Реагенты диагностические, калибраторы и контроли для определения in vitro гентамицина, карбамазепина, пепсиногена, витамина D и онкомаркёра CYFRA на иммунохимическом анализаторе "ARCHITECT i" — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
=== файл: Инструкция_руководство__o45141_I.pdf ===
--- стр. 4 ---
НАЗВАНИЕ
ARCHITECT iQentamicin
НАЗНАЧЕНИЕ
Тест АНСНГГЕСТ iGentamicin является in vitro хемилюминесцентным
иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для количественного
определения гентамицина, антибиотика, в сыворотке или плазме
крови человека на системе ARCHITECT i System с протоколом
STAT. Результаты исследования применяются при диагностике и
лечении передозировки гентамицином, а также для контроля уровней
гентамицина с целью подбора адекватной дозировки.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Гентамицин является аминогликозидным антибиотиком, характеризуется
высокой эффективностью и широким спектром бактериального
действия против как фам-отрицательных, так и грам-положительных
организмов. Он обладает узким терапевтическим индексом, что делает
его использование опасным, особенно для пациентов с повреждённой
почечной функцией. Кроме того, профильная кривая гентамицина
доза-уровень в сыворотке крови непредсказуема, как в отношении
пиковых уровней в сыворотке крови, так и в отношении периода
полувыведения в плазме крови.''
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
Тест ARCHITECT iGentamicin - одноступенчатый иммуноанализ по
количественному определению гентамицина в сыворотке или плазме
крови человека с использованием технологии CMIA с гибкими
протоколами анализа Chemiflex.
В тесте ARCHfTECT jGentamicin образец, парамагнитные микрочастицы,
сенсибилизированные антителами к гентамицину, и акридин-меченый
коньюгат гентамицина соединяются и образуют реакционную смесь.
Микрочастицы, сенсибилизированные антителами к гентамицину,
связываются с гентамицином образца и акридин-меченым коньюгатом.
После промывки в реакционную смесь добавляются пре-триггерный и
триггерный растворы. Полученная в результате хемилюминесцентная
реакция измеряется в относительных световых единицах (RUU). Между
количеством гентамицина в образце и RLU, выявленных оптикой
системы ARCHITECT i System, существует обратная зависимость.
Дополнительную информацию о системе и технологии теста см. в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT, Раздел 3.
РЕАГЕНТЫ
Тест-система, 100 тестов
ARCHITECT iGentamicin Reagent Kit (1РЭ1)
• iMlCROPAimcLESi 1 флакон (7,11 мл) с микрочастицами,
сенсибилизированными антителами к гентамицину (мышиными,
моноклональными) в ТРИС буфере с протеиновыми (бычьими)
стабилизаторами. Минимальная концентрация: 0,16% твёрдых
веществ. Консерванты: ProClin 950 и азид натрия.
• IcoNJUOitfE] 1 флакон (11,75 мл) акридин-меченого коньюгата
гентамицина в МЕС буфере. Минимальная концентрация: 3 нм.
Консервант: ProClin 300.
Разбавитель образца
АРСНПЕСТ i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50)
• IMULTI-ASSAY MANUAL PILU E N tI 1 флакон (100 М Л) ручного
разбавителя ARCHH^CT i Multi-Assay Manual Diluent, содержит
забуференный фосфатом физиологический раствор. Консервант:
противомикробный препарат.
Другие реагенты
ARCHITECT i Pre-Trigger Solution
• |PBE-TRiooER soLurioM] Пре-триггерный раствор содержит 1,32%
(вес/объём) пероксид водорода.
ARCHn~ECT i Trigger Solution
• Itrio o e b s o lu tio n I Триггерный раствор, содержит 0,35 N
гидроксид натрия.
ARCHH^CT i Wash Buffer
• [w a s h b u f f e r ! Промывочный буфер, содержит забуференный
фосфатом ф изиологический раствор. Консерванты :
противомикробные реагенты.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• I i v dI
Меры предосторожности
• ВНИМАНИЕ: Этот продукт подразумевает работу с биоматериалами
человека. Рекомендуется считать все биоматериалы человека
потенциально инфекционными и обращаться с ними в
соответствии со Стандартом по обращению с патогенными
микроорганизмами, полученными из крови, разработанным
Управлением США по охране труда и промышленной гигиене
(OSHA).^ При работе с материалами, содержащими или
предположительно содержащими инфекционные агенты, следует
использовать правила биобезопасности, уровень 2,^ или другие
соответствующие правила.^'®
• Этот продукт содержит азид натрия; см. список в разделе
РЕАГЕНТЫ. При контакте с кислотами высвобождается
высокотоксичный газ. Утилизируйте этот материал и его контейнер
с соблюдением мер предосторожности.
• К данным компонентам относятся следующие предупреждения и
меры предосторожности:
• Микрочастицы
• Коньюгат
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ:
Содержит метилизотиазолоны
Н317 Может вызывать кожную
аллергическую реакцию
Предотвращение
Р261
Р272
Р280
Реагирование
Р302+Р352
РЗЗЗ+Р313
Р363
Избегать вдыхания пыли/дыма/
газа/тумана/паров/аэрозолей.
Не выносить загрязнённую
одежду с рабочего места.
Пользоваться защитными
перчатками/защитной одеждой/
средствами защиты глаз/лица.
ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ:
Промыть большим количеством
воды с мылом.
При раздражении кожи или
появлении сыпи: обратиться к
врачу.
Выстирать зафязнённую
одежду перед дальнейш им
использованием.
Для диагностики
In Vitm.
Следуйте рекомендациям, приведенным в инструкции.
Достоверность результатов анализа не гарантируется при любых
отклонениях от инструкций, содержащихся в данном вкладыше.
• Утилизируйте этот материал и его контейнер с соблюдением мер
предосторожности.
• Информацию о безопасной утилизации азида натрия и мерах
предосторожности во время работы системы см. в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 8.
Меры предосторожности при работе
• Не используйте тест-системы с истёкш им сроком годности.
• Не замораживайте реагенты ARCHH^CT iGentamicin.
• Не смеш ивайте реагенты одного или разных наборов
реагентов.
• Перед зафузкой тест-системы ARCHITECT iGentamicin в систему
в первый раз перемешайте флакон с микрочастицами, чтобы
ресуспендировать микрочастицы, которые, возможно, осели
во время транспортировки. Инструкции по перемешиванию
микрочастиц см. в разделе этого вкладыша ПРОЦЕДУРА,
Процедура анализа.
• Мембраны ДОЛЖНЫ использоваться для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке обеспечения
целостности реагента. Достоверность результатов анализа
не гарантируется при любых отклонениях от инструкций,
содержащихся в данном вкладыше.
• Чтобы не допустить контаминацию, надевайте чистые перчатки
при помещении мембраны на открытый флакон с реагентом.
• После помещения мембраны на флакон с реагентом не
переворачивайте флакон, так как это приведёт к протечке
реагента и получению неправильных результатов теста.
• Со временем остаточные жидкости высохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на
эффективность теста.
• Подробое описание мер предосторожности при работе системы
см. в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел
7.
--- стр. 5 ---
Инструкции по хранению
- Г С
= г• r c - 'l Храните тест-систему ARCHITECT iGentamicin при 2-8'С
вертикально, её можно использовать непосредственно после
извлечения из холодильника (2-8'С).
• Реагенты остаются стабильными до истечения срока годности, если
хранились и использовались в соответствии с инструкциями.
• Тест-система ARCHITECT iGentamicin может храниться на борту
системы ARCHITECT i System с протоколом STAT максимально 30
дней. После 30 дней тест-система должна быть утилизирована.
Для достижения максимальной стабильности реагентов на
борту может потребоваться повторная калибровка. Информацию
по отслеживанию времени на борту см. в Руководстве по
эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
• Реагенты можно хранить на борту системы ARCHITECT г System
или вне её. Если реагенты удалены из системы, храните их при
2-8'С (с мембранами и замещаемыми крышечками) вертикально.
Если реагенты хранятся вне системы, рекомендуется хранить
их в их оригинальных поддонах и коробках, что обеспечит им
вертикальное положение. Если флакон с микрочастицами
(с установленной мембраной) хранился в холодильнике не
вертикально, тест-система не пригодна к использованию.
Более подробная информация о разгрузке реагентов находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
Показатели порчи реагентов
Если значение образца контроля выходит за рамки указанного
диапазона, это может указывать на порчу реагентов или методические
ошибки. Результаты сопряжённых исследований неверны, и образцы
должны быть протестированы снова. Может потребоваться также
повторная калибровка тест-системы. Информация об устранении
неисправностей находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHnECT, Раздел 10.
РАБОТА АНАЛИЗАТОРА
• Тест-система ARCHHHUT iGentamicin используется на системе
АРСНППЕСТ i System с протоколом
STAT, на которой инсталирована
версия 7.00 или более поздняя программного обеспечения
ARCHITECT.
• файл теста ARCHITECT iGentamicin должен быть инсталлирован
на системе ARCHH^CT i System с протоколом STAT с CD-ROM
ARCHrTECT i до проведения теста. Более детальная информация
по установке файла анализа, просмотре и редактировании
параметров анализа находится в Руководстве по эксплуатации
системы ARCHnHUT, Раздел 2.
• Образцы в тесте ARCHITECT iGentamicin, исследуемые
одновременно с некоторыми тестами ARCHH^CT на гепатит,
могут генерировать ошибку с кодом 1700 "Невозможно провести
исследование из-за интерференции теста номер х” [1700 Unable
to process test, due to interference from A ssay number (x )) (x - номер
теста). См. раздел РЕЗУЛЬТАТЫ, флаЯски данного вкладыша.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT, Раздел 5.
• Подробное описание процедур системы находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT.
• Результаты теста ARCHITECT iGentamicin по умолчанию
выражаются в мкг/мл. Можно выбрать альтернативную единицу
мкмоль/л выражения результатов, изменив параметр теста
"Единицы концентрации результата" (Result concentration units)
на мкмоль/л.
• Формула конверсии; (концентрация в мкг/мл) х (2,09) -
мкмоль/л.
СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Типы образцов
Перечисленные ниже пробирки для сбора образцов были апробированы
для использования в тесте ARCHITECT iGentamicin. Другие типы
пробирок для сбора образцов не были проверены для этого
анализа.
Стекло Пластик
• Сыворотка крови
• Натрий EDTA
• Сыворотка крови
• Литиевая соль гепарина
• Натриевая соль гепарина
• Двукалий EDTA
• Система ARCHITECT i не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит проверка правильности типов
образцов для использования в тесте ARCHITECT iGentamicin.
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях;
• инактивированные нафеванием
• пулированные
• сильно гемолизированные
• с заметной микробной контаминацией
• Рабочие характеристики не были установлены для образцов от
трупов или других жидкостей организма помимо сыворотки и
плазмы крови человека.
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки
и плазмы крови дол)кны быть отделены от фибрина,
эритроцитов и других твёрдых частиц. В образцах сыворотки
крови от пациентов, получавших антикоагуляционную или
тромболитическую терапию, может быть фибрин из-за
незавершённости образования сгустков.
• Чтобы избежать перекрёстной контаминации, с образцами
пациентов обращайтесь осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток и наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до
начала тестирования. Используйте новый аппликатор для каждого
образца, чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. При подготовке образцов к тестированию
гравитационного разделения недостаточно.
• Тщательно перемешайте размороженные образцы на вортексе на
медленной скорости, или перевернув пробирки 10 раз. Визуально
проверьте образцы. Если наблюдается расслоение, продолжайте
перемешивание до тех пор, пока образцы не станут визуально
однородными.
• Для получения согласованных результатов образцы должны бьпъ
помещены в центрифужные пробирки и отцентрифугированы при
> 10 О О О RCF (относительная центрифужная сила) в течение 10
минут перед тестированием, если
• они содержат фибрин, эритроциты или другие твёрдые
частицы или
• они были заморожены и разморожены.
• Если на поверхности отцентрифугированного образца образуется
липидный слой, образец нужно перелить в чашечку для образца
или другую пробирку. Это надо делать очень аккуратно с тем, чтобы
перелить только чистый образец без липидного слоя.
• Для тестирования перенесите очищенный образеец в чашечку
для образцов или вторичную пробирку.
Хранение
• Образцы можно хранить со сгустками или эритроцитами или без
них в течение
• 24 часа при комнатной температуре (15-30’С) или
• 7 дней при 2-8'С.
• Если тестирование откладывается более, чем на 7дней, удалите
из сыворотки или плазмы крови сгустки или эритроциты и
храните образцы при -20'С или ниже.
• Не замораживайте/размораживайте образцы более трёх раз.
• Если предполагается задержка исследования более, чем на 8
часов, образцы, содержащие Р-лактамные антибиотики, должны
храниться замороженными. Если образцы сыворотки крови
вовремя не заморозить, содержание гентамицина в образце может
оказаться заниженным в результате его инактивации
In vltro.^^
Транспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы от
сгустков или эритроцитов.
• При транспортировке образцы следует упаковывать и маркировать
в соответствии с местными и международными требованиями
по транспортировке клинических образцов и инфекционных
веществ.
• Образцы можно транспортировать при температуре окружающей
среды, при 2-8’С (на мокром льду) или замороженными (на сухом
льду). Не храните образцы после истечения срока годности,
указанного выше.
--- стр. 6 ---
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 1Р31 ARCHITECT j'Gentamicin Reagent Kit
Необходимые материалы, не предоставляемые с тест-системой
• ARCHITECT i System с протоколом STAT с инсталлированной
версией 7.00 или более поздней программного обеспечения
ARCHITECT (все системы) и версией 7.00 или более
поздней процедуры 6445 "Техобслуживание и диагностика"
(Maintenance and Diagnostics Procedure 6445) (только ARCHITECT
i lO O O sfO
ARCHITECT i System [ASSAY CiMIOM|
1P31-01 ARCHITECT j'Gentamicin Calibrators
Коммерческие контроли, содержащие гентамицин
7062-50 ARCHITECT l MULTI-ASSAY MANUAL DILUENT
ARCHrTECT I |PRE-TRIQQER SOLUTION)
ARCHfTECT I I t r i q o e r s o lu t io n !
ARCHITECT i [WASH BUFFER
ARCHITECT i [REACTION VESSELSi
ARCHITECT I [SAMPLE C U P ^
ARCHITECT I [SEPTUMI
ARCHITECT I [REPLACEMENT CAPS)
Пипетки или наконечники для пипеток (опционно) для обеспечения
объёмов, указанных на экране заказа пациента или контроля.
Информация о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHFTECT, Раздел 9.
Процедура теста
• Перед зафузкой тест-системы ARCHH^T jGentamicin в систему
в первый раз перемешайте флакон с микрочастицами, чтобы
ресуспендировать микрочастицы, которые, возможно, осели во
время транспортировки. После загрузки микрочастиц в первый
раз дальнейшего перемешивания не требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально проверьте, ресуспендировались ли микрочастицы.
Если микрочастицы всё ещё пристают к стенкам флакона,
продолжайте вращать флакон до тех пор, пока микрочастицы
полностью не ресуспендируются.
• Если м икрочасти цы не ресуспендировались, НЕ
ИСПОЛЬЗУЙТЕ ИХ. Обратитесь к местному представителю
Abbott.
• После того как микрочастицы ресуспендировались, поместите
мембрану на флакон. Инструкции по помещению мембран на
флаконы находятся в разделе Меры предосторожности при
работе данного вкладыша.
• Загрузите тест-систему ARCHITECT iGentamicin на борт
анализатора ARCHR^CT
i System с протоколом STAT.
• Проверьте наличие всех необходимых реагентов.
• Проверьте наличие мембран на всех флаконах с
реагентами.
• При необходимости закажите калибровку.
• Более подробная информация о заказе калибровки находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 6.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов и контролей и
общих операционных процедурах находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
• ПРИМЕЧАНИЕ: Образцы в тесте ARCHITECT iGentamicin,
исследуемые одновременно с некоторыми тестами АЯСНПЕСТ
на гепатит, могут генерировать ошибку с кодом 1700
"Невозможно провести исследование из-за интерференции
теста номер х"
(1700 Unable to process test, due to interference
from A ssa y num ber (x )) (x - номер теста). См. раздел
РЕЗУЛЬТАТЫ, флаЯски данного вкладыша.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте о заказе
(Order List Report). Объёма одной чашечки для образцов достаточно
для проведения только 10 повторов. Перед проведением теста
проверьте правильность объёма образца в чашечке для образцов,
чтобы минимизировать эффект испарения.
• Приоритетные образцы: 35 мкл для первого теста iGentamicin
плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста iGentamicin
из той же чашечки для образцов.
• S 3 часов на борту; 150 мкл для первого теста iGentamicin
плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста iGentamicin
из той же чашечки для образцов.
• > 3 часов на борту: замените свежим образцом (образцы
пациентов, контролей и калибраторов).
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте также мерную метку для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и контроли.
• Перемешайте калибраторы ARCHn^CT iGentamicin перед
использованием, аккуратно переворачивая флаконы.
• Для получения рекомендованного объёма кгшибраторов
ARCHITECT iGentamicin держите флаконы вертикально и
накапайте минимум 5 капель каждого калибратора в каждую
соответствующую чашечку для образцов.
• Следуйте инструкциям производителя при подготовке
коммерческих контролей.
• Загрузите образцы
• Более подробная информация о загрузке образцов находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT.
Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Более подробная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHnBJT, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
описанных в Руководстве по эксплуатации системы ARCHn^CT,
Раздел 9. Проводите процедуры технического обслуживания чаще,
если этого требуют правила Вашей лаборатории.
Процедура разведения образцов
Образцы с концентрациями гентамицина > 10,00 мкг/мл помечаются
флажком “>10.00 pg/mL" и могут бьпъ разведены с использованием
процедуры ручного разведения.
• Ручное разведение производится следующим образом:
• Предлагаемая пропорция разведения для теста
ARCHR^CT i Gentamicin - 1:5.
• Добавьте 50 мкл образца пациента к 200 мкл калибратора
А ARCHITECT i Gentamicin или к ручному разбавителю
ARCHH'ECT i Multi-Assay Manual Diluent.
• Оператор должен ввести фактор разведения в экраны заказа
пациента или контроля. Система использует этот фактор
разведения для автоматического расчёта концентрации
образца до разведения и сообщит результат. Результат
(до введения фактора разведения) должен быть более
0,3 мкг/мл.
• Более подробная информация о заказе разведения находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT, Раздел 5.
Калибровка
• Для калибровки АРСНГТЕСТ iGentamicin протестируйте калибраторы
в повторах. Калибраторы должны быть загружены в приоритетные
позиции.
• Диапазон калибровки: 0,0-10,0 мкг/мл.
• Для оценки калибровки теста ARCHR^CT iGentamicin используйте
коммерческие контроли, протестируйте по одному образцу
каждого уровня.
• Закажите контроли, следуя инструкциям раздела Процедура
теста.
• Значения контролей должны бьп-ь в фаницах установленных
диапазонов.
• После принятия и сохранения результатов калибровки ARCHITECT
iGentamicin все последующие образцы можно тестировать без
предварительной калибровки кроме тех случаев, когда:
• используется тест-система с новым серийным номером
• результаты контролей выходят за границы допустимого
диапазона.
• Более подробная информация о проведении калибровки находится
в Руквоводстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 6.
--- стр. 7 ---
т
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
Рекомендуемым требованием контроля качества теста ARCHITECT
iGentamicin является тестирование по одному образцу каждого
контроля каждые 24 часа проведения теста. Соблюдайте
правила Вашей лаборатории, если они требуют более частого
использования контролен для проверки результатов тестов. Можно
тестировать дополнительные контроли в соответствии с местными
и/или государственными законами или требованиями аккредитации
и политикой контроля качества Вашей лаборатории.
Каждая лаборатория должна установить свои диапазоны коитролей,
чтобы контролировать приемлемые рабочие характеристики теста.
Если значение контроля выходит за рамки указанного диапазона,
результаты соответствующего теста считаются ложными, и образец
должен быть повторно протестирован. Может понадобиться
перекалибровка.
При использовании коммерческих контролен каждая лаборатория
должна установить диапазоны концентраций для новых серий
контролей на каждом клинически значимом уровне контроля. Это
можно достичь путём проведения исследования минимум в 20
повторах в течении нескольких (3-5) дней. В это исследование
должны быть включены возможные источники колебаний, чтобы
получить репрезентативные данные по работе системы. Варианты
могут включать;
• Несколько сохранённых калибровок
• Разные серии реагента
• Разные серии калибратора
• Разные аналитические модули
• Результаты, получаемые в разное время суток
Эти результаты необходимо учитывать в правилах контроля качества
Вашей лаборатории. Кроме того, лаборатория должна убедиться, что
матрикс контрольного материала пригоден для использования в тесте
в соответствии с инструкциями вкладыша к тест-системе.
Если не указано другое, целевые значения и диапазоны, приведённые
во вкладыше к коммерческому контролю, являются исключительно
рекомендациями и не должны использоваться в целях контроля
качества.
См. в документе С24-А3’° Института клинических и лабораторных
стандартов (CLSI) или в других опубликованных руководствах общие
рекомендации по контролю качества.
Проверка параметров анализа
Информация о протоколах проверки параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы АНСНПВ^Т, приложение В. Тест
ARCHITECT j'Gentamicin относится к методологической фуппе 1 .
РЕЗУЛЬТАТЫ
Тест ARCHn^JT iGentamicin использует метод обработки данных по
соответствию четырех-параметрической логистической кривой (4P LjC ,
Y-единицы массы) для создания калибровочной кривой.
Флз)кки
Результаты некоторых тестов могут сопровождаться информацией в
поле флажки. Описание флажков, которые могут появиться в этом
поле, находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHR^CT.
Раздел 5.
Исключение: Код ошибки 1700 (только для теста(ов) ARCHn^CT
Systems на гепатит)
• В таблице ниже приведены тесты на АНСНП^Т, содержащие
гентамицин в качестве консерванта. Образцы для теста
ARCHITECT iGentamicin. исследуемые одновременно с любым из
тестов, приведённом в таблице ниже, могут генерировать ошибку
"1700 Невозможно провести исследование из-за интерференции
теста номер (х)"
(1700 Unable to process test, due to Interference
from A ssay number (x )) {x - номер теста).
• Если при исследовании образца появляется код ошибки 1700 в
первый раз. сделайте следующее:
• Закажите снова и проведите тест ARCHITECT iGentamicin.
• Закажите снова и проведите любое из остальных исследований
этого образца.
• ПРИМЕЧАНИЕ: НЕ заказывайте снова тест ARCHITECT iGentamicin
с любым из указанных ниже тестов.
Если этот образец ПРИ ПОВТОРНОМ ТЕСТИРОВАНИИ генерирует
ошибку с кодом 1700, сделайте следующее;
• Проведите перечисленное ниже техобслуживание системы
ARCHITECT два;кды:
• Для ARCHITECT i 2000s r проведите 2130 Flush Fluids.
• Для ARCHH^CT i IOOOsr проведите 2137 Flush Fluids.
• Закажите снова и проведите тест ARCHITECT iGentamicin.
См. Руководство по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 9.
Тест-системы, содержащие гентамицин
Название тест-системы
Катал.
номер®
Номер
теста
ARCHfTECT AUSAB 1L82 872
ARCHITECT Anti-HBs 7018 1 3 1
ARCHR^CT HBsAg
1L80 873
6C36 701
ARCHR^CT HBsAg Qualitative 1P97 149
ARCHITECT HBsAg Confirmatory 1L81 874
ARCHITECT HBsAg Qualitative
Confirmatory 1P98 159/160
ARCHITECT HBsAg Confirmatory V .1 9C94 1 5 1
ARCHRECT HBe Antigen 6C32 301
ARCHnrECT Anti-HCV
1L79 871
6C37 161
ARCHR^CT HCV Antigen 6L47 801
® Некоторые каталожные номера
странах.
доступны не во всех
Диапазон измерения (сообщаемый диапазон)
Диапазон измерения теста ARCHFTECT iGentamicin составляет 0,3 мкг/мл
-10,0 мкг/мл. См. раздел этого вкладыша СПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАБОЧИЕ
ХАРАКТЕРИСТИКИ. Диапазон измерения. При использовании
процедуры ручного разведения тест может генерировать результаты
до 50,0 мкг/мл.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Если результаты по гентамицину не согласуются с клиническими
данными, рекомендуется провести дополнительное исследование
для подтверждения результата.
• При диагностике результаты должны использоваться в сочетании
с другими данными, напр., симптомами, результатами других
исследований, клиническими наблюдениями и тл.
• Если предполагается задержка исследования более, чем на 8
часов, образцы, содержащие Р-лактамные антибиотики, должны
храниться замороженными. Если образцы сыворотки крови
вовремя не заморозить, содержание гентамицина в образце может
оказаться заниженным в результате его инактивации In vitro.^^
• Исследование образцов пациентов, содержащих препараты
цефалексин, нетилмицин, сизомицин и сагамицин,'*'' даст
ложно повышенные результаты по гентамицину. Более
подробные объяснения см. в разделе СПЕЦИФИЧЕСКИЕ
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ, Интерференция. Однако, эти
препараты обычно не назначаются вместе с гентамицином.
Было также показано, что пенициллин или цефалоспорин
в высоких концентрациях инактивируют гентамицин
in vitro.
Степень инактивации зависит от конкретного измеряемого
аминогликозида, типа и концентрации пенициллина или
цефалоспорина, а также условий хранения образца.^Образцы
пациентов, принимающих дополнительно антибиотики подобного
типа, должны анализироваться незамедлительно или храниться
в замороженном виде.
• Образцы пациентов, принимавших лекарственные препараты,
изготовленные из моноклональных мышиных антител, в
диагностических или терапевтических целях, могут содержать
человеческие антитела против мышиных антител (НАМА).’*'’^
Образцы, содержащие НАМА, могут давать аномальные значения
при тестировании тест-системами (например. ARCHITECT
iGentamicin), использующими мышиные моноклональные
антитела.’^
--- стр. 8 ---
с
• Гетерофильные антитела в сыворотке крови человека могут
реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя in vitro
с иммуноанализом.^^ Пациенты, находящиеся в привычном контакте
с животными либо с продуктами из сыворотки крови животных,
наиболее часто подвергаются подобному взаимодействию,
результаты тестов для них могут демонстрировать аномальные
значения. Для определения точного диагноза может потребоваться
дополнительная информация.
• Информацию об офаничениях для образцов см. в разделе этого
вкладыша СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
В образцах специфических пациентов была показана сильная
корреляция между уровнями в сыворотке крови и как терапевтическим
эффектом, так и токсичностью. Для достижения оптимальной
терапевтической эффективности предлагаются пиковые уровни
гентамицина в диапазоне от 5 до 10 мкг/мл. Было показано, что
постоянно повышенные пиковые уровни концентраций (10 мкг/мл)
вызывают нефротоксичность и токсичность черепного нepвa.^^'^^
Нефротоксичиость выражается в повреждении проксимальных
почечных канальцев и асоциируется с нарушением почечной
функции. Токсичность центральной нервной системы наиболее часто
выражается в повреждении вестибулярной и слуховой ветвей черепного
нерва.’® '’® Транзиторные уровни дают более дискретное указание на
уфозу токсичности, поскольку они более соответствуют уровням в
тканях и менее подвержены ошибкам, свойственным пробоотбору.’^
Было показано, что медленно возрастающие транзиторные уровни
отражают аккумуляцию препарата в тканях, а транзиторные уровни,
превышающие 2 мкг/мл, ассоциированы у некоторых пациентов с
почечной недостаточностью.’®’® См. во вкладыше производителя к
препарату или в Настольном справочнике врача (Physicians’ Desic
Reference) (PDR) правильную дозировку препарата и время сбора
образцов для исследования на гентамицин.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Данные раздела СПЕЦИФИЧЕСКИЕ РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
были получены с использованием системы АВСНГГЕСТ
i 2000 s r .
