1 мМ) и глютатион (до 50
мМ) и сравнены с не стимулированными образцами с содержанием L-цистина <5,0% и
глютатиона <10%.
--- стр. 17 ---
р N Латекс RF
ьПрименения
•юе определение ревматоидных фаеторов (RF) в человеческой сыворотке,
Нванной плазме и EDTA-плаэме при помощи систем BN* и BN ProSpec® для
■ ревматического артрита
КТ И пояснения
я аутоиммунными антителами к Fc области человеческого IgG с измененной
яруктурой Данные аутоантитела также взаимодействуют с животным IgG RF
•вжо принадлежат к классу IgM, однако также встречаются и во всех других
■уноглобулина’^
R F является одним из критериев, используемых Американской Ассоциацией по
1матизма (ARA), при диагностике ревматоидного артрита (RA)^, так как у 70 - 90%
с RA обнаруживаются ревматоидные факторы RF играют важную роль в
шльном диагностировании RA и его отделении от прочих ревматических
I Кроме того они позволяют делать прогнозы в отношении RA‘ Высокое
RF часто указывает на более тяжелое протекание болезни Однако, также
свронегативные типы RA, при которых RF не выявляется, а может быть связан с
магическими заболеваниями, такими как гепатит, эндокардит и паразитные или
нфекции и другие аутоиммунные заболевания. В процессе старения также
ся процент положительных результатов на RF при отсутствии соответствующих
мболеваний' Таким образом, только тест на выявление RF не может
кся в качестве диагностики, а должен интерпретироваться совместно с
N дальнейших клинических исследований
|»ые обнаружен при агглютинировании эритроцитов овцы антителами крови
т Waaler-Rose), но затем предпочтение было отдано методу агглютинирования
стирола покрытых человеческим IgG (латексный тест)^ Последний метод легко
■ автоматизирован и обеспечивает стандартизированные, количественные
Набор N Латекс RF сочетает в себе элементы обеих процедур обнаружения, в
ицы полистирола покрыты иммунокомплексом IgG человека и животного
методики
к частиц полистирола, пофыгых иммунокомплексом, содержащим человеческий
и человеческий анти-у-глобулин овцы, при смешивании с образцами,
и RF, афегируются При облучении светом агрегат рассеивает световой пучок,
гь рассеивания света зависит от концентрации соответствующего белка в пробе,
лняется путем сравнения со стандартной заданной концентрацией.
явм ы е м атериалы
же RF, код ОРСЕ 03, содержащий
внт), N RF Реагент
исадка), N RF Присадка
■КС RF, код ОРСЕ 05, содержащий
8нт), N RF Реагент
йсадка), N RF Присадка
• состоит из частиц полистирола, нагруженных иммунокомплексом, содержащим
I 7-глобулин и человеческий анти-у-глобулин овцы, то есть комбинацию
о и Х0 1В0ТН0Г0 у-глобулина
са состоит из водного раствора полиэтилена гликоля (макс. 70 г/л) с
м.
• Гентамицин сульфат 6,96 мг/л, амфотерцин В 0,696 мг/л
а. азид соды < 1 г/л
ения и меры предосторожности
in vitro диагностики.
дение. содержит азид соды (< 0,1 %) в качестве консерванта Азид соды может
1ЖЦИЮ с медными или свинцовыми трубами сливной системы и образовывать
в соединения Утилизация должна проводиться в соответствии с
•и нормами и стандартами
■еловеческий материал.
9 или донорный орган был протестирован и получен отрицательный результат
наличие вируса иммунодефицита (HIV) 1 и 2, вируса гепатита В (HBV) и вируса
HCV) либо при помощи методов, соответствующих директиве по in viiro
1ля Евросоюза, либо методами, утвержденными Управлением по контролю за
лекарствами (США) Так как ни один из известных тестов не может дать 100 %
|Гтствия инфекционных агентов, со всеми анализами, взятыми у человека,
цаться с должной осторожностью
>еактиво8
находится в жидком состоянии и готов к использованию. Перед
вм необходимо аккуратно перемешать, избегайте энергичных взбалтываний и
■ены.
а: раствор готов к использованию,
сто^йчивость
овирт -*-2до *В °С
указан на наклейке
после открытия
и (N RF Реагент и N RF Присадка), если плотно закрьп-ь сразу после
R в цепях предотвращения загрязнения (например, микроорганизмами) и
мипературе от *2 до +8 'С.
айте реактивы.
анения при температуре от +2* до +8* С возможна кристаллизация N RF
■ако раствор снова перейдет в жидкое состояние при комнатной температуре
*С). На рабочие характеристики кристаллизация воздействия не оказывает.
Рприборе
в приборе зависит от используемой системы BN* а также лабораторных
тедует оставлять емкость с реагентами для системы BN* II открытыми, вместо
,оеано закрыть емкость сразу после использования и хранить при температуре
I* С. Для получения более подробной информации см. руководство по
atCTBM BN* II и BN ProSpec®
едополнительнь^е материаль^, не входящие в комплект поставки
«ческий стандарт SL, код OQKZ
>евматологии SL/1 и 2, код OQDB и OQDC
■ь. код Оимт
арительная пробка (доп.), код OVLE
масти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*
являются пробы человеческой сыворотки, гепаринизированной плазмы или
либо свежие (хранение не более В дней при температуре от +2 до +8’С),
женном виде Образцы сыворотки и плазмы могут храниться до трех месяцев
ре -20 'С, в случае, если они были заморожены в течение 24 часов после
Методика
примечания
1 Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
инструкции.
2 Разрешается использовать совместно только компоненты из тестовых наборов с
одинаковым номером серии.
3 N RF Реагент и N RF Присадка должны быть заменены в системах BN* одновременно
Протокол испь^тания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови и плазмы включен в руководство, так же как и
Программное обеспечение для соответствующего оборудования Все действия выполняются
системой автоматически
Расчет эталонной кривой
Референсные кривью строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N Ревматологического
стандарта SL с N Разбавителем Растворы должны быть использованы в течение 4 часов.
Референсную кривую можно использовать в течение 4 недель и может использоваться
дольше, если контролируется точность, например, N/T Ревматологический контроль SL/1 и
SL/2 остается в пределах соответствующего интервала доверия
Новая рефренсная кривая создается при каждой смене партии реактивов.
Точный диапазон измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N
Ревматологического стандарта SL Стандартные значения указаны в соответствующем
руководстве по эксплуатации системы BN*.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы сыворотки и плазмы автоматически разбавляются в соотношении 1:20 при помощи
N Разбавителя Растворы должны быть исследованы в течение 4 часов
Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследование можно повторить с
более высокой степенью разбавления проб Повторные исследования с дальнейшим
разбавлением проб описаны в руководстве по системам BN*
Внутренний контроль качества
Анализ NЯ Ревматологического контроля SL/1 и SL/2 должен проводиться после каждого
расчета реферемсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же
для каждого измерения образцов сыворотки или плазмы. Контрольные пробы исследуются
и оцениваются так же, как и тестируемые образцы Заданное значение и доверительный
интервал для контроля даны в соответствующей Таблице приписанных значений. Для
ввода приписанных значений в систему BN ProSpec® можно воспользоваться
информационным компакт-диском (код OVLP)
Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия,
контрольный анализ необходимо повторить. Если отклонение подтверждается повторным
измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая Результаты пациента не
должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Реэультать^
Оценка выполняется автоматически в МЕ/мл на системе BN*
Ограничения анализа
Концентрации билирубина до 600 мг/л и свободного гемоглобина до 10 г/л не оказывают
воздействия на измерения.
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа.
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно 15 000 х г) и пробы инактивированные нагреванием должны быть
исключены из испытаний.
Компания Dade Behring провела тестирование на использование данных реагентов с
различными анализаторами в целях оптимизации производительности и соответствия
требованиям, предъявляемых к продукции Компания не поддерживает пользовательские
изменения, так как они могут повлиять на производительность системы и результаты
анализа За использование рекомендаций, отличающихся от приведенных здесь, или
реагентов, не входящих в комплект поставки Dade Behring, вместо оригинальных
ответственность ложится на пользователя
Полученные результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно с историей
болезни, клинической картиной пациента, а так же с результатами других медицинских
обследований.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих
результатов методом удельных заданных значений
Эталонный интервал
При исследовании сыворотки крови 253 доноров из центральной Европы были получены
значения: < 8,8 МЕ/мл (в 95 процентиле) и 15,9 МЕ/мл в 97,5 процентиле при помощи
набора N Латекс RF. Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный
эталонный интервал, с учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой
изученной фуппы жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Базовый диапазон измерений для набора N Латекс RF составляет от 10 до 640 МЕ/мл.
Чувствительность теста определяется по нижней фанице референсной кривой и поэтому
зависит от концентрации веществ, определяемых при анализе в N Ревматологическом
стандарте SL. Чувствительность, вычисляемая по двум стандартным отклонениям от
среднего значения при 20 тестах с N Растворителем, для системы BN ProSpec® составлет
0,13 МЕ/мл.
