Тест-системы и контрольные материалы для клинической лабораторной диагностики инфекционных заболеваний in vitro — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
=== файл: Инструкция_руководство__db335287_I.pdf === --- стр. 2 --- СОДЕРЖАНИЕ 1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ................................................................................................................ 3 2. Сифилис тест (Syphilis Test (Syph-Check-1)) ........................................................................ 6 3. Хламидия положительный контроль (CHL Positive Control)........................................... 1 1 4. Хламидия тест (Chlamydia Test (Chlamy-Check-1))........................................................... 12 5. VDRL Антиген. (VDRL Antigen)...........................................................................................19 6. Сифилис РИГА (TPHA Syphilis)........................................................................................... 24 7. Сифилис РПР (RPR Carbon)...................................................................................................32 --- стр. 3 --- 1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ НАЗНАЧЕНИЕ Тест-системы для клинической лабораторной диагностики инфекционных заболеваний in vitro предназначены для качественного и полуколичественного определения специфических антигенов и антител в сыворотке, плазме, цельной крови человека и экстракте мазков, а также для контроля качества тестирования. Тест-системы предназначены только для профессионального использования в клинико-диагностической практике медицинских и научных учреждений. Компоненты тест-систем используются как одноразовые изделия. ХАРАКТЕРИСТИКА Иммунохроматографические тест-системы представляют собой наборы, содержащие тестовые кассеты и одноразовые пластиковые пипетки. Некоторые наборы могут также содержать разбавитель во флаконе-капельнице, экстрагирующий раствор во флаконе- капельнице, тампоны, пробирки с фильтрующими крышками. Компоненты этих тест- систем укомплектованы в количествах, необходимых для проведения 20 определений. Иммунохроматографические тест-системы являются высокоспецифичными качественными тестами с принципом действия «сэндвич»-метод. Иммунохроматографическая кассета представляет собой пластмассовый корпус с нитроцеллюлозной мембраной и стартовой зоной (окном для нанесения образца). При внесении пробы в стартовую зону, находящиеся там специфические меченные коллоидным золотом мышиные моноклональные антитела связываются с антигенами или антителами пробы, образуя окрашенный иммунный комплекс, связываемый в свою очередь со специфическими антителами (антигенами) в тестовой зоне мембраны и образующий окрашенную полосу. Иммунохроматографическая мембрана кассеты содержит также контрольную зону (встроенный контроль качества), в которой происходит другая реакция «антиген-антитело». Появление контрольной полосы указывает на качественность теста и должно происходить независимо от наличия в пробе искомого аналита. Результат теста считывается визуально или с помощью иммунохроматографического экспресс- анализатора. Тест-системы для выявления антител к сифилису представляют собой трепонемные и нетрепонемные препараты для выявления специфических антител. При добавлении сьшоротки к реагенту происходит реакция агглютинации, которая регистрируется визуально. В состав этих наборов входят флаконы с реагентами, буфер для разбавления образца, положительный и отрицательный контроли, подложки, мешалки. Контроль для хламидийного антигена представляет собой стабилизированный --- стр. 4 --- буферный раствор в стеклянном флаконе. Раствор содержит неинфекционные компоненты, полученные in vitro из культур клеток L-2 штамма Chlamydiae trachomatis человеческого происхождения. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (см. для каждого теста). МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Тесты предназначены только для диагностики in v i t r o и профессионального применения. При работе с пробами пользоваться защитной одеждой и одноразовыми перчатками. Не принимать пишу, не пить и не курить в помещении, где выполняется работа с пробами. При взятии и тестировании проб не прикасаться руками к слизистой оболочке глаз и носа. При работе с реагентами, содержащими компоненты человеческой крови, следует рассматривать их как потенциально инфекционный материал и принимать соответствующие меры предосторожности. Внимательно прочитать инструкцию перед проведением тестирования. Не использовать тестовые кассеты и реагенты, если защитная упаковка повреждена. Не использовать тестовые наборы с истекшим сроком хранения. Соблюдать температуру хранения. Соблюдать инструкцию по применению. Не использовать повторно. ОБЕЗВРЕЖИВАНИЕ ОТХОДОВ Все пробы следует считать потенциально инфекционными. После завершения процедуры тестирования утилизировать пробы следует с осторожностью и только после стерилизации в автоклаве или обработки 0,5-1% раствором гипохлорита натрия не менее 1 часа. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Соответственно для каждого теста. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Соответственно инструкции для каждого теста. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ Соответственно инструкции для каждого теста. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ РЕАГЕНТОВ 1. Хранить при указанной на упаковке температуре в герметичной фабричной --- стр. 5 --- упаковке. 2. Не замораживать! 3. Наборы стабильны до истечения срока хранения, указанного на этикетке. Стабильность не менее 1 года от даты производства при соблюдении условий хранения. ИЗГОТОВИТЕЛЬ ВЕДАЛАБ (VEDALAB), Франция --- стр. 7 --- Инструкция 1 Стабильность и хранение 1. Хранить при температуре от 4 до 30°С в герметично закупоренной фабричной упаковке. 2. Не замораживать! 3. Тест стабилен до истечения срока хранения, указанного на этикетке. Меры предосторожности Данный тест предназначен только для диагностики in v i t r o и профессионального применения. При работе с пробами пользоваться защитной одеждой и одноразовыми перчатками. Не принимать пищу, не пить и не курить в помещении, где выполняется работа с пробами. При взятии и тестировании проб не прикасаться руками к слизистой оболочке глаз и носа. Внимательно прочитать инструкцию перед проведением теста. Не использовать тестовую кассету, если её защитная упаковка повреждена. Не использовать тестовую кассету с истекшим сроком хранения. Образцы цельной крови должны тестироваться немедленно после взятия. Обезвреживание отходов Все пробы следует считать потенциально инфекционными. После завершения процедуры тестирования утилизировать пробы следует с осторожностью и только после стерилизации в автоклаве или обработки 0 ,5 -1 % раствором гипохлорита натрия не менее 1 часа. Подготовка реагента Все реагенты готовы к использованию. Исследуемые образцы Сыворотка, плазма (с гепаринатом лития или аммония, ЭДТА) или цельная кровь. Взятие и подготовка проб 1. Взятие крови осуществляется с помощью стандартной лабораторной процедуры (асептическим способом, исключающим гемолиз). Все пробы следует считать потенциально инфекционными. 2. Образцы цельной крови должны тестироваться в течение 4 часов после взятия. 3. Если тестирование образцов сыворотки предполагается провести в течение 48 часов после взятия крови, образец следует хранить в холодильнике при 2-8°С. Если же тест будет выполняться позже, пробу сыворотки или плазмы необходимо заморозить. --- стр. 8 --- Замороженные пробы перед тестированием следует оттаять, тщательно перемешать и довести до комнатной температуры. Повторное замораживание проб не допускается, В случае мутности, высокой вязкости или наличия в пробе сыворотки нерастворимых частиц необходимо перед тестированием развести пробу равным объёмом буфера для разведения (не входит в комплект набора, но может поставляться по заказу). Процедура тестирования 1 . Довести все пробы, тестовые кассеты и разбавитель до комнатной температуры. 