Результаты исследований в отдельных лабораториях могут отличаться
от этих данных.
Воспроизводимость
Тест АРСНГГЕСТ iGentamicin имеет погрешность s 8% общего
КВ для образцов с концентрацией гентамицина в диапазоне от
2 мкг/мл до 10 мкг/мл.
Воспроизводимость внутри лаборатории
Было проведено исследование в соответствии с инструкциями
документа ЕР5-А2’ ® Национального комитета по стандартам
клинических лабораторий (NCCLS). Тестирование проводилось в
лабораториях компании Abbott с использованием двух серий наборов
реагентов ARCHITECT iGentamicin. одной серии калибраторов
ARCHrrECT iGentamicin и одной серии коммерческих контролей
(Bio-Rad Liquichek Therapeutic Drug Monitoring Controls) на двух
анализаторах. Были исследованы контроли трёх уровней и панели
сыворотки крови человека четырёх уровней в минимум двух повторах,
дважды в день, в течение 20 дней. Для каждой партии реагентов в
течение всего исследования использовалась одна калибровочная
кривая. Данные суммированы в следующей таблице.
Образец
Инстру
мент
Номер
серии
реагента Кол.
Средн.
(мкг/мл)
Внутри
серии
Суммарный
показатель
СКО %КВ СКО %КВ
Уровень
контроля
1
1 1 120 1,2 0,03 2,3 0,03 2.4
2 120 1,2 0,03 2,3 0.03 2.4
2 1 120 1,3 0,03 2,0 0,03 2.3
2 120 1.3 0,03 2,2 0,03 2.4
Уровень
контроля
2
1 1 120 3,7 0,08 2,3 0,10 2.7
2 120 3.7 0,11 2.9 0,12 3,2
2 1 120 3,8 0,12 3.1 0,12 3,1
2 120 3,9 0,11 2.9 0.12 3,1
Уровень
контроля
3
1 1 120 6,5 0.20 3,1 0.23 3,5
2 120 6,8 0.28 4.1 0.36 5,3
2 1 120 6,9 0.25 3,7 0.29 4,2
2 120 6,8 0.26 3,8 0.27 4,0
Панель 1
1 1 120 0,2 0.01 2.7 0,01 4,3
2 120 0,2 0.01 2,7 0,01 4,4
2 1 120 0,3 0,01 2,8 0,01 3,1
2 120 0,3 0,01 2,8 0,01 3,1
Панель 2
1 1 120 1,0 0,03 2,8 0,03 3,5
2 120 1,0 0,02 2,0 0,03 3,2
2 1 120 1,0 0,02 1,9 0,02 2.0
2 120 1.0 0,02 2,5 0,03 2.8
Панель 3
1 1 119 3,6 0,10 2.9 0,14 3,9
2 120 3,6 0.13 3.6 0,14 3,9
2 1 120 3,8 0,10 2,6 0.11 2,9
2 120 3,7 0,10 2.6 0,11 3,1
Панель 4
1 1 120 8,2 0,31 3.7 0,35 4,3
2 120 8,4 0,37 4.4 0,44 5,2
2 1 120 8,6 0,31 3.6 0,33 3,8
2 120 8,3 0,38 4.5 0,42 5,0
Выход
Тест ARCHrrECT iGentamicin имеет средний процент выхода от 91
до 109 для образцов с концентрациями гентамицина в диапазоне от
2 мкг/мл до 10 мкг/мл.
Было проведено исследование на 12 образцах, не содержащих
гентамицин, или с низкими уровнями гентамицина. В образцы
дополнительно добавляли гентамицин, чтобы концентрация
образцов была 2,5, 4,0, 6,0 и 8,0 мкг/мл. Образцы исследовали с
использованием тест-системы ARCHITECT iGentamicin на одном
анализаторе и рассчитывали полученный в результате процент выхода.
Отдельные проценты выхода были в диапазоне от 91,1 до 99,2, а
средний процент выхода составил 95,7.
Чувствительность
Предел количественного определения
Предел количественного определения (ПКО) теста ARCHITECT
iGentamicin составляет < 0,3 мкг/мл.
В соответствии с инструкциями документа NCCLS ЕР17-А^° было
проведено исследование на пяти образцах с нулевым уровнем и
шести образцах с концентрациями гентамицина приблизительно
0,025, 0,05, 0,075, 0,1, 0,2 и 0,3 мкг/мл. Эти образцы исследовали в
пяти разных сериях, в течение минимум 3 дней, с использованием
двух серий реагента, на двух анализаторах. ПКО теста АВСНГГЕСТ
iGentamicin составил 0,20 мкг/мл.
Предел фондвргр измерения и преда[}_о.б.надужения
В этом же исследовании были определены предел фонового измерения
(ПфИ) и предел обнаружения (ПО). ПфИ составил 0,00 мкг/мл, а
ПО - 0,05 мкг/мл.
--- стр. 9 ---
с
Линейный диапазон
В соответствии с инструкциями документа NCCLS ЕР6-А^’
было проведено исследование с целью определения линейного
диапазона теста ARCHITECT iGentamicin. Были приготовлены
одиннадцать образцов методом смешивания в определённой
пропорции образцов с высоким содержанием гентамицина
(> 10,0 мкг/мл) с образцами с низким содержанием гентамицина
(< 0,3 мкг/мл), эти образцы были протестированы тест-системой
ARCHITECT iGentamicin.
С использованием абсолютного отклонения от линейности,
соответствующим s 9% для образцов с концентрациями > 1 мкг/мл
и й 18% для образцов с концентрациями гентамицина < 1 мкг/мл,
для тест-системы ARCHITECT iGentamicin был определён линейный
диапазон от 0,11 до 11,16 мкг/мл.
Интервал измеренияя
Интервал измерения определяется как диапазон значений в мкг/мл,
который соответствует границам приемлемых рабочих характеристик
для погрешности и отклонения неразбавленного образца. По
результатам верификационных исследований, описанных в этом
вкладыше, диапазон был от 0,3 мкг/мл до 10,0 мкг/мл.
Интерференция
Потенциально интерферирующие эндогенные вещества
В соответствии с инструкциями документа CLSI ЕР7-А2“ была
оценена потенциальная интерференция эндогенных веществ с целью
определения, влияют ли они на концентрации гентамицина в тесте
ARCHH^CT iGentamicin. Эндогенные вещества в перечисленных ниже
концентрациях добавляли в образцы с разными уровнями гентамицина
(приблизительно 2,5 и 7,0 мкг/мл). Образцы были проанализированы,
и концентрации гентамицина в образцах с добавленным аналитом
сравнили с образцами контролей. Данные суммированы в следующей
таблице.
Потенциально
интерферирующее
эндогенное вещество
Минимальная
концентрация
интерферента
% интерференции^
2,5 мкг/мл 7,0 мкг/мл
Билирубин 20 мг/дл -0,6 0.7
Гемоглобин 500 мг/дл 2,7 3.4
Общий белок 12 г/дл 0,9 4.8
Триглицериды 3000 мг/дл -1,6 0.4
% интерференции -
Результат исследования -
Результат контроля X 100
Результат контроля
Потенциально интерферирующие клинические состояния
Оценивали потенциально интерферирующие клинические состояния
с целью определения, влияют ли они на концентрации гентамицина в
тесте АНСНГТЕСТ iGentamicin. К пулированной нормальной сыворотке
крови и образцам пациентов с перечисленными ниже клиническими
состояниями добавляли гентамицин на двух уровнях (приблизительно
2,5 и 7,0 мкг/мл). Образцы были проанализированы, и концентрации
гентамицина в образцах с добавленным аналитом сравнили с
образцами, не содержащими гентамицин. Данные суммированы в
следующей таблице.
Потенциально интерферирующие
клинические состояния Кол.
Диапазон ^
(ИНДИВИД|
^ выхода^
^ ь н ы й )
2.5 мкг/мл 7.0 мкг/мл
Человеческие антитела против
иыш иных антител (НАМА) 12 99,4 - 107,1 91,2 - 103.7
Гетерофильные антитела 12 97,6 - 107,9 87,6 - 105.2
Ревматоидный фактор 1 2 95,8 - 105,6 93.2 - 101,5
% выхода
Результат с добаленным аналитом -
Результат до добавления аналита
Результат образца нормальной сыворотки
крови с добавленным аналитом
X 100
Потенциально интерферирующие препараты
В соответствии с инструкциями документа CLSI ЕР7-А2“ оценивали
потенциально интерферирующие препараты с целью определения,
влияют ли они на концентрации гентамицина в тесте АНСНП^СТ
iGentamicin. Перечисленные ниже препараты добавляли в образцы
без гентамицина (0,0 мкг/мл) и в образцы с разными уровнями
гентамицина (приблизительно 2.5 и 7,0 мкг/мл). Образцы были
проанализированы, и концентрации гентамицина в образцах с
добавленным аналитом сравнили с образцами контролей. Данные
суммированы в следующей таблице.
Тестируемый
препарат
Конц.
тест.
препа
рата
(мкг/мл)
Конц. гентамицина (мкг/мл)
0,0 2,5 7 0
Разн.
конц.®
Разн.
конц.®
%
кросс-
реакт.ь
Разн.
конц.®
%
кросс
реакт. * *
Acetaminophen 200 0,00 0,03 0,0 0,08 0,0
Acetylcysteine 1000 0,00 -0,01 0,0 0,01 0.0
Acetylsalicylic acid 300 0.00 -0,01 0.0 -0,34 -0,1
Amikacin 300 0.00 0,08 0.0 0,32 0,1
Amphotericin В 100 0.00 0,00 0.0 0,11 0,1
Ampicillin 50 0.00 -0,02 0.0 -0.36 -0.6
Ascorbic acid 30 0,00 -0,01 0.0 -0.03 -0.1
Carbenicillin 2500 0,00 -0,33 0,0 -0.83 0,0
Cefamandole 250 0,00 -0,05 0,0 -0.08 0,0
Cefoxitin 1000 0,00 -0,05 0,0 -0,21 0,0
Cephalexin 320 0,01 0,91 0,3 2.34 0,7
Cephalosporin С 1000 0,00 0,02 0,0 0,06 0,0
Cephalothin 1000 0.00 0,02 0,0 0,18 0,0
Chloramphenicol 250 0,00 -0,04 0,0 0.03 0.0
Clindamycin 2000 0,00 0,00 0,0 0,00 0.0
[^closporine 6000 0,00 0,10 0.0 0,59 0.0
Erythromycin 500 0,00 -0,12 0.0 0,24 0.0
Ethacrynic Acid 400 0,00 0,04 0.0 -0,28 -0.1
5-Fluorocytosine 30 0,00 -0,01 0.0 -0,01 0,0
Furosemide 100 0,00 0,03 0.0 -0,40 -0,3
Fusidic Acid 1000 0,00 -0,04 0,0 -0,01 0,0
buprofen 7000 0,00 -0,01 0,0 -0,34 0.0
Kanamycin A 400 0,00 0,13 0,0 0,45 0,1
Kanamycin В 400 0,00 0,22 0,1 0,87 0.2
Levodopa 1000 0.00 0,02 0,0 -0,03 0,0
Lincomycin 2000 0.00 0,01 0,0 -0,02 0.0
\^ethicillin 200 0.00 -0,03 0,0 -0,15 -0.1
\^ethotrexate 50 0,00 -0,01 0.0 -0,10 -0.2
\^ethy(prednisolone 200 0,00 -0,02 0.0 -0,03 0.0
^^etronidazole 1000 0.00 0,00 0.0 0,19 0.0
'Jeomycin 100 0.00 0,15 0.1 1.01 0.9
Netilmicin 10 4.41 4,58 45.8 4,93 49,3
Oxytetracycline 2000 0.00 0,04 0.0 0,02 0,0
= ’enicillin V 10 0,00 0,00 0.0 0,08 0,7
= ’ henylbutazone 1000 0,00 0,00 0,0 -0,06 0.0
Prednisolone 12 0.00 0,03 0,2 -0,04 -0,3
Rifampin 50 0.00 0,01 0,0 0,00 0.0
Sagamicin® НД НД НД НД НД НД
Sisomicin 10 3.29 3,29 27.4 3,78 31,5
Spectinomycin 100 0.00 -0,09 -0.1 -0,23 -0.2
Streptomycin 400 0.03 0,03 0.0 0,21 0,0
Sulfadiazine 1000 0.00 -0.03 0.0 -0,02 0.0
Sulfamethoxazole 400 0,00 -0,01 0.0 0,20 0.0
Tetracycline 2000 0,00 0,10 0.0 0,59 0,0
Theophylline 200 0,00 0,01 0.0 0,14 0,1
ГюагсИНп 100 0,00 -0,20 -0.2 -0,09 -0,1
Tobramycin 100 0,00 0,28 0,2 0,84 0,7
Trimethoprim 20 0,00 0,01 0,0 -0,09 -0,4
\/ancomycin 400 0,00 0,03 0,0 -0,06 0,0
® Разн. конц.- разница концентрации
ь Разн. конц.% кросс-реакт.- % кросс-реактивности — -------------------Концентрация
тестируемого
препарата
® НД - не доступен для исследования.
X 100
--- стр. 10 ---
Метод сравнения
Тест ARCHITECT iGentam icin имеет угловой коэффициент
1,0 ± 0,1 и коэффициент корреляции (г) ^ 0,95 для образцов
с концентрацией гентамицина в диапазоне от 0,3 мкг/мл до
10 мкг/мл при сравнении с тестом AxSYM Gentamicin. Исследование
корреляции было проведено в соответствии с инструкциями документа
NCCLS ЕР9-А2*® с использованием метода рефессии Passing-Bablok.
В исследовании сравнивали методики ARCHITECT
i Gentamicin и
AxSYM Gentamicin на образцах сыворотки крови (п - 146). Данные
суммированы в следующей таблице.
Корреляция ARCHITECT /Gentamicin и AxSYM Gentamicin
Диапазон
концентрации
(мкг/мл)
ARCHITECT
0,31 -
8,82
AxSYM
0,46 -
9,23
Коэфф.
корреляции
(г)
0,993
95%
ДП«
0,990
Пере
сечение
(мкг/мл)
-0,04
95%
ди ь
(-0,08,
0,00)
Угловой
коэфф.
0,96
95%
ДИЬ
(0,94,
0.97)
® 95% ДП- доверительный предел (нижний, односторонний)
ДИ - доверительный интервал
БИБЛИОГРАФИЯ
1 . Chambers, HF. Chapter 45; Aminoglycosides. In: Brunton LL, Lazo JS,
Parker KL, editors. Goodman and G ilm an's The Pharm acological B a sis
o f Therapeutics. 11th ed. McGraw-Hill. 2006. http://online.statref.com/
document.aspx?fxid-75&docid-430. Accessed June 22, 2010.
2. US Department of Labor, Occupatkjnal Safety and Health Administration,
29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens.
3. US Department of Health and Human Services. B io s a fe ty in
M icrobiological and Biom edical Laboratories. 5th ed. Washington, DC:
US Government Printing Office; January 2007.
4. World Health Organization. Laboratory B io sa fe ty M anual. 3"^ ed.
Geneva: World Health Organization; 2004.
5. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection o f Laboratory
V\A>rkers from O ccupationally Acquired Infections: Approved Guideline—
Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne. PA; Clinical and
Laboratory Standards Institute; 2005.
6. Glew RH, Pavuk RA. Stability of gentamicin, tobramycin, and amikacin
in combination with four P-lactam antibiotics. Antim icrob Agents
Chemother 1983;24(4):474-7.
7 Tindula RJ, Ambrose PJ, Harralson AF. Aminoglycoside inactivation by
penicillins and cephalosporins and its impact on drug-level monitoring.
Dnjg In tell Clin Pham t 1983;17:906-8.
8. Pickering LK. Rutherford I. Effect of concentration and time upon
inactivation of tobramycin, gentamicin, netilmicin and amikacin
by aziocillin, carbenicillin, mecillinam, mezlocillin and piperacillin.
J Pharm acol Exp Ther 1981;217(2):345-9.
9. Pickering LK, Gearhart P . Effect of time and concentration upon
interaction between gentamicin, tobramycin, netilmicin, or amikacin
and carbenicillin or ticarcillin. A ntim icrob A gents C hem other
1979;15(4):592-6.
10. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Sta tistica l Q uality
Control for Q uantitative M easurem ent Proced ures: Prin cip le s and
Definitions: Appюved Guideline - Third Edition. CLSI Document C24-A3.
Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2006.
11. MIcronomicin Sulfate In: Sweetman, SC. editor. M artindale - The
Complete Dnjg Reference 36th ed. Pharmaceutical Press, 2009: p 736.
http://csi.micromedex.com/hcsdata/mt/mtm736%2Dp.htm Accessed
June 29, 2010.
12. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, ef a/. “Sandwich" type Immunoassay
of carcinoembryonic antigen In patients receiving murine monoclonal
antibodies for diagnosis and therapy. Clin Chem 1988;34(2):261-4.
13. Schroff RW, Foon KA, Beatty SM, e t a l. Human Anti-Murine
Immunogtobulin Responses in Patients Receiving Monoclonal Antibody
Therapy. C ancer R es 1985;45:879-85.
14. Boscato LM. Stuart MC. Heterophllic antibodies; a problem for all
Immunoassays. Clin Chem 1988;34(1);27-33.
15. Nordstrom L. Banck G, Belfrage S. e t al. Prospective study of the
ototoxicity of gentamicin. Acta Path M icrobiol Scan d (Section B. 81)
(Supp 241) 1973;58-61.
16. Dayal VS, Smith EL, McCain WG. Cochlear and vestibular gentamicin
toxicity. A clinical study of systemic and topical usage. Arch Otolaryngol
1974;100:338-40.
17 Manglone A, Schentag JJ. Therapeutic monitoring of aminoglycoside
antibiotics: An approach. Ther Drug M onit 1980;2(2):159-67
18. Barza M, Lauermann M. Why monitor serum levels of gentamicin? Clin
Pharm acokinet 1978;3:202-15.
19. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
Evaluation o f Precisio n Perform ance o f Q uantitative M easurem ent
M ethods; Approved G uideline-Second Ed ition . NCCLS Document
EP5-A2. Wayne, PA: NCCLS; 2004.
20. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
Pro to co ls for D eterm ination o f Lim its o f D etection and Lim its of
Quantitation; Approved Guideline. NCCLS Document EP17-A. Wayne.
PA: NCCLS; 2004.
21. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
Evaluation o f the Lin earity o f Quantitative Measurem ent Procedures:
A Sta tistica l Approach; Approved Guideline. NCCLS document EP6-A.
Wayne. PA; NCCLS; 2003.
22. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Interference
Testing in C lin ical Chem istry; Approved Guideline-Second Edition. CLSI
Document EP7-A2. Wayne. PA: CLSI: 2005.
23. National Committee for Clinical Laboratory Standards. (NCCLS).
M ethod Com parison and B ia s Estim ation Using Pa tien t Sam p les;
Approved Guideline-Second Edition. NCCLS document EP9-A2. Wayne,
PA: NCCLS; 2002.
ARCHITECT и AxSYM являются торговыми марками компании Abbott
Laboratories в различных юрисдикциях.
Все торговые марки являются собственностью своих владельцев.
У
ABBOTT
Max-Planck-Ring 2
65205 Wiesbaden
Germany
+49-6122-580
C€
Дистрибьюторы Abbott Laboratories
Abbott Park. IL 60064 USA
и
ABBOTT 65205 Wiesbaden, Germany
Июль 2010 r.
© 2010 Abbott Laboratories
--- стр. 14 ---
НАЗВАНИЕ
ARCHITECT iCarbamazepine
НАЗНАЧЕНИЕ
ARCHfTECT iCarbamazepine является in vitm хемилюминесцентным
иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для количественного
определения карбамазепина, противосудорожного средства, в
сыворотке или плазме крови человека (собранных в пробирки с
литиевой солью гепарина, натрий гепарином, двукалием EDTA или
натрием EDTA) на системе ARCHITECT i с протоколом s ta t. Полученные
результаты применяются для мониторинга уровня карбамазепина при
проведении соответствующей терапии.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Карбамазепин - производное iminostilbine, структурно связан с
трициклическими антидепрессантами.'*Карбамазепин применяется
при лечении генерализованных тоническо-клонических и простых,
а также сложных парциальных припадков, так как он ингибирует
повторяющееся возбуждение нейронов.^
Около 75% карбамазепина в плазме крови связано с белками.^^
Карбамазепин метаболизируется печоночными оксидазами,
преимущественно CYP3A4, при этом вырабатывается 10,11-эпоксид.®
Этот метаболит также фармакологически активен и выявляется в
плазме крови и тканях в концентрациях до 50% от концентрации
исходного лекарственного препарата.® 10,11-эпоксид далее
метаболизируется в неактивные вещества, экскретируемые с мочой
преимущественно в виде глюкуронидов.^-®
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
ARCHITECT iCarbamazepine - одноступенчатый иммуноанализ по
количественному определению карбамазепина в сыворотке или
плазме крови человека с использованием технологии CMIA с гибкими
протоколами анализа Chemiflex.
В тесте ARCHITECT iCarbamazepine смешиваются образец,
парамагнитные микрочастицы, сенсибилизированные антителами
против карбамазепина, и акридин-меченый коньюгат карбамазепина и
образуют реакционную смесь. Микрочастицы, сенсибилизированные
антителами к карбамазепину, связываются с карбамазепином образца
и акридин-меченым коньюгатом. После промывки в реакционную
смесь добавляются пре-триггерный и триггерный растворы.
Получаемая в результате хемилюминесцентная реакция измеряется
в относительных световых единицах (RUJ). Между количеством
карбамазепина в образце и RLU, выявленных оптической системой
ARCHITECT I System, существует обратная зависимость.
Дополнительная информация о системе и технологии анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 3.
РЕАГЕНТЫ
Тест-система, 100 тестов
АЯСНГГЕСТ iCarbamazepine Reagent Kit (1Р36)
• [ m ic r o p a r t ic le s] 1 флакон (6,6 мл) с микрочастицами,
сенсибилизированными антителами против карбамазепина
(мышиными, моноклональными), в МЕС буфере с протеиновым
(бычьим) стабилизатором. Минимальная концентрация; 0,04%
твёрдых веществ. Консервант; ProClin 300.
• I c o n j u o a t eI 1 флакон (10,0 мл) с акридин-меченым коньюгатом
карбамазепина в МЕС буфере. Минимальная концентрация:
4 нг/мл. Консервант; ProClin 300.
Другие реагенты
ARCHfTECT i Pre-T rig g er So lution
• |PRE-TRICOER SOLUTIONI Пре-триггерный раствор, содержащий
1,32% (вес/объём) пероксид водорода.
ARCHITECT i Trigger Solution
• [TRIOOER s o l u t io n] Триггерный раствор, содержащий 0,35 N
гидроксид натрия.
ARCHfTECT > • W ash. Bu ffe r
• ( w as h b u f f e r! Промывочный буфер содержит забуференный
Консерванты: фосфатом физиологический
противомикробные препараты.
раствор.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• [ ] ^
• Для диагностики
In Vitro.
• Точно следуйте инструкциям вкладыша. Надёжность результатов
теста не может быть гарантирована при отклонении от инструкций
данного вкладыша.
Меры предосторо)кности
• ВНИМАНИЕ: Данный продукт предполагает работу с образцами
человека. Рекомендуется считать все биоматериалы человека
потенциально инфекционными, с ними следует обращаться
в соответствии со Стандартом по обращению с патогенными
микроорганизмами, полученными из крови, разработанным
Управлением США по охране труда и промышленной гигиене
(OSHA).^ При работе с материалами, которые содержат или могут
содержать инфекционные элементы, следует соблюдать требования
правил биобезопасности, Уровень 2,® или использовать другие
методы обеспечения биобезопасности.®'^
• Следующие предупреждения и меры предосторожности относятся
к данным компонентам;
• Микрочастицы
• Коньюгат
Ф
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ:
Содержит метилизотиазолоны
Н317 Может вызывать аллергическую
кожную реакцию.
Предотвращение
Реагирование
Р302+Р352
РЗЗЗ+Р313
Р261 Избегать вдыхания пыли/дыма/газа/
тумана/паров/аэрозолей.
Р272 Не выносить загрязнённую одежду с
рабочего места.
Р280 Пользоваться защитными
перчатками/защитной одеждой/
средствами защиты глаз/лица.
ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ;
Промьп-ь большим количеством воды
с мылом.
При раздражении кожи или
появлении сыпи; обратиться к врачу.
Р363 Выстирать загрязнённую одежду
перед дальнейшим использованием.
• Утилизируйте этот материал и его контейнер с соблюдением мер
предосторожности.
• Подробная информация о мерах безопасности во время работы на
анализаторе находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHHECT, Раздел 8.
Меры предостороткности при работе
• Не используйте наборы реагентов после истечения срока
годности.
• Не замораживайте реагенты.
• Не смешивайте реагенты одной или разных упаковок.
• Перед загрузкой тест-системы ARCHFTECT iCarbamazepine в
систему в первый раз перемешайте флакон с микрочастицами,
чтобы ресуспендировать микрочастицы, которые, возможно,
осели во время транспортировки. Инструкции по перемешиванию
микрочастиц смотрите в разделе ПРОЦЕДУРА, Процедура анализа
данного вкладыша.
• Мембраны ДОЛЖНЫ использоваться для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке обеспечения
целостности реагента. Достоверность результатов анализа
не гарантируется при любых отклонениях от инструкций,
содер^кащихся в данном вкладыше.
• Надевайте чистые перчатки при установке мембраны
на открьп-ые флаконы с реагентами, это предохранит от
контаминации.
• После установки мембраны на флаконе с реагентом не
переворачивайте флакон, иначе реагент вьп-ечет, и это может
повлиять на правильность результата анализа.
• Со временем остаточные жидкости вьюохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на
эффективность теста.
• Подробная информация о мерах предосторожности при работе
системы находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHfTECT, Раздел 7 .
--- стр. 15 ---
Инструкции по хранению
-ГС
1 '• 2*с-/| Храните тест-систему ARCHITECT /Carbamazepine при
2-8‘С вертикально, её можно использовать неме£ 1ленно после
извлечения из холодильника (2-8*С).
• Реагенты остаются стабильными до истечения срока годности, если
хранились и использовались в соответствии с инструкциями.
• Тест-система ARCHITECT iCarbamazepine может храниться на
борту системы ARCHITECT i с протоколом STAT максимум 30 дней.
После 30 дней нахождения на борту тест-система не пригодна к
использованию. Для достижения максимальной стабильности
реагентов на борту может потребоваться повторная калибровка.
Более подробная информация о мониторинге времени нахождения
на борту находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT, Раздел 5.
• Реагенты могут храниться на борту системы ARCHFTECT i или
вне её. Вне системы храните реагенты при температуре 2-8’С (с
мембранами и сменными крышечками) в вертикальном положении.
Рекомендуется хранить реагенты вне системы в их поддонах
и коробках, чтобы обеспечить им вертикальное положение.
Если флакон с микрочастицами хранился не вертикально (с
установленной мембраной) в холодильнике вне системы, тест-
система долзкна быть утилизирована. Подробная информация
о разгрузке реагентов находится в Руководстве по эксплуатации
системы ARCHITECT, Раздел 5.
Показатели порчи реагентов
Если значение образца контроля выходит за рамки указанного
диапазона, это может означать порчу реагентов или технические
неполадки в оборудовании. Результаты сопряжённых исследований
неверны, и образцы должны быть протестированы снова. Может
потребоваться повторная калибровка. Более подробная информация
по обнаружению и устранению неисправностей содержится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHFTECT, Раздел 10.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
• Тест-система ARCHHECT /Carbamazepine разработана для
использования на системе ARCHH^CT i с протоколом s ta t.
