Реагенты для in vitro диагностики в наборах и отдельных упаковках к оборудованию для исследования гемостаза серии Helena — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2011/11270 от 26.12.2011 · класс риска 2а

Производитель: "Хелена Лэбораторис" (СК), торгующая как "Хелена Байосайенсес Европ" (HELENA LABORATORIES (UK) Ltd trading as HELENA BIOSCIENCES EUROPE) (Соединенное Королевство)

Вид изделия: Стандартный образец для калибровки/контроля лабораторных оптических приборов ИВД, одноразового использования · Гомоцистеин ИВД, контрольный материал · Гомоцистеин ИВД, набор, ферментный спектрофотометрический анализ

Назначение: Предназначены для применения с оборудованием для исследования гемостаза серии Helena.

В госконтрактах 44-ФЗ: 149 контрактов, медианная цена за единицу 13 625 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

=== файл: Инструкция_руководство__o79703_I.pdf ===
--- стр. 5 ---
т
I
f
Тест-система "Жидкий тромбопластин" (Thromboplastin LI)
Назначение.
Первый стандартизованный одностадийный тест протромбинового времени был предложен д-ром Армандом Квиком в 1935г. 
Сейчас он стал основным скрининговым тестом при диагностике врожденного и приобретенного дефицита факторов 
свертывания по внешнему пути (факторы II, V, VII и X). Он также используется для инициирования и мониторинга терапии 
оральными антикоагулянтами, и также может быть использован при оценке уровня белкового синтеза печенью при 
хронической или острой печеночной недостаточности.
Helena Thromboplastin-Li (TP-LI) выделен из мозга кролика, но сходен с человеческим ВСТ по значению Международного 
Индекса Чувствительности (МИЧ). МИЧ Helena TP-LI примерно равен 1.1 (при использовании ручного метода калибровки) и 
откалиброван относительно международного референса. Helena TP-LI особенно подходит для мониторинга терапии 
оральными антикоагулянтами и, вместе с соответствующей фактор-дефицитной плазмой, для измерения активности 
факторов внешнего пути свертывания. Тканевый тромбопластин, в присутствии ионов кальция, является активатором 
внешнего пути свертывания крови. При добавлении смеси тканевого тромбопластина с кальцием к нормальной цитратной 
плазме активируется механизм свертывания, приводящий к образованию фибринового сгустка. Если имеет место дефицит 
факторов внешнего пути, то время, необходимое для образования сгустка будет удлиняться тем сильнее, чем тяжелее 
дефицит факторов.
Меры предосторожности.
Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!  При работе с 
компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам предосторожности. 
Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к гепатиту В (HBsAg), 
HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с ними с той же 
осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Состав.
1. реактив Helena TP-Li
Каждый флакон содержит суспензию тромбопластина, выделенного из мозга кролика. Содержимое флакона нужно хорошо 
перемешивать перед и во время использования. Реактив является суспензией мозговой ткани кролика.
2. Раствор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 0,25М раствор хлорида кальция. Реактив представляет собой прозрачный, бесцветный раствор.
3. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению с указанием рефересных значений для данного набора.
Хранение и срок годности.
Запечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
1. Helena TP-Li о
Вскрытые флаконы годны к применению в течение 1 месяца при температуре хранения 2+6 С, 5 дней при 15+30 С. Готовый 
для использования реактив (смешанный с хлоридом кальция) можно использоать в течение 10 дней при температуре 2+6 С 
или 5дней при температуре 15+30“С. Не замораживать!  Признаки ухудшения качества: большое скопление частиц или 
отличия от ожидаемых значений могут означать ухудшение свойств реактива.
2. Раствор кальция хлорида
Вскрытые флаконы годны к применению в течение месяца при температуре 2+6 С или 5 дней при температуре 15+30 С. 
Признаки ухудшения качества: дисперсная взвесь, хлопья или отличия от ожидаемых значений могут означать ухудшение 
свойств реактива.
Требуемые, но не поставляемые материалы.
Cat. No. 5519 Плазма-калибратор.
Сбор и приготовление образцов.
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в пробирку с 
цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при оборотах 
2000+3000 * g в течение 15 минут отделить плазму. Плазму следует хранить при температуре 2+6 С. Тестирование должно
быть проведено в течение 2 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при температуре -20 С
в течение 2 недель или при -70°С в течение 1 месяца. Разморозить быстро при 37°С перед проведением измерений. Не 
держать при 37°С более 5 минут.
Пошаговая последовательность действий.
Для достоверного вычисления МНО рекомендуется определить специфическое для лаборатории значение МИЧ реактивов, 
используемых в тестировании. Helena BloSciences Europe рекомендует для этих целей плазму-калибратор (Cat. No. 5519). 
Подобная процедура должна быть проведена для каждой новой партии реактивов. Для вычисления сдвига в локальном 
системном МИЧ, который наблюдается в связи с изменением температуры в лаборатории, особенностями технического 
обслуживания прибора, среди прочих местных различий, предлагается использовать Helena BloSciences Europe МИЧ- 
референс (Cat, No. 5490).
Для точного определения протромбиновой активности (%ПТ) рекомендуется калибровать прибор при рутинном  
использовании, используя Heiena BioSciences Europe протромбин-калибратор (Cat. No. 5504). He рекомендуется  
использование серии разведений референсной плазмы для получения графика зависимости (%ПТ) от времени свертывания, 
так как это может привести к неточности, вызванной низким содержанием фибриногена в разведениях рефересной плазмы, 
которое не отражается в образцах пациентов, в основном, имеющих нормальный уровень фибриногена.
1. Ручной метод.
а) Смешать достаточное количество Heiena TP-Li и раствора хлорида кальция для получения смеси, необходимой для 
проведения тестирования в течение дня и инкубировать при 37°С не более 8 часов.
б) Прогреть 0,1 мл тестируемой плазмы при 37°С в течение 2 минут.
в) Добавить 0,2 мл свежеприготовленного тромбопластин-реактива к плазме и немедленно включить таймер.
г) Заметить время, необходимое для образования сгустка с точностью до 0,1 сек.
I
L
7?


--- стр. 6 ---
2. Автоматизированный метод.
а) Обратитесь к руководству пользователя вашего оборудования для получения детальных инструкций.
Интерпретация результатов.
Результаты должны быть представлены с точностью до 0,1 сек и разница в повторах не должна превышать 5%. МНО может 
быть вычислено по формуле:
МНО= {ПВ (пациента)\среднее ПВ (норма)}”'''*
Значение (%ПВ) может быть найдено из калибровочного графика (график зависимости (%ПВ) от измеренного времени), 
который должен быть строго линейным в двойных логарифмических координатах.
Контроль качества.
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Helena BioSciences Europe предлагает следующие контрольные реактивы:
Cat. No. 5186 Norm-Trol 1 10 х 1ml
Cat. No. 5499 Norm-Trol 1 10 x 3ml
Cat. No. 5187 Ab-Trol 2 10 x 1ml
Cat. No. 5183 Ab-Trol 3 10 x 1ml
Cat. No. 5490 INR Reference Set 12 x 0.5ml
Референсные значения.
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от
используемых методов и анализаторов. В связи с этим каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений. Это крайне важно для локальной МИЧ-калибровки. При использовании ручного метода («наклонная 
пробирка») нормальные значения лежат в диапазоне 12,5+16,5 секунд.
Область терапевтических значений.
Британское Общество по Гематологии рекомендует следующие диапазоны значений МНО для разных клинических условий:
МНО
2.0+2.5
2.0+3.0
Клиническое состояние
Профилактика тромбоза глубоких вен, включая оперативное вмешательство для пациентов с высоким 
риском (2.0+3.0 для операций на тазобедренном суставе и операций на бедренной кости).
Лечение тромбоза глубоких вен. Легочная эмболия. Системная эмболия. Предупреждение венозной 
тромбоэмболии при инфаркте миокарда. Митральный стеноз с эмболией. Периодические ишемические 
атаки. Фибрилляция предсердий.
3.0+4.5 Повторяющиеся тромбоз глубоких вен и легочная эмболия. Поражение артерии, включая инфаркт
миокарда. Механическое протезирование сердечных клапанов.
Показатели.
Последующие измерительные характеристики были определены Helena BioSciences или их представителями как стандарты. 
Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Воспроизводимость (с использованием Behnk RackRotor):
Воспроизводимость в пределах определения
время свертывания, сек. коэф. вар. внутри пробы, %
п=10 17.0 0.92
п=10 26.9 1.09
Воспроизводимость между определениями
время свертывания, сек. 
п=100 13.7
п=100 23.0
п=100 25.6
Воспроизводимость между партиями
время свертывания, сек. 
п=3 13.1
п=3 27.3
п=3 44.0
Сравнение метода.
Сравнение значений МНО, определенных с помощью Helena TP-LI и двумя другими референсами тромбопластина дало 
следующие корреляционные соотношения:
TP-LI = 0.9936 (RTF95) + 0.0129 
г^= 0.9834 п = 79
TP-LI = 0.9589 (ВСТ441) + 0.1543 
г^= 0.9500 п = 79
коэф. вар. ме>|щу пробами, % 
2.09 
2.38 
2.15
коэф. вар. между пробами, % 
2.0 
3.3 
2.2
Тест-система "Тромбопластин" (Thromboplastin L)
I. Применение
Первый стандартизованный одностадийный тест протромбинового времени (ПВ) был предложен доктором 
Армандом Квиком в 1935г. Сейчас он стал основным скрининговым тестом при диагностике врожденного и приобретенного 
дефицита факторов свертывания по внешнему пути (факторы И , V, VII и X). Он также используется для инициирования и 
мониторинга терапии оральными антикоагулянтами, и также может быть использован при оценке уровня белкового синтеза 
печенью при хронической или острой печеночной недостаточности.


--- стр. 7 ---
L
Тромбопластин L I (ТП-LI) выделен из мозга кролика, но сходен с человеческим тромбопластином по значению 
Международного Индекса Чувствительности (МИЧ). МИЧ тромбопластина L I примерно равен 1.1 (при использовании ручного 
метода калибровки) и откалиброван относительно международного референса. Тромбопластин L I особенно подходит для 
мониторинга терапии оральными антикоагулянтами и, вместе с соответствующей фактор-дефицитной плазмой, для 
измерения активности факторов внешнего пути свертывания. Тканевый тромбопластин, в присутствии ионов кальция, 
является активатором внешнего пути свертывания крови. При добавлении смеси тканевого тромбопластина с кальцием к 
нормальной цитратной плазме активируется механизм свертывания, приводящий к образованию фибринового сгустка. Если 
имеет место дефицит факторов внешнего пути, то время, необходимое для образования сгустка будет удлиняться тем 
сильнее, чем тяжелее дефицит факторов.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы крови человека.
выделенного из мозга кролика. Реактив является суспензией
III. Реактивы
1. Реактив т ромбопласт ин U.
Каждый флакон содержит суспензию тромбопластина, 
мозговой ткани кролика.
Приготовление.  Реактив готов к использованию. Содержимое флакона нужно хорошо перемешивать перед и во время 
использования.
2. Раст вор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 0,25М раствор хлорида кальция. Реактив представляет собой прозрачный, бесцветный раствор. 
Приготовление.  Реактив готов к использованию.
3. Д ругие компонент ы  набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению с указанием рефересных значений для данного набора.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
1. Тромбопласт ин и  „ .
Вскрытые флаконы годны к применению в течение 1 месяца при температуре хранения 2+6 С, 5 дней при 15+30 С. 
Готовый для использования реактив (смешанный с хлоридом кальция) можно использоать в течение 10 дней при 
температуре 2+6°С или 5дней при температуре 15+30°С. Не замораживать! Признаки ухудшения качества: большое 
скопление частиц или отличия от ожидаемых значений могут означать ухудшение свойств реактива.
2. Раст вор кальция хлорида  „
Вскрытые флаконы годны к применению в течение месяца при температуре 2+6 С или 5 дней при температуре 15+30 С. 
Признаки ухудшения качества: дисперсная взвесь, хлопья или отличия от ожидаемых значений могут означать ухудшение 
свойств реактива.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. Плазма-калибратор кат ном 5519.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрис{)угирования при 
оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут отделить плазму. Плазму следует хранить при температуре 2+6 С. Тестирование 
должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при  
температуре -20°С в течение 2 недель или при -70 '’С в течение 1 месяца. Разморозить быстро при 37 С перед проведением 
измерений. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководствоДля достоверного вычисления МНО рекомендуется определить специфическое для лаборатории значение мич 
реактивов, используемых в тестировании. Компания Helena рекомендует для этих целей плазму-калибратор (кат ном 5519). 
Подобная процедура должна быть проведена для каждой новой партии реактивов. Для вычисления сдвига в локальном 
системном МИЧ, который наблюдается в связи с изменением температуры в лаборатории, особенностями технического 
обслуживания прибора, среди прочих местных различий, предлагается использовать Helena МИЧ-референс (кат ном 5490).
Для точного определения протромбиновой активности (%ПТ) рекомендуется калибровать прибор при рутинном 
использовании, используя кат ном 5185KzDT.
Ручной метод. -Смешать достаточное количество Helena ТП-LI и раствора хлорида кальция для получения смеси, необходимой для 
проведения тестирования в течение дня, ин1«бировать при 37°С не более 8 часов.
Прогреть 0,1 мл тестируемой плазмы при 37Х в течение 2 минут.
Добавить 0,2 мл свежеприготовленного тромбопластин-реактива к плазме и немедленно включить таймер.
Заметить время, необходимое для образования сгустка с точностью до 0,1сек.
Автоматизированный метод.
Обратитесь к руководству пользователя вашего оборудования для получения детальных инструкции.
1)
2)
3)
4)
VIII. Интерпретация результатов .Результаты должны быть измерены с точностью до 0,1 сек и разница в повторах не должна превышать 5/о. МНО
может быть вычислено по формуле:
Зн^ачениТ(“ ГпВ)^м^^^ калибровочного графика (график зависимости %ПВ от измеренного времени),
который должен быть строго линейным в двойных логарифмических координатах.
IX. необходимо установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии
образцов пациентов нео^димо протестировать нормальную и патологичную плазму, чтобы удостовериться


--- стр. 8 ---
удовлетворительной работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми 
значениями, то измеренные данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena BioSciences Europe предлагает следующие контрольные реактивы:
Кат. ном 5186KZDT Routine Control N.
Кат. ном 5187KzDT Routine Control А.
Кат. ном 5490 INR Reference Set
X. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от используемых методов и 
анализаторов. В связи с этим каждая лаборатория должна определить свою собственную область нормальных значений. Это 
крайне важно для локального значения МИЧ-калибровки. При использовании ручного метода нормальные значения лежат в 
диапазоне 12,5+16,5 секунд.
Область терапевтических значений.
Британское Общество по Гематологии рекомендует следующие диапазоны значений МНО для разных клинических
условий:
МНО Клиническое сост ояние
2.0+2.5 Профилактика тромбоза глубоких вен, включая оперативное вмешательство для пациентов с высоким
риском (2.0+3.0 для операций на тазобедренном суставе и операций на бедренной кости).
2.0+3.о Лечение тромбоза глубоких вен. Легочная эмболия. Системная эмболия. Предупреждение венозной
тромбоэмболии при инфаркте миокарда. Митральный стеноз с эмболией. Периодические ишемические 
атаки. Фибрилляция предсердий.
3.0+4.5 Повторяющийся тромбоз глубоких вен и легочная эмболия. Поражение артерии, включая инфаркт
миокарда. Механическое протезирование сердечных клапанов.
XI. Аналитические характеристики.
Последующие аналитические характеристики были определены Helena BioSciences или их представителями как 
пример. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Воспроизводимость (с использованием Behnk RackRotor):
Внутри одной аналитической Сирии.
время свертывания, сек. коэф. вар. внутри пробы, %
п=10 17.0 0.92
п=10 26.9 1 09
Мех(ду разными аналитическими сериями, 
время свертывания, сек. коэф. вар. между пробами, %
п=100 13.7 2.09
п=100 23.0 2.38
п=100 25.6 2.15
Между определениями с реактивами разных партий, 
время свертывания, сек. коэф. вар. между пробами, %
п=3 13.1 2.0
п=3 27.3 3.3
п=3 44.0 2.2
Сравнение метода.
Сравнение значений МНО, определенных с помощью Helena ТП-LI и двумя другими референсами тромбопластина дало 
следующие корреляционные соотношения:
TP-Li = 0.9936 (RTF95) + 0.0129 
г2= 0.9834 п = 79
TP-Li = 0.9589 (ВСТ441) + 0.1543 
г2= 0.9500 п = 79
Тест-система "Рекомбинантный тромбопластин" (Thromboplastin RH).
Нэзнэчонив
Высокая чувствительность тромбопластинового реагента, основана на том, что для определения протромбинового времени 
(РТ) и фибриногена (Fib) используется рекомбинантный кроличий тканевой фактор. Определение РТ и Fib проводится в 
цитратной плазме на анализаторах IL и необходимо для оценки внешнего пути свертывания и контроля за приемом оральных 
контрацептивов.
Принцип метода , .
Реактив ПВ, включенный в набор ПВ-фибриноген рекомбинантный, содержит рекомбинантный кроличии тканевой фактор 
(RH) и синтетические фосфолипиды в смеси с оптимальной концентрацией кальция хлорида, буфера и консервантов. 
Основным достижением данного метода является стабильность реагентов от партии к партии по сравненик) с  
тромбопластином, полученным из естественных источников. Из-за очень высокой чувствительности, сопоставимой с 
международным референсным препаратом, данный реагент идеально подходит для проведения мониторинга терапии 
оральными контрацептивами. Так как RH не содержит факторы свертывания, то реагент на РТ обладает высокой 
чувствительностью к дефициту X, Vli, V и il-ro факторов, что делает этот анализ наиболее оптимальным для оценки 
факторов внешнего пути свертывания.
ПВ-фибриноген рекомбинантный нечувствителен к терапевтическим уровням гепарина. Улучшенная формула этого реагента 
позволяет проводить определение фибриногена (методом ПВ). Анализ ПВ заключается в добавлении реагента к плазме 
пациентов, что приводит к активированию внешнего пути. Это приводит, в конечном счете, к переходу фибриногена в
8


--- стр. 9 ---
фибрину, с формированием твердого геля, 
свертываемости калибратора.
Количество фибриногена связано со спектральной абсорбцией и временем
Состав
Набор ПВ-фибриноген рекомбинантный состоит из 10 - флаконов по 8 мл лиофилизированного рекомбинантного кроличьего 
тканевого фактора, синтетических фосфолипидов и ионов кальция со стабилизаторами, полибреном, буфером и  
консервантами.
ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ и ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ:
Избегайте контакта с кожей и глазами. Не допускайте утечки. При работе используйте соответствующукэ защитную одехаду- 
С каждой новой партией вводите значения МИЧ (ISI) указанные на вкладыше реагентов и устанавливайте средние значения 
ПВ из нормального диапазона ПВ.
Этот продукт - только для диагностики in vitro.
Подготовка
Растворите содержимое каждого флакона по 8 мл в деионизированной воде. Аккуратно перемешайте. Убедитесь в полном 
растворении продукта. Прогрейте реактив при Т = 15-25°С в течение 30 минут. Не встряхивать.
Хранение реагентов и стабильность
Не вскрытые реагенты устойчивы до срока годности, указанного на флаконе при температуре 2-8°С.
Стабильность после растворения: 3 недели при Т = 2-8°С в оригинальном флаконе, 24 часа при Т = 15°С .
Оптимальней всего хранить реагенты при 2-8°С в оригинальном флаконе.
Процедура анализа
Обратитесь к руководству на анализатор IL.
Сбор крови для анализа
Девять частей свежеотобранной венозной крови необходимо смешать с одной частью тринатриевой соли лимонной кислоты. 
Контроль качества
Нормальные и Abnormal контроли рекомендуются для проведения контроля качества.
Нормальный Контроль, Низкий Abnormal Контроль, Высокий Abnormal Контроль, Abnormal control High/Lev. II и Контроль 
низкой концентрации фибриногена разработан для этой программы. Каждая лаборатория должна установить свои 
собственные средние значения и стандартное отклонение, а также должна установить программу проведения контроля 
качества для проведения контроля за лабораторными исследованиями. Контроль качества необходимо проводить, по 
крайней мере, один раз в 8 часов в соответствии с GLP.
Результаты
Полученные результаты можно выдавать в следующих единицах:
ПВ: секунды, %, отношение, МНО 
Фибриноген: mg/dL, g/L
Для получения дополнительной информации обращайтесь к руководству.
Интерференция
На результаты анализ ПВ могут влиять различные ЛП.
На результаты анализ фибриногена (методом ПВ) могут влиять продукты деградации (фибрин или фибриноген)  
содержащиеся в анализируемой плазме.
На анализаторах IL не возникает следующая интерференция:
arin Hemoglobin Trigly^rides Bilirubin
РТ
Fib
1.5Шт1 
1.5 WmL
400niga 
400 m ga
750 mg,yL 
750 mg^L 20m^dL
Ожидаемые значения no ^ «
Данное исследование диапазона референсных значений было выполнено используя реактив ПВ-фиориноген
1  кщ S y s t e m N
Г  Р Т A C L  F a m i l y4 1
1  Р Т A C L F u t i r a l A G L  A d v a n o e4 1
1  F i b h o g a n A C L  F a m i l y4 1
Г F i t r h o g a n1  рекомбинантный
A C L F u t u r a M L  тшш 4 1
R a n g e  ( u n i t s )
I 0 - 1 2 l ( i e c o r e t e j 
9 . 4 5 -  l l O f i i o s n c I s )
lea-S& M n^'dL)
Эти результаты были получены, при использовании определенной партии реактивов. Из-за многих переменных, который 
могут оказывать влияние на время свертывания, каждая лаборатория должна установить свои собственные Референсные 
значения.
Сертификация
Вариабельность результатов ПВ может наблюдаться при анализе образцов различными реагентами тромбопластина и/или 
различными методами анализа (ручной, полу/полностью автоматический). ICSH (Международный Комитет по  
Стандартизации в гематологии) и ICTH (Международный Комитет по Тромбозу и гемостазу), предлагают для стандартизации 
использовать ISI (Международный Индекс Чувствительности), для последующего вычисления INR (Международное 
Нормализованного Отношения) и выдачи сопоставимых результатов ПВ для пациентов которым необходимо проведение 
мониторинга терапии оральными контрацептивами. Каждая партия «ПВ-фибриноген рекомбинантный» откалибрована. 
Значения МИЧ приведены на листке-вкладыше.
Значения МНО вычисляются следующим образом:
INR = (ПВ пациента/Среднее значение ПВ нормального диапазона)
fef


--- стр. 10 ---
Тест-система "Капиллярный тромбопластин" (Capillary Thromboplastin).
I. Применение
Первый стандартизованный одношаговый метод по определению протромбинового времени (ПВ) был разработан 
Армандом Квиком в 1935 году. Этот метод используют для контроля лечения пероральными антикоагулянтами, а также для 
оценки способности печени синтезировать белки при различных заболеваниях.
Данный реагент компании Хелена приготовлен с использованием тканевого тромбопластина из мозга кролика, 
имеет низкий международный индекс чувствительности (МИЧ). Приблизительное значение МИЧ = 1.1 (точное значение 
указано на отдельно вложенном листке). Капиллярный реагент предназначен специально для мониторинга антикоагулянтной 
терапии.
Тканевый тромбопластин, в присутствии ионов кальция, является активатором внешнего пути свертывания. После 
добавления смеси (тромбоплатин с кальцием) к капиллярной или цитратной крови происходит активация ферментов, 
заканчивающаяся образованием фибринового сгустка. Если есть недостаток факторов внешнего пути свертывания, то время 
образования сгустка будет удлинено (тем сильнее, чем большая недостаточность).
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам предосторожности и способу утилизации.
III. Реактивы
1. Капиллярны й реактив.
Каждый флакон содержит тканевый тромбопластин из мозга кролика.
Приготовление.  Приготовленный раствор нужно перемешивать перед и во время использования.
2. Кальция хлорид.
Каждый флакон содержит раствор кальция хлорида (0.01 ОМ )
Приготовление.  Раствор готов к применению.
3. Д ругие компонент ы  набора.
Каждый набор содержит инструкцию и лист со значениями.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы стабильны до окончания срока годности, указанного на упаковке при условии правильного хранения.
1. Капиллярны й реагент
Открытый реактив годен 1 месяц при 2+6°С или 5 дней при 15+30°С. Рабочий реактив (смесь тромбопластина с кальцием) 
годна 10 дней при 2+6°С или 5дней при 15+30°С.
Не замораживать!
Реактив представляет собой однородную суспензию. Появление крупных частиц, а также неправдоподобные результаты 
говорят о загрязнении реактива.
2. Кальция хлорид
Открытый флакон хранится 1 месяц при 2+6°С или 5 дней при 15+30°С.
Реактив является чистым, бесцветным раствором. Частицы, мутность и неправдоподобные результаты говорят о  
загрязнении.
V. Требуемое, но не предоставляемое оснащение
Для проведения данного теста необходим специальный коагулометр для измерений в цельной крови.
VI. Забор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки.
Варианты выполнения анализа ПВ в цельной крови:
1) Выполнение анализа на месте.
Кровь берется из пальца пациента. Капиллярная кровь должна быть представлена первой каплей, полученной при проколе 
кожи.
Вариант №1
Выступившую каплю крови забирают лабораторной пипеткой (с установленным объемом 25мкл) с одноразовым стерильным 
наконечником!!! В течение 30 секунд с момента забора, кровь (ровно 25мкл) вносят в измерительную кювету прибора с 
заранее внесенным в нее реактивом.
Вариант №2
После прокола кожи пальца кровь забирают стерильным стеклянным силиконизированным капилляром, переносят в 
пластиковую пробирку и затем отбирают ровно 25мкл лабораторной пипеткой. В течение 30 секунд с момента забора, кровь 
(ровно 25мкл) вносят в измерительную кювету прибора с заранее внесенным в нее реактивом.
2) Выполнение анализа на консервированной крови.
Вариант №1 Анализ капиллярной крови.
После прокола пальца пациента капиллярная кровь забирается в специальную минипробирку (пластик или  
силиконизированное стекло) о антикоагулянтом (3.2% цитрат натрия, в соотношении 9объемов крови + 1 объем  
антикоагулянта). Тестирование должно быть произведено в течение 4 часов после забора крови.
Вариант № 2 Анализ венозной крови.
Венозная кровь должна собираться в пробирку с 3.2% натрия цитрата (в соотношении 9объемов крови + 1объем  
антикоагулянта). Тестирование венозной крови должно производиться в течение 4 часов после забора.
VII. Пошаговое руководство
Изначально следует проанализировать цельную кровь 20 здоровых доноров (нужны только секунды). Затем 
рассчитать среднее арифметическое и ввести его в прибор как MNPT (значение для здорового человека). Также ввести 
значение МИЧ (международный индекс чувствительности, оно указано на специально вложенном в набор листе под словом 
ISI (International Sensitivity Index)). Это процесс калибровки прибора.
Вы можете рассчитать значение МИЧ самостоятельно, что заметно повысит точность измерений. Для этого Вам 
нужно приобрести «набор для точной установки МИЧ» (кат ном 5519, Caiibrant Plasma Set). Такую калибровку необходимо 
производить при смене серии (лота) реактива. Также Вы можете приобрести контроли с различными значениями МНО (кат 
ном 5490).
10


--- стр. 11 ---
( o l
li
Выполнение на приборе Coadata S01S.
1)
2)
3)
4)
5)
6 )
7)
8 )
9).
Прибор должен быть прогрет до температуры 37 С.
Прогрейте измерительные кюветы (с магнитами) в специальных позициях прибора.
Смешайте тромбопластин и кальция хлорид (1+1) и прогрейте в позиции для реагента.
После достижения прибором температуры 37°С, нажмите "ESC", появится экран "1PT-WB"
Нажмите "ENTER", на экране появится "Cuv in".
Вставьте заранее прогретую кювету (содержащую 150мкл реагента) в измерительный 
"START".
Инкубация, установите 1 сек.
Как только на экране появится "GO-S", добавьте 25мкл крови (15мкл плазмы) в измерительную кювету и 
одновременно нажмите "START".
Дождитесь, пока прибор покажет значение "MHO"(INR).
канал и нажмите
10). Запишите результат, уберите измерительную кювету и нажмите "RESET".
VIII. Интерпретация результатов
Коэффициент вариации для измерения в дубле не должен превышать 5%. 
мне рассчитывается следующим образом:
МНО=(время пациента (свк))/время
IX . Контроль качества
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть 
измерены нормальная и патологическая плазма, чтобы убедиться в нормальной работе прибора и реактивов. Если 
измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные материалы:
1) . кат ном 5186/5499 Norm Тго11
2) . кат ном 5187 АЬ-Тго1 2
3) . кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
X. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от техники и реактивов. В связи с 
этим, каждая лаборатория должна устанавливать свои собственные референсные значения для здоровых доноров. Это 
особенно важно для МИЧ, рекомендуется определить его набором, кат ном 5519.
При работе на приборе KoaData 501S значения в секундах для здоровых доноров чаще всего лежат в области 
19,5+29.0 секунд.
Область терапевтических значений.
Британское Общество по Гематологии рекомендует следующие диапазоны значений МНО для разных клинических условий: 
МНО Клиническое сост ояние
2.0+2.5 Профилактика тромбоза глубоких вен, включая оперативное вмешательство для пациентов с высоким
риском (2.0+3.0 для операций на тазобедренном суставе и операций на бедренной кости).
2.0+3.0 Лечение тромбоза глубоких вен. Легочная эмболия. Системная эмболия. Предупреждение венозной
тромбоэмболии при инфаркте миокарда. Митральный стеноз с эмболией. Периодические ишемические 
атаки. Фибрилляция предсердий.
3.0+4.5 Повторяющиеся тромбоз глубоких вен и легочная эмболия. Поражение артерии, включая инфаркт
миокарда. Механическое протезирование сердечных клапанов.
XI. Аналитические характеристики
Последующие характеристики были определены компанией Helena или ее представителями в качестве примера. 
Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Точность.
Точность определения ПВ сильно зависит от метода и техники определения. При анализе одной и разных аналитических
Одна аналит.серия 
(п=10)
Разные аналит.серии (п=10)
Секунды CV% Секунды CV%
1 проба 21.3 2,36 1 проба 23,7 6.48
2 проба 66.0 3.18 2 проба 67.9 3.07
Сравнение с наборами других фирм.
Сравнивали МНО набора компании Helena (капиллярный реагент) и трех разных коммерчески доступных наборов 
(производства разных компаний).
Венозная кровь.
СарШагу Reagent =  1,1632 (А) - 0.1828 г =  0.9559 п =  20  
CapUlary Reagent =  0.8317 (В) +0.1541 г =  0.9593 п =  20
Капиллярная кровь.
СарИНагу Reagent: 0.9985 (С) - 0.1608 г =  0.9053 п =  29
11


--- стр. 12 ---
Тест-система "Активированное частичное тромбопластиновое время (кремниевый активатор 
L минус)" (АРТТ Si L Minus).
Только для лабораторной диагностики.
I. Применение
Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) - это тест, который используется для диагностики 
дефицита факторов свертываемости, а именно, VIII, IX, XI и XII факторов. Начиная с его происхождения (работы Langdell и 
соавторов) и позже тест АЧТВ широко использовался на протяжении долгих лет как тест, проводимый перед хирургическим 
лечением для проведения оценки состояния определенных факторов внутреннего пути свертывания, а также для проведения 
контроля за терапией гепарином. Тест также используется для проведения количественного определения факторов 
свертывания VIII, IX, XI, XII.
Тест АЧТВ - клоттинговый, т.е. основан на определении времени образования сгустка. Вначале необходимо 
активировать исследуемую плазму реактивом АЧТВ, а затем добавить хлорид кальция, и измерить время свертывания в 
секундах. Дефицит факторов VIII, IX, XI и XII, приблизительно 40% и ниже, приведет к удлинению АЧТВ. Гепарин, начиная с
0. 1ед/мл, при нормальном уровне АТ III, также приведет к удлинению АЧТВ.
II. Реактивы
Кат ном 5558 (5x10мл A4TB-SIL М1пи5-реактив+5х10мл 25мМ кальция хлорид)
Кат ном 5559 (ЮхЮмл A4TB-SIL Мтиэ-реактив+ЮхЮмл 25мМ кальция хлорид)
1. Реактив APTT-SiL
Реактив APTT-SIL Minus содержит коллоидный раствор смеси алюминиевой и магниевой соли кремниевой кислоты с 
оптимальной чувствительностью к дефициту факторов и гепарину. Реактив также содержит фосфолипиды с буфером и 
стабилизаторами.
Пригот овление.  Перед использованием прогрейте реактив при комнатной температуре и хорошо перемешайте.
III. Хранение и стабильность
1. Реактив APTT-SiL Minus
Хранить при температуре 2+8°С. Не замораживать. Устойчив в течение 30 дней после вскрытия. Избегайте прямого 
нагревания.
IV. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
Все отходы, содержащие биологический материал, должны храниться отдельно и быть промаркированы. 
Утилизируйте эти отходы в соответствии с международным, государственным и местным законодательством.
Только на основании одного АЧТВ - теста нельзя поставить диагноз, требуются дополнительные тесты и  
медицинский осмотр.
V. Сбор и приготовление образцов
Антикоагулянт. Используйте цитрат натрия (3,2 %).
Взятие пробы;
1. Возьмите венозную кровь.
2. Немедленно хорошо смешайте в пробирке 9 частей крови с 1 частью антикоагулянта.
3. Центрифугировать пробу при скорости 1500*д в течение не менее 15 минут.
4. Удалите плазму из пробирки в течение 60 минут, используя пипетку, после этого храните её в пластиковой
пробирке. Q
5. Плазму необходимо проанализировать в течение 4 часов после забора, в противном случае, хранить при -20 С 
в течение двух недель или при -70“С до шести месяцев. Внимание! Размораживать можно только один раз.
VI. Необходимое, но не поставляемое оснащение
1. Анализатор.
Таймер.
Парафильм.
Точная пипетка на 100 или 50 мкл. 
Контроль.
2.
3.
4.
5.
6.
VII. Пошаговое руководство
Предост авляемые мат ериалы:
1. APTT-SII minus (жидкость)
2. Кальция хлорид 0.025М.
Определение:
Этот набор может использоваться для проведения АЧТВ анализа на полуавтомате, автомате и вручную. Для более 
подробной информации смотрите инструкции к анализаторам.
1. прогрейте реагенты до температуры 37°С.
2. прогрейте 0.1 мл плазмы в течение 2 минут при 37°С (для повышения точности делайте анализ в дубле).
3. Добавьте к плазме 0.1 мл APTT-SIL и включите секундомер.
4. Инкубируйте точно 5 минут.
5. Добавьте 0.1 мл Хлорида Кальция и включите секундомер.
6. Запишите время образования сгустка.
7. Результат выдавайте как время АЧТВ (секунды).
f
Вы полнение т ест а на приборе АС-4  (5558=1 ОООтестов; 5559=2000 тестов). 
Для получения дополнительной информации, обратитесь к инструкции на АС4.
12


--- стр. 13 ---
START=17s METHOD=Coag MIX=0 PATIENTCP®)
vol=SQ[rL
pos=35(CP)
Def. Plasma (DP) 
Vol=0jyL
INCUB=300s MATH=lln CLEAN=0 BUFFER (BUF^ 
Vol=0^iL
RIVol=S0)iL
Poe=3l
RUNTIME=l8Qs SENS= I T-CORR=0
S-OORR=0
CLEAR (CLR) 
Vol=0j.iL
R2Vol=S0jU'L
Pos=26
VIII. Интерпретация результатов
Все анализы (пациенты + контроли) следует выполняйть в дубле и рассчитывать среднее значение. Коэффициент 
вариации для двух измерений не должен превышать 5% (если превысил, то повторите измерение). При выдаче конечного 
результата сообщайте также диапазон нормальных значений.
Измерение контрольной плазмы должно подтверждать правильность работы прибора (отсутствие температурных 
сбоев, годность реактивов и прибора и.т.д.). Не рекомендуется выдавать вместе с результатами измерений информацию о 
результатах контрольных измерений.
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный и 
патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Референсные значения для контролей должны устанавливаться лабораторией.
X. Ожидаемые значения
Нормальный диапазон для данного набора приблизительно равен 30+40 секунд. Однако, каждая лаборатория 
должна сама устанавливать референсные значения, обусловленные их прибором, реагентами, способом забора и.т.д. Также 
нормальный диапазон может различаться между человеческими популяциями.
Нормальный диапазон должен устанавливаться заново:
при замене прибора, изменении способа забора крови, смене антикоагулянта и также при изменении серии (лота) реагента.
XI. Ограничения
При сборе образцов избегайте:
1. Использование стеклянных пробирок. Используйте только пластиковые.
2. Отсроченное смешивание крови с антикоагулянтом.
3. Гемолиз образцов (или липиемичные образцы).
4. Загрязнение образцов тканевым тромбопластином.
5. Неправильное соотношение антикоагулянта с кровью.
Требования к исполнению лабораторных методик.
6. Выполняйте тесты при температыре 37°С.
7. Используйте дистиллированную воду хорошего качества.
8. Оптимальное pH 7.0+7.5
XII. Аналитические характеристики
Компания Helena приводит аналитические характеристики только в качестве примера. Вы должны сами установить 
свои локальные аналитические характеристики.
Точность.
Внутри одной аналитической серии (АЧТВ в секундах): Испытания проводились на приборе SYSMEX СА 1500 при
Контроль Среднее значение Коэф. вариации Число повторов
Норма (Norm-Trol 1) 33 0.36% 10
Патология (Ab-Trol 3) 77.9 0.31% 10
Между аналитическими сериями (АЧТВ в секундах) Испытания проводились при тех-же условиях, в трех аналитических
Контроль Среднее значение Коэф. вариации Число повторов
Норма (Norm-Trol 1) 32.9 2.41% 100
Патология (Ab-Trol 3) 78,3 0.77% 100
Чувствительность к факторам.
Исследования были выполнены, чтобы оценить чувствительность реактива АЧТВ к различным дефицитам фактора. 
Были получены следующие результаты:
% Factor Factor VIII (Seconds) Factor IX (Seconds) Factor XI (Seconds)
<1 8S.7 70.9 92.4
to 4S.9 44.4 S0.7
40 34.2 33.9 34.4
IC O 28.8 28.3 28.8
Верхний предел нормальных значений для этого исследования составил 34,9 секунды.
13