2. Извлечь тестовую кассету из защитной упаковки, оторвав край упаковки по надрезу. 3. Пометить тестовую кассету фамилией или кодовым номером пациента. 4. Набрать пробу (сыворотки или плазмы) в пипетку-капельницу и, держа её вертикально, внести 1 полную каплю сыворотки (25 мкл без воздушных пузырьков) в лунку для проб тестовой кассеты. В случае тестирования цельной крови внести в лунку для проб 2 капли (50 мкл) крови. 5. Внести в лунку для проб 3 полных капли разбавителя (150 мкл). 6. Считать качественный результат теста через 10-15 минут после внесения пробы. НЕ ИНТЕРПРЕТИРОВАТЬ РЕЗУЛЬТАТ ТЕСТА ПОСЛЕ 15 МИНУТ ВЫДЕРЖКИ. Интерпретация результатов Отрицательный: Появляется только одна цветная полоса в контрольной зоне (С). Положительный: Кроме цветной полосы в контрольной зоне, появляется также вторая чётко различимая полоса в тестовой зоне. Неопределённый: Если в контрольной зоне не появилось чёткой цветной полосы, тест считается не прошедшим контроль качества. В этом случае рекомендуется повторить его, взяв новую тестовую кассету. Характеристики теста Серия из 12 предварительно проанализированных проб была протестирована с помощью данного теста. Результаты сравнения приведены в Таблице 1 и показывают очень хорошую корреляцию с методами ИФА, трепонемными и нетрепонемными методами. Бьши также протестированы 50 отрицательных проб, которые оказались отрицательными в данном тесте. № EIA Syphilis Captia EIA Syphilis Embrabio EIA SyphiHs P.Cambrid ge VDRL Wiener VDRL Behring VDRL Lahore lin PG Serodia TP FTA- ABS Biolab Тест VEDALAB I 0.789/0.365 0.702/0.300 П03. Her. Her. Her. П03. П03. П03. 2 1.245/0.365 0.604/0.300 П03. Her. Her. Her. П03. П03. П03. --- стр. 9 --- 1.286/0.365 1.308/0.300 поз. 1/4 1/4 1/4 поз. поз. поз. 1.171/0.365 1.157/0.300 поз. 1/4 1/4 1/4 поз. поз. поз. 1.035/0.365 0.787/0.300 поз. 1/4 1/4 1/4 поз. поз. поз. 1.227/0.365 0.609/0.300 поз. 1/64 1/64 1/64 поз. поз. поз. 1.173/0.365 1.193/0.300 поз. 1/8 1/4 1/8 поз. поз. поз. 0.764/0.365 1.105/0.300 поз. 1/64 1/16 1/64 поз. поз. поз. 0.777/0.365 0.809/0.300 поз. нег. нег. нег. поз. поз. поз. 10 0.205/0.365 0.072/0.312 нег. + 1/1 + 1/1 + 1/1 нег. нег. нег. 11 0.205/0.365 0.072/0.312 поз. нег. нег. нег. поз. поз. поз. 12 0.767/0.365 0.566/0.300 поз. 1/1 1/1 1/1 поз. поз. Т а б л и ц а 1. Р е з у л ь т а т ы т е с т и р о в а н и я о б р а з ц о в к р о в и р а з н ы м и т е с т а м и . Второе клиническое испытание проводилось в Исследовательском Институте венерических заболеваний. Клиническое испытание проводилось на 304 пациентах, из которых 224 было инфицировано. Испытания проводились с использованием проб сыворотки и крови от каждого пациента, в трех экземплярах для каждой пробы. Данный тест, используемый в качестве скрининговой диагностики, сравнивался с нетрепонемными (VDRL, RPR) и трепонемными тестами (TPI и сравнительным методом FTA-ABS). Результаты показали абсолютное соответствие теста всем методам, как для проб сыворотки, так и для проб крови, т.е. чувствительность и специфичность была 100%. Ограничения метода 1. Как и в случае всякой диагностической процедуры, врач должен подтвердить данные, полученные с использованием этого теста, другой клинической информацией. 2. Очень ранняя стадия инфицирования может привести к ложным отрицательным результатам по причине низкой концентрации антител против T r e p o n e m a p a l l i d u m в пробах сыворотки, плазмы или цельной крови. 3. Положительный результат не исключает наличия других патогенов. Литература 1. Pettit D.E., S.A. Larsen, V. Pope, M.W. Penyman, and M.R. Adams 1982. Unheated serum reagin test as a quantitative test for syphilis. J. Clin. Microbiol. 