• До проведения теста на системе ARCHR^CT i с протоколом s ta t
должен быть инсталлирован файл теста ARCHH^CT /Carbamazepine.
Более детальная информация об установке файла анализа,
просмотре и редактировании параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT, Раздел 2.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы АРСНП^СТ, Раздел 5.
• Подробное описание процедур системы содержится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT.
• Результаты теста АВСНП^СТ /Carbamazepine по умолчанию
выражаются в мкг/мл.
• При выборе альтернативной единицы измерения результата
мкмоль/л система применяет фактор пересчёта 4,23.
• формула конверсии:
(концентрация в мкг/мл) х (4,23) - мкмоль/л
• При выборе альтернативной единицы измерения результата
мг/л система применяет фактор пересчёта 1,00.
• Формула конверсии;
(концентрация в мкг/мл) х (1,00) - мг/л
СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Типы образцов
Перечисленные ниже пробирки для сбора образцов были
апробированы для использования в тесте ARCHITECT /Carbamazepine.
Другие типы пробирок для сбора образцов не были проверены для
этого анализа.
Стекло Пластик
• Сыворотка крови
• Натрий EDTA
• Сыворотка крови
• Литий гепарин
• Натрий гепарин
• Двукалий EDTA
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях:
• инактивированные нафеванием
• пулированные
• сильно гемолизированные
• с заметной микробной контаминацией
• Рабочие характеристики не были установлены для образцов, взятых
от трупов, или других жидкостей организма помимо сыворотки или
плазмы крови человека.
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки и
плазмы крови долзкны быть отделены от фибрина, эритроцитов
и других твёрдых частиц. Образцы сыворотки крови пациентов,
получающих антикоагуляционную или тромболитмческую терапию,
могут в результате незаконченного образования сгустков содержать
фибрин.
• Чтобы избежать перекрёстной контаминации, обращайтесь с
образцами пациентов осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток или наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до начала
тестирования. Используйте новый аппликатор для каждого образца,
чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. Гравитационного разделения недостаточно при
подготовке образца.
• Тщательно перемешайте размороженные образцы на вортексе на
медленной скорости или переверните пробирки 10 раз. Визуально
проверьте образцы. Если наблюдается расслоение, продолжайте
перемешивание до тех пор, пока образцы не станут визуально
однородными.
• Для получения согласованных результатов образцы должны быть
помещены в центрифужные пробирки и отцентрифугированы при
> 10 О О О RCF (относительная центрифужная сила) в течение 10
минут перед тестированием, если
• они содержат фибрин, эритроциты или другие твёрдые частицы
или
• они были заморожены и разморожены.
• Отцентрифугированные образцы с липидным слоем на поверхности
необходимо перенести в чашечки для образцов или новые
пробирки. Соблюдайте осторожность, избегайте перенесения
липидного материала вместе с очищенным образцом.
• Для тестирования поместите очищенный образец в чашечку для
образцов или вторичную пробирку.
Хранение
• Образцы можно хранить со сгустками или эритроцитами или без них
• до 24 часов при комнатной температуре или
• до 7 дней при 2-8’С.
• Если тестирование откладывается более, чем на 7 дней, удалите
из сыворотки или плазмы крови сгустки или эритроциты и
храните образцы при -20'С или ниже.
• Избегайте более трех циклов замораживания/размораживания.
Транспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы
пациентов от сгустков или эритроцитов.
• При транспортировке образцы следует упаковывать и маркировать
в соответствии с местными и международными требованиями по
транспортировке клинических образцов и инфекционных веществ.
• Образцы можно транспортировать при температуре окружающей
среды, при 2-8’С (на мокром льду) или замороженными (на сухом
льду). Не храните образцы дольше времени, указанного выше.
Система ARCHH^CT / не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит проверка правильности типов
образцов для использования в тесте ARCHITECT /Carbamazepine.
--- стр. 16 ---
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 1Р36 ARCHITECT iCarbamazepine Reagent Kit
Необходимые материалы, не предоставляемые с набором
реагентов
• ARCHITECT I System с протоколом s ta t
• ARCHITECT i System е-Assay CD-ROM на
www.abbottdiagnostlcs.com, Support/Technical Library/ Assay Rles
или
• ARCHITECT i System Assay CD-ROM
• 1P36-01 ARCHITECT iCarbamazepine Calibrators
• Коммерческие контроли, содержащие карбамазепин
• ARCHITECT i |PRE.TRiQOER SOLUTION]
• ARCHITECT I ITWIQOER SOLUnOMi
• ARCHrTECT i IWASH BUFFE^
• ARCHITECr
i IREACTON VESSELSi
• ARCHFTECT I ISAMPLE C U P ^
• ARCHITECT t ISEPTUMI
• ARCHITECT I IREPLACEMENT CAPS|
• Пипетки или наконечники для пипеток (опционно) для обеспечения
указанных объёмов.
Информацию о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, см. в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT. Раздел 9.
Процедура анализа
• Перед загрузкой тест-системы ARCHH^CT j'Carbamazepine в
систему в первый раз перемешайте флакон с микрочастицами,
чтобы ресуспендировать микрочастицы, которые, возможно, осели
во время транспортировки. После загрузки микрочастиц в первый
раз дальнейшего перемешивания не требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально проверьте флакон, чтобы убедиться, что
микрочастицы ресуспендировались. Если микрочастицы всё
ещё пристают к стенкам флакона, продолжайте вращать
флакон до тех пор, пока микрочастицы полностью не
ресуспендируются.
• Если микрочастицы во флаконе не ресуспендировались,
НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ флакон. Обратитесь к местному
представителю компании ABBOTT.
• После того как микрочастицы ресуспендировались, поместите
на флакон мембрану. Инструкции по помещению мембран на
флаконы находятся в разделе Меры предосторожности при
работе данного вкладыша.
• Загрузите тест-систему ARCHn^CT /Carbamazepine на борт
системы АНСНП^СТ
i с протоколом ш т .
• Проверьте наличие всех необходимых реагентов.
• Проверьте наличие мембран на всех флаконах с реагентами.
• При необходимости закажите калибровку.
• Подробная информация о заказе калибровки находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 6.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов и контролей, а также
общих операционных процедурах находится в Руководстве по
эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
• Дополнительную информацию см. в разделе РЕЗУЛЬТАТЫ,
Фпа)кки данного вкладыша.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте о заказе.
Объема образца в одной чашечке для образцов достаточно только
для проведения 10 повторов. Перед проведением теста проверьте
правильность объёма образца в чашечке для образцов, чтобы
минимизировать эффект испарения.
• Приоритетные образцы: 80 мкл для первого теста
«Carbamazepine плюс 30 мкл для каждого дополнительного
теста iCarbamazepine из той же чашечки для образцов.
• S3 часов на борту; 150 мкл для первого теста /Carbamazepine
плюс 30 мкл для каждого дополнительного теста iCarbamazepine
из той же чашечки для образцов.
• > 3 часов на борту: замените свежим образцом (образцом
пациентов, контролей и калибраторов).
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте мерную метку для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и контроли.
• До использования перемешайте калибраторы ARCHITECT
/Carbamazepine, аккуратно переворачивая флаконы.
• Для получения рекомендованного объёма калибраторов
ARCHITECT /Carbamazepine держите флаконы вертикально и
накапайте минимум 5 капель каждого калибратора в каждую
соответствующую чашечку для образцов.
• Следуйте инструкциям производителя при подготовке
коммерческих контролей.
• Загрузите образцы
• Более подробная информация о загрузке образцов находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT, Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Более подробная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHrECT, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
которые описаны в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT, Раздел 9. Если правила работы в Вашей лаборатории
требуют более частого технического обслуживания, следуйте
принятой практике.
Процедуры разведения образцов
• Образцы с концентрациями карбамазепина выше 20,00 мкг/мл
помечаются " > 20.00" и могут быть разведены с использованием
процедуры ручного разведения, описанной ниже.
Процедура ручного оазведения
• Предлагаемая пропорция разведения теста ARCHITECT
/Carbamazepine - 1:4.
• Например, добавьте 50 мкл образца пациента к 150 мкл
калибратора А ARCHHBDT /Carbamazepine.
• Результат (до введения фактора разведения) должен быть более
2,00 мкг/мл.
• Оператор должен ввести фактор разведения в экран заказа
пациента или контроля. Система использует фактор разведения
для автоматического вычисления концентрации образца до
разведения.
• Более подробная информация о заказе разведения находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
Калибровка
• Для проведения калибровки теста ARCHITECT /Carbamazepine
протестируйте калибраторы А, В , С, D , Е и F в повторах. Калибраторы
должны быть загружены в приоритетные позиции.
• Диапазон калибровки: 0,00 - 20,00 мкг/мл.
• Чтобы оценить калибровку теста с использованием коммерческих
контролей, протестируйте по одному контролю каждого уровня.
• Закажите контроли. следуя инструкциям раздела Процедура
анализа.
• Значения контролей должны быть в фаницах установленных
диапазонов.
• После того как калибровка ARCHR^CT /Carbamazepine принята
и сохранена, могут тестироваться все остальные образцы без
дальнейшей калибровки, если не происходит следующее:
• Используется тест-система с новым номером серии.
• Результаты контролей выходят за фаницы допустимого
диапазона.
• Полную информацию о проведении калибровки анализа смотрите в
Разделе 6 Руководства по эксплуатации системы ARCHfTECT.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
• Рекомендуемым требованием контроля качества теста ARCHITECT
/Carbamazepine является тестирование по одному образцу
каждого контроля каждые 24 часа проведения теста. Если Вашей
лаборатории требуется более частое использование контролей
для проверки результатов тестов, следуйте принятым процедурам
или требованиям Вашего государственного и/или местного
аккредитующего органа.
• Используйте коммерческие контроли в соответствии с инструкциями
и рекомендациями производителя контролей. Кроме того, каждая
лаборатория должна установить диапазоны концентраций
новых серий контролей на каждом уровне концентрации. Эти
диапазоны должны устанавливаться в соответствии с политикой
контроля качества Вашей лаборатории и/или местными
и/или федеральными законами или требованиями аккредитации.
Диапазоны концентраций, указанные во вкладышах к контролям,
должны использоваться только как рекомендация.
--- стр. 17 ---
• При использовании любого контроля лаборатория должна
убедиться, что матрикс контроля приемлем для использования в
тесте в соответствии с инструкциями вкладыша.
• Если результат контроля выходит за рамки установленного
диапазона, результаты соответствующих анализов неверны, и
образцы должны быть протестированы снова. Может потребоваться
повторная калибровка.
• См. общие рекомендации по контролю качества в опубликованных
инструкциях, например, документ С24-АЗ Института клинических
и лабораторных стандартов (CLSI)^ или другие.
Проверка параметров анализа
Информация о протоколах проверки параметров анализа находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Приложение
В. Тест АЯСНПВ^Т iCarbamazepine относится к методологической
группе 2.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Тест АЯСНП'ЕСТ jCarbamazepine использует метод обработки данных
по соответствию четырех-параметрической логистической кривой
(4P LjC , Y-единицы массы) для создания калибровочной кривой.
фла)кки
Некоторые результаты могут иметь информацию в поле Флажки.
Описание информации, которая может находиться в поле Флажки,
находится в Руководстве по эксплуатации системы АПСНП^СТ,
Раздел 5.
Диапазон измерения (сообщаемый диапазон)
Диапазон измерения теста АПСНГТЕСГ jCarbamazepine составляет
2,00 мкг/мл - 20,00 мкг/мл. См. раздел этого вкладыша
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА, Интервал
измерения. При использовании процедуры ручного разведения тест
может генерировать значения до 80,0 мкг/мл.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Если результат по карбамазепину не согласуется с клиническими
данными, рекомендуется проведение дополнительного тестирования
для подтверждения результата.
• В целях диагностики результаты анализа должны использоваться
в сочетании с другими данными,
напр, симптомами, результатами
других тестов, клиническими наблюдениями и тд.
• Образцы крови пациентов, принимавших лекарственные
препараты, изготовленные из моноклональных мышиных антител,
в диагностических или терапевтических целях, могут содержать
человеческие антитела против мышиных антител (НАМА).®''®
Образцы, содержащие IHAM A, могут давать аномальные значения
при тестировании тест-системами (например, АЯСНП^СТ
iCarbamazepine), использующими мышиные моноклональные
антитела.®
• Гетерофильные антитела в сыворотке крови человека могут
реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя с
in vitro
иммуноанализами.'''' Пациенты, находящиеся в привычном контакте
с животными либо с продуктами из сыворотки крови животных,
наиболее часто подвергаются подобному взаимодействию,
результаты тестов для них могут демонстрировать аномальные
значения. Для определения точного диагноза может потребоваться
дополнительная информация.
• Информацию об ограничениях для образцов см. в разделе этого
вкладыша СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Концентрации карбамазепина в плазме крови от 4 до
12 мкг/мл считались оптимальными для контроля за припадком для
взрослых.’* Токсичность карбамазепина, как правило, относительно
незначительна. Наиболее серьезные проблемы могут возникнуть в
связи со способностью карбамазепина угнетать функцию спинного
мозга. Это серьёзное токсическое действие, потенциально
приводящее к апластической анемии, достаточно редкое.’^ Более
часто встречающиеся побочные эффекты, такие как сонливость,
нарушение координации, пространственная дезориентация и
диплопия, зависят от дозы препарата и не опасны для жизни.''^■''®
Информацию о подборе правильной дозировки карбамазепина и
времени взятия образца для анализа на карбамазепин смотрите во
вкладыше производителя к упаковке препарата или в настольном
справочнике врача (Physicians’ Desk Reference, PDR).
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
Данные раздела СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
были получены с использованием системы ARCHrTECT i 2000s r .
Результаты теста, полученные в отдельных лабораториях, могут
отличаться от представленных данных.
Воспроизводимость
Тест АНСНГГЕСТ iCarbamazepine имеет погрешность s 7% общего
КВ для образцов с концентрациями карбамазепина в диапазоне от
2,00 мкг/мл до 20,00 мкг/мл.
В.ос.пр^изродшаст! ? ,вь|утр.ч лaб^в.aтQPии
Было проведено исследование в соответствии с инструкциями
документа ЕР5-А2''® Национального комитета по стандартам
клинических лабораторий {NCCL5). Тестирование проводилось в
лабораториях компании Abbott с использованием двух серий наборов
реагентов ARCHrTECT iCarbamazepine, двух серий калибраторов
ARCHrTECT iCarbamazepine, одной серии коммерческих контролей
(Bio-Rad Uqulchek Therapeutic Drug Monitoring Controls), на трёх
анализаторах. Были исследованы контроли трёх уровней и панели
сыворотки крови человека четырёх уровней в минимум двух повторах,
дважды в день, в течение 20 дней. Для каждой серии реагентов в
течение всего исследования использовалась одна калибровочная
кривая. Данные суммированы в следующей таблице.
Внутри
Серия Среднее
Образец Инстр. реагента Кол. (мкг/мл)
серии
СКО %КВ
Всего
СКО %КВ
1 1 120 3,94 0,074 1.9 0,112 2.9
2 120 3 ,9 1 0,074 1.9 0,125 3,2
К о нтрол ь О 1 120 4 ,0 1 0,060 1,5 0,095 2.4
уровень 1 С 2 120 4,05 0,077 1.9 0,103 2,6
О 1 120 3,85 0,055 1 .4 0,059 1 .5
0 2 120 3,85 0,049 1,3 0,053 1.4
1 1 120 9 ,6 1 0,242 2.5 0,318 3,3
2 120 9,55 0,198 2 ,1 0,302 3,2
Контрол ь 0 1 1 20 9,75 0,184 1.9 0,225 2,3
уровень 2 с 2 120 9,99 0,168 1.7 0,220 2,2
Q 1 120 9,43 0,109 1.2 0,113 1 .20 2 1 20 9,56 0,140 1.5 0,146 1 ,5
1 1 120 15,12 0,263 1.7 0,503 3,3
2 120 15,18 0,38 1 2.5 0,582 3,8
Контроль о 1 120 15,36 0,422 2.7 0 ,50 1 3,3
уровень 3 с 2 120 15,60 0,27 1 1.7 0,443 2 ,8
0 1 120 1 4 ,7 1 0,204 1.4 0,244 1 .70 2 120 14,96 0,194 1.3 0 ,24 1 1 ,6
1 1 120 1,89 0,042 2.2 0,073 3.9
2 120 1,84 0,043 2.3 0.066 3,6
П а н е л ь 10 1 120 1 ,9 1 0,040 2 .1 0,060 3,2с 2 120 1,87 0,049 2.6 0,056 3,0
о 1 120 1,80 0,026 1,5 0.030 1 ,70 2 120 1,78 0,03 1 1.7 0,034 1 ,9
1 1 120 2,23 0,055 2,5 0,087 3,9
2 120 2.20 0,046 2 ,1 0,076 3,4
П а н е л ь 20 1 120 2,28 0,050 2,2 0,060 2,7с 2 120 2,24 0,055 2,4 0,068 3,0
о 1 120 2,14 0,030 1.4 0,034 1,60 2 120 2 .1 1 0,036 1,7 0,038 1 ,8
1 1 120 12,52 0,260 2 ,1 0,457 3,6
2 120 12,48 0,238 1.9 0,472 3,8
П а н е л ь 30 1 120 12,75 0,298 2,3 0,385 3,0с 2 120 12,98 0,280 2,2 0,357 2.8
0 1 1 20 12,20 0,194 1,6 0,230 1 ,9о 2 120 12,37 0,192 1.6 0,260 2 ,1
1 1 120 18,65 0,390 2 .1 0,767 4 ,1
2 120 18,84 0,480 2,5 0,800 4,2
П а н е л ь 40 1 120 18,76 0,366 1.9 0,429 2.3с 2 120 1 9 ,0 1 0,373 2,0 0,410 2,2
о 1 120 17,97 0,29 1 1,6 0,309 1,70 2 120 18,30 0,22 1 1,2 0,259 1,4
--- стр. 18 ---
Выход
Тест ARCHITECT iCarbamazepine имеет средний процент выхода 90%
- 110% для образцов с концентрациями карбамазепина в диапазоне
от 4 мкг/мл до 12 мкг/мл.
Было проведено исследование 12 образцов, полученных от
пациентов, получавших карбамазепин. К образцам добавляли
карбамазепин, чтобы экспериментальные образцы имели
концентрации карбамазепина в диапазоне от 6 мкг/мл до 18 мкг/мл.
Образцы исследовали с использованием тест-системы ARCHITECT
iCarbamazepine на одном анализаторе и рассчитывали полученный
в результате процент выхода. Отдельные проценты выхода были
в диапазоне от 94,1 до 110,0, а средний процент выхода составил
101,4.
Чувствительность
П р ед ел w nH 4.e .c T B g H H Q .ro рпред еления
Предел количественного определения (ПКО) теста ARCHITECT
iCarbamazepine составляет < : 2,0 мкг/мл.
В соответствии с инструкциями документа ЕР17-А''^ NCCLS было
проведено исследование пяти образцов с О уровнем и пяти образцов
с концентрациями карбамазепина приблизительно 0,3, 0,5, 0,7, 1,0
и 1,5 мкг/мл. Эти образцы исследовали в пяти разных сериях, в
течение минимум 3 дней, с использованием двух серий реагента, на
двух анализаторах ПКИ теста ARCHITECT iCarbamazepine составил
0,30 мкг/мл.
Предел фонового измерения и предел обнаружения
В этом же исследовании были определены предел фонового
измерения (ПфИ) и предел обнаружения (ПО). ПфИ составил
0,06 мкг/мл, а ПО - 0,13 мкг/мл.
Линейный диапазон
В соответствии с инструкциями документа ЕР6-А^® NCCLS было
проведено исследование по установлению линейного диапазона
теста ARCHHECT iCarbamazepine. Три серийных разведения были
приготовлены следующим образом; образец с высоким содержанием
карбамазепина
(> 20 - й 26 мкг/мл) соединяли в определённой
пропорции с образцом с низким содержанием карбамазепина
(< 2 мкг/мл). Три серийных разведения, включая образцы с низким и
высоким содержанием, исследовали с использованием тест-системы
ARCHRbCT iCarbamazepine.
С использованием абсолютного отклонения от линейности s 10% для
образцов с концентрациями 2 мкг/мл - s 20 мкг/мл и s 0,20 мкг/мл
для образцов с концентрациями карбамазепина менее 2 мкг/мл для
тест-системы ARCHITECT iCarbamazepine был установлен линейный
диапазон 0,56 мкг/мл - 22,34 мкг/мл.
Интервал измерения
Интервал измерения определяется как диапазон значений в мкг/мл,
который соответствует фаницам приемлемых рабочих характеристик
для погрешности и отклонения неразбавленного образца. По
результатам верификационных исследований, описанных в этом
вкладыше, диапазон был от 2,00 мкг/мл до 20,00 мкг/мл.
Интерференция
Потенциально интерферирующие эндогенные вещества
В соответствии с инструкциями документа ЕР7-А2^® CLSI были
оценены потенциально интерферирующие эндогенные вещества с
целью определения, влияют ли они на концентрации карбамазепина
при исследовании образцов методом ARCHR^CT iCarbamazepine.
Эндогенные вещества в перечисленных ниже концетрациях добавляли
в образцы с разными уровнями карбамазепина (приблизительно
4 и 12 мкг/мл). Образцы были проанализированы, и концентрации
карбамазепина в образцах с добавленным аналитом сравнили с
образцами контролей. Данные суммированы в следующей таблице.
Потенциально
интерферирующее
эндогенное вещество
Мин.
концентрация
интерферента
% интерференции^
4 мкг/мл 12 мкг/мл
Билирубин 20 мг/дл 3,9% 2,9%
Коньюгированный
билирубин 20 мг/дп 4,7% 5,2%
Гемоглобин 500 мг/дл 6.2% 4,1%
Общий белок 12 г/дл 3,0% 9.1%
Триглицериды 3000 мг/дл -2.0% -0,1%
Потенциально интерферирующие клинические состояния
Оценивали потенциально интерферирующие клинические состояния
с целью определения, влияют ли они на концентрации карбамазепина
в тесте ARCHITECT iCarbamazepine. Образцы пациентов в указанных
ниже клинических состояниях были разделены на три фуппы. К двум
образцам добавляли разные уровни карбамазепина (приблизительно
4 мкг/мл и 12 мкг/мл). Все образцы были исследованы, и результаты
тех образцов, в которые добавляли карбамазепин, сравнивали с
результатами образцов, в которые не добавляли карбамазепин.
Данные суммированы в следующей таблице.
Потенциально
интерферирующие
Диапазон % интерференции^
(индивид.)
клинические состояния Кол. 4 мкг/мл 12 мкг/мл
Человеческие антитела
против мышиных антител 12 -6.6% - 7.4% -7,8% - 13,9%
(НАМА)
Ревматоидный фактор 12 -4.5% - 8.7% -6,7% - 8,5%
Гетерофильные антитела 12 -2,5% - 9,8% -8,4% - 4,3%
интерференции =
(Результат обогащённого образца -
Результат необогащённого образца)
- Конц. добавленного карбамазепина
Конц. добавленного карбамазепина
X 100
П о тенциально и ш - е.в.Ф .е си вую ш и 9 препараты
В соответствии с инструкциями документа ЕР7-А2''® CLSI оценивали
потенциально интерферирующие препараты с целью определения,
влияют ли они на концентрации карбамазепина в методе ARCHH^CT
iCarbamazepine. Потенциально интерферирующие препараты
добавляли к нормальной сыворотке крови человека с карбамазепином
двух уровней (приблизительно 4 мкг/мл и 12 мкг/мл) и к нормальной
сыворотке крови человека с О мкг/мл карбамазепина. Образцы
исследовали, а результаты обогащённых образцов с концентрациями
карбамазепина 4 мкг/мл и 12 мкг/мл сравнивали с результатом
обогащенного образца нормальной сыворотки крови. Данные
суммированы в следующей таблице.
® % интерференции Результат теста - Результат контроля
Результат контроля
X 100
--- стр. 19 ---
Концентрация карбамазепина (мкг/мл)
Тест.
вещество
К0НЦ.Т8СТ.
вещества
(мкг/мл)
0 4 12
Разн.
КОНЦ.“
Разн.
КОНЦ.“
%
интер-
фвр."
%
кросс-
рвакт.®
Разн.
конц.*
%
интер-
фвр.Ь
%
кросс
реакт.®
5-(p-Hydroxy-
phenyl)-5-
phenyihydantoin
1000 0,00 -0,10 -2,3 -0.0 -0,11 -0,9 -0.0
10-Hydroxy-
carbamazepine 22 0,14 0,26 6,2 1,2 -0,05 -0,4 -0.2
Acetaminophen 200 -0,01 0,01 0,2 0,0 0,16 1.4 0,1
Acetylcysteine 150 0,02 0,26 6,1 0,2 0,61 5,1 0,4
Acetyl salicylic
Acid 1000 0,00 0,07 1.8 0,0 0,03 0.2 0,0
Amitriptyline 100 0,00 0,01 0,4 0,0 -0,05 -0.4 -0,0
Amobarbital 50 0,00 -0,19 -4,4 -0,4 -0,59 -4.8 -1.2
Ampiciffln-Na 100 -0,03 -0,22 -5.2 -0,2 -0,43 -3.7 -0,4
Ascorbic Acid 30 0,03 0,22 5.1 0,7 0,74 6.3 2,5
Carbamazepine-
10,11-epoxide 6 0,21 0,24 5.5 3.9 0.30 2.6 5,1
Cefoxitin 2500 0,05 0,30 7.1 0.0 0,90 7,6 0,0
Cetirizine
dlhydrochlorkle 3 -0,01 -0,02 -0,5 -0.7 0,12 1.0 3.9
ChtonSazepoxide 30 0,00 0,03 0,6 0.1 0,17 1.4 0.6
Chlofpromazine 100 0,00 0,01 0,2 0.0 0,01 0.1 0.0
Clonazepam 12 0,02 0,07 1.8 0.6 -0,43 -3.5 -3.6
Cydosporine 5 0,01 0,23 5,3 4.6 0,10 0.8 2.0
Deslpramlne 5 0,00 0,00 0.1 0.1 0,02 0,1 0.3
Diazepam 25 0,00 0,00 0.0 0.0 -0,16 -1,3 -0.6
E^artuzeolne 170 0,00 0,01 0.3 0.0 -0,01 -0.1 -0.0
EeiosuxMde 1000 0,02 -0,02 -0,5 -0.0 -0,07 -0.5 -0.0
EttKrtoin 50 0,00 -0,01 -0.3 -0,0 0,14 1.2 0,3
Gtutethimkle 50 0,00 -0,02 -0.4 -0,0 0,00 0.0 0,0
Hydroxyzine
dihydrocWoride 1 0,06 0,08 1.9 8,2 -0,15 -1,2 -14,7
Ibupnofen 500 0,02 0,10 2.5 0,0 0,18 1-5 0,0
Imipramine 200 0,02 0,00 0.0 0,0 0,00 0.0 0,0
K-Dobesilate
(hydroquinone-
sulfonic acid
potassium salt)
200 -0,01 -0,13 -3,0 -0,1 -0.05 -0.5 -0,0
Levodopa 20 0,00 0,29 7,0 1,4 0,87 7.6 4.4
Mephenytoin 150 0,01 -0,04 -1.0 -0.0 -0,02 -0.2 -0.0
Methsuximide 50 0,00 0,05 1.3 0,1 -0,07 -0.6 -0,1
Methyldopa
sesquihydrate 20 0,01 0,18 4,3 0,9 0,42 3.5 2.1
Metronidazole 200 -0,01 -0,03 -0.8 -0,0 0,05 0.4 0.0
Nortriptyline 50 0,04 0,08 2.0 0,2 0,21 1.8 0.4
Oxcarbazepine 10 0,14 0,20 4,8 2.0 0,13 1.1 1.3
p-Hydroxy-
phenobarbitai 50 -0,00 0,00 0,0 0.0 -0,05 -0.4 -0.1
Pfienobarbital 50 -0,01 -0,06 -1.4 -0,1 0,28 2,4 0.6
Phenothiazine 200 0,00 -0,06 -1.6 -0.0 -0,06 -0,5 -0.0
Ptienyibutazone 400 0,00 -0,14 -3.4 0.0 -0,54 -4,4 -0.1
Phenytoin 1000 0,02 0,09 2.1 0.0 0,29 2,5 0,0
Primidone 1000 0,01 0,05 1.2 0,0 -0,05 -0,4 -0,0
Probenecid 500 0,00 -0,04 -0,9 -0.0 -0,20 -1.7 -0,0
Promethazine 1000 0,03 -0,35 -8,0 -0,0 -0,35 -3.0 -0,0
Rifampicin 60 0,00 -0,13 -3.1 -0,2 0,19 1.6 0,3
Secobarbital 50 -0,01 0,05 1,3 0,1 -0,04 -0,3 -0,1
Tetracycline 50 -0,00 -0,02 -0,6 -0,0 0,06 0,5 0,1
Theophylline 100 0,00 -0,07 -1.5 -0,1 0,08 0.6 0,1
Valproic Acid 1000 0,01 0,21 5.0 0,0 0,56 4.8 0,1
® Разн. (интерференции) = среднее/медиана тестируемой
концентрации - среднее/медиана референсной
концентрации
ь % интерференции = [Разн./(среднее/медиана референсной
концентрации)] *100
® % кросс-реактивности = (Разн./концентрация кросс
реагента) *100
Метод сравнения
Тест АПСНГТЕСТ j’Carbamazepine имеет угловой коэффициент 1,0
± 0,10 и коэффициент корреляции (г) г 0,90 для образцов в диапазоне
концентраций карбамазепина от 2,00 мкг/мл до 20,00 мкг/мл
при сравнении с результатами по методу AxSYM Carbamazepine.