--- стр. 14 ---
Чувствительность к гепарину.
Вариации значений, при определении АЧТВ в образцах, может быть в следствии проведения гепариновой терапии. 
Было проведено исследование по изучению влияния гепарина на значения АЧТВ. К нормальной плазме были добавлены 
различные количества гепарина и, используя данный реагент и оптический анализатор, были получены следующие
Heparin lU/ml Clot Hme (seconds.)
0 29.9
0.2 70.0
0.4 174
Тест-система "Активированное частичное тромбопластиновое время (кремниевый активатор 
L плюс)" (АРТТ Si L Plus).
Только для лабораторной диагностики.
I. Применение
Активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) - это тест, который используется для диагностики 
дефицита факторов свертываемости, а именно, VIII, IX, XI и XII факторов. Начиная с его происхождения (работы Langdell и 
соавторов) и позже тест АЧТВ широко использовался на протяжении долгих лет как тест, проводимый перед хирургическим 
лечением для проведения оценки состояния определенных факторов внутреннего пути свертывания, а также для проведения 
контроля за терапией гепарином. Тест также используется для проведения количественного определения факторов 
свертывания VIII, IX, XI, XII.
Тест АЧТВ - клоттинговый, т.е. основан на определении времени образования сгустка. Вначале необходимо 
активировать исследуемую плазму реактивом АЧТВ, а затем добавить хлорид кальция, и измерить время свертывания в 
секундах. Дефицит факторов VIII, IX, XI и XII, приблизительно 40% и ниже, приведет к удлинению АЧТВ. Гепарин, начиная с
0.1ед/мл, при нормальном уровне АТ III, также приведет к удлинению АЧТВ.
II. Реактивы
Кат ном 5560 (5x10мл АЧТВ-SiL Р1из-реактив+5х10мл 25мМ кальция хлорид) 
Кат ном 5561 (ЮхЮмл АЧТВ-SIL Р1и8-реактив+10х10мл 25мМ кальция хлорид)
2. Реактив APTT-SiL Plus
Реактив APTT-SiL Plus содержит коллоидный раствор смеси алюминиевой и магниевой соли кремниевой кислоты с 
оптимальной чувствительностью к дефициту факторов и гепарину. Реактив также содержит фосфолипиды с буфером и 
стабилизаторами.
Приготовление.  Растворить каждый флакон в 10мл дистиллированной воды, аккуратно покачивая. Дать постоять в течение 
10 минут до плного растворенияи хорошо перемешать перед использованием.
III. Хранение и стабильность
2. Реактив APTT-SiL
Хранить при температуре 2+8°С. Не замораживать. Устойчив в течение 30 дней после вскрытия. Избегайте прямого 
нагревания.
IV. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
Все отходы, содержащие биологический материал, должны храниться отдельно и быть промаркированы. 
Утилизируйте эти отходы в соответствии с международным, государственным и местным законодательством.
Только на основании одного АЧТВ - теста нельзя поставить диагноз, требуются дополнительные тесты и  
медицинский осмотр.
V. Сбор и приготовление образцов
Антикоагулянт. Используйте цитрат натрия (3,2 %).
Взятие пробы:
1. Возьмите венозную кровь.
2. Немедленно хорошо смешайте в пробирке 9 частей крови с 1 частью антикоагулянта.
3. Центрифугировать пробу при скорости 1500*д в течение не менее 15 минут.
4. Удалите плазму из пробирки в течение 60 минут, используя пипетку, после этого храните её в пластиковой
пробирке. ^
5. Плазму необходимо проанализировать в течение 4 часов после забора, в противном случае, хранить при -20 С 
в течение двух недель или при -70 С до шести месяцев. Внимание! Размораживать можно только один раз.
VI. Необходимое, но не поставляемое оснащение
1. Анализатор.
Таймер.
Парафильм.
Точная пипетка на 100 или 50 мкл. 
Контроль.
2.
3.
4.
5.
6.
VII. Пошаговое руководство
Предост авляемые мат ериалы:
1. APTT-SII Plus (лиофилизованный)
2. Кальция хлорид 0,025М.
т
k
Р
14


--- стр. 15 ---
Определение:
Этот набор может использоваться для проведения АЧТВ анализа на полуавтомате, автомате и вручную. Для более 
подробной информации смотрите инструкции к анализаторам.
1. прогрейте реагенты до температуры 37°С.
2. прогрейте 0.1 мл плазмы в течение 2 минут при 37°С (для повышения точности делайте анализ в дубле).
3. Добавьте к плазме 0.1 мл APTT-SiL и включите секундомер,
4. Инкубируйте точно 5 минут.
5. Добавьте 0.1 мл Хлорида Кальция и включите секундомер,
6. Запишите время образования сгустка.
7. Результат выдавайте как время АЧТВ (секунды).
Вы полнение т еста на приборе АС-4  (5560=1 ОООтестов; 5561=2000 тестов).
Для получения дополнительной информации, обратитесь к инструкции на АС4.
START=17s METHOD =Coag M1X=0 PATIENT(R3t)
vol=5Qt/L
pos=3S(CP)
Def. Plasma (DP) 
Vol=0/J.
INCUB =3Q0s MATH=lln CLEAN =0 BUFFER (BUF) 
Vol=0M-
RIVol=S0^/L
Pos=3l
RUNTIME=l8flS SENS= 1 T-CORR=0
S-CORR=0
CLEAR (CLR) 
Vol=0^iL
R2Vol=50#/L
Pos=26
VIII. Интерпретация результатов
Все анализы (пациенты + контроли) следует выполняйть в дубле и рассчитывать среднее значение. Коэффициент 
вариации для двух измерений не должен превышать 5% (если превысил, то повторите измерение). При выдаче конечного 
результата сообщайте также диапазон нормальных значений.
Измерение контрольной плазмы должно подтверждать правильность работы прибора (отсутствие температурных 
сбоев, годность реактивов и прибора и.т.д.). Не рекомендуется выдавать вместе с результатами измерений информацию о 
результатах контрольных измерений.
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Референсные значения для контролей должны устанавливаться лабораторией.
X. Ожидаемые значения
Нормальный диапазон для данного набора приблизительно равен 35+45 секунд. Однако, каждая лаборатория 
должна сама устанавливать референсные значения, обусловленные их прибором, реагентами, способом забора и.т.д. Также 
нормальный диапазон может различаться между человеческими популяциями.
Нормальный диапазон должен устанавливаться заново:
при замене прибора, изменении способа забора крови, смене антикоагулянта и также при изменении серии (лота) реагента.
XI. Ограничения
При сборе образцов избегайте:
1. Использование стеклянных пробирок. Используйте только пластиковые.
2. Отсроченное смешивание крови с антикоагулянтом.
3. Гемолиз образцов (или липиемичные образцы).
4. Загрязнение образцов тканевым тромбопластином.
5. Неправильное соотношение антикоагулянта с кровью.
Требования к исполнению лабораторных методик.
1. Выполняйте тесты при температыре 37°С.
2. Используйте дистиллированную воду хорошего качества,
3. Оптимальное pH 7.0+7.5
XII. Аналитические характеристики
Компания Helena приводит аналитические характеристики только в качестве примера. Вы должны сами установить 
свои локальные аналитические характеристики.
Точность.
Внутри одной аналитической серии (АЧТВ в секундах): Испытания проводились на приборе SYSMEX СА 1500 при
Контроль Среднее значение Коэф. вариации Число повторов
HopMa(Norm-Trol 1) 41.8 0.41% 10
Патология (Ab-Trol 3) 70.0 0.87% 10
Мехдзу аналитическими сериями (АЧТВ в секундах) Испытания проводились при тех-же условиях, в трех аналитических
Контроль Среднее значение Коэф. вариации Число повторов
Норма(Могт-Тго11) 41.81 1.16% 100
Патология (АЬ-Тго1 3) 67.5 4.72% 100
15


--- стр. 16 ---
Тест-система "Активированное частичное тромбопластиновое время ES (элаговый  
активатор)" (АРТТ ES).
I. Применение
Этот набор предназначен для выполнения АЧТВ-теста и обладает высокой чувствительностью к волчаночным 
антикоагулянтам. Активаторами свертывания здесь представлены: высушенный экстракт мозга кролика и эллаговая кислота. 
Измерения этим набором могут производиться вручную, на полуавтоматическом и автоматическом анализаторе. АЧТВ 
отражает нарушения внутреннего пути свертывания (факторы VIII, IX, XI, XII, прекалликреин и высокомолекулярный 
кининоген). Также АЧТВ тест используется для количественного определения этих факторов и для контроля  
гепаринотерапии.
Волчаночные антитела (ВА) и неспицифические антитела (Волчаночно-подобные антитела) вызывают увеличение 
времени АЧТВ. Однако, при низкой концентрации ВА
выраженного изменения АЧТВ может не произойти. Чаще всего в качестве реактива используют один из трех активаторов: 
каолин, кремний, эллаговая кислота. Эллаговая кислота превосходит остальные активаторы за счет большей растворимости. 
Время инкубации при этом активаторе уменьшается с 5 минут до 3.
АЧТВ - тест является клотинговым (измеряется время образования фибринового сгустка). В этом тесте цитратная 
плазма инкубируется 3 минуты при 37°С  вместе с АЧТВ-реактивом, а затем добавляется предварительно прогретый до 37°С 
кальция хлорид. С этого момента начинается отсчет времени реакции. Время (в секундах) с момента добавления кальция 
хлорида и до образования сгустка является результатом (в секундах) АЧТВ теста. Момент образования сгустка  
детектируется различными способами.
II. Меры предосторожности
Реактивы из этого набора предназначены только для in vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с любым компонентом набора. Обращайте внимание на предупреждающие значки 
на флаконах и на упаковке.
III. Реактивы
1. A4TB-ES реактив.
Содержит 0.1 ппМ  эллаговой кислоты с суспензией фосфолипидов, полученных из высушенного мозга кролика. Также в 
состав входят буфер, стабилизаторы, консерванты (включая 0.2% фенол).
Приготовление.  Реагент уже готов к использованию. Осторожно переверните флакон несколько раз, чтобы получить 
однородную суспензию.
2. Кальция хлорид реактив 0.025 М.
Приготовление.  Реагент уже готов к использованию.
3. Другие компоненты набора.
В каждый набор вложена инструкция по использованию.
IV. Хранение и стабильность
1. A4TB-ES реактив
Реактив должен храниться при 2+6°С. Избегайте загрязнения реагента.
Не замораживать!
В норме реактив представляет собой бледно зеленый гомогенный раствор. Допускается наличие зеленоватого осадка, 
который должен мгновенно исчезать при помешивании. В случае изменений другого рода (сопровождаемых  
«непрохождением» контролей), скорее всего, произошло загрязнение.
2. Кальция хлорид 0.025 М
При хранении при 2+6°С реактив имеет срок годности, указанный на этикетке. Помутнение раствора говорит о его 
загрязнении.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
1. Высококачественный коагулометр и центрифуга.
Также для определения факторов внутреннего пути свертывания:
2. кат ном 5185 SARP. 
кат ном 5375/5488 Вероналовый буфер, 
кат ном 5193/5793 плазма, дефицитная по фVIII. 
кат ном 5194/5794 плазма, дефицитная по ф1Х. 
кат ном 5196/5796 плазма, дефицитная по фХ1. 
кат ном 5197/5797 плазма, дефицитная по фХИ.
3.
4.
5.
6. 
7.
VI. Сбор и приготовление образцов „ иКровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9:1. Натрия цитрат 
может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте при 2000-3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при 
температуре 2+6°С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20 С в 
течение 2 недель или месяц при -70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут, иначе могут
инактивироваться Волчаночные антитела. - . ____
Ложные результаты могут быть получены из-за загрязнения пробы тканевыми жидкостями. Старайтесь не трясти 
пробу, избегайте пузырьков и пены. Учитывайте влияние лекарственных препаратов. При разрушении тромбоцитов 
выделяются вещества, которые могут ингибировать Волчаночные антитела.
VII. Пошаговое руководство
Все пипетки, пробирки, шприцы должны быть пластиковыми. 
Вы полнение на полуавт омат ическом коагулометере.
1.
2.
3.
4.
5.
6. 
7.
Соберите кровь для анализа в соответствии с этой инструкцией.
Приготовьте контрольные плазмы в соответствии с вложенными инструкциями. 
Помешайте и прогрейте АЧТВ-реактив и кальция хлорид до 37°С.
Поместите ЮОмкл плазмы пациента (контроля) в реакционную пробирку.
Осторожно переверните флакон с АЧТВ-реагентом, чтобы растворить возможный осадок. 
Добавьте в реакционную пробирку ЮОмкл АЧТВ-реагента (там уже есть плазма). 
Инкубируйте смесь при 37°С ровно 3 минуты.
(N
16


--- стр. 17 ---
8. Добавьте Ю Омкл прогретого кальция хлорида и засекайте время.
9. Если Вы делаете тест вручную, то аккуратно трясите кювету (вперед-назад) в водяной бане. Остановите таймер при 
образовании сгустка.
10. Делайте все тесты в дубле. Если коэффициент вариации превышает установленную Вами норму (обычно менее 
5%)- то переделайте тест.
Вы полнение на авт омат ическом коагулометере.
При выполнении теста обратитесь к описанию прибора для получения детальных инструкций.
VIII. Интерпретация результатов
Тест должен проводиться с точностью до 1/10 секунды. Рекомендуется установить референсные значения для 
Вашей лаборатории (среднее арифметическое ± 2 среднеквадратичных отклонения). Результаты могут быть завышенными, 
но не заниженными. В случае заниженных результатов, нужно произвести измерения заново.
Заниженные результаты связанны с тромбозом In vivo (тромбоз вен, ДВС-синдром).
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории необходимо устанавить программу контроля качества. Перед проведением тестов должны 
быть измерены нормальная и патологическая плазма, чтобы убедиться, что реактивы не испортились и прибор исправен. 
Если измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для этого теста:
1. катном5186/5499 Norm-Trol 1
2. катном5187Ab-Trol 2
3. катном5183Ab-Trol 3
4. катном5189Hep-Trol
5. катном5301SAC-1
6. катном5302SAC-2
X. Референсные значения
Компания Хелена произвела измерения этим набором 28 замороженных плазм от здоровых взрослых доноров. 
Сбор крови проводился в вакутейнеры (3.8%натрия цитрата), измерения проводились на приборе Cascade 480,
Результат составил: 21.9+31.7 секунд (±2 SD). Среднее арифметическое = 26.8 секунд.
Эти значения приведены как пример. Они могут различаться между лабораториями из-за разницы в приборах и методиках. 
Рекомендуется самостоятельно установить референсные значения.
XI. Мониторинг гепаринотерапии
При контроле гепаринотерапии важно учитывать разную восприимчивость людей к гепарину. Терапевтическая доза 
гепарина лежит в области 0.2+05 единиц/мл.
Следует помнить:
1. Время сбора крови очень важно, так как период полураспада (период полуэлиминации) гепарина в человеке равен 
1.5 часа.
2. При агрегации тромбоцитов, а также при их разрушении, выделяется lV-тромбоцитарный фактор, который 
нейтрализует гепарин. Чтобы этого избежать, следует правильно забирать кровь и готовить пробу.
3. Следует провести АЧТВ-тест пациенту до начала терапии, причем в той лаборатории, в которой и будет  
осуществлятся мониторинг.
4. Разные приборы (с разными методами детекции сгустка: механический, оптический) имеют разную  
чувствительность к гепарину. Поэтому, мониторинг нужно проводить на одном приборе,
5. Калибровка гепарина должна проводиться при изменении номера серии реагента, а также через определенные 
интервалы при одной и той же серии. Также нужно использовать один и тот же гепарин (он может быть из 
слизистых оболочек свиньи или из бычьих легких).
4
%
XII. Ограничения
Если пациенту сделают АЧТВ-тест в разных лабораториях, то результаты могут отличаться. Метод детекции, 
температура, pH, способ забора крови, тип антикоагулянта, время хранение проб,- все это очень важные моменты при 
проведении теста. Методика сбора крови и ее хранения должны быть стандартизированы и должны контролироваться. 
Неожиданные результаты должны быть проверены другими методиками. Разрушение тромбоцитов приводит к выделению 
фосфолипидов, которые могут нейтрализовать ВА. Использование малых объемов проб не рекомендуется, так как они хуже 
держат pH. На этот тест влияют различные лекарства. Увеличение АЧТВ наблюдается при приеме дифенина  
(дифенилгидантоин), гепарина, варфарина и препаратов, применяемых для рентгена. Уменьшение АЧТВ наблюдается при 
приеме пероральных контрацептивов (особенно эстрогенов). Таким образом, лабораториям рекомендуется самостоятельно 
устанавливать референсные значения для пациентов и для контролей.
XIII. Аналитические характеристики
Компания Хелена приводит данные характеристики только для примера. Вы должны сами их определить.
Точность.
Внутри одной аналитической серии. Использовались трехуровневые контрольные материалы, использовался прибор 
Cascade 480.
Среднеквад.откл.
0.24 
0.64 
1.01
определения тот же.
Контроль 
Norm Trol 1 
Ab-Trol 2 
Ab-Trol 3
Время, сек. 
29.7
52.4
77.4
Способ
Коэф. вариации. 
0.8%
1.2%
1.3%
использовались
Кол-во проб, шт 
20
20
20
двухуровневыеконтроли, каждое
Среднеквад.откл.
0.44
1.91
Коэфф.вариации 
1.5%
3.6%
Кол-во проб, шт 
60 
60
Между аналитическими сериями.
измерение повторяли три раза.
Контроль Время, сек.
Norm Troll 30.1
Ab Trol2 52.5
Сравнение с АЧТВ-набором от другого производителя.
Компания Helena произвела сравнение АЧТВ-набора Helena с АЧТВ-набором другой фирмы. При этом  
использовались пробы от здоровых доноров и от доноров с различными заболеваниями (волчаночные антитела, недостаток 
факторов, их комбинация и гепаринотерапия). Всего было протестировано 103 пробы (измерения проводились в дубле). 
Получены следующие характеристики:
17


--- стр. 18 ---
Y=1.085-4.77 Y=APTT-ES.
Corr. Coeff.(r)=0.975 Х=набор от другой фирмы, принятый за референс.
Линейность при калибровке наборов для определения недостаточности факторов. 
Калибровали по 4 точкам на приборе Cascade 480.
Коэффициент линейности (г^) при калибровке факторов VIII, IX, XI, XII был равен 0.99 и выше.
Тест-система "Активированное частичное тромбопласти новое время SA (элаговый  
активатор)" (АРТТ SA).
I. Применение
Этот набор предназначен для измерения активированного частичного тромбопластинового времени и других тестов 
(основанных на АЧТВ). В состав реактива входит экстракт из мозга кролика и эллаговая кислота (как растворимый 
активатор). Этот тест можно проводить вручную, на полуавтоматическом и на автоматическом анализаторе.
Тест АЧТВ используют для определения нарушений во внутреннем пути свертывания, который включает в себя 
факторы VIII, IX, XI, XII, прекалликреин, высокомолекулярный кининоген. Этот тест также используется для количественной 
оценки отдельных факторов и для мониторинга гепариновой терапии. Реактив для АЧТВ-теста был описан Рапапортом и 
Проктором в 1961 году. Они улучшили старый тест (частичное тромбопластиновое время) благодаря добавлению активатора 
контактной фазы (каолин), после чего выросла чувствительность и воспроизводимость. АЧТВ-тест сейчас повсеместно 
используется для предоперационного скрининга и мониторинга гепариновой терапии. При изготовлении АЧТВ реактивов 
обычно используют один из трех активаторов: каолин, кремний, эллаговая кислота. Эллаговая кислота заслужила 
наибольшую популярность, благодаря хорошей растворимости,- это позволяет сохранять суспензию реактива в гомогенном 
состоянии (при работе на автоматическом анализаторе). Реагенты с эллаговой кислотой обычно требуют время инкубации 
примерно 3 минуты.
В конце этого теста происходит превращение фибриногена в фибрин под действием тромбина. Вы вносите в 
реакционную кювету цитратную плазму и АЧТВ реагент и инкубируете при температуре 37°С в течение 3 минут. Затем 
запускаете реакцию добавлением кальция хлорида (предварительно прогретого при 37°С). Время от добавления кальция 
хлорида до образования сгустка (в секундах) является результатом теста.
Этот тест можно проводить вручную, на механических и оптических анализаторах.
II. Меры предосторожности
Реагенты из этого набора предназначены только для in vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с любым компонентом набора. Обращайте внимание на предупреждающие значки 
на флаконах и на упаковке.
III. Реактивы
1. A4TB-SA реактив.
Реактив содержит O.ImM эллаговой кислоты с суспензией фосфолипидов, экстрагированных из мозга кролика. Также 
добавлены буфер и стабилизаторы (включая 0.2% фенол). В норме реактив является гомогенным бледно-зеленоватым 
раствором. Могут образовываться зеленоватые частицы, которые должны исчезать при легком помешивании. Если раствор 
поменял вид или цвет, а также значения контролей выходят за пределы,- то, скорее всего, произошло загрязнение реактива. 
Пригот овление.  Реактив уже готов к использованию. Осторожно переверните флакон несколько раз, чтобы получить 
однородную суспензию.
2. Кальция хлорид 25тМ.
Раствор кальция хлорида. Мутность может говорить о его загрязнении.
Приготовление.  Реактив уже готов к использованию.
3. Другие компоненты набора.
В набор входит инструкция.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанный флакон стабилен до окончания срока годности при условии правильного хранения.
1. A4TB-SA реактив
Храните при 2+6°С. Избегайте попадания инородных частиц. Не замораживать!
2. Кальция хлорид  
Храните при 2+6°С.
VII. Пошаговое руководство
Все пипетки, пробирки, шприцы должны быть пластиковыми.
Вы полнение на полуавт омат ическом коагулометере.
1. Соберите кровь для анализа в соответствии с этой инструкцией.
2. Приготовьте контрольные плазмы в соответствии с вложенными инструкциями.
3. Прогрейте кальция хлорид до 37°С (приблизительно 5 минут)
4. Поместите Ю Омкл плазмы пациента (контроля) в реакционную пробирку
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
1. Высококачественный коагулометр.
2. Кальция хлорид 25тМ (только для кат ном 5387).
3.
VI. Сбор и приготовление образцов
Кровь собирается в пластиковые пробирки. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9.1. Натрия 
цитрат может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте при 2000+3000д в течение 15минут. Плазма должна хранится^при 
температуре 2+6'С. Тесты должны проводится в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20°С в 
течение 2 недель, или месяц при -70°С. Быстро разморозить при 37°С перед использованием. Не хранить при 37°С более 
чем 5 минут.
18


--- стр. 19 ---
\
f
4
5. Осторожно переверните флакон с АЧТВ-реактивом, чтобы растворить возможный осадок
6. Добавьте в реакционную пробирку Ю Омкл АЧТВ-реагента (там уже есть плазма)
7. Инкубируйте смесь при 37°С ровно 3 минуты
8. Добавьте Ю Омкл прогретого кальция хлорида и засекайте время
9. Если Вы делаете тест вручную, то аккуратно трясите кювету (вперед-назад) в водяной бане. Остановите таймер при 
образовании сгустка.
10. Делайте все тесты в дубле. Если коэффициент вариации превышает установленную Вами норму (обычно менее 
5%), то тест следует переделать.
Вы полнение на ает омат ическом коагулометере.
При выполнении теста, обратитесь к описанию прибора для получения детальных инструкций.
VIII. Мониторинг гепаринотерапии
При контроле гепаринотерапии важно учитывать разную восприимчивость людей к гепарину. Терапевтическая доза 
гепарина лежит в области 0.2+05 единиц/мл.
Следует помнить:
1. Время сбора крови очень важно, так как период полураспада (период полуэлиминации) гепарина в человеке равен 
1.5 часа.
2. При агрегации тромбоцитов, а также при их разрушении, выделяется IV-тромбоцитарный фактор, который 
нейтрализует гепарин. Чтобы этого избежать, следует правильно забирать кровь и готовить пробу.
3. Следует провести АЧТВ-тест пациенту до начала терапии, причем в той лаборатории, в которой и будет  
осуществлятся мониторинг.
4. Разные приборы (с разными методами детекции сгустка: механический, оптический) имеют разную  
чувствительность к гепарину. Поэтому, мониторинг нужно проводить на одном приборе.
5. Калибровка гепарина должна проводиться при изменении номера серии реагента, а также через определенные 
интервалы при одной и той же серии. Также нужно использовать один и тот же гепарин (он может быть из 
слизистых оболочек свиньи или из бычьих легких).
IX. Интерпретация результатов
Тест должен проводится с точностью до 1/10 секунды. Коэффициент вариации не должен быть более 5%.  
Результаты чаще бывают завышенными, а не заниженными. В случае завышенных результатов, необходимо обследование 
больного. В случае заниженных результатов нужно произвести измерения заново.
Заниженные результаты связанны с тромбозом In vivo (тромбоз вен, ДВС-синдром).
X. Контроль качества
Каждой лаборатории необходимо установить программу контроля качества. Перед проведением тестов должны 
быть измерены нормальная и патологичная плазма, чтобы убедиться, что реактивы не испортились и прибор исправен. Если 
измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для этого теста.
1. кат ном 5186/5499 Norm-Trol 1.
2. кат ном 5187 АЬ-Тго1 2.
3. кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
4. кат ном 5189 Нер-Тго1.
5. кат ном 5301 SAC-1.
6. кат ном 5302 SAC-2.
XI. Ограничения
Если пациенту сделают АЧТВ-тест в разных лабораториях, то результаты могут отличаться. Метод детекции, 
температура, pH, способ забора крови, тип антикоагулянта, время хранение проб,- все это очень важные моменты при 
проведении теста. Методика сбора крови и ее хранения должны быть стандартизированы и должны контролироваться. 
Неожиданные результаты должны быть проверены другими методиками. Таким образом, лабораториям рекомендуется 
самостоятельно устанавливать референсные значения для пациентов и для контролей.
XII. Референсные значения
Компания Helena произвела измерения этим набором 27 замороженных плазм от здоровых взрослых доноров. Сбор 
крови проводился в вакутейнеры (3.8%натрия цитрата), измерения проводились на приборе Cascade 480.
Результат составил: 20.7+32.7 секунд (±2 SD). Среднее арифметическое = 26.7 секунд.
Эти значения приведены как пример. Они могут различаться между лабораториями из-за различия в используемых приборах 
и методиках. Рекомендуется самостоятельно установить референсные значения.
XIII. Аналитические характеристики.
Компания Helena приводит данные характеристики только для примера. Вы должны сами их определить.
Точность.
Внутри одной аналитической серии. Использовались трехуровневые контрольные материалы, использовался прибор
Каждое измерение повторяли два раза.
Время, сек. Среднеквад.откл. Коэф. вариации, % Кол-во проб, шт
29.43 0.29 0.99 20
51.64 0.60 1.16 20
68.21 1.31 1.92 20
Контроль 
Norm Тго11 
АЬ-Тго1 2 
АЬ-Тго1 3
Между разными аналитическими сериями. Способ определения тот же, использовались трехуровневые контроли, каждое 
измерение повторяли два раза.
Контроль 
Norm troll 
Ab Trol2 
Ab trol3
Коэфф. Вариации, %
2.7
2.8 
4,9
Кол-во тестов, шт 
60 
60 
60
19


--- стр. 20 ---
Сравнение с АЧТВ-набором другого производителя. ^
Было проведено сравнение АЧТВ-набора производства компании Helena с АЧТВ-набором от другой фирмы.
Анализировались пациенты с нормальной активностью свертывающей системы.^ Значение АЧТВ, сек
Прибор Реагент Кол-во тестов ±2SD
Каскад 480 A4TB-SA 29
Каскад 480 АЧТВ-другой 29 28.0±4|
Также для сравнения использовались пробы от доноров с различными заболеваниями  
гепаринотерапия, их комбинация). Всего было протестировано 68 проб, измеренных в дубле.
Были получены следующие характеристики:
Наклон=0.992 
Точка пересечения=1.92 
Коэффициент корреляции (г) =0,978
CV, %
8 .7
8 .7
(недостаток факторов.
Линейность при калибровке тестов на факторы.
Фд1Ггор 8 Г = 0 ,9 9 13
Фдктоо 11 г=0,9959
(bairrnn 9 г= 0 ,9 9 8 7
Фактор 12 г= 0,9958
Тест-система "Кальция хлорид для коагуологии" (Calciuoi Chloride).
Кальция хлорида 0 025М раствор используется для запуска реакции свертывания при проведении таких коагулолгических 
тестов как протромбиновое время (ПВ), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), активированное время 
рекальцификации (каолиновое время), время рекальцификации плазмы, кефалиновое время, при коагулологическом 
тестировании активности всех факторов свертывания, анализе ингибиторов свертывания и т.п.
Добавление к ^исследуемой плазме избытка ионов кальция нейтрализует ионы цитрата, стабилизирующие плазму, и 
запускает механизм свертывания под действие того или иного активатора свертывания.
Состав набора.
Кальция хлорида 0,025М раствор, 5 или 10мл во флаконе ■6 флаконов.
Приготовление реагента. _ _
Кальция хлорида 0,025М раствор является готовым реагентом для проведения анализа. Перед анализом прогреть при 37 С.
Повторное прогревание вскрытого флакона не рекомендуется.
Стабильность.
+2-8°С +18-220С +37°С
До окончания срока хранения в закрытом виде 8 часов
Получение исследуемой плдзмы ДЛЯ энализэ. /л 4\
Венозную кровь взять в силиконированную стеклянную или пластиковую пробирку на 3,8% (0.11моль/л) цитрате натрия (9.1). 
Центрифугировать 15 мин при 3000 об/мин (1200д). Центрифугирование следует проводить как можно скорее после взятия 
крови. Немедленно после центрифугирования перенести плазму в пластиковую пробирку^^я анализов дос^^^^^^ 1 0 мл
бедной тромбоцитами плазмы. Время хранения при комнатной температуре не более 4 часов, при 2 - 8 С не более 8 часов. 
Допускается однократное замораживание плазмы при - 20С.
Проведение анализа.
Необходимо руководствоваться инструкцией для проведения соответствующего теста.
Кальция хлорида 0,025М раствор предназначен только для диагностики ш vitro. При работе с ‘^ '^ ‘^®луемыми образца 
следует надрать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы плазмы человек следует
рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать в ру  
иммунодефицита ВИЧ1 и ВИЧ2, гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
20


--- стр. 21 ---
• »
Тест-система "Определение фибриногена методом Клаусса 100" (Clause Fibrinogen
100).
I. Применение
Этот набор предназначен для количественного определения фибриногена (ФГ) в плазме крови человека.
Метод Клаусса - простой метод количественного определения фибриногена, основанный на измерении времени 
образования сгустка. Метод проводится в разведенной плазме после добавления тромбинового реактива (> 30 единиц/мл 
NIH).
Время образования сгустка пропорционально концентрации фибриногена. Уровень фибриногена может  
увеличиваться при воспалении, беременности или при приеме оральных контрацептивов. Низкие значения могут  
наблюдаться при заболеваниях печени и ДВС. Для диагностики врожденных дефицитных состояний, включая  
афибриногенемию (полное отсутствие фибриногена), гипофибриногенемию (концентрация фибриногена менее 1 мг/мл) и 
исфибриногенемию (структурные нарушения в молекуле фибриногена).
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь. 
При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одежду. В 
реактивах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
III. Реактивы
1. Тромбиновый реактив.
Каждый пузырек содержит приблизительно 200 единиц/мл NIH бычьего тромбина со стабилизаторами.
Приготовление.  Растворите каждый пузырек в 2,0 мл дистиллированной воды. Аккуратно перемешайте. Убедитесь в 
полной растворимости реагента. Тромбиновый реагент можно использовать через 15 минут после приготовления. Не трясти.
2. Фибриногеновый калибратор.
Содержит 1мл лиофилизованной человеческой плазмы с точно известным значением фибриногена.
Приготовление.  Добавьте ровно 1 мл дистиллированной воды. Осторожно перемешайте и оставьте на 10 минут. Еще раз 
перемешайте перед использованием. Не трясти.
3. Буфер
Каждый флакон (объем 25 мл) содержит водный раствор натрия хлорида и натрия азида.
Приготовление.  Буфер готов к использованию.
4. Другие компоненты набора.
Также в набор вложена инструкция и листок со значением калибратора.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы стабильны до окончания срока годности при условии правильного хранения (указано на упаковке).
1. Тромбин реагент
После приготовления, реактив устойчив в течение 8 часов при комнатной температуре или 1 неделю при 2+6°С.
2. Фибриногеновый калибратор
После разведения стабилен 4 часа при температуре 2+6°С.
3. Вероналовый буфер  
Хранить при 2+6°С.
V. Забор и приготовление образцов
Используйте пластиковые или силиконизированные пробирки. Кровь (9 частей) должна быть собрана с  
антикоагулянтом (1 часть) цитратом натрия 3,8 %  или 3,2 %. Отделите плазму после центрифугирования при 2000+3000 д, в 
течение 15 минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Анализ необходимо проводить в течение 2 часов после 
отбора проб, либо плазма может быть заморожена при -20°С и храниться в течение 2 недель или при -70“С в течение одного 
месяца. Перед проведением анализа необходимо разморозить плазму при 37°С. Не держите плазму при 37°С больше 5 
минут.
VI. Пошаговое руководство
Реактивы подходят для использования на любом коагулометре, пригодном для выполнения анализа фибриногена 
по методу Клаусса.
За детальной инструкцией обратитесь к Руководству Оператора и/или используйте инструкцию производителя реагентов. 
Подготовьте все реактивы.
Калибровка.
Новая калибровка должна использоваться при изменении номера партии реагентов или если ожидаемые значения 
контроля выходят за пределы референсных значений.
Разведите калибратор буфером как указано в таблице.
Tube D ili^o n Fibrinogen (m l) Buf
1 1+4 0.2 0,8
2 1+9 0.1 0.9
3 1  +  19 0.1 1.9
4 1+29 0.1 2,9
5 1+39 0.1 3.9
Аккуратно перемешайте.
Приготовление образцов.
Смешайте 1 часть плазмы пациента или контроля с 9 частями вероналового буфера.
21


--- стр. 22 ---
Анализ.
Выполняйте все тесты в дубле.
1,
2.
3.
4.
5.
я I в Bte IВ1/1В1 в rtyuj 1C. е -
Отберите пипеткой 0,2мл стандарта, пробы пациента или контроля в реакционную пробирку и инкубируите в 
течение 2 минут при 37°С.
Добавьте 0,1мл тромбинового реактива (15+30°С).
Определите время свертывания с точностью 0,1 секунды.
На миллиметровой бумаге (вложенной в набор реагентов) отложите по оси Y значения времени свертывания 
стандарта, а по оси X концентрацию фибриногена.
Должна быть получена прямая линия. Определите значения калибратора фибриногена в разведении 1+9, 
интерполируйте полученное значение с целью контроля стандартной кривой.
VII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества.
Нормальный и патологичный контроль должен проводиться с каждой партией образцов пациентов, чтобы гарантировать
работу анализатора и оператора. Компания Helena предлагает следующие контроли.
кат ном 5301 SAC 1.
кат ном 5302 SAC 2.
кат ном 5186 Norm-Trot 1.
кат ном 5187 АЬ-Тго1 2.
кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
VIII. Референсные значения
Референсные значения могут меняться между лабораториями в зависимости от используемых методов и  
анализаторов. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные референсные значения. 
Ожидаемые значения для фибриногена у здоровых взрослых доноров составляют 2+4 г/л.
IX. ОграниченияУровень гепарина > 0,6 ед/мл и продуктов деградации фибрина > 100mg/ml может привести к получению ложно 
заниженных результатов. Если значения некоторых пациентов выпадают из калибровочной кривой, то проведите повторный 
анализ, используя соответствующее разведение, чтобы привести значения в стандартный диапазон.
X. Аналитические характеристики
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример. 
Каждая лаборатория должна их устанавливать сама.
Линейность этого метода лежит в диапазоне 1.5+6.5 г/л.
Воспроизводимость, 
в одной аналитической серии
Фибриноген г/л 
1.24 
3.01
Фибриноген г/л
1.02 
3.62
CV п
4.88 5
3.58 5
1
CV П
6.17 10
3.78 10
Ф
Тест-система "Определение фибриногена методом Клаусса 50" (Clause Fibrinogen 50).
I. ПрименениеЭтот набор предназначен для количественного определения фибриногена (ФГ) в плазме крови человека.
Метод Клаусса - простой метод количественного определения фибриногена, основанный на измерении времени 
образования сгустка. Метод проводится в разведенной плазме после добавления тромбинового реактива (> 30 единиц/мл
^  Время образования сгустка пропорционально концентрации фибриногена. Уровень фибриногена может  
увеличиваться при воспалении, беременности или при приеме оральных контрацептивов. Низкие значения могут 
наблюдаться при заболеваниях печени и ДВС. Для диагностики врожденных дефицитных состоянии включая  
афибриногенемию (полное отсутствие фибриногена), гипофибриногенемию (концентрация фибриногена менее 1 мг/мл) и 
исфибриногенемию (структурные нарушения в молекуле фибриногена).
II. Меры предосторожности .....Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики m vitro. Не принимать внутрь. 
При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одежду- В 
реактивах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
III. Реактивы
f . Тромбиновы й реактив.
Каждый пузырек содержит приблизительно 200 единиц/мл NIH бычьего тромбина со стабилизаторами. ^ 
Приготовление.  Растворите каждый пузырек в 4,0 мл коалиновой суспензии (0,5 г/л). Аккуратно перемешайте. Убедитесь в 
полной растворимости реагента. Тромбиновый реагент можно использовать через 15 минут после приготовления. Не трясти.
2 . Ф ибриногеновый калибрат ор.
Содержит 1мл лиофилизованной человеческой плазмы с точно известным значением фибриногена.
22


--- стр. 23 ---
Ш '
• ш
ш
Приготовление.  Добавьте ровно 1 мл дистиллированной воды. Осторожно перемешайте и оставьте на 10 минут. Еще раз 
перемешайте перед использованием. Не трясти.
3. буф ер
Каждый флакон (объем 25 мл) содержит водный раствор натрия хлорид и натрия азид.
Приготовление.  Буфер готов к использованию.
4. Каолиновая суспензия
Каждый флакончик (объем 50 мл) содержит водный раствор каолина.
Приготовление.  Суспензия готова к использованию. Перед применением хорошо премешать.
5. Д ругие компонент ы набора.
Также в набор вложена инструкция и листок со значением калибратора.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы стабильны до окончания срока годности при условии правильного хранения (указано на упаковке).
4. Тромбин реагент
После приготовления, реактив устойчив в течение 8 часов при комнатной температуре или 1 неделю при 2+6°С.
5. Фибриногеновый калибратор
После разведения стабилен 4 часа при температуре 2+6'’С.
6. Вероналовый буфер
7. Хранить при 2+6°С.
8. Каолиновая суспензия
Хранить при 4+8Х, в темном месте. Окраска суспензии свидетельствует о загрязнении реактива.
V. Забор и приготовление образцов
Используйте пластиковые или силиконизированные пробирки. Кровь (9 частей) должна быть собрана с  
антикоагулянтом (1 часть) цитратом натрия 3,8 %  или 3,2 % . Отделите плазму после центрифугирования при 2000+3000 д, в 
течение 15 минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Анализ необходимо проводить в течение 2 часов после 
отбора проб, либо плазма может быть заморожена при -20°С и храниться в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Перед проведением анализа необходимо разморозить плазму при 37°С. Не держите плазму при 37°С больше 5 
минут.
VI. Пошаговое руководство
Реактивы подходят для использования на любом коагулометре, пригодном для выполнения анализа фибриногена 
по методу Клаусса.
За детальной инструкцией обратитесь к Руководству Оператора и/или используйте инструкцию производителя реагентов. 
Подготовьте все реактивы.
Калибровка.
Новая калибровка должна использоваться при изменении номера партии реагентов или если ожидаемые значения 
контроля выходят за пределы референсных значений.
Разведите калибратор буфером как указано в таблице.
Tube Ш иЬоп F ib ln afen  Calibrator (m l) Quf
1 1+4 0.2 0.8
2 1+9 0.1 0.9
3 1  +  19 0.1 1.9
4 1+29 0.1 2.9
S 1+39 0.1 3.9
Аккуратно перемешайте.
Приготовление образцов.
Смешайте 1 часть плазмы пациента или контроля с 9 частями вероналового буфера.
Анализ.
Выполняйте все тесты в дубле.
6. Отберите пипеткой 0,2мл стандарта, пробы пациента или контроля в реакционную пробирку и инкубируйте в 
течение 2 минут при 37°С.
7. Добавьте 0,1мл тромбинового реактива (15+30°С).
8. Определите время свертывания с точностью 0,1 секунды.
9. На миллиметровой бумаге (вложенной в набор реагентов) отложите по оси Y значения времени свертывания  
стандарта, а по оси X концентрацию фибриногена.
10. Должна быть получена прямая линия. Определите значения калибратора фибриногена в разведении 1+9,  
интерполируйте полученное значение с целью контроля стандартной кривой.
VII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества.
Нормальный и патологичный контроль должен проводиться с каждой партией образцов пациентов, чтобы гарантировать
работу анализатора и оператора. Компания Helena предлагает следующие контроли:
кат ном 5301 SAC 1.
кат ном 5302 SAC 2.
кат ном 5186 Nomi-Trol 1.
кат ном 5187 АЬ-Тго1 2.
кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
VIII. Референсные значения „ „ „ „ „  „
Референсные значения могут меняться между лабораториями в зависимости от используемых методов и  
анализаторов. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные референсные значения. 
Ожидаемые значения для фибриногена у здоровых взрослых доноров составляют 2+4 г/л.
23