Специфичность
Агглюцинация возбуждаемая частицами чаще всего выявляет RF в классе IgM’
Точность
Тестирование точности прибора проведено в соответствии с директивой CLSI ЕР5-/\2* с
двумя контрольными пробами и 4 пулами сыворотки с различным содержанием RF При
помощи дисперсионного анализа (п = 80) результатов для системы BN* были получены
следующие значения коэффициента вариации (CV)
Лроба
Среднее
значение
(МЕ/мл)
Внутри анализа
CV {%)
Между анализами
CV (%)
Общий
CV (%)
Контр, образец 1 69 3 2 2 5.2 5.7
Контр образец 2 170 2 2 3.1 3.8
Пул сыворотки ниэк 1 27 9 2 7 5 4 7 9
Пул сыворотки ниэк. 2 81.3 2.2 4 8 5 3
Пул сыворотки выс 1 583 5.1 4.8 7 7
Пул сыворотки выс 2 601 5.3 5.8 8.1
Сопоставление методов
90 образцов сыворотки (с содержанием RF от 15,8 МЕ/мл до 588 МЕ/мл) были
проанализированы при помощи набора N Латекс RF на системе BN* (у) и N Латекс RF (х).
Сопоставление результатов выявило следующие сведения
у = 1,098 X - 12,9 МЕ/мл, г = 0,98.
Примечание
Значения, ссылающиеся на особые рабочие характеристики анализа, являются
стандартными значениями и не должны приниматься за спецификации набора N Латекса RF.
--- стр. 18 ---
I Латекс IgA
бласть применения
*генты для 1П vitro диагностики для количественного определения IgA в спинномозговой
jKOCTM (CSF) и в парных образцах CSF и сыворотки при помощи нефелометрического
тноанализа на системах BN* Выявление IgA позволяет упростить оценку состояния
лунной системы пациента.
(нспект и пояснения
(цектрация белков сыворотки в CSF показывает установившееся состояние, где самыми
(мыми параметрами являются диффузия между кровью и CSF (проходимость) и поток
10Й CSF. Также на результат оказывают влияние возрастные изменения. Помимо
1НЫХ физиологических переменных, воспалительные процессы вызывают увеличение
ичества белков сыворотки в CSF. Кроме того, также в CSF может выделяться
луноглобулин, как следствие процесса синтеза антител в рамках центральной нервной
темы (CNS)' Чтобы получить надежные результаты при тесте белков CSF
)бходимо использовать методы, обеспечивающие дифференциацию в рамках пробь!
IKOB CSF, полученной из сыворотки, и пробы, полученной при внутриоболочечном
гтезе. Здесь помощь при диагностике обеспечивается подсчетом подходящих
ффициентов концентрации.
i оценке альбумин используется в качестве эталонного белка для проверки барьерной
нкции крови/CSF, так как он синтезируется исключительно а печени. Даже в случае
ологий CSF альбумин производится исключительно в крови. Это означает, что при
ющи соотношения альбумина CSF/сыворотки можно измерять индивидуальную
|ьерную функцию как при нормальном состоянии, так и в патологическом. Используя
му частных Райбера (Reiber) и Фельгенхауэра (Felgenhauer) для IgG, IgA и IgM, можно
1Гностировать нарушения барьерной функции и/или наличие анутриоболочечного
теза иммуноглобулина при помощи отношения альбумина CSF/сыворотки. Локальный
тез IgA в CNS лучше всего заметен у пациентов с бактериальными инфекциями и имеет
еделенное отношение к диагностике туберкулезного менингита'^.
:нова методики
тицы полистирола, нафуженные антителами, характерными для человеческого IgA при
1шении с пробами, содержащими человеческий IgA, агрегируются При облучении
том агрегат рассеивает световой пучок. Интенсивность рассеивания света зависит от
центрации соответствующего белка в пробе. Оценка выполняется путем сравнения со
ндартной заданной концентрацией
^активы
{доставляемые материалы
'атекс IgA. код OQAI
|А Реагент 3, три пробирки по 2 мл в каждой
|А Стандарт (челов ), три пробирки по 1 мл в каждой
(А Контроль (челов.), три пробирки по 1 мл в каждой
(А Дополнительный реагент А, три пробирки по 1 мл в каждой
|А Дополнительный реагент В, одна пробирка на 0,5 мп
:тав и стандартизация
|А Реагент состоит из замороженных сухих частиц полистирола, нагруженнь 1х
1ттелами (кроликов) против IgA. N IgA Стандарт (челов.) состоит из смеси сывороток
овеческой крови. После восстановления, концентрация IgA в стандарте соответствует
эначенной на наклейке.
|А Контроль (челов.) состоит из смеси сывороток человеческой крови. После
становления, концентрация IgA в контроле соответствует обозначенной на наклейке,
центрации N IgA Стандарта и N IgA Контроля откалиброваны в соответствии с
цедурой подготовки CRM 470^ *.
|А Дополнительный реагент А состоит из физиологического раствора пирролидона
<с. 100 г/л) иТвина 20 (макс. 10 г/л).
|А Дополнительный реагент В состоит из раствора животного и человеческого белка,
1юке пирролидона (приблизительно 50 г/л).
сервант
lA Реагент, N IgA Стандарт, N IgA Контроль после восстановления, а также N IgA
опнительные реагенты;
д соды < 1 г\л
щупреждения и меры предосторожности
Голько для in vitro диапностики.
;:одвржит азид соды. Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
здыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид соды
/пая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
»1Воопасныв соединения.
(аждый образец крови, предназначенный как для производства N IgA Реагента. N IgA
ндарта (челов.), N IgA Контроля (челов.) и N IgA Дополнительного реагента В был
тестирован на антиген гепатита, анти-HCV, анти-HIVI и aHTM-HIV2 при помощи метода
к Только образцы с отрицательными результатами используются для производства
I не менее, пока отсутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
Лизами, взятыми у человека, и продукцией (стандартная и контрольная сыворотка)
4Т обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для работь! с
логически опасными веществами®.
(готовка реагентов
[А Реагент: смешайте лиофилизированное содержимое пробирки с 2 мл
тиллированной воды и оставьте на 15 минут перед использованием. Перед первым
ользованием необходимо аккуратно перемешать
|А Стандарт (челов.): Растворите лиофилизированное содержимое пробирки 1,0 мл
тиллированной воды. Аккуратно перемешайте. Стандарт готов к использованию через
линут после восстановления.
|А Контроль (челов.): Растворите лиофилизированное содержимое пробирки 1,0 мл
тиллированной воды. Аккуратно перемешайте. Контроль готов к использованию через
линут после восстановления.
|А Дополнительные реагенты: при помощи пипетки перенесите 25 мп N IgA
юлнительного реагента В в одну пробирку с N IgA Дополнительным реагентом А и
/ратно перемешайте.
1нение и устойчивость
ойчивость при температуре от +2 до +8 °С
ж годности указан на наклейке.
ойчивость после открывания:
5дели (восстановленный N IgA Реагент, N IgA Стандарт, N IgA Контроль и смесь N IgA
юпнительных реагентов), хранение при температуре от +2 до +8° С, необходимо плотно
зьп-ь пробирку сразу после использования,
замораживайте реактивы. Помутневшие стандартные и/или контрольные сыворотки
ольэовать запрещается.
ойчивость в приборе.
менее трех дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени.
1мечание. Устойчивость в приборе зависит от используемой системы 6N*. а таюке
ораторных условий. Для получения более подробной информации см. руководство по
плуатации систем BN* И и BN ProSpec®. Устойчивость в системе BN* ProSpec® N IgA
троля указана в руководстве по эксплуатации системы
)бходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
тема BN*
Белковый контроль 1С(доп.), код OQLW
азбавитель, код OUMT
’ II Антиисларительная пробка (доп.), код OVLE
ггупные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*.
юбы
(ходящими являются пробы человеческой CSF и парные CSF/сыворотка, либо свежие
(хранение не более 8 дней при температуре от +2 до +8°С), либо в замороженном виде
хранимые при температуре -20* С не более 6 месяцев®. Пробы CSF и сыворотки должн!
браться одновременно. Каждая проба CSF должна быть центрифугирована перед
анализом. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-либ(
частиц или следов фибрина после центрифугирования. Лилемические или замороженн!
пробы, мутные после оттаивания, должны быть очищены центрифугированием (10 мин;
приблизительно на 15.000 х г) до анализа.
Методика
Примечания
1 Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
инструкций.
2. Совместно разрешается использовать только компоненты из тестовых наборов с
одинаковым номером партии.
3 Лиофилизированные реагенты запрещается использовать до полного восстановлен!
(не менее 15 минут после добавления дистиллированной воды).
4. Оставьте реагенть! и пробы до тех пор, пока они не достигнут комнатной температур
(+15 - +25* С) перед использованием с системой BN* 100. При работе с системами BN*
BN ProSpec® пробы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8* С, можно
использовать сразу.
5. В системе BN* 100 пробы должны анализироваться приблизительно при температур
окружающей среды (максимальное отклонение 3*С), так как результаты измерений
используются для создания референсной фивой.