Исследование корреляции было проведено в соответствии с
инструкциями документа ЕРЭ-А2“ NCCL с использованием метода
регрессии Passing-Bablok. В исследовании сравнивали методы
АНСНГГЕСТ /Carbamazepine и AxSYM Carbamazepine на образцах
сыворотки крови (п - 128). Данные суммированы в следующей
таблице.
Диапазон
концентрации
(гикг/мл)
Коэфф.
корреляции
(г) Пере
сечение
(мкг/мл)
95%
диь
Угол
нак
лона
95%
ДИЬARCHITECT AxSYM г
95%
дп«
2.22 - 18.93 2.73-
14.75 0,934 0,907 -0,68 (-1.19,
-0.18) 1,06 (0.99.
1,14)
® = 95% ДП “ доверительный предел (нижний, односторонний)
ь . ди - доверительный интервсш
БИБЛИОГРАФИЯ
1 . Репгу JK. Newmark ME. The use of antiepileptic drugs.
Ann of Int Med
1979; 90: 207-218.
2. McNamara JO. Pharmacotherapy of the epilepsies. In: Brunton LL,
ed. Goodman & G ilm an's The Pharm acological B a sis o f Therapeutics.
11th ed. New York, NY: McGraw-Hill Medical Publishing Division;
2006:501-525.
3. Hooper WD. Dubetz DK, Bocher F. e t al. Plasma protein binding of
carbamazepine. Clin Pharm acol Ther 1975; 17(4):433-440.
4. US Department of Labor, Occupational Safety and Health Administration,
29 CFR Part 1910.1030, Bloodborne pathogens.
5. US Department of Health and Human Services. Biosafety in
M icrobiological and Biom edical Laboratories. 5th ed. Washington, DC:
US Government Printing Office; January 2007
8. World Health Organization. Laboratory Bio safety M anual 3rd ed.
Geneva: World Health Organization; 2004.
7. Clinical and Laboratory Standards Institute. Protection o f Laboratory
Workers from O ccupationally Acquired Infections: Approved G uideline-
Third Edition. CLSI Document M29-A3. Wayne, PA: Clinical and
Laboratory Standards Institute; 2005.
8. Clinical and Laboratory Standards Institute. S tatistical Q uality Control
for Quantitative M easurem ent Procedures: Prin cip les and Definitions;
Approved G uideline—Third Edition. CLSI Document C24-A3. Wayne,
PA; Clinical and Laboratory Standards Institute; 2006.
9. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, e ta l. “Sandwich"-type immunoassay
of carcinoembryonic antigen in patients receiving murine monoclonal
antibodies for diagnosis and therapy Clin Chem 1988;34(2):261-264.
10. Schroff R W , Foon KA. Beatty SM, et al. Human anti-murine
immunoglobulin responses in patients receiving monoclonal antibody
therapy. C ancer R es 1985;45:879-885.
11. Boscato LM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: a problem for all
immunoassays. Clin Chem 1988;34(1):27-33.
12. Arroyo S, Sander JWAS. Carbamazepine in comparative trials:
pharmacokinetic characteristics too often forgotten. Neurology
1999;53(6):1170-1174.
13. Killian JM. Tegretol in trigeminal neuralgia with special reference to
hematopoietic side effects. H eadache 1969;9(1):58-63.
14. Holmes GL. Carbamazepine: adverse effects, in: Levy RH, Mattson RH,
Meldrum BS, Perucca E, eds. Antiepileptic Dnigs. 5th ed. Philadelphia,
PA: Lippincott Williams & Wilkins. 2002:285-297
15. Monaco F, Riccio A, Fantini M, e ta L A month-by-month long-term study
on carbamazepine: clinical, EEG and pharmacological evaluation. J/nf
M ed R es 1979;7(2):152-157.
16. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
Evaluation o f Precision Perform ance o f Quantitative M easurem ent
M ethods; Approved G uideline-Second Edition. NCCLS Document
EP5-A2. Wayne, PA: NCCLS; 2004.
17 National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
Protocols for Determ ination o f Lim its o f Detection and Lim its of
Quantitation; Approved Guideline. NCCLS Document EP17-A. Wayne,
PA: NCCLS; 2004.
--- стр. 24 ---
НАЗВАНИЕ
ARCHITECT Pepsinogen I
НАЗНАЧЕНИЕ
Тест ARCHITECT Pepsinogen I (PG I) является хемилюминесцентным
иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для количественного
определения пепсиногена I в сыворотке и плазме крови человека.
ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Abbott ARCHITECT Pepsinogen I - автоматизированный иммуноанализ,
основанный на использовании методики хемилюминесцентного
иммуноанализа на микрочастицах (CMIA).
Пепсиногены • это неактивные предшественники пепсинов,
являющихся протеолитическими ферментами в желудочном соке и
иммунологически классифицирующиеся как пепсиноген I (PG I) и
пепсиноген II (PG П)\ PG I продуцируется железами дна желудка, а
PGII - железами дна желудка, железами кардиального отдела желудка,
железами пилорического отдела желудка, а также бруннеровыми
железами.*'® Известно, что количество главных клеток желудка,
продуцирующих PG I, в основном снижается, а количество желез
пилорического отдела желудка увеличивается, что обусловлено
прогрессированием атрофии слизистой дна желудка. В результате
соотношение PG I/PG II (I / И ) снижается.^ В связи с этим становится
ясно, что использование соотношения I / II в качестве показателя
атрофии слизистой дна желудка считается эффективным, а
использование иммунологического метода исследования PG I и
PGII целесообразно при масс-скрининге болезней, сопровождающихся
атрофией слизистой дна желудка, с использованием комбинированного
анализа соотношения PG I и I / II. Считается, что болезни,
сопровождающиеся атрофией слизистой дна желудка, особенно
атрофический гастрит, связаны с раком желудка. Таким образом,
иммунологические методы исследования PG I и PG II используются
для масс-скрининга желудка при клиническом исследовании.^'''''
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
ARCHFTECT Pepsinogen I является двухступенчатым иммуноанализом
для количественного определения PG I в сыворотке и плазме крови
человека с использованием технологии CMIA с гибкими протоколами
анализа, называемыми Chemiflex.
На первой стадии соединяются образец, разбавитель анализа и
парамагнитные микрочастицы, сенсибилизированные антителами
к PG I человека. Присутствующий в образце PG I связывается с
микрочастицами, сенсибилизированными антителами к PGI человека.
После промывки на второй стадии добавляется акридин-меченый
коньюгат антител к PGI человека. После следующего цикла промывки
к реакционной смеси добавляются претриггерный и триггерный
растворы. Получаемая в результате хемилюминесцентная реакция
измеряется в относительных световых единицах (RLU). Между
количеством PGI в образце и RUJ, выявляемыми оптической системой
ARCHITECT I, существует прямая зависимость. Концентрация PG I в
образце определяется по полученной ранее калибровочной кривой
ARCHITECT Pepsinogen I.
Дополнительная информация о системе и технологии анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 3.
РЕАГЕНТЫ
Набор реагентов, 100 / 500 тестов
ПРИМЕЧАНИЕ: Некоторые расфасовки доступны не во всех странах
или для использования не на всех системах i Systems. Обратитесь к
местному дистрибьютору.
ARCHITECT Pepsinogen I Reagent Kit (8D07^
• I MICROPARTICLES 11 флакон (6,6 М Л на 100 тестов/27,0 мл на 500
тестов) с микрочастицами, сенсибилизированными антителами
к PG I человека (мышиными, моноклональными) в буфере
MOPSO с протеиновым (бычьим) стабилизатором. Консерванты:
противомикробные препараты.
• Ic o n ju q a te ] 1 флакон (5,9 мл на 100 тестов/26,3 мл на
500 тестов) акридин-меченого коньюгата антител к PG I человека
(мышиных, моноклональных) в MES буфере с протеиновым
(бычьим) стабилизатором. Консервант: РгоСНп.
• [ASSAY SPECIFIC p il u e n t ] 1 флакон (10.0 М Л на 100 тестов/50.9 мл
на 500 тестов) с разбавителем теста Pepsinogen I содержит буфер
MOPSO. Консерванты: противомикробные препараты.
Другие реагенты
ARCHITECT
i Pre-Trigger Solution
• |PRE-TRI00ER SOLUTIOnI Првтриггерный pacTBop содержит 1,32%
(вес/объем) пероксида водорода.
ARCHH^CT i Trigger Solution
• ITRIOOER s o lu t i o n ] Триггврный pacTBop содержит 0,35 N
гидроксида натрия.
ARCHITECT i Wash Buffer
ПРИМЕЧАНИЕ; Количество флаконов и объём зависят от заказа.
• [w a s h b u f f e r ! Промывочный буфер содержит забуференный
фосфатом ф изи о ло ги че ски й раствор. Консервант:
противомикробный агент.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• Для диагностики In V itro .
• ВНИМАНИЕ: Данный продукт предполагает работу с образцами
человека. Рекомендуется считать все биоматериалы человека
потенциально инфекционными и обращаться с ними в
соответствии с надлежащими правилами биологической
безопасности.
Меры предосторожности
• Коньюгат содержит смесь: 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он и
2-метил-4-изотиазолин-3-он (3:1), которая является компонентом
РгоСИп и классифицируется директивами Европейского
Сообщества (ЕС) как: Раздражающее вещество (Xi). Далее
приводится классификация факторов риска (R) и безопасности
(S).
R43 При контакте может вызвать раздражение
кожи.
S24 Избегайте попадания на кожу.
S35 Этот материал и его контейнер необходимо
утилизировать с соблюдением мер
безопасности.
S37 Носите защитные перчатки.
S46 При проглатывании немедленно обратиться
за медицинской помощью и предъявить
врачу содержимое или этикетку.
• Для продуктов, которые в соответствии с пересмотренной
директивой Европейского Сообщества 1999/45/ЕС не
классифицируются как опасные, также существует список
факторов риска, который выдается по требованию.
• Подробная информация о мерах безопасности во время работы на
анализаторе находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHH^T, Раздел 8.
Меры предосторозкности при работе
• Не используйте тест-системы после истечения срока годности.
• Не смешивайте реагенты одной или разных упаковок.
• До зафузки тест-системы ARCHITECT Pepsinogen I в анализатор
первый раз необходимо перемешать флакон с микрочастицами для
того, чтобы микрочастицы, осевшие во время транспортировки,
ресуспендировались. Инструкции по перемешиванию микрочастиц
смотрите в разделе ПРОЦЕДУРА, Процедура анализа данного
вкладыша.
• НЕОБХОДИМО использовать мембраны для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке для обеспечения
целостности реагента. Правильность результатов анализа не
мо^кет бьпъ гарантирована, если мембраны не использовались
в соответствии с инструкциями данного вкладыша.
• Надевайте чистые перчатки при установке мембраны
на открытые флаконы с реагентами, это предохранит от
контаминации.
• После установки мембраны на флаконе с реагентом не
переворачивайте флакон, иначе реагент вытечет, и это может
повлиять на правильность результатов анализа.
• Со временем остаточные жидкости высохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на эффективность
анализа.
• Подробная информация о мерах предосторожности при работе
системы находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT, Раздел 7 .
Инструкции по хранению
-8*С
т с - 't Тест-система ARCHRBDT Pepsinogen I должна храниться
при температуре 2-8‘С вертикально и может использоваться сразу
после извлечения из холодильника (2-8'С).
При соблюдении правил обращения и хранения реагенты остаются
стабильными до истечения срока годности.
--- стр. 25 ---
• Тест-систему ARCHITECT Pepsinogen I можно хранить на борту
анализатора ARCHITECT i в течение максимум 30 дней. По
истечении 30 дней реагенты должны быть утилизированы.
Подробная информация о мониторинге времени нахождения
реагентов на борту находится в Руководстве по эксплуатации
системы АРСНП^СТ, Раздел 5.
• Реагенты могут храниться на борту системы ARCHn^TT
i или
вне её. Вне системы храните реагенты при температуре 2-8'С
(с мембранами и сменными крышечками) в вертикальном
положении. Рекомендуется хранить реагенты вне системы в
их поддонах и коробках, чтобы обеспечить им вертикальное
положение. Если флакон с микрочастицами хранился не
вертикально (с установленной мембраной) в холодильнике
вне системы, тест-система долАна быть утилизирована.
После извлечения реагентов из анализатора следует запустить
сканирование для обновления таймера стабильности реагентов
на борту анализатора.
Показатели порчи реагентов
Если значение контроля выходит за рамки установленного
диапазона, это может свидетельствовать о порче тест-системы
или технических неполадках с оборудованием. Результаты всех
сопряженных тестов следует считать недействительными, требуется
повторное тестирование. Может потребоваться повторная калибровка.
Информация об устранении неисправностей находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHRHjr, Раздел 10.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
• До начала проведения анализа на системе ARCHRH^T
i должен
быть установлен файл анализа ARCHITECT Pepsinogen I с
ARCHITEGTI Assay CD-ROM. Подробная информация об установке
файла анализа, просмотре и изменении параметров анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHRHDT,
Раздел 2.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT, Раздел 5.
• Подробное описание процедуры системы содержится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT.
СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Тилы образцов
Следующие типы пробирок для сбора образцов были проверены
на использование в анализе ARCHITECT Pepsinogen I. Другие
типы пробирок для сбора образцов не были проверены для этого
анализа.
• Сыворотка крови человека (включая сыворотку крови, собранную
в пробирки с сывороточным сепаратором)
• Плазма крови человека, собранная в:
• калий EDTA
• цитрат натрия
• Жидкие антикоагулянты могут давать эффект разбавления, что
может привести к заниженным концентрациям в отдельных
образцах пациентов.
• Система ARCHn^CT i не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит определение правильности типов
образцов в анализе ARCHITECT Pepsinogen I.
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях:
• инактивированные нагреванием
• пулированные
• сильно гемолизированные
• с заметной микробной контаминацией
• образцы, взятые у трупов, или другие жидкости организма
кроме сыворотки и плазмы крови.
• Данный анализ разработан и утвержден для использования
сыворотки или плазмы крови отдельных пациентов или образцов
донорской крови.
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки и
плазмы крови должны бьпгь отделены от фибрина, эритроцитов и
других твёрдых частиц.
• Убедитесь в том, что в образцах сыворотки крови формирование
сгустков закончилось до центрифугирования. Образование
сгустков в некоторых образцах, в особенности взятых у пациентов,
которым назначена антикоагуляционная или тромболитическая
терапия, может занять больше времени. При наличии фибрина в
образцах, отцентрифугированных до полного свертывания крови,
тестирование ведет к получению неправильных результатов.
• Образцы, взятые у гепаринизированных пациентов, могут быть
частично коагулированы и могут давать неправильные результаты
из-за наличия фибрина. Чтобы избежать этого, производите забор
крови до проведения терапии гепарином.
• Чтобы избежать перекрёстной контаминации обращайтесь с
образцами пациентов осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток или наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до
начала тестирования. Используйте новый аппликатор для каждого
образца, чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. Гравитационного разделения недостаточно
при подготовке образца. Образцы должны быть отделены от
сгустков или эритроцитов центрифугированием в соответствии
с рекомендациями производителей пробирок.
• Тщательно перемешайте размороженные образцы на вортексе на
медленной скорости, или перевернув пробирки 10 раз. Визуально
проверьте образцы. Если наблюдается расслоение, продолжайте
перемешивание до тех пор, пока образцы не станут визуально
однородными.
• Для получения правильных результатов образцы необходимо
перенести в центрифужные пробирки и отцентрифугировать
при скорости г 10000 ОЦС (относительная центрифужная сила)
в течение 10 минут перед тестированием, если они содержат
фибрин, эритроциты или другие твердые частицы.
Для тестирования поместите очищенный образец в чашечку для
образцов или вторичную пробирку.
• Отцентрифугированные образцы с липидным слоем на поверхности
необходимо перенести в чашечки для образцов или новые
пробирки. Соблюдайте осторожность, избегайте перенесения
липидного материала вместе с очищенным образцом.
Хранение
• Если тестирование откладывается более чем на 24 часа,
сыворотка или плазма крови должны быть отделены от сгустков,
сывороточного сепаратора или эритроцитов.
• До начала тестирования образцы могут храниться до 7 дней при
температуре 2-8'С. Если тестирование откладывается более чем
на 7 дней, образцы следует хранить при температуре -10‘С или
ниже.
• Необходимо избегать многократного повтора циклов
замораживание/размораживание.
*Пэанспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы от
сгустков, эритроцитов или сепараторного геля.
• При транспортировке образцы следует упаковывать и маркировать
в соответствии с местными и международными требованиями
по транспортировке клинических образцов и инфекционных
веществ.
• Образцы должны перевозиться при температуре 2-8*С (мокрый
лёд) или -20’С или ниже (сухой лёд). Не храните образцы
после истечения срока годности, указанного выше. Перед
транспортировкой рекомендуется отделить образцы от сгустков,
сывороточного сепаратора или эритроцитов.
--- стр. 26 ---
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 8D07 АЯСНГГБСТ Pepsinogen I Reagent Kit
Необходимые, но не предоставляемы материалы
ARCHITECT I System
ARCHITECT i [a s s a y CIMIOMI
8D07-01 ARCHITECT Pepsinogen I Calibrators
8D07-10 ARCHITECT Pepsinogen I Controls
ARCHITECT I |PWE-TRIOOER s o lu t io n ]
ARCHITECT IITRIQOER SOLUTIONl
ARCHITECT I IWASH b u f f e r !
ARCHITECT i [REACTION VESSELS]
ARCHITECT i [SAMPLE CUPSi
ARCHITECT I ISEPTUMI
ARCHITECT I [REPLACEMENT CAPS[
Пипетки или наконечники для пипеток (опционно) для дозирования
объёмов, заданных на экране заказа пациента или контроля.
Информация о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHnH)T, Раздел 9.
Процедура анализа
• До зафузки тест-системы ARCHHECT Pepsinogen I в анализатор
первый раз необходимо перемешать флакон с микрочастицами для
того, чтобы микрочастицы, осевшие во время транспортировки,
ресуспендировались. После зафузки микрочастиц в первый раз
дальнейшего перемешивания не требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально исследуйте флакон, чтобы убедиться, что
микрочастицы ресуспендированы. Если микрочастицы
всё ещё пристают к стенкам флакона, продолжайте
переворачивать флакон до тех пор, пока микрочастицы
полностью не ресуспендируются.
• Если микрочастицы во флаконе не ресуспендировались,
НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ флакон. Обратитесь к местному
представителю Abbott.
• После того как микрочастицы полностью ресуспендировались,
снимите и выбросьте крышку. В чистых перчатках выньте
мембрану из пакета. Сожмите мембрану вдвое так, чтобы
открылись прорези. Осторожно наденьте мембрану на
флакон.
• При необходимости закажите калибровку.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов, калибраторов,
контролей и общих операционных процедурах находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 5.
• Загрузите тест-систему АРСНП^СТ Pepsinogen I на борт системы
ARCHH^CT
i. Проверьте наличие всех необходимых для анализа
реагентов. Проверьте наличие мембран на всех флаконах с
реагентами.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте о заказе.
Объема образца в одной чашечке для образцов достаточно только
для проведения 8 повторов. Перед проведением теста проверьте
правильность объёма образца в чашечке для образцов, чтобы
минимизировать эффект испарения.
• Приоритетные образцы: 75 мкл для первого теста
Pepsinogen I плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста
из той же чашечки для образца.
• S 3 часа на борту; 150 мкл для первого теста Pepsinogen I
плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста из той же
чашечки для образца.
• > 3 часов на борту; необходим дополнительный объём
образца. Информация об испарении образцов и объёмах
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT,
Раздел 5.
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте дозатор образца для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и контроли.
• Перед использованием перемешайте калибраторы и контроли
ARCHHHJr Pepsinogen I. аккуратно переворачивая флаконы.
• Для получения рекомендованного объёма калибраторов
и контролей ARCHH^CT Pepsinogen I держите флаконы
вертикально и добавьте по 5 капель каждого калибратора
или по 4 капли каждого контроля в каждую чашечку для
образца.
• Зафузите образцы.
• Подробная информация о загрузке образцов находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Дополнительная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHRHTT, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
которые описаны в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHПHЛ■. Раздел 9. Если правила работы в Вашей лаборатории
требуют более частого технического обслуживания, следуйте
принятым процедурам.
Процедуры разведения образца
Образцы пациентов со значением анализа Pepsinogen I, превышающим
200 нг/мл, помечены кодом “>200.0" и могут быть разведены с
использованием процедуры ручного разведения.
Разведение вручную производится следующим образом;
• Предлагаемая пропорция разведения для теста Pepsinogen 11;5.
• Добавьте 100 мкл образца пациента к 400 мкл калибратора 1
ARCHITECT Pepsinogen I.
• Оператор должен ввести фактор разведения в экран заявки
пациента или конфоля. Все образцы, выбраные для заказа, будут
разбавлены. Система использует этот фактор разведения для
автоматического расчёта концентрации образца до разведения
и сообщает результат.
• Если разведенные образцы помечены кодом *> 1000.0”, можно
провести дополнительное разведение в пропорции 1;2.
Калибровка
• Для проведения ка л и б р о вки анализа ARCHITECT
Pepsinogen I протестируйте калибраторы 1 и 2 в повторах. Для
оценки калибровки анализа необходимо протестировать по
одному образцу всех уровней контролей PG I. Убедитесь, что
значения контролей не выходят за рамки диапазона концетраций,
указанных во вкладыше к контролям. Калибраторы должны
зафужаться в первую очередь.
• Диапазон значений калибровки; О - 200 нг/мл
• После того как калибровка е 1нализа ARCHHHJT Pepsinogen I принята
и сохранена, все последующие образцы могут тестироваться без
дополнительной калибровки, если не происходит следующее;
• используется тест-система с новым номером серии
• значения контролей выходят за рамки диапазона допустимых
значений.
• Подробная информация о проведении калибровки находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHFECT, Раздел 6.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
ПРИМЕЧАНИЕ: В целях проверки калибровки рекомендуется
тестировать контроли ARCHITECT Pepsinogen I всех уровней.
Рекомендуемые требования по контролю качества анализа ARCHITECT
Pepsinogen I заключаются в тестировании по одному контролю
всех уровней каждые 8 часов, то есть каждые сутки эксплуатации.
Соблюдайте правила Вашей лаборатории, если они требуют более
частого использования контролей для проверки результатов тестов.
Значения контроля ARCHITECT Pepsinogen I должны быть в приемлемых
диапазонах, указанных во вкладыше к контролю. Если значение
контроля выходит за рамки указанного диапазона, результаты
соответствующего теста считаются ложными, и образцы необходимо
протестировать снова. Может потребоваться повторная калибровка.
Проверка параметров теста
Подробная информация о протоколах проверки параметров теста
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Приложение В.
--- стр. 27 ---
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ АЯСНГТНГГ Pepsinogen I использует метод обработки данных по
соответствию четырех-параметрической логистической кривой (4P1jC ,
Y-единицы массы) для создания калибровочной кривой.
Флз)кки
Результаты некоторых тестов могут сопровождаться информацией в
поле флажки. Описание флажков, которые могут появиться в этом
поле, находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 5. Значения концентраций пепсиногена I, которые находятся
ниже предела выявления/чувствительности, могут сообщаться только
для информации.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Образцы пациентов, которые принимали в диагностических
или терапевтических целях лекарственные препараты,
изготовленные из моноклональных мышиных антител, могут
содержать человеческие антитела против мышиных антител
(НАМА). Подобные образцы при тестировании тест-системами,
использующими моноклональные мышиные антитела, могут
демонстрировать ложно повышенные или пониженные значения.’2 ,1 3
Тест-система ARCHITECT Pepsinogen I содержит компонент,
который снижает влияние НАМА-реактивных образцов.
Для определения окончательного диагноза пациента могут
потребоваться дополнительные клинические или диатостические
данные.
• Гетерофильные антитела в сыворотке и плазме крови человека
могут реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя с
иммуноанализами
in vitm. Пациенты, имеющие регулярный контакт
с животными или продуктами из сыворотки крови животных, могут
быть подвержены данной интерференции, в результате чего могут
наблюдаться аномальные результаты. Для определения точного
диагноза может потребоваться дополнительная информация и
история болезни пациента.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Miki et сообщают, что комбинированный анализ уровня PG I
в сыворотке или плазме крови, а также использование соотношения
PG I / II являются эффективными при определении степени атрофии
слизистой дна желудка. Позднее они''® сообщили, что при пороговых
значениях менее 70 нг/мл для PG I и менее 3,0 для соотношения
PG I/II степень выявления заболеваний, сопровождающихся
атрофией слизистой дна желудка, была самой высокой. При этих
пороговых значениях специфичность составила 80% при отсутствии
атрофии слизистой дна желудка, значение которой совпадает со
значением специфичности непрямого рентгеновского метода (самого
распространенного метода масс-скрининга желудка''^). Пороговое
значение необходимо установить в каждой лаборатории.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
ПРИМ ЕЧАНИЕ: Приведены репрезентативные данные. Результаты,
полученные в отдельных лабораториях (и для различных популяций/
образцов), могут отличаться.
Воспроизводимость
Исследование проводили с использованием тест-системы ARCHFTECT
Pepsinogen I в соответствии с инструкциями документа ЕР5-А
Института клинических и лабораторных стандартов.''® Шесть образцов:
три сывороточные панели и три контроля PG I были исследованы
на двух анализаторах, в двух повторах, дважды в день, в течение
двадцати дней (п-80 для каждого образца) с использованием двух
серий реагентов и одной калибровки. Результаты анализа сведены
в таблице.