--- стр. 24 ---
IX. Ограничения
Уровень гепарина > 0,6 ед/мл и продуктов деградации фибрина > 100mg/ml может привести к получению ложно 
заниженных результатов. Если значения некоторых пациентов выпадают из калибровочной кривой, то проведите повторный 
анализ, используя соответствующее разведение, чтобы привести значения в стандартный диапазон.
X. Аналитические характеристики
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример.
Каждая лаборатория должна их устанавливать сама.
Линейность этого метода лежит в диапазоне 1.5+6.5 г/л.
Воспроизводимость.
В одной аналитической серии
Фибриноген г/л CV п
1.24 4.88 5
3.01 3.58 5
Между аналитическимисериями
Фибриноген г/л CV п
1.02 6.17 10
3.62 3.78 10
Тест-система "Определение фибриногена методом Клаусса 35" (Clause Fibrinogen 35).
I. Применение
Этот набор предназначен для количественного определения фибриногена (ФГ) в плазме крови человека.
Метод Клаусса - простой метод количественного определения фибриногена, основанный на измерении времени 
образования сгустка. Метод проводится в разведенной плазме после добавления тромбинового реактива (> 30 единиц/мл 
NIH). #
Время образования сгустка пропорционально концентрации фибриногена. Уровень фибриногена может  
увеличиваться при воспалении, беременности или при приеме оральных контрацептивов. Низкие значения могут 
наблюдаться при заболеваниях печени и ДВС. Для диагностики врожденных дефицитных состояний, включая  
афибриногенемию (полное отсутствие фибриногена), гипофибриногенемию (концентрация фибриногена менее 1 мг/мл) и 
фибриногенемию (структурные нарушения в молекуле фибриногена).
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь.
При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одежду. В 
реактивах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
III. Реактивы
1. Тромбиновый реактив.
Каждый пузырек содержит приблизительно 200 единиц/мл NIH бычьего тромбина со стабилизаторами.
Приготовление.  Растворите каждый пузырек в 6,0 мл коалиновой суспензии (0,5 г/л). Аккуратно перемешайте. Убедитесь в 
полной растворимости реагента. Тромбиновый реагент можно использовать через 15 минут после приготовления. Не трясти.
2. Ф ибриногвновы й калибрат ор.
Содержит 1мл лиофилизованной человеческой плазмы с точно известным значением фибриногена.
Приготовление.  Добавьте ровно 1 мл дистиллированной воды. Осторожно перемешайте и оставьте на 10 минут. Еще раз 
перемешайте перед использованием. Не трясти.
3. буфер
Каждый флакон (объем 25 мл) содержит водный раствор натрия хлорид и натрия азид.
Приготовление.  Буфер готов к использованию. -
4. Каолиновая суспензия
Каждый флакончик (объем 50 мл) содержит водный раствор каолина.
Приготовление.  Суспензия готова к использованию. Перед применением хорошо премешать.
5. Д ругие компонент ы  набора.
Также в набор вложена инструкция и листок со значением калибратора.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы стабильны до окончания срока годности при условии правильного хранения (указано на упаковке).
Тромбин реагент
После приготовления, реактив устойчив в течение 8 часов при комнатной температуре или 1 неделю при 2+6°С.
Ф ибриногвновы й калибрат ор  
После разведения стабилен 4 часа при температуре 2+6°С.
Вероналовы й буфер  
Хранить при 2+6°С.
Каолиновая суспензия
Хранить при 4+8°С, в темном месте. Окраска суспензии свидетельствует о загрязнении реактива.
%V. Забор и приготовление образцов
Используйте пластиковые или силиконизированные пробирки. Кровь (9 частей) должна быть собрана с  
антикоагулянтом (1 часть) цитратом натрия 3,8 %  или 3,2 % . Отделите плазму после центрифугирования при 2000+3000 д, в 
течение 15 минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Анализ необходимо проводить в течение 2 часов после 
отбора проб, либо плазма может быть заморожена при -20°С и храниться в течение 2 недель или при -70°С в течение одного
24


--- стр. 25 ---
месяца. Перед проведением анализа необходимо разморозить плазму при 37°С. Не держите плазму при 37°С больше 5 
минут.
VI. Пошаговое руководство
Реактивы подходят для использования на любом коагулометре, пригодном для выполнения анализа фибриногена 
по методу Клаусса.
За детальной инструкцией обратитесь к Руководству Оператора и/или используйте инструкцию производителя реагентов. 
Подготовьте все реактивы.
Калибровка.
Новая калибровка должна использоваться при изменении номера партии реагентов или если ожидаемые значения 
контроля выходят за пределы референсных значений.
Разведите калибратор буфером как указано в таблице.
Tube CXhitkm Fibrinofon Odtbrator (ш1) Buf
1 1+4 0.2 0.8
2 1+9 0.1 0.9
3 1  +  19 0.1 1.9
4 1+29 0.1 2.9
5 1+39 0.1 3,9
Аккуратно перемешайте.
Приготовление образцов.
Смешайте 1 часть плазмы пациента или контроля с 9 частями вероналового буфера.
Анализ.
Выполняйте все тесты в дубле.
6. Отберите пипеткой 0,2мл стандарта, пробы пациента или контроля в реакционную пробирку и инкубируйте в 
течение 2 минут при 37°С.
7. Добавьте 0,1 мл тромбинового реактива (15+30°С),
8. Определите время свертывания с точностью 0,1 секунды.
9. На миллиметровой бумаге (вложенной в набор реагентов) отложите по оси Y значения времени свертывания  
стандарта, а по оси X концентрацию фибриногена.
10. Должна быть получена прямая линия. Определите значения калибратора фибриногена в разведении 1+9,  
интерполируйте полученное значение с целью контроля стандартной кривой.
VII. Контроль качества
Кахедая лаборатория должна установить программу контроля качества.
Нормальный и патологичный контроль должен проводиться с каждой партией образцов пациентов, чтобы гарантировать
работу анализатора и оператора. Компания Helena предлагает следующие контроли:
кат ном 5301 SAC 1.
кат ном 5302 SAC 2.
кат ном 5186 Norm-Trol 1.
кат ном 5187 АЬ-Тго1 2.
кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
VIII. Референсные значения
Референсные значения могут меняться между лабораториями в зависимости от используемых методов и  
анализаторов. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные референсные значения. 
Ожидаемые значения для фибриногена у здоровых взрослых доноров составляют 2+4 г/л.
IX. Ограничения
Уровень гепарина > 0,6 ед/мл и продуктов деградации фибрина > 100mg/ml может привести к получению ложно 
заниженных результатов. Если значения некоторых пациентов выпадают из калибровочной кривой, то проведите повторный 
анализ, используя соответствующее разведение, чтобы привести значения в стандартный диапазон.
X. Аналитические характеристики
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример. 
Каждая лаборатория должна их устанавливать сама.
Воспроизводимость.
в одной аналитической серии
Фибриноген г/л
1.24
3.01
Между аналитическими сериями 
Фибриноген г/л 
1.02 
3.62
в диапазоне 1.5+6.5 г/л.
CV п
4.88 5
3.58 5
1
CV п
6.17 10
3.78 10
25


--- стр. 26 ---
Тест-система "Фибриноген по Клауссу (только тромбиновый реагент)"  
Fibrinogen (Thrombin oniy).
(Ciauss
I. Применение
Тромбиновый реагент предназначен для проведения количественного определения фибриногена по Клауссу в 
цитратной плазме пациентов.
Метод Клаусса - простой метод количественного определения фибриногена, основанный на измерении времени 
образования сгустка. Метод проводится в разведенной плазме после добавления тромбинового реагента (> 30 единиц/мл 
NIH).
Время образования сгустка пропорционально концентрации фибриногена. Уровень фибриногена может  
увеличиваться при воспалении, беременности или при приеме оральных контрацептивов. Низкие значения могут 
наблюдаться при заболеваниях печени и ДВС. Для диагностики врожденных дефицитных состояний, включая  
афибриногенемию (полное отсутствие фибриногена), гипофибриногенемию (концентрация фибриногена менее 1 мг/мл) и 
дисфибриногенемию (структурные нарушения в молекуле фибриногена).
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь. 
При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одежду. В 
реактивах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
III. Реактивы
Тромбиновый реактив.
Каждый флакон содержит приблизительно 100 единиц/мл NIH бычьего тромбина со стабилизаторами.
Приготовление.  Растворите кахедый пузырек в 2,0 мл (для кат ном 5374) или в 5,0 мл (для кат ном 5378) коалиновой 
суспензии (0,5 г/л). Аккуратно перемешайте. Убедитесь в полном растворении реактива. Тромбиновый реагент можно 
использовать через 15 минут после приготовления. Не трясти.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит инструкцию.
IV. Хранение и стабильность ^
Запечатанные реагенты устойчивы до срока годности, указанного на флаконе при температуре 2+8 С. После 
приготовления, реактив устойчив в течение 8 часов при комнатной температуре или 1 неделю при 2+8 С.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. Кат ном 5379 Калибратор фибриногена (10x1 мл)
2. Кат ном 5185 SARP (10x1 мл)
3. Кат ном 5375 Буфер Veronal Owren’s (10 х 25 мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте пластиковые или силиконизированные пробирки. Кровь (9 частей) должна быть собрана с  
антикоагулянтом (1 часть) цитратом натрия 3,8 %  или 3,2 % . Отделите плазму после центрифугирования при 2000+3000 д, в 
течение 15 минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Анализ необходимо проводить в течение 2 часов после 
отбора проб, либо плазма может быть заморожена при -20°С и храниться в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Перед проведением анализа необходимо разморозить плазму при 37°С. Не держите плазму при 37°С больше 5 
минут.
VII. Пошаговое руководство
Реактивы подходят для использования на любом коагулометре, пригодном для выполнения анализа фибриногена 
по методу Клаусса.
За детальной инструкцией обратитесь к Руководству Оператора и/или используйте инструкцию производителя реагентов. 
Подготовьте все реактивы.
Калибровка.
Новая калибровка должна использоваться при изменении номера партии реагентов или если ожидаемые значения 
контроля выходят за пределы референсных значений.
Разведите калибратор буфером как указано в таблице.
J d tm C^lution Fibrinosen Cyitw vtnr (m l) Btif
1 1+4 0.2 0.8
2 1+9 0.1 0.9
3 1  +  19 0.1 1.9
4 1+29 0.1 2.9
5 1+39 0.1 3,9
Аккуратно перемешайте.
Приготовление образцов.
Смешайте 1 часть плазмы пациента или контроля с 9 частями вероналового буфера.
Анализ.
Выполняйте все тесты в дубле.
11. Отберите пипеткой 0,2мл стандарта, пробы пациента или контроля в реакционную пробирку и инкубируйте в 
течение 2 минут при 37°С.
Добавьте 0,1мл тромбинового реактива (15+30°С).
Определите время свертывания с точностью 0,1 секунды.
На миллиметровой бумаге (вложенной в набор реагентов) отложите по оси Y значения времени свертывания 
стандарта, а по оси X концентрацию фибриногена.
12.
13.
14.
»
26


--- стр. 27 ---
ш
Ч '^
15. Должна быть получена прямая линия. Определите значения калибратора фибриногена в разведении 1+9, 
интерполируйте полученное значение с целью контроля стандартной кривой.
VIII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества.
Нормальный и патологичный контроль должен проводиться с каждой партией образцов пациентов, чтобы гарантировать
работу анализатора и оператора. Компания Helena предлагает следующие контроли:
кат ном 5301 SAC 1.
кат ном 5302 SAC 2.
кат ном 5186 Nonn-Trol 1.
кат ном 5187 АЬ-Тго1 2.
кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
IX. Референсные значения
Референсные значения могут меняться между лабораториями в зависимости от используемых методов и  
анализаторов. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные референсные значения. 
Ожидаемые значения для фибриногена у здоровых взрослых доноров составляют 150+350 мг/дл (1,5+3,5 г/л).
X. Ограничения
Уровень гепарина > 0,6 ед/мл и продуктов деградации фибрина > 100мг/мл может привести к получению ложно 
заниженных результатов. Если значения некоторых пациентов выпадают из калибровочной кривой, то проведите повторный 
анализ, используя соответствующее разведение, чтобы привести значения в стандартный диапазон.
XI. Аналитические характеристики
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример. 
Каходая лаборатория должна их устанавливать сама.
Линейность этого метода лежит в диапазоне 1.5+6.5 г/л.
Воспроизводимость.
Между аналитическими сериями:
Фибриноген (g/L) =3,64 CV=4,87 n=10 
Внутри аналитической серии:
Фибриноген (g/L) =3,61 CV=3,78 п=10
Тестовый реагент "Фибриноген по Клауссу, суспензия оптическая" (Kaolin
Suspension).
Каолин, 0,5% суспензия в физиологическом растворе используется для проведения теста каолиновое время.
1V
чувствительного, в частности, при определении волчаночного антикоагулянта, а также для других коагулологических тестов. 
Принцип метода.
Добавление к исследуемой плазме веществ, обладающих способностью к контактной активации фактора Хагемана, таких как 
суспензия каолина, стандартизирует начальную фазу процесса свертывания крови и значительно ускоряет этот процесс. При 
этом дальнейшая активация факторов коагуляционного каскада происходит на собственных (присутствующих в исследуемой 
плазме) фосфолипидных матрицах.
Состав набора.
Каолин, 0,5% суспензия в физиологическом растворе, (5 мл) - 6 флаконов.
Приготовление реагента.
Суспензия легкой фракции каолина в физиологическом растворе является готовым реагентом для проведения анализа. 
Вскрытый флакон можно использовать повторно при условии хранения при 2-8°С в плотно закрытом состоянии. 
Стабильность реагента.
Вскрытый флакон стабилен в течение двух месяцев при условии хранения при +2-8 С и 14 дней при хранении при комнатной 
температуре.
Получение исследуемой плазмы для анализа.
Венозную кровь взять в силиконированную стеклянную или пластиковую пробирку на 3,8% (0.11моль/л) цитрате натрия (9:1). 
Центрифугировать 15 мин при 3000 об/мин (1200д), плазму перенести в другую пробирку и повторно центрифугировать 15 
мин при 3000 об/мин (1200д). Центрифугирование следует проводить как можно скорее после взятия крови. Немедленно 
после центрифугирования перенести плазму в пластиковую пробирку.
Для анализов достаточно 1,0 мл бедной тромбоцитами плазмы. Время хранения при комнатной температуре - не более 4 
часов, при 2 - 8°С не более 8 часов. Допускается однократное замораживание плазмы при - 20С.
Проведение анализа.
Внести в кювету анализатора: Объем
Плазма контрольная (исследуемая) Ю Омкл Суспензию каолина Ю Омкл Инкубировать при 37°С точно 3 мин.
Кальция хлорида 0,025 М  раствор 100 мкл
Зафиксировать время свертывания в секундах на коагулологическом анализаторе.
Интерпретация результатов.
В норме каолиновое время составляет 55 - 75 секунд.
Каолиновое время удлиняется при дефиците факторов свертывания внутреннего и общего пути, при гепаринотерапии, при 
наличии ингибиторов свертывания, как специфических, так и не специфических и в частности волчаночного антикоагулянта. 
В этом случае смешение исследуемой плазмы с нормальной плазмой не приводит к коррекции результатов определения 
каолинового времени.
Меры предосторожности. . „
Каолин, 0,5% суспензия в физиологическом растворе предназначена только для диагностики ш vitro. При работе с
исследуемыми образцами следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы плазмы
27


--- стр. 28 ---
крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и 
передавать вирусы иммунодефицита ВИЧ1 и ВИЧ2, гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
Калибратор фибриногена (Fibrinogen Caiibrator).
I. Применение
Реактив используется для калибровки теста для определения фибриногена в плазме. Может использоваться 
вместе с реактивом Thrombin (кат ном 5374, 5378) или комплектом для анализа фибриногена (кат ном 5376).
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Калибратор фибриногена.
Каждый флакон содержит лиофилизированную и стабилизированную человеческую плазму с цитратом.
Приготовление.  Растворить каждый пузырек в 1 мл дистиллированной или деионизированной воды, аккуратно перемешать 
и дать отстояться в течение 10 минут при комнатной температуре.
2. Другие компоненты комплекта.
Каждый комплект содержит инструкцию и значения калибраторов.
IV. Хранение и стабильность
1. Калибратор фибриногена ^
Запечатанные реактивы устойчивы до срока годности, указанного на флаконе при температуре 2+6 С. После приготовления, 
реактив устойчив в течение 4 часов при 2+6°С.
Избегать загрязнения.
V. Пошаговое руководство
Каждый калибратор нужно анализировать так же, как неизвестные образцы и контроли в соответствии с 
инструкцией.
VI. Референсные значения
Референсные значения могут меняться между лабораториями в зависимости от используемых методов и  
анализаторов. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные Референсные значения.
Тест-система "Тромбиновое время" (Thrombin Time)
О
I. Применение
Реагент для определения тромбинового времени (ТВ) Helena содержит бычий тромбин. Реактив можно  
использовать как для ручных методов, так и на полуавтоматических и автоматических анализаторах. Тест обычно 
применяется для выявления причин, связанных с нарушением свертывающей системы крови. Удлинение тромбинового 
времени может быть качественным признаком аномального уровня фибриногена (высокого или низкого), или признаком 
наличия веществ типа FDP (продукты разрушения фибриногена) или гепарина. Количественная оценка возможных причин 
удлинения тромбинового времени должна быть выполнена вместе с такими исследованиями, как исследования АЧТВ или 
хромогенный анализ гепарина, фибриногена по Клауссу, определения продуктов деградации фибрина, определения 
гепарина методом нейтрализации протамин сульфатом или полибреном, нормальная плазма, смешивающая исследования 
или рептилазный анализ, чтобы различить гипофибриногенемию и эффекты продукта деградации фибрина.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с любым из компонентов набора применяйте соответствующую защитную одежду. В реактивах не 
содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реактивы как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры предосторожности.
III. Реактивы
1. тромбин-реагент.
Каждый пузырек содержит лиофилизованный реактив, приготовленный из бычьего тромбина с добавлением буфера и 
стабилизаторов. Разведенный реагент содержит приблизительно 3 единицы/мл тромбина. Внешне, до приготовления, 
реактив должен выглядеть как белая плотная лиофилизовання субстанция.
Приготовление.  Рразведите реактив с рекомендованным объемом очищенной воды (5мл для кат ном 5377 или 2мл для кат 
ном 5392). Подождите 5 минут, затем плавно перемешайте и перелейте в пластиковую пробирку. Разведенный реактив 
внешне должен выглядеть как прозрачный, бесцветный раствор.
2. Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит инструкцию для пользователя.
I
28


--- стр. 29 ---
V
♦
I »
I
L
VI. Пошаговое руководство
Любой высококачественный электромеханический или оптический коагулометр подходит для 
выполнения анализа определения тромбинового времени.
1. Возьмите кровь и выполните приготовление образцов, как описано выше.
2. Разведите плазму контроля согласно инструкции, вложенной в пакет реагентов.
3. Подготовьте реактивы к использованию согласно инструкции, приведенной в разделе Реактивы.
4. Выполните все тесты в двойном экземпляре. Вычислите среднее время свертывания.
Варьирование значений должно быть в пределах ± 5 % от среднего значения.
Автоматизированный метод, АС-4.
(кат ном 5392 на 400 определений, кат ном 5377 на 1000 определений)
Обратитесь к соответствующему разделу Руководства Пользователя для АС-4 для получения более подробных инструкций. 
Подготовьте все реактивы как указано в разделе Реакппивы.
START METHOD
*Соа§
-ш т------- PATIENT (Fat)
•i«rf«100uL
Pos’36iCP)
Del. Pieema  
(DP)
Vol=0|iL
INCUS
«йа
MATH
щ п
CL&AN*6 BUFFER (BUF) 
Vo№ 0 (J L
R1
Vol»OpL
RUNTIME
:»12£Й
SENS
«2
T-C0RR»0
S-CORR»0
CLEAR (CLR) 
VoNQ^L VoHSOmL
Pqs»2/'
Ручной Метод.
1,
2.
3,
4.
С помощью пипетки отберите 0.2мл плазмы пациента или контроля в реакционную пробирку. 
Инкубируйте при 37°С в течение 3 минут.
С помощью пипетки отберите 0.1мл реагента в реакционную пробирку, содержащую 
плазму пациента или контроль, одновременно запустите таймер.
Заметьте и запишите время образования сгустка (с точностью до 0,1 секунды).
а
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
1. тромбин-реагент
Разведенный реактив должен храниться при 2-*-6°С. Устойчив в течение 8 часов, на борту АС-4 в позиции 27 при 37°С - 6 
часов.
V. Сбор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Стделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в 
течение одного месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 
минут.
VII. Контроль качества
Каждой лаборатории необходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии работы анализатора и оператора. 
Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно считать 
недействительными.
Компания Helena рекомендует использовать следующие контроли качества: 
кат ном 5186 Nomio-Trol 1. 
кат ном 5187 АЬ-Тго1 2. 
кат ном 5183 АЬ-Тго1 3.
VIII. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить 
свой собственный референсный диапазон.
IX. Интерпретация результатов
Результаты Тромбинового Времени выражаются в секундах, с точностью до 0,1. Нормальный диапазон (обычно 
среднее значение ± 2 CV (стандартных отклонения)) должен быть установлен в каждой лаборатории. Результаты вне 
нормального диапазона нужно рассматривать как неправильные и нужно определять повторно.
X. Ограничения
Ожидаемые значения Тромбинового Времени могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и 
анализаторов, которые используются в лаборатории для выполнения данного теста, а также от температуры, pH, типа 
антикоагулянта, метода взятия крови, времени и метода хранения образцов - все это очень важно. Сбор и хранение 
образцов плазмы должны быть стандартизированы и тщательно контролируемы. Неожиданные результаты должны быть 
подтверждены дополнительными исследованиями.
Также, удлинение тромбинового времени может наблюдаться у пациентов с множественным системным  
амилоидозом, осложненным с кровотечениями, эти осложнения могут быть вызваны циркулирующим ингибитором. Кроме 
того, терапевтические уровни гепарина могут полностью исключить образование сгустка при выполнении теста Тромбиновое 
Время, несмотря на то, что нейтрализация с протамином сульфатом или полибреном должна исправить тромбиновое время.
29


--- стр. 30 ---
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие параметры (в качестве примера): 
Внутри дной аналитической серии.
время сверт., сек. коэф. вар. внутри пробы, %
12.5 1.43  
Между разными аналитическими сериями.
время сверт., сек. коэф. вар. внутри пробы, %
12.5 1.29
10
10
Тестовый реагент "Буфер Оуренса" (Owrens Buffer).
I. Применение
Это универсальный буфер, который используют при коагулогических исследованиях человеческой плазмы, например, 
фибриноген по Клаусу и факторы свертывания.
Буфер используют для приготовления стандартных разведений при калибровке фибриногена и факторов. Также его 
используют при рутинных измерениях этих показателей.
Буфер пригоден при работе вручную, на полуавтоматическом анализаторе и на автомате.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Внимательно ознакомьтесь с информацией на этикетки на предмет возможных рисков и способа утилизации.
III. Реактивы
Оуренс буфер -1 0  флаконов по 25 мл каждый.
Каждый флакончик содержит водный раствор натрия хлорида (125.4 тМ) и 0.05% натрия азида, pH 7.2-7.6  
Другие компоненты комплекта.
Также в набор входит инструкция по применению.
IV. Хранение и стабильность
Оуренс буфер
Запечатанные флаконы годны до окончания срока годности, указанного на упаковке. При загрязнении буфера следует его 
заменить.
Контроль качества специальные тесты, норма  
(Speciality Assayed Control N).
I. Применение
Контрольная плазма Sac-1/ Sac-2 может использоваться как нормальный/абнормальный контроль для таких тестов 
как: факторы II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, фибриноген, фактор Виллебранда, ПрС (и его активность) и ПрВ (общий и 
свободный). Также для хромогенных тестов: АТ III, ПрС, фактор VIII и плазминоген.
Этот контроль должен анализироваться так же, как и свежая плазма пациента.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора. Информация по безопасности и способу утилизации 
отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
2. SAC-1 (10*1мл).
Содержит лиофилизат свежей цитратной плазмы (с добавлением буфера).
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды. Аккуратно перемещать. Оставить на 20 минут до полного  
растворения.
Важно: Если Вы хотите поставить этот контроль на тест Фибриноген на приборе АС-4, то надо предварительно развести 
готовый контроль в 2 раза. Затем полученный результат следует умножить на 2. Это будет истинное значение, которое нужно 
сравнивать с референсным диапазоном.
5. SAC-2 (10*1 мл).
Содержит лиофилизат свежей цитратной плазмы (с добавлением буфера).
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды. Аккуратно перемещать. Оставить на 20 минут до полного  
растворения.
Важно: Если Вы хотите поставить этот контроль на тест Фибриноген на приборе АС-4, то надо предварительно развести 
готовый контроль в 2 раза. Затем полученный результат следует умножить на 2. Это будет истинное значение, которое нужно 
сравнивать с референсным диапазоном.
I
30


--- стр. 31 ---
1 1
6. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя и лист со значениями.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанный флакон стабилен до окончания срока годности, при условии правильного хранения. Фактор VIII, 
фактор Виллебранда и ристоцетин кофактор стабильны в течение 2 часов при температуре 2+6°С. Остальные показатели 
стабильны 4 часа при 2+6°С.
Контроль представляет собой сухую, слегка желтоватую массу. Любое отклонение от этого описания может говорить о 
плохом качестве продукта. В таком случае, обратитесь в представительство компании Helena.
V. Использование
Этот контроль может использоваться на любых оптических и механических коагулометрах в комплексе с любыми 
подходящими коммерчески доступными реактивами.
VI. Ограничения
Результаты анализа зависят от множества факторов (прибор, реагенты и прочее). Поэтому Вы должны сами 
рассчитывать референсные диапазоны для этого контроля.
VII. Интерпретация результатов
Если Вы не измеряли контроли, то все полученные результаты считаются недостоверными. Убедитесь, что номер 
лота (серии) флаконов равен номеру на вложенном листке со значениями.
VIII. Аналитические характеристики.
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример.
Каждая лаборатория должна устанавливать свои собственные значения.
Для Sac-1:
Было проведено 3 анализа (анализатор Behnk Rackrotor).
Тест Значение
Фириноген г/л 2.9
Фактор 9 %  132.7
Протеин S %  110.4
Для Sac-2:
Было проведено 3 анализа (анализатор Behnk Rackrotor).
Тест Значение
Фириноген г/л 1.24
Фактор 9 %  50.3
Протеин S %  42.4
CV между флаконами
6.9
4.3
5.0
CV между флаконами
3.35
5.4
3.1
IX. Референсные значения
Референсные значения Вы должны устанавливать сами, 
использовать для приблизительных расчетов.
Листок с приведенными значениями Вы можете
Контроль качества специальные тесты, патология  
(Speciality Assayed Control А).
I. Применение
Контрольная плазма Sac-1/ Sac-2 может использоваться как нормальный/абнормальный контроль для таких тестов 
как: факторы II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, фибриноген, фактор Виллебранда, ПрС (и его активность) и HpS (общий и 
свободный). Также для хромогенных тестов: АТ III, ПрС, фактор VIII и плазминоген.
Этот контроль должен анализироваться так же, как и свежая плазма пациента.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора. Информация по безопасности и способу утилизации 
отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
2. SAC-1 (10*1мл).
Содержит лиофилизат свежей цитратной плазмы (с добавлением буфера).
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды. Аккуратно перемешать. Оставить на 20 минут до полного  
растворения.
Важно: Если Вы хотите поставить этот контроль на тест Фибриноген на приборе АС-4, то надо предварительно развести 
готовый контроль в 2 раза. Затем полученный результат следует умножить на 2. Это будет истинное значение, которое нужно 
сравнивать с референсным диапазоном.
3. SAC-2 (Ю Чмл).
Содержит лиофилизат свежей цитратной плазмы (с добавлением буфера).
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды. Аккуратно перемешать. Оставить на 20 минут до полного  
растворения.
31


--- стр. 32 ---
Важно: Если Вы хотите поставить этот контроль на тест Фибриноген на приборе АС-4, то надо предварительно развести 
готовый контроль в 2 раза. Затем полученный результат следует умножить на 2. Это будет истинное значение, которое нужно 
сравнивать с референсным диапазоном.
4. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя и лист со значениями.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанный флакон стабилен до окончания срока годности, при условии правильного хранения. Фактор VIII, 
фактор Виллебранда и ристоцетин кофактор стабильны в течение 2 часов при температуре 2+6°С. Остальные показатели 
стабильны 4 часа при 2+6°С.
Контроль представляет собой сухую, слегка желтоватую массу. Любое отклонение от этого описания может говорить о 
плохом качестве продукта. В таком случае, обратитесь в представительство компании Helena.
V. Использование
Этот контроль может использоваться на любых оптических и механических коагулометрах в комплексе с любыми 
подходящими коммерчески доступными реактивами.
VI. Ограничения
Результаты анализа зависят от множества факторов (прибор, реагенты и прочее). Поэтому Вы должны сами 
рассчитывать референсные диапазоны для этого контроля.
VII. Интерпретация результатов
Если Вы не измеряли контроли, то все полученные результаты считаются недостоверными. Убедитесь, что номер 
лота (серии) флаконов равен номеру на вложенном листке со значениями.
VIII. Аналитические характеристики.
Приведенные характеристики должны рассматриваться только как пример. 
Каждая лаборатория должна устанавливать свои собственные значения.
Для Sac-1:
Было проведено 3 анализа (анализатор Behnk Rackrotor).
Тест Значение
Фириноген г/л 2.9
Фактор 9% 132.7
Протеин S % 110.4
Для Sac-2:
Было проведено 3 анализа (анализатор Behnk Rackrotor).
Тест Значение
Фириноген г/л 1.24
Фактор 9 %  50.3
Протеин S %  42.4
CV между флаконами
6.9
4.3
5.0
CV между флаконами
3.35
5.4
3.1
IX. Референсные значения
Референсные значения Вы должны устанавливать сами, 
использовать для приблизительных расчетов.
Листок с приведенными значениями Вы можете
Контроль качества, норма (Routine Control N).
I. Применение
Norma-Trol, Ab-Trol 2 и Ab-Trol 3 - контроли качества с нормальным, умеренно увеличенным и заметно увеличенным 
временем АЧТВ и ПВ. Их также можно использовать для определения количества фибриногена, ТВ и АТ-111. Контроли 
приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Нер-Тго1 разработан для контроля в тестах по определению гепарина 
хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
Каждый пузырек содержит 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) лиофилизированную человеческую плазму (сдобавлением 
буфера). Ab-Trol 2 и АЬ-Тго1 3 получены из адсорбционной человеческой плазмы. Norma-Trol 1 приготовлен из пула 
нормальной плазмы. Нер-Тго1 приготовлен из пула человеческой плазмы с добавлением натриевой соли гепарина для 
моделирования плазмы, полученной от пациентов, получающих гепариновую терапию.
Пригот овление.  Развести каждый пузырек соответствующего контроля в 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) дистиллированной 
воды. Плавно перемешать и дать отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием 
необходимо перемешать.
Д ругие компонент ы  набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
I
32


--- стр. 33 ---
11
t
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. Разведенные контроли устойчивы в течение 8 часов, при хранении в холодильнике (2+6 С). Держать их плотно 
закрытыми.
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль нужно анализировать так же, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте.
VI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, используемых в 
лабораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения. Noma-Trol 1 должен 
давать значения в пределах нормального диапазона, используемого в лаборатории для ПВ, АЧТВ и теста на фибриноген. АЬ- 
Trol 2 и АЬ-Тго1 3 были стандартизированы таким образом, чтобы показывать умеренно увеличенное и заметно увеличенное 
время АЧТВ и ПВ, соответственно.
VII. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили представленные характеристики:
В таблице приведен пример определения коэффициента вариации при исследовании реактивов Helena ПВ и АЧТВ (п=5) на 
приборе Behnk RackRotor:
Control C V  %  f T - U ) C V % ( A P T T - S 0
N o r m -T r o l I i.O I 2 .8 3
A b -T r o l 2 1.71 2 ,7 6
A b -tro l 3 1,03 1 . Л
H e p -T r o l H ’A 2 .2 6
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Контроль качества, высокая патология (Routine Control SA).
к
I. Применение
Norma-Trol, Ab-Trol 2 и Ab-Trol 3 - контроли качества с нормальным, умеренно увеличенным и заметно увеличенным 
временем АЧТВ и ПВ. Их также можно использовать для определения количества фибриногена, ТВ и AT-III. Контроли 
приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Нер-Тго1 разработан для контроля в тестах по определению гепарина 
хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
Каждый пузырек содержит 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) лиофилизированную человеческую плазму (сдобавлением 
буфера). АЬ-Тго1 2 и Ab-Trol 3 получены из адсорбционной человеческой плазмы. Norma-Trol 1 приготовлен из пула 
нормальной плазмы. Нер-Тго1 приготовлен из пула человеческой плазмы с добавлением натриевой соли гепарина для 
моделирования плазмы, полученной от пациентов, получающих гепариновую терапию.
Приготовление.  Развести каждый пузырек соответствующего контроля в 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) дистиллированной 
воды. Плавно перемешать и дать отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием 
необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях х|1анения, указанных на 
упаковке. Разведенные контроли устойчивы в течение 8 часов, при хранении в холодильнике (2+6 С). Держать их плотно 
закрытыми.
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль нужно анализировать так же, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте,
VI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, используемых в 
лабораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения. Norma-Trol 1 должен 
давать значения в пределах нормального диапазона, используемого в лаборатории для ПВ, АЧТВ и теста на фибриноген. Ab- 
Trol 2 и Ab-Trol 3 были стандартизированы таким образом, чтобы показывать умеренно увеличенное и заметно увеличенное 
время АЧТВ и ПВ, соответственно.
33


--- стр. 34 ---
VII. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили представленные характеристики:
В таблице приведен пример определения коэффициента вариации при исследовании реактивов Helena ПВ и АЧТВ (п=5) на 
приборе Behnk RackRotor:
C o n tro l C V  %  ( P T -U ) C V % { A P T T - S )
N o r m -T r a l 1 1.01 2 .8 3
A b -T r o l 2 1.71 2 ,7 6
A b -tro l 3 1.03 1.72
Н е р -Т гс й N /A 2 .2 6
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Контроль качества, умеренно выраженная патология (Routine Control А).
I. Применение
Norma-Trol, Ab-Trol 2 и Ab-Trol 3 - контроли качества с нормальным, умеренно увеличенным и заметно увеличенным 
временем АЧТВ и ПВ. Их также можно использовать для определения количества фибриногена, ТВ и АТ-111. Контроли 
приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Нер-Тго1 разработан для контроля в тестах по определению гепарина 
хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
Каждый пузырек содержит 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) лиофилизированную человеческую плазму (сдобавлением 
буфера). Ab-Trol 2 и Ab-Trol 3 получены из адсорбционной человеческой плазмы. Norma-Trol 1 приготовлен из пула 
нормальной плазмы. Нер-Тго1 приготовлен из пула человеческой плазмы с добавлением натриевой соли гепарина для 
моделирования плазмы, полученной от пациентов, получающих гепариновую терапию.
Приготовление.  Развести кахщый пузырек соответствующего контроля в 1.0мл (3.0мл для кат ном 5499) дистиллированной 
воды. Плавно перемешать и дать отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием 
необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. Разведенные контроли устойчивы в течение 8 часов, при хранении в холодильнике (2+6 С). Держать их плотно 
закрытыми. Q
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль нужно анализировать так же, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте.
VI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, используемых в 
лабораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения. Norma-Trol 1 должен 
давать значения в пределах нормального диапазона, используемого в лаборатории для ПВ, АЧТВ и теста на фибриноген. Ab- 
Trol 2 и Ab-Trol 3 были стандартизированы таким образом, чтобы показывать умеренно увеличенное и заметно увеличенное 
время АЧТВ и ПВ, соответственно.
VII. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили представленные характеристики:
В таблице приведен пример определения коэффициента вариации при исследовании реактивов Helena ПВ и АЧТВ (п=5) на 
приборе Behnk RackRotor:
C o n tro l C V % < P T - U ) C V % ( A F T T ^ ' )
N o r m -T r o l 1 I.O I 2 .8 3
A b -T ro t 2 1.71 2 .7 6
A b -tro l 3 1.03 1 . Л
H e p -T r o l N /A 2 .2 6
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
34


--- стр. 35 ---
Универсальный калибратор (Calibration Plasma).
t
#
I. Применение
SARP может использоваться как референсная плазма, для определения факторов II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, 
фибриногена, фактора Виллебрандта, антигенов и функциональной активности ПрС и Пр8 (общего и свободного), так же 
SARP можно использовать и для хромогенах тестов, включая АТ III, ПрС, фактор VIII и плазминоген,
SARP используется для анализа фактора и других тестов также, как свежая плазма, для определения референсных 
значений ф11, VII, VIII, IX и X фактора, а также для определения значений хромогенных тестов: VIII фактора, АТ- III и ПрС. 
Проведение анализов с SARP рекомендовано ВОЗ. Референсная плазма должна использоваться для определения  
погрешности в кахадой лаборатории.
Референсная плазма не должна использоваться для определения нормального диапазона, так как референсные 
значения варьируют в зависимости от населения. Для определения нормального диапазона используется плазма местных 
здоровых доноров.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
1. SARP.
Содержит лиофилизат пула цитратной плазмы, полученной от здоровых доноров.
Приготовление.  Развести в 1.0мл дистиллированной или деионизированной воды. Плавно перемешать. Дать продукту 
полностью растворится в течение 20 минут.
2. Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит инструкцию.
IV. Хранение и стабильность
1. SARP
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной на них даты окончания срока годности, при соблюдении условий хранения, 
которые указаны на упаковке набора или на флаконе.
Значения для фVIII, фактора Виллебрандта и кофактора ристоцетина устойчивы в течение 2 часов при 2+6°С. Все другие 
факторы устойчивы в течение 4 часов при 2+6°С.
Неразведанный SARP должен выглядеть, как светло-желтый сухой плотный лиофилизат.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
SARP может быть использован при выполнении тестов на любом механическом или оптическом коагулометре, с 
любыми подходящими реактивами.
VI. Ограничения
Результаты, полученные при использовании SARP, зависят от нескольких факторов, связанных с применяемым 
анализатором, типом реактивов, недостатком субстрата и варьируют от лаборатории к лаборатории.
Каждая лаборатория должна установить референсный диапазон по данному реактиву для своего анализатора.
VII. Интерпетация результатов
Для определения стандартных лабораторных кривых при использовании SARP оценка процента активности 
различных факторов свертывания должна быть взята из колонки “референсные значения”. Убедитесь, что номер партии, 
напечатанный на этом листе, совпадает с номером, указанным на используемом флаконе SARP.
VIII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Нормальный и патологичный контроль 
должен быть проверен перед использованием каждой партии образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не попадает в установленные Вами границы, то выполнять исследования не  
рекомендуется.
IX. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики: 
анализатор Behnk Rackrotor, и реактивы Helena (п=5):
Pwarneter Меш1 Between vial C V  (% )
Fibrinogen 1.0 3.6
Factor IX (% ) 124,7 1.9
Rrowin S 98.S 2,e
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
X. Референсные значения
Референсные значения могут изменяться между лабораториями в зависимости от методик и анализаторов, 
используемых в лобораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой собственный диапазон 
референсных значений.
35