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови и CSF включен в руководство, так же как и в
программном обеспечении для соответствующего оборудования. Для проб сыворотки
начальная степень разбавления должна быть задана вручную, последующие шаги буду
отработаны системой автоматически.
Расчет эталонной кривой
Референсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки. Расчет
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N IgA Стандарта с N
Разбавителем. Растворы должны быть использованы в течение 4 часов. Приписанное
значение дано во вложенной таблице. Для ввода приписанных значений в систему BN
ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код OVLP).
Референсную кривую можно использовать в течение 1 недели и может использоваться
дольше, если контролируется точность, например, N IgA Контроль или N/T Белковый
контроль LC остаются в пределах соответствующего интервала доверия Референсная
кривая может использоваться для выявления IgA как в CSF, так и в сыворотке. Новая
референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов.
Точный диапазон измерений зависит от концентрации аналита е каждой партии N IgA
Стандарта. Стандартные значения указаны в соответствующем руководстве по
эксплуатации системы BN"
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы CSF автоматически разбавляются в соотношении 1 5 и анализируются. Для
образцов сыворотки необходимо выбирать коэффициент разбавления 1 2 ООО. Расгво;
должны быть исследованы в течение 4 часов. Для результатов, находящихся вне
диапазона измерений, исследование можно повторить с более высокой или более низке
степенью разбавления проб (только для сыворотки), для выявления IgA в сыворотке
минимальный коэффициент разбавления составляет 1 400. Повторные исследования с
дальнейшим разбавлением проб описаны в руководстве по системам BN*. Для вычисле
отношения IgA CSF к сыворотке рекомендуется таюке выполнить анализ сыворотки при
помощи N Латекс IgA и произвести анализ этих образцов одновременно с пробами CSF
Внутренний контроль качества
Анализ N IgA Контроля или МЯ Белкового контроля LC должен проводиться после кажд
расчета референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так ж(
для каждого измерения проб. Контрольнью пробы исследуются и оцениваются так же, к
тестируемые образцы. Приписанное значение N IgA Контроля напечатано на наклейке г
пробирке. Интервал доверия для приписанных значений составляет ±20 %. Заданное
значение и доверительный интервал для МЯ Белкового контроля LC даны в
соответствующей Таблице приписанных значений. Для ввода приписанных значений в
систему BN ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код
OVLP). Данные приписанные значения предназначены для использования в качестве
контроля точности аналази. При использовании в целях контроля точности, польэовате!
должен ввести конечную концентрацию и интервалы доверия во время предварительно
настройки Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала
доверия, контрольный анализ необходимо повторить. Если отклонение подтверждается
повторным измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая. Результа!
пациента не должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не
устранена.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции.
Ограничения анализа
Концентрации триглицерида до 19,2 г/л, билирубина до 600 мг/л и свободного гемоглоб!
до 10 г/л не оказывают воздействия на измерения.
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
Лилемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно 15.000 х г) должны быть исключены из испытаний. Проверка результат:
IgA в CSF должна выполняться при помощи диаграмм коэффициентов’- В случав
получения сомнительных результатов, необходимо повторить измерения с более
разбавленными пробами. Если перед проведением анализа CSF на системах BN* 100 и
BN* II проводились тесты образцов с высоким уровнем IgA, результаты, полученные дш
IgA в CSF могут быть завышены из-за условий работы (например, часто используемые
кюветы). Таким образом, по возможности определение IgA в CSF должно проводиться
перед анализом сыворотки. Необходимо обращаться с должной осторожностью с
результатами анализа несоответствующими клинической картине и истории болезни
пациента.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку эт!
результатов методом удельных заданных значений. Полученные результаты анализов
всегда должны интерпретироваться совместно с историей болезни, клинической картин
пациента, а так же с результатами других медицинских обследований.
Эталонный интервал
Верхний предел для интервала доверия для IgA в CSF состаствляет 5 мг/л (2, в
соответствии с CRM 470). Полученное значение дано только в качестве ориентировочнс
Строго говоря, референсные диапазоны в соотношении CSF/сыворотка зависят от
соотношения альбумины CSF/сыворотки''^. Кроме того, каждая лаборатория олределяе
свой собственный эталонный интервал, с учетом многих переменных, которые могут
отличаться для каждой изученной группы жителей
--- стр. 19 ---
Антисыворотка к иммуноглобулинам человека (IgG, IgA и IgM)
класть применения
генты для in vilro диагностики для количественного определения иммуноглобулинов
I. IgA и IgM) в сыворотке человеческой крови, геларинизированной и EDTA плазме, а
* IgG в моче человека и спинномозговой жидкости (CSF) при помощи
влометрического имунноанализа на системах BN*
нспект и пояснения
(уноглобулины формируются клетками плазмы как гуморальный иммунный отклик на
модействие иммунной системы с антигенами Основной реакцией после первичного
акта является формирование антител класса IgM и следующим за ним формированием
тел IgG и IgA. Количественное определение иммуноглобулина предоставляет
ормацию. необходимую для определения гуморального иммунного состояния',
йженный уровень иммуноглобулина в сьгворотке наблюдается при основном
унодефицитом состоянии и вторичной иммунной недостаточности, например при
рессирующих злокачественных опухолях, лимфатической лейкемии, множественных
гюмах и болезни Вальденштрома. Повышенный уровень иммуноглобулина может
юдаться при поликлональной или олигоклональной пролиферации 1д. например при
теваниях печени (гепатит, цирроз печени), острых и хронических инфекциях,
иммунных заболеваниях, а также в пуповинной крови новорожденных с
риматочными и перинатальными инфекциями Разрастание моноклонального
уноглобулина наблюдается при плаэмацистомах, болезни Вальденштрома и
теваниях с тяжелыми цепями иммуноглобулина Моноклональная иммуноглобупинемия
рует подробной дифференциальной диагностики в дополнение к качественному анализу
шьные иммунные реакции в центральной нервной системе приводят к повышенному
1НЮ иммуноглобулина, особенно IgG, в спинномозговой жидкости^'^. Повышенное
•ржание IgG в моче определяется у пациентов с неселективной гломерулярной
еинурии
нова методики
[ И , содержащиеся е человеческом теле, образуют иммуннь(е комплексы в ходе
иохимической реакции с некоторыми антителами Это приводит к рассеиванию
одящего через образец света Интенсивность рассеивания света зависит от
ентрации соответствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со
Вартной заданной концентрацией
активы
поставляемые материалы
тисыворотка для человеческого IgG, код OSAS или
гтисыворотка для человеческого IgA, код OSAR или
тисыворотка для человеческого IgM, код OSAT по одной пробирке по 5 или 2 мл е
,ой
тисывороткой является жидкая животная сыворотка, получаемая при вакцинации
иксе высоко очищенным человеческим иммуноглобулином (IgG, IgA или IgM) Титр
гел определяется при помощи радиальной иммунодиффузии и наносится на этикетки
ирок Титр отражает количество антиген е мг, которые осядут в агарозном геле при
влении 1 мг соответствующей антисыворотки Консервант
тисыворотка к человеческому IgG, IgA или IgM азид натрия < 1 г/л
{упреждения и меры предосторожности
злько для In vitro диагностики.
одержит азид натрия. Рекомендуется работать с веществом аккуратно:
в вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками Азид натрия,
;гупая в контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может
к>азовывать взрывоопасные соединения
отовка реагентов
тисыворотка готова к применению и может использоваться без дополнительной
тговки
«ние и устойчивость
йчивость при температуре от +2 до +8 *С
годности указан на наклейке
Живость после открытия
{ели при температуре от +2 до +8 *С, если плотно закрыть сразу после использования
(дотвратить возможности загрязнения (например, микроорганизмами).
>емя хранения, в антисыворотке может образоваться осадок или наблюдаться
тнение, однако, они не вызваны загрязнением раствора микроорганизмами и не
иеаются на его активности. В подобных случаях, акгисьеоротку необходимо отфильтровать
I использованием Для данной цели подойдут одноразовые фильтры с размером пор
э 0,45 мкм Не замораживайте реактивы
Живость в приборе:
внее пяти дней (по 8 часов в день) для 5 мл флаконов.
менее трех дней (по 8 часов в день) для 2 мл флаконов или сопоставимый промежуток
мчание: Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN* а также
лабораторных условий. Для получения более подробной информации см
руководство по эксплуатации систем BN* II и BN ProSpec®.
•ходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
ема BN*
лковый стандарт SL (челов ), код OQIM
ллковый контроль SL/L, М и Н (челов.), код OQIN, OQIO и OQIP
«лковый контроль 1С(чвлов ). код OQLW
{•ер реакции, код OUMS
}бз8итель. код Оимт
гюлнительный реагент/Осаждающий. код OUMU (для использования с протоколами
(налиэа IgA и IgM низкой концентрации)
I Антииспарительная пробка (доп.), код OVLE
упные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*
ЭбЫ
едящими являются пробы человеческой плазмы, геларинизированной плазмы или
А-плаэмы, либо в свежие (хранение не более 6 дней при температуре от *2 до -«-B’C)
в замороженном виде. Свежив образцы мочи и проб CSF также подходят для
ления IgG В случав, если требуется произвести парный анализ сыворотки и проб CSF
5ор образцов необходимо производить одновременно Образцы сыворотки и плазмы
г храниться до трех месяцев при температуре -20 *С, в случае, если они были
рожены в течение 24 часов после сбора и при условии отсутствия повторной
розки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-либо
щ или следов фибрина после центрифугирования. Липемические или замороженные
ы, мутные после оттаивания, должны бьггь отцентрифугированы (10 минут
пизительно на 15 ООО х г) до исследования Свежие лроизеольнь 1е или взятые по
жу образцы мочи подходят для тестирования иммуноглобулина Образцы мочи и CSF,
)ые хранились е замороженном виде должны быть исключены из анализа Каждая
а CSF должна быть центрифугирована перед анализом
годика
•ечания
вращайтесь к соответствующему руководству по системам ВМ*для подробных
•укций
гтавьте реагенты и пробы до тех пор, пока они не достигнут комнатной температуры
4 С . ПАГЧА П ^ DKI* ^ АА ПрМЛ А АIЛ АТ А ft J А К АIЛ □ к1 * II15 - +25* С) перед использованием с системой BN* 100. При работе с системами BN*
BN ProSpec® пробы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8* С, можно
пользовать сразу,
окол испытания для систем BN*
окол испытания для сыворотки крови и плазмы, а также для выявления CSF е моче,
чем в руководство, так же как и Программное обеспечение для соответствующего
/дования. Все действия выполняются системой автоматически
ет референсной кривой
•ренсные кривые строятся при мультиточечной калибровке. Расчет производится
4атически сериями, образуется раствор N Белкового стандарта SL с N Разбавителем.
Растворы должны быть использованы в течение 4 часов
Референсную кривую можно использовать для точности коктролей, например, N/1
Белковый контроль SL/L, М и Н для сыворотки и плазмы или N/T Белковь 1Й контроль LC дл?
выявления IgG в моче и CSF, остаются в пределах соответствующего доеерительногс
интервала Новая референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов
Исследование проб, взятых у пациентов
Пробы сыворотки и плазмы автоматически разбавляются 1:400 (IgG), 1:20 (IgA, IgM) bkb l.f
для испытаний с низкой концентрацией веществ (IgA, IgM) с N Разбавителем. Растворь
должны быть исследованы в течение 4 часов. IgG в пробах мочи или CSF измеряются бе:
разбавления при помощи специальных протоколов. IgG в сыворотке и CSF также могут
быть исследованы при помощи одной референсной кривой, с учетом того, что степень
разбавления устанавливается вручную.
Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследование можно повторить с
более высокой или более низкой степенью разбавления проб (IgG в сыворотке/плазме). См
руководство по системе BN* для получения сведений о повторных измерениях с другими
степенями разбавления В случае, если показания для стандартного протокола испытаниР
на IgA или IgM (разбавление 1 20) расположены ниже интервала измерения, можно провестк
повторное исльггания с соответствующим протоколом для низких концентраций по новому
запросу
Внутренний контроль качества
Анализ N/T Белкового контроля SL/L, М, Н должен проводиться после каждого расчете
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же дпг
каждого измерения образцов Для определения уровня иммуноглобина в образцах мочи ил^
CSF, необходимо использовать N/T Белковый контроль LC. Контрольные пробы исследуютсг
и оцениваются так же. как и тестируемые образцы. Заданное значение и доверительны!/
интервал для контроля даны е соответствующей Таблице приписанных значений.
Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия, контрольный
анализ необходимо повторить Если отклонение подтверждается повторным измерением,
должна быть вычислена новая референсная кривая. Результаты пациента не должны быть
оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена
Результаты
Оценка выполняется автоматически е г/л или в любых единицах, определяемых пользователем
системы BN*
Ограничения анализа
Влияния со стороны концентраций триглицерида до 19 г/л (IgG), 5.7 г/л (IgA), 9,9 г/г
(протокол низкой концентрации IgA) и 4,6 г/л (протокол низкой концентрации IgM),
билирубина до 600 мг/л и свободного гемоглобина до 10 г/л. в сыворотке выявлено не было.
Воздействия со стороны широко распространенных лекарств не выявлено Мутные пробы i/
содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа. Пробы, содержащие
осадок, должны быть центрифугированы перед анализом. Анализы иммуноглобулина были
разработаны для того, чтобы минимизировать избыток антигена в стандартном растворе
проб Однако, полностью исключить подобное влияние невозможно, из-за чего при высокой
концентрации иммуноглобулина возможно появление заниженных результатов Особенно
моноклональный иммуноглобулин может показывать реакцию, отличную от
поликлонального стандарта, что. в отдельных случаях, может привести к искусственно
заниженным или нелинейным результатам В случав определения сыворотки или плазмы,
необходимо задать соответствующий IgG, IgA или IgM Проверка результатов IgG в CSF
должна выполняться при помощи диафамм коэ({^ициентов *. В случае получения
сомнительных результатов, необходимо повторить измерения с более разбавленными
пробами При мониторинге пациента, ре<улярное выявление иммуноглобулина должно
выполняться при том же коэффициенте раэоавпения проб, до тех пор пока это возможно.
Компания Dade Behring провела тестирование на использование данных реагентов с
различными анализаторами в целях оптимизации производительности и соответствия
требованиям, предъявляемых к продукции. Компания не поддерживает пользовательские
изменения, так как они могут повлиять на производительность системы и результать!
анализа. Пользователь по собственному усмотрению при утверждении изменений может
использовать данные инструкции, реагенты, не входящие в комплект поставки Dade
Behring. Полученные результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно с
историей болезни, клинической картиной пациента, а так же с результатами других
медицинских обследований
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытнь1е результать! исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих
результатов методом удельных заданных значений
Эталонный интервал
Нижеследующий эталонный интервал подходит для проб сыворотки и плазмы здоровых
взрослых людей®.
Белок
IgG
IgA
IgM
7,0
0,7
0,4
16,0 г/л
4,0 r/л
2,3 л/л
Эталомнь^е интервалы для IgG, IgA, IgM в педиатрии могут сильно зависеть от возраста и
составлять достаточно обширмьм диапазон Эталонный интервал для IgG в образцах мочи
Уровень IgG в моче на следующее утро ниже 9,6 мг/л в соответствии с , значение
пересчитано в соответствии с процедурой подготовки протеина CRM 470. Эталонный
интервал для IgG в образцах CSF:
IgG в CSF ниже 34 мг/л^, (после конвертации в соответствии с CRM 470); данное значение
приведено в качестве справочного. Грубо говоря, референсные интервалы существуют
только для соотношений CSF/сыворотка’ ^.
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный интервал, с
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей.
Особые рабочие характеристики
Чувствительность и диапазон измерений
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте SL. Стандартные диапазоны
измерений даны в руководстве по эксплуатации системы BN.
Специфичность
N Актисыворотка к человеческим IgG, IgA и IgM специфичны, соответственно, только для у-
цепей. а-целей и р-цепей иммуноглобулина. Взаимная реакция используемой иммунной
сыворотки не выявлена.
Точность
при исследовании N Антисыворотки к человеческому иммуноглобулину на системе BN*.
были получены следующие коэффициенты вариации (CV)
--- стр. 20 ---
Латекс IgM
ласть применения
екть 1 для in vitro диагностики для количественного определения IgM в спинномозговой
Ыдкости (CSF) и в парных образцах CSF и сыворотки при помощи нефелометрического
|иунноанапиза на системах BN* Выявление IgM позволяет упростить оценку состояния
■ммунной системы пациента
Конспект и пояснения
Ьнцектрация белков сыворотки в CSF показывает установившееся состояние, где самыми
ажными параметрами являются диффузия между кровью и CSF (проходимость) и поток
амой CSF. Также на результат оказывают влияние возрастные изменения Помимо данных
физиологических переменных, воспалительные процессы вызывают увеличение количества
клков сыворотки в CSF. Кроме того, также в CSF может выделяться иммуноглобулин, как
ледствие процесса синтеза антител в рамках центральной нервной системы (CNS)'' ^
Кобы получить надежные результаты при тесте белков CSF необходимо использовать
ютоды. обеспечивающие дифференциацию в рамках пробы белков CSF, полученной из
ыворотки. и пробы, полученной при внутриобопочечном синтезе Здесь, помощь при
1иагностике обеспечивается подсчетом подходящих коэффициентов концентрации
1ри оценке, альбумин используется в качестве эталонного белка для проверки барьерной
|»ункщ1и крови/CSF, так как он синтезируется исключительно в печени Даже в случав
нтологий CSF альбумин производится исключительно в крови. Это означает, что при
омощи соотношения альбумина CSF/сыворотки можно измерять индивидуальную
карьерную функцию как при нормальном состоянии, так и при патологиях. Используя схему
встных Райбера (Reiber) и Фельгенхауэра (Felgenhauer) для IgG, IgA и IgM. можно
1иагностировать нарушения барьерной функции и/или наличие внутриоболочечного синтеза
ммуноглобулина при помощи отношения альбумина CSF/сыворотки. Локальный синтез IgM
I CNS лучше всего заметен у пациентов с невроборрелиосом или парото-
•енингоэнцефапита'' ^
Основа методики
1астицы полистирола, нагруженные антителами, характерными для человеческого IgM, при
мешении с пробами, содержащими человеческий IgM, агрегируются При облучении
ветом агрегат рассеивает световой пучок Интенсивность рассеивания света зависит от
онцентрации соответствующего белка в пробе. Оценка выполняется путем сравнения со
тандартной заданной концентрацией
>еактивы
1редоставляемые материалы
1 Латекс 1дМ. код OQAC
I IgM Реагент 3 три пробирки по 2 мл в каждой
I IgM Стандарт (челов.), три пробирки по 1 мл в каждой
I IgM Контроль (челов ), три пробирки по 1 мл в каждой
I IgM Дополнительный реагент А, три пробирки по 1 мл в каждой
I IgM Дополнительный реагент В, одна пробирка на 0,5 мл
1остав и стандартизация
I IgM Реагент состоит из замороженных сухих частиц полистирола, нагруженных 0,03 г/л
кгителами (кроликов) против IgM.