Воспромзаодимость теста ARCHITECT Pepsinogen I
Среднее
PG 1 Внутри серии Общее
Образец Инструмент Реагент (нг/мл) СКО %КВ СКО %КВ
Низкий 1 1 14,7 0.424 2,9 0,471 3,2
контроль 2 14,6 0,383 2,6 0,419 2,9
2 1 15,6 0,452 2.9 0,560 3,6
2 14,5 0,309 2,1 0,390 2,7
Средний 1 1 47,9 1,263 2,6 1,540 3.2
контроль 2 48,9 1,143 2,3 1,365 2.8
2 1 50,9 1,423 2,8 2,089 4,1
2 48,0 1,402 2.9 1,493 3.1
Высокий 1 1 80,8 2,612 3.2 3,051 3.8
контроль 2 83,1 2,188 2.6 2,814 3.4
2 1 86,8 2,552 2.9 3,443 4,0
2 82,0 2,259 2.8 2,591 3,2
Панель 1 1 1 14.7 0,408 2.8 0,443 3,0
2 14.1 0.322 2.3 0,396 2,8
2 1 15,7 0.292 1,9 0,452 2,9
2 14.2 0.292 2.1 0,368 2,6
Панель 2 1 1 67.8 1,971 2.9 2,552 3,8
2 66.6 1,500 2.3 1,786 2.7
2 1 73.2 2,224 3.0 2,399 3.3
2 66,5 1,603 2,4 1,890 2.8
Панель 3 1 1 114,6 3,824 3,3 4,367 3,8
2 113,4 2,738 2,4 3,532 3,1
2 1 125,6 3,901 3,1 4,282 3,4
2 114,1 2,757 2,4 3,322 2,9
Выход
Известные количества PG 1 были добавлены к двенадцати
нормальным образцам сыворотки крови человека и протестированы
в два разных дня. Концентрация PG I определялась с
использованием трех серий реагентов тест-системы ARCHITECT
Pepsinogen I, после чего рассчитывался процент выхода.
Эндоген. Добавл. Наблюд.
уровень
Образец День Реагент (нг/мл)
PG 1
(нг/мл)
PGI
(нг/мл)
Процент
выхода
1 1 1 30,5 17,4 48,2 102,3
30,5 86,4 124,8 109,2
2 36,3 17,4 56,2 114,5
36,3 86,4 129,7 108,1
3 39.3 17,4 58.7 112,2
39.3 86,4 133,6 109,2
4 42.5 17,4 61,0 106,5
42.5 86,4 131,7 103,3
5 2 2 30.7 16,5 48,2 105,5
30,7 85,9 119,5 103,4
6 31,6 16,5 49,0 105,1
31,6 85,9 118,1 100,7
7 36.0 16,5 53,1 103,7
36,0 85,9 123,8 102,2
8 38,9 16,5 56,0 103,3
38.9 85,9 124,1 99.2
9 2 3 30.9 17,9 51,2 113,5
30.9 89,2 114,3 93,5
10 31.2 17,9 51,2 111,1
31,2 89,2 118,8 98,2
1 1 37,2 17,9 54.7 97,6
37,2 89,2 123,7 97,1
12 42.8 17,9 60,8 100,1
42.8 89,2 134,5 102,8
Средний
% выхода: 104,3%
(наблюд. (нг/мл) - эндогенный уровень (нг/мл))
Добавленный PG I (нг/мл)% выхода - • X 100
--- стр. 28 ---
Аналитическая чувствительность
Расчетная чувствительность анализа ARCHITECT Pepsinogen I менее
1,0 нг/мл. Чувствительность определяется как концентрация, на
два стандартных отклонения превышающая среднее значение RLU
для калибратора 1 ARCHITECT Pepsinogen I, и представляет собой
наименьшую измеримую концентрацию PG I, отличную от нуля.
Специфичность
Специфичность анализа ARCHITECT Pepsinogen I определялась
методом тестирования сыворотки крови, содержащей перечисленные
ниже вещества. Эти вещества при указанных концентрациях показали
в анализе ARCHITECT Pepsinogen I интерференцию менее 10%.
Тестируемое вещество
Билирубин
Гемоглобин
Общий белок
Т1)иглицериды
Конц. тестируемого вещества
22 мг/дл
550 мг/дл
1,8 - 13,2 г/дл
3300 мг/дл
Перенос
При исследовании образца, содержащего 1527 нг/мл PGI, выявляемого
переноса (менее значения аналитической чувствительности) не
наблюдалось.
Точность при корреляции
Тест-систему ARCHITECT Pepsinogen I сравнивали с коммерческим
диагностическим набором. В таблице ниже приведены результаты
исследования образцов сыворотки крови;
ARCHITECT Pepsinogen I vs. Abbott Pepsinogen I RIABEAD
Метод
Кол.
образцов Пересечение
Угол
наклона
Коэфф.
корреляции
Линейная
регрессия
наименьших
квадратов
749 -1.1 0,92 0,984
БИБЛИОГРАФИЯ
1 . Samloff IM. Slow moving protease and the seven pepsinogens:
Electrophoretic demonstration of the existence of eight
proteolytic fractions in human gastric mucosa. 1969;57(6):
659-669.
2. Samloff IM, Varis K, lhamaki T ,
e ta l. Relationships Among Pepsinogen I,
Serum Pepsinogen II, and Gastric Mucosal HistologyGastroeneterology
1982:83:204-209.
3. Weinstein WM, Lechago J, Samloff IM, e t at. Pepsinogens in human
gastric cardiac and esophageal glands. Clin. Acta Endocrinol
1985;45:879-85. 97725{5):690.
4. Miki K, Ichinose M. Chronic atrophic gastritis and Serum pepsinogen
levels. Jpn. J. Cancer Clin. 1992;38(3):221-229.
5. Kabuto M, Imai И, Tsugane S, e t al. Correlation between Atrophic
Gastritis Prevalence and Gastric Cancer Mortality among Middle-aged
Men in 5 Areas in Japan. J. Epidemiotogy 1993;3:35-39.
6. Kikuchi S, Wada O , Miki K, e ta l. Serum Pepsinogen as a New Marker
for Gastric Carcinoma among Young Adults. 1994;73(11):2695-2702.
7. Miki K, Ichinose M, Shimizu A, ef al. Serum Pepsinogens as a Screening
test of Extensive chronic gastritis. Gastroenterologica Japonica.
1987;22(2):133-141.
8. Hattori Y, Tashiro H, Kawamoto T , e t al. Sensitivity and Specificity
of Mass Screening for Gastric Cancer Using the Measurement
of Serum Pepsinogens. Jpn. J. Acta Endocrinol 1985;45:879-85.
1995:86(12):1210-1215.
9. Yoshihara M, Sumii K. Haaima K. e ta l. Yoshihara M. Sumii K, Haruma
K, et al. Hiroshima J. Med. Sci. 1997;46(2):81-86.
10. Yoshihara M, Sumii K, Haruma K, et al. Correlation of ratio of Serum
pepsinogen I and II with prevalence of gastric cancer and adenoma in
Japanese subjects. Am. J. 1969;57(6): 1998;93(7): 1090-1096.
11. Kitahara F, Kobayashi K, Sato T, e ta l. Accuracy of screening for gastric
cancer using serum pepsinogen concentrations. Gut. 1999:44:693-
697
12. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ, e ta l. “Sandwich"-Type Immunoassay
of Carcinoembryonic Antigen in Patients Receiving Murine Monoclonal
Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem 1988:34(2):.
261-264.
13. Schroff RW. Foon KA, Beatty SM, e t a l. Human Anti-Murine
Immunogtobulin Responses in Patients Receiving Monoclonail Antibody
Therapy Cancer Res 1985;45:879-885.
14. Miki K. Oka H: Significance of determination of serum pepsinogen.
1986;58(3):716-718.
15. Miki K, Ichinose M, Shimizu A, et al. Evaluation of serum group I and
II pepsinogens (PG I and PG II) by radioimmunoassay (RIA) in normal
controls and patients with various disorders. 1982:79(11):2071-2079.
16. Miki K, Oka H: Medical application of pepsinogen RIA kit.
1989;19(4):531-537
17 Nishizawa M: An outkjok of gastric mass screening (2nd report). Nippon
Shokaki shudankenshin gakkaishi 1988;78:100-103.
18. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of
Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second Edition;
Approved Guideline. NCCLS document EP5-A. Wayne, PA:NCCLS,
February 1999.
Следующие патенты США относятся к системе ARCHH^T i или
её компонентам. В США и в мире существует ряд других подобных
патентов и патентных приложений.
5 468 646
5 565 570
5 543 524
5 669 819
5 545 739
5 783 699
ProClin является собственностью соответствующего владельца.
У
ABBOTT
Max-Planck-Ring 2
65205 Wiesbaden
Germany
+49-6122-580
C€
Июнь 2008
©2000, 2008 Abbott Laboratories
--- стр. 32 ---
НАЗВАНИЕ
ARCHfTECT Pepsinogen II
НАЗНАЧЕНИЕ
Тест АНСНГТЕСТ Pepsinogen II (PG II) является хемилюминесцентным
иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для количественного
определения пепсиногена II в сыворотке и плазме крови человека.
ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Abbott ARCHITECT Pepsinogen II - автоматизированный иммуноанализ,
основанный на использовании хемилюминесцентного иммуноанализа
на микрочастицах (CMIA).
Пепсиногены - это неактивные предшественники пепсинов,
являющихся протеолитическими ферментами в желудочном соке и
иммунологически классифицирующиеся как пепсиноген I (PG I) и
пепсиноген II (PG II)''. PG I продуцируется железами дна желудка, а
PGII - железами дна желудка, железами кардиального отдела желудка,
железами пилорического отдела желудка, а также бруннеровыми
железами.2-Э Известно, что количество главных клеток желудка,
продуцирующих PG I, в основном снижается, а количество желез
пилорического отдела желудка увеличивается, что обусловлено
прогрессированием атрофии слизистой дна желудка. В результате
соотношение PGI/PGII (I / II) снижается.^ В связи с этим становится ясно,
что использование соотношения I / II в качестве показателя атрофии
слизистой дна желудка считается эффективным, а использование
иммунологического метода исследования PG I и PG II целесообразно
при масс-скрининге болезней, сопровождающихся атрофией
слизистой дна желудка, с использованием комбинированного анализа
соотношения PGI и I / II. Считается, что болезни, сопровождающиеся
атрофией слизистой дна желудка, особенно атрофический гастрит,
связаны с раком желудка. Таким образом, иммунологические методы
исследования PGI и PG II используются для масс-скрининга желудка
при клиническом исследовании.®"''''
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
ARCHITECT Pepsinogen II является двухступенчатым иммуноанализом
для количественного определения PG II в сыворотке и плазме крови
человека с использованием технологии CMIA с гибкими протоколами
анализа, называемыми Chemiflex.
На первой стадии соединяются образец, разбавитель анализа и
парамагнитные микрочастицы, сенсибилизированные антителами
к PG II человека. Присутствующий в образце PG II связывается
с микрочастицами, сенсибилизированными антителами к PG II
человека. После промывки на второй стадии добавляется акридин-
меченый коньюгат антител к PG II человека. После следующего
цикла промывки к реакционной смеси добавляются претриггерный и
триггерный растворы. Получаемая в результате хемилюминесцентная
реакция измеряется в относительных световых единицах (RLU). Между
количеством PGII в образце и RUJ, выявляемыми оптической системой
ARCHR^CT i, существует прямая зависимость. Концентрация PG II в
образце определяется по полученной ранее калибровочной кривой
ARCHITECT Pepsinogen II.
Дополнительная информация о системе и технологии анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 3.
РЕАГЕНТЫ
Набор реагентов, 100 / 500 тестов
ПРИМЕЧАНИЕ: Некоторые расфасовки доступны не во всех странах
или для использования не на всех системах
i Systems. Обратитесь к
местному дистрибьютору.
ARCHITECT Pepsinogen II Reagent Kit (9D6S)
• I m ic r o p a r t ic le s I 1 флакон (6,6 мл на 100 тестов/27,0 мл на 500
тестов) с микрочастицами, сенсибилизированными антителами
к PG II человека (мышиными, моноклональными) в буфере
MOPSO с протеиновым (бычьим) стабилизатором. Консервант;
противомикробные препараты.
• IcOMJUOiiri] 1 флакон (5,9 мл на 100 тестов/26,3 мл на 500
тестов) акридин-меченого коньюгата антител к PG II человека
(мышиных, моноклональных) в MOPSO буфере с протеиновым
(бычьим) стабилизатором. Консервант; ProClin.
• [ASSAY SPECIFIC P ILU E N t] 1 флакон (10,0 МЛ на 100 тестов/
50,9 мл на 500 тестов) с разбавителем теста Pepsinogen II
содержит буфер MES. Консервант; РгоСМп.
Другие реагенты
ARCHH^CT» Pre-Trigger Solution
• |PRE-TRIQQER SOLUTION | Претриггерный раствор содержит 1,32%
(вес/объем) пероксида водорода.
ARCHITECT
i Trigger Solution
• I triq qer s o lu tio nI Триггерный раствор содержит 0,35 N
гидроксида натрия.
ARCHn~ECT i Wash Buffer
ПРИМЕЧАНИЕ: Количество флаконов и объём зависят от заказа.
• IWASH buffer ! Промывочный буфер содержит забуференный
фосфатом ф изи о ло ги че ски й раствор. Консервант:
противомикробный агент.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• Для диагностики In Vitm.
• ВНИМАНИЕ: Данный продукт предполагает работу с образцами
человека. Рекомендуется считать все биоматериалы человека
потенциально инфекционными и обращаться с ними в
соответствии с надлежащими правилами биологической
безопасности.
Меры предосторожности
• Коньюгат и разбавитель теста содержат смесь; 5-хлор-2-метил-
4-изотиазолин-З-он и 2-метил-4-изотиазолин-3-он (3:1), которая
является компонентом ProClin и классифицируется директивами
Европейского Сообщества (ЕС) как; Раздражающее вещество
(Xi). Далее приводится классификация факторов риска (R) и
безопасности (S).
R43 При контакте может вызвать раздражение кожи.
324 Избегайте попадания на кожу.
S35 Этот материал и его контейнер необходимо
у т и л и з и р о в а т ь с с о б л ю д е н и е м мер
безопасности.
S37 Носите защитные перчатки.
S46 При проглатывании немедленно обратиться за
медицинской помощью и предъявить врачу
содержимое или этикетку.
• Для продуктов, которые в соответствии с пересмотренной
директивой Европейского Сообщества 1999/45/ЕС не
классифицируются как опасные, также существует список
факторов риска, который выдается по требованию.
• Подробная информация о мерах безопасности во время работы на
анализаторе находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT, Раздел 8.
Меры предосторожности при работе
• Не используйте тест-системы после истечения срока годности.
• Не смешивайте реагенты одной или разных упаковок.
• До зафузки тест-системы АНСНП^СТ Pepsinogen II в анализатор
первый раз необходимо перемешать флакон с микрочастицами для
того, чтобы микрочастицы, осевшие во время транспортировки,
ресуспендировались. Инструкции по перемешиванию микрочастиц
смотрите в разделе ПРОЦЕДУРА, Процедура анализа данного
вкладыша.
• НЕОБХОДИМО использовать мембраны для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке для обеспечения
целостности реагента. Правильность результатов анализа не
моЖет бьпгь гарантирована, если мембраны не использовались
в соответствии с инструкциями данного вкладыша.
• Надевайте чистые перчатки при установке мембраны
на открытые флаконы с реагентами, это предохранит от
контаминации.
• После установки мембраны на флаконе с реагентом не
переворачивайте флакон, иначе реагент вытечет, и это может
повлиять на правильность результата анализа.
• Со временем остаточные жидкости высохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на эффективность
анализа.
• Подробная информация о мерах предосторожности при работе
системы находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHfTECT, Раздел 7 .
Инструкции по хранению
-8’С
I2*0^1 Тест-система ARCHITECT Pepsinogen II должна храниться
при температуре 2-8'С вертикально и может использоваться сразу
после извлечения из холодильника (2-8'С).
При соблюдении правил обращения и хранения реагенты остаются
стабильными до истечения срока годности.
--- стр. 33 ---
• Тест-систему ARCHITECT Pepsinogen II можно хранить на борту
анализатора ARCHITECT i в течение максимум 30 дней. По
истечении 30 дней реагенты должны быть утилизированы.
Подробная информация о мониторинге времени нахождения
реагентов на борту находится в Руководстве по эксплуатации
системы ARCHHHDT, Раздел 5.
• Реагенты могут храниться на борту системы ARCHR^CT
i или
вне её. Вне системы храните реагенты при температуре 2-8’С
(с мембранами и сменными крышечками) в вертикальном
положении. Рекомендуется хранить реагенты вне системы в
их поддонах и коробках, чтобы обеспечить им вертикальное
положение. Если флакон с микрочастицами хранился не
вертикально (с установленной мембраной) в холодильнике
вне системы, тест-система должна быть утилизирована.
После извлечения реагентов из анализатора следует запустить
сканирование для обновления таймера стабильности реагентов
на борту анализатора.
Показатели порчи реагентов
Если значение контроля выходит за рамки установленного
диапазона, это может свидетельствовать о порче тест-системы
или технических неполадках с оборудованием. Результаты всех
сопряженных тестов следует считать недействительными, требуется
повторное тестирование. Может потребоваться повторная калибровка.
Информация об устранении неисправностей находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 10.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
• До начала проведения анализа на системе ARCHITECT i должен
быть установлен файл анализа ARCHITECT Pepsinogen II с
ARCHH^CT i Assay CD-ROM. Подробная информация об установке
файла анализа, просмотре и изменении параметров анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHHH^T,
Раздел 2.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы АНСНПЖ:Т, Раздел 5.
• Подробное описание процедуры системы содержится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT.
СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Типы образцов
Следующие типы пробирок для сбора образцов были проверены
на использование в анализе ARCHITECT Pepsinogen II. Другие
типы пробирок для сбора образцов не были проверены для этого
анализа.
• Сыворотка крови человека (включая сыворотку крови, собранную
в пробирки с сывороточным сепаратором)
• Плазма крови человека, собранная в:
• калий EDTA
• цитрат натрия
• Жидкие антикоагулянты могут давать эффект разбавления, что
может привести к заниженным концентрациям в отдельных
образцах пациентов.
• Система ARCHH^CT
i не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит определение правильности типов
образцов в анализе ARCHH^T Pepsinogen II.
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях;
• инактивированные нагреванием
• пулированные
• сильно гемолизированные
• с заметной микробной контаминацией
• образцы, взятые у трупов, или другие жидкости организма
кроме сыворотки и плазмы крови.
• Данный анализ разработан и утвержден для использования
сыворотки или плазмы крови отдельных пациентов или образцов
донорской крови.
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки и
плазмы крови должны бьпъ отделены от фибрина, эритроцитов и
других твёрдых частиц.
• Убедитесь в том, что в образцах сыворотки крови формирование
сгустков закончилось до центрифугирования. Образование
сгустков в некоторых образцах, в особенности взятых у пациентов,
которым назначена антикоагуляционная или тромболитическая
терапия, может занять больше времени. При наличии фибрина в
образцах, отцентрифугированных до полного свертывания крови,
тестирование ведет к получению неправильных результатов.
• Образцы, взятые у гепаринизированных пациентов, могут быть
частично коагулированы и могут давать неправильные результаты
из-за наличия фибрина. Чтобы избежать этого, производите забор
крови до проведения терапии гепарином.
• Чтобы избежать перекрёстную контаминацию обращайтесь с
образцами пациентов осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток или наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до
начала тестирования. Используйте новый аппликатор для каждого
образца, чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. Гравитационного разделения недостаточно
при подготовке образца. Образцы должны быть отделены от
сгустков или эритроцитов центрифугированием в соответствии
с рекомендациями производителей пробирок.
• Тщательно перемешайте размороженные образцы на вортексе на
медленной скорости, или перевернув пробирки 10 раз. Визугшьно
проверьте образцы. Если наблюдается расслоение, продолжайте
перемешивание до тех пор. пока образцы не станут визуально
однородными.
• Для получения правильных результатов образцы необходимо
перенести в центрифужные пробирки и отцентрифугировать
при скорости 2 10000 ОЦС (относительная центрифужная сила)
в течение 10 минут перед тестированием, если они содержат
фибрин, эритроциты или другие твердые частицы.
Для тестирования поместите очищенный образец в чашечку для
образцов или вторичную пробирку.
• Отцентрифугированные образцы с липидным слоем на поверхности
необходимо перенести в чашечки для образцов или новые
пробирки. Соблюдайте осторожность, избегайте перенесения
липидного материала вместе с очищенным образцом.
Хранение
• Если тестирование откладывается более чем на 24 часа,
сыворотка или плазма крови должны бьпъ отделены от сгустков,
сывороточного сепаратора или эритроцитов.
• До начала тестирования образцы могут храниться до 7 дней при
температуре 2-8‘С. Если тестирование откладывается более чем
на 7 дней, образцы следует хранить при температуре -10‘С или
ниже.
• Необходимо избегать многократного повтора циклов
замораживание/размораживание.
Транспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы от
сгустков, эритроцитов или сепараторного геля.
• При транспортировке образцы следует упаковывать и маркировать
в соответствии с местными и международными требованиями
по транспортировке клинических образцов и инфекционных
веществ.
• Образцы должны перевозиться при температуре 2-8'С (мокрый
лёд) или -20’С или ниже (сухой лёд). Не храните образцы
после истечения срока годности, указанного выше. Перед
транспортировкой рекомендуется отделить образцы от сгустков,
сывороточного сепаратора или эритроцитов.
--- стр. 34 ---
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 9D65 ARCHfTECT Pepsinogen II Reagent Kit
Необходимые, но не предоставляемые материалы
АЯСНШЕСТ i System
ARCHITECT i [ASSAY С Р - Я ^
9D65-01 ARCHITECT Pepsinogen II Calibrators
9D65-10 ARCHITECT Pepsinogen II Controls
ARCHfTECT I I p r e - t r ic g e r s o lu t io n ]
ARCHITECT I ITRIOOER SOLUTIONi
ARCHFTECT I I WASH BUFFER I
ARCHITECT I [REACTION VESSELSi
ARCHITECT i [SAMPLE C U ^
ARCHITECT i |SEPTUM[
ARCHITECT i [REPLACEMENT CAPS[
Пипетки и наконечники для пипеток (опционно) для дозирования
объёмов, заданных на экране заказа пациента или контроля.
Информация о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHrTECT, Раздел 9.
Процедура анализа
• До зафузки тест-системы ARCHITECT Pepsinogen II в анализатор
первый раз необходимо перемешать флакон с микрочастицами для
того, чтобы микрочастицы, осевшие во время транспортировки,
ресуспендировались. После загрузки микрочастиц в первый раз
дальнейшего перемешивания не требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально исследуйте флакон, чтобы убедиться, что
микрочастицы ресуспендированы. Если микрочастицы
всё ещё пристают к стенкам флакона, продолжайте
переворачивать флакон до тех пор. пока микрочастицы
полностью не ресуспендируются.
• Если микрочастицы во флаконе не ресуспендировались,
НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ флакон. Обратитесь к местному
представителю Abbott.
• После того как микрочастицы полностью ресуспендировались,
снимите и выбросьте крышку. В чистых перчатках выньте
мембрану из пакета. Сожмите мембрану вдвое так, чтобы
открылись прорези. Осторожно наденьте мембрану на
флакон.
• При необходимости закажите калибровку.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов, калибраторов,
контролей и общих операционных процедурах находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 5.
• Зафузите тест-систему ARCHH^CT Pepsinogen II на борт системы
ARCHR^CT I. Проверьте наличие всех необходимых для анализа
реагентов. Проверьте наличие мембран на всех флаконах с
реагентами.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте о заказе.
Объема образца в одной чашечке для образцов достаточно только
для проведения 8 повторов. Перед проведением теста проверьте
правильность объёма образца в чашечке для образцов, чтобы
минимизировать эффект испарения.
• Приоритетные образцы: 75 мкл для первого теста Pepsinogen
II плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста из той же
чашечки для образца.
• S 3 часа на борту: 150 мкл для первого теста Pepsinogen II
плюс 25 мкл для каждого дополнительного теста из той же
чашечки для образца.
• > 3 часов на борту: необходим дополнительный объём
образца. Информация об испарении образцов и объёмах
находится в Руководстве по эксплуатации системы АРСИПЕСТ,
Раздел 5.
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте дозатор образца для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и контроли.
• Перед использованием перемешайте калибраторы и
контроли ARCnn^CT Pepsinogen II, аккуратно переворачивая
флаконы.
• Для получения рекомендованного объёма калибраторов
и контролей АРСНПЕСТ Pepsinogen II держите флаконы
вертикально и добавьте по 5 капель каяедого калибратора
или по 4 капли каждого контроля в каждую чашечку для
образца.
• Загрузите образцы.
• Подробная информация о загрузке образцов находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Дополнительная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы АНСНПЖГГ, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
которые описаны в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHRIECT, Раздел 9. Если правила работы в Вашей лаборатории
требуют более частого технического обслуживания, следуйте
принятым процедурам.
Процедуры разведения образца
Образцы пациентов со значением анализа Pepsinogen П , превышающим
100 нг/мл, помечены кодом “>100.0” и могут быть разведены с
использованием процедуры ручного разведения.
Разведение вручную производится следующим образом:
• Предлагаемая пропорция разведения для теста Pepsinogen I11:5.
• Добавьте 100 мкл образца пациента к 400 мкл калибратора 1
ARCHH^CT Pepsinogen II.
• Оператор должен ввести фактор разведения в экран заявки
пациента или контроля. Все образцы, выбраные для заказа, будут
разбавлены. Система использует этот фактор разведения для
автоматического расчёта концентрации образца до разведения
и сообщает результат.
• Если разведенные образцы помечены кодом "> 500.0”, можно
провести дополнительное разведение в пропорции 1:2.
Калибровка
• Для проведения ка л и б р о вки анализа ARCHITECT
Pepsinogen II протестируйте калибраторы 1 и 2 в повторах. Для
оценки калибровки анализа необходимо протестировать по
одному образцу всех уровней контролей PG II. Убедитесь, что
значения контролей не выходят за рамки диапазона концентраций,
указанных во вкладыше к контролям. Калибраторы должны
зафужаться в первую очередь.
• Диапазон значений калибровки: О - 100 нг/мл
• После того ка к ка л и б р о в ка анализа ARCHITECT
Pepsinogen II принята и сохранена, все последующие образцы
могут тестироваться без дополнительной калибровки, если не
происходит следующее:
• Используется тест-система с новым номером серии
• Значения контролей выходят за рамки диапазона допустимых
значений.
• Подробная информация о проведении калибровки находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHR^T, Раздел 6.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
ПРИМЕЧАНИЕ: В целях проверки калибровки рекомендуется
тестировать контроли ARCHITECT Pepsinogen II всех уровней.
Рекомендуемые требования по контролю качества анализа ARCHITECT
Pepsinogen II заключаются в тестировании по одному контролю
всех уровней каждые 8 часов, то есть каждые сутки эксплуатации.
Соблюдайте правила Вашей лаборатории, если они требуют более
частого использования контролей для проверки результатов тестов.
Значения контролей ARCHITECT Pepsinogen II должны быть в
приемлемых диапазонах, указанных во вкладыше к контролям.
Если значение контроля выходит за рамки указанного диапазона,
результаты соответствующего теста считаются ложными, и образцы
необходимо протестировать повторно. Может потребоваться повторная
калибровка.
Проверка параметров теста
Подробная информация о протоколах проверки параметров теста
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Приложение В.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ ARCHITECT Pepsinogen II использует метод обработки данных
по соответствию четырех-параметрической логистической кривой
(4PLC, Y-единицы массы) для создания калибровочной кривой.