--- стр. 36 ---
Калибратор МИЧ (ISI Calibrant Plasma Set).
I. Применение
Этот набор разработан компанией Helena для точного расчета Международного Индекса Чувствительности (МИЧ) 
(для стандартизации теста Протромбиновое время) для автоматических коагулометров. При этом тромбопластин должен 
быть либо человеческим, либо кроличьим и его изначальный МИЧ (указанный в инструкции) должен быть меньше 2.
Поскольку МИЧ зависит не только от природы тромбопластина, но и в определенной мере от прибора, то 
определение его «локального» значения заметно повысит точность результатов. Также при работе с этим набором Вам не 
придется:
делать двойные измерения - референсным и коммерческим тромбопластином 
обращаться в организацию International Reference Preparation для обработки результатов 
искать пациентов, принимающих варфарин.
В набор входит лиофилизированная плазма, искусственно обедненная по варфарин-зависимым факторам. Профессор 
Томпсон и др. ученые доказали, что такая плазма идентична по свойствам плазме пациентов, принимающих варфарин [1]. 
Плазма обоих видов может применяться для исследования влияния прибора на МНО (Международное Нормализованное 
Отношение) [1-7].
Величина МИЧ зависит также от многих факторов пробоподготовки. «Локальный» МИЧ будет определен 
следующим образом:
1. Вы измеряете значения ПВ для всех 20 флаконов набора и сообщаете результаты дистрибьютеру.
2. Через определенное время Вам сообщают значение МИЧ.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Калибровочные плазмы. 20 флакончиков с различными номерами.
Каждый флакончик содержит 0,5мл плазмы здорового человека, с искусственно изъятыми факторами свертывания. Также 
содержатся буфер и консерванты для низких температур.
Приготовление.  Добавить в каждый флакончик ровно 0,5мл дистиллированной воды. Оставить на 10 минут и затем 
перемешать. Не трясти!
2. Другие компоненты набора.
В набор также входит инструкция и бланк для занесения результатов.
IV. Хранение и стабильность
1 .Калибровочная плазма
Запечатанные флаконы стабильны до окончания срока годности при условии правильного хранения (указаны на флаконе или 
плазма стабильна 30 минут при 15+30°С или 4 часа при 2+6°С. Дальнейшее хранение некоробке). Разведенная плазма стабильна 30 минут при 15+30 С или 4 часа при  
рекомендуется.
Лиофилизированная плазма представляет собой сухую массу бледно-желтого цвета. Если после добавления воды Вы не 
получаете однородный раствор и/или присутствуют инородные тела, то продукт испорчен.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1).
2).
3).
4).
Высококачественный коагулометр (оптический способ детекции).
Пипетка на 0,5мл
20 свежесобранных плазм от здоровых доноров обоего пола различного возраста (желательно охватить 
наибольший диапазон). Кровь (9 часть) должна собираться в пластиковые пробирки с консервантом (1 часть). 
Консервантом может быть 3,2% или 3.8% натрия цитрат. Хорошо перемешайте и немедленно  
центрифугируйте при 1500+2500 g в течение 10 минут. Отделите плазму и переместите ее в пластиковые 
пробирки. Определение следует закончить в течение 2 часов с момента сбора.
Реактив на ПВ (тромбопластин, приготовить в соответствии с инструкцией).
VI. Пошаговое руководство
Важно. Вы рассчитываете МИЧ только для данного прибора и для данной серии реактива. Этот набор также имеет серию, 
поэтому нельзя брать калибраторы из разных коробок.
1).
2).
3).
Приготовить 20 калибровочных плазм (см.выше).
Измерить ПВ для каждого флакона 4 раза (нужны только секунды).
Внести все полученные значения в специальный бланк, вложенный в набор. Рассчитать среднее  
арифметическое для каждого флакона и также внесите его в бланк. Каждый флакон имеет свой номер, это 
отражено в бланке.
Измерить 4 раза плазмы, полученные от здоровых доноров (нужны только секунды). Рассчитать среднее 
арифметическое. Внести это значение в ячейку MNPT.
Передать полученные результаты дистрибьютеру.
Отметим, что коэффициент вариации для четырех измерений каждого калибратора должен быть меньше 5% 
(только в этом случае будут проводиться расчеты). Расчет «локального» МИЧ будет произведен в течение двух дней. Если 
CV больше 5%, то всю процедуру нужно повторить. Если результаты снова будут выше 5%, то нужно искать причину 
разбросов.
4).
5).
Р
0 4
т
36


--- стр. 37 ---
г
t
VII. Аналитические характеристики
Качество этого набора оценивали в двух крупных исследованиях:
1. Данные собирались только в Англии.
2. Данные собирались в разных странах.
Оказались охваченными 95 торговых марок приборов и 11 торговых марок реактивов на ПВ. Приняли участие 37 
лабораторий из США, Канады, Франции, Германии, Италии и Испании. Расхождения по МНО для варфариновых пациентов 
между этими лабораториями достигало 14,41%. После установления «локального» МИЧ для каждой лаборатории ( для 
каждого прибора) с помощью этого набора, эта цифра уменьшилась до1,04%.
В таблице указаны: наименование прибора, наименование реактива (тромбопластина), изначальный МИЧ и количество 
приборов данной марки, принявших участие.
ISI = МИЧ (английская абревиатура).
МИЧ определяли только в диапазоне 1.07+2.00.
INSTRUM ENTTH R O M BO PLA STINM A N U FA C TU R ER  ISINO. O F SY STEM S
KoaguLab RacombiPlasTin 0.99 lO
KcaguLab Ortho Brain Thromboplaitin 1.92 lO
KoaeuLab Stago, France 1.79-2.04 2
KoaguLab Thromboplastin C 2Л0 I
MLA* RacombiHasTin 0.99 lO
MLA* Ortho Brain TVomboplastin 1,92 lO
MLA* Thromboplastin C 2.80 I
MLA* Innovin 0.96-i.04 3
MLA* IS, Baxter # 2
MLA* Thromboplastin C  -F # 2
ACL** PleeombiRasTin 0.99 I3
ACL** Ortho Brain Thromboplastin 1.92 I3
ACL** A CL 1.4 1-2.42 3
ACL** Stago, France 1.79-2.04 I
ACL** Sirr^lastin X L # 2
Coag-A-Mita RecombiPlasTin 0.99 3
Coag-A-Mata Orthto Brain Thromboplastin 1.92 3
Coag-A-Mate Stago, France 1.79-2.04 2
Coag-A-Mata Thromboma # I
Bahring В FA RecombiPlasTin 0.99 I
Behring В FA Ortho Brain Thromboplastin 1.92 I
Behring BFA Thromborel S # I
* MLA = M eicai Laboratory Automation
** A CL = Automated Coagulation Laboratory
#  (SI ranged between 1.07-2.00
Калибровку этим набором следует проводить при смене серии реактива, после сервисного обслуживания прибора 
и/или в случае непрохождения контролей.
Это набор может использоваться только для тромбопластина с ожидаемым МИЧ ниже 2. Тромбопластин может 
быть только кроличьи или человеческим.
Контроль на МНО (INR Reference Set).
I. Применение
Набор референсной плазмы МНО разработан, чтобы облегчить лабораторный контроль значений МНО. Система 
для калибровки МИЧ (набор плазмы для калибровки кат ном 5519), позволяет лабораториям скорректировать не только 
значения МНО, зависящие от качества тромбопластина, но и значения МНО, зависящие от работы на конкретном 
коагулометре.
Набор для МНО должен использоваться, для того чтобы лаборатория была уверена в качестве результатов. 
Изменения значений МИЧ происходит при изменении температуры в лаборатории, после проведения сервисного  
обслуживания анализатора и при изменении лота реагента тромбопластина. Набор для МНО может также использоваться, 
как МНО калибратор для анализаторов, способных к интерполяции МНО по калибровочной кривой.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Набор МНО.
Набор МНО состоит из 3 лиофилизированных человеческих плазм, с установленным значением МНО. Эти значения 
предназначены для лабораторий, которые используют не стандартизованный тромбопластин и мануальные методики.
37


--- стр. 38 ---
Каждый набор содержит 4 флакона каждого уровня плазмы, с известным значением МНО в следующих диапазонах 1+2, 2+3 
и 3+4.
2. Другие компоненты набора  
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Набор МНО
Запечатанные флаконы должны храниться в при -18°С или ниже. При этих условиях значения МНО плазмы устойчивы до 
даты окончания срока годности, указанного на упаковке. Разведенная плазма должна храниться при 4°С, её необходимо 
проанализировать в течение 1 часа после разведения.
V. Референсные значения
Значения для каждого уровня приведены во вкладыше.
VI. Пошаговое руководство
1. Разведите по одному уровню каждой плазмы набора в 1.0мл очищенной воды. Плавно перемешайте и дайте 
отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
2. Выполните анализ ПВ в дубле, а лучше в четырех повторах для каждого флакона. Вычислите МНО, используя 
значения МИЧ.
VII. Интерпретация результатов
1. Проверьте, что лаборатория вычислила значения МНО относительно диапазона, напечатанного на листе-вкладыше. Если 
результат будет вне установленного диапазона тогда необходимо перекалибровать значение МИЧ.
2. Чтобы подготовить кривую калибровки МНО, подготовьте средние значения ПВ на бумаге регистрации (по оси X 
сертифицированные значения МНО, по оси Y ПВ в секундах). Образцы плазмы МНО теперь могут быть интерполированы по 
этому графику.
VIII. Аналитические характеристики
Представленные аналитические характеристики определены компанией Helena или её представителями и 
являются примером (кахедая лаборатория должна установить свои собственные данные методики).
Вариация значений МНО в плазме данного набора должна быть менее 5 % .
Тест-система "Дефицитная плазма по II фактору (иммунозамещение)" (Factor 
Deficient Piasma (immunodepieted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (не трясти).
2, Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
2.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1т1) 
кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл). 
кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл)
3.
38
I


--- стр. 39 ---
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
Start=9s Method=Coag Mix=0
lncub=60s
RunTinne=180sec
Math=LogXY
Sens=2
Clean=0
T-corr=0 
S-corr=0
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
Patient
VoNIOul
CP=35pos
Buffer=40ul
Pos 39
Clear=0ul
Def plasma=50ul 
Pos=33
R1=0ul
R2=100ul 
Pos 25
:
T d t » SARP(ml) EkfflF«r (ml) Activily (%)
1 0.1 0.4 100
2 OJ 0.9 so
3 0.1 1.9 2S
4 0.1 3.9 [ IS
%
Перемешайте. He трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
1) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
2) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
3) инкубировать при 37°С течение 2 минут
4) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
5) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
6) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазиы-кали6ратора/10) * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
определили следующие аналитические характеристики (каждая
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
39


--- стр. 40 ---
Тест-система "Дефицитная плазма по V фактору (иммунозамещение)" (Factor  
V Deficient Plasma (Immunodepleted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ, За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (не трясти).
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
3.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1т1) 
кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл). 
кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
Start=9s Method=Coag Mix=0 Patient
VoNIOul
CP=35pos
Def plasma=50ul 
Pos=33
lncub=60s Math=LogXY Clean=0 Buffer=40ul 
Pos 39
R1=0ul
RunTime=180sec Sens=2 T-corr=0
S-corr=0
Clear=0ul R2=100ul 
Pos 25
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
T u b e
1
SARP (m l)  
0.1
B uff»- (m ^  
0.4
A ctivity (% )
too
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 12.5
Перемешайте. Не трясти!
«
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
4  'i
л
40


--- стр. 41 ---
I
i
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
7) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
8) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
9) инкубировать при 37°С течение 2 минут
10) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
11) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
12) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазмы-калибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
определили следующие аналитические характеристики (каждая
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Тест-система ’’Дефицитная плазма по VII фактору (иммунозамещение)” (Factor VII  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
- Г
« 1
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время  
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (натрясти).
3. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С.
41


--- стр. 42 ---
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
6.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
5. кат ном 5185 SARP (10*1т1) 
кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл). 
кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
7.
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
Start=9s Method=Coag Mix=0
lncub=60s
RunTime=180sec
Math=LogXY
Sens=2
Clean=0
T-corr=0 
S-corr=0
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
Patient
Voi=10ui
CP=35pos
Buffer=40ui
Pos 39
Clear=0ul
Def piasma=50ul 
Pos=33
R1=0ul
R2=100ul 
Pos 25
T u b e SARP (m l) Ekiffier (m l) A ctivity (% )
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 12,5
Перемешайте. He трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера. 
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
13) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
14) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
15) инкубировать при 37°С течение 2 минут
16) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
17) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
18) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y)  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазмы-кали6ратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл). < 1
42


--- стр. 43 ---
i
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
определили следующие аналитические характеристики (каждая
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
f i
« к
Тест-система "Дефицитная плазма по VIII фактору (иммунозамещение)" (Factor VIII  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем,  
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
2. Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 X 1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37 С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
43


--- стр. 44 ---
T u b a SAR P(m O Ekiffer (m l) (% )
1 0.1 0,4 100
2 0,1 0.9 5 0
3 0,1 1.9 25
4 0.1 3.9 12.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
1. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
2. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
3. инкубировать при 37°С течение 2 минут
4. добавить 0.1 мл реактива АРТТ-Si
5. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
6. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
7. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
8. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазмы-калибратора/10) * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по IX фактору (иммунозамещение)" (Factor IX  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем,  
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
44


--- стр. 45 ---
1%
III. Реактивы
3. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
4. Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
4. кат ном 5185 SARP (10 X 1мл)
5. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
6. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 % или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руково^^стве, содержащемся 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37 С.
в наборе с реактивами. Предварительно
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме;
T u b e 5А ЯР{ш 1) (m l) Activity (% )
1 0.1 0.4 too
2 0.1 0,9 50
3 0.1 t.9 25
4 0.1 3.9 I2.S
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
9. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы 
добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля 
инкубировать при 37°С течение 2 минут 
добавить 0.1мл реактива APTT-Si 
инкубировать при 37°С в течение 5 минут 
добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
активность % стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
10 .
11.
12.
13.
14.
15.
16.
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом.
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10) интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контрольгачества^^^^^^^ небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется один
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
45


--- стр. 46 ---
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50->-150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по X фактору (иммунозамещение)" (Factor X  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (натрясти).
2. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6°С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1 ml)
2. кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл).
3. кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных 
Start=9s
lncub=60s
RunTime=180sec
Method=Coag Mix=0 Patient Def plasma=50ul
VoNIOul
CP=35pos
Pos=33
Math=LogXY Clean=0 Buffer=40ul 
Pos 39
R1=0ul
Sens=2 Т-согг=0 Clear=0ul R2=100ul
S-corr=0 Pos 25
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией.
46


--- стр. 47 ---
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
Tube S A R P (rn^ B yffer (m ^ A ctivity (% )
I 0.1 0.4 [00
2 0.1 0.9 50
3 OJ (.9 25
4 0.1 3.9 12.5
«I
Перемешайте. Не трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
19) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
20) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
21) инкубировать при 37°С течение 2 минут
22) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
23) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
24) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение конт^Голя, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазмы-калибратора/Ю)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие аналитические характеристики (каждая  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Ф
Тест-система "Дефицитная плазма по XI фактору (иммунозамещение)'  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
(Factor XI
I. ПрименениеФактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем, 
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в /о.
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к
47


--- стр. 48 ---
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1 Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
2. Другие компоненты набора.
Ка>кдый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
7. кат ном 5185 SARP (10 X 1мл)
8. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
9. кат ном 5491 APTT-Si (5 X 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37°С.
в наборе с реактивами. Предварительно
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
Tub e SARP(cnl) (tnf) A ctivity (% )
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 Г2.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
17. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
18. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
19. инкубировать при 37°С течение 2 минут
20. добавить 0.1мл реактива APTT-Si
21. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
22. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
23. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
24. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-кали6ратора/10) 'интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
48


--- стр. 49 ---
V
\
i
ш
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по XII фактору (иммунозамещение)" (Factor XII  
Deficient Plasma (Immunodepleted).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем, 
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
2. Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 х 1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов _
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6 С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20 С в течение 2 недель или при -70 О в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37 С. Не держать при 37 С более 5 минут.
V II Пошаговое руководство _Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37°С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
49


--- стр. 50 ---
T i * a SAR P(tnD A ctivity (% )
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 5 0
3 O.i 1,9 25
4 Q.l 3.9 I2.S
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера. 
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
25. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы 
добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля 
инкубировать при 37°С течение 2 минут 
добавить 0.1мл реактива APTT-Si 
инкубировать при 37°С в течение 5 минут 
добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
определить время образования сгустка для кахздого стандарта, контроля или образца
активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-кали6ратора/10) "интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или е6 представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по II фактору (донорная)" (Factor II Deficient  
Plasma (Congenital).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
k
50


--- стр. 51 ---
it
г
I
#
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (не трясти).
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP(10*1ml)
2. кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл).
3. кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
Start=9s
lncub=60s
RunTime=180sec
Method=Coag
Math=LogXY
Sens=2
Mix=0
Clean=0
T-corr=0 
S-corr=0
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией.
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
Patient
Voi=10ui
CP=35pos
Buffer=40ul
Pos 39
Ciear=0ui
Def plasma=50ui 
Pos=33
R1=0ul
R2=100ui 
Pos 25
ТхЛзт SA R P<m ^ Buffer (m l) A ctnnty (% )
I 0 .I 0.4 100
2 0 .I 0.9 so
3 0 .I 1.9 2S
4 0 .I 3.9 12.5
«
Перемешайте. He трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
2 5 )  в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
2 6 ) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
2 7 ) инкубировать при 37°С течение 2 минут
2 8 ) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
2 9 )  определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
3 0 ) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
51


--- стр. 52 ---
IX. Контроль качества
Ка>кцой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 ж  1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие аналитические характеристики (каждая  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Тест-система "Дефицитная плазма по V фактору (донорная)'  
Plasma (Congenital).
(Factor V Deficient
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (не трясти).
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1т1)
2. кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл).
3. кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li Й 0*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
52


--- стр. 53 ---
п
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
Def plasma=50ul 
Pos=33Start=9s Method=Coag Mix=0 Patient
VoNIOul
CP=35pos
lncub=60s Math=LogXY Clean=0 Buffer=40ul 
Pos 39
R1=0ul
RunTime=180sec Sens=2 T-corr=0
S-corr=0
Clear=0ul R2=100ul 
Pos 25
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
T u b e S A R P {m l) Suffer (rnf) A ctivity (% )
1 0.1 0.4 to o
2 OJ 0.9 50
3 OJ 1.9 2S
4 O J 3.9 12.5
?
I
Перемешайте. Не трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
3 1 )  в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
3 2 ) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
3 3 ) инкубировать при 37°С течение 2 минут
34) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
35) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
3 6 ) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1 мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие аналитические характеристики (каждая  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
53


--- стр. 54 ---
Тест-система "Дефицитная плазма по VII фактору (донорная)'  
Plasma (Congenital).
(Factor VII Deficient
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % . Определение 
дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет тест на ПВ. За  
дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь! Надевайте 
перчатки при работе с компонентами этого набора. Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической 
опасности и, в связи с этим, принимайте все меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были 
проверены на содержание антигенов к гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с 
ними следует обращаться с особой осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190. Приготовление.  
Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в течение 15минут. Перед 
использованием перемешать (не трясти).
Другие компоненты набора.  Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6°С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1 ml)
2. кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл).
3. кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Выполнение на приборе АС-4 (на 200 определений).
Для дополнительных инстоукций обоатитесь к руководству на прибор АС-4.
Start=9s Method=Coag Mix=0 Patient
Vol=10ul
CP=35pos
Def plasma=50ul 
Pos=33
lncub=60s Math=LogXY Clean=0 Buffer=40ul 
Pos 39
R1=0ul
RunTime=180sec Sens=2 T-corr=0
S-corr=0
Clear=0ul R2=100ul 
Pos 25
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
J ib e SARP (m l) Buffer (m ^ A ctivity {% )
1 0.1 0.4 100
1 0.1 0.9 so
3 0.1 L9 25
4 0.1 3.9 I I S
Перемешайте. Не трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
54


--- стр. 55 ---
Перемешайте. He трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
37) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
38) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
39)  инкубировать при 37°С течение 2 минут
40)  добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
41) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
42)  активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10) "интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие аналитические характеристики (кахедая  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Тест-система "Дефицитная плазма по VMI фактору (донорная)'  
Plasma (Congenital).
(Factor VIII Deficient
I
4
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем,  
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
55


--- стр. 56 ---
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 х 1 мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si 00 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 % или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37°С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
Tube SARF(mO Buffer (ml) Activity (%)
1 0.1 0.4 !00
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 Г2.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
33. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
34. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
35. инкубировать при 37°С течение 2 минут
36. добавить 0.1мл реактива APTT-Si
37. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
38. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
39. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
40. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-кали6ратора/10) * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 %.
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
56


--- стр. 57 ---
J
\
\
Тест-система "Дефицитная плазма по IX фактору (донорная)" (Factor IX Deficient  
Plasma (Congenital).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем,  
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 X  1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 X 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37"С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
Tube SARP (ml) Buff»- (ml) ArtMty(%)
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3,9 12.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера. 
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
41. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
57


--- стр. 58 ---
42. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
43. инкубировать при 37°С течение 2 минут
44. добавить 0.1мл реактива APTT-Si
45. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
46. добавьте 0.1 мл 25птМ раствора хлорида кальция
47. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
48. активность % стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность = (значение плазмы-калибратора/10) * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по X фактору (донорная)"  
Plasma (Congenital).
(Factor X Deficient
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Количественное определение 
индивидуальных факторов свертывания - одноэтапный метод, для которого требуется фактор-дефицитная плазма, которая 
будет измерена. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образование сгустка. Полученное время вы накладываете на калибровочный график и рассчитываете % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на ПВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная ллазма.
Получена из человеческой плазмы и содержат менее 1% активности фактора. Исключение: кат ном 5190.
Пригот овление.  Развести каждый пузырек в 1.0ml дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15минут. Перед использованием перемешать (не трясти).
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке набора. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов, если температуре хранения 2+6 С. 
При помещении на прибор АС-4 годен 4 часа (ЗЗпозиция, 15°С). Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, 
окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое отклонение от этого описания может говорить о том, что 
продукт испортился.
58


--- стр. 59 ---
t s .
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10*1 ml)
2. кат ном 5375 Буфер (10*25мл). 
кат ном 5488 Буфер (1*500мл).
3. кат ном 5265 Тромбопластин-Li (10*2.5мл) 
кат ном 5267 Тромбопластин-Li (10*5мл) 
кат ном 5269 Тромбопластин-Li (10*10мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 g в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в течение 2 
часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в течение одного 
месяца. Размораживать плазму для определения необходимо быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
ение на приборе АС-4 (на 200 определений).
)лнительных инструкций обратитесь к руководству на прибор АС-4.
Def
plasma=50ul
Pos=33
Start=9s Method=Coag Mix=0 Patient
Vol=10ul
CP=35pos
lncub=60s Math=LogXY Clean=0 Buffer=40ul 
Pos 39
R1=0ul
RunTime=180sec Sens=2 T-corr=0
S-corr=0
Clear=0ul R2=100ul 
Pos 25
Выполнение вручную.
Приготовьте и прогрейте реактивы в соответствии с инструкцией. 
Создание калибровочной кривой.
Приготовьте разведения в соответствии с таблицей.
T ii)e S A R P {m ^ A ctivity (% )
i 0.1 0.4 too
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 2S
4 0.1 3.9 12.5
Перемешайте. Не трясти!
Анализ плазмы пациента.
Смешайте 1часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешайте. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
43) в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
44) добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
45) инкубировать при 37°С течение 2 минут
46) добавить 0.2мл раствора тромбопластин-кальциевой смеси
47) определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
48) активность %  стандарта откложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполируйте значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислите точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректируйте значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-капибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX . Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы; 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 /о.
59


--- стр. 60 ---
XI. Аналитические характеристики
Компания Helena или её представители определили следующие аналитические характеристики (каждая  
лаборатория должна установить свои собственные):
линейность методики для определения факторов внешнего пути в преелах 10+150 % . 
воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Тест-система "Дефицитная плазма по XI фактору (донорная)"  
Plasma (Congenital).
(Factor XI Deficient
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем,  
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Пригот овление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 X  1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si ПО х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37“С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
Т|ЙН1 5АЙР(тО № fFer(iTil) А с М у  (% )
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 12.5
60


--- стр. 61 ---
Перемешать, Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
49. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
50. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
51. инкубировать при 37°С течение 2 минут
52. добавить 0.1мл реактива APTT-Si
53. инкубировать при 37'С в течение 5 минут
54. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
55. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
56. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Дефицитная плазма по XII фактору (донорная)'  
Plasma (Congenital).
(Factor XII Deficient
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одиоэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем, 
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
61


--- стр. 62 ---
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 X 1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-Si (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-Si (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-Si 00 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 % или 3.2 % цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70°С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-Si и раствор хлорида кальция при 37°С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
T u b e SARP{m O Buffer (mQ ArtiviQf {% )
1 0.1 0.4 100
2 0.1 0.9 50
3 0.1 1.9 25
4 O.i 3.9 12.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера.
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
57. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
58. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
59. инкубировать при 37°С течение 2 минут
60. добавить 0.1мл реактива APTT-Si
61. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
62. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
63. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
64. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-кали6ратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
f
62


--- стр. 63 ---
Тест-система "Дефицитная плазма по XIII фактору (донорная)" (Factor XIII Deficient  
Plasma (Congenital).
I. Применение
Фактор-дефицитная плазма предназначена для количественного определения соответствующего фактора у 
пациентов с подозрением на наличие врожденного или приобретенного дефицита этого белка. Для количественного 
определения индивидуальных факторов свертывания одноэтапным методом требуется плазма, дефицитная пофактору, 
которй нужно измерить. Разбавленная плазма пациента смешивается с фактор-дефицитной плазмой и определяется время 
образования сгустка. Уровень коррекции времени образования сгустка в плазме пациента сравнивают с уровнем, 
обеспечиваемым референсным материалом, что дает возможность определить активность плазмы пациента в % .
Определение дефицита факторов свертываемости можно проводить на любом анализаторе, который выполняет 
тест на АЧТВ. За дополнительными инструкциями обратитесь к руководству пользователя анализатора.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Фактор-дефицитная плазма.
Получена из человеческой плазмы и содержит менее 1% активности фактора.
Приготовление.  Развести каждый пузырек в 1.0мл дистиллированной воды. Плавно перемешать и дать отстояться в 
течение 15 минут. Перед использованием необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор-дефицитная плазма
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных ^на 
упаковке. После того, как реактив был разведен, он устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С.  
Лиофилизированный продукт должен выглядеть как сухой, окрашенный в желтоватый цвет плотный конгломерат. Любое 
отклонение от этого описания может говорить о плохом качестве продукта.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5185 SARP (10 X  1мл)
2. кат ном 5375 Вероналовый буфер (10 х 25мл) 
кат ном 5488 Вероналовый буфер (1 х 500мл)
3. кат ном 5491 APTT-SI (5 х 10мл) 
кат ном 5492 APTT-SI (10 х 10мл) 
кат ном 5508 APTT-SI (10 х 15мл).
VI. Забор и приготовление образцов
Используйте только пластиковые или стеклянные с силиконовым покрытием пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана с антикоагулянтом (1 часть) - 3.8 %  или 3.2 %  цитратом натрия. Отделите плазму после центрифугирования 
при 2000+3000 об/мин в течение 15 минут. Плазма должна храниться при 2+6°С. Тестирование должно быть закончено в 
течение 2 часов после взятия пробы, или плазма может быть заморожена при -20°С в течение 2 недель или при -70 С в 
течение одного месяца. Разморозить перед определением быстро при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовить все реактивы как указано в руководстве, содержащемся в наборе с реактивами. Предварительно 
прогреть реактив APTT-SI и раствор хлорида кальция при 37°С.
Построение калибровочной кривой.
Приготовить растворы SARP в вероналоого буфера по следующей схеме:
T u b * S A R P (flil) Buffer (mQ A ctivity (% )
1 0.1 0.4 too
2 0.1 0.9 5 0
3 0.1 1.9 25
4 0.1 3.9 12.5
Перемешать. Не трясти!
Пробоподготовка образцов.
Смешать 1 часть образца пациента или контроля с 4 частями Вероналового буфера. 
Перемешать. Не трясти!
Проведение анализа.
Все анализы следует проводить в дубле.
65. в реакционную пробирку поместить 0.1мл фактор-дефицитной плазмы
66. добавить 0.1мл стандарта, плазмы пациента или контроля
63


--- стр. 64 ---
67. инкубировать при 37°С течение 2 минут
68. добавить 0.1 мл реактива АРТТ-Si
69. инкубировать при 37°С в течение 5 минут
70. добавьте 0.1мл 25тМ раствора хлорида кальция
71. определить время образования сгустка для каждого стандарта, контроля или образца
72. активность %  стандарта отложить на оси X против среднего времени образования сгустка (ось Y) на  
миллиметровой бумаге (должна получиться прямая линия).
VIII. Интерпретация результатов
Интерполировать значения пациентов по калибровочной кривой. Вычислить точное значение пробы пациента или 
значение контроля, скорректировать значения плазмы по значениям калибратора следующим образом:
Истинная активность  = (значение плазмы-калибратора/10)  * интерполированное значение пациента или контроля.
IX. Контроль качества
Каждой лаборатории небходимо установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один 
нормальный и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильной работы анализатора и 
оператора. Если контроль качества не укладывается в установленные данной лабораторией пределы, то результаты нужно 
считать недействительными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы: 
кат ном 5301 SAC-1 (норма) (10 х 1мл) 
кат ном 5302 SAC-2 (патология) (10 х 1мл).
X. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые  
используются в лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждая лаборатория должна установить свой 
собственный референсный диапазон. Ожидаемые значения активности факторов лежат в диапазоне 50+150 % .
XI. Особенности
Компания Helena или её представители определили следующие характеристики:
Линейность фактора лежит в диапазоне 10+150 % .
Воспроизводимость для автоматических гематологических анализаторов < 5 % .
Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические данные.
Тест-система "Хромогенный Антитромбин (Ха) жидкий"  
(Chromogenic).
(Antithrombin Ха
I. Применение
Этот набор производства компании Helena предназначен для количественного определения активности антитромбина III 
(АТЗ). Исследование проводится на цитратной плазме, для определения используется хромогенный субстрат.
АТЗ - важный ингибитор свертывания крови, он ингибирует сериновые протеазы: факторы 1Ха, Ха, Х1а и тромбин. Его 
ингибирующая способность значительно усиливается в присутствии гепарина. Нехватка АТЗ может быть наследственной или 
приобретенной и значительно увеличивает вероятность тромбоза. Нехватка часто появляется при заболеваниях печени, 
две- синдроме, сепсисе, легочном эмболизме, нефротическом синдроме, инсульте и тромбоэмболизме.
Тесты для определения АТЗ, чаще всего, основаны на его способности инактивировать тромбин в присутствии гепарина. 
Относительно недавно было доказано, что метод, основанный на способности плазмы инактивировать фактор Ха в 
присутствии гепарина является более точным, так как это позволяет избежать интерференции из-за кофактора2 гепарина 
(этот кофактор не ингибирует фактор Ха).
В представленном 2х-ступечатом методе факторХа добавляется в разведенную плазму, содержащую АТЗ и избыток 
гепарина и кальция.
После инкубационного периода (ступень-1), остаток фактораХа определяется на специфичном для этого фактора  
хромогенном субстрате (ступень2). Остаточная активность фактора Ха обратно пропорциональна концентрации АТЗ.
II. Меры предосторожности
Регенты представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора. Внимательно ознакомьтесь с отметками о возможных 
опасностях и способах утилизации. В реагентах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. 
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры 
предосторожности.
III. Реактивы
Реагент, содержащий фактор Ха.
Содержит сухой бычий фактор Ха.
Пригот овление.  Добавьте во флакончик 10мл (кат ном 5502) или 2мл (кат ном 5507) дистиллированной воды. Оставьте на 
10 минут, а затем хорошо перемешайте.
Субстрат для фактора Ха.
Содержит замороженный и затем высушенный CH30CO-D-CHA-Gly-Arg-pNA*AcOH.
Пригот овление.  Добавьте 10мл (кат ном5502) или 2мл (кат ном 5507) дистиллированной воды. Оставьте на 10 минут и 
хорошо перемешайте.
Дилюент для проб.
Содержит 10мл (кат ном 5502) или 3мл (кат ном 5507) концентрата (с добавлением 0.1% натрия азида в качестве  
консерванта).
Пригот овление.  После смешивания с водой он будет содержать 0.05М Tris-HCI; 0.175М NaCI; 7.5mM МагЕОТА и натрия 
гепаринат при pH 8.4. Разводится дистиллированной водой в соотношении 1+4.
I
64


--- стр. 65 ---
■i
Другие компоненты побора.
Каждый набор содержит инструкцию по использованию,
IV. Хранение и стабильность
1. Фактор Ха реагент
Запечатанный реактив годен до окончания срока годности, указанного на этикетке. Разведенный реагент стабилен 2 месяца 
при температуре хранения 2+6 °С, 1 месяц при 17 °С и 7дней при 37°С.
2. Хромогенный субстрат для фактора Ха
Запечатанный реактив годен до окончания срока годности, указанного на этикетке. Разведенный реагент годен 2 месяца при 
2+6°С, 1 месяц при 17°С и 7 дней при 37°С.
3. Дилюент для проб  _ и
Запечатанный реактив годен до окончания срока годности, указанного на этикетке. Вскрытый флакон хранится при 2+6 С в 
течение 1 месяца. Плотно закручивайте крышку.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
(в зависимости от метода)
1. SARP кат ном 5185
2. Ледяная уксусная кислота
3. Спектрофотометр, работающий при длине волны 405нм.
4. Водяная баня (или сухая), поддерживающая температуру 37°С.
5. Таймер.
VI. Сбор и приготовление образцов
Кровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата 9:1. Натрия цитрат может быть 3.2 л или 
3.8%. Отцентрифугируйте кровь при 2000+3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6 С. Тесты 
должны проводится в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20 С в течение 2 недель или месяц 
при -70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут.
VII. Пошаговое руководство  
Ручной метод.
% АТ 3 Плазма Буфер
100% Юмкл калибратора 990МКЛ
50% 500МКЛ 100%разведения бООмкл
25% 500МКЛ 50%разведения 500м кл
12.5% бООмкл 25%разведения 500мкл
Пациент или контроль Юмкл плазмы 990МКЛ
Определение методом конечной точки.
В стеклянную или пластиковую пробирку добавить:
1. 200МКЛ калибратора/контроля или разведенной плазмы пациента.
2. инкубировать при 37°С 2-4 минуты.
3. 200М КЛ фактор Ха-реагента и перемешать.
4. инкубировать при 37°С ровно 1 минуту.
5. 200МКЛ факторХа-субстрата и перемешать.
6. инкубировать при 37°С ровно 3 минуты.
7. 200МКЛ ледяной уксусной кислоты (5 0 % ) и перемешать.
8. ‘Добавить 200М КЛ воды (при необходимости)
В результате Вы получите раствор желтого цвета, который стабилен в течение 4 часов. Считайте оптическую плотность при 
405 нм в кювете толщиной 1см. Из полученного результата нужно вычесть оптическую плотность бланка.
Бланк состоит из:
1) 200М КЛ уксусной кислоты
2) 200МКЛ разведения калибратора
3) 200МКЛ фактор Ха-реагента
4) 200МКЛ факторХа-субстрата
5) *200мкл воды (при необходимости)
* Некоторым спектрофотометрам необходим объем пробы не менее 1мл (в кювете).
Если плазма пациента имеет высокий уровень билирубина, то приготовьте бланк с заменой калибратора на плазму больного. 
Во избежание ошибок, не рекомендуется выполнять одновременно более 10 проб.
Кинетический метод.
Для этого метода требуется автоматический анализатор.
Процедура выполнения анализа:
1. В реакционную кювету добавить 200мкл разведенного стандарта или плазмы пациента
2. инкубировать при 37°С 1 минуту.
3. добавить 200М КЛ факторХа-реагента и перемешать.
4. инкубировать при 37°С 1 минуту.
5. добавить 200М КЛ факторХа-субстрата.
непрерывно измерять оптическую плотность при 405 нм в течение 1 минуты.
Калибровка.
Набор для калибровки: 5АКР(кат ном 5185).
Калибровочный график:
На миллиметровой бумаге отложите значения оптической плотности (ось Y), значения в процентах (ось X). Оцените 
пинейность графика и аппроксимируйте прямой линией. Результаты проб будут интерполироваться на этот график. Следует 
учитывать, что значение калибратора не равно 100%. Поэтому итоговое значение вычисляется по формуле: %АТЗ=(%АТЗ(по 
графику)*%АТЗ(калибратор))/100.
VIII. Контроль качества
65