15 : 238-242. 2. March, R.W. and G.E. Stiles. 1980. The reagin screen test : a new reagin card test for syphilis. Sex. Transm. Dis. 7 : 66-70. 3. S.A. Larsen, E.A. Hambie, D.E. Pettit, M.W. Perryman, SJ. Kraus. 1981. Specificity, sensitivity and reproducibility among the fluorescent treponemal antibody-absoфtion test, the microhemagglutination assay for Treponema pallidum antibodies, and the hemagglutination treponemal test for syphilis. J. Clin. Microbiol. 14 (4) : 441-445.4 --- стр. 15 --- 22 drops ist's::':'’ iqu2 . . „ I ЕЛггс'О! iL b ? r t G l l f до комнатной температуры. A . Э к с т р а к ц и я п р о б ы : 1. Внести в пробирку для экстракции 22 капли (0,9 мл) экстрагента. 2. Поместить тампон в пробирку и энергично перемешивать им экстрагент в течение 10 секунд, чтобы добиться хорошей экстракции мазка. 3. Поместить пробирку с тампоном в штатив и оставить на 10-15 минут при комнатной температуре для экстракции. Во время экстракции 2-3 раза покрутить тампон в течение нескольких секунд, прижимая его к стенкам пробирки (см. рисунок). 5. По окончании экстракции (через 10- 15 минут) тщательно выжать тампон о стенки пробирки и извлечь его из пробирки. 6. Утилизировать тампон, соблюдая технику безопасности при работе с инфекционным биоматериалом. Экстрагированная проба может храниться при комнатной температуре в течение 30 минут без ухудшения качества теста. B . Т е с т и р о в а н и е : 1. Извлечь тестовую кассету из защитной упаковки и положить её на ровную горизонтальную поверхность. 2. Пометить кассету фамилией или кодовым номером пациента. 3. Закрыть пробирку с экстрагированной пробой фильтрующей крышкой- капельницей и внести 4 капли (150 мкл) экстракта в лунку для проб тестовой кассеты. 4. Дать каждой капле впитаться перед внесением следующей. Не допускать образования воздушных пузырьков в лунке для проб. 5. Наблюдать результат теста через 20 минут после внесения пробы в лунку для проб тестовой кассеты. Интерпретация результатов Отрицательный: Появляется только одна цветная полоса в контрольной зоне (С). Положительный: Кроме цветной полосы в контрольной зоне, появляется также чётко различимая вторая розовая полоса в тестовой зоне, что указывает на присутствие в пробе антигена хламидий. Даже бледная линия в тестовой зоне трактуется как положительный результат. Возможное различие в оттенке и интенсивности тестовой и контрольной полос не влияет на интерпретацию результата. 15 --- стр. 16 --- 3. Продолжить серию двукратных разбавлений аналогичным образом вплоть до пятого круга, и отбросить лишние 50 мкл из последнего круга. Окончательное разбавление образца будет: 1/2, 1/4, 1/8, 1/16 и 1/32. 4. Протестировать каждое разбавление, как описано в пунктах 2-6 для качественного метода. Считывание результатов а) Результаты 1. Реакция есть: при положительном результате образуются небольшие, но четко видимые обильные хлопья. (См. Меры предосторожности, пункт 5). 2. Реакции нет: частички остаются в дисперсной взвеси без видимой преципитации. Титр образца обозначается как наивысшее разбавление, которое показывает реакцию в тесте. Следующее более высокое разбавление должно дать отрицательный результат. Если тестируемое наивысшее разбавление оказалось реакционно способным, следует повторить тест, начиная с предварительного 1/16 разбавления. Использовать 1/50 разбавление отрицательной контрольной сыворотки в 0,9% физиологическом растворе для того, чтобы заменить 0,9% солевой раствор в сериях двукратного разбавления. б) Контроль качества Положительные и отрицательные контроли (не входят в состав набора, но могут поставляться по запросу) следует проверять ежедневно, следуя методу качественного определения с целью проверки оптимальной реакционной способности антигена. Положительный контроль должен показьгеать четкое образование хлопьев. Если при проверке не удается достичь ожидаемого результата, не используйте такой набор. Характеристики теста а) Чувствительность и специфичность Аналитическая чувствительность эквивалентна чувствительности, наблюдаемой при использовании человеческой реактивной сыворотки из Центра Контроля за Болезнями (CDC). Диагностическая чувствительность равна 86% для первичного сифилиса и 100% для вторичного сифилиса. Диагностическая специфичность равна 98%. Результаты, полученные с этим реагентом, не показали значительных различий при сравнении с эталонными реагентами. 