I IgM Стандарт (челов ) состоит из замороженной сухой смеси сывороток человеческой
>ови. После восстановления, концентрация IgM в стандарте соответствует обозначенной на
вклейке.
IgM Контроль (челов.) состоит из замороженной сухой смеси сывороток человеческой
юви. После восстановления, концентрация IgM в контроле соответствует обозначенной на
вклейке
онцентрации N IgM Стандарта и N IgM Контроля откалиброваны в соответствии с
ооцедурой подготовки CRM 470* *
IgM Дополнительный реагент А состоит из водного раствора полиоксиэтилен сорбита
онолаурата (макс 70 г/л).
IgM Дополнительный реагент В состоит из антисыворотки к IgG овцы (500 г/л) и
аловеческого гамма глобулина (50 г/л). Консервакт
IgM Реагент. N IgM Стандарт. N IgM Контроль после восстановления, а также N IgM
ополкительные реагенты:
эид соды < 1 г\л
редупреждения и меры предосторожности
Только для in vitro диатостики.
Содержит азид соды. Рекомендуется работать с веществом аккуратно,
е вдыхать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками. Азид соды вступая
контакт с тяжелыми металлами, такими как медь и свинец, может образовывать
(рывоопасные соединения
Каждый образец крови, предназначенный как для производства N IgM Реагента. N IgM
тамдарта (челов ), N IgM Контроля (челов ) и N IgM Дополнительного реагента В был
^тестирован на антиген гепатита, анти-HCV, анти-HIVI и анти-Н1\/2 при помощи метода
DA.
элько образцы с отрицательными результатами используются для производства Тем не
внее, пока отсутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
зализами, взятыми у человека, и продукцией (стандартная и контрольная сыворотка) стоит
Зращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для работы с биологически
1ЭСНЫМИ веществами^
одготовка реагентов
IgM Реагент: смешайте лиофилизированное содержимое пробирки с 2 мп
жггиллированной воды и оставьте на 15 минут перед использованием Перед первым
пользованием необходимо аккуратно перемешать
IgM Стандарт (челов.): Растворите лиофилизированное содержимое пробирки 1 мл
Астиллированной воды. Аккуратно перемешайте Стандарт готов к использованию через 15
пнут после восстановления.
IgM Контроль (челов.): Растворите лиофилизированное содержимое пробирки 1 мл
«стиллированной воды Аккуратно перемешайте Контроль готов к использованию через 15
йнут после восстамовлемия
IgM Дополнительные реагенты: при помощи пипетки перенесите 25 мл N IgM
ополнительмого реагента В в одну пробирку с N IgM Дополнительным реагентом А и
осуратно перемешайте
ранение и устойчивость
ггойчивость при температуре от *2 до *8 *С:
рок годности указан на наклейке.
^тойчивосгь после открьггия.
недели (восстановленный N IgM Реагент, N IgM Стандарт, N IgM Контроль и смесь N IgM
ополмительных реагентов), хранение при температуре от +2 до +8* С, необходимо плотно
жрыть пробирку сразу после использования.
в замораживайте реактивы Помутневшие стандартные и/или контрольные сыворотки
этольэовать запрещается
:тойчивость в приборе
Л'ойчивость в приборе N IgM Реагента и смеси N IgM Дополнительных реагентов зависит
г используемой системы BN*. а также лабораторных условий Не следует оставлять
«кость с реагентами для системы BN* 100 или BN* II открытыми, вместо чего
жомендовамо закрыть емкость сразу после использования и хранить при температуре от
>до +8* С. Для получения более подробной информации см. руководство по эксплуатации
ютемы BN ProSpec®. Устойчивость в системе BN* ProSpec® N N IgM Контроля указана а
'ководстве по эксплуатации системы
еобходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
Астема BN*
Т Белковый контроль 1С(доп.), код OQLW
Разбавитель, код OUMT
VI* II Антииспарительмая пробка (доп.), код OVLE
зступные запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*
(хранение не более 8 дней при температуре от +2 до +8*С). либо в замороженном ви^
хранимые при температуре -20* С не более 6 месяцев® Пробы CSF и сыворотки доля
браться одновременно. Каждая проба CSF должна быть центрифугирована перед
анализом Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-nv
частиц или следов фибрина после центрифугирования. Липемические или заморожен
пробы, мутные после оттаивания, должны быть очищены центрифугированием (10 mi
приблизительно на 15 ООО х г) до анализа
Методика
Примечания
1 Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
инструкций.
2 Совместно разрешается использовать только компоненты из тестовых наборов с
одинаковым номером партии
3. Лиофилизироваммьге реагенты запрещается использовать до полного восстановлб
(не менее 15 минут после добавления дистиллированной воды).
4 Оставьте реагенть! и пробы до тех пор, пока они не достигнут комнатной температ
(+15 • +25“ С) перед использованием с системой BN* 100. При работе с системами Bh
BN ProSpec® нет необходимости ждать, пока пробы достигнут комнатной температур
Пробы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8“ С можно использовать сразу
5 В системе BN* 100 пробы должны анализироваться приблизительно при температ
окружающей среды (максимальное отклонение 2*С), так как результаты измерений
используются для создания референсной кривой
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испьггания для сыворотки крови и CSF включен в руководство, так же как и
программном обеспечении для соответствующего оборудования. Для проб сыворотка
начальная степень разбавления должна быть задана вручную, последующие шаги бу
отработаны системой автоматически.
Расчет эталонной кривой
Референсныв кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки Расчет
производится автоматически сериями, образуется слабый раствор N IgM Стандарта с
Разбавителем Растворы должны быть использованы в течение 4 часов. Приписанно<
значение дано во вложенной таблице. Для ввода приписанных значений в систему ВГ
ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код OVLP).
Референсную кривую можно использовать в течение 1 недели и может использоваты
дольше, если контролируется точность, например, N IgM Контроль или МЯ Белковый
контроль LC остаются в пределах соответствующего интервала доверия. Референснг
кривая может использоваться для выявления IgM как в CSF, так и в сыворотке. Новая
референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов. Точный диапаэо!
измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N IgM Стандарта.
Стандартные значения указаны в соответствующем руководстве по эксплуатации сис
BN*
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы CSF анализируются без рабавления Для образцов сыворотки необходимо
выбирать коэффициент разбавления 1 2 ООО Растворы должны быть исследованы е
течение 4 часов Для результатов, находящихся вне диапазона измерений, исследовг
можно повторить с более высокой или более низкой степенью разбавления проб (тол
для сыворотки), для выявления IgM в сыворотке минимальный коэффициент разбавл
составляет 1 400 Повторные исследования с дальнейшим разбавлением проб описа
руководстве по системам BN* Для вычисления отношения IgM CSF к сыворотке
рекомендуется также выполнить анализ сыворотки при помощи N Латекс IgM и проиэ!
анализ этих образцов одновременно с пробами CSF.
Внутренний контроль качества
Анализ N IgM Контроля или МЯ Белкового контроля LC должен проводиться после ка
расчета референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так
для каждого измерения проб. Контрольные пробы исследуются и оцениваются так же,
тестируемые образцы Приписанное значение N IgM Контроля напечатано на наклейк
пробирке Интервал доверия для приписанных значений составляет ±20%. Заданное
значение и доверительный интервал для МЯ Белкового контроля LC даны в
соответствующей Таблице приписанных значений. Для ввода приписанных значений i
систему BN ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код
OVLP). Указанные приписанные значения предназначены для использования в
лаборатории в качестве контроля при оценке точности и референсных кривых. При
использовании в целях контроля точности, пользователь должен ввести конечную
концентрацию и интервалы доверия во время предварительной настройки. Если резу,
контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия, контрольный анали:
необходимо повторить. Если отклонение подтверждается повторным измерением, до:
быть вь 1числена новая референсная кривая. Результаты пациента не должны быть
оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции.