--- стр. 66 ---
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть измерены 
нормальная и патологическая плазма, чтобы убедится, что реактивы годны и прибор исправен. Если измерения контролей не 
проводились, то все измерения признаются недостоверными.
Компания Хелена предлагает контрольные плазмы для теста АТЗ: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC2 .
IX. Ограничения
Избегайте образцов с высокими значениями липидов и билирубина. Не рекомендуется работать с сильно  
гемолизированными образцами. Для получения хорошей воспроизводимости строго соблюдайте все инструкции (точно 
соблюдайте время инкубации и температурный режим, используйте аттестованные пипетки).
X. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от используемой техники и методик. 
Поэтому каждая лаборатория должна сама устанавливать референсные значения. Для АТЗ диапазон нормальных значений 
равен 75%+125%. Уровень активности 30+60% встречается у пациентов с наследственной недостаточностью АТЗ. При 
некоторых заболеваниях уровень АТЗ снижается (приобретенный дефицит): заболевания печени, ДВС синдром,  
нефротический синдром, легочный эмболизм, инсульт, тромбофлебит. Прием оральных контрацептивов также может 
приводить к снижению уровня АТЗ.
XI. Аналитические характеристики
Компания Хелена или ее представители определили представленные аналитические характеристики, приводимые здесь в 
качестве примера. Каждая лаборатория должна устанавливать собственные характеристики.
Точность.
Приведенные коэффициенты вариации получены экспериментальным путем при работе на автоматическом анализаторе 
(кинетическим методом).
Воспооизводимость внутри одной серии Воспроизводимость в разных сериях
Уровень АТЗ CV(%) Уровень АТЗ CV(%)
п=20 Нормальная
плазма
1.36 п=10 Нормальная плазма 2.34
п=19 Патологичная
плазма
4.40 п=10 Патологичная
плазма
4.99
Чувствительность.
Эта методика определения АТЗ дает линейность в диапазоне; 7.5%+150%. Пробы с результатами выше 150/о должны быть 
разведены вручную вероналовым буфером и измерены заново.
Специфичность.
Специфичность для данного набора была установлена в результате проведения экспериментов, в которых использовали 
плазму, искусственно обедненную по АТЗ, а также очищенный АТЗ (так получали плазму с определенной концентрацией 
фермента АТЗ).
Было проведено сравнение данного набора (хромогенный субстрат для определения АТЗ) с другими наборами. Измерили 62
пробы со значениями в диапазоне (30+130% АТЗ) и получили следующие результаты
у=0.9665х+0.0629
г2=0.8893
Тест-система "Хромогенный фактор VIII" (Factor VllhC (Chromogenic).
I. Применение _ „Этот набор предназначен для количественного определения фактора VIII в плазме пациента. Для выполнения этого анализа
нужен спектрофотометр, работающий при длине волны 405 нм.
Гемофилия А - это заболевание, обусловленное недостатком фУ111. С помощью этого набора можно не только  
диагностировать это заболевание, но и определять степень его тяжести: не сильно выраженное заболевание 5+50/о от 
нормы
умеренно выраженное 1+5% от нормы
тяжелое заболевание <1% от нормы. „ „ ___
фУ111 - это белок системы свертывания, который обычно связан с фактором Виллебрандта. После активации тромбином, 
активированный фУШ начинает действовать как кофактор в реакции активации фХ (вместе с ф1Ха, гальцием и  
фосфолипидами). фХа расщепляет специфический хромогенный субстрат. Количество получившегося фХа прямо 
пропорционально изначальной концентрации фVIII. 
ф1Ха, кальций, фосфолипиды
фХ — -------------------------------------------------►  ФХа
фХа 
Субстрат Пептии pNa.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Информация по безопасности и способу утилизации отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
III. Реактивы
1. Фактор  Ха субстрат (6”2мл).
Каждый флакончик содержит лиофилизированный хромогенный субстрат.
66


--- стр. 67 ---
so
Приготовление.  Добавить 2мл деионизированной воды. Если жидкость мутная, то прогреть несколько минут при 37 С.
1. Фактор X  реагент (6*2мл).
Каждый флакон содержит бычий фХ 10 и консервант - натрия азид.
Приготовление.  Добавить 2 мл деионизированной воды.
2. Фактор  /Ха реагент (6*2мл).
Содержит ф1Ха, тромбин, кальция хлорид, фосфолипиды и натрия азид в качестве консерванта.
Приготовление.  Добавить деионизированную воду в соответствии с таблицей.
Вода мл Метод
2мл Кинетический
1мл Конечная точка
3. Буфер концентрированный для разведения плазмы  (6 ^.ьмл).
Концентрированный трис-буфер и натрия азид (консервант).
Приготовление.  Один флакон разводится в 50 мл деионизированной воды.
4. Другие компоненты набора.
Также в набор входит инструкция.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы годны до окончания срока годности, указанного на упаковке.
1. Фактор Ха субстрат
Разведенный реактив годен 2 месяца при температуре 2+6 °С.
2. Фактор X  реактив
Разведенный реактив стабилен 1 неделю при 2+6 °С.
3. Фактор 1Ха реактив
Разведенный реактив стабилен 8 часов при 2+6 °С или 1 неделю при -20°С.
4. Буфер для разведения плазмы. ^
Разведенный буфер стабилен 30 дней при температуре 2+6 °С или неделю при 15+30 С.
V. Забор и приготовление образцов
Кровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9; 1. Натрия цитрат может 
быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте кровь при 2000+3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при 
температуре 2+6 °С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента забора крови или плазму можно хранить при - 
20°С в течение 2 недель или месяц при -70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более 5 минут. Ложные 
результаты могут быть получены из-за загрязнения пробы тканевыми жидкостями. Старайтесь не трясти пробу, избегайте 
пузырьков и пены. Учитывайте влияние лекарственных препаратов.
VI. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. Спектрофотометр, работающий при длине волны 405 нм.
2. кат номер 5185 SARP.
3. Уксусная кислота (для выполнения анализа вручную).
VII. Пошаговое руководство 
Приготовление калибратора и плазмы пациента.
Приготовление осуществляется в соответствии с таблицей.
Калибратор Плазма Буфер
*200 25мкл SARPa + 2000 м кл буфера
100 500МКЛ 200% 
разведения*
+ 500 мкл буфера
0 + Только буфер
Пациент 25мкл плазмы + 4000 мкл буфера
В случае подозрения на недостаток фУ111 или если результаты оказались менее 50% от нормы., то следует смешать 25мкл 
плазмы и 2мл буфера, и полученный результат поделить на 2. Если исследуется плазма больного, принимающего препарат 
«Криопреципитат» и ожидается высокая концентрация фУ111, то изначально нужно развести плазму буфером, так чтобы 
результат был в диапазоне 0+200%. Важно! 1 U/ml фУ111 = 100%.
Последовательные разведения нужно делать, как предписано для плазмы пациента. Полученный результат нужно  
умножать только на начальный фактор разведения.
Выполнение анализа вручную, метод «конечной точки».
•| 0 пробирку (стеклянную или пластиковую) внести ЮОмкл разведенного буфером калибратора или разведенной
плазмы.
2. Инкубировать 2 минуты при 37 С.
3. Добавить Ю Омкл реактива ф1Ха и перемешать.
4. Инкубировать 2 минуты при 37°С.
5. Добавить 200М КЛ реактива фХ и перемешать.
6. Инкубировать при 37°С 4 минуты.
7. Добавить 200М КЛ фХа субстрата и перемешать.
8. Инкубировать при 37°С 4 минуты.
9. Добавить 200МКЛ 5 0 %  уксусной кислоты и перемешать.
10 'Добавьте, при необходимости, 200мкл воды
Считайте оптическую плотность при 405нм в 1-см кювете. Также считайте бланк (деионизированная вода).
* Некоторые спектрофотометры требуют минимум 1мл жидкости.
Отметим, что при выполнении этих шагов недопустима ошибка более чем на 5 секунд. В связи с этим, не рекомендуе с 
выполнять одновременно более 10 проб.
67


--- стр. 68 ---
Кинетический метод.
Обратитесь к инструкции пользователя для выполнения этого теста на автоматическом анализаторе.
Калибровочный график.
По оси Y отложить оптическую плотность, по оси X - проценты активности фактора. Если изначально не учитывалось, что 
калибратор не равен 100%, то результат следует пересчитать следующим образом:
Конечный результат%=3начение, полученное при наложении *3начение клибратора/100.
Пример: Ваш результат 110%, значение калибратора 96%, для получения конечного результата нужно 110 умножить на 0.96. 
Данный калибровочный график представлен здесь в качестве примера. Нельзя его использовать для Ваших расчетов.
Sample Calibration Curve
VIII. Интерпретация результатов
Количество фУ111 уменьшается при гемофилии А, которая может быть: тяжелая (фУ111<1%), умеренная (1+5%), слабая 
(5+50%),
Увеличение наблюдается при приеме пероральных антикоагулянтов, кортикостероидов, пероральных контрацептивов, при 
беременности и при воспалении. Существенные физические нагрузки и стресс также способствуют увеличению р
концентрации фУ111.
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть измерены 
нормальная и патологическая плазма, чтобы убедиться, что реактивы пригодны для измерений и прибор исправен. Если 
измерения контролей не проводились, то все полученные результаты за этот день признаются недостоверными.
Компания Helena предлагает контрольные плазмы для теста фУ111:
1) . кат ном 5301 SAC1 (10x1 мл).
2) . кат ном 5302 SAC2 (10x1 мл).
X. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от используемой техники и реактивов. По 
этой причине каждой лаборатории следует установить эти значения самостоятельно. Диапазон нормальных значений 
составляет 50+150% (0.5+1.5 ед.) в плазме.
XI. Ограничения
Если пациент имеет ингибиторы (антитела) к фУ111 (это приобретенное заболевание), то результаты будут ложно низкими. 
Волчаночные антитела могут блокировать фосфолипид-зависимую активацию фХ. В таком случае, оценить фУ111 
хромогенным методом невозможно.
Физическое истощение и стресс могут повышать уровень фУ111. ’
Для получения точных и воспроизводимых результатов используйте точные приборы и строго соблюдайте временной и 
температурный режимы.
XII. Аналитические характеристики
Компания Helena приводит данные аналитические характеристики в качестве примера. Вы должны устанавливать их сами. 
Выполнение вручную.
Специфичность.
Высокая специфичность обусловлена использованием очищенного бычьего ф1Ха, который, как известно, катализирует 
активацию очищенного фХ в присутствии человеческого фVIII. Также, специфичность обусловлена использованием 
высокоспецифичного к фХа хромогенного субстрата. В состав хромогенного субстрата включен мощный трипептидный 
ингибитор тромбина (это позволяет инактивировать случайно образовавшийся тромбин).
Корреляция с другим методом (набор реактивов другой фирмы).
¥
Y »  I .0 4 X  +  0.31 Y  =  C h ro m  2  F acteur V llh C
г  =  0 ,9 8 7 X  =  M e th o d e  d e  referen ce
Точность.
Фактор 8 Одна аналитическая серия Разные аналитические серии
100% 1.9% 5.6%
53% 3.3% 6%
Чувствительность.
Этот набор дает линейность в диапазоне 0+200%. 
Автоматический коагулометр PACKS-4. 
Точность.
В одной аналитической серии.
68


--- стр. 69 ---
3f
в разных аналитических сериях.
N  =  24  
Х= 1Ю.8 
E ca rt-ty p e  =  
C V %  =  7 ,7
8 ,5
Сравнение с другим референсным набором реактивов.
п * 4 7 Y  =  C h ro m  Z  F a c c e u r'^ ll:C
Y  =  0 .9 5 6 Х  -1 - 4 .4 
г  -  0 ,9 7
X  =  Referience
Тест-система "Хромогенный гепарин жидкий" (Heparin Anti-Xa (Chromogenic).
I. Применение
Реактив Chrom Z-Heparin предназначен для количественного определения гепарина и низкомолекулярного гепарина 
в плазме крови человека хромогенным методом.
Реактивы пригодны для использования совместно со спектрфотомером, измеряющим поглощение на длине волны 405нм или 
с любым другим хромогенным анализатором.
Антитромбин III (АТЗ) является основным ингибитором тромбина, фактора Ха и других коагулогических ферментов в 
плазме крови. Обычно медленная скорость ингибирования может быть значительно увеличена присутствием гепарина. 
Низкомолекулярные терапевтические образцы гепарина катализируют реакцию фХа-АТЗ лучше, чем реакцию тромбин-АТЗ. 
Обычный гепарин катализирует обе реакции одинаково. Таким образом, тест с ингибированием фХа является наиболее 
удобным для исследования широкого спектра препаратов терапевтического гепарина.
В случае избытка фХа и АТЗ, скорость ингибирования фХа прямо пропорциональна концентрации гепарина. ФХа 
катализирует высвобождение паранитроанилина из субстрата на фХа. Остаточная активность фХа обратно  
пропорцианальна концентрации гепарина.
Гепарин + АТЗ (в избытке) 
[Гепарин-АТЗ] + фХа (в избытке) 
Субстрат фХа оставшийся
ГГепа^н-АТЗ)
ГГепау1н-АТЗ-ФХа1 + фХа оставшийся 
Пептид + pNa
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности и способу утилизации.
III. Реактивы
реактив фХа.
Каждый флакон содержит лиофилизованный бычий фХа с добавкой азида натрия в качестве консерванта.
Приготовление.  Кахедый флакон растворить в 2мл дистиллированной воды. 
субстрат на фХа.
Каждый флакон содержит лиофилизованный MeO-CO-D-CHG-Gly-Arg-pNa.
Приготовление.  Кахщый флакон растворить в 2мл дистиллированной воды.
Антитромбин III.
Каждый набор содержит буферный раствор АТЗ, очищенного из плазмы крови человека с добавлением азида натрия как 
консерванта.
Приготовление.  Каждый флакон разбавить в 1,5мл дистиллированной воды.
4. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
1. реактив фХа ^ ^
Разведенный реактив годен к применению в течение 2 недель при температуре хранения 2+6 С, 1 месяца при -20 С.
2. субстрат на фХа
Разведенный реактив годен к применению в течение 2 месяцев при температуре 2+6 С или 6 месяцев при температуре - 
20°С. Не перемораживать!
3. Антитромбин III  л
Разбавленный раствор стабилен в течение 2 недель при температуре хранения 2+6 С, 1 месяца при -20 С.
69


--- стр. 71 ---
Бланк приготовить по следующей схеме:
1) 75мкл лимонной кислоты
2) 75м кл АТЗ
3) 25мкл Norm-Trol или плазмы пациента
4) 75мкл фХа
5) 75мкл субстрата на фХа
Ознакомьтесь с замечаниями, относящимися к образцам иктеричной плазмы в случае полу-микро метода. По 
крайней мере, 10 измерений следует произвести одномоментно, используя один и тот же таймер для регулирования шагов 
пипетирования с 5-секундным интервалом.
Кинетический
PACKS-4: Обратитесь к
метод.
эуководству пользователя для получения детальных инструкций.
Реактив Объем, мкл Время, мин:сек
образец 75 03:00
фХа 75 00:40
субстат 75 01:00
Калибровочная кривая.
Построить график зависимости величины поглащения, полученной для каждого разведения референса гепарина от 
%  концентрации гепарина. Гепарин в образцах плазмы пациента может быть определен интерполяцией, используя 
калибровочную кривую (смотри ниже пример калибровочной кривой). Калибровочная кривая, использованная в качестве 
примера, была построена с использованием референса гепарина, выделенного из слизистой свиньи. Перед каждым 
измерением необходимо строить новую калибровочную кривую.
Пример калибровочной кривой
гепарин, ед/мл
VIII. Интерпретация результатов
В силу того, что данный тест используется для мониторирования пациентов, интерпретация результатов является 
клиническим заключением, сделанным лечащим врачом, опирающимся на специально подобранное время забора образцов 
для измерения, рекомедованное производителем гепарина.
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы, доступные для использования с данным набором 
реактивов:
кат ном 5189 Нер-Тго1.
В качестве альтернативы, можно использовать замороженный при -70°С пул нормальных плазм, содержащих 0.5 и 
0.1 ед/мл гепарина, соответственно. Контрольные образцы должны быть измерены на свежеприготовленных реактивах и, по 
крайней мере, раз в неделю впоследствии. Контроли гепарина 0.5 и 0.1 ед/мл должны мерять в пределах 0.43+0.57 ед/мл и 
0.08+0.12 ед/мл гепарина, соответственно. Если качество контрольных образцов не обеспечивает измерение концентраций 
гепарина в указанных пределах хотя бы в одном измерении, то измерения следует переделать на свежеприготовленных 
реактивах.
X. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от 
используемых методов и анализаторов. В связи с этим, каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений.
Для достижения оптимального эффекта с минимальным риском кровотечений, активность гепарина должна лежать 
в области, рекомендованной производителем гепарина. Для забора образцов должны выбираться специальные моменты 
времени, также установленные производителем гепарина.
71


--- стр. 72 ---
XI. Ограничения
Различия в приготовлении гепарина могут приводить к разным наклонам референсной кривой. Это особенно 
справедливо для низкомолекулярного гепарина по сравнению с обычным гепарином. При построении референсной кривой 
следует использовать тот же гепарин, который используется при терапии пациента.
Иктеричность плазмы может повлиять на результаты измерений. В этом случае, чтобы вычесть вклад, привносимый 
иктеричностью плазмы, следует приготовить отдельный бланк, с использованием плазмы пациента.
Наличие остаточных тромбоцитов в образцах плазмы, особенно после заморозки-разморозки, может привести к 
высвобохаденияю тромбоцитарного фактора IV, который является сильным гепарин-нейтрализующим белком. Это может 
привести к недооценке концентрации гепарина. Смотри раздел «сбор образцов».
Для получения точных и воспроизводимых результатов, используйте точные пипетки и следуйте рекомендованным 
процедурам, с особенным вниманием относясь ко времени и темпераруре инкубации.
XII. Аналитические характеристики
Представленные измерительные характеристики были определены компанией Helena или их представителями как 
пример. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Ручной метод.
Сравнение.
Корреляция между Chrom Z-Heparin и референсным набором для хромогенного определения гепарина; 
п 15
Y 0.969 + 0.06 Х=референс
г 0.975 Y=Chrom Z-Heparin
Точность.
Приведенные оценки точности были получены с использованием метода конечной точки.
Измерение№1 Измерение№2
n 8 7
X 0.41ед\мл 0.40 ед\мл
SD 0.02 0.03
%CV 5.14 6.82
N 15
X 0.40 ед\мл
SD 0.02
%CV 6.12
Чувствительность.
Chrom Z-Heparin обеспечиает линейность теста в области концентраций гепарина 0+0.8 ед\мл.
Специфичность.Специфичность метода обеспечивается использованием очищенного бычьего фХа и очищенного человеческого 
АТЗ, которые, как известно, в присутствии гепарина способны быстро образовывать неактивный комплекс. Кроме того, 
хромогенный субстрат, используемый для определения остаточной активности фХа высоко специфичен относительно фХа. 
PACKS-4.
Точность.
Внутри аналитической серии.
Измерения проводились на нормальном контроле с повторениями, получены следующие результаты:
п 8
X 0.41
SD 0.03
CV, %  7.1
Между аналитическими сериями.
Выше описанные измерения были произведены еще для 2 аналитических серий. Общие данные всех трех измерении
выглядят следующим образом;
п 24
X 0.43
SD 0.03
CV, %  6.9
Сравнение.Сравнение было произведено на 52 нормальных и абнормальных образцах. Образцы, тестированные методом 
Chrom Z-Heparin и референсные материалы дали следующие результы: 
п 52
Y 0.92Х + 0.07 Х=референс
г 0.923 Y= Chrom Z-Heparin
S T A R T = S s H E T H O D = C h r o m M I X - 0 P A T IE N T  (Pat)  
v o l—
poe— 36 (C P )
A n tith ro m  III (D P )  
V o l-4 5 /u L  
Pos— 34
IN C U B = l2 0 s H A T H = lin C L E A N - 0 B U F F E R  (B U F ) 
V d - O p L
Factor X a  ( R l)  
V o l-S O fiL  
Pos— 37
R U N T IM E = 9 0 s S E N S - 0 T - C O R R - 0
S - C O R R - 0
C L E A R  (CLFQ 
V o l- O p L
F acto r X a  Substrate (R 2)  
V o l— SO^L 
Pos— 38
’
72


--- стр. 73 ---
■ т
i
Тест-система "Хромогенный Протеин С" (Protein С (Chromogenic).
1. Применение
Этот набор предназначен для количественного определения протеина С (ПрС) в плазме крови человека. В этой 
методике используется хромогенный субстрат.
Протеин С - это витамин К зависимый белок, который играет важную роль в противосвертывающей системе. Он 
ингибирует активированные ф\/ и ф\/111 или, будучи сам активирован, стимулирует фибринолиз. В активированное состояние 
он переходит под действием тромбина (в присутствии тромбомодулина). Недостаточность ПрС (наследственная или 
приобретенная) является серьезным фактором риска в развитии венозных тромбозов.
В этой методике ПрС активируется ядом змеи (Agkistrodon contortrix). Количество активированного ПрС определяется через 
мониторирование степени гидролиза специфического хромогенного субстрата. Количество образующегося  
паранитроанилина (pNA) прямо пропорционально количеству ПрС (измерение проводят при длине волны 405нм).
II. Меры предосторожности
Реагенты из этого набора предназначены только для In vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с любым компонентом набора.
Обращайте внимание на предупреждающие значки на флаконах и на упаковке.
III. Реагенты
7. Протеин С субстрат.
Каждый флакон содержит 2.75 мкМ лиофилизированного хромогенного субстрата.
Приготовление.  Добавьте 2мл специального дилюента из этого набора. Если есть мутность, то прогрейте несколько минут 
при 37°С.
2 . Протеин С активатор.
Каждый флакон содержит 0.8 единиц активатора из яда змеи (ПРОТАК).
Приготовление.  Добавьте 2мл дистиллированной воды.
3. Протеин С дилюент.
Каждый флакончик содержит трис буфер с натрия азидом в качестве консерванта.
Приготовление.  Готов к использованию.
4 . Инструкция для набора.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы стабильны до окончания срока годности, указанного на упаковке.
7. Протеин С субстрат  ^
Разведенный реагент стабилен 1 неделю при температуре 2+6°С или месяц при -20 С.
Его позиция на АС-4 =27. В ней при 37°С он стабилен 6 часов.
2. Протеин С активатор.
Разведенный реагент стабилен 1 неделю при 2+6°С или месяц при -20 С. Его позиция на АС-4 =30. В ней он стабилен 6 
часов.
3. Протеин С дилюент.
Хранить при 2+6°С.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. Калибратор SARP (кат ном 5185)
2. Коагулометр или спектрофотометр, способный работать при длине волны 450нм.
3. Ледяная уксусная кислота
4. таймер (при ручной методике выполнения).
VI. Сбор и приготовление образцов
Кровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата — должно быть 9:1. Натрия цитрат 
может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте при 2000+3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться ^при 
температуре 2+6°С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20 С в 
течении 2 недель или месяц при -70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37 С более 5 минут. Ложные  
результаты могут быть получены из-за загрязнения пробы тканевыми жидкостями. Старайтесь не трясти пробу^ избегайте 
пузырьков и пены. Учитывайте влияние лекарственных препаратов. Для разведения плазмы используйте только  
физиологический раствор.
VII. Пошаговое руководство
Разведение калибратора, % Плазма, мкл Буфер (физ-раствор), мкл
100 100 SARP +300 физ р-ра
50 50 SARP +350 физ р-ра
0 +400 только физ р-ра
Пациент 100 плазмы больного +300 физ р-ра
Важно; используйте только 0.85% NaCI для разведений.
Выполнение анализа на прибое АС-4, (набора хватит на 250 определений).  
Для получения полной информации обратитесь к инструкции на АС-4. 
Приготовьте все реагенты как указано в инструкции.
73


--- стр. 74 ---
S T A R T = 3 3 s M E T H O D = ^ C h ro o T M I X = 0 P A T IE N T  (P a t) 
v o I = I 2)JL 
p o s = 3 5  (C P )
D e f. Plasm a (D P )  
V d ^ Q ^ L
IN C U B = 3 0 0 s M A T H  =  lm C L E A N  = 0 B U F F E R  (saline)
V o l = 3 ^ L
P o s = 3 9
P C  A c trv a to f ( R l)
V o )= 4 8 )./L
P o s = 3 0
R U IM T IH E = l8 0 s S E N S = 0 T - C O R R = 0
S -C O R R = 0
C L E A R  (C L R ) 
V o l= Q u L
P C  S u b strate (R 2 )  
У о 1 = 4 8 д 1 
Pos =  27
I
Ручной метод (метод конечной точки).
В пластиковую или стеклянную пробирку:
1) Добавьте Ю Омкл калибратора или разведенную плазму пациента.
Инкубируйте при 37°С 2 минуты.
Добавьте 200мкл активатора и перемешайте 
Инкубируйте при при 37°С 5 минут.
Добавьте 200мкп ПрС субстрата и перемешайте.
Инкубируйте при 37°С 10 минут.
Добавьте 200 мкл уксусной кислоты и перемешайте.
*При необходимости добавьте 200мкл воды.
Считайте оптическую плотность при длине волны 405 нм в кювете толщиной 1 см (также считайте бланк- деионизированную 
воду).
‘Некоторые спектрофотометры требуют минимальный объем 1 мл. Отметим, что не следует ошибаться при выполнении этих 
шагов более чем на 5 секунд. В связи с этим, не рекомендуется выполнять одновременно более 10 проб.
2)
3)
4)
5)
6)
7)
8)
Кинетический метод.
Для этого требуется автоматический анализатор. Для более подробной информации обратитесь к инструкции на прибор. 
Калибровочная кривая.
По оси Y откладывайте оптическую плотность, по оси X - %ПрС .
Ели Вы изначально не учитывали, что калибратор не равен 100%, то пересчитайте результаты следующим
образом:
Конечный рвзультат%  = Значение, полученное при наложении  * Значение клибратора/100.
Например, если Ващ результат 110%, а значение калибратора =96%, то просто умножьте 110 на 0.96. Представленный 
калибровочный график приведен в качестве примера. Нельзя его использовать для Ваших расчетов.
VIII. Интерпретация результатов
Недостаток ПрС (как приобретенный так и наследуемый) может приводить к серьезным тромботическим 
заболеваниям, таким как: тромбофлебит, глубокий тромбоз вен и легочный эмболизм. Приблизительно 2+8% от всего числа 
пациентов с венозным тромбозом (возраст менее 40+45 лет)имеют недостаточность ПрС. При вро>еденной недостаточности 
тромбозы начинаются с юности. Первый раз это заболевание проявляется в связи с травмой или сильным стрессом. 
Распространенность этого заболевания -1 случай на 300 человек или 0,33%.
Приобретенная недостаточность.
Снижение количества ПрС наблюдается в следующих случаях:
-заболевания печени: гепатит и цирроз.
-ДВС-синдром.
-терапия пероральными антикоагулянтами (в этих случаях интерпретация результатов усложняется)
Наследственная недостаточность.
Два типа недостаточности:
- количественная (тип 1)-уменьшается не только количество ПрС но и его качество.
- качественная (тип2) -при ней снижается качество ПрС, а количество может быть в норме или уменьшенным.
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть 
измерены нормальная и патологическая плазма, чтобы убедиться, что реактивы не пригодны и прибор исправен. Если 
измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными. Компания Helena 
предлагает контрольные плазмы этого теста: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC2.
f
74


--- стр. 75 ---
X. Ограничения
Если плазма гемолизированная или с высоким значением билирубина и липидов, то следует использовать 
специальный бланк. Бланк нужно делать также в случае подозрения на факторы контактной активации (например, ДВС 
синдром) или в случае приема пациентом пероральных антикоагулянтов (может случиться холодовая активация). Бланк - это 
смесь из реактивов и плазмы, где активатор ПрС заменен на физиологический раствор. После проведения анализа, вычтите 
из полученной оптической плотности оптическую плотность бланка. В обычных условиях ПрС активируется тромбином в 
присутствии тромбомодулина. Чисто теоретически, можно предположить, что в некоторых случаях ПрС будет хорошо 
активироваться Протаком и расщеплять хромогенный субстрат, но in-vivo будет дефектным.
Для получения точных и воспроизводимых результатов используйте аттестованные пипетки и строго следуйте 
указанным шагам проведения анализа (это особенно важно для времени и температуры инкубации).
XI. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от техники и реактивов. В связи с 
этим, каждая лаборатория должна устанавливать свои собственные референсные значения для здоровых людей. Активность 
ПрС (выражается в %) сравнивается с пулом плазм здоровых людей. Референсные значения приблизительно  
соответствуют диапазону 65+145%. У пациентов, принимающих антикоагулянты, эти цифры должны быть снижены. 
Референсные значения не различаются у мужчин и женщин. Компания Heiena протестировала 17 плазм предположительно 
здоровых людей (мужчин и женщин) на приборе АС-4 и получила следующие результаты:
Х=105% среднеквадратическое отклонение=26.6
реф знач=61.2-162.9%
XII. Аналитические характеристики
Аналитические характеристики предоставляются только для примера. Для своей лаборатории Вы должны рассчитать их 
сами.
Специфичность.
Для проверки специфичности брали плазму без ПрС и добавляли в нее различные концентрации ПрС, затем анализировали 
плазму набором реактивов Helena. Установили высокую специфичность.
Точность.
в одной аналитической серии: оценивали контрольные плазмы.
N=10 Х=68.5
SD=1.7 CV%2.5
В разных аналитических сериях: анализировались контрольные плазмы. Всего было три аналитических серии. 
п=18 Х=45.3
SD=1.2 CV%=2.6
4
Тест-система "Хромогенный Плазминоген" (Plasminogen (Chromogenic).
I. Применение
Реактив Chrom Z-PLG предназначен для количественного определения плазминогена в плазме крови человека 
хромогенным методом.
II. Введение
Плазминоген (ПГ) является предшественником фибринолитического фермента плазмина. В присутствии избытка 
стрептокиназы образуется комплекс, который катализирует реакцию расщепления субстрата с высвобгокдением  
паранитроанилина (pNA).
Уровень плазминогена может быть пониженным по причине врожденного или приобретенного дефицита, такого как 
первичный или вторичный фибринолиз. Угнетение плазминогена также имеет место во время тромболитической терапии, но 
самой распространенной причиной является диссиминированное внутрисосудистое свертывание (ДВС).
III. Принцип метода
Комплекс плазминоген-стрептокиназа катализирует реакцию высвобождения (pNA) из хромогенного субстрата.1,2 
Уровень активности может быть измерен фотометрически по поглощению на длине волны 405нм и прямо пропорционален 
количеству плазминогена, присутствующему в образце. Активность может отслеживаться как методом начальной скорости 
расщепления, так и методом, при котором используется остановка реакции кислотой. Ферментативная активность не 
чувтвительна к плазменным ингибиторам [2,3].
IV. Меры предосторожности
Регенты представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора. Человеческий альбумин, используемый в наборе, 
был проверен на содержание антигенов к гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не 
менее, с растворенным реактивом следует обращаться с той же осторожностью, что и с сывороткой пациента. Буфер для 
плазминогена содержит азид натрия, который может прореагировать со свинцовыми или медными канализационными 
трубами с образованием нароста азидов металлов. Материалы, сливаемые в раковину, должны быть смыты большим 
количеством воды для предотвращения азидного нароста.
V. Реактивы
СтрептокиназныО реактив.
Содержит Ю ОООед. лиофилизованной стрепокиназы с содержанием менее 1% альбумина как стабилизатора.
Приаотовление.  Развести содержимое каждого флакона в 2мл дистиллированной воды.
Субстрат на плазмин.
Содержит Змкмоль лиофилизованного D-But-CHT-Lys-pNA.2AcOH.
Приготовление.  Развести содержимое каждого флакона в 2мл дистиллированной воды.
Буфер для плазминогена. (ПГ-буфер)
75


--- стр. 76 ---
1.
2.
3.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
1 ).
Буфер является 10-кратным концентратом. После разбавления буфер содержит бОмМ Tris-HCI, 1 ЮмМ NaCI и азид натрия. 
Приготовление.  Разбавить буфер 1:10 дистилированной водой (1 часть буфера + 9 частей воды).
VI. Хранение и стабильность
Стрептокиназный реактив
Стрептокиназный реактив стабилен до истечения срока годности, указанного на этикетке, при температуре хранения 2+6°С. 
Разведенный реактив можно использовать в течение 1 недели при хранении в условиях 2ч-6°С или 1 месяца в условиях - 
20°С.
Субстрат на плазмин
Субстрат стабилен до истечения срока годности, указанного на этикетке, при температуре хранения 2+6°С. Разведенный 
реактив можно использовать в течение 1 недели при температуре хранения 15+30°С, 2 месяцев при хранении в условиях
2-I-6 С или 6 месяцев в условиях -20 С. Не перемораживать!
Буфер для плазминогена
Буфер стабилен до истечения срока годности, указанного на этикетке, при температуре хранения 2+6°С. После разбавления 
буфер можно использовать в течение 1 недели при температуре хранении 15+30’’С или 1 месяца при температуре хранения 
2+6°С.
VII. Необходимое, но не поставляемое оснащение
Реактивы теста Chrom Z-PLG подходят для использования на спектрофотометре, способном измерять поглощение 
на длине волны 405нм или на анализаторе PACKS-4 (кат ном 1471).
VIII. Сбор и приготовление образцов
Плазма, полученная из цельной крови, заготовленной на 3,8% цитрате натрия в качестве антикоагулянта, является 
препочтительной. Кровь может быть собрана в вакутейнеры, техникой 2х шприцов или с помощью иголки-бабочки и шприца.
Достоверность коагулогических исследований зависит от правильного соотношения цельной крови и  
антикоагулянта. Для образцов крови с гематокритом (НСТ) 40+50% (норма), 9 частей свежесобранной цельной крови должно 
быть немедленно добавлено к 1 части антикоагулянта. Для образцов крови с гематокритом, вне нормальной области, 
количество цельной крови, добавляемое к антикоагулянту, должно быть рассчитано по следующей формуле:
Частей цельной крови на 1 часть антикоагулянта  = 0,6х9/(1-НСТ).
Специальное внимание должно быть уделено использованию вакутейнеров. Эти пробирки сконструированы для 
забора 9 частей крови на 1 часть антикоагулянта. Если гематокрит ненормален, кровь должна быть забрана в шприц и 
соответствующее количество смешано с подобранным объемом цитратного антикоагулянта.
Приготовление образцов: Отцентрифугировать цельную кровь при оборотах 3000 * g в течение 10 минут для 
получения бедной тромбоцитами плазмы. Немедленно отделить плазму от клеток крови и поместить в пластиковую пробирку 
с крышкой. Определения следует произвести в течение 2 часов. Если тесты не делаются непосредственно сразу, плазму 
следует хранить в пластиковой пробирке с крышкой при температуре 2+6°С. Если измерения откладываются более чем на 2 
часа, плазма может храниться при температуре -20°С до 1 месяца. Размораживать быстро при 37°С перед проведением 
измерений, но не держать при 37°С более 5 минут.
Недостоверные результаты могут быть вызваны примесями тканевых или застойных жидкостей. Иктеричные, 
гемолизированные или липиемичные образцы могут повлиять на результаты тестов. Избегать встряхивания, образования 
воздушных пузырей и вспенивания. Для ознакомления с эффектами, имеющими место при применении обычных лекарств, 
обратитесь к ссылке 6.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
X. Пошаговое руководство
Приготовление образца и контроля.
Приготовить SARP-плазминогеновый референс и образцы плазмы пациента по следующей схеме: 
|100%* Ю Омкл S.A.R.P. +500М КЛ ПГ-буфера
стандарт 150% 200 мкл 100%-реф. р-ра* +200мкл ПГ-буфера
|0 %
пациент ЦЮ Омкл плазмы
ТОЛЬКО ПГ-буфер 
+500М КЛ ПГ-буфера
Метод конечной точки.
В стеклянную или пластиковую пробирку добавить:
200М КЛ разведения референса или образца плазмы
Инкубировать при 37°С в течение 2+4 минут
200МКЛ стрептокиназного реактива
Перемешать и инкубировать при 37°С в течение 2 минут
200МКП субстрата на плазмин
Перемешать и инкубировать при 37°С в течение 1 минуты 
200М КЛ ледяной уксусной или 2 %  лимонной кислоты, перемешать 
при необходимости добавить 200мкл воды 
Измерить поглащение на длине волны 405 нм в 1-см кювете против бланка. 
Приготовить бланк по схеме:
200МКЛ ледяной уксусной или 2% лимонной кислоты
1
IX. Требуемое, но не поставляемое оснащение
Коагулогическое оборудование: анализатор PACKS-4 (кат ном 1471).
Пипетки на 100, 200 и 500мкл
Референсная плазма: SARP (кат ном 5185); нормальная человеческая плазма, испытанная по стандартам ВОЗ или 
стандартам Национального Совета по Биологическим Стандартам (NIBSC).
Контрольные плазмы: SAC-1 (кат ном 5301), SAC-2 (кат ном 5302).
Центрифуга.
Оснащение для забора крови (описано выше).
Ледяная уксусная кислота или 2% лимонная кислота.
Спектрофотометр (405нм).
Водяная баня или сухой шкаф на 37°С.
Таймер.
76


--- стр. 77 ---
200М КЛ разведения референса 
200М КЛ стрептокиназного реактива 
200М КЛ субстрата на плазмин
200МКЛ воды (при неоходимости, т.к. для некоторых спектрофотометров требуется 1  мл воды)
Для референсов и образцов плазмы пациента нужен один бланк. Однако, если плазма пациента сильно иктерична, 
то необходимо приготовить другой бланк, содержащий разведенную плазму пациента вместо стандартного раствора, и 
полученное значение поглащения следует вычесть из результатов измерения плазминогена.
По крайней мере 10 измерений следует произвести одномоментно, используя один и тот же таймер для регулирования шагов 
пипетирования с 5-секундным интервалом.
Кинетический метод.
Ручной метод.
Для измерения начальной скорости гидролиза хромогенного субстрата может быть использован кинетический 
анализатор.
Использовать следующую процедуру:
Смешать Юмкл разведенной (референсной или тестируемой) плазмы и буфер для плазминогена (ПГ-буфер)
Инкубировать при 37°С в течение 2+4 минут
Добавить ЮОмкл стрептокиназного реактива
Перемешать и инкубировать при 37Х в течение 1 минуты
Добавить ЮОмкл субстрата для плазмина
Измерить скорость изменения поглащения на длине волны 405нм.
Автоматизированный метод. PACKS-4.
Обратитесь к руководству пользователя вашего оборудования для получения детальных инструкций.
реактив объем, мкл время, мин
Образец 75 3
Стрептокиназа 75 3
Субстрат 75 3
Калибровочная кривая.
Построить график зависимости величины поглащения, полученной для каждого разведения плазминогенового 
референса от %  плазминогена. Плазминоген в образцах плазмы пациента может быть определен интерполяцией, используя 
калибровочную кривую. Если для построения стандартной кривой используется коммерчески доступный референс плазмы по 
плазминогену, то концентрацию плазминогена в образцах пациента следует пересчитать по концентрации плазминогена в 
референсе (см. ниже).
%  плазминогена (рассчетный)=% плазминогена (пациент) х % плазминогена (референс)/100
Ci libMtion Cuiv»
Plavminogefl
i
XI. Контроль качества
Перед каждым использованием тест-систему необходимо тестировать, используя нормальный и абнормальный 
контроля, чтобы удостовериться в работе каждой фазы процедуры. Рекомендуется использовать SAC-1 (кат ном 5301) и 
SAC-2 (кат нам 5302). Обратитесь к инструкции, вложенной в каждый контрольный набор, для детальной информации и 
уточнения объемов пробы.
XII. Референсные значения
Референсные значения плазминогена в плазие составляют 55+145%. Нормальная плазма получена от здоровых 
мужчин или женщин, в возрастной категории 18+55 лет, не принимающих никаких препаратов. Каждой лаборатории 
рекомендуется определить свою область ожидаемых значений, характерных для данной популяции и используемого 
оборудования и реактивов.
XIII. Ожидаемые значения
Уровень плазминогена может быть пониженным по причине врожденного или приобретенного дефицита, такого как 
первичный или вторичный фибринолиз. Уровень плазминогена также может быть пониженным при проведении  
тромболитичесой терапии. Самой распространенной причиной угнетения плазминогена является диссиминированное 
внутрисосудистое свертывание (ДВС).
XIV. Ограничения
Иктеричность плазмы может повлиять на результаты измерений из-за задействования относительно низкого 
разведения плазмы. Чтобы вычесть вклад, привносимый иктеричностью плазмы, следует приготовить отдельный бланк, с 
использованием плазмы пациента. Из измеренной оптической плотности (ОП) образца нужно вычесть ОП бланка, 
специально приготовленного с использованием плазмы пациента.
Для получения точных и воспроизводимых результатов, используйте точные пипетки и следуйте рекомендованным 
процедурам, с особенным вниманием относясь к времени и темпераруре инкубации.
Природными активаторами плазминогена являются тканевый активатор плазминогена (1-РА) или урокиназный 
активатор плазминогена (и-РА). Наличие возможных клинических нарушений плазминогена, не определяемых по 
реакционной способности со стрептокиназой или синтетическим субтратом, используемым в данном наборе, не может быть 
исключено.
77