2 2 --- стр. 17 --- б) Влияния гемолизная и яипемичная сыворотка мешают определению VDRL антигена. Другие вещества также могут влиять (4). Ограничения метода 1 . Ложные отрицательные биологические реакции могут наблюдаться при ранней первичной инфекции и на поздних латентных стадиях болезни. 2. Известно о ложных положительных реакциях с антигенами типа кардиолипина при таких заболеваниях, как инфекционный мононуклеоз, системная красная волчанка и вирусная пневмония. Беременность, наркотическая зависимость и аутоиммунные болезни могут также дать ложные положительные реакции. Литература 1 . Harris А et al. J. Ven. Dis. Information. 27 : 169 (1946). 2. Harris A et al. J. Ven. Dis. Information. 29 : 72 (1948). 3. Guide of clinical preventive services. 2nd Edition. U.S. Department of Health and human services, Washington, DC (1996). 4. Young D.S. Effects of drugs on clinical laboratory test, 4^ edition. AACC Press. 1995. 23 --- стр. 24 --- Считайте результаты теста. Считывание результатов может быть отложено до 24 часов при условии, если микропланшета будет накрыта и будет храниться при описанных выше условиях. Считывание результатов а) Качественные результаты Контрольная Тестовая Результат лунка лунка Негативный Позитивный (выполнить количественный тест) Неопределенный • ) (§ ) О (5 ) CZ^ CZ) Недействительный (неспецифическая реация) Если клетки образуют структуру, покрывающую дно лунки, это указывает на четкий положительный результат. В случае отрицательного результата клетки (образца или отрицательного контроля) оседают в виде компактной «кнопочки» на дне лунки. Если эти два условия не вьшолняются, тест следует считать недействительным и его следует выполнить вновь Пограничный контроль должен показывать как клеточную структуру с отчетливо открытым центром лунки, так и компактную массу клеток для идентификации пограничных образцов (неопределенные результаты). Эти результаты указывают на низкий уровень антител как в случае раннего первичного сифилиса, так и недавно проведенного лечения или фрамбезии. Образец такого типа следует повторно тестировать с помощью качественного метода. Необходимо определить титр образца, чтобы определить повьппение титра во времени. Рекомендуется тест для определения реагинов (РПР-сифилис) и/или тест FTA-ABS. Положительный контроль должен давать четкую агглютинацию эритроцитов с появлением структуры клеток, покрывающих дно лунки. Примечание: В случае положительного результата контрольную лунку следует внимательно рассмотреть. Контрольные клетки должны сформировать компактную «кнопочку» на дне лунки. Этот результат не должен использоваться для сравнения с результатами, полученными для отрицательных образцов (контрольная «кнопочка» клеток получается более компактной, чем образование из тестовых клеток). Агглютинация эритроцитов в контрольной лунке указывает на наличие неспецифических агглютининов в образце; тест следует считать недействительным. Образец такого рода можно абсорбировать, используя контрольные клетки (см. пункт 28 --- стр. 25 --- «Неспецифическая абсорбция»). б) Количественные результаты Внешний вид результатов на примере положительного контроля из набора: 1/80 А Позитивный 1/160 В Позитивный 1/320 С Позитивный 1/640 D НеопределенныйI У 1/1280 Е Негативный 1/2560 F Негативный 1/5120 G Негативный 1 /10240 Н Негативный Интерпретация: титр образца соответствует разведению, показывая неопределенный результат (клеточная структура + «кнопочка»). Положительный контроль, разбавленный 1/1280, должен дать неопределенный результат (клеточная структура + «кнопочка»). Эта величина может изменяться от 1/640 до 1/2560, в зависимости от лота реагентов, как показано на рисунке выше. в) Неспецифическая абсорбция 1. Внести 100 мкл исследуемой сыворотки в пробирку, затем добавить 400 мкл контрольных клеток. Хорошо перемешать и оставить на час при комнатной температуре. 