--- стр. 35 ---
ФлаЯски
Результаты некоторых тестов могут сопровождаться информацией в
поле флажки. Описание флажков, которые могут появиться в этом
поле, находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHFTECT,
Раздел 5. Значения концентраций пепсиногена II, которые находятся
ниже предела выявления/чувствительности, могут сообщаться только
для информации.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Образцы пациентов, которые принимали в диагностических или
терапевтических целях лекарственные препараты, изготовленные
из моноклональных мышиных антител, могут содержать
человеческие антитела против мыш иных антител (НАМА). Подобные
образцы при тестировании тест-системами, использующими
моноклональные мышиные антитела, могут демонстрировать
ложно повышенные или пониженные з н а ч е н и я .т е с т -
система ARCHITECT Pepsinogen II содержит компонент, который
снижает влияние НАМА-реактивных образцов. Для определения
окончательного диагноза пациента могут потребоваться
дополнительные клинические или диагностические данные.
• Гетерофильные антитела в сыворотке и плазме крови человека
могут реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя с
иммуноанализами in vitro. Пациенты, имеющие регулярный контакт
с животными или продуктами из сыворотки крови животных, могут
быть подвержены данной интерференции, в результате чего могут
наблюдаться аномальные результаты. Для определения точного
диагноза может потребоваться дополнительная информация и
история болезни пациента.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
MikI et сообщают, что комбинированный анализ уровня PG I
в сыворотке или плазме крови, а также использование соотношения
PG I / II являются эффективными при определении степени атрофии
слизистой дна желудка. Позднее они’ ® сообщили, что при пороговых
значениях менее 70 нг/мл для уровня PGI и менее 3,0 для соотношения
PG I/II степень выявления заболеваний, сопровождающихся
атрофией слизистой дна желудка, была самой высокой. При этих
пороговых значениях специфичность составила 80% при отсутствии
атрофии слизистой дна желудка, значение которой совпадает со
значением специфичности непрямого рентгеновского метода (самого
распространенного метода масс-скрининга желудка"'^). Пороговое
значение необходимо установить в каждой лаборатории.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
ПРИМЕЧАНИЕ: Приведены репрезентативные данные. Результаты,
полученные в отдельных лабораториях (и для различных популяций/
образцов), могут отличаться.
Воспроизводимость
Исследование проводили с использованием тест-системы ARCHITEGT
Pepsinogen II в соответствии с инструкциями документа ЕР5-А
Института клинических и лабораторных стандартов.'’® Шесть образцов:
три сывороточные панели и три контроля PG II - были исследованы
на двух анализаторах, в двух повторах, дважды в день, в течение
двадцати дней (п-^вО для каждого образца) с использованием двух
серий реагентов и одной калибровки. Результаты анализа сведены
в таблице.
Воспроизводимость теста ARCHITECT Pepsinogen I!
Образец
Среднее
Инстру- PGII Внутри серии
мент Реагент (нг/мл) СКО %КВ
Всего
СКО %КВ
Низкий 1 1 3,0 0,112 3.7 0,159 5.3
контроль 2 2,9 0.089 3.0 0,169 5.8
2 1 2,9 0.117 4.0 0,191 6.6
2 2,8 0.089 3.2 0,196 7,0
Средний 1 1 8,0 0.185 2.3 0,298 3,7
контроль 2 7,9 0.186 2.3 0,420 5,3
2 1 7,8 0,317 4.1 0,415 5,3
2 7.6 0,314 4,1 0,453 6,0
Высокий 1 1 29,8 0,780 2,6 1,106 3.7
контроль 2 29,6 0,645 2,2 1,232 4.2
2 1 29,1 1,196 4,1 1,391 4,8
2 28,6 0,920 3.2 1,456 5,1
Панель 1 1 1 4.6 0,111 2.4 0,196 4.2
2 4.6 0,110 2.4 0,238 5.2
2 1 4.6 0,197 4.3 0,264 5.8
2 4.5 0,170 3,8 0.281 6.2
Панель 2 1 1 23,5 0,584 2,5 0.885 3.8
2 23,5 0,644 2,7 0.899 3.8
2 1 23,4 0,750 3,2 1,104 4.7
2 23,0 0,766 3,3 1,268 5,5
Панель 3 1 1
57.5 1,132 2,0 1,971 3,4
2 58,4 1.024 1,8 2,146 3,7
2 1 57.6 1.751 3,0 2.549 4.4
2 56,8 2,255 4,0 3.100 5.5
Выход
Известные количества PGII были добавлены к двенадцати нормальным
образцам сыворотки крови человека и протестированы в два
различных дня. Концентрация PG И определялась с использованием
трех серий реагентов тест-системы ARCHITECT Pepsinogen II, после
чего рассчитывался процент выхода.
Эндоген. Добавлен. Наблюдаем.
уровень PG II PG II Процент
Образец День Реагент (нг/мл) (нг/мл) (нг/мл) выхода
1 1 1 4,3 7,4 11.9 102.5
4,3 37,0 39.0 93.7
2 6.1 7.4 13.5 99.9
6.1 37.0 43.4 100.9
3 6.1 7.4 14,1 108.1
6.1 37,0 46,6 109.4
4 7,0 7,4 14,7 104.1
7.0 37,0 45,7 104.3
5 2 2 5,3 9.3 14,7 101.2
5,3 44,7 50,5 101.2
6 6,2 9.3 15,2 96,4
6,2 44,7 50,6 99,3
7 6,6 9,3 15,8 97.7
6,6 44,7 50,5 98,1
8 7,3 9.3 16.7 100.3
7.3 44.7 53,2 102,6
9 2 3 5.4 8.4 14,4 106,4
5.4 44,0 46,8 94,0
10 5.8 8,4 14,0 97.0
5.8 44,0 49,5 99.3
1 1 5.9 8,4 14,8 105.3
5.9 44,0 50,6 101.5
1 2 7,5 8,4 16,0 101,6
7,5 44,0 51,5 100,0
Средний % выхода: 101,0%
--- стр. 36 ---
% выхода - (наблюдаем, (нг/мл) - эндоген, уровень (нг/мл))
добавленный PG II (нг/мл)
X 100
Аналитическая чувствительность
Расчетная чувствительность анализа ARCHITECT Pepsinogen II менее
0,5 нг/мл. Чувствительность определяется как концентрация, на
два стандартных отклонения превышающая среднее значение RLU
для калибратора 1 ARCHITECT Pepsinogen II, и представляет собой
наименьшую измеримую концентрацию PG II, отличную от нуля.
Специфичность
Специфичность анализа ARCHITECT Pepsinogen II определялась
методом тестирования сывороток крови, содержащих перечисленные
ниже вещества. Эти вещества при указанных концентрациях показали
в анализе АРСНГГЕСТ Pepsinogen II интерференцию менее 10%.
Тестируемое вещество
Билирубин
Гемоглобин
Общий белок
Триглицериды
Конц. тестируемого вещества
22 мг/дл
550 мг/дл
1,8 - 13,2 г/дл
3300 мг/дл
Перенос
При исследовании образца, содержащего 415 нг/мл PG II, не
наблюдалось выявляемого переноса (менее значения аналитической
чувствительности).
Точность при корреляции
Тест-систему ARCHITECT Pepsinogen II сравнивали с коммерческим
диагностическим набором. В таблице ниже приведены результаты
исследования образцов сыворотки крови:
ARCHITECT Pepsinogen II vs. Abbott Pepsinogen I RIABEAD
12. Primus FJ, Kelley EA, Hansen HJ,
e ta l. “Sandwich*-Type Immunoassay
of Carcinoembryonic Antigen In Patients Receiving Murine Monoclonal
Antibodies for Diagnosis and Therapy. Clin Chem 1988;34(2):261-264.
13. Schroff RW, Foon KA. Beatty SM,
e t a l. Human Anti-Murine
Immunoglobulin Responses in Patients Receiving Monoclonal Antibody
Therapy. Cancer Res 1985:45:879-885.
14. Miki K, Oka H: Significance of determination of serum pepsinogen.
1986;58(3):716-718.
15. Miki K, Ichinose M, Shimizu A, e ta l. Evaluation of serum group I and
II pepsinogens (PG I and PG II) by radioimmunoassay (RIA) in normal
controls and patients with various disorders. 1982;79(11):2071-2079.
16. Miki K, Oka H: Medical application of pepsinogen RIA kit.
1989;19(4):531-537
17 Nishizawa M; An outlook of gastric mass screening (2nd report). Nippon
Shokaki shudankenshin gakkaishi 1988;78:100-103.
18. National Committee for Clinical Laboratory Standards. Evaluation of
Precision Performance of Clinical Chemistry Devices - Second Edition;
Approved Guideline. NCCLS document EP5-A. Wayne, PA:NCCLS,
Febmary 1999.
Следующие патенты США относятся к системе ARCHn^CT i или
её компонентам. В США и в мире существует ряд других подобных
патентов и патентных приложений.
5 468 646
5 565 570
5 543 524
5 669 819
5 545 739
5 783 699
ProClin является собственностью соответствующего владельца.
У
ABBOTT
Max-Planck-Ring 2
С€
Кол. Угол Коэфф.
Методика образцов Пересечение наклона корреляции
Germany
+49-6122-580
Линейная рефессия 770 0,4 0,81
наименьших
квадратов
0,986
Июнь 2008
©2000, 2008 Abbott Laboratories
БИБЛИОГРАФИЯ
1 . Samloff IM. Slow moving protease and the seven pepsinogens:
Electrophoretic demonstration of the existence of eight
proteolytic fractions In human gastric mucosa. Gastroenterology
1969;57(6):659-669.
2. Samloff IM, Varis K, lhamaki T, et al. Relationships Among Pepsinogen I.
Serum Pepsinogen II, and Gastric Mucosal HistologyGastroeneterology
1982;83:204-209.
3. Weinstein WM, Lechago J, Samloff IM, et al. Pepsinogens in human
gastric cardiac and esophageal glands. Clin. Acta Endocrinol
1985;45:879-85. 1977(5):690.
4. Miki K, Ichinose M. Chronic atrophic gastritis and Serum pepsinogen
levels. Jpn. J. Cancer Clin. 1992;38(3):221-229.
5. Kabuto M, Imai H, Tsugane S, et al. Correlation between Atrophic
Gastritis Prevalence and Gastric Cancer Mortality among Middle-aged
Men in 5 Areas in Japan. J. Epidemiok>gy. 1993;3:35-39.
6. Kikuchi S, Wada 0, Miki K, et al. Serum Pepsinogen as a New Marker
for Gastric Carcinoma among Young Adults. 1994;73(11):2695-2702.
7. Miki K. Ichinose M. Shimizu A, et al. Serum Pepsinogens as a Screening
test of Extensive chronic gastritis. Gastroenterologica Japonica.
1987;22(2):133-141.
8. Hattori Y, Tashiro H, Kawamoto T, et al. Sensitivity and Specificity
of Mass Screening for Gastric Cancer Using the Measurement
of Serum Pepsinogens. Jpn. J. Acta Endocrinol 1985;45:879-85.
1995;86(12):1210-1215.
9. Yoshihara M, Sumii K, Haruma K.
e ta l. Yoshihara M, Sumii K, Haruma
K, et al. Hiroshima J. Med. Sci. 1997;46(2):81-86.
10. Yoshihara M, Sumii K, Haruma K, e t a l. Correlation of ratio of Serum
pepsinogen I and II with prevalence of gastric cancer and adenoma in
Japanese subjects. Am. J. 1969;57(6): 1998;93(7):1090-1096.
11. Kitahara F, Kobayashi K, Sato T , e ta l. Accuracy of screening for gastric
cancer using serum pepsinogen concentrations. Gut. 1999;44:693-
697
--- стр. 41 ---
ф
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ:
Содержит метилизотиазолоны.
Н317 Может вызывать аллергическую кожную
реакцию.
Предотвращение
Р261 Избегать вдыхания пыли/дыма/газа/тумана/
паров/аэрозолей.
Р272 Не выносить зафязиённую одежду с
рабочего места.
Р280 Пользоваться защитными перчатками/
защитной одеждой/средствами защиты
глаз/лица.
Реагирование
Р302+Р352 ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ: Промыть
большим количеством воды с мылом.
РЗЗЗ+Р313 При раздражении кожи или появлении
сыпи: обратиться к врачу
Р363 Выстирать зафязнённую одежду перед
дальнейшим использованием.
Утилизируйте этот материал и его контейнер с соблюдением мер
предосторожности.
• Следующие предупреждения и меры предосторожности
относятся к данным компонентам;
• Реагент предварительной обработки 1
• Реагент предварительной обработки 2
ОПАСНОСТЬ: Содержит метанол.
Н226 Воспламеняющаяся жидкость и пар.
Н332 Наносит вред при вдыхании.
Н370 Наносит вред органам.
Предотвращение<$>
< ! >
Р210
Р243
Р233
Р2Л
Р260
Р280
Р264
Реагирование
Р304+Р340
РЗОЗ +Р361
+Р353
Р307+Р311
Хранение
Р403+Р235
Р405
Беречь от тепла/искр/открытого огня/
горячих поверхностей. Не курить.
Принимать меры предосторожности против
статического разряда.
Держать контейнер плотно закрытым.
Использовать только на открытом воздухе
или в хорошо вентилируемом месте.
Избегать вдыхания пыли/дыма/таза/тумана/
паров/аэрозолей.
Пользоваться защитными перчатками/
защитной одеждой/средствами защиты
глаз/лица.
После работы тщательно вымыть руки.
ПРИ ВДЫХАНИИ: Вынести пострадавшего
на свежий воздух и обеспечить ему полный
покой в удобном для дыхания положении.
ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ (или волосы):
Немедленно снять загрязненную одежду.
Промыть кожу водой / под душем.
ПРИ ПОПАДАНИИ: Обратиться в
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР или к врачу-
специаписту/терапевту.
Хранить в прохладном/хорошо
вентилируемом месте.
Хранить под замком.
Меры предостороЯсности при работе
• Не используйте тест-системы после истечения срока годности.
• Не смешивайте реагенты одной или разных упаковок.
• Коньюгат термочувствительный, минимизируйте время
нахо)кдения флакона с коньюгатом при комнатной
температуре.
• До загрузки тест-системы АВСНП^СТ 25-ОН Vitamin D в
анализатор первый раз необходимо перемешать флакон с
микрочастицами для того, чтобы микрочастицы, осевшие во
время транспортировки, ресуспендировались. Инструкции по
перемешиванию микрочастиц смотрите в разделе ПРОЦЕДУРА,
Процедура анализа данного вкладыша.
• Мембраны ДОЛЖНЫ использоваться для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке обеспечения
целостности реагента. Достоверность результатов анализа
не гарантируется при любых отклонениях от инструкций,
содер)кащихся в данном вкладыше.
• Надевайте чистые перчатки при установке мембраны на открытые
флаконы с реагентами, это предохранит от контаминации.
• После установки мембраны на флаконе с реагентом не
переворачивайте флакон, иначе реагент вытечет, и это
может повлиять на правильность результата анализа.
• Со временем остаточные жидкости высохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на
эффективность анализа.
• Подробная информация о мерах предосторожности при работе
системы находится в Руководстве по эксплуатации системы
АЯСНПтет, Раздел 7 .
Инструкции по хранению
-8*С
Утилизируйте этот материал и его контейнер с соблюдением мер
предосторожности.
• Информацию о безопасной утилизации азида натрия и мерах
предосторожности во время работы системы см. в Руководстве
по эксплуатации системы АВСНПШЛ; Раздел 8.
• 2*0^1 Храните набор реагентов АЯСНПЕСТ 25-ОН Vitamin
D при 2-8'С вертикально, его можно использовать сразу после
извлечения из холодильника (2-8’С).
• При соблюдении правил обращения и хранения реагенты
остаются стабильными до истечения срока годности.
• Коньюгат термочувствительный, минимизируйте время
нахо)кдения флакона с коньюгатом при комнатной
температуре.
• Набор реагентов АПСНП^СТ 25-ОН Vitamin D на 100 тестов можно
хранить на борту системы АНСНП^СТ
i максимум 7 дней.
• Набор реагентов АНСНП^СТ 25-ОН Vitamin D на 500 тестов можно
хранить на борту системы АНСНПБСТ i максимум 14 дней.
• После указанных максимальных сроков хранения набор реагентов
должен быть утилизирован. Более подробная информация
о мониторинге времени нахождения на борту находится в
Руководстве по эксплуатации системы АПСНПЕСТ, Раздел 5.
• Реагенты могут храниться на борту системы АПСНП^СТ / или
вне её. Вне системы храните реагенты при температуре 2-8'С
(с мембранами и сменными крышечками) в вертикальном
положении. Рекомендуется хранить реагенты вне системы в
их поддонах и коробках, чтобы обеспечить им вертикальное
положение. Если флакон с микрочастицами хранился не
вертикально (с установленной мембраной) в холодильнике
вне системы, тест-система дол)кна бьпъ утилизирована.
Подробная информация о разгрузке реагентов находится в
Руководстве по эксплуатации системы АЯСНП^Т, Раздел 5.
Показатели порчи реагентов
Если результат
образца контроля выходит за рамки указанного диапазона, это
может означать порчу реагентов или технические неполадки в
оборудовании. Результаты сопряжённых исследований неверны, и
образцы должны быть протестированы снова. Может потребоваться
повторная калибровка. Информация об устранении неисправностей
находится в Руководстве по эксплуатации системы АНСНПЕСТ,
Раздел 10.
--- стр. 42 ---
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
• Для теста ARCHfTECT 25-ОН Vitamin D требуется;
• ARCHITECT I System e-Assay CD-ROM на
www.abtrottdiagnostics.com, Support/Technical Library/Assay Files
или
• ARCHITECT I System Assay CD ROM - WW (кроме США) -
Приложение E.
• До проведения теста ARCHITECT 25-ОН Vitamin D на системе
ARCHrTECT i должен быть установлен файл этого теста.
Подробную информацию об инсталляции файла анализа,
просмотре и редактировании параметров см. в Руководстве по
эксплуатации системы ARCHHECT, Раздел 2.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT. Раздел 5.
• Подробное описание процедур системы содержится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT.
• По умолчанию единицей измерения результата теста ARCHITECT
25-ОН Vitamin D является нг/мл. Изменением параметра анализа
“Result concentration units" ("Единица конечной концентрации") на
нмоль/л может быть выбрана альтернативная единица измерения
(нмоль/л). Система использует фактор конверсии 2.5.
СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ
Типы образцов
Следующие типы пробирок для сбора образцов были проверены
на использование в тесте ARCHITECT 25-ОН Vitamin D. Другие
типы пробирок для сбора образцов не были проверены для этого
анализа.
• Сыворотка крови человека (включая сыворотку крови, собранную
в пробирки с сывороточным сепаратором)
• Плазма крови человека, собранная в;
• калиевую соль ЭДТА
• литиевую соль гепарина (порошок или гель)
• натрий гепарин
• Плазма крови человека, собранная в пробирки с цитратом натрия,
показала отклонение -13% по отношению к сыворотке крови.
• Другие жидкие антикоагулянты также могут давать эффект
разбавления, что может вести к заниженным концентрациям в
отдельных образцах пациентов.
• Система ARCHITECT i не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит определение правильности типов
образцов для теста ARCHITECT 25-ОН Vitamin D .
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях:
• инактивированные нагреванием
• пулированные
• сильно гемолизированные (гемоглобин > 500 мг/дл)
• с заметной микробной контаминацией
• образцы, взятые от трупа, или другие жидкости организма
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки и
плазмы крови должны быть отделены от фибрина, эритроцитов
и других твёрдых частиц. Образцы сывороток крови пациентов,
получающих антикоагуляционную или тромболитическую
терапию, могут в результате незаконченного образования
сгустков содержать фибрин.
• Чтобы избежать перекрёстной контаминации, обращайтесь с
образцами пациентов осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток или наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до
начала тестирования. Используйте новый аппликатор для
каждого образца, чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. Гравитационного разделения недостаточно при
подготовке образца.
• Тщательно перемешайте размороженные образцы на вортексе
на медленной скорости, или перевернув пробирки 10 раз.
Визуально проверьте образцы. Если наблюдается расслоение,
продолжайте перемешивание до тех пор, пока образцы не станут
визуально однородными.
• Для получения правильных результатов образцы необходимо
перенести в центрифужные пробирки и отцентрифугировать при
скорости г 10000 ОЦС (относительная центрифужная сила) в
течение 10 минут перед тестированием, если;
• они содержат фибрин, эритроциты или другие твёрдые
частицы,
• их требуется повторно протестировать или
• они были заморожены и разморожены.
Для тестирования поместите очищенный образец в чашечку для
образцов или вторичную пробирку.
• Отцентрифугированные образцы с липидным слоем на
поверхности необходимо перенести в чашечки для образцов
или новые пробирки. Соблюдайте осторожность, избегайте
перенесения липидного материала вместе с очищенным
образцом.
Хранение
• Образцы можно хранить со сгустками или эритроцитами или
без них в течение:
• до 1 2 дней при 2-8'С или
• до 72 часов при 15-30‘С
• Если тестирование откладывается более, чем на 12 дней, удалите
из сыворотки или плазмы крови сгустки или эритроциты и
храните образцы при -20"С или ниже.
• У образцов, хранившихся замороженными в течение 1 месяца,
не наблюдалось изменения рабочих характеристик. Избегайте
более трех циклов замораживания/размораживания.
Транспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы от
сгустков, эритроцитов или сепараторного геля.
• Притранспортировкеобразцыследуетупаковывать и маркировать
в соответствии с местными и международными требованиями
по транспортировке клинических образцов и инфекционных
веществ.
• Образцы могут перевозиться при температуре окружающей
среды, на мокром льду, на сухом льду. Не храните образцы
дольше времени, указанного выше.
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 3L52-25 или -35 ARCHITECT 25-ОН Vitamin О Reagent Kit
Необходимые материалы, не предоставляемые с набором
реагентов
• ARCHITECT 2 System
• 1L66 ARCHITECT
i System_________________
I А«му CD-ROM • WW (>xclu€llna US) • Addition E |. версия 8.0 ИЛИ
более поздняя или
• ARCHFTECT i System e-Assay CD-ROM на
www.abbottdiagnostics.com, SupportДechnical Library/Assay Files.
• 3L52-01 ARCHHECT 25-OH Vitamin D Calibrators
• 3L52-10 ARCHITECT 25-OH Vitamin D Controls
• ARCHITECT j IPRE.TRIOCER s o l u t i o n ]
• ARCHITECT
i iTRiOOER SOLUTiONi
• ARCHRECT JIWASH buffer ]
• ARCHITECT i I REACTION VESSELS I
• ARCHITECT i [SAMPLE CUPSI
• ARCHFTECT i ISEPTUMi
• ARCHFTECT i [REPLACEMENT CAPS|
• Пипетки или наконечники для пипеток (опционно) для
обеспечения объёмов, указанных на экране заказа пациента
или контроля.
Информация о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHFTECT, Раздел 9.
--- стр. 43 ---
Процедура анализа
• До зафузки тест-системы ARCHITECT 25-ОН Vitamin D в
анализатор первый раз необходимо перемешать флакон с
микрочастицами для того, чтобы микрочастицы, осевшие во
время транспортировки, ресуспендировались. После загрузки
микрочастиц в первый раз дальнейшего перемешивания не
требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально проверьте флакон, чтобы убедиться, что
микрочастицы ресуспендировались. Если микрочастицы
всё ещё пристают к стенкам флакона, продолжайте
переворачивать флакон до тех пор, пока микрочастицы
полностью не ресуспендируются.
• Если микрочастицы во флаконе не ресуспендировались,
НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ флакон. Обратитесь к местному
представителю Abbott.
• После того как микрочастицы ресуспендировались,
поместите на флакон мембрану. Инструкции по помещению
мембран на флаконы находится в разделе Меры
предосторо;кности при работе данного вкладыша.
• Загрузите реагенты набора АНСНП^СТ 25-ОН Vitamin D в систему
АЯСНП^СТ L
• Проверьте наличие всех необходимых реагентов.
• Проверьте наличие мембран на всех флаконах с
реагентами.
• При необходимости закажите катибровку.
• Подробная информация о заказе калибровки находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHFECT,
Раздел 6.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов и контролей и
общих операционных процедурах находится в Руководстве
по эксплуатации системы АВСНПНЛ; Раздел 5.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте о заказе.
Объема образца в одной чашечке для образцов достаточно
только для проведения 10 повторов. Перед проведением теста
проверьте правильность объёма образца в чашечке для
образцов, чтобы минимизировать эффект испарения.
• Приоритетные образцы: 60 мкл для первого тста АЯСНПЖ^Т
25-ОН Vitamin D плюс 10 мкл для каждого дополнительного
теста АПСНП^Т 25-ОН Vitamin D из той же чашечки для
образцов.
• S 3 часов на борту; 150 мкл для первого теста АЯСНП^СТ
25-ОН Vitamin D плюс 10 мкл для каждого дополнительного
теста АЯСНП^СТ 25-ОН Vitamin D из той же чашечки для
образцов.
• > 3 часов на борту; необходим дополнительный объём
образца. Информацию об испарении образца и объёмах
смотрите в Руководстве по эксплуатации системы АЯСНП^СТ,
Раздел 5.
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте мерную метку для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и контроли.
• Перед использованием перемешайте калибраторы и контроли
АНСНПНЛ" 25-ОН Vitamin D . аккуратно переворачивая
флаконы.
• Для получения рекомендуемого объема калибраторов и
контролен ARCHITECT 25-ОН Vitamin D держите флаконы
вертикально и добавьте по 5 капель каждого калибратора
или по 5 капель каждого контроля в каждую соответствующую
чашечку для образцов.
• Зафузите образцы.
• Информация о загрузке образцов находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHH^T, Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Дополнительная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы АНСНПВИТ, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
которые описаны в Руководстве по эксплуатации системы
АНСНП"ЕСТ, Раздел 9. Если правила работы в Вашей лаборатории
требуют более частого технического обслуживания, следуйте
принятой практике.
Процедуры разведения образцов
Образцы с концентрациями 25-ОН витамин D
>160,0 нг/мл (> 400,0 нмоль/л) помечаются флажком ‘ >160.0 ng/mL’
(“>400.0 nmol/L”) и могут бьпъ разведены образцами с
концентрациями 25-ОН витамин D
i 10,7 нг/мл (s 26,8 нмоль/л).
Ручное разведение производится следующим образом; добавьте
100 мкл образца пациента к 100 мкл образца с низкой концентрацией
25-ОН витамин D {т .в ., разведение 1;2).
Расчёт концентрации производится следующим образом;
Концентрация (образец с высокой концентрацией) “
концентрация (разведённый образец 1 :2 ) х 2 - концентрация (образец с
низкой концентрацией)
Калибровка
• Интервал калибровки теста ARCHR^CT 25-ОН Vitamin D
составляет 7 дней.
• Для проведения калибровки теста ARCHITECT 25-ОН Vitamin D
протестируйте калибраторы А, В, С, D , Е и F в двух повторах. Для
оценки калибровки протестируйте по одному образцу контролей
25-ОН vitamin D . Убедитесь, что значения контролей не выходят
за рамки диапазона концентраций, указанных в инструкции к
контролям. Калибраторы должны бьп"ь загружены приоритетно.
• Диапазон калибровки: 0.0 -160,0 нг/мл (0,0 - 400.0 нмоль/л).
• Полную информацию о проведении калибровки анализа смотрите
в Разделе 6 Руководства по эксплуатации системы ARCHH^CT.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
Рекомендуемые требования по контролю качества анализа
АНСНГТЕСТ 25-ОН Vitamin D заключаются в тестировании контролей
каждого уровня каждые 24 часа использования. Соблюдайте правила
Вашей лаборатории, если они требуют более частого использования
контролей для проверки результатов тестов.