Ограничения анализа
Концентрации триглицерида до 20 г/л, билирубина до 600 мг/л и свободного гемоглоб
до 10 г/л не оказывают воздействия на измерения
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа
Пробы, содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом.
Липемические пробы, которые не очищаются центрифугированием (10 минут
приблизительно 15 ООО х г) должны быть исключены из испытаний N Латекс IgM был
разработан для того, чтобы минимизировать избыток антигена в стандартном pacreoi:
проб Однако, полностью исключить подобное влияние невозможно, из-за чего при вь
концентрации IgM возможно появление заниженных результатов Особенно
моноклональный иммуноглобулин может показывать реакцию, отличную от
поликлонального стандарта, что. в отдельных случаях, может привести к искусственн!
заниженным или нелинейным результатам. Проверка результатов IgM в CSF должна
выполняться при помощи диаграмм коэффициентов'' В случае получения сомнител
результатов, необходимо повторить измерения с более разбавленными пробами. Есл
перед проведением анализа CSF на системах BN* 100 и BN* II проводились тесты
образцов с высоким уровнем IgM (например, макроглобулинемия Вальденштрома),
результаты, полученные для IgM в CSF, могут быть завышены из-за условий работы
(например, часто используемые юоветы). Таким образом, по возможности определен 1>
в CSF должно проводиться перед анализом сыворотки Полученные результаты анал!
всегда должны интерпретироваться совместно с историей болезни, клинической карп
пациента, а так же с результатами других медицинских обследований.
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для кон-фоля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от вьйранног
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку :
результатов методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
При исследовании 220 пациентов из Центральной Европы с нормальным соотношени
альбумина CSF/сыворотки и отсутствием признаков воспалительных процессов, eepxi
предел интервала доверия (95 процентиль) для IgM в CSF составил 1,3 мг/л (7 в
соответствии с CRM 470) Полученное значение дано только в качестве ориентира. Ci
говоря, референсныв диапазоны в соотношении CSF/сыворотка зависят от соотношеь
альбумина CSF/сыворотки’ ^
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный эталонный интервал, >
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы
жителей
1робы
эдходящими являются пробы человеческой CSF и парнью CSF/сыворотка, либо свежие
--- стр. 21 ---
Латекс Ьг-микроглобулин
бласть применения
агенты для In vitro диагностики для количественного определения Ьг-микроглобулина в
воротке человеческой крови, гепариниэированной или EDTA плазме, а также в моче, при
мощи нефелометрического имунноанализа на системах BN*.
онспект и пояснения
)лекулярная масса Ьз-микроглобулина составляет 11,800 дальтонов и характерна для всех
росодержащих клеток как компонент HLA комплекса. Он регулярно подается в кровь в
больших количествах. Ьз-свободно проходит через почки, где он абсорбируется и
ещепляется в почечных каналах. Поэтому уровни в сыворотке здоровых людей остается
ааточно низким, а в моче Ьз-микроглобулин практически не обнаруживается’. Повышение
нцектрации в сыворотке является следствием большей эмиссии Ьз-микроглобулина из-за
•ешнной активности иммунной системы, например в случаях инфекционных или
■магических заболеваний, отмирания клеток или пониженной элиминации из-за
вреждения почек. Таким образом, концентрация Ьз-микроглобулина является качественным
изателем скорости гломерулярной фильтрации почек, особенно у детей ’'®. Повышение
овня Ьгмикроглобулина в моче, как правило, указывает на тубулярные повреждения, таким
ipasoM. исследования Ьз-микроглобулина в моче позволяют получить ценную информацию
и диагностики и мониторинга тубулоинтерстиальных почечных травм Чрезмерно высокий
оеень в сыворотке пациентов с диализом может привести к амилоидозу Ьз-микроглобулина'.
злее того, уровень Ь^-микрогпобулина в сыворотке является хорошим показателем
«жеавенной миеломы , а также подходит для мониторинга и лечения лимфатической
юплазии Повышенный уровень Ьз-микроглобулина в сыворотке также может проявляться
ри ВИЧ инфекциях и играть значительную роль при прогнозировании и терапевтическом
юниторинге
'эк как концентрация Ьз-микроглобулина в сыворотке может быть повышенной при различных
■болеваниях, ее диагностическое применение все должно следовать за четким клиническим
опросом и должно вытекать из наличия других, схожих заболеваний’. Ее специфичность для
пучаев с повышенной пролиферацией клеток, может быть улучшена заданием соотношения
(* 1икроглобулин/цистатин С®
)снова методики
йсгиф91 полистирола, нафуженные антителами, характерными для человеческого Ьз-
■кроглобулина при смешении с пробами, содержащими человеческий Ьз-микроглобулин,
грегируются. При облучении светом агрегат рассеивает световой пучок. Интенсивность
•ссеивания света зависит от концентрации соответствующего белка в пробе Оценка
июлняется путем сравнения со стандартной заданной концентрацией.
^еактивы
|редоставляемые материалы
1Латекс Ьз-микроглобулин, код OQWU
I Латекс Ьз-микроглобулин Реагент, 3 пробирки по 3 мл в каждой
Ибилизатор мочи, 1 ампула по 2 мл
Остав
1Латекс Ьз-микроглобулин Реагент состоит из суспензии частиц полистирола, нафуженных
Вноклональными антителами к Ьз-микроглобулину (мышь).
Ибилиэатор мочи содержит раствор с растворителем,
онсервант
[Латекс Ьз-микроглобулин Реагент: Гентамицин сульфат 6,25 мг/л, амфотерцин 0,625 мг/л
редупреждения и меры предосторожности
, Только для in vitro диагностики.
Каждый образец донорской крови для производства N Латекс Ьз-микроглобулин Реагент
проверяется на HBsAg, анти-HCV, анти-HIVI и анти-Н1У2 методами, утверждеиными
Управлением по контролю за продуктами и лекарствами (США).
Только образцы с отрицательными результатами используются для производства. Тем не
менее, пока отсутствие возбудителей инфекции не будет подтверждено, со всеми
8налиэами(сыворотка и плазма), взятыми у человека, и продукцией, полученной из крови
человека, стоит обращаться с должной осторожностью, соблюдая рекомендации для
работы с биологически опасными веществами^,
одготовка реактивов
Латекс Ьз-микроглобулин Реагент поставляется готовым к использованию. Перед первым
пользованием необходимо аккуратно перемешать.
ибилизатор мочи поставляется готовым к использованию.
мнение и устойчивость
атйчивость при температуре о т +2 до +8 *С
зок годности указан на наклейке
тойчивость после открытия:
jTbipe недели, если плотно закрыть сразу после использования и хранить при температуре
♦2 до +8 X
■ замораживайте реактивы.
тойчивость е приборе:
i менее пяти дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени.
|жмечание: Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN*, а также
1бораторных условий. Для получения более подробной информации см. руководство по
сплуатации систем BN* II и 8N ProSpec®.
■обходимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
стема BN*
Белковый стандарт SL (челов.), код OQIM
Т Белковый контроль SL/L (челов.), код OQIN
Т Белковый контроль SUM (челов ), код 0010
Т Белковый контроль SUH (челов.), код OOIP
Дополнительный реагент L, код OQTD
Разбавитель, код OUMT
II Актиисларительная пробка (доп.), код OVLE
N Раствор гидроксида натрия (для ощелачивания образцов мочи)
ктупмые запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*.
1робы
здходящими являются пробы человеческой сыворотки и плазмы (гепариниэированной или
ЭТА), либо свежие (хранение не более 8 дней при температуре от +2 до +8°С), либо в
мороженном виде, а также свежие образцы мочи Образцы сыворотки и плазмы могут
вниться до 2 месяцев при температуре -18 ®С, в случае, если они были заморожены в
нение 24 часов после сбора и при условии отсутствия повторной заморозки. Сыворотка
«жна быть полностью свернувшейся и не содержать каких-либо частиц или следов фибрина
еле ценфифугирования. Для определения Ьз-микроглобулина в моче могут использоваться
к образцы, забор которых производился по графику, так и без него. Не рекомендуется
пользовать образцы мочи, хранимые в замороженном виде Каждый образец моче должен
ль отцентрифугирован перед использованием, после чего 1 капля стабилизатора мочи
шжна быть добавлена к 1 мл центрифугированного образца мочи, после чего образец
■обходимо тщательно перемешать. Липемические или замороженные пробы, мутные после
таивания. должны быть очищены центрифугированием (10 минут приблизительно на 15.000
‘)до анализа.
тя выявления Ьз.микроглобулима в образцах мочи с уровнем pH <6,0 необходимо вывести pH
шанс до уровня 7-9 добавлением 1 N NaOH как можно скорее после получения.
5разцы мочи, содержащие стабилизатор мочи для определения Ьз-микроглобулина не могут
пользоваться для анализа общего количества белка на системах BN*.
1етодика
жмечания
Обращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
сгрукций.
Не используйте реагенты с истекшим сроком годности.
3. Перед использованием реагентов в системах BN'A/BN* 100, выдержите их при KOf
температуре (от 15 до +25 X ). При работе с системами BN* II и BN ProSpec® г
реагенты, хранимые при температуре +2 - +8‘’С, можно использовать сразу.
4. В системе BN* А и BN* 100 пробы должны анализироваться приблизитель
температуре окружающей среды (максимальное отклонение 2"С), так как реэ;
измерений используются для создания референсной кривой.
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови, плазмы и мочи, включен в руководство, так >
Программное обеспечение для соответствующего оборудования. Все действия выполн!
системой автоматически.
Расчет референсной кривой
Референсные кривые строятся при помощи мультиточечной калибровки. Расчет произ
автоматически сериями, образуется слабый раствор N Белкового стандарта S
Разбавителем Растворы должны быть использованы в течение 4 часов. Референсную
можно использовать в течение 4 недель и дольше, если контролируется точность, на:
МЯ Белковый контроль SL, М и Н для исследования сыворотки/плазмы и МЯ Бб
Стандарт SL, L и М в анализе мочи, остаются в пределах соответствующего ин-
доверия. Новая референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов.
Точный диапазон измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N Бб
стандарт SL. Стандартные значения указаны в соответствующем руководстве по экспл;
системы BN*.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы сыворотки и плазмы автоматически разбавляются е соотношении 1:400 при
N Разбавителя. Образцы мочи автоматически разбавляются е соотношении 1:И
Разбавителем с использованием отдельного протокола для исследования. Растворы ,
быть исследованы в течение 4 часов Для результатов, находящихся вне ди;
измерений, исследование можно повторить с более высокой или более низкой ci
разбавления проб (только протокол анализа сыворотки/плазмы). Повторные исследо
дальнейшим разбавлением проб описаны в руководстве по системам BN*.
Внутренний контроль качества
Анализ МЯ Белкового контроля SL, М, Н должен проводиться после каждого |
референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же для i
измерения образцов. Для определения уровня Ьг-микроглобулина е образцах
необходимо использовать NЯ Белковый контроль SL, L и М соответственно. Контр
пробы исследуются и оцениваются так же, как и тестируемые образцы. Заданное эна'
доверительный интервал для контроля даны в соответствующей Таблице припк
значений. Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала д
контрольный анализ необходимо повторить. Если отклонение подтверждается пов
измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая. Результаты паци<
должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Результаты
Результаты анализируются автоматически при помощи логит-лог функции.
Ограничения анализа
Мутные пробы и содержащиеся в них частицы могут повлиять на результаты анализа,
содержащие осадок, должны быть центрифугированы перед анализом. Липемические
которые не очищаются центрифугированием (10 минут приблизительно 15.000 х г) ,
быть исключены из испытаний. Ьг.микроглобулин нестабилен в образцах мочи с уров
<6,0 поэтому данные образцы необходимо ощелачивать добавлением 1 N NaOH как
скорее после получения, чтобы pH баланс составлял 7-9.
На системах BN*A, BN* 100 и BN* II после измерения образцов с чрезмерно в
содержанием Ьг-микроглобулина, при проведении в скором времени следующего ана.
выявление Ьг-микроглобулина возможно получение ложно завышенных результг
подобных случаях, следует произвести повторное исследование, особенно если больи
полученных результатов для Ьг-микроглобулина расположены выше верхнего г
интервала доверия.
Образцы, взятые у пациентов, могут содержать гетерофильные антитела, которьк
оказать влияние на иммунологический анализ и стать причиной завышенных или эани
результатов Данный тест был разработан с целью минимизировать воздействие со с
гетерофильных антител. Тем не менее, полное исключение подобного влияния из пр
пациентов не гарантируется. Необходимо обращаться с должной осторожно!
результатами анализа несоответствующими клинической картине и истории болезни па
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные о
результате! исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих резу,
методом удельных заданных значений.
Эталонный интервал
при исследовании 242 образцов крови здоровых людей из центральной Eepont
получены значения от 0,7 до 1,8 мг/л (2,5 и 97,5 процентили) при помощи N Jlai
микроглобулина. У новорожденных и младенцев были обнаружены более высокие зн
по сравнению со взрослыми . Возможно, что повышение концентрации Ьг-микроглоб)
сыворотке по мере взросления, является следствием снижения почечной функщ 1и’
доверия для Ьг-микроглобулина в моче, был установлен при исследовании 196 х
Центральной Европы, не болевших почечными заболеваниями и без повыи
превращения В-клеток. Ни один из образцов не показал содержание Ьг-микроглоб)
измеряемом диапазоне N Латекс Ьг-микроглобулина. Поэтому верхний предел ин 1
доверия для мочи составил 0,2 мг/л
Кроме того, каждая лаборатория определяет свой собственный референсный икте
учетом многих переменных, которые могут отличаться для каждой изученной группы жи
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувствительность теста определяется по нижней границе эталонной кривой и поэтому:
от концентрации белка в N Белковом Стандарте SL.
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не выявлена
Точность
Анализ сыворотки/плазмы
Содержание Ьг-микроглобулина в начальном измеряемом интервале приблизительно о
23 мг/л были измерены на системе BN* и оценены при помощи дисперсионного анал 1
40) на основе рекомендаций NCCLS Guideline ЕР5-А Точность исследования была из
по двум различным концентрациям контрольного материала и трем различным концент
пулов сыворотки и пулов плазмы На основе результатов были получены коэффи
вариации от 2,2% до 3,6%, внутри анализа CV составил от 1,0% до 2.5%, а между ана
CV составил от 1,7% до 3,0%
Анализ мочи
Содержание Ьг-микроглобулина в начальном измеряемом интервале приблизительно о
6 мг/л были измерены на системе BN* и оценены при помощи дисперсионного анализа
на основе рекомендаций NCCLS Guideline ЕР5-А Точность исследования была иэме|
двум различным концентрациям контрольного материала и трем различным концент
пулов мочи. На основе результатов были получены коэффициенты вариации от 4,5 % д
внутри анализа CV составил от 3.7 % до 4,5 %, а между анализами CV составил от 2
3,1 %.
--- стр. 22 ---
Латекс Цистатин С
1асть применения
р N Латекс Цистатина С для m vitro диагностики используется для количественного
»еления цистатина С в сыворотке человеческой крови и гепаринизированной плазме
омощи нефелометрического имунноанапиэа на системах BN* Измерения уровня
зтина С используются при диагностике и лечении почечных заболеваний.
юпект и пояснения
ггин с - ингибитор цистеин протеиназы с относительной молекулярной массой в
0 Дальтонов, формируемый всеми исследованными ядросодержащими клетками' ®
эк он формируется постоянно и свободно проходит через здоровые почки, данный
[ является хорошим индикатором функции почек Концентрации цистатина С в
хггке практически полностью зависят от скорости гломерулярной фильтрации® '
ение скорости гломерулярной фильтрации (GFR) вызывает повышение
1итрации цистатина С Цистатин С не показал подверженности влиянию различных
)рое. таких как мускульная масса и питание, факторы, которые оказывают влияние на
ния, получаемые при исследовании креатинина Кроме того, повышение уровня
инина явно не определяется до тех пор, пока понижение GFR не составит около
юва методики
(упность частиц полистирола, покрытых цистанином С. при смешении с пробами,
кащими человеческий щ 1станином С. агрегируется. При облучении светом агрегат
ивает световой пучок Интенсивность рассеивания света зависит от концентрации
етствующего белка в пробе Оценка выполняется путем сравнения со стандартной
ной концентрацией
ктивы
оставляемые материалы
3 N Латенс Цистанин С. код OQNM
ггаиин С, три пробирки по 2 мл в каждой
танин С Дополнительный Реагент А, три пробирки по 0,5 мл в каждой
танин С Дополнительный Реагент В, одна пробирка по 1,6 мл
танин С Контрольный уровень 1, три пробирки по 1 мл в каждой
танин С Контрольный уровень 2, три пробирки по 1 мл в каждой
в и стандартизация
татин С Реагент состоит из суспензии частиц полистирола, нагруженных
элами к цистатину С человека (кролик) (ок. 0,03 г/л),
ггатин С Дополнительный Реагент А содержит буферный раствор
юглобулина кролика (14 г/л),
татин С Дополнительный Реагент В состоит из водного раствора полиэтилен
W сорбита монолаурата (85 г/л) и эфира полиэтилен гликоля (27 г/л)
татин С Контрольные уровни 1 и 2: лиофилизированные полигены с белками
«лоееческого происхождения Концентрация цистатина С задана относительно
иного цистатина С После восстановления, концентрация цистатина С в контроле
этствует обозначенной на наклейке
рвант
татин С Реагент Гентамицин 6,25 мг/л, амфотерцин 0,625 мг/л
татин С Дополнительный реагент А и В азид натрия < 1 г/л
татин С Контрольные уровни 1 и 2 после восстан,: азид натрия < 1 г/л
глреждения и меры предосторожности
тько для in vitro диагностики.
1вржит азид натрия Рекомендуется работать с веществом аккуратно;
>1хать и не допускать контакта с кожей или слизистыми оболочками При удалении в
до систему, смойте большим количеством воды, в целях предотвращения
•юния концентрации азида. Азид натрия, вступая в контакт с тяжелыми металлами,
к как медь и свинец, может образовывать взрывоопасные соединения
иый образец донорской крови для производства N Цистатин С Реагента, а также N
тин С Контрольных уровней 1 и 2 проверяются на HBsAg. анти-HCV, анти-HIVI и
1IV2 методами, утвержденными Управлением по контролю за продуктами и
:твами (США). Только образцы с отрицательными результатами используются для
эодства. Тем не менее, пока отсутствие возбудителей инфекции не будет
эрждено, со всеми анализами, взятыми у человека, стоит обращаться с должной
вкностью. соблюдая рекомендации для работы с биологически опасными
твами®
товка реактивов
татин С Реагент находится в жидком состоянии и готов к использованию Перед
м использованием необходимо аккуратно перемешать
татин С Дополнительный реагент при помощи пипетки поместите 0,5 мл N
тин с Дополнительного реагента В в пробирку с N Цистатин С Дополнительным
ггом А и аккуратно перемешайте
татин С Контрольные уровни 1 и 2: Растворите лиофилиэированное содержимое
рки 1,0 мл дистиллированной воды Аккуратно перемешайте. N Цистатин С
эльные уровни 1 и 2 готовы к применению через 30 минут после восстановления.
ние и устойчивость
ыеость при температуре от *2 до +8 *С:
одности указан на наклейке
ниеость после открывания или восстановления
татин С Реагент 2 недели
татин С Дол реагент (смесь) 2 недели
танин С Контрольный уровень 1 и 2 4 недели в восстан состоянии
шотно закрьггь сразу после использования и хранить при температуре от *2 до +8
1 замораживайте реактивы.
увость в приборе:
нее пяти дней (по 8 часов в день) или сопоставимый промежуток времени,
тчание; Устойчивость в приборе зависит от используемой системы BN’, а также
аторных условий. Более подробная информация приведена в соответствующем
здстве по эксплуатации системы BN*
«аость в системе BN* ProSpec® N Цистатин С Контроля 1 и 2 указаны в
здстве по эксплуатации системы
юдимые дополнительные материалы, не входящие в комплект поставки
iiaBN*
ковый стандарт UY, код OQLV
щве вещество SCS, код OQUB (для систем BN* II и BN ProSpec®)
йвитепь, код ОиМТ
Антииспарительмая пробка (доп.), код OVLE
№ые запчасти и оборудование, описанные в руководстве по системам BN*.
бы
дящими являются пробы человеческой сыворотки или гепаринизированной плазмы,
«жие (хранение не более 7 дней при температуре от +2 до +8”С) или в
окенном виде Образцы могут храниться до трех месяцев при температуре -20 °С. в
I. если ОМИ были заморожены е течение 24 часов после сбора и при условии
теия повторной заморозки. Сыворотка должна быть полностью свернувшейся и не
кать каких-либо частиц или следов фибрина после цеьгтрифугирования.
эмеские или замороженные пробы, мутные после оттаивания, должны быть
1НЫ центрифугированием (10 минут приблизительно на 15.000 х г) до анализа
одика
эчания
ращайтесь к соответствующему руководству по системам BN* для подробных
2 Лиофилизированные реагенты запрещается использовать до полного восстановления
(не менее 30 минут после добавления дистиллированной воды).
3. Оставьте реагенты и пробы до тех пор, пока они не достигнут комнатной температуры
(+15 - +25* С) перед использованием с системой BN* 100 При работе с системами BN* II
и BN ProSpec® пробы и реагенты, хранимые при температуре +2 - +8* С, можно
использовать сразу
4 6 системе BN* 100 пробы должны анализироваться приблизительно при температуре
окружающей среды (максимальное отклонение 3*0). так как результаты измерений
используются для создания референсной кривой
Протокол испытания для систем BN*
Протокол испытания для сыворотки крови и плазмы включен в руководство, так же как и
Программное обеспечение для соответствующего оборудования. Все действия
выполняются системой автоматически
Расчет референсной кривой
Референсные кривые строятся при мультклочечной калибровке Расчет производится
автоматически сериями, образуется слабый раствор N белкового стандарта UY с N
Разбавителем. Растворы должны быть использованьг в течение 4 часов. Референсная
кривая может использоваться в течение 2 недель. Референсную кривую можно
использовать сверх указанного срока, если контролируется точность, например, N
Цистатин С Контрольный уровень 1 и 2 остаются в пределах соответствующего
интервала доверия
Новая референсная кривая создается при каждой смене партии реактивов Точный
диапазон измерений зависит от концентрации аналита в каждой партии N Белковый
стандарт UY. Стандартные значения указаны е соответствующем руководстве по
эксплуатации системы BN*.
Исследование проб, взятых у пациентов
Образцы автоматически разбавляются в соотношении 1:100 с N Разбавителем. Растворы
должны быть исследованы в течение 4 часов Для результатов, находящихся вне
диапазона измерений, исследование можно повторить с более высокой или более низкой
степенью разбавления проб. Повторные исследования с дальнейшим разбавлением проб
описаны в руководстве по системам BN*
Внутренний контроль качества
Анализ N Цистатин С Контрольного урювня 1 и 2 должен проводиться после каждого
расчета референсной кривой, после первого использования колбы с реагентом, а так же
для каждого измерения образцов сыворотки или плазмы. Контрольные пробы
исследуются и оцениваются так же. как и тестируемые образцы. Приписанное значение
дано на соответствующей этикетке. Для ввода приписанных значений в систему BN
ProSpec® можно воспользоваться информационным компакт-диском (код OVLP)
Интервал доверия для приписанных значений составляет ±20 %. Указанные приписанные
значения предназначены для использования в лаборатории в качестве контроля при
оценке точности и референсных кривых. При использовании в целях контроля точности,
пользователь должен ввести конечную концентрацию и интервалы доверия во время
предварительной настройки
Если результат контрольных измерений лежит за пределами интервала доверия,
контрольный анализ необходимо повторить. Если отклонение подтверждается повторным
измерением, должна быть вычислена новая референсная кривая Результаты пациента
не должны быть оглашены, пока причина отклонений не установлена и не устранена.
Результаты
Оценка выполняется автоматически в мг/л или производной единице, определяемой
пользователем системы BN*
Ограничения анализа
при помощи N Цистатин С Дополнительного реагента осуществляется подавление
воздействия со стороны ревматоидных факторов. Мутные пробы и содержащиеся в них
частицы могут повлиять на результаты анализа Пробы, содержащие осадок, должны
быть центрифугированы перед анализом. Липемические пробы, которые не очищаются
центрифугированием (10 минут приблизительно 15.000 х г) должны быть исключены из
испытаний. Со стороны иммуноподавляющих препаратов (циклосфорин, такролим.
сиролим, мукофенолат или аэатиопрен) влияния не выявлено. Влияния со стороны
моноклональных или поликлональных антител, используемых при лечении пациентов с
пересадками органов, также не было обнаружено.
В целях проверки точности результатов, получаемых на системах BN* 100, исследования,
с использованием N Латекс Цистатин С должны выполняться в первый день и перед
выполнением любых других исследований, а также должны применяться N Сегментные
Кюветы, предварительно помещенные в инкубатор с моющим средством на 16 часов.
Также, можно использовать отдельный набор N Сегментных кювет, исключительно для
исследований с N Латекс Цистатином С. Необходимо использовать отдельный набор N
Сегментных кювет, если исследование на выявление общего количества белка в моче
или CSF было проведено днем раньше.
Полученные результаты анализов всегда должны интерпретироваться совместно с
историей болезни, клинической картиной пациента, а так же с результатами других
медицинских обследований
Из-за матричных эффектов, отличающиеся результаты для контроля и лабораторные
опытные результаты исследования проб могут означать их зависимость от выбранного
метода исследования. Поэтому может возникнуть необходимость произвести оценку этих
результатов методом удельных заданных значений
Эталонный интервал
Эталонный интервал был рассчитан при оценке популяции здоровых на первый взгляд
людей, не имевших почечных заболеваниями. Всего было исследовано 413 образцов,
взятых у 194 мужчин и 219 женщин в возрасте от 1 до 78 пет. Эталонный интервал был
рассчитан при помощи непараметрического метода и он составил от 0,53 до О, 95 мг/л.
Данный интервал отражает 95% популяции. Кроме того, каждая лаборатория определяет
свой собственный эталонный интервал, с учетом многих переменных, которые могут
отличаться для каждой изученной группы жителей
Особые рабочие характеристики
Чувствительность
Чувствительность анализа устанавливается нижним пределом референсной кривой и
зависит от концентрации белков в N Белковом стандарте UY. Стандартная
чувствительность для N Латекс Цистатин С составляет 0,05 мг/л. Аналитическая
чувствительность, вычисляемая по двум стандартным отклонениям от среднего значения
при 20 тестах с N Растворителем, для системы BN ProSpec® составляет 0,005 мг/л.
Специфичность
Взаимная реакция используемых антител не выявлена.
--- стр. 23 ---