2. Центрифугировать при 1000 об/мин в течение 5 минут и анализировать супернатант согласно методике качественного теста. Примечание. Разведение сьшоротки будет равно 1/5. Этот факт следует учитывать в процессе приготовления разведений. Если результат после этапа абсорбции всё ещё неопределенный, то образец следует проанализировать другим методом, например, определением реагинов или тестом FTA-ABS. Характеристики теста а " ) Внешняя оценка Тест РПГА на сифилис оценивали в центрах переливания крови и независимых лабораториях. Образцы анализировали с помощью данного и другого коммерческого теста. Сыворотки с противоречивыми и положительными результатами теста РПГА на сифилис были подтверждены с помощью теста FTA-ABS и/или клиническим диагнозом. Образцы, полученные от доноров Скрининг прошли 2160 образцов. Все результаты были отрицательными. Неспецифический результат получен на двух сыворотках. После этапа абсорбции данные 29 --- стр. 26 --- сыворотки дали отрицательные результаты. Специфичность составила 100% (2160/2160). Клинические образцы Были протестированы 602 сыворотки. Результаты суммированы в нижеследующей таблице: Клинический диагноз Положительный Отрицательный Всего Результат теста РПГА Положительный 298 300 Отрицательный 1 301 302 Всего 299 303 602 Сыворотки с противоречивыми и положительными результатами теста РПГА на сифилис были подтверждены с помощью теста FTA-ABS и/или клиническим диагнозом. Специфичность составила 99,3% (301/303). Чувствительность составила 99,7% (298/299). Ограничения метода 1 . Антитела к сифилису, которые определяются тестом РПГА, долговременно сохраняются в крови, даже после успешного лечения. В этом заключается причина, почему положительный тест РПГА указывает на недавнюю или предьщущую инфекцию. 2. Невозможно отличить сифилис от других трепонемных инфекций (например, фрамбезии), используя тест РПГА. Всегда следует учитывать клинические симптомы при постановке диагноза. Ложные положительные результаты можно наблюдать у пациентов, страдающих от проказы, инфекционного мононуклеоза или нарушений соединительной ткани. 3. Тест FTA-ABS следует применять для подтверждения результатов, поскольку им можно различить антитела классов IgG и IgM. Данный тест полезен в случае очень раннего заболевания сифилисом, когда можно получить отрицательный тест РПГ А. 4. Рекомендуется применение количественного теста (например, РПР или VDRL) при мониторинге процесса лечения. Литература 1 . Rathlev Т. W.H.O. VDT. RES., 1965, 77: 65. 2. TomizawaT. and Kasamatsu S. Jap. Med. Sci. Biol. 1966, 19: 05. 3. Rathlev T. Brit. J. Vener. Dis., 1967, 43: 181. 4. Tringali G. Ann. Sc. Pav., 1970, 12: 311. 5. Uete Т., Fukazawa S., Ogi K. and Takeuchi Y., Brit. J. Vener. Dis., ... 30 --- стр. 30 --- 1. Довести все пробы и реагенты до комнатной температуры. 2. С помощью автоматической пипетки внести 50 мкл каждого образца в отдельный круг на пластине. Для каждого образца нужно использовать отдельный наконечник, который выбрасывается после использования. В два дополнительных круга внести по 1 капле каждого из двух сывороточных контролей (положительного и отрицательного). 3. Осторожно встряхнуть раздаточный флакон и, держа его вертикально, слегка сжать для удаления воздушных пузырьков из иглы и получения нормальной капли. 4. Установить иглу дозатора в вертикальное положение перпендикулярно к тестовой пластине. Слегка сжать раздаточный флакон и добавить по 1 капле антигена в каждый круг рядом с исследуемым образцом. 