--- стр. 78 ---
Образцы пациента, которые невозможно интерполировать по калибровочной кривой, должны быть разбавлены и 
перемеряны. Разбавление образца пациента может быть произведено путем добавления 200мкл ПГ-буфера к 200мкл 
плазмы пациента.
XV. Аналитические характеристики 
Ручной метод.
Достоверность.
Корреляция между Chrom Z-PLG (X) и другим коммерчески доступным набором для хромогенного определения 
плазминогена (Y):
линия регрессии коэф. корреляции станд. ошибка определения 
Y=0.92X + 62 0.89 9.4
Точность.
Приведенные оценки точности (кооффициент вариации, CV), были получены с использованием метода конечной 
точки в варианте полу-микро.
Плазминоген, %  Внутри пробы, CV между пробами, CV
98 1.2 6.1
49 2.0 4.1
15 6.8 12.7
Чувствительность.
Чувствительность определялась как удвоенное стандартное отклонение между двумя измерениями внутри 
аналитической пробы. Метод Chrom Z-PLG чувствителен к 3% плазминогена.
Специфичность.
Специфичность метода беспечивается использованием хромогенного субстрата, специфичного для комплекса 
стрептокиназа-плазминоген или плазмина, и также использованием стрептокиназы, которая сама по себе не имеет 
протеолитической активности и активирует только плазминоген в плазме крови человека.
Автоматизированный метод с PACKS-4.
Точность.
Внутри одной аналитической серии.
Точность была посчитана на нормальном контроле с повторениями, получены следующие данные: 
п 8
X 104.3
SD 1.6
CV, %  1.5
Между аналитическими сериями.
Выше описанное исследование было произведено еще для 2х измерений. Общие данные всех трех измерений:
п 24
X 105.3
SD 3.0
CV, %  2.9
Сравнение.
Сравнение было произведено на 45 нормальных и абнормальных образцах. Образцы, тестированные методом 
Chrom Z-PLG, и референсные материалы дали следующие результы: 
п 46
Y 1.04Х-0.6 Х=референс
г 0.994 Y=Chrom Z-PLG
■i'I
Тест-система "Резистентность к активированному протеину С" (РСА Ratio). I
I. Применение
Этот набор используется для обнаружения резистентности фУ к активированному протеину С (ПрС). ФакторУ, 
обладающий такой резистентностью, называется также фактором Лейдена.
Устаревший метод определения фактора Лейдена назывался АРС ratio  (иногда его некорректно называют просто 
АРС) и выполнялся следующим образом:
1) Выполняется тест АЧТВ с добавлением (внешего) активированного ПрС (секунды).
2) Выполняется обычный тест АЧТВ (секунды).
3) Вычисляется отношение 1) на 2) (в сек).
Если результат выше чем 2.2, то у пациента нет фактора Лейдена; если ниже, то фактор Лейдена есть.
Современный метод называется РСА ratio  (иногда его некорректно называют просто РСА). В этом методе в плазму 
не вносится внешний активированный ПрС, а активируется собственный ПрС пациента, ПрС может перейти (только при 
наличии ПрЗ в плазме) в активированное состояние (ПрСа) при добавлении яда змеи Agkistrodon Contortrix. Еще одно 
отличие от старого метода —  смешивание плазмы больного с плазмой, дефицитной по фактору V.
Следует отметить, что при добавлении в плазму больного плазму, дефицитную по фУ, такие показатели как 
витамин К-зависимые факторы, факторы внутреннего пути свертывания, ПрС и ПрЗ- нормализуются. Таким образом, 
добавление этой плазмы позволяет оценивать только фУ.
В РСА ratio  тесте плазма больного смешивается с плазмой, дефицитной по фУ в соотношении 1: 4. Затем одна 
часть этой плазмы инкубируется с АЧТВ-реагентом и ядом змеи, другая - с АЧТВ-реагентом. Затем к обеим порциям 
добавляют кальция хлорид и фиксируют время свертывания. Рассчитывают отношение= (время свертывания при АЧТВ-  
тесте с ядом змеи)/(о6ычный АЧТВ тест).
78


--- стр. 79 ---
•(
»
4
II. Меры предосторожности
Регенты представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Информация по безопасности и способу утилизации отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции. 
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), H1V и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с той же  
осторожностью, что и с сывороткой пациента.
III. Реактивы
1. 25мМ Кальция хлорид в физиологическом растворе.
Приготовление.  Флакончики с кальцием хлорида готовы к использованию.
2. РСА-АРТТ реактив.
Каждый флакон содержит лиофилизированный АЧТВ вместе с ядом змеи.
Приготовление.  Добавить 2мл очищенной воды. Дать постоять 20 минут и помешать перед использованием.
3. АРТТ реактив.
Каждый флакон содержит лиофилизированный АЧТВ реагент.
Приготовление.  Добавить 2мл очищенной воды. Дать постоять 20 минут и помешать перед использованием.
4. Factor V depleted plasma (дефицитная по ф \/ плазма).
Каждый флакончик содержит лиофилизированную дефицитную по 5 фактору плазму.
Приготовление.  Добавить 2мл очищенной воды. Дать постоять 20 минут и помешать перед использованием.
5. АРС resistant plasma, (плазма с фV, устойчивым к действию ПрС).
Приготовление.  Добавить 0.5 мл очищенной воды. Дать постоять 20 минут и помешать перед использованием.
6. Другие компоненты набора.
В набор также входит инструкция.
IV. Хранение и стабильность
1. 25тМ кальция хлорид в физиологическом растворе
Хранится при 2+6 °С. Помещенный на прибор АС-4 в позицию 26 (15 С), реактив годен 6 часов.
2. РСА-АРТТ реактив
Неразведанный реактив хранится при 2+6 °С и годен до конца срока годности, указанного на упаковке. После добавления 
воды он стабилен 2 недели в холодильнике. Помещенный на прибор АС-4 в позицию 31(15 С) годен 6 часов.
3. АРТТ-реактив
Неразведанный реактив хранится при 2+6 °С и годен до конца срока годности, указанного на упаковке. После добавления 
воды он стабилен 2 недели в холодильнике.
4. Плазма, дефицитная по ф \/
Запечатанный флакон хранится при 2+6 °С и годен до окончания срока годности, указанного на упаковке. После разведения 
плазма может быть заморожена при -20 °С и использована еще только один раз.
5 АРС резистентная плазма
Запечатанный флакон хранится при 2+6 °С и годен до окончания срока годности, указанного на упаковке. После разведения 
плазма может быть заморожена при -20 °С.
V. Забор и приготовление образцов „ иКровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9; 1. Натрия цитрат 
может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте кровь при 2000д в течение Юминут. Плазма должна храниться при 
температуре 2+6 °С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента забора образцов или плазму можно хранить 
при -20 °С в течение 2 недель или месяц при -70 °С. Быстро разморозить при 37 С. Не хранить при 37 С более 5 минут.
VI. Пошаговое руководство 
Рекомендуется проводить все анализы в дубле.
Выполнение анализа вручную.1 Приготовьте две пробирки, содержащие по 20мкл плазмы больного и по 80мкл плазмы, дефицитной по фУ.
2. В одну пробирку добавьте Ю Омкл АЧТВ-реактива, в другую Ю Омкл АЧТВ-реактива с ядом.
3. Инкубируйте обе пробирки при 37 °С в течение 5 минут.
4. Добавьте поЮОмкл мкл кальция хлорида в обе пробирки и запишите время свертывания.
5. Рассчитайте отношение= АЧТВ-тест с ядом(сек)/АЧТВ-тест.
Выполнение анализа на приборе АС-4 (кат ном 5546 на 80 определений). _
Обратитесь к инструкции для работы на приборе АС-4 для получения детальных сведении. Приготовьте все
реактивы, как было описано выше.
Прибор сам осуществляет смешивание плазмы больного и фУ-дефицитнои плазмы.
Отношение (Ratio) Вы должны рассчитывать сами.
1. Поместите фУ-дефицитную плазму в позицию 33.
2. Поместите АЧТВ-реактив с ядом в позицию 31.
3. Поместите обычный АЧТВ-реактив в позицию 32.
4 Поместите кальция хлорид в позицию 26. ,
5. Закажите этому больному сразу два теста: тест АРС (тест с ядом) и тест APCR. Отношение (Ratio) рассчитывается
следующим образом: APC(ceK)/APCR(ceK).
4
79


--- стр. 80 ---
^АРС
S T A R T -1 5 s M E T H O D - C o ^ M IX - Y E S P A T IE N T  (P a t) 
v o l -  lO/uL 
pos— 36 (C P )
D e f. Plasma (D P )  
V o I = 4G!^/L 
Pos— 33
IN C U B -3 G © s M A T H - lin C l £ A N - 0 B U F F E R  (B U F ) 
V o l- C ^ L  
Pos—0
R l
V o l— 5 % L 
P o s - 31
R U N T IM E -3 0 C s S E N S - 3 T - C O R R - 0
S - C O R R - 0
C L iA R  (C L R ) 
V o l-C jM i
FQ
V o l-5 0 )u L 
Pos—2 6
*
APCR
S T A R T -1 5 s M E T H O D - C o a g M IX - Y E S P A T IE N T  (P at) 
v o l— lOjtiL 
pos — 36 (C P )
D ef. Plasma (D P )  
V o l= 4 0 |u L 
Pos— 33
IN C U B - 3 0 0 s M A T H - lin C L J A N - 0 B U F FE R  (B U F ) 
V d - C ^ L  
Pos—0
R l
V o I= 5 0 ^ tL
P t » = 3 2
R U N T 1 M E -3 0 0 S S E N S - 3 T - C O R R - 0
S - C O R R - 0
C L E A R  (C LR ) 
V d - C ^ L
R2
V o l-S O ju L 
Pos—26 %
VII. Интерпретация результатов
Этот метод, в сравнении с устаревшим АРС ratio,  гораздо лучше показывает разницу между здоровым человеком и 
пациентом с фактором Лейдена. Его можно применять при приеме пероральных антикоагулянтов, при высоком уровне фУ111 
(при беременности), при исследовании размороженной плазмы с низким уровнем фУ111, при наличии у пациента дефектов 
ПрС и Пр8. Также этот тест можно использовать для исследований плазмы больного волчанкой и пациентов во время 
гепаринотерапии. PCA-rato набор гораздо более устойчив, чем APC-ratio  (выделенный активированный ПрС очень плохо 
хранится).
VIII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна устанавить свою программу контроля качества. Нормальная и патологическая плазма 
должны быть проанализированы перед проведением анализов, чтобы подтвердить исправность прибора и пригодность 
реактивов. Если контроли не измерялись, то все результаты признаются недостоверными.
Присутствующя в данном наборе АРС-резистентная плазма (плазма с дефектным фУ) является абнормальным 
контролем.
IX. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от используемой техники и 
реактивов. Поэтому каждая лаборатория должна сама устанавливать референсные границы для здоровых людей.
X. Аналитические характеристики
По оси Y отложены значения отношения (ratio) для методов РСАг и АРСг. "Лейден+ " означает наличие фактора
Лейдена.
Каждая лаборатория должна устанавливать собственные аналитические данные. I
DILUTION М FACTCMV DEPLETED Pi AIMA
80


--- стр. 81 ---
i
I. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор «Д-Димер» от компании Хелена позволяет качественно и полуколичественно определять содержание Д-Димера в 
образцах плазмы пациентов на основе агглютинации латексных частиц с адсорбированными на них антителами.
II. ПРИНЦИП МЕТОДА
Д-димер образуется в процессе плазминового протеолиза сшитых фактором Xllla нитей фибрина. Повышенные  
концентрации в плазме крови Д-димера отмечаются при тромбозах глубоких вен нижних конечностей, тромбоэмболии 
легочной артерии, ДВС-синдроме’’^. Уровень Д-димера повышается во время беременности, что более выражено при 
осложнениях беременности^. В этом наборе используются моноклональные антитела которые вступают в реакцию с Д- 
димером или фрагментами Д фибрина, но не с фибриногеном®, позволяя определять Д-димер в плазме человека. Могут быть 
исследованы также образцы сыворотки, используемые для определения ПДФ.
В данное время международных контролей для Д-димера не существует. Для численных значений компания Хелена сравнивает 
тест-систему «Д-димер» с коммерчески доступными иммуноферментными методами исследования (ИФА).
Для количественного определения Д-димера, компания Хелена рекомендует использовать наборы ном. кат.5501 Авто 
Красный Д-димер 700 (для приборов работающих при длине волны 600-900 нм; Hitachi, Sysmex, Вепк) и ном. кат.5552 Авто 
Синий Д-Димер 400 (для приборов работающих при длине волны 350-550 нм: АС-4, iL, Stage).
III. СОСТАВ РЕАГЕНТОВ
А. Описание реагента
1. Д-димер - латексный реагент
1x1.7 мл взвеси латексных частиц, покрытых моноклональными антителами против Д-димера.
2. Солевой буфер
2x8 мл буфера, pH 7.3. Содержит 0.2 г/л азида натрия.
3. Позитивный контроль - плазма с Д-димером
1x1.0 мл лиофилизированная, обогащенная Д-димером плазма человека.
4. Негативная контроль - плазма, не содержащая Д-димер 
1x1.0 мл лиофилизированная плазма человека.
Б. Приготовление реагента
I. Доведите до комнатной температуры все компоненты набора, в течение, минимум 10 минут.
II. Добавьте 1.0 мл (1000 рл) солевого буфера в каждый флакон с позитивной и негативной контрольной плазмой.  
Контрольные плазмы следует хранить при 2-6°С в течение одного месяца. Смотри также раздел XIII, п. 3.
III. Флакон с латексным реагентом, непосредственно перед использованием, переворачивайте (без встряхивания) в течение 
5 сек.
IV. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
При работе с любым из компонентов набора применяйте соответствующую защитную одежду. В реагентах не содержится 
антигенов гепатита В (HBsAg), HIV I  и II антител, антител к гепатиту С, сифилису и H.T.L.V. 1/11. Тестирование проведено 
одобренными FDA методами. Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с 
этим, применяйте все меры предосторожности.
Если использованные солевой буфер и латексный реагент сливают, то в систему слива нужно вылить дополнительно 
большое количество воды.
Тест должен быть использован в рамках клинического обследования наряду с другими лабораторными тестами.
V. ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Реагенты можно хранить при 2-8'С до даты, указанной на упаковке.
Контрольные плазмы после разведения можно хранить при 2-6°С в течение 1-го месяца.
VI. СБОР И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦОВ = , оо/
Используется плазма крови, стабилизированная цитратом натрия. Кровь (9 частей) должна быть собрана в пробирку с 3.2 /о 
(0.105М) цитрата натрия (1 часть). После центрифугирования при 2000-3000 g в течение 10-15 минут плазма переносится в 
другую пробирку. Цитратная плазма может храниться в течении 2 часов при комнатной температуре, 2-8°С - в течение 18 
часов, при - 20°С более 1 месяца. Одноразовое замораживание и оттаивание не влияет на результаты анализа.
VII. ИНСТРУКЦИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ
A. Компоненты набора
Д-димер латексный реагент (1 х 1,7 мл)
Д-димер позитивный контроль (1 x 1 мл)
Д-димер негативный контроль (1 x 1 мл)
Буфер солевой (2x8  мл)
Карты тестовые 16x6  лунок 
Палочки перемешивающие х 50 
Б. Необходимые компоненты, не включенные в набор
- Пипетка на 20, 100 и 1000 мкл
- Наконечники для пипетки
- Пробирки объемом 3 мл
- Секундомер
B. Качественный метод (скрининг)
1) Поместите 20 мкл образца или контрольной плазмы в лунки на тест карте.
2) Нанесите рядом с образцом 20 мл латексного реагента.
3) Быстро перемешайте компоненты, используя одноразовые палочки для перемешивания. Включите секундомер.
4) Наклоняйте осторожно карту вверх-вниз и отметьте время появления агглютинации частиц латекса мехаду 180-200 сек^ 
Позитивная (+) и негативная (-) агглютинация сравнивается с результатами, полученньши при использовании ^°”^Р°"^Ь1Х 
плазм. Позитивный контроль только качественный и дополнительно не разводиться. Отсутствие агглютинации в опытной 
пробе свидетельствует об отрицательном результате анализа и и дальнейшего тестирования не требует.
Выполюют^^ показавшими положительный результат при качественном анализе
Т) ПоследГ^^^^^^ разведите 100 мкл образца в 3, 4 и 8 раза (1:2, 1:4,1:8) используя солевой буфер и маленькие пробирки.
81


--- стр. 82 ---
2) Отметьте положения разведенного образца на тест карте и определите агглютинацию, как показано выше, в разделе VII, 
В. Концентрация Д-димера может быть определена используя таблицу в разделе IX.
VIII. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Поставляемые позитивные и негативные контроли должны быть использованы для контроля качества каждого набора. 
Рекомендуется использовать оба контроля при каждом использование набора. В случае если позитивный или негативный 
контроль не даст соответствующую реакцию, результат не должен быть использован в диагностических целях, набор 
должен быть забракован и выслан компании Хелена.
IX. ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Агглютинация латекса в образцах плазмы, содержащих Д-димер в концентрации более чем 250 нг/мл появляется в течение 
180 - 200 сек. Исследование последовательно разведенных образцов плазмы позволяет получить полуколичественный 
результат анализа.
Расчет уровня Д-димера
Д-димер,
нг/мл
Неразведённый
образец
Разведения образца
1:2 1:4 1:8
<250 - - _ -
250-500 + - - -
500-1000 + + - -
1000-
2000 + + + -
>2000 + + + +
- нет агглютинации 
+ агглютинация
Агглютинация может проходить быстрее и отчетливее в образцах, имеющих высокую концентрацию Д-димера.
Результаты могут быть представлены в ед. измерения Д-димера или в фибриноген-эквивалентных единицах (ФЭЕ). 1 
единица Д-димера = 2 ФЭЕ. Например, <250 нг/мл (уровень Д-димера) равен <500 (ФЭЕ).
Как говорилось в ряде публикаций*, некоторые коммерческие латексные тесты имеют умеренную чувствительность, но более 
высокую специфичность в сравнении с иммуноферментными тестами (ИФА).
X. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Агглютинация частиц латекса появляется в течение 180-200 сек для образцов плазмы с содержанием Д-димера выше 250 
нг/мл.
Средний уровень Д-димера в популяции практически здоровых людей находится между 8 и 135 нг/мл.
Отсутствие повышения Д-димера в плазме крови имеет большое диагностическое значение для исключения тромбоза или 
тромбоэмболии легочной артерии.
Период полувыведения Д-димера из плазмы крови составляет около 12 часов. Повышенный уровень Д-димера может какое- 
то время определяться в соответствии с происходящим внутри сосудов фибринолизом.
После клинических испытаний практически здоровых людей, а так же пациентов с флебографически подтверхщенным 
тромбозом глубоких вен и пациентов с диссеминированным внутрисосудистым свертыванием (ДВС-синдром), а также при 
преэклампсии были получены следующие результаты:
Тест система «Д-димер»
Образцы
плазмы
Число
наблю
дений
Нераз
ведён
ный,
число
отриц
атель
ных
резул
ьтатов
1:1 1:2 1:4 >1:
8
Нормальные 101 100 1* - - -
ТГВ 48 3 10* 7* 14* 14*
ДВС-
синдром
29 0 3 3 4 19
Преэклампс
ИЯ
6 2 1 3 “ “
I
I
т
Титры (1:1 и т.д.) показывают наибольшую степень разведения, при котором отмечается агглютинация частиц латекса.
* Агглютинация была подавлена добавлением специфичным к Д-димеру антителом MA-8D3 (0.2 мг/мл), не связанным с 
антителом IgGlk (РАМ-1).
XI. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 
А. Специфичность
В реакции используются моноклональные антитела MA8D3, специфичные к Д-димеру (для скринингового метода отобрана 
определенная гибридома^^ Были выбраны антитела которые вступают в реакцию лишь с очищенным Д-димером, но не с 
фибриногеном или фрагментом Д фибриногена. Таким образом тест-система не имеет перекрестной чувствительности к 
фибриногену или к дез/кА-фибриногену. Тест не чувствителен также к ревматоидному фактору.
82


--- стр. 83 ---
Б. Воспроизводимость
Для оценки воспроизводимости результатов теста были отобраны три образца плазмы. Каждый образец был тестирован 10 
раз в течение трех различных дней. В каждом позитивном случае образец плазмы был титрован.
Результаты определения Д-димера (нг/мл):
Образец Уровень Д-  
димера
Результат
Нормальный < 250 нг/мл Негативный
Средний 3000 нг/мл Титр 1:8
Высокий > 16000 нг/мл Титр 1:64
С.Точность
«Д-димер» производства компании Хелена был сопоставлен с другим аналогичным коммерческим набором, основанным на 
латексной агглютинации. Оба набора дали негативную реакцию при тестировании 25 нормальных образцов. Плазма 30 
пациентов была тестирована с использованием ИФА и тест-системы «Д-димер» (Хелена). Все образцы на ИФА со 
значениями уровня Д-димера выше 225 нг/мл также показали наличие агглютинации частиц латекса.
XII.
1.
2.
XIII.
1.
2.
3.
ПРЕДЕЛ ТЕСТА
Негативный результат при определении Д-димера не исключает диагноз тромбоза . Отрицательная диагностическая 
значимость метода для венозных тромбозов с набором компании Хелена составляет > 94%. Определение уровня Д- 
димера должно проходить вместе с другим клинико-лабораторным обследованием.
Небольшое количество образцов с нормальным уровнем Д-димера могут показывать агглютинацию из-за не  
специфичности или образовывать белую взвесь при перемешивании с латексными частицами (не путать с  
агглютинацией).
ПРИМЕЧАНИЯ
Результаты могут быть представлены в ед. измерения Д-димера или в фибриноген- эквивалентных единицах (ФЭЕ). 1 
единица Д-димера = 2 ФЭЕ. Пример, <250 Нг/Мл (уровень Д-димера) равен <500 (ФЭЕ).
Агглютинация может проходить быстрее и более четко в образцах имеющих высокую концентрацию Д-димера.
Резиновый колпачок во флаконах с контрольными плазмами может быть выброшен после их открытия.
Тест-система "Авто Синий Д-димер 400" (Auto Blue D-Dimer 400).
I. Применение
Набор предназначен для количественного определения продукта деградации фибрина: Д-димера. Метод основан 
на реакции осаждения на латексных частицах. Анализ проводится в цитратной плазме.
И.Теоретическая часть
Набор Auto Blue D-Dimer 400 основан на иммунотурбодиметрическом методе и предназначен для количественного 
определения продуктов деградации фибрина, содержащих Д-димер, в плазме крови человека.
Продукты деградации, содержащие Д-димер формируются после деградации поперечно сшитого фактором Xllla 
фибрина, инициируемой плазмином. Значительные количества Д-димера были выявлены при таких заболеваниях как ДВС- 
синдром, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Лабораторные исследования Д-димера имеют важное значение в 
первоначальном выявлении выше перечисленных заболеваний.
»
В наборе Auto Blue D-Dimer 400 используются латексные частицы с прикрепленными (ковалентной связью) на них 
моноклональными антителами. При наличии Д-димера они образуют комплекс и за счет этого возрастает мутность раствора 
(уровень Д-димера и оптическая плотность коррелируют между собой). Антитела не вступают в перекрестную реакцию с 
фибриногеном. Это делает возможным получить количественную оценку Д-димера.
^  III. Реактивы
Щ И Реагенты лот-специфичны. Нельзя замещать реагенты набора из разных лотов.
1. Д-димер реактив.
Буферный раствор, содержащий частицы, покрытые мышиными моноклональными антителами, специфичными к Д-димеру. 
Приготовление.  Готов к использованию Перед каждым проведением анализа восстанавливайте гомогенность раствора, 
аккуратно несколько раз переворачивая флакончик и, таким образом, распределяя частицы равномерно. Не трясти!
2. реакционный буфер.
HEPES буфер со стабилизатором (рН=7). Содержит стабилизаторы, детергент и натрия азид в качестве консерванта. 
Приготовление.  Буфер готов к использованию.
3. дилюент.
Содержит 0.85% физиологического р-ра. Содержит натрия азид.
Приготовление.  Дилюент готов к использованию.
4. калибратор.
Лиофилизированная человеческая плазма, обогащенная Д-димером.
Приготовление.  Разведите калибратор 1мл деионизированной воды. Аккуратно переворачивайте флакончик около 5 мин, 
пока не получится гомогенная смесь. Оставьте на 30 минут при комнатной температуре. Перемешайте осторожно перед 
^  использованием. Не трясти! Не использовать магнитную мешалку!
Щ  IV. Меры предосторожности
^  Регенты, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Калибратор в наборе изготовлен из человеческого материала и несет потенциальную опасность заражения 
инфекциями.
83


--- стр. 84 ---
Д-димер реагент, реакционный буфер и дилюент содержат натрия азид, который может прореагировать со 
свинцовыми или медными канализационными трубами с образованием нароста азидов металлов. Материалы, сливаемые в 
раковину, должны быть смыты большим количеством воды для предотвращения азидного нароста.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с той же 
осторожностью, что и с сывороткой пациента (так как ни один метод анализа не позволяет 100% исключить наличие 
инфекции).
Результаты теста надо использовать совместно с клинической картиной.
Информация по рискам и безопасности отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
V. Хранение и стабильность
Весь набор должен храниться в холодильнике при температуре 2+6°С. Все запечатанные флаконы годны до 
окончания срока годности.
1. Д-димер реактив
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
2. реакционный буфер
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
3. дилюент
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
4. калибратор
Разведенный реактив стабилен в течение 10 часов при 20+25 С.
VI. Сбор и приготовление образцов
Венозная кровь собирается в пробирку с 3.2% натрия цитратом в соотношении 9 к 1 (9 объемов крови и 1 объем 
антикоагулянта). Центрифугировать забранную кровь при 1500д 15 минут при комнатной температуре. Плазма может 
храниться 2 часа при комнатной температуре или 18 часов при 2+6°С или может быть заморожена при -20°С (один раз).
Замороженная плазма должна быть быстро разморожена при 37 С, аккуратно перемешана и немедленно проанализирована.
TEST=DD POINTS=5 T-CORR=0% 
/0 secs
VALIDATE=Yes Def plasma (DP)= ODi 
Pos=0
Start=21s Math=Lin S-corr=-15% DIL=1 :1 R1 Vol=85nl Pos 37
lncub=120s CT-MECH=No Mix=Yes Patient (Pat) Vol 
=2301 Pos 36 (CP)
R2 Vol=42Dl Pos 38
RunTime=180sec Sens=0 Clean=Yes Buffer(BUF) Vol =0Dl 
Pos 39
Method=lmmun Unit=30721 PIP2Buf= No Clear (CLR) Vol ODI 
Pos =0
XI. Аналитические характеристики
Пользователю рекомендуется выработать свои аналитические характеристики для используемой им специфичной методики.
VII. Пошаговое руководство 
Калибровочная кривая
Для точного определения значения калибратора Д-димера обратитесь ко вкладышу в набор (значение может 
отличаться от лота к лоту).
Калибровочную кривую следует строить каждый раз при смене лота наборов, после изменения в настройках прибора 
или сервисных работ, или каждые 6 месяцев, или если результаты контрольной плазмы выходят за указанные границы. 
Автоматизированный метод.
Обратитесь к руководству пользователя для получения детальных инструкций. Приготовьте все реагенты, как 
указано в главе «реактивы».
Настройки для прибора АС-4 компании Хелена.
VIII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна устанавливать диапазон контролей и ставить контроли ежедневно. Перекалибровка 
должна производиться при непрохождении контролей. После перекалибровки следует снова протестировать контроли. Если 
полученные значения не будут соответствовать контрольным, то следует обратиться к представителям компании Helena. В 
качестве контролей высоких и низких значений используйте D-dimer control kit - cat. № 5509.
^1
IX. Ограничения
Присутствие ревматоидного фактора дает ложно положительные результаты.
Не проводилось тестирования этого набора на плазме с человеческими анти-мышиными антителами. Результаты, 
полученные от пациентов с гетерофильными антителами нужно использовать с осторожностью, так как в наборе  
присутствует компонент, содержащий мышиные антитела и интерференция может привести к ложно завышеным или ложно 
заниженным результатам.
т
X. Референсные значения
Завышенный уровень Д-димера наблюдается у пациентов с подтвержденным венозным тромбозом, легочным 
эмболизмом, две, при травмах. Уровень Д-димера возрастает в течении беременности и высокий уровень м.б. связан с 
осложнениями.
Измеренные концентрации д-димера в образце, определенные наборами от разных производителей могут  
различаться. Таким образом, каждая лаборатория должна выработать свои референсные интервалы, специфичные для 
своей популяции, используемых реагентов и анализаторов.
84


--- стр. 85 ---
Тест-система "Авто Красный Д-димер 700" (Auto Red D-Dimer 700).
ПРИМЕНЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения продукта деградации фибрина: Д-димера. Метод основан 
на реакции осаждения на латексных частицах. Анализ проводится в цитратной плазме.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор Auto Red D-dimer 700 основан на иммунотурбодиметрическом методе и предназначен для количественного 
определения продуктов деградации фибрина, содержащих Д-димер, в плазме крови человека.
Продукты деградации, содержащие Д-димер формируются после деградации поперечно сшитого фактором Xllla 
фибрина, инициируемой плазмином. Значительные количества Д-димера были выявлены при таких заболеваниях как ДВС- 
синдром, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Лабораторные исследования Д-димера имеют важное значение в 
первоначальном выявлении выше перечисленных заболеваний.
В наборе Auto Red D-dimer 700 используются латексные частицы с прикрепленными (ковалентной связью) на них 
моноклональными антителами. При наличии Д-димера они образуют комплекс и за счет этого возрастает мутность раствора 
(уровень Д-димера и оптическая плотность коррелируют между собой). Антитела не вступают в перекрестную реакцию с 
фибриногеном. Это делает возможным получить количественную оценку Д-димера.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Регенты, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
D-dimer 700 калибратор в наборе изготовлен из человеческого материала и несет потенциальную опасность 
заражения инфекциями. Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, 
принимайте все меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание 
антигенов к гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться 
с той же осторожностью, что и с сывороткой пациента (так как ни один метод анализа не позволяет 100% исключить наличие 
инфекции).
Д-димер реагент, реакционный буфер и дилюент содержат натрия азид, который может прореагировать со 
свинцовыми или медными канализационными трубами с образованием нароста азидов металлов. Материалы, сливаемые в 
раковину, должны быть смыты большим количеством воды для предотвращения азидного нароста.
Результаты теста надо использовать совместно с клинической картиной.
СОСТАВ
А. Описание реагентов
Реагенты лот-специфичны. Нельзя замещать реагенты набора из разных лотов.
1. Латексный реагент
2 X 4 ml, латексные частицы, покрытые мыщиными моноклональными антителами, специфичными к Д-димеру. Готовы к 
использованию. Латекс осаждается в процессе хранения. Перемешайте реагенты до начала использования. Не трясти!
2. Реакционный буфер
2 X 7 ml, HEPES буфер со стабилизатором (рН=7). Содержит стабилизаторы, детергент и натрия азид в качестве  
консерванта. Буфер готов к использованию.
3. Дилюент
1 X  7 ml, содержит физиологического р-р, pH 7.3. Содержит натрия азид.
Буфер готов к использованию.
4. D-dimer калибратор
1 X 1 ml, лиофилизированная человеческая плазма, обогащенная Д-димером.
Разведите калибратор 1мл деионизированной воды. Аккуратно переворачивайте флакончик около 5 мин, пока не получится 
гомогенная смесь.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Весь набор должен храниться в холодильнике при температуре 2+6°С. Все запечатанные флаконы годны до окончания срока 
годности.
1. Латексный реагент
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
2. Реакционный буфер
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
3. Дилюент
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
4. D-dimer калибратор
Разведенный реактив стабилен в течение 10 часов при 20+25°С.
СБОР И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Венозная кровь собирается в пробирку с 3.2% натрия цитратом в соотнощении 9 к 1 (9 объемов крови и 1 объем 
антикоагулянта). Центрифугировать забранную кровь при ЗОООд 10 минут при комнатной температуре. Плазма может 
храниться 2 часа при комнатной температуре или 18 часов при 2+6°С или может быть заморожена при -20 С (один раз). 
Обратитесь к CLSI Н21-А4 для конкретных руководящих принципов сбора образцов.
ПОШАГОВОЕ РУКОВОДСТВО
A. Приготовлени калибровочной кривой
Для точного определения значения калибратора Д-димера обратитесь ко вкладышу в набор (значение может 
отличаться от лота к лоту).
Калибровочную кривую следует строить каждый раз при смене лота наборов, после изменения в настройках прибора 
или сервисных работ, или каждые 6 месяцев, или если результаты контрольной плазмы выходят за указанные границы.
B. Процедура анализа
Смотри инструмен-специфичное руководство пользователя.
85


--- стр. 86 ---
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Каждая лаборатория должна устанавливать диапазон контролей и ставить контроля ежедневно. Перекалибровка 
должна производиться при непрохождении контролей. После перекалибровки следует снова протестировать контроля. Если 
полученные значения не будут соответствовать контрольным, то следует обратиться к представителям компании Helena. В 
качестве контролей высоких и низких значений используйте D-dimer control kit - cat. № 5509.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Присутствие ревматоидного фактора дает ложно положительные результаты.
Не проводилось тестирования этого набора на плазме с человеческими анти-мышиными антителами. Результаты, 
полученные от пациентов с гетерофильными антителами нужно использовать с осторожностью, так как в наборе  
присутствует компонент, содержащий мышиные антитела и интерференция может привести к ложно завышеным или ложно 
заниженным результатам.
РЕФЕРЕНСНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Завышенный уровень Д-димера наблюдается у пациентов с подтвержденным венозным тромбозом, легочным 
эмболизмом, две, при травмах. Уровень Д-димера возрастает в течении беременности и высокий уровень м.б. связан с 
осложнениями.
Измеренные концентрации д-димера в образце, определенные наборами от разных производителей могут 
различаться. Таким образом, каждая лаборатория должна выработать свои референсные интервалы, специфичные для 
своей популяции, используемых реагентов и анализаторов.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Пользователю рекомендуется выработать свои аналитические характеристики для используемой им специфичной 
методики.
Тестовый реагент "Д-димер калибратор" (D-Dimer Calibrator).
ПРИМЕНЕНИЕ
Калибратор предназначен для калибровки набора для определения д-димера, для количественного определения 
продукта деградации фибрина. Метод определения основан на реакции осаждения на латексных частицах. Анализ 
проводится в цитратной плазме.
D-dimer калибратор
1 X  1 ml, лиофилизированная человеческая плазма, обогащенная Д-димером.
Разведите калибратор 1мл деионизированной воды. Аккуратно переворачивайте флакончик около 5 мин, пока не получится 
гомогенная смесь.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Регент только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Калибратор изготовлен из человеческого материала и несет потенциальную опасность заражения инфекциями. 
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с той же  
осторожностью, что и с сывороткой пациента (так как ни один метод анализа не позволяет 100% исключить наличие 
инфекции).
СОСТАВ
1 X  1 ml, лиофилизированная человеческая плазма, обогащенная Д-димером.
Разведите калибратор 1мл деионизированной воды. Аккуратно переворачивайте флакончик около 5 мин, пока не получится 
гомогенная смесь.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ 
D-dimer калибратор
Разведенный реактив стабилен в течение 10 часов при 20+25°С.
Тестовый реагент "Д-димер дилюент" (D-Dimer Diluent).
ПРИМЕНЕНИЕ
Дилюент предназначен для работы с набором для определения д-димера, для количественного определения 
продукта деградации фибрина. Метод определения основан на реакции осаждения на латексных частицах. Анализ 
проводится в цитратной плазме.
Дилюент
1 X 7 ml, содержит физиологического р-р, pH 7.3. Содержит натрия азид.
Буфер готов к использованию.
86


--- стр. 87 ---
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Регент только для in-vitro диагностики. Не принимать BHyrpbi 
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Дилюент содержат натрия азид, который может прореагировать со свинцовыми или медными канализационными 
трубами с образованием нароста азидов металлов. Материалы, сливаемые в раковину, должны быть смыты большим 
количеством воды для предотвращения азидного нароста.
СОСТАВ
1 X  7 ml, содержит физиологического р-р, pH 7.3. Содержит натрия азид. 
Буфер готов к использованию.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ 
Дилюент
1 X 7 ml, содержит физиологического р-р, pH 7.3. Содержит натрия азид. 
Буфер готов к использованию.
Тест-система "Д-димер Высокочувствительный" (D-dimer).
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Весь набор должен храниться в холодильнике при температуре 2+6°С. Все запечатанные флаконы годны до окончания срока 
годности.
1. Латексный реагент
Хранить при температуре 2+8 С и использовать до истечения срока годности.
(йо
ПРИМЕНЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения продукта деградации фибрина: Д-димера. Метод основан 
на реакции осаждения на латексных частицах. Анализ проводится в цитратной плазме.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор D-Dimer основан на иммунотурбодиметрическом методе и предназначен для количественного определения 
продуктов деградации фибрина, содержащих Д-димер, в плазме крови человека.
Продукты деградации, содержащие Д-димер формируются после деградации поперечно сшитого фактором Xllla 
фибрина, инициируемой плазмином. Значительные количества Д-димера были выявлены при таких заболеваниях как ДВС- 
синдром, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Лабораторные исследования Д-димера имеют важное значение в 
первоначальном выявлении выше перечисленных заболеваний.
В наборе D-Dimer используются латексные частицы с прикрепленными (ковалентной связью) на них  
моноклональными антителами. При наличии Д-димера они образуют комплекс и за счет этого возрастает мутность раствора 
(уровень Д-димера и оптическая плотность коррелируют между собой). Антитела не вступают в перекрестную реакцию с 
фибриногеном. Это делает возможным получить количественную оценку Д-димера.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Регенты, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
D-dimer калибратор в наборе изготовлен из человеческого материала и несет потенциальную опасность заражения 
инфекциями. Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте 
все меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с той же 
осторожностью, что и с сывороткой пациента (так как ни один метод анализа не позволяет 100% исключить наличие 
инфекции).
Д-димер реагент, реакционный буфер и дилюент содержат натрия азид, который может прореагировать со 
свинцовыми или медными канализационными трубами с образованием нароста азидов металлов. Материалы, сливаемые в 
раковину, должны быть смыты большим количеством воды для предотвращения азидного нароста.
Результаты теста надо использовать совместно с клинической картиной.
СОСТАВ
А. Описание реагентов
Реагенты лот-специфичны. Нельзя замещать реагенты набора из разных лотов.
1. Латексный реагент
2 X 4 ml, латексные частицы, покрытые мышиными моноклональными антителами, специфичными к Д-димеру. Готовы к 
использованию. Латекс осаждается в процессе хранения. Перемешайте реагенты до начала использования. Не трясти!
2. Реакционный буфер
2 X 7 ml, HEPES буфер со стабилизатором (рН=7). Содержит стабилизаторы, детергент и натрия азид в качестве  
консерванта. Буфер готов к использованию.
3. Дилюент
1 X 7 ml, содержит физиологического р-р, pH 7.3. Содержит натрия азид.
Буфер готов к использованию.
4. D-dimer калибратор
1 X 1 ml, лиофилизированная человеческая плазма, обогащенная Д-димером.
Разведите калибратор 1мл деионизированной воды. Аккуратно переворачивайте флакончик около 5 мин, пока не получится 
гомогенная смесь.
87