Дополнительные контроли могут использовап'ься в анализе в
соответствии с местными и/или федеральными правилами или
установленными требованиями и нормами по качеству контроля
Вашей лаборатории.
Каждая лаборатория должна установить свои диапазоны контролей,
чтобы контролировать приемлемые рабочие характеристики теста.
Если значение контроля выходит за рамки указанного диапазона,
результаты соответствующего теста считаются ложными, и образец
необходимо протестировать повторно. Может потребоваться
повторная калибровка.
Проверка параметров анализа
Информация о протоколах проверки параметров анализа находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT. Приложение
В. Тест ARCHR^CT 25-ОН Vitamin D относится к методологической
группе 2.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Анализ ARCHRHDT 25-ОН Vitamin D использует методику обработки
данных по соответствию четырех-параметрической логистической
кривой (4P 1JC . Y-единицы массы) для создания калибровочной
кривой.
Вычисление
Система ARCHH^CT i рассчитывает среднее значение
хемилюминесцентного сигнала калибраторов А - F в двух повторах,
создает калибровочную кривую и сохраняет результат. По умолчанию
единицей измерения результата теста АНСНГЕСТ 25-ОН Vitamin D
является нг/мл.
Фла)кки
Некоторые результаты могут содержать информацию в поле Флажков.
Описание информации, которая может находиться в поле Флажки,
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT.
Раздел 5.
Диапазон измерения (сообщаемый диапазон)
Диапазон измерения теста ARCHR^CT 25-ОН Vitamin D составляет
8,0 нг/мл - 160,0 нг/мл (20,0 нмоль/л - 400,0 нмоль/л).
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Если результат по витамину D не согласуется с клиническими
данными, для подтверждения результата рекомендуется провести
дополнительное тестирование.
• В целях диагностики результаты анализа должны использоваться
в сочетании с другими данными,
напр., симптомами, результатами
других тестов, клиническими проявлениями и тл-
--- стр. 44 ---
Гетерофильные актитела в сыворотке крови человека могут
реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя с
иммуноанализами in vitro.^^ Пациенты, имеющие регулярный
контакт с животными или продуктами из сыворотки крови
животных, могут быть подвержены данной интерференции, в
результате чего могут наблюдаться аномальные результаты.
Для определения точного диагноза может потребоваться
дополнительная информация.
Образцы пациентов, получавш их в диагностических или лечебных
целях препараты, приготовленные из мышиных моноклональных
антител, могут содержать человеческие антитела против
мышиных антител (НАМА)."'®-''® Образцы, содержащие НАМА,
могут давать аномальные значения при тестировании тест-
системами, использующими мышиные моноклональные
антитела.''®
Средн.
Серия конц. Внутри серии Всего
Образец реагента Коя. (нг/мл) СКО %КВ СКО %КВ
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Каждой лаборатории рекомендуется устанавливать собственный
референсный диапазон, который может быть уникальным для
обслуживаемой популяции вследствие географических, сезонных,
личностных, диетологических особенностей, а также факторов
окружающей среды.
Исследование референсных диапазонов определялось с
использованием протокола С28-А32° Института клинических
и лабораторных стандартов (CLSO- Образцы сыворотки крови
очевидно здоровых жителей Нидерландов, собранные в летнее
время (с июня по сентябрь) и во время зимы (с марта по май, в
ноябре и декабре) оценивали в одном повторе с использованием
тест-системы ARCHITECT 25-ОН Vitamin D. Была использована
медицинская анкета, чтобы отобрать референсную группу образцов
по следующим критериям: возраст от 17 до 60 лет, нормальное
питание (без диеты), без пищевых добавок, без заболеваний костей
или ревматизма, не было недавнего отпуска в солнечных странах или
загорания, не было недавнего лечения в больнице, без хронических
заболеваний (особенно диабета, почечной недостаточности,
высокого холестерина). Кроме того, исключались люди, если их
результаты были вне диапазона ожидаемых значений для /РТН
(15,0 - 68,3 пг/мл) и кальция (2,10 - 2,55 ммоль/л). Полученные
значения суммированы в следующей таблице.*
Поя
Сезон
Летнее Зимнее
Все Женщины Му;кчины время время Единица
Кол. 360 178 182 120 240
2,5-й
процентиль 9.5 9,4 9,4 15.7 8.8 нг/мл
97,5-й
процентиль 55,5 59,1 52.4 60,3 46.3 нг/мл
* Репрезентативные данные: результаты, полученные в других
лабораториях и географических регионах, могут отличаться от
приведенных выше.
В настоящее время обсу)^аается рекомендованный целевой
диапазон значений витамина D в сыворотке крови, но по недавно
предложенной экспертной панели целевой диапазон должен быть по
крайней мере 30 - 40 нг/мл.^^
СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
Данные раздела СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
были получены на системе ARCHRHJT i2000gp.
Результаты теста, полученные в отдельных лабораториях, могут
отличаться от представленных данных.
Воспроизводимость
Тест ARCHRH^ 25-ОН Vitamin D разработан так, чтобы иметь
воспроизводимость 5 10% общего %КВ.
Было проведено исследование тест-системы ARCHnHDT
25-ОН Vitamin D в соответствии с протоколом ЕР5-А2 С1^1.22 Шесть
образцов, 3 образца контролей АЯСНП^СТ 25-ОН Vitamin D и 3
панели сывороток крови, исследовали с использованием двух серий
реагентов, на одном инструменте, в двух повторах, дважды в день, в
течение 20 дней. Результаты анализа приведены в таблице ниже.
Низкий 1 80 19.0 0,709 3,7 0,712 3,8
контроль 2 80 19.5 0.589 3,0 0,889 4,6
Средний 1 80 38,5 0,873 2,3 1,142 3,0
контроль 2 80 38,0 0,879 2.3 1,062 2,8
Высокий 1 80 78,4 1,470 1.9 2,201 2,8
контроль 2 80 76,3 1,485 1.9 2,034 2,7
Сыворотка 1 80 23,0 0,714 3.1 0,912 4.0
крови
панель 1
2 80 22,4 0,548 2.4 0,780 3.5
Сыворотка 1 80 42,5 1,095 2.6 1,346 3.2
крови
панель 2
2 80 40,1 0,668 1.7 1,274 3.2
Сыворотка 1 80 75,4 1,088 1,4 2,064 2.7
крови
панель 3
2 80 71.3 1,242 1.7 1,869 2,6
Линейный диапазон
Линейный диапазон тест-системы ARCHITECT 25-ОН Vitamin D был
установлен в соответствии с протоколом ЕР6-А NCCLS.^®
Были приготовлены четыре пары образцов: каждую пару разводили 1 1
раз, смешивая образец с высокой концентрацией 25-ОН витамина D
(в диапазоне от 78,4 нг/мл до 165,5 нг/мл) в специальной пропорции
с образцом с низкой концентрацией 25-ОН витамина D (в диапазоне
от 0,2 нг/мл до 10,7 нг/мл), и исследованы с использованием тест-
системы ARCHITECT 25-ОН Vitamin D. С использованием абсолютного
отклонения от линейности
й 20% для тест-системы ARCHITECT
25-ОН Vitamin D был установлен линейный диапазон в 9,4 нг/мл -
165,5 нг/мл.
Интервал измерения
Интервал измерения определяется как диапазон значений в нг/мл,
который соответствует границам приемлемых рабочих характеристик
для пофешности и отклонения неразбавленного образца. В
исследовании по проверке данных этого вкладыша использовался
диапазон 8,0 нг/мл - 160,0 нг/мл (20,0 нмоль/л - 400,0 нмоль/л).
Чувствительность
Тест ARCHHECT 25-ОН Vitamin D разработан так, чтобы иметь предел
фонового измерения (ПфИ) s 4,0 нг/мл, предел обнаружения (ПО)
й 10,0 нг/мл и предел количественного измерения (ПКИ) s 20 нг/мл.
В соответствии с протоколом ЕР17-А CLSI^^ было проведено
исследование 4 образцов с 0-уровнем (калибратор А) и 8 образцов
с концентрациями 25-ОН витамин D в диапазоне от 3,4 нг/мл
до 9.5 нг/мл. Эти образцы исследовали в 5 сериях, в течение
минимум 5 дней, с использованием двух серий реагентов, на двух
анализаторах.
По данным этого исследования ПфИ составил 1,9 нг/мл, ПО -
3,1 нг/мл и ПКИ - 8,0 нг/мл.
Специфичность
Специфичность тест-системы ARCHITECT 25-ОН Vitamin D
исследовали методом тестирования приведённых ниже в таблице
перекрёстных реагентов.
Было проведено исследование тест-системы ARCHH^CT 25-ОН
Vitamin D в соответствии с протоколом ЕР7-А2 CLSI.^® К аликвотам
калибратора А ARCHH^CT 25-ОН Vitamin D добавляли потенциальные
перекрёстные реагенты в указанных концентрациях и исследовали
на 25-ОН витамин D. Результаты этого исследования приведены в
таблице ниже.
Кросс-реагент
Концентрация
нг/мл
% перекрёстной
реактивности^
25-ОН vitamin Оэ 100 105
25-ОН vitamin D2 100 52
Vitamin-D2 (Ergocalciferol) 1000 0,1
Vitamin-D3 (Cholecalciferol) 1000 0,3
24,25-(OH)2-vitamin D3 20 112
1,25-(OH)2-vitamin D3 100 12,6
3-epi 25-OH vitamin D3 100 2,7
Paricalcitol (Zempiar) 24 0,4
--- стр. 45 ---
X 100
Сред. знач. обогащенного (нг/мл) -
8 % перекрёстной _ Сред, знач. не обогащ. (нг/мл)
реактивности Концентрация кросс-реагекта (нг/мл)
Интерференция
Потенциальная интерференция в тесте ARCHITECT 25-ОН Vitamin D
гемоглобина, билирубина, триглицеридов, белка, ревматоидного
фактора, НАМА (человеческие антитела против мышиных антител)
и эритроцитов S 10% .
Интерференция была исследована в соответствии с протоколом
ЕР7-А2 CLSI. Результаты этого исследования приведены в таблице
ниже.
Потенциально
интерферирующее Диапазон
вещество Концентрация
% выхода^
Гемоглобин*’ 200 (мг/дл) 91 - 98
Билирубин 20 (мг/дл) 100 - 104
Триглицериды 5000 мг/дл 94 - 103
Белок(альбумин
человека) 12 г/дл 90 - 102
Ревматоидный фактор^ 400 МЕ/мл 106 - 109
НАМА 1000 нг/мл 96 - 99
Эритроциты 0,4%(об/об) 99 - 103
® % выхода - Средн. наблюдаемое значение (нг/мл) X 100
Средн. значение контроля (нг/мл)
^ Для образцов с гемоглобином в концентрациях от 200 мг/дл до
500 мг/дл % выхода был от 90% до 62%.
Для образцов с Ревматоидным фактором в концентрациях от
400 МЕ/мл до 800 МЕ/мл % выхода был от 107% до 118%.
Метод сравнения
Тест-система ARCHITECT 25-ОН Vitamin D имеет коэффициент
корреляции 2 0,80 для образцов сыворотки крови при сравнении с
тест-системой DiaSorin LIAISON 25-ОН Vitamin D Total.
Было проведено иccлвдoвaниeтвcт-cиcтeмыARCHITECT25-OH Vitamin
D , в котором проводился регрессионный анализ с использованием
метода Passing-Bablok.2® Результаты этого исследования приведены
в таблице ниже и графике.*
Метод
рефессии Кол. Угол наклона Пересечение
Коэфф.
корреляции
Passing-
ВаЫок» 108 1,02 -0,54 0,94
® Метод линейной рефессии без особых допущений относительно
распределения образцов и ошибок измерений.
* Репрезентативные данные; такие переменные, как размер выборки
образцов и исследуемая популяция, могут оказывать влияние на
корреляцию теста, поэтому результаты отдельных лабораторий
могут отличаться от этих данных.
По результатам этого исследования концентрации образцов
сыворотки крови были в диапазоне от 8,2 нг/мл до 70,5 нг/мл при
тестировании тест-системой ARCHRHTT 25-ОН Vitamin D и от
5,1 нг/мл до 63,2 нг/мл при тестировании методом DiaSorin LIAISON
25-ОН Vitamin D Total. Образцы, включённые в это исследование,
были получены в клинической исследовательской организации.
ARCHITECT 25-ОН Vitamin D
vs.
DiaSorin LIAISON 25-ОН Vitamin D Total (Passlng-Bablok)
DiaSorin LIAISON 25-OH Vitamin D T o t a l (нг/мл)
Те же самые образцы исследовали методом хроматографии (ЖХ/МС/
МС) и сравнивали с результатами теста ARCHITECT 25-ОН Vitamin D .
Был проведён анализ рефессии с использованием метода Passing-
ВаЫок. Результаты этого исследования приведены в таблице ниже
и на графике.*
Метод Коэфф.
регрессии Кол. Угол наклона Пересечение корреляции
Passing-
ВаЫок® 107 1,01 -1,45 0,90
® Метод линейной рефессии без особых допущений относительно
распределения образцов и ошибок измерений.
* Репрезентативные данные; такие переменные, как размер выборки
образцов и исследуемая популяция, могут оказывать влияние на
корреляцию теста, поэтому результаты отдельных лабораторий
могут отличаться от этих данных. Кроме того, такие переменные
ЖХ/МС/МС, как экстракционный способ, метод ионизации, тип
хроматофафического разделения и тип внутреннего стандарта,
могут влиять на результаты ЖХ/МС/МС; поэтому, результаты,
полученные в отдельных лабораториях, могут отличаться от
приведённых выше.^^
По результатам этого исследования концентрации образцов
сыворотки крови были в диапазоне от 8,2 нг/мл до 70,5 нг/мл при
тестировании тест-системой ARCHITECT 25-ОН Vitamin D и от
7,5 нг/мл до 64,4 нг/мл при тестировании методом ЖХ/МС/МС.
--- стр. 50 ---
ВНИМАНИЕ; Результаты теста ARCHFTECT CYFRA 2 1 - 1 не должны
использоваться взаимозаменяемо с результатами определения
CYFRA 2 1 - 1 методами других производителей.
Примечание: Полученное значение CYFRA 2 1 -1 образца пациента
может варьировать в зависимости от использованной методики
тестирования. В заключении лаборатории поэтому всегда должно
бьп'ь указание на применённый метод определения CYFRA
2 1 -1 . Значения CYFRA 2 1 - 1 в образцах пациентов, полученные с
использованием разных процедур тестирования, не могут быть
непосредственно сравнены между собой, это может вести к
неправильным врачебным интерпретациям.______________________
НАЗВАНИЕ
АПСНГГЕСТ CYFFIA 2 1 - 1
НАЗНАЧЕНИЕ
ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 является хемилюминесцентным
иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для количественного
определения фрагментов цитокератина 19 человека в сыворотке и
плазме крови человека.
ОБЩЕЕ ОПИСАНИЕ ТЕСТА
Цитокератин 19 - член семейства по крайней мере двадцати
различных полипептидов цитокератина. Цитокератины образуют
промежуточный филамент структуры эпителиоцитов.'’'^ Филаменты
цитокератина труднорастворимы, но в результате протеолитической
дегенерации образуются и попадают в биологические жидкости
организма растворимые фрагменты цитокератина. АНСНПШТ
CYFRA 21 -1 - иммуноанализ, определяющий уровень фрагментов
цитокератина 19 в сыворотке крови.з-в в основе теста ARCHHtCT
CYFRA 21-1 лежит определение двух моноклональных антител
(ВМ 19.21 и KS 19.1), специфичных для цитокератина 1 9.® -^'®
Повышенные уровни фрагментов цитокератина 19 наблюдаются в
сыворотках крови пациентов с раком лёгкого, а также с другими
раковыми заболеваниями {напр., раком мочевого пузыря’^.
Значения CYFRA 2 1 -1 повышены у пациентов с раком лёгкого,
особенно с немелкоклеточным раком легкого. Самые высокие уровни
CYFRA 2 1 - 1 наблюдаются у пациентов с плоскоклеточным раком,
причём уровни CYFRA 2 1 - 1 коррелируют со стадией заболевания,^^-''®
что указывает на то, что значения CYFRA 2 1 -1 могут использоваться в
гистологической диагностике рака лёгкого. В нескольких публикациях
указывалось на то, что определение CYFRA 2 1 -1 может бьп-ь
использовано в качестве инструмента мониторинга ответа опухоли и
прогноза выживаемости при терапии рака лёгкого.'’®-''^'’®
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
Тест ARCHITECT CYFRA21-1 является двуступенчатым иммуноанализом
для количественного определения фрагментов цитокератина 19
или антигена CYFRA 2 1 - 1 в сыворотке крови и плазме крови EDTA
человека с использованием технологии CMIA с гибкими протоколами
Chemiflex.
На первой стадии соединяются образец и параматитные
микрочастицы, сенсибилизированные антителами KS 19.1 к CYFRA
2 1 -1 . Антиген CYFRA 21-1, присутствующий в образце, связывается
с микрочастицами, сенсибилизированными антителами к CYFRA
2 1 -1 . На второй стадии после промывки добавляется акридин-меченый
коньюгат антител ВМ 19.21 к CYFRA 2 1 -1 и образуется реакционная
смесь. После следующего цикла промывки к реакционной смеси
добавляются претриггерный и триггерный растворы. Получаемая в
результатехемилюминесцентная реакция измеряется в относительных
световых единицах (RLU). Ме>кду количеством антигена CYFRA 2 1 - 1
в образца и RUU, выявленных оптической системой ARCHITECT i,
существует прямая зависимость.
Дополнительная информация о системе и технологии анализа
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHRHiJT.
Раздел 3.
РЕАГЕНТЫ
Тестч»1стема, 100 тестов
ARCHR^CT CYFRA 2 1 - 1 Reagent Kit (2P55)
• iMtCROPAimcLESI 1 флакон (6.6 мл) с микрочастицами,
сенсибилизированными антителами против CYFRA 2 1 - 1
(мышиными, моноклональными) в ТРИС-буфере с протеиновым
(бычьим) стабилизатором. Минимальная концентрация: 0,1%
сухих веществ. Консерванты: РгоСНп 300 и ProClin 950.
. ICONJUOATEl 1 флакон (5,9 мл) акридин-меченого коньюгата
антител против CYFRA 2 1 - 1 (мышиных, моноклональных) в МЕС
буфере с протеиновым (бычьим) стабилизатором. Минимальная
концентрация; 675 нг/мл. Консервант; ProClin 300.
Разбавитель тест-системы
ARCHfTECT / Multi-Assay Manual Diluent (№ 7D82-50)
• IMULTI-ASSAY MANUAL PILUENTi 1 флакон (100 МЛ) ручного
разбавителя ARCHITECT i Multi-Assay Manual Diluent, содержит
забуференный фосфатом физиологический раствор. Консервант:
противомикробный препарат.
Другие реагенты
ARCHITECT I Pre-Trigger Solution
• |PRE.TRiGGER s o l u t io h] Пре-триггврный раствор содержит 1,32%
(вес/объём) пероксид водорода.
ARCHITECT i Trigger Solution
• I t r i c g e r s o l u t i o nI Триггерный раствор содержит 0,35 N
гидроксид натрия.
ARCHITECT i Wash Buffer
• [ w a s h b u f f e r I Промывочный буфер содержит забуференный
фосфатом физиологический раствор. Консерванты:
противомикробные препараты.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
• llVDl
• Для диагностики In Vitm
• Точно следуйте инструкциям вкладыша. Надёжность результатов
теста не может быть гарантирована при отклонении от инструкций
данного вкладыша.
Меры предосторюкности
• ВНИМАНИЕ: Данный продукт предполагает работу с образцами
человека. Рекомендуется считать все биоматериалы человека
потенциально инфекционными и обращаться с ними в
соответствии со Стандартом по обращению с патогенными
микроорганизмами, полученными из крови, разработанным
Управлением США по охране труда и промышленной гигиене
(OSHA).''® При работе с материалами, которые содержат или
могут содержать инфекционные элементы, следует соблюдать
требования правил биологической безопасности. Уровень 2,^°
или использовать другие методы обеспечения биологической
безопасности.^''
• Следующие предупреждения и меры предосторожности относятся
к данным компонентам;
• Микрочастицы
• Коньюгат
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ; Содержит метилизотиазолоны.
Может вызывать аллергическую
кожную реакцию.Н317
Предотвращение
Р261
Р272
Р280
Реагирование
Р302+Р352
РЗЗЗ+Р313
Р363
Избегать вдыхания пыли/дыма/
газа/тумана/паров/аэрозолей.
Не выносить загрязнённую одежду
с рабочего места.
Пользоваться защитными
перчатками/защитной одеждой/
средствами защиты глаз/лица.
ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ;
Промыть большим количеством
воды с мылом.
При раздражении кожи или
появлении сыпи; обратиться к
врачу.
Выстирать загрязнённую
одежду перед дальнейшим
использованием.
Утилизируйте этот материал и его контейнер с
соблюдением мер предосторожности.
--- стр. 51 ---
Следующие предупреждения и меры безопасности относятся к
данному компоненту:
• Коньюгат
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ:
Вызывает серьёзное раздражение
глаз.
Предотвращение
Р264
Р280
После работы тщательно вымыть
руки.
Пользоваться защитными
перчатками/защитной одеждой/
средствами защиты глаз/лица.
Реагирование
Р305+Р351 +
Р338
ПРИ ПОПАДАНИИ В ГЛАЗА:
Осторожно промыть глаза водой
в течение нескольких минут.
Снять контактные линзы, если Вы
пользуетесь ими и если это легко
сделать. Продолжить промывание
глаз.
Р337+Р313 Если раздражение глаз
продолжается: обратиться к врачу.
• Подробная информация о мерах безопасности во время работы на
анализаторе находится в Руководстве по эксплуатации системы
АНСНП^СТ, Раздел 8.
Меры предосторо;кности при работе
• Не используйте тест-системы после истечения срока годности.
• Не смешивайте реагенты одной или разных упаковок.
• До зафузки тест-системы АНСНП^СТ CYFRA 21-1 в
анализатор первый раз необходимо перемешать флакон с
микрочастицами для того, чтобы микрочастицы, осевшие во
время транспортировки, ресуспендировались. Инструкции по
перемешиванию микрочастиц смотрите в разделе ПРОЦЕДУРА,
Процедура анализа данного вкладыша.
• Мембраны ДОЛЖНЫ использоваты:я для предотвращения
испарения и контаминации реагента, а таюке обеспечения
целостности реагента. Достоверность результатов анализа
не гарантируется, если мембраны не использовались в
соответствии с инструкциями в данного вкладыша.
• Надевайте чистые перчатки при установке мембраны на открьп'ые
флаконы с реагентами, это предохранит от контаминации.
• После установки мембраны на флаконе с реагентом не
переворачивайте флакон, иначе реагент вытечет, и это
может повлиять на правильность результата анализа.
• Со временем остаточные жидкости высохнут на поверхности
мембраны. Это обычные сухие соли, не влияющие на
эффективность теста.
• Подробое описание мер предосторожности при работе во время
работы системы см. в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHH^CT. Раздел 7.
Инструкции по хранению
- 8*0
= г2*с-'1 Набор реагентов ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 необходимо
хранить при температуре 2-8'С в вертикальном положении,
реагенты могут быть использованы сразу после извлечения из
холодильника.
Реагенты остаются стабильными до истечения срока
годности, если хранились и использовались в соответствии с
инструкциями.
Набор реагентов ARCHH^CT CYFRA 2 1 -1 может находиться на
борту анализатора ARCHH^CT i не более 30 дней. По истечении
30 дней реагенты должны быть утилизированы. Более подробная
информация о мониторинге времени нахождения на борту
находится в Руководстве по эксплуатации системы АНСНГГЕСТ,
Раздел 5.
• Реагенты могут храниться на борту системы ARCHR^CT i или
вне её. Вне системы храните реагенты при температуре 2-8’С
(с мембранами и сменными крышечками) в вертикальном
положении. Рекомендуется хранить реагенты вне системы в
их поддонах и коробках, чтобы обеспечить им вертикальное
положение. Если флакон с микрочастицами хранился не
вертикально (с установленной мембраной) в холодильнике
вне системы, тест-система долЯсна быть утилизирована.
Подробная информация о разгрузке реагентов находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHRH^T, Раздел 5.
Показатели порчи реагентов
Если значение образца контроля выходит за рамки указанного
диапазона, это может означать порчу реагентов или технические
неполадки в оборудовании. Результаты сопряжённых исследований
неверны, и образцы должны быть протестированы снова. Может
потребоваться повторная калибровка. Информация об устранении
неисправностей находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHITECT, Раздел 10.
П РО Ц ЕД УРА АНАЛИЗА
• До проведения теста на сисмеме ARCHITECT i System должен
быть установлен файл теста ARCHITECT CYFRA 2 1 -1 с ARCHH^CT
i System Assay CD-ROM. Более детальная информация об
установке файла анализа, просмотре и редактировании
параметров анализа находится в Руководстве по эксплуатации
системы ARCHHTCT, Раздел 2.
• Информация о распечатке параметров анализа находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^JT, Раздел 5.
• Подробное описание процедур системы содержится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHHtCT.
• По умолчанию единицей измерения результата теста ARCHITECT
CYFRA 2 1 - 1 является нг/мл. Может быть выбрана альтернативная
единица измерения мкг/л для сообщения результатов, для этого
надо изменить единицу на мкг/л в параметре теста “Result
concentration units" (единицы измерения конечной концентрации),
фактор конверсии, используемый системой, • 1 .
С БО Р О БРА ЗЦ А И ПО ДГО ТО ВКА К АНАЛИЗУ
• В тесте ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 можно использовать только
сыворотку крови (включая сыворотку крови, собранную в
пробирки с сепаратором сыворотки крови [SST]) или плазму
крови Dipotassium EDTA человека. Другие типы пробирок для
сбора образцов не были проверены для этого анализа.
• Система ARCHH^CT i не может определять тип образца. В
обязанности оператора входит определение правильности типов
образцов для теста АРСНПЕСТ CYFRA 2 1 -1 .
Состояние образцов
• Не используйте образцы в следующих состояниях:
• инактивированные нафеванием
• пулированные
• сильно гемолизированные
• с заметной микробной контаминацией
• образцы, взятые от трупа, или другие жидкости организма
• Чтобы получить правильные результаты, образцы сыворотки и
плазмы крови должны быть отделены от фибрина, эритроцитов
и других твёрдых частиц. Образцы сывороток крови пациентов,
получающих антикоагуляционную или тромболитическую
терапию, могут в результате незаконченного образования
сгустков содержать фибрин.
• Чтобы избежать перекрёстной контаминации, обращайтесь с
образцами пациентов осторожно. Рекомендуется использование
одноразовых пипеток или наконечников для пипеток.
• Для получения правильных результатов проверьте все образцы
на наличие пузырьков. Удалите пузырьки аппликатором до начала
тестирования. Используйте новый аппликатор для каждого
образца, чтобы избежать перекрёстной контаминации.
Подготовка к анализу
• Следуйте указаниям производителя пробирок для сбора сыворотки
и плазмы крови. Гравитационного разделения недостаточно при
подгоуовке образца.
• Перемешайте оттаянные образцы, аккуратно переворачивая
пробирки пять раз. Визуально проверьте образцы. Если
наблюдается расслоение, продолжайте перемешивание до тех
пор, пока образцы не станут визуально однородными. Образцы
для исследования на цитокератин не перемешивайте энергично
после разморозки.23
--- стр. 52 ---
• Не перемешивайте образцы на вортексе, так как это ведёт к
получению заниженных значений.
• Для получения правильных результатов образцы необходимо
перенести в центрифужные пробирки и отцентрифугировать при
скорости 2 10 О О О ОЦС (Относительная центробежная сила) в
течение 2 минут до начала тестирования, если они содержат
фибрин, эритроциты или другие твёрдые частицы.
• Для тестирования поместите очищенный образец в чашечку для
образцов или вторичную пробирку.
• Отцентрифугированные образцы с липидным слоем на
поверхности необходимо перенести в чашечки для образцов
или новые пробирки. Соблюдайте осторожность, избегайте
перенесения липидного материала вместе с очищенным
образцом.
Хранение
• Образцы можно хранить вместе со сгустками, эритроцитами или
сепараторным гелем при;
• до 48 часов при комнатной температуре (анализ проводить
при 25-С)
• до 7 дней при 2-8*С.
• Если тестирование образцов откладывается более, чем на 48
часов (хранились при комнатной температуре), или более, чем
на 7 дней (хранились при 2-8*С), отделите сыворотку или плазму
крови от сгустков, эритроцитов или сепараторного геля и храните
образцы при -10’С или ниже.
• Не замораживайте/размораживайте образцы более трёх раз.
Транспортировка
• Перед транспортировкой рекомендуется отделить образцы от
сгустков, эритроцитов или сепараторного геля.
• При транспортировке образцы следует упаковывать и маркировать
в соответствии с государственными и международными
требованиями по транспортировке клинических образцов и
инфекционных веществ.
• Образцы могут транспортироваться на мокром или сухом льду. Не
храните образцы дольше времени, указанного выше.
ПРОЦЕДУРА
Предоставляемые материалы
• 2Р55 АЯСНП^СТ CYFRA 2 1 - 1 Reagent Kit
Необходимые материалы, не предоставляемые с набором
реагентов
• АНСНГГЕСГ I System
• ARCHITECT I System e-Assay CD-ROM на
www.abbottdiagnostics.com, SupportДechnical Library/Assay RIes
или
• ARCHPTECT i System [ASSAY CIM<om1
• 3K52 ARCHn^CT i System [ASSAY CiMlOMi - WW (кроме США)
• Приложение A (для систем ARCHHH^T i2000 и 12000^^,)
• 1P61 ARCHn^СТ i 1000S F , System [ASSAY С 1Ш О м ]. WW (кроме
США) Special Edition (специальное издание)
2P55-01 ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 Calibrators
2P55-10 ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 Controls________
7D82-50 ARCHHECT i |M U L T I - A S S A Y M A N U A L D IL U E N T |
ARCHITECT I
ARCHRTCT I
ARCHITECT I
ARCHHECT 1
ARCHHECTI
ARCHHECT I
ARCHITECT i
Пипетки или
PRE-TRIGGER SOLUTION
TRIGGER SO L U nO N
WASH BUFFER
R EA C nO N VESSELS
SAMPLE CUPS
SEPTUM
REPLACEMENT CAPS
наконечники для пипеток (опционно) для
обеспечения объёмов, указанных на экране заказа пациента
или контроля.
Информация о материалах, необходимых для процедур технического
обслуживания, находится в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHHECT, Раздел 9.
Процедура анализа
• До зафузки тест-системы АРСНПЕСТ CYFRA 2 1 - 1 в анализатор
первый раз необходимо перемеш ать флакон с микрочастицами для
того, чтобы микрочастицы, осевшие во время транспортировки,
ресуспендировались. После загрузки микрочастиц в первый раз
дальнейшего перемешивания не требуется.
• Переверните флакон с микрочастицами 30 раз.
• Визуально проверьте флакон, чтобы убедиться, что
микрочастицы ресуспендировались. Если микрочастицы
всё ещё пристают к стенкам флакона, продолжайте
переворачивать флакон до тех пор, пока микрочастицы
полностью не ресуспендируются.
• Если микрочастицы во флаконе не ресуспендировались,
НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ флакон. Обратитесь к местному
представителю Abbott.
• Послетогокакмикрочастицыресуспендировались, поместите
мембрану на флакон. Инструкции по помещению мембран
на флаконы содержатся в разделе Меры предосторожности
при работе данного вкладыша.
• Зафузите реагенты набора ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 в систему
ARCHITECT I.
• Проверьте наличие всех необходимых для анализа
реагентов.
• Проверьте наличие мембран на всех флаконах с
реагентами.
• При необходимости закажите калибровку.
• Более подробная информация о заказе калибровки находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT,
Раздел 6.
• Введите заявку на тесты.
• Информация о заказе образцов пациентов и контролей и
общих операционных процедурах находится в Руководстве
по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
• Минимальный объём образца в чашечке для образцов
рассчитывается системой и распечатывается на отчёте заказа.
Объема образца в одной чаш ечке для образцов достаточно только
для проведения 10 повторов. До начала проведения анализа
убедитесь, что в чашечке для образцов имеется достаточный
объем образца, чтобы минимизировать испарение.
• Приоритетные образцы: 100 мкл для первого теста ARCHITECT
CYFRA 2 1 - 1 плюс 50 мкл для каждого дополнительного теста
ARCHHECT CYFRA 2 1 -1 из той же чашечки для образцов.
• S 3 часов на борту; 150 мкл для первого теста ARCHHECT
CYFRA 2 1 -1 плюс 50 мкл для каждого дополнительного теста
ARCHITECT CYFRA 2 1 -1 из той же чашечки для образцов.
• > 3 часов на борту; замените свежим образцом (образцы
пациентов, контроли и калибраторы).
• При использовании первичных или аликвотных пробирок
используйте дозатор образца для обеспечения достаточного
объёма образца пациента.
• Подготовьте калибраторы и конфоли.
• Перед использованием перемешайте калибраторы и контроли
ARCHHECT CYFRA 21-1, аккуратно переворачивая флаконы.
• Для получения рекомендованного объёма калибраторов
и контролей ARCHHECT CYFRA 2 1 - 1 держите флаконы
вертикально и добавьте по 6 капель каждого калибратора
или по 5 капель каждого конфоля в каждую соответствующую
чашечку для образцов.
• Зафузите образцы.
• Более подробная информация о зафузке образцов находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT,
Раздел 5.
• Нажмите RUN.
• Дополнительная информация о принципах работы находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHHECT, Раздел 3.
• Для достижения оптимальных рабочих характеристик важно
следовать стандартным процедурам технического обслуживания,
которые описаны в Руководстве по эксплуатации системы
ARCHHECT, Раздел 9. Если правила работы в Вашей лаборатории
фебуют более частого технического обслуживания, следуйте
принятой практике.
--- стр. 53 ---
Процедуры разведения образцов
Образцы пациентов, значения которых по результатам
тестирования методом ARCHITECT CYFRA 2 1 -1 превышают
100,00 нг/мл, помечены флажком с кодом “> 100.00 ng/mL’ и могут
бьп-ь разведены по протоколам автоматического или ручного
разведения.
Протокол автоматического разведения
• При использовании протокола автоматического разведения
система производит разведение образца в пропорции 1:5,
автоматически рассчитывает концентрацию образца до
разведения и сообщает результат.
Протокол ручного разведения
• Ручное разведение для теста АНСНПЕСТ CYFRA 2 1 - 1 проводится
в пропорции 1:5.
• Добавьте 100 мкл образца пациента к 400 мкл ручного
разбавителя АЯСНП^СТ i Multi-Assay Manual Diluent (7D82-50).
• He перемешивайте образцы на вортексе, так как это ведёт
к получению зани)кенных значений. См. рекомендации по
перемешиванию в разделе данного вкладыша СБОР 06PA3L4A И
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ, Подготовка к анализу.
• Оператор должен ввести фактор разведения в экраны заказа
пациента или контроля. Система использует фактор разведения
для автоматического вычисления концентрации образца до
разведения. Результат данного расчета будет выведен на экран.
Значение результата до введения фактора разведения должно
быть в интервале измерения.
• Более подробная информация о заказе разведения находится в
Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Раздел 5.
Калибровка
• Для проведения калибровки анализа ARCHITECT CYFRA
2 1 - 1 протестируйте калибраторы А, В, С, D, Е и F в повторах.
Калибраторы должны быть загружены в приоритетные позиции.
• Чтобы проверить калибровку протестируйте по одному образцу
каждого уровня контроля.
• Убедитесь, что значения контролен не выходят за рамки
диапазона концентраций, указанных в инструкции к
контролям.
• Диапазон калибровки: 0,00 нг/мл - 100,00 нг/мл.
• ПocлeтoгoкaккaлибpoвкaaнaлизaARCHГTECTCYFRA21-1 принята
и сохранена, все последующие образцы можно тестировать без
дальнейшей калибровки, если не происходит следующее:
• используется тест-система с новым номером серии
• результаты контролей выходят за границы допустимого
диапазона.
• Полную информацию о проведении калибровки анализа смотрите
в Разделе 6 Руководства по эксплуатации системы ARCHITECT.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
Рекомендуемые требования по контролю качества анализа
ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 заключаются в тестировании контролей
каждого уровня каждые 24 часа использования. Соблюдайте правила
Вашей лаборатории, если они требуют более частого использования
контролей для проверки результатов тестов. Дополнительные
контроли могут использоваться в анализе в соответствии с местными
и/или федеральными правилами или установленными требованиями
и нормами по качеству контроля Вашей лаборатории.
Каждая лаборатория должна установить свои диапазоны контролей,
чтобы контролировать приемлемые рабочие характеристики
теста. Если значение контроля выходит за рамки этого диапазона,
результаты сопутствующих анализов неверны, и образцы должны
быть протестированы снова. Может потребоваться повторная
калибровка.
Проверка параметров анализа
Информация о протоколах проверки параметров анализа находится
в Руководстве по эксплуатации системы ARCHITECT, Приложение
В. Анализ ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 относится к методологической
группе 1 .
РЕЗУЛЬТАТЫ
Вычисление
Анализ ARCHn^CT CYFRA 2 1 - 1 использует методику обработки данных
по соответствию четырех-параметрической логистической кривой
(4PLC, Y-единицы массы) для создания калибровочной кривой.
Фла)кки
Для некоторых результатов в поле флажки может быть информация.
Описание информации, которая может находиться в поле Флажки,
находится в Руководстве по эксплуатации системы ARCHH^CT,
Раздел 5.
Интервал измерения
Интервал измерения для теста ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 0,50 нг/мл -
100,00 нг/мл.
ОГРАНИЧЕНИЯ ПРОЦЕДУРЫ
• Пациенты с подтверждённым диагнозом "рак" могут иметь в
тесте ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 значения в таких же диапазонах,
что и здоровые люди. Повышенные значения CYFFIA 2 1 - 1 могут
обнаруживаться и у людей с незлокачественными заболеваниями,
напр., острая пневмония, туберкулёз, заболевания печени и
почечная недостаточность. Поэтому результат теста ARCHITECT
CYFRA 2 1 -1 не может использоваться как абсолютное
доказательство наличия или отсутствия злокачественного
заболевания, а тест АНСНГГЕСТ CYFRA 21-1 не дол)кен
использоваться в качестве тест-скрининга на рак.
• Результаты теста ARCHFTECT CYFRA 2 1 - 1 должны использоваться в
сочетании с другими клиническими данными, напр., симптомами,
историей болезни и т.д.
• Если результаты теста ARCHfFECT CYFRA 2 1 -1 не согласуются с
клиническими данными, рекомендуется провести дополнительное
тестирование для подтверждения результатов.
• Результаты теста ARCHFTECT CYFRA 2 1 -1 не должны
использоваться взаимозаменяемо с результатами определения
CYFRA 2 1 - 1 методами других производителей.
• Контаминация образца слюной может вести к получению
ложноповышенных результатов CYFRA 2 1 -1 .
• Образцы крови пациентов, принимающих лекарственные
препараты, изготовленные из мышиных моноклональных антител,
в диагностических или терапевтических целях, могут содержать
антитела человека против мышиных антител (НАМА).*^'^^
Образцы, содержащие НАМА, могут давать аномальные значения
при тестировании такими тест-системами как ARCHFFECT CYFRA
21-1, использующими мышиные моноклональные антитела.^^
• Гетерофильные антитела в сыворотке крови человека могут
реагировать с иммуноглобулинами реагента, интерферируя
in vitm с иммуноанализом.2® Пациенты, находящиеся в
привычном контакте с животными либо с продуктами из
сыворотки крови животных, наиболее часто подвергаются
подобному взаимодействию, результаты тестов для них могут
демонстрировать аномальные значения. Для определения точного
диагноза может потребоваться дополнительная информация.
• Образцы для исследования на цитокератин не перемешивайте
энергично после разморозки.^з
• Не перемешивайте образцы на вортексе, так как это ведёт
к получению заниженных значений. См. рекомендации по
перемешиванию в разделе данного вкладыша СБОР ОБРАЗЦА И
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ, Подготовка к анализу.
• Информация об ограничениях по образцам содержится в
разделе СБОР ОБРАЗЦА И ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ данного
вкладыша.
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Каждой лаборатории рекомендуется устанавливать свои собственные
диапазоны ожидаемых значений, которые могут быть уникальны для
обследуемой популяции.
В исследовании 240 очевидно здоровых людей 95% в тесте ARCHFFECT
CYFRA 2 1 - 1 имели результаты, равные или ниже 2,08 нг/мл.
--- стр. 54 ---
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ АНАЛИЗА
Результаты теста, полученные в отдельных лабораториях, могут
отличаться от представленных данных.
Воспроизводимость
Тест АПСНГПЕСТ CYFRA 2 1 - 1 разработан таким образом, чтобы
пофвшность составила s 10% общего CV для образцов в диапазоне
от 0,50 нг/мл до 100,00 нг/мл.
Было проведено исследование в соответствии с инструкциями
документа ЕР5-А2 Национального комитета по стандартам
клинических лабораторий (NCCLS).®^ Тестирование проводилось с
использованием двух серий реагентов, калибраторов и контролей
на трёх анализаторах. Три уровня контролей и четыре панели
тестировались в двух повторах, дважды в день, в течение 20
дней. На всём протяжении исследования на каждом анализаторе
использовали одну калибровочную кривую. Данные суммированы в
следующей таблице.
Образец
(Низкий
контроль
редний
контроль
Высокий
контроль
Панель 1
Панель 2
Панель 3
Панель 4
Ана-
лизатор^
Серия
реагентаКал.
ВО
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
80
Средн.
(нг/мл)
5.11
4,93
4.77
14,89
14,23
14,07
34,00
33,26
32,90
0.74
0,67
0,72
16,18
14,86
15,87
67,55
64,17
68.10
3,24
2,79
3,00
Внутри
серии
СКО
0,13
0,15
О.Ю
0.30
0,28
0,27
0,63
0,57
0,61
0,04
0,02
0,03
0,25
0,25
0,43
1.01
1,08
1,21
0,08
0,07
0,09
% кв
Всего
СКО
0,24
0,26
0,14
0,40
0,45
0,40
1,03
1.05
1.02
0,05
0,03
0.03
0,38
0.42
0,51
1,32
1,62
1.71
0.11
0.09
0.11
% кв
8 Анализатор: 1 - АВСНП^СТ i2000, 2 - ARCHITEGT
3 - ARCHR^CT nOOOsf,
Выход
Тест АНСНПЖГГ CYFRA 2 1 - 1 разработан таким образом, чтобы иметь
среднее изменение измеренных концентраций по тесту АВСНП^СТ
CYFRA 2 1 - 1 S 10% для образцов с концентрациями i 3.3 нг/мл и
S 0,33 нг/мл для образцов с концентрациями < 3,3 нг/мл.
Линейность
Тест АНСНПЖ^Т CYFRA 2 1 -1 разработан таким образом, чтобы
линейный диапазон измерения составил от 0,50 нг/мл до
100,00 нг/мл.
Было проведено исследование в соответствии с документом NCCLS
ЕР6-А.28 Было приготовлено пять образцов с высоким уровнем
методом добавления к нормальным образцам (3 сыворотки крови
и 2 плазмы крови) плевральной жидкости. С использованием
калибратора А были приготовлены серийные разведения ка^^дого
образца. Неразведённые и разведённые образцы были исследованы
методом АПСНП'ЕСТ CYFRA 2 1 -1. Данные подтверждают линейный
диапазон 0,50 нг/мл - 100,00 нг/мл.
Чувствительность (ПфИ, ПО, ПКИ)
Предел количественного измерения (ПКИ) теста АПСНП^СТ CYFRA
2 1 - 1 ^ 0.50 нг/мл. ПКИ определяется как наименьшее значение
аналита в образце, которое можно точно измерить с общей
допустимой ошибкой i 28%.
Было проведено исследование в соответствии с инструкциями
документа NCCLS ЕР17-А^® одного образца с 0-уровнем и пяти
образцов с низкими уровнями. Образцы исследовали в шести сериях,
минимум пяти повторах на каждую серию, с использованием двух
серий реагентов, на трёх анализаторах. Поданным этого исследования
предел фонового измерения (ПфИ) составил 0,02 нг/мл, ПО -
0,09 нг/мл, а ПКИ - 0,17 нг/мл.
Перекрёстная реактивность
Онкомаркёры, перечисленные ниже, были исследованы на
перекрёстную реактивность с тестом ARCHHECT CYFRA 2 1 -1 . Для
каждого онкомаркёра был изготовлен образец сыворотки крови с
целевой концентрацией антигена цитокератина 8/19 3,3 нг/мл, к этому
образцу добавляли исследуемый онкомаркёр, и тестировали его
относительно контроля. Образцы исследовали методом ARCHH^CT
CYFRA 21-1. концентрации цитокератина 8/19 в экспериментальных
образцах сравнивали с концентрациями контролей. Наблюдаемый
средний процент перекрёстной реактивности для всех онкомаркёров
был < 10%.
Онкомаркёр
Уровень концентрации
онкомаркёра
a-Fetoprotein (AFP) до 800 нг/мл
Human Chorionic Gonadotropin /З-hCG до 500 мМЕ/мл
CA 125 до 3500 Ед/мл
CA 15-3 до 532 Ед/мл
CA 19-9 до 3700 Ед/мл
Carcinoembryonic Antigen (CEA) до 500 нг/мл
Проверка авторазведения
Метод авторазведения ARCHRIECT CYFRA 2 1 - 1 имеет процент
различия i 10% по сравнению с ручным разведением.
Авторазведение ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 было сравнено с методом
ручного разведения. К пяти нормальным образцам человека добавляли
антиген цитокератина 8/19, а образцы делили на пять равных порций.
Одна порция каждого образца была разведена вручную. Каждый
образец тестировали в двух повторах на трёх анализаторах методом
ARCHITECT CYFRA 2 1 -1 . Процент различий среднего значения
авторазведеиия по сравнению со средним значением ручного
разведения на всех трёх анализаторах составил 2%. Данные
суммированы в следующей таблице.
Анали
затор® Образец
Среднее
значение
ручного
разведения
(нг/мл)
Среднее
значение
авторазведения
(нг/мл) % разницы^
1
1 81,20 82,75 2
2 82,15 81.15 1
3 80,75 79.70 1
4 82,20 81.70 1
5 81.10 80.70 0
2
1 82,45 78.50 5
2 79,95 78,90 1
3 78,35 76,80 2
4 81,50 77,30 5
5 78,60 76.15 3
3
1 84,60 81.15 4
2 79,55 76,10 4
3 81,80 78,75 4
4 80,95 80,50 1
5 79,45 78,65 1
Анализатор: 1 - ARCHITECT i2000, 2 - ARCHHECT i2 0 0 0 ^
3 - ARCHHECT HOOOsfi
% разницы -
Среднее значение авторазведения (нг/мл)
- Среднее значение ручного разведения
______________(нг/мл) X DF*
Среднее значение ручного разведения
(нг/мл) X DF*
X 100
DF - фактор разведения
--- стр. 55 ---
Интерференция
Исследование интерференции было проведено в соответствии
с инструкциями документа ЕР7-А2 Института клинических и
лабораторных стандартов (CLSI) ЕР7-А2.^
Потенциально интдрферирукущид лдкардтвднныд препараты
Результаты теста АВСНГТЕСТ CYFRA 2 1 - 1 по каждому образцу,
целевая концентрация которых была 3,3 нг/мл, показали среднее
изменение полученной концентрации (средний процент различий)
< 10% при сравнении потенциальных интерферентов с результатами
тестирования контролей.
Целью исследований выхода было сравнение образцов, содержащих
следующие лекарственные препараты в указанных концентрациях, с
образцами контролей. Данные суммированы в следующей таблице.
Лекарственные
препараты
Концентрация Средний %
интерферента различий
Carboplatin 500 мкг/мл
Cisplatin 165 мкг/мл
Docetaxel 1 мкг/мл
Doxorubicin 40 мкг/мл
Erlotinib 17 мкг/мл
Etoposide 12 мкг/мл
Gemcitabine 380 мкг/мл
Ifosfamide 800 мкг/мл
Irinotecan 20 мкг/мл
Paclitaxel 67 мкг/мл
Pemetrexed 1370 мкг/мл
Vinblastine 500 мкг/мл
Vinorelbine 1,23 мкг/мл
Vincristine 11 мкг/мл
Потенциально интерферирующие эндогенные вещества
Тест ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 для образцов с целевой концентрацией
3.3 нг/мл имеет среднее изменение концентрации s 10%. Тест
ARCHH^CT CYFRA 2 1 - 1 для образцов с целевой концентрацией
3.3 нг/мл имеет среднее изменение концентрации s 0,33 нг/мл.
Потенциальная интерференция в тесте ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1
билирубина, гемоглобина, общего белка и триглицеридов была
исследована на указанных в таблице ниже уровнях. К образцам с
уровнями от 2,85 нг/мл до 3,91 нг/мл по результатам теста ARCHITECT
CYFRA 2 1 - 1 добавляли потенциально интерферирующие вещества.
Для образцов с концентрациями г 3,3 нг/мл средняя интерференция,
наблюдаемая во время исследования, была в диапазоне 0% - 8%.
Для образцов с концентрациями < 3,3 нг/мл среднее изменение
концентрации, наблюдаемое между экспериментальными и
контрольными образцами, было в диапазоне от 0.02 нг/мл до
0,32 нг/мл.
Концентрация
Потенциально потенциально
интерферирующее интерферирующего
вещество вещества
Билирубин 20 мг/дп
Гемоглобин 500 мг/дп
Белок 12 г/дл
Триглицериды 3000 мг/дл
Прт9нциапьн.д. интэдфгвируюшие клинические ^ocтoяния
Тест ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 для образцов с целевой концентрацией
3.3 нг/мл имеет среднее изменение концентрации i 10%. Тест
ARCHITECT CYFRA 2 1 -1 для образцов с целевой концентрацией
3.3 нг/мл имеет среднее изменение концентрации i 0,33 нг/мл.
Были исследованы пятнадцать образцов, положительных на
человеческие антитела против мышиных антител (НАМА), и 12
образцов, положительных на ревматоидный фактор (РФ ), в указанных
диапазонах концентраций. Данные суммированы в следующей
таблице.
Диапазон
Клиническое концентрации % различий, Средний %
состояние интерферента диапазон* различий
НАМА 14,5 - 122,3 Ед/мл 0 - 6 4
РФ 47,5 - >100,0 Ед/мл 2-12 7
Полученная концентрация (нг/мл)
- Ожидаемая концентрация (нг/мл)
Ожидаемая концентрация (нг/мл)
X 100
Хук-эффект высокой концентрации
Хук-эффект высокой концентрации - это феномен занижения
результатов анализа при очень высокой концентрации аналита.
В тесте ARCHH^CT CYFRA 2 1 - 1 не было обнаружено хук-эффекта
высокой концентрации при тестировании образцов с концентрацией
антигена CYFRA 2 1 - 1 приблизительно до 749,32 нг/мл.
Метод сравнения
Угловой коэффициент теста ARCHn^CT CYFRA 2 1 - 1 1,0 ± 0,1, а
коэффициент корреляции (г) i 0,90 для образцов сыворотки крови
при сравнении с методом Roche Elecsys CYFRA 2 1 -1 .
Сто девяносто восемь образцов сыворотки крови были протестированы
методами ARCHH^CT CYFRA 2 1 - 1 и Roche Elecsys CYFRA 2 1 -1 . Данные
суммированы в следующей таблице.
ARCHITECT CYFRA 21-1 vs. Roche Elecsys CYFRA 2 1 -1
Метод
регрессии
Диапазон
измерения
(нг/мл)
Угловой
коэфф.
Кол. (95%Д И“)
Пере
сечение
(95% ДИ«)
Коэфф.
корре
ляции
Passing-
Bablok» 0,50 - 100,00 1,00 -0,45
(0,96 - 1,03) (-0,52--0,38) 0,99
Диапазон образцов ARCHITECT CYFRA 2 1 - 1 - 0,51 - 96,69 нг/мл
Диапазон образцов Roche Elecsys CYFRA 2 1 - 1 - 0,63 - 89,94 нг/мл
® ДИ - доверительный интервал
^ Метод линейной регрессии без специальных допущений
относительно распределения образцов и ошибок при
измерении.®^
БИБЛИОГРАФИЯ
1 . Moll R. Franke WW, Schiller DL, et al. The catalog of human
cytokeratins: patterns of expression in normal epithelia. tumors and
cultured cells. Cell 1982;31:11-24.
2. Hesse M. Magin TM, Weber K. Genes for intermediate filament
proteins and the draft sequence of the human genome: novel keratin
genes and a surprisingly high number of pseudogenes related to
keratin genes 8 and 18. ./Ce//Sc/2001:114(14);2569-2575.
3. Bodenmiiller H. Ofentoch-Hahnie B, Lane EB, et al. Lung cancer-
associated keratin 19 fragments: development and biochemical
characterisation of the new serum assay Enzymun-Test CYFRA 2 1 - 1 .
Int J Biol Markers 1994;9(2):75-81.
4. Bodenmiiller H. The Biochemistry of CYFRA 2 1 - 1 and other cytokeratin-
tests. Scand J Clin Lab Invest 1995;Suppl 221:60-66.
5. Stieber P, Dienemann H, Hasholzner U, etal. Comparison of cytokeratin
fragment 19 (CYFRA 21-1) tissue polypeptide antigen (TPA) and tissue
polypeptide specific antigen (TPS) as tumor markers in lung cancer.
EurJ Clin Chem Clin Biochem 1993;31 (10):689-694.
6. Bodenmiiller H. Doni6 F, Kaufmann M. etal. The tumor markers TPA.
TPS, TPAqyk and CYFRA 2 1 -1 react differently with the keratins 8, 18
and 19. Int J Biol Markers 1994;9(2):70-74.
7. Bottger V, Stasiak PC. Harrison DL, et al. Epitope mapping of
monoclonal antibodies to keratin 19 using keratin fragments, synthetic
peptides and phage peptide libraries. Eur J Biochem 1995;231:475-
485.
8. Stigbrand T, Andrёs C, Beilanger L, et al. Epitope specificity of
30 monoclonal antibodies against cytokeratin antigens: the ISOBM
TD5-1 Workshop. Tumor Б/0/ 1998;19:132-152.
9. Stieber P. Hasholzner U, Bodenmiiller H. et al. CYFRA 2 1 -1 . A new
marker in lung cancer. Cancer 1993;72(3):707-713.
10. Ebert W, Dienemann H, Fateh-Moghadam A, et al. Cytokeratin 19
fragment CYFRA 2 1 - 1 compared with carcinoembryonic antigen,
squamous cell carcinoma antigen and neuron-specific enolase in lung
cancer Results of an international multicentre study. Eur J Clin Chem
Clin Biochem 1994;32(3):189-199.
11. Stieber P. Zimmermann A, ReinmiedI J, et al. CYFRA 2 1 - 1 in the early
diagnosis of recurrent disease in non small celt lung carcinomas
(NSCLC). Anticancer Res 1999;19:2665-2668.