5. Смешать содержимое каждого круга одноразовой мешалкой и распределить смесь по всей площади круга. Использовать отдельные мешалки для каждого смешиваемого образца. 6. Поместить пластину на механическую мешалку-ротатор и мешать при скорости 100 оборотов в минуту в течение 8 минут. 7. Визуально наблюдать за образованием хлопьев под интенсивным светом лампы или ярким дневным освещением в течение минуты после снятия пластины с мешалки. Полуколичественное определение Приготовить серию разведений для каждого тестируемого образца, для чего внести автоматической пипеткой по 50 мкл 0,9% физиологического раствора в каждый из 8 кругов на тестовой пластине. Не размазывать разбавитель по пластине. В первый круг добавить к физиологическому раствору 50 мкл образца и, используя тот же наконечник, смешать солевой раствор с образцом с помощью пипетирования, а затем перенести 50 мкл смеси в физраствор во втором круге. Продолжить серию двукратных разбавлений аналогичным образом вплоть до пятого круга, и отбросить 50 мкл из последнего круга. Окончательное разбавление образца будет 1/2, 1/4, 1/8, 1/16 и 1/32. Протестировать каждое разбавление, как описано в пунктах 3-7 качественного метода. Интерпретация результатов Положительный: Агглютинация проявляется в течение одной минуты. . Большие агрегаты присутствуют в центре тестового круга. ) 34 --- стр. 31 --- Отрицательный: Агглютинация не проявляется в течение одной минуты. Углеродные частицы остаются в тонкой суспензии без видимых агрегатов. Если в полуколичественном методе наивысшее тестируемое разбавление показало положительную реакцию, следует повторить тест, начиная с 1/16 разбавления в первом круге. В этом случае для серийного разведения сыворотки пациента необходимо использовать отрицательную контрольную сьшоротку, разбавленную физраствором 1/50. Характеристики теста а) Чувствительность и специфичность Аналитическая чувствительность эквивалентна чувствительности при использовании человеческая реактивная сыворотка из Центра Контроля над Болезнями (CDC). Диагностическая чувствительность равна 86% для первичного сифилиса и 100% для ф вторичного сифилиса. Диагностическая специфичность равна 98%. Полученные при использовании этого реагента результаты не показали значительных различий при сравнении с эталонными реагентами. б) Влияния Гемоглобин (<10 г/л), билирубин (<20 мг/дл) и липемия (<10 г/л) не мешают работе РПР-реагента. Ревматоидный фактор (>300 МЕ/мл) может влиять на результаты, так же как и некоторые другие вещества (6). Ограничения метода 1 . Ложные отрицательные реакции могут наблюдаться при ранней первичной инфекции и поздних латентных стадиях болезни. Ф 2. Известно о ложных положительных реакциях с антигенами кардиолипинового типа при некоторых заболеваниях, таких как инфекционный мононуклеоз, красная волчанка и вирусная пневмония. Беременность, наркотическая зависимость и аутоиммунные болезни могут также дать ложные положительные реакции. 3. Не использовать для тестирования спинномозговую жидкость. 4. Как и при любой другой диагностической процедуре, лечащий врач должен оценивать данные, полученные с помощью данного теста в свете другой клинической информации. 5. Плазма, содержащая избыточные концентрации антикоагулянтов, может дать ненадежные результаты. Литература I. Portnoy J., Brewer J.H. and Harris A., Pub. Health rep. (1962) 77: 645. 35 --- стр. 32 --- 2. Portnoy J., Pub. Health Lab. (1965), 23: 43. 3. McGrew B.E, DuCros M.F, Stout G.W., Falcone V.H., Clin. Path. (1968), 50: 52. 4. McGrew B.E, Stout G.W., Falcone V.H., Amer.J.Clin.Tech. (1968), 34: 634. 5. Guide of clinical preventive services. 2nd Edition. U.S.Department of Health and human services, Washington, DC (1996). 6. Young D.S. Effects of drugs on clinical laboratory test, 4th edition. AACC Press. 1995. 36