--- стр. 88 ---
2. Реакционный буфер
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
3. Дилюент
Хранить при температуре 2+8°С и использовать до истечения срока годности.
4. D-dimer калибратор
Разведенный реактив стабилен в течение 10 часов при 20+25°С.
СБОР И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦОВ
Венозная кровь собирается в пробирку с 3.2% натрия цитратом в соотношении 9 к 1 (9 объемов крови и 1 объем 
антикоагулянта). Центрифугировать забранную кровь при ЗОООд 10 минут при комнатной температуре. Плазма может 
храниться 2 часа при комнатной температуре или 18 часов при 2+6°С или может быть заморожена при -20°С (один раз). 
Обратитесь к CLSI Н21-А4 для конкретных руководящих принципов сбора образцов.
ПОШАГОВОЕ РУКОВОДСТВО
A. Приготовлени калибровочной кривой
Для точного определения значения калибратора Д-димера обратитесь ко вкладышу в набор (значение может 
отличаться от лота к лоту).
Калибровочную кривую следует строить каждый раз при смене лота наборов, после изменения в настройках прибора 
или сервисных работ, или кахщые 6 месяцев, или если результаты контрольной плазмы выходят за указанные границы.
B. Процедура анализа
Смотри инструмен-специфичное руководство пользователя.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Каждая лаборатория должна устанавливать диапазон контролей и ставить контроли ежедневно. Перекалибровка 
должна производиться при непрохождении контролей. После перекалибровки следует снова протестировать контроли. Если 
полученные значения не будут соответствовать контрольным, то следует обратиться к представителям компании Helena. В 
качестве контролей высоких и низких значений используйте D-dimer control kit - cat. № 5509.
ОГРАНИЧЕНИЯ
Присутствие ревматоидного фактора дает ложно положительные результаты.
Не проводилось тестирования этого набора на плазме с человеческими анти-мышиными антителами. Результаты, 
полученные от пациентов с гетерофильными антителами нужно использовать с осторожностью, так как в наборе  
присутствует компонент, содержащий мышиные антитела и интерференция может привести к ложно завышеным или ложно 
заниженным результатам.
РЕФЕРЕНСНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Завышенный уровень Д-димера наблюдается у пациентов с подтвержденным венозным тромбозом, легочным 
эмболизмом, две, при травмах. Уровень Д-димера возрастает в течении беременности и высокий уровень м.б. связан с 
осложнениями.
Измеренные концентрации д-димера в образце, определенные наборами от разных производителей могут  
различаться. Таким образом, каждая лаборатория должна выработать свои референсные интервалы, специфичные для 
своей популяции, используемых реагентов и анализаторов.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Пользователю рекомендуется выработать свои аналитические характеристики для используемой им специфичной 
методики.
Контроль качества высокий и низкий для тест-систем "Д-димер" (D-Dioier Control  
H/L).
I. Применение
Молекулы Д-димера образуются при разрушении плазмином поперечно сшитого фибрина (сшивку делает фХ111). 
Повышенный уровень Д-димера наблюдается при таких заболеваниях, как тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм и ДВС- 
синдром. Уровень Д-димера несколько повышен у беременных, причем сильное повышение говорит об осложнении. В 
медицинской практике имеет значение именно отсутствие повышенного д-димера (это так называемая «отрицательная» 
реакция), но даже в этом случае нельзя полностью исключить вероятность тромбоза.
Этот набор содержит плазму с низким и высоким содержанием Д-димера и предназначен для контроля  
иммунологических исследований с латексным реагентом (кат ном 5489, 5501 и прочие).
»
#
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактив
1. Контрольная плазма с низким значением (Low) (5*1 мл).
Каждый пузырек содержит человеческую плазму, обогащенную Д-димером.
Приготовление.  Развести каждый пузырек 1мл физиологического раствора. Оставить на 5 минут и затем перемешать. Не 
трясти!
2. Контрольная плазма с высоким значением (High) (5*1 мл).
Каждый пузырек содержит человеческую плазму, обогащенную Д-димером.
88


--- стр. 89 ---
t
Приготовление.  Развести каждый пузырек 1мл физиологического раствора. Оставить на 5 минут и затем перемешать.Не 
трясти!
3). Другие компоненты набора.
Кащый комплект содержит руководство пользователя и лист со значениями контролей.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные пузырьки стабильны до окончания срока годности, указанного на этикетке, при условии правильного 
хранения. Разведенные реактивы стабильны 5 дней при 2+6°С или 3 месяца при -20 С. Не замораживать/размораживать 
более одного раза.
V. Пошаговое руководство
Контроли должны анализироваться также, как и плазма пациента.
VI. Референсные значения.
Референсные значения могут различаться между лабораториями в зависимости от используемой техники и 
реактивов. Поэтому каждая лаборатория должна сама устанавливать референсные границы для здоровых людей.
При смене лота реактивов референсные пределы надо пересчитывать. При непрохождении контролей следует 
сделать новую калибровку.
VII. Ограничения „ d,..Указанные значения контролей верны только при использовании набора фирмы Helena. В противном случае, вы
можете получить ложные результаты.
ш
4
1^
Тест-система "Скрининг на волчаночные антикоагулянты" (D R W T Screen).
I. Применение ^ . ,Волчаночные антикоагулянты (ВА) - это антитела классов IgG и 1дМ , которые блокируют фосфолипиды, 
участвующие в процессе свертывания. Появление этих антител связывают с такими заболеваниями как. многократные 
выкидыши, тромбоцитопения, тромбоз неизвестного генеза и неврологические заболевания. Наличие волчаночных антител
может повлиять на результаты АЧТВ-теста. _Данный набор предназначен для обнаружения ВА в плазме, это качественный анализ. Фактор X системы  
свертывания активируется ядом гадюки Рассела (фХа), после чего, в присутствии фосфолипидов и ионов кальция, запускает 
процесс свертывания. В результате работы каскада свертывания образуется легко обнаруживаемый сгусток. Безусловно, 
этот тест более чувствителен к наличию ВА, чем тест АЧТВ.
В случае обнаружения патологии на скрининговом тесте, следует воспользоваться подтверждающим тестом (кат
ном 5485).
II. Меры предосторожности
Регенты представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Информация по безопасности и способу утилизации отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
III. Реактивы
1. DRVVT Screen reagent.
В каждом флакончике содержится лиофилизированная смесь, состоящая из яда змеи Рассела, кальция хлорида и
фосфолипидов. „
Приготовление.  Добавить 2мл дистиллированной воды во флакон и оставить на 10 минут. Аккуратно перемешать, не
трясти!
2. Другие компоненты набора.
Компоненты набора содержат свою инструкцию.
IV. Хранение и стабильность
1.DRVVT Screen reagent.
Запечатанный реактив годен до окончания срока годности (при правильном хранении).
Разведенный реактив годен 24 часа при 15+30°С, 5 дней при 2+6°С, 2 недели при -20“С. Реаетивы могут быть заморожены 
только в пластиковых пробирках. Разморозить непосредственно перед использованием при 37 С.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5485 DRWT-confiim kit (Юфл. по 1мл)
2. кат ном 5499 NormTrol 1 (Юфл. по 3мл)
3. кат ном 5186 NormTrol 1 (Юфл. по 1мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Кровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9. 1. Натрия цитрат 
может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте при 2000+3000д в течение 15минут. Если в плазме остались тромбоциты, то 
либо еще раз отцентрифугируйте, либо пропустите через фильтр с диаметром пор 0.22мкм. Плазма должна храниться^при 
температуре 2+6°С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20 С в 
течение 2 недель или месяц при -70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не держать при 37 С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Ручной метод. ^
1. предварительно нагрейте готовый реагент до 37 С
2. поместите 200мкл плазмы пациента (или контроля) в реакционную кювету
3. инкубируйте при 37°С 2 минуты
89


--- стр. 90 ---
4. добавьте в кювету 200мкл реагента, заметьте время
5. определите время образования сгустка с точностью до 0.1 секунды
6. рассчитайте отношение:
X = плазма пациента на скрининговом реагенте/Мопл ТгоИ на скрининговом реагенте.
Измерение на автоматическом анализаторе.
Этот тест может быть осуществлен практически на любом авомате. Прибор должен быть запрограммирован на 
смешивание равных объемов плазмы и реактива, предварительно прогревать реактив. Используйте одноразовую посуду. 
Для получения более подробных инструкций, обратитесь к руководству пользователя на прибор.
VIII. Интерпретация результатов
Вы должны обязательно определить значение нормальной контрольной плазмы как на скрининговом, так и на 
подтверждающем реактивах. Также для окончательного анализа Вам могут понадобиться разведения плазмы пациентов с 
контрольной плазмой.
Если Вы померили плазму больного и ее значение вышло за референсные значения (для скрининга: нормальная 
плазма ± 3 среднеквадратичных отклонения), то возможно присутствие ВА. Вы должны провести тест смешивания с 
контрольной плазмой (Norm- Troll) в соотношении 1:1. А также обязательно выполнить подтверждающий тест (кат ном 5485).
В том случае, если время свертывания смеси не попадает в референсные значения, это может свидетельствовать 
о налиии ВА. Если время смеси укладывается в референсные значения, то, скорее всего, мы имеем дело с  
недостаточностью фактора (чаще всего ф11, фУ или фХ). Использование подтверждающего теста позволяет раличить ВА, 
недостаточность фактора и другие ингибиторы свертывания.
IX. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями, это связано с различием в реактивах и приборах. 
Поэтому каждая лаборатория должна устанавливать свои референсные значения. Следует провести тест на образцах 20 
здоровых взрослых мужчин и женщин. Вычислить среднее арифметическое и среднеквадратичное отклонение.
Референсные пределы: X = среднее значение ± 3 среднеквадратичных отклонения). Результаты, полученные 
компанией Helena с помощью скринингового теста: 33.3± 9.3 сек.
X. Ограничения
Плазма с недостатком факторов (ф11, фУ5 или фХ) дает патологию на скрининговом тесте. При смешивании с 
контрольной плазмой (Norm-Troll) в соотношении 1:1, результат (в случае недостаточности факторов) должен вернутся в 
референсные значения.
Случай, когда смешивание не приводит к возвращению в референс, может быть обусловлен: гепарином  
(концентрация >1U/ml), пероральными антикоагулянтами, ДВС синдромом.
Следует обязательно удалить остаточные тромбоциты, так как они являются источником фосфолипидов и могут 
давать ложно отрицательные результаты.
XI. Контроль качества
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть 
измерены нормальная и патологическая плазма, чтобы убедиться, что реактивы годны к применению и прибор исправен. 
Если измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными.
Компания Helena предлагает контрольные плазмы для теста ВА:
DRWT positive control кат ном 5486 (1фл по 1мл).
XII. Аналитические характеристики
Компания Helena или ее представители установили нижеприведенные характеристики: 
коэффициент вариации для одной аналитической серии и между сериями не должен превышать 5%. Каждая лаборатория 
должна устанавливать собственные характеристики.
II. Меры предосторожности
Регенты представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Информация по безопасности и способу утилизации отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
т
Тест-система "Подтверждение на волчаночные антикоагулянты" (D R W T Confirm).
I. Применение
Волчаночные антикоагулянты (ВА) - это антитела классов IgG и 1дМ , которые блокируют фосфолипиды, 
участвующие в процессе свертывания. Появление этих антител связывают с такими заболеваниями как: многократные 
выкидыши, тромбоцитопения, тромбоз неизвестного генеза и неврологические заболевания. Наличие волчаночных антител 
может повлиять на результаты АЧТВ-теста.
Данный набор предназначен для обнаружения ВА в плазме, это качественный анализ.
Следует использовать вместе два теста: скрининг (кат ном 5484) и подтверждение. В этом случае можно различить 
ВА, недостаточность фактора или другие ингибиторы. Если результаты теста пациента не попали в референсные значения 
для скрининга, и смесь его плазмы с нормальной плазмой также не попадает в пределы, то, скорее всего, имеет место 
наличие ВА. Далее нужно сделать подтверхедающий тест (в реактиве подтверждающего набора концентрация фосфолипидов 
очень велика,- теоритически они не могут быть все инактивированы ВА).
III. Реактивы
1. DRVVT confirm reagent.
Содержит лиофилизированную смесь, состоящую из яда змеи Рассела, кальция хлорида и фосфолипидов.
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды во флакон и оставить на 10 минут. Аккуратно перемешать. Не 
трясти!
90


--- стр. 91 ---
2, Другие компоненты набора.
Компоненты набора содержат свою инструкцию.
IV. Хранение и стабильность
1. DRVVT confirm reagent
Запечатанный реактив годен до окончания срока годности (при правильном хранении).
Разведенный реактив годен 24 часа при 15+30°С, 5 дней при 2+6°С, 2 недели при -20°С. Реактивы могут быть заморожены 
только в пластиковых пробирках. Разморозить непосредственно перед использованием при 37 С.
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
1. кат ном 5484 DRWT screen kit (Юфл по 2мл)
2. кат ном 5499 NormTrol 1 (Юфл. по 3мл)
3. кат ном 5186 NormTrol 1 ЙОфл. по 1мл)
VI. Забор и приготовление образцов
Кровь собирается в вакутейнеры. Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9: 1. Натрия цитрат 
может быть 3.2% или 3.8%. Отцентрифугируйте при 2000+3000д в течение 15минут. Если в плазме остались тромбоциты, то 
либо еще раз отцентрифугируйте, либо пропустите через фильтр с диаметром пор 0.22мкм. Плазма должна храниться^при 
температуре 2+6°С. Тесты должны проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20 С в 
течение 2 недель или месяц при -70“С. Быстро разморозить при 37°С. Не держать при 37°С более 5 минут.
¥
I
I
ft*
I
VII. Пошаговое руководство
Ручной метод. ^
1. предварительно нагрейте готовый реагент до 37°С
2. поместите 200мкл плазмы пациента (или контроля) в реакционную кювету
3. инкубируйте при 37°С 2 минуты
4. добавьте в кювету 200мкл реагента, заметьте время
5. определите время образования сгустка с точностью до 0.1 секунды
6. рассчитайте отношение:
X = плазма пациента на скрининговом реагенте/Мопл Troll на скрининговом реагенте.
Измерение на автоматическом анализаторе.
Этот тест может быть осуществлен практически на любом авомате. Прибор должен быть запрограммирован на 
смешивание равных объемов плазмы и реактива, предварительно прогревать реактив. Используйте одноразовую посуду. 
Для получения более подробных инструкций, обратитесь к руководству пользователя на прибор.
VIII. Интерпретация результатов
Для правильной интерпретации результатов следует обязательно использовать Norm Troll. Измерение этого 
контроля на скрининговом и подтверждающем реактивах позволит «нормализовать» результаты, то есть уменьшить 
расхождения, вызванные использованием разных приборов и разных серий (лотов) реактивов. Для этой же цели следует 
использовать тесты смешивания. Если образец пациента при скрининговом исследовании не попал в референсные 
значения, а при подтверждающем - попал в референсные значения, то, скорее всего, имеет место наличие ВА. Тесты 
смешивания в таком случае «возвращают» значения в пределы нормы.
Если у пациента были абнормальными и скрининг и подтверждение, а смешивание с Norm Troll в обоих случаях 
давало нормальные результаты, то, скорее всего, имеет место недостаточность фактора (ф11, фV или фХ).
Если у пациента были абнормальными и скрининг и подтверждение, а смешивание с Norm Troll нормализовало 
только подтверждающий тест, то, скорее всего, имеет место наличие ВА и недостаточность фактора.
Если у пациента были абнормальными и скрининг и подтверждение, а смешивание не номализовало результаты, 
то, скорее всего, имеет место наличие другого ингибитора свертывания.
Как отмечено выше, необходимо вычислять отношение (Ratio) как для скрининг-теста, так и для подтверждающего 
теста. Это поможет определить тяжесть заболевания.
(Скрининг отношение)/( Подтверждающее отношение)>2.0 -» Большое количество ВА.
(Скрининг отношение)/^ Подтверждающее отношение)=1.5-2.0 умеренные ВА.
(Скрининг отношение)/( Подтверждающее отношение)=1.2-1.5 — ►  слабые ВА
Скрининг Подтверждение Диагноз
Референсные значения Референсные значения
( - )секунд ( - )секунд
Пациент Пациент + контроль 
(1:1)
Пациент Пациент + контроль (1:1)
Диагноз
норма норма норма норма Здоров
патология патология норма норма ВА
патология норма патология норма Недостаток фактора
патология патология патология норма ВА+недостаток фактора
патология патология патология патология Другие ингибиторы
i
IX. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями, это связано с различием в реактивах и приборах. 
Поэтому каждая лаборатория должна устанавливать свои референсные значения. Следует провести тест на образцах 20 
здоровых взрослых мужчин и женщин. Вычислить среднее арифметическое и среднеквадратичное отклонение.
Референсные пределы: X = среднее значение ± 3 среднеквадратичных отклонения. Результаты, полученные 
компанией Helena на подтверхщающий тест: 32.4± 6.0 сек.
X. Ограничения
Случаи, когда результаты абнормальны (как для чистой плазмы, так и для плазмы, смешанной с Nomi Troll), 
обусловлены: гепарином (концентрация >1U/ml), пероральными антикоагулянтами.
91


--- стр. 92 ---
Следует обязательно удалить остаточные тромбоциты, так как они являются источником фосфолипидов и могут 
давать ложно отрицательные результаты.
XI. Контроль качества
Каждая лаборатория должна сама устанавливать программу контроля качества. Перед анализами должны быть 
измерены нормальная и патологичная плазма, чтобы убедиться, что реактивы годны к применению и прибор исправен. Если 
измерения контролей не проводились, то все полученные результаты признаются недостоверными.
Компания Helena предлагает контрольные плазмы для теста ВА:
DRWT positive control кат ном 5486 (1фл по 1мл).
XII. Аналитические характеристики
Компания Helena или ее представители установили следующие характиристики: 
коэффициент вариации для одной аналитической серии и между сериями не должен превышать 5%. Каждая лаборатория 
должна устанавливать собственные характеристики.
Положительный контроль на волчаночные антикоагулянты (LA Positive Control S).
I. Применение
Эта плазма приготовлена из пула плазм, полученных от людей, болеющих волчанкой.
Такая плазма должна приниматься как плазма больного волчанкой, при работе со следующими реактивами:
ВА-скрининг реагент (Drwt-screen кат ном 5484)
ВА-подтверждение реагент (Drwt-confinm кат ном 5485) 
и тесты типа АЧТВ (APTT-Si кат ном 5491 и 5492).
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
1. Lupus anticoagulant(1*1 мл).
Каждый флакон содержит 1мл лиофилизированной цитратной плазмы.
Приготовление.  Развести любой флакон 1мл дистиллированной воды. Слегка перемешать и оставить на 15 минут. Хорошо 
перемешать перед использованием. Не трясти!
2. Другие компоненты набора.
В каждый набор вложена инструкция по приготовлению плазмы, и листок со значениями.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанный флакон годен до окончания срока годности, указанного на паковке (при правильном хранении). 
Разведенную плазму нужно поместить на лед. При 2+6°С она стабильна 4 часа.
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль должен анализироваться как обычная плазма пациента (в соответствии с правилами работы с 
тест-наборами и прибором).
VI. Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями из-за различной техники и систем. Поэтому 
каждая лаборатория должна сама устанавливать референсные значения.
Данная плазма должна показать абнормальные (удлиненное время свертывания) результаты на скрининговом 
реагенте (кат ном 5484), и нормальные результаты (нормальное время свертывания) на подтверждающем реагенте (кат ном 
5485). Точные цифры указаны во вложенном в набор листке.
VII. Аналитические характеристики
Приведенные значения были получены компанией Helena или ее представителями, следует их рассматривать в 
качестве примера. Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические характеристики.
Определяли ВА-позитив контроль следующими реактивами: Протромбиновое время-LI, АЧТВ-Si, Скрининг-реактив 
и Подтверждающий-реактив компании Helena. Для расчета коэффициента вариации брали разные флаконы одной серии.
Drwt
PT-Li APTT-Si Screen Confimi Ratio
Время свертывания (сек) 12.3 34.20 47.3 33.8 1.40
CV 0.72 1.00 4.96 2.52 4.86
92


--- стр. 93 ---
t
I
Тест-система "Фактор Виллебранда антиген" (vWF Antigen (ELISA).
НАБОР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНА ФАКТОРА ФОН ВИЛЛЕБРАНДА.
Только для in vitro диагностики.
ПРИМЕНЕНИЕ
Ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELiSA) для количественного определения антигена фактора фон 
Виллебранда (FVW) в цитратной человеческой плазме.
ВВЕДЕНИЕ
Антиген FVW или антиген, высвобождающий Viii фактор является плазменным протеином, обнаруживаемым в крови в 
комплексе с неактивным Viii фактором (Viil:C), или прокоагулянтным протеином, называемым так же антигемофильным 
фактором.
Эти два протеина проявляют различные свертывающие свойства, как и имеют разные антигенные детерминанты. Дефицит 
Viii фактора вызывает заболевание истинной гемофилией, тогда как дефицит VW - болезнь Виллебранда. Основное 
количество фактора Виллебранда синтезируется и хранится в эндотелиоцитах, около 15-20% - синтезируется в  
мегакариоцитах и хранится в циркулирующих тромбоцитах. Молекула фактора VW имеет молекулярную массу 250 кО и 
тенденцию к полимеризации в циркулирующей крови от 850 кО до 15x10 6 кО. Фактор VW играет важную роль в  
гемостатической функции, он защищает Viii фактор от расщипления протеолитическими ферментами., помогает адгезии и 
агрегации тромбоцитов. Период полураспада фактора Viii без фактора VW уменьшается до 10-12 часов. Болезнь  
Виллебранда характеризуется наследственным дефицитом фактора VW. Болезнь Виллебранда может быть связана с 
количественным дефектом фактора VW (1 тип), или дефицитом функции (li тип). Болезнь Виллебранда характеризуется 
спонтанными и долгими кровитечениями из слизистых оболочек. Частота встречаемости болезни Виллебранда в популяции 
составляет около 1-3%. Приблизительно 80% болезни виллебранда представлено I типом.
Лабораторное исследование дефицита в может установить как количественные, так и качественные его недостатки. 
Количественное определение фактора VW основано на таких иммунологических исследованиях, как радиальная  
иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез, ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELISA). ELiSA может 
проводится в небольших лабораториях, и приводит к получению объективных, точных и воспроизводимых результатов. 
Проведение ELiSA возможно на специальных автоматических приборах.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принципом анализа антигена фактора VW является метод сендвич ELISA. Связанные специфические антитела против 
человеческого протеина С находятся в 96-луночной полиэстеровой планшете. Разведенная плазма пациентов инкубируется 
в лунках с прикрепленными на их поверхности антителами. Затем лунки промываются для удаления плазмы. Количество 
связанного антигена высчитывается применением лошадиной пероксидазы конъюгированной с человеческими анти фактор 
VW антителами. Связанные конъюгаты удаляются в процессе смывания. Хромогенный субстрат тетраметилбензидин (ТМВ) и 
гидрогенезированная пероксидаза приводят к появлению окрашивания, степень которого измеряется с помощью измерения 
оптической плотности на спектрофотометре с длинной волны 450 нм. Процент концентрации фактора VW в плазме больного 
высчитывается по кривой построенной по контрольной плазме, поставляемой в наборе.
РЕАГЕНТЫ
Хранение при 2° - 8°С. Не замораживать. Каждый антиген набор к фактору VW, содержащийся в 96 лунках, содержит:
12x8  лунок с антителами к человеческому FVW.
60 мл разбавитель образцов (сине-зеленый раствор); содержащий азид натрия,
3 пузырька X  0,5 мл лиофилизированной референсной плазмы, с полоской для анализа.
12 мл анти-антиге VWW человеческий коньюгат (синий раствор).
13 мл субстрата (тетраметилбензидин (ТМБ) и перекись водорода).
15 мл останавливающего раствора (0,36 N серной кислоты)
30 мл моющего концентрата (ЗЗХ раствора фосфатного буфера с 0,01% Tween 20)
ВНИМАНИЕ: турбидиметрия может возникать в промывочной концентрации, не имеющей необходимых компонентов 
анализа, тогда надо произвести разбавление.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Для in vitro диагностики.
1,
2,
3.
4.
5.
ИНСТРУКЦИЯ по ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
Фактор вон Виллебранда набор для полного изучения:
НЕ ВКЛЮЧЕННЫЕ В НАБОР МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
• Рекомендована фактор VW контрольная плазма с известными и сохраняемыми параметрами.
/гз
Человеческий материал использованный для приготовления референсной плазмы, содержащийся в данном наборе, 
протестирован и является негативным по НВзАГ, HCV, ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Иногда, дериваты, полученные из человеческого 
материала образцов пациентов, могут быть потенциально инфицированными.
Не пипетируйте ртом.
Не курите, не принимайте пищу и не пейте в тех местах, где могли находиться составные части набора.
При поврехедении перчаток при работе с компонентами набора незамедлительно тщательно промойте руки.
Компонент набора может вызывать покраснение глаз и кожи. Возможно проникновение через кожу. Пользуйтесь 
перчатками при работе с наборами и мойте руке после работы. Держите реагенты вдали от источников огня. Изгибайте 
контакта с окислительными агентами.
Образцы содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может образовывать азид меди, поэтому избегайте 
контакта с этим металлом. Азид этого метала является взрывоопасным. Все растворы, содержащие азиды, должны быть 
немедленно промыты достаточным количеством воды во избежание накопления их в промывочной системе.
ПОДГОТОВКА И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦА
Плазма, содержащая 3,2% - 3,8% цитрат натрия в качестве антикоагулянта, может быть использована, как основа. Кровь, 
взятая из вены, должна быть сразу отцентрифугирована. Полученная плазма, должна храниться при 2°- 8°С. После 8 часов 
хранения плазма не должна использоваться, для этого ее надо хранить при -70°С и использовать в течение 1 месяца..
93
L


--- стр. 94 ---
Пригодная для приготовления фосфатного буфера/Tween 20 моющего раствора, восстановления плазмы и для нулевого 
или известного считывания с пластины во время исследования.
Градуированный цилиндр.
Пригодная пипетка на 5 и 1000 микролитров, с наконечниками.
Различная стеклянная посуда, пригодная для малых объемов.
Сосуд или бутыль на 1 литр.
Моющиеся бутыли, предпочтительно переносимые, предназначенные для проведения ручной или полуавтоматической промывки. I
Доступные перчатки, предпочтительно без порошка.
Считывающий спектрофотометр с длинною волны 450 нм (по возможности с 650нм).
Многоканальный дозатор, предпочтительно 8 каналов.
Микропипетки для приготовления образцов.
4.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Согрейте до комнатной температуры образцы и реагенты (18-26°) и хорошо перемешайте. После процедуры все  
неиспользованные образцы и реагенты охлабите до 2°-8°С.
2. Все приготовленные для использования растворы и референсные плазмы должны быть использованы.
3. Одна плашка в каждом тесте должна содержать один образец воды. Нельзя добавлять в неё ни образец ни реагент. 
Поместите 200 pL воды для калибровки прибора сразу перед исследованием в спектрофотометре. Считыватель плашек 
должен быть установлен на ноль или бланкирован после считывания.
Для проведения исследования необходимо использовать только хорошо промытую, чистую технику. Предпочтительно 
использовать направленный поток моющего раствора из сминаемой пластиковой бутыли с широким наконечником на 
дне микропипетки. Моющий раствор не должен перемешиваться с водой во время процедуры. Автоматический 
промыватель планшет так же может быть использован.
5. ВАЖНО: неадекватное удаление резидуального количества фосфатного буфераЯ\д/ееп 20 может вызвать  
нехарактерный цвет субстрата.
6. Предпочтительно использование многоканального (8 канального) дозатора.
7. Тщательно проверяйте каждый шаг приготовления процедуры. Каждый образец, контроль, референт - разбавитель 
должен быть добавлен не познее через 5 минут. Объем образца не должен превышать количество, которое может быть 
добавлено за 5 минут.
8. Для всех инкубаторов, страт инкубирования начинается по завершении добавления реагентов или образцов.
9. Добавление всех образцов и реагентов должно осуществляться в одинаковых количествах и одинаковой  
последовательности.
10. Температура инкубирования выше или ниже комнатной температуры (18-26°) может привести к неточным результатам 
исследования.
11. Избегайте контаминации реагентами при открывании и закрывании первичных флаконов.
12. Не используйте компоненты набора после срока годности.
13. Содержащиеся в наборах микропланшеты, конъгаты, субстраты не должны использоваться с другими наборами.
Приготовление реагентов
1. Моющий раствор - фосфатного буфера/Tween 20 раствор: Отмерьте 30 мл моющего концентрата (ЗЗХ фосфатного 
буфераЯ\л/ееп 20) и разведите 1 литром приготовленной и отградуированной воды. Рн приготовленного раствора 
должен быть 7,35 ± 0,1. Данный раствор рассчитан примерно на 20 проб, храниться при 2-8°С. Его необходимо 
утилизировать при признаках контаминации.
2. Восстановление референсной плазмы осуществляется путем добавления 0,5 мл приготовленной воды. Тщательно 
перемешайте. Дайте отстояться в течение 10 минут перед использованием до полной гомогенизации. Оставьте 
максимум на 8 часов, затем храните при температуре 2-6°С. Соответствующая контрольная плазма приготавливается и 
храниться соответственно прилагаемой инструкции.
2.
Процедура проведения исследования
1. Достаньте микролуночную планшету, которая не использовалась, из рамки в приготовленное место для хранения.
Приготовьте каждую референсную плазму в двух экземплярах. Дублирование, так же рекомендовано для контролей. 
Одна ячейка используется как бланк реагента, в другие добавляется образец разбавителя без сыворотки  
последовательно в 6 шагов в одной секции. Эта ячейка используется в качестве контроля, или образец образца 
последующего шага. Приготовленная вода помещается в каждую лунку, так чтобы заполнить до 200 pL реагентной воды, 
до завершения приготовления сразу перед началом считывания. Так же должна использоваться одна лунка, как 
контроль образца воды.
Используя разведенную плазму для поставляемую в наборе, приготовьте 6 рабочих позиций как описано ниже:3.
Объем референс-плазмы 
(1:2)
Объем дилюента  
образца
*Референсный
уровень
30 ц1 + 500 м 1 = 150
20 р1 + 500 M l = 100
15 р1 + 500 M l = 75
10 м 1 + 500 M l = 50
10 M l + 1000 M l = 25
10 M l + 2000 M l = 12,5
"10 M l + "4000 M l = 6,25
4.
5.
6.
7.
8.
'Референсные уровни объема, используемые только для построения референсной кривой 
"Делается одно дополнительное разведение если исследуемый уровень в рефересной плазмы al50%
Приготовьте 1:26 разведения образца пациента и контролей для использования разбавителя образца (сине-зеленый 
раствор); 20 р1 до 500 р1 Образца дилюента Тщательно перемешать.
Добавить 100 р1 разбавителя образца (референсная плазма х 6, образцы и контроль) в предназначенную лунку. 
Добавить 100 р1 образца в реагент. Тщательно удалите воду.
Инкубировать в течении 15 минут в комнатной температуре, удалите воду.
Промыть 4 раза рабочим моющим раствором (фосфатного буфераЯ\л/ееп 20). Каждая лунка должна быть заполнена 
раствором при промывке. Промытые лунки необходимо тщательно высушить. Перевернутые лунки постучите, чтобы
t
94


--- стр. 95 ---
9.
10,
11.
12.
13.
лучше освободить от жидкости. Рамка должна быть выдавлена в центр верхушки и дно сохраняет модуль микролунок в 
процессе промывки. Используйте абсорбентную бумагу, для остаточного удаления воды. Не позволяйте лункам 
сообщаться между собой.
Добавить 100 р1 коньюгата (синий) в каждую лунку (с тщательно удаленной водой).
Инкубировать в течение 15 минут в комнатной температуре после заверщения инкубации тщательно перевернуть лунки 
и вытрихните раствор.
Промыть 4 раза рабочим раствором , как в пункте 8, Промывающий раствор не должен смешиваться в процессе 
процедуры. Используя пощелкивание, удалить остатки воды, затем использовать промокательную бумагу.
Добавить 100 р1 субстрата в каждую лунку (проверить хорошо ли удалена вода) и инкубировать 10 минут при комнатной 
температуре. Добавить субстрата в каждую исследуемую лунку в той же пропорции. Синий цвет должен появиться в 
позитивных образцах.
Добавить 100 р1 останавливающего раствора (0,36 М  серной кислоты) в кахедую лунку (проверить, чтобы не было воды) 
для остановки реакции.. Добавляйте в тех же пропорциях, что и субстрат раствор. Синий раствор станет желтым, 
цветной - обесцветится. Не добавляйте останавливающий раствор в лунки с водой. Взамен, добавить 200 р1 воды для 
разведения реагента в ячейки с водой. Значение или ноль напротив лунки с водой. Считайте оптическую плотность 
(ОП) каждой ячейки при 450 нм, затем при 650 нм (если возможно). Для получения лучшего результата объемы 
оптических областей надо измерять спустя 30 минут после добавления останавливающего раствора.
Результаты
1. Сосчитать среднюю оптическую плотность дубликатов растворов референсных плазм, контролей выбранных для 
использования, образцов пациентов.
2. Отметьте среднюю ОП, наблюдаемую в каждом разведении референсной плазмы (ось X) напротив соответствующих 
значений референсных уровней (ось У). Рекомендуется использовать график с логарифмическими значениями на обеих 
осях, диаграммы и линейные графики.
3. Используя значения ОП, определите контроль и сравнительные значения пациентов по графической кривой, или 
используя линейную регрессию.
4. Для подсчета уровня фактора Виллебранда в %  от нормы умножить контроль и относительное значение пациента, 
наблюдаемое на используемой кривой на заданное значение для референс плазмы (см. этикетку).
5. Для проверки того, что параметры находятся в пределах контроля качества (см. КК).
Контроль качества
1. Основная оптическая плотность (ОП) должна быть меньше 0.1, если спектрофотометр настроен правильно по образцу 
воды. Если ОП больше 0.1 , то возможно образец загрязнен примесью тромбоцитов.
2. Индивидуальные расхождения ОП в дубликатах может отклоняться от средней в пределах 20% в образцах с  
поглощением более 0.200.
3. Уровень фактора VW в контролях должен быть в пределах, указанный производителем. Хотя некоторое отклонение 
возможно.
4. Каждая лаборатория должна периодически проверять определяемые значения по этой инструкции.
ИССЛЕДУЕМЫЕ УРОВНИ
Нормальный уровень: Плазменный антиген фактора VW измеряется в %  от нормальной пулированной плазмы.
Нормальный уровень антигена VW в пулированной плазме составляет 47-197%, (среднее 105,8%, СО 39%). Этот уровень
признан нормальным в научной литературе и во всех наблюдаемых случаях исследований (50-160%). Образцы с более
высоким уровнем, чем калибровочная кривая, должны быть разбавлены до нормальных значений.
ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЯ;
t
к
Уровни детекции:
Описанные уровни детекции антигена фактора VW находятся в промежутке между 5-200%, Хотя, определяемые уровни 
завися от уровня антигена в референсной плазме. Для большей правильности, образцы с уровнем антигена находящимся за 
пределами уровней ОП необходимо перепроверить, предварительно разведя.
Точность:
Меж-исследовательская точность:
Для определения точности между плашками, три образца плазмы с известными концентрациями антигена фактора VW 
(высоким, средним и низким) тестируются в 16 лунках двумя операторами на 6 плашках по 3 в каждой. Данные,  
представленные в следующей таблице, показывают средний коэффициент вариации - 3,6% между лотами. В примере 
показаны уровни антигена фактора VW , определнные у 99 пациентов в 3 лотах для выяснения точности показанной в данной 
инструкции. Показано , что КВ между дубликатами составляет 2,5%.
Внутри-исследовательская точность:
10 образцов плазм с известными уровнями антигена фактора VW между 57% и 159% были протестированы в дубликатах для 
определения точности между лотами. Средний КВ составил 5%, как видно в таблице.
Меж-исследовательская
точность
(вариабельность между 
плашками)
Уровень фактора  
VW (%  от нормы)
Коэффициент
вариации
Общий
коэффициент
вариации
Повторы (х16) 149%-155% 1,9-7,9%
75%-89% 2,2-7,7%
57%-83% 1,8-9,9% 3,6%
Дубликации 54%-276% 2,5%
Внутри-
исследовательская
точность
(вариабельность между 
лотами)
57%-159% 3,0-12,1% 5,0%
95


--- стр. 96 ---
Линейность:
Двойное разведение плазмы, референсной по фаетору VW, тестируемой в трех лотах Helena biosciences демонстрируют 
кривую со средним коэффициентом, определяемым в квадрате как 0,995. Индивидуальные точки получения реагента от 
10,7% до 14,0%.
Точность:
Точность определяется с помощью тестирования смешенной референсной плазмы и заранее извесными Helena biosciences 
объемами антигена фактора VW и расчетом теоритических величин. Среднее значения процена восстановления в 3 лотах 
составило 103,6% со средним коэффициентом вариации 5,7%.
ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТОВ:
Наблюдаемые концентрации антигена фактора VW использованные в данном исследовании определялись только для 
исследования. Каждый исследователь интерпритирует полученные данные, исходя из истории болезни, данных  
обследования, других аналитических данных. Остаются не выясненными механизмы регуляции нормального содержания 
фактора VW. Уровень фактора VW может резко возрастать при стрессе, антикоагулянтной терапии, хирургических 
вмешательствах, долезнях печени, аутоиммунных заболеваниях, раке простаты.
Образцы плазмы могут содержать сниженное количество фактора VW из-за неправильного хранения или обработки в 
лаборатории, у некоторых индивидуумов уровень может достигать 25% в сравнении с другими. Так у больных  
лимфопролиферативными заболеваниями описаны случаи болезни Виллебранда.
Плазма пациентов может содержать анти-антитела (мышиные, кроличьи, лошадиные и т.д.), если те вводились им в 
диагностических целях или в процессе лечения, которые могут связывать антитела в диагностических наборах. У данных 
пациентов возможно неадекватное снижение лабораторного определения антигена фактора VW.
Тест-система "Протеин S (клоттинговый метод)" (Protein S (Clot).
I. Применение
Набор предназначен для определения функциональной активности протеина S (Пр8) в плазме крови человека 
клоттинговым методом.
Протеин S - витамин К-зависимый белок, синтезируемый в печени, сосудистом эндотелии, мегакариоцитах, который 
играет важную физиологическую роль в противосвертывающей системе протеина С [1,2]. Эта антикоагулянтная система 
является одним из важнейших регуляторов гемостаза посредством ингибирования образования сгустка и активации системы 
фибринолиза. Пр8 функционирует как кофактор активированного протеина С (аПрС) на мембране клеток сосудистой стенки, 
усиливая скорость деградации фУа и ф\/111а, замедляя, таким образом, скорость образования сгустка.
В нормальной плазме приблизительно 40% Пр8 циркулирует в виде свободных молекул, в то время как 60 % 
состоят в комплексе с плазменным белком С4Ь классической системы комплимента. Только свободный Пр8 функционально 
активен и способен связываться с аПрС, тогда как связанный Пр8 не активен.
Набор для измерения Пр8 компании Helena предназначен для определения количества функционального Пр8. В 
данном методе разведения нормальной плазмы смешиваются с плазмой, дефицитной по Пр8. Смешанная плазма затем 
активируется реактивом, содержащим аПрС, фУа и фосфолипиды. После активации образование сгустка инициализируется 
добавлением кальция хлорида. Человеческий аПрС и фУа добавляются в таком количестве, чтобы нормализовать дефицит 
фактора в плазме пациента, предотвращая ложно положительные или отрицательные результаты функциональной 
активности Пр8. Удлинение времени свертывания, таким образом, напрямую связано с концентрацией Пр8 в плазме крови 
пациента.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности и способу утилизации. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на 
упаковке) антигенов к гепатиту В (HBsAg), Н1У1,2 и НСУ антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе 
следует обращаться с ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
1. активатор протеина S.
Кахщый флакон содержит АРС торговой марки Polybrene и растворяющие компоненты.
Приготовление.  Растворить в 1 мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед  
использованием.
2. плазма, дефицитная по протеину S.
Каждый флакон содержит дефицитную по Р8 плазму, полученную аффинным методом.
Приготовление.  Растворить в 1 мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед  
использованием.
3. фактор Va.
Каждый флакон содержит человеческий фУа и стабилизаторы.
Приготовление.  Растворить в 1мл дилюента для фУа. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед  
использованием.
4. Дилюент для фактора Va.
Каждый флакон содержит элаговую кислоту, фосфолипиды, буфер, стабилизаторы и консерванты (включая 0.2% фенол). 
Приготовление.  Реактив уже готов к применению. Аккуратно перевернуть несколько раз до получения гомогенной суспензии.
5. 25тМ раствор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 25тМ раствор кальция хлорида.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
6. 0.9% солевой раствор.
Каждый флакон содержит 0.9% раствор натрия хлорида и 0.09% азида натрия в качестве консерванта.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
96


--- стр. 97 ---
/о
/
о
7. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV . Хранение и стабильностьЗапечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
1. активатор протеина S
Разведенный реактив годен к применению в течение 1  недели при температуре хранения 2+6 С или 8 часов при комнатной 
температуре. Не замораживать!
2. плазма, дефицитная по протеину S
Разведенный реактив годен к применению в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 4 часа при комнатной 
температуре или 1  месяц при -20°С, если реактив будет разморожен только один раз.
3. фактор Va
Разведенный реактив годен к применению до 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 3.5 часа при комнатной температуре. 
Не замораживать!
4. разбавитель для фактора Va
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
5. 25тМ раствор кальция хлорида
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
6. 0.9% солевой раствор
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
SARP кат ном 5185.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана в пробирку с 3.2% или 3.8% цитратным антикоагулянтом (1 часть). После центриф^/гирования при оборотах 
2000+3000 * g в течение 15 минут плазму отделить. Плазму следует хранить при температуре 2+6 С. Тестирование должно 
быть проведено в течение 4 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при температуре -20 С 
в течение 2 недель или при -70°С в течение 1 месяца. Разморозить быстро при 37°С перед проведением измерений. Не 
держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство 
Измерения рекомендуется дублировать.
Внимание;  Перед каждым измерением следует строить новую калибровочную кривую. Следует убедиться, что разведено 
достаточное для измерений количество реактива. При необходимости, одинаковые по составу флаконы можно пулировать. 
Ручной метод.Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Поместить 25гпМ раствор кальция хлорида в инкубатор
на 37“С.Приготовить исходный раствор стандарта путем смешивания 200мкл референсной плазмы и 1800мкл солевого раствора.
Сток V стандарта, мкл V солевого р-ра, мкл активность, %
1 400 0 100
2 300 100 75
3 200 200 50
4 100 300 25
5 0 400 0
Подготовить разведения контроля и образцов плазмы пациента добавлением 50мкл плазмы к 450мкл солевого 
раствора.Все стандарты, разведения контроля и плазмы пациента держать на льду и провести измерения в течение 30 минут.
В кювету для коагулогических измерений добавить:
1. Ю Омкл дефицитной по PS плазмы.
Ю Омкл разведения стандарта, контроля или плазмы пациента.
Ю Омкл реактива активатора PS.
Ю Омкл реактива фУа.
Инкубировать 3 минуты при 37°С. 
добавить Юмкл раствора кальция хлорида 
запустить таймер
заметить время свертывания с точностью до 0.1 секунды.
построить график зависимости активности ПрЗ (ось X) от времени свертывания (осьУ).
Интерполировать значения контроля и плазмы пациента по калибровочной кривой.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
97


--- стр. 98 ---
Автоматизированный метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Запустить АС-4, используя опцию PS-test в настройках
Start=15sec Method=coag M ix=1 Patient (pat) Vol=6pl 
Pos=35 (CP)
Def plasma (DP)
Уо1=60р1
Pos=34
lncub=180sec Math=lin Clean=1 Buffer (saline)
Vol=54pl
Pos=39
PS activator (RO) 
Vol=60pl Pos=29
Runtime=300sec Sens=3 t-corr=0%
s-corr=0%
Clear (CLR) 
VoI= 0mI
Factor V (R1) 
Vol=60pl Pos=31
CaCI2 (R2) 
Vol=60ul Pos=26
VIII. Интерпретация результатов
Дефицит Пр8, как врожденный, так и приобретенный, может приводить к серьезным тромботическим осложнениям, 
таким как тромбофлебиты, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Распространение дефицита flpS среди массы 
населения оценивается как менее 1  случая на 300 человек. 2/3 пациентов с врожденным дефицитом Пр8 (уровень менее 
50% от нормы) могут страдать венозным тромбозом в зрелом возрасте [5,6]. Среди молодых пациентов (до 35 лет) с 
историей тромбозов, распространенность может достигать 15+18% [7]. Приобретенный дефицит Пр8 может возникать при 
беременности, во время применения оральных контрацептивов или оральной антикоагулянтной терапии, при заболеваниях 
печени, сахарном диабете, послеоперационных осложнениях, сепсисе и других инфекционных синдромах [8]. Сниженная 
активность Пр8 в плазме может иметь место при низкой концентрации или нарушенной функции молекулы Пр8.
Снижение активности Пр8 в плазме связано с возросшей частотой возникновения тромбоэмболизма [9]. Сниженная 
активность Пр8 необязательно означает снижение концентрации. Для лабораторной диагностики дефицита Пр8 нужно 
проводить качественный (функциональный) и количественный (по уровню антигена) анализы. Компания Helena предлагает 
наборы для проведения твердофазного иммуноанализа (ELISA) как с полноценным содержанием Пр8, так и со свободным 
от его содержания, (кат ном 5286, 5293).
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы, доступные для использования с данным набором 
реактивов: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC-2.
X. Ограничения
1. Сбор образцов. Убедитесь, что использовано правильное соотношение антикоагулянта/крови.
>150% протеина 8. Образцы пациентов с повышенным уровнем содержания Пр8 должны измеряться после 
разбавления для получения точных результатов. Откорректированный уровень Пр8 должен быть получен при 
разбавлении по крайней мере в 2 раза.
Влияние гепарина/варфарина. Гепарин в концентрации >1ед\мл может вызывать удлинение времени свертывания и, 
следовательно, оказывать эффект завышенного содержания Пр8. Пациенты, получающие варфарин, могут иметь 
ложно заниженную активность Пр8. 
фУ 111. Содержание >200% не влияет на результат.
Волчаночный антикоагулянт. Образцы, содержащие волчаночный антикоагулянт с удлиненным значением АЧТВ могут 
давать ложно завышенные значения Пр8 и должны быть подтверждены тестом со свободным антигеном.
Мутация фУ Лейден. Граница низкого функционального уровня Пр8 пациентов с фУ-Лейден мутацией должна быть 
проверена тестом со свободным антигеном.
Влияние ингибитора тромбина. Ингибиторы тромбина (гирудин, бивалирудин и др.) в образце пациента могут приводить 
к завышению содержания Пр8.
2 .
XI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от 
используемых методов и анализаторов. В связи с этим, каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений.
Ожидаемая область нормальных значений протеина 8 гендер-специфична [11].
Мужчины 85+157% Женщины 65+136%
ХМ.Аналитические характеристики
Представленные характеристики измерений были определены компанией Helena или ее представителями и 
являются примером. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Внутри одной аналитической серии.
Уровень DpS, % 
n=8 98.1
коэф. вар. внутри пробы, %
5.04
n=8 32.4 6.14
Между разными аналитическими сериями.
Уровень Пр8,% 
п=8 96.7
коэф. вар. между пробами, %
2.8
п=8 25.4 11.19
Между партиями.
Уровень Пр8, % 
п=8 91.7
коэф. вар. внутри пробы, %
8.69
п=8 26.4 15.33
Точность
98


--- стр. 99 ---
о
М
Сравнение набора для определения ПрЗ (коагулогичекий метод) фирмы Helena с другим коммерчески доступным 
набором (Stago Staclot Assay) дало результат с хорошей корреляцией (г=0.82).
Чувствительность
Метод чувствителен к 10% ПрЗ.
Линейность
Метод обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 10+150% ПрЗ.
Тест-система "Общий и свободный протеин S антиген" (Total and Free Protein S Antigen).
Только для in vitro диагностики.
ПРИМЕНЕНИЕ
Ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELISA) для количественного определения антигена протеина 3 в 
цитратной человеческой плазме.
ВВЕДЕНИЕ
Протеин 3 является витамин К зависимым фактором, синтезирующимся гепатоцитами, сосудистым эндотелием, 
мегакариоцитами, играет важную роль в протеин С антикоагулянтной системе. Вместе с тромбином и эндотелиальными 
клетками, через комплекс каскадных реакций обеспечивают контроль гемостаза под при взаимодействии свертывающей и 
противосвертывающей систем.
Протеин 3 является кофактором протеина С, который активируется при переходе тромбина в трамбомодулин в присутствии 
трансмембранных рецепторов на эндотелиальных клетках. Активированный протеин С взаимодействует с протеином 3 на 
мембране эндотелиальных клеток и тромбоцитах. Образующийся комплекс инактивирует V-активированный и VIII- 
активированный факторы свертывания, что снижает потенциал свертывающей системы. Активированный протеин С так же 
участвует в активации тканевого активатора плазминогена путем отщепления от него молекулы ингибитора (PAY-1), тем 
самым усиливая разрушение тромба и фибринолиз. В норме в плазме человека 40% протеина 3 циркулирует в свободном 
виде, а 60% - в комплексе с С4в компонентом комплемента. Только свободная форма протеина 3 активна в отношении 
протеина С.
Дефицит врожденный или приобретенный протеина 3 может приводить к выраженным тромботическим осложнениям, таким 
как тромбофилия, тромбозам глубоких ведет и тромбоэмболии легочной артерии. Частота встречаемости дефицита 
протеина С в популяции составляет 1 на 300 (случаи с более чем 50% снижением). У молодых людей с венозными 
тромбозами, частота дефицита протеина 3 может достигать 15% - 18%. Приобретенный дефицит протеина 3 часто 
встречается при заболеваниях печени, у хирургических больных, больных находящихся на оральной антикоагулянтной 
терапии, сахарном диабете, септицемии. Так же встречаются функциональные аномалии молекулы. Количественное 
определение протеина 3 основано на таких иммунологических исследованиях, как радиальная иммунодиффузия, 
иммуноэлектрофорез, ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELISA). ELISA может проводится в 
небольших лабораториях, и приводит к получению объективных, точных и воспроизводимых результатов. Проведение ELISA 
возможно на специальных автоматических приборах. Для точного установления причины гиперкоагуляции необходимо 
исследование как связанного, так и приобретенного дефицита протеина 3.
ПРИН14ИП МЕТОДА
Принципом анализа протеина 3 является метод сендвич ELISA. Связанные специфические антитела против человеческого 
протеина 3 находятся в 96-луночной полиэстеровой планшете. Разведенная плазма пациентов инкубируется в лунках с 
прикрепленными на их поверхности антителами. Затем лунки промываются для удаления плазмы. Количество связанного 
протеина 3 высчитывается применением лошадиной пероксидазы конъюгированной с человеческими анти протеин 3 
антителами. Связанные коньюгаты удаляются в процессе смывания. Хромогенный субстрат тетраметилбензидин (ТМВ) и 
гидрогенезированная пероксидаза приводят к появлению окрашивания, степень которого измеряется с помощью измерения 
оптической плотности на спектрофотометре с длинной волны 450 нм. Процент концентрации протеина 3 в плазме больного 
высчитывается по кривой построенной по контрольной плазме, поставляемой в наборе. Измерение свободного протеина 3, 
возможно при предварительной преципитации комплекса протеина с С4в молекулой. Возможно так же исследование 
супернатанта плазмы, содержащего только свободный протеин 3. Плазма без полиэтиленгликоля отображает общее 
количество протеина 3, в отличие от плазмы при его наличии.
РЕАГЕНТЫ
Хранение при 2° - 8°С. Не замораживать. Каждый протеин 3 антиген набор, содержащийся в 96 лунках, содержит:
12x8 лунок с антителами к человеческому протеину 3.
60 мл разбавитель образцов (сине-зеленый раствор); содержащий азид натрия.
3 пузырька X 0,5 мл лиофилизированной референсной плазмы, с полоской для анализа.
12 мл анти-протеин 3 человеческий коньюгат (синий раствор).
13 мл субстрата (тетраметилбензидин (ТМВ) и перекись водорода).
15 мл останавливающего раствора (0,36 N серной кислоты)
30 мл моющего концентрата (ЗЗХ раствора фосфатного буфера с 0,01%/Tween 20): турбидиметрия может возникать в 
промывочной концентрации, не имеющей необходимых компонентов анализа, тогда надо произвести разбавление.
2 мл реагента свободного протеина 3 - полиэтиленгликоля (PEG)
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Для in vitro диагностики.
7. Человеческий материал использованный для приготовления референсной плазмы, содержащийся в данном наборе, 
протестирован и является негативным по HBsAT, HCV, ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Иногда, дериваты, полученные из человеческого 
материала образцов пациентов, могут быть потенциально инфицированными.
Не пипетируйте ртом.
Не курите, не принимайте пищу и не пейте в тех местах, где могли находиться составные части набора.
При повреждении перчаток при работе с компонентами набора незамедлительно тщательно промойте руки.
Компонент набора может вызывать покраснение глаз и кожи. Возможно проникновение через кожу. Пользуйтесь 
перчатками при работе с наборами и мойте руке после работы. Держите реагенты вдали от источников огня. Изгибайте 
контакта с окислительными агентами.
8.
9,
10. 
11.
99


--- стр. 100 ---
12.
13.
Образцы содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может образовывать азид меди, поэтому избегайте 
контакта с этим металлом. Азид этого металла является взрывоопасным. Все растворы, содержащие азиды, должны 
быть немедленно промыты достаточным количеством воды во избежание накопления их в промывочной системе.
На компонентах реагентов имеются следующие предупреждения, указанные на наклейках: опасно при проглатывании (R 
22). Возможно покраснение глаз и кожи при контакте (R 36/38). Избегайте контакта с глазами и кожей (S 24/25). При 
попадании в глаза промойте большим количеством воды и обратитесь за медицинской помощью (S 26). Носите удобную защищающую одежду (S 36).
ПОДГОТОВКА И  ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦА
Плазма, содержащая 3,2% - 3,8% цитрат натрия в качестве антикоагулянта, может быть использована, как основа. Кровь, 
взятая из вены, должна быть сразу отцентрифугирована. Полученная плазма, должна храниться при 2°- 8°С. После 8 часов 
хранения плазма не должна использоваться, для этого ее надо хранить при -70°С и использовать в течение 1 месяца..
ИНСТРУКЦИЯ по
Протеин S антиген набор для полного изучения:
НЕ ВКЛЮЧЕННЫЕ В НАБОР МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
• Протеин S (общий/свободный) контрольная плазма. Восстановленная плазма с инструкцией по пользованию и хранению.
• Пригодная для приготовления фосфатного буфера/Tween 20 моющего раствора, восстановления плазмы и для нулевого 
или известного считывания с пластины во время исследования.
Градуированный цилиндр.
Пригодная пипетка на 5 и 1000 микролитров, с наконечниками.
Различная стеклянная посуда, пригодная для малых объемов.
Сосуд или бутыль на 1 литр.
Моющиеся бутыли, предпочтительно переносимые, предназначенные для проведения ручной или полуавтоматической промывки.
Доступные перчатки, предпочтительно без порошка.
Считывающий спектрофотометр с длиной волны 450 нм (по возможности с 650нм).
Многоканальный дозатор, предпочтительно 8 каналов.
Микропипеткй для приготовления образцов.
Центрифуга.
15.
16.
18.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
14. Согрейте до комнатной температуры образцы и реагенты (18-26°) и хорошо перемешайте. После процедуры все 
неиспользованные образцы и реагенты охладите до 2°-8°С.
Все приготовленные для использования растворы и референсные плазмы должны быть использованы.
Одна плашка в ках<дом тесте должна содержать один образец воды. Нельзя добавлять в неё ни образец ни реагент. 
Поместите 200 pL воды для калибровки прибора сразу перед исследованием в спектрофотометре. Считыватель плашек 
должен быть установлен на ноль или бланкирован после считывания. ,
17. Для проведения исследования необходимо использовать только хорошо промытую, чистую технику. Предпочтительно 
использовать направленный поток моющего раствора из сминаемой пластиковой бутыли с широким наконечником на 
дне микропипетки. Моющий раствор не должен перемешиваться с водой во время процедуры. Автоматический 
промыватель планшет так же может быть использован.
ВАЖНО: неадекватное удаление резидуального количества фосфатного буфера/Tween 20 может вызвать 
нехарактерный цвет субстрата.
Предпочтительно использование многоканального (8 канального) дозатора.
Тщательно проверяйте каждый шаг приготовления процедуры. Каждый образец, контроль, референт - разбавитель 
должен быть добавлен не познее через 5 минут. Объем образца не должен превышать количество, которое может быть 
добавлено за 5 минут.
Для всех инкубаторов, страт инкубирования начинается по завершении добавления реагентов или образцов. 
Добавление всех образцов и реагентов должно осуществляться в одинаковых количествах и одинаковой 
последовательности.
Температура инкубирования выше или ниже комнатной температуры (18-26°) может привести к неточным результатам исследования.
Избегайте контаминации реагентами при открывании и закрывании первичных флаконов.
Не используйте компоненты набора после срока годности.
Содержащиеся в наборах микропланшеты, конъгаты, субстраты не должны использоваться с другими наборами.
19.
20 .
21.
22.
23
24.
25.
26.
4.
Приготовление реагентов
3. Моющий раствор - фосфатного буфера/Tween 20 раствор: Отмерьте 30 мл моющего концентрата (ЗЗХ фосфатного 
буфера/Tween 20) и разведите 1  литром приготовленной и отградуированной воды. Рн приготовленного раствора 
должен быть 7,35 ± 0,1. Данный раствор рассчитан примерно на 20 проб, храниться при 2-8°С. Его необходимо 
утилизировать при признаках контаминации.
Восстановление референсной плазмы осуществляется путем добавления 0,5 мл приготовленной воды. Тщательно 
перемешайте. Дайте отстояться в течение 10 минут перед использованием до полной гомогенизации. Оставьте 
максимум на 8 часов, затем храните при температуре 2-6°С. Соответствующая контрольная плазма приготавливается и 
храниться соответственно прилагаемой инструкции.
Процедура проведения исследования
14. Достаньте микролуночную планшету, которая не использовалась, из рамки в приготовленное место для хранения.
15. Приготовьте каждую референсную плазму с общим и свободным протеином S в двух экземплярах. Дублирование, так же 
рекомендовано для контролей. Одна ячейка используется как бланк реагента, в другие добавляется образец 
разбавителя без сыворотки последовательно в 7 шагов в одной секции. Эта ячейка используется в качестве контроля, 
или образец образца последующего шага. Приготовленная вода помещается в каждую лунку, так чтобы заполнить до 
200 pL реагентной воды, до завершения приготовления сразу перед началом считывания. Так же должна 
использоваться одна лунка, как контроль образца воды.
Подготовьте плазму для исследования свободного протеина S. Подготовка осуществляется путем добавления во все 
образцы, контроли, референсы полиэтиленгликоля (PEG). Добавьте 15 р1 полиэтиленгликоля к 85 р1 плазмы. Если
16.
100


--- стр. 101 ---
io ^
17.
18.
используется супернатант, то для приготовления референсной кривой (95 р1), добавьте 45 р1 PEG к 255 р1 референсной 
плазмы. Взболтайте и положите в лед на 30 минут. Центрифугируйте 10 минут при 3000 об/мин. Используйте 
супернатант для приготовления кривой и образцов разведения (см. пункт 5,6).
Чтобы развести все плазмы (1:2 разведения разбавителем образцов) следует:
Референс-плазма:  добавить lOOpL референсной плазмы к lOOpL разбавителя образца.
Контрольный образец и образец пациента:  добавить 20pL референсной плазмы к 20pL разбавителя образца.
Хорошо перемешать. Это предразведение используется в 4-5 шагах исследования
Используя 1:2 разведенную плазму для 3 шага , приготовьте 6 рабочих позиций как описано ниже:
Объем референс-плазмы Объем
образца
дилюента *Референсный
уровень
30 ц1 + 500 ц1 15 0
20 р1 + 500 р1 = 10 0
15 м 1 + 500 M l = 7 5
10 р1 + 500 M l = 50
10 р1 + 10 0 0  M l = 25
10 р1 + 20 0 0  M l = 1 2 ,5
t
Референсные уровни объема, используемые только для построения референсной кривой
19. Для приготовление рабочего раствора для контроля и образцов надо:
Для общего протеина S: добавлением 20 р1 предварительно разведенной плазмы (1:2 разведенную плазму для 4 шага) 
до 500 р1 Образца дилюента .
Для свободного протеина S: добавлением 20 р1 PEG-разведенную плазму (для 4 шага) до 500 р1 Образца дилюента . 
(Внимание: это разведение соответствует 100% референсной плазмы)
20. Тщательно перемешать и добавить 100 р1 рабочего раствора (референсная плазма, контроль и образец пациента) в 
соответствующую лунку.
21. Добавить 100 р1 разбавителя образца реагент-бланк лунку. Полностью удалите из нее воду.
22. Инкубировать в течении 40 минут в комнатной температуре, затем тщательно переверните лунки и удалите жидкость. 
Не позволяйте контаминировать жидкостью соседние ячейки.
23. Промыть 4 раза рабочим моющим раствором (фосфатного буфераЯууееп 20). Каждая лунка должна быть заполнена 
раствором при промывке. Промытые лунки необходимо тщательно высушить. Перевернутые лунки постучите, чтобы 
лучше освободить от жидкости. Рамка должна быть выдавлена в центр верхушки и дно сохраняет модуль микролунок в 
процессе промывки. Используйте абсорбентную бумагу, для остаточного удаления воды. Не позволяйте лункам 
сообщаться между собой.
24. Добавить 100 р1 коньюгата (синий) в каждую лунку (с тщательно удаленной водой).
25. Инкубировать в течение 10 минут в комнатной температуре после завершения инкубации тщательно перевернуть лунки 
и вытрихните раствор.26. Промыть 4 раза рабочим раствором , как в пункте 9. Промывающий раствор не должен смешиваться в процессе 
процедуры. Используя пощелкивание, удалить остатки воды, затем использовать промокательную бумагу.
27. Добавить 100 ц 1 субстрата в ка>кдую лунку (проверить хорошо ли удалена вода) и инкубировать 10 минут при комнатной 
температуре. Добавить субстрата в каждую исследуемую лунку в той же пропорции. Синий цвет должен появиться в 
позитивных образцах.
28. Добавить 100 р1 останавливающего раствора (0,36 М  серной кислоты) в кахщую лунку (проверить, чтобы не было воды) 
для остановки реакции.. Добавляйте в тех же пропорциях, что и субстрат раствор. Синий раствор станет желтым, 
цветной - обесцветится. Не добавляйте останавливающий раствор в лунки с водой. Взамен, добавить 200 р1 воды для 
разведения реагента в ячейки с водой. Значение или ноль напротив лунки с водой. Считайте оптическую плотность 
(ОП) каждой ячейки при 450 нм, затем при 650 нм (если возможно). Для получения лучшего результата объемы 
оптических областей надо измерять спустя 30 минут после добавления останавливающего раствора.
Результаты
1. контролей выбранных дляСосчитать среднюю оптическую плотность дубликатов растворов референсных плазм, 
использования, образцов пациентов.Отметьте среднюю ОП, наблюдаемую в каждом разведении референсной плазмы (ось X) напротив соответствующих 
значений референсных уровней (ось У). Рекомендуется использовать график с логарифмическими значениями на обеих 
осях, диаграммы и линейные графики. Составьте кривые для общего и свободного протеина S.
Используя значения ОП, определите контроль и сравнительные значения пациентов по графической кривой, или 
используя линейную регрессию.
Для подсчета уровня общего или свободного протеина S в % от нормы умножить контроль и относительное значение 
пациента, наблюдаемое на используемой кривой на заданное значение для референс плазмы (см. этикетку).
Для проверки того, что параметры находятся в пределах контроля качества (см. КК).
Контроль качества5. Основная оптическая плотность (ОП) должна быть меньше 0.1, если спектрофотометр настроен правильно по образцу 
воды. Если ОП больше 0.1 , то возможно образец загрязнен примесью тромбоцитов.
Индивидуальные расхождения ОП в дубликатах может отклоняться от средней в пределах 20% в образцах с 
поглощением более 0.200.Уровень протеина S в контролях должен быть в пределах, указанный производителем. Хотя некоторое отклонение 
возможно.Кахедая лаборатория должна периодически проверять определяемые значения по этой инструкции.
ИССЛЕДУЕМЫЕ УРОВНИ . ^ ..Нормальный уровень: общий протеин S обычно измеряется в % от нормальной пулированнои плазмы. Нормальный 
уровень общего протеина S составляет 60-150% Нормальный уровень свободного протеина S составляет 50-130%. Этот 
уровень признан нормальным в научной литературе и во всех наблюдаемых случаях исследований. Образцы с более 
высоким уровнем, чем калибровочная кривая, должны быть разбавлены до нормальных значений.
4.
5.
6.
7.
8
101


--- стр. 102 ---
ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Уровни детекции:
Описанные уровни детекции антигена протеина S находятся в промежутке между 5-150%. Хотя, определяемые уровни завися 
от уровня антигена в референсной плазме. Для большей правильности, образцы с уровнем антигена находящимся за 
пределами уровней ОП необходимо перепроверить, предварительно разведя.
Меж-исследовательская точность;
Для определения точности между плашками, три образца плазмы с известными концентрациями антигена протеина S 
(высоким, средним и низким) тестируются в 16 лунках двумя операторами на 6 плашках по 3 в каждой. Данные, 
представленные в следующей таблице, показывают средний коэффициент вариации - 10,1% для общего, коэффициент 
вариации - 6,6% для свободного между лотами. В примере показаны уровни антигена протеина S , определенные у 99 
пациентов в 3 лотах для выяснения точности показанной в данной инструкции. Показано , что КВ между дубликатами 
составляет 7,8% - для общего и 4,7% - для свободного.
Внутри-исследовательская точность:
6 образцов плазм с известными уровнями антигена протеина S между 57% и 159% были протестированы в дубликатах для
Меж­
исследовательская 
точность 
(вариабельность 
между плашками)
Уровень 
общего 
протеина S 
(% от нормы)
Коэффициент
вариации
общего
протеина S (3
основных
лота)
Уровень 
свободного 
протеина S 
(% от нормы)
Коэффициент
вариации
свободного
протеина S (3
основных
лота)
Повторы (х16) 105-107% 10,3-11,1% 76-86% 4,4-7,9%
53-83% 8,1-12,2% 38-80% 3,3-8,3%
44-45% 7,1-10,4% 34-40% 3,4-10,4%
Общий средний КВ 10,1% 6,6%
Дубликации Уровни Уровни
Общий средний КВ 7,8% 4,7%
Внутри-
исследовательская 
точность 
(вариабельность 
между лотами)
46-95%
Коэффициент 
вариации (2 
лота) 
2,4-19,5%
37-83%
Коэффициент 
вариации (2 
лота) 
1,3-22,6%
Общий средний КВ 11,0% 10,5%
Линейность;
Двойное разведение плазмы, референсной по протеину S, тестируемой в трех лотах демонстрируют кривую со средним 
коэффициентом, определяемым в квадрате как 0,985 для общего и 0,992 для свободного протеинаб.
Точность:
Точность определяется с помощью тестирования смешенной референсной плазмы и заранее извесными объемами антигена 
протеина S и расчетом теоритических величин. Среднее значения процена восстановления в 3 лотах составило 101% со 
средним коэффициентом вариации 7,?1% , 5,0% соответственно.
ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТОВ:
Наблюдаемые сонцентрации антигена протеина S, использованные в данном исследовании определялись только для 
исследования. Каждый исследователь интерпритирует полученные данные, исходя из истории болезни, данных 
обследования, других аналитических данных. Пациенты с врожденной гомозиготной формой дефицита протеина S могут 
иметь неопределяемый (следовой) его уровень, а гетерозиготные - как правило между 50% от нормы. Приобретенный 
дефицит протеина S может встречаться при различных заболеваниях у новорожденных на 20-35% чаще, чем у взрослых: 
острая печеночная недостаточность, антикоагулянтная терапия, сахарный диабед,, синдром диссеминированного 
внутрисосудистого свертывания и др. Повышенный уровень протеина S может быть у больных с нефротическим синдромом. 
Образцы плазмы могут содержать сниженное количество протеина S из-за неправильного хранения или обработки в 
лаборатории. Плазма пациентов может содержать анти-антитела (мышиные, кроличьи, лошадиные и т.д.), если те вводились 
им в диагностических целях или в процессе лечения, которые могут связывать антитела в диагностических наборах. У  
данных пациентов возможно неадекватное снижение лабораторного определения антигена протеина S.
62. Тест-система ’’Свободный протеин S антиген” (Free Protein S Anti^
Только для in vitro диагностики.
ПРИМЕНЕНИЕ
Ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELiSA) для количественного определения антигена протеина S в 
цитратной человеческой плазме.
ВВЕДЕНИЕ
Протеин S является витамин К зависимым фактором, синтезирующимся гепатоцитами, сосудистым эндотелием, 
мегакариоцитами, играет важную роль в протеин С антикоагулянтной системе. Вместе с тромбином и эндотелиальными 
клетками, через комплекс каскадных реакций обеспечивают контроль гемостаза под при взаимодействии свертывающей и 
противосвертывающей систем.
Протеин S является кофактором протеина С, который активируется при переходе тромбина в трамбомодулин в присутствии 
трансмембранных рецепторов на эндотелиальных клетках. Активированный протеин С взаимодействует с протеином S на 
мембране эндотелиальных клеток и тромбоцитах. Образующийся комплекс инактивирует V-активированный и Vlil- 
активированный факторы свертывания, что снижает потенциал свертывающей системы. Активированный протеин С так же 
участвует в активации тканевого активатора плазминогена путем отщепления от него молекулы ингибитора (PAY-1), тем 
самым усиливая разрушение тромба и фибринолиз. В норме в плазме человека 40% протеина S циркулирует в свободном 
виде, а 60% - в комплексе с С4в компонентом комплемента. Только свободная форма протеина S активна в отношении 
протеина С.
102


--- стр. 103 ---
t
it
itij I
Дефицит врожденный или приобретенный протеина S может приводить к выраженным тромботическим осложнениям, таким 
как тромбофилия, тромбозам глубоких ведет и тромбоэмболии легочной артерии. Частота встречаемости дефицита 
протеина С в популяции составляет 1 на 300 (случаи с более чем 50% снижением). У молодых людей с венозными 
тромбозами, частота дефицита протеина S может достигать 15% - 18%. Приобретенный дефицит протеина S часто 
встречается при заболеваниях печени, у хирургических больных, больных находящихся на оральной антикоагулянтной 
терапии, сахарном диабете, септицемии. Так же встречаются функциональные аномалии молекулы. Количественное 
определение протеина S основано на таких иммунологических исследованиях, как радиальная иммунодиффузия, 
иммуноэлектрофорез, ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELISA). ELISA может проводится в 
небольших лабораториях, и приводит к получению объективных, точных и воспроизводимых результатов. Проведение ELISA 
возможно на специальных автоматических приборах. Для точного установления причины гиперкоагуляции необходимо 
исследование как связанного, так и приобретенного дефицита протеина S.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принципом анализа протеина S является метод сендвич ELISA. Связанные специфические антитела против человеческого 
протеина S находятся в 96-луночной полиэстеровой планшете. Разведенная плазма пациентов инкубируется в лунках с 
прикрепленными на их поверхности антителами. Затем лунки промываются для удаления плазмы. Количество связанного 
протеина S высчитывается применением лошадиной пероксидазы конъюгированной с человеческими анти протеин S 
антителами. Связанные коньюгаты удаляются в процессе смывания. Хромогенный субстрат тетраметилбензидин (ТМВ) и 
гидрогенезированная пероксидаза приводят к появлению окрашивания, степень которого измеряется с помощью измерения 
оптической плотности на спектрофотометре с длинной волны 450 нм. Процент концентрации протеина S в плазме больного 
высчитывается по кривой построенной по контрольной плазме, поставляемой в наборе. Измерение свободного протеина S, 
возможно при предварительной преципитации комплекса протеина с С4в молекулой. Возможно так же исследование 
супернатанта плазмы, содержащего только свободный протеин S. Плазма без полиэтиленгликоля отображает общее 
количество протеина S, в отличие от плазмы при его наличии.
РЕАГЕНТЫ
Хранение при 2° - 8°С. Не замораживать. Каждый протеин S антиген набор, содержащийся в 96 лунках, содержит:
12x8 лунок с антителами к человеческому протеину S.
60 мл разбавитель образцов (сине-зеленый раствор); содержащий азид натрия.
3 пузырька X 0,5 мл лиофилизированной референсной плазмы, с полоской для анализа.
12 мл анти-протеин S человеческий коньюгат (синий раствор).
13 мл субстрата (тетраметилбензидин (ТМБ) и перекись водорода).
15 мл останавливающего раствора (0,36 N серной кислоты)
30 мл моющего концентрата (ЗЗХ раствора фосфатного буфера с 0,01%/Tween 20): турбидиметрия может возникать в 
промывочной концентрации, не имеющей необходимых компонентов анализа, тогда надо произвести разбавление.
2 мл реагента свободного протеина S - полиэтиленгликоля (PEG)
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Для in vitro диагностики.14 Человеческий материал использованный для приготовления референсной плазмы, содержащийся в данном наборе, 
протестирован и является негативным по НВзАГ, HCV, ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Иногда, дериваты, полученные из человеческого 
материала образцов пациентов, могут быть потенциально инфицированными.
15. Не пипетируйте ртом.
16. Не курите, не принимайте пищу и не пейте в тех местах, где могли находиться составные части набора.
17. При повреждении перчаток при работе с компонентами набора незамедлительно тщательно промойте руки.
18. Компонент набора может вызывать покраснение глаз и кожи. Возможно проникновение через кожу. Пользуйтесь 
перчатками при работе с наборами и мойте руке после работы. Держите реагенты вдали от источников огня. Изгибайте 
контакта с окислительными агентами.
19. Образцы содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может образовывать азид меди, поэтому избегайте 
контакта с этим металлом. Азид этого металла является взрывоопасным. Все растворы, содержащие азиды, должны 
быть немедленно промыты достаточным количеством воды во избежание накопления их в промывочной системе.
20. На компонентах реагентов имеются следующие предупреждения, указанные на наклейках: опасно при проглатывании (R 
22). Возможно покраснение глаз и кожи при контакте (R 36/38). Избегайте контакта с глазами и кожей (S 24/25). При 
попадании в глаза промойте большим количеством воды и обратитесь за медицинской помощью (S 26). Носите удобную 
защищающую одежду (S 36).
ПОДГОТОВКА И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦА
Плазма, содержащая 3,2% - 3,8% цитрат натрия в качестве антикоагулянта, может быть использована, как основа. Кровь, 
взятая из вены, должна быть сразу отцентрифугирована. Полученная плазма, должна храниться при 2°- 8°С. После 8 часов 
хранения плазма не должна использоваться, для этого ее надо хранить при -70°С и использовать в течение 1 месяца..
ИНСТРУКЦИЯ по
Протеин S антиген набор для полного изучения:
НЕ ВКЛЮЧЕННЫЕ В НАБОР МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Протеин S (общий/свободный) контрольная плазма. Восстановленная плазма с инструкцией по пользованию и 
хранению.Пригодная для приготовления фосфатного бyфepaЯween 20 моющего раствора, восстановления плазмы и для нулевого 
или известного считывания с пластины во время исследования.
Градуированный цилиндр.
Пригодная пипетка на 5 и 1000 микролитров, с наконечниками.
Различная стеклянная посуда, пригодная для малых объемов.
Сосуд или бутыль на 1 литр.Мокзщиеся бутыли, предпочтительно переносимые, предназначенные для проведения ручной или полуавтоматической 
промывки.
Доступные перчатки, предпочтительно без порошка.
Считывающий спектрофотометр с длиной волны 450 нм (по возможности с 650нм).
Многоканальный дозатор, предпочтительно 8 каналов.
103


--- стр. 104 ---
Микропипетки для приготовления образцов. 
Центрифуга.
и хорошо перемешайте. После процедуры все
28.
29.
30.
31
32
33,
34.
35.
36.
37.
38.
39.
6.
30.
31.
32.
33.
Объем референс-плазмы Объем дилюента 
образца
^Референсный
уровень
30 р1 + 500 р1 = 150
20 р1 + 500 M l = 100
15 ц 1 + 500 M l = 75
10 р1 + 500 M l = ;50
10 р1 + 1000 M l = 25
lOjti!_________________ + 2000 M l = 12,5
•Референсные уровни объема, используемые только для построения референсной кривой
(Внимание: это разведение соответствует 100% референсной плазмы)
35. Тщательно перемешать и добавить 100 р1 рабочего раствора (референсная плазма, контроль и образец пациента) в 
соответствующую лунку.
36. Добавить 100 р1 разбавителя образца реагент-бланк лунку. Полностью удалите из нее воду.
Г
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
27. Согрейте до комнатной температуры образцы и реагенты (18-26° 
неиспользованные образцы и реагенты охладите до 2°-8°С.
Все приготовленные для использования растворы и референсные плазмы должны быть использованы.
Одна плашка в каждом тесте должна содержать один образец воды. Нельзя добавлять в неб ни образец ни реагент. 
Поместите 200 pL воды для калибровки прибора сразу перед исследованием в спектрофотометре. Считыватель плашек 
должен быть установлен на ноль или бланкирован после считывания.
Для проведения исследования необходимо использовать только хорошо промытую, чистую технику. Предпочтительно 
использовать направленный поток моющего раствора из сминаемой пластиковой бутыли с широким наконечником на 
дне микропипетки. Моющий раствор не должен перемешиваться с водой во время процедуры. Автоматический 
промыватель планшет так же может быть использован.
ВАЖНО: неадекватное удаление резидуального количества фосфатного буфера/Tween 20 может вызвать 
нехарактерный цвет субстрата.
Предпочтительно использование многоканального (8 канального) дозатора.
Тщательно проверяйте каждый шаг приготовления процедуры. Каждый образец, контроль, референт - разбавитель 
должен быть добавлен не познее через 5 минут. Объем образца не должен превышать количество, которое может быть 
добавлено за 5 минут.
Для всех инкубаторов, страт инкубирования начинается по завершении добавления реагентов или образцов. 
Добавление всех образцов и реагентов должно осуществляться в одинаковых количествах и одинаковой 
последовательности.
Температура инкубирования выше или ниже комнатной температуры (18-26°) может привести к неточным результатам 
исследования.
Избегайте контаминации реагентами при открывании и закрывании первичных флаконов.
Не используйте компоненты набора после срока годности.
Содержащиеся в наборах микропланшеты, конъгаты, субстраты не должны использоваться с другими наборами.
Приготовление реагентов
5. Моющий раствор - фосфатного буфера/Tween 20 раствор: Отмерьте 30 мл моющего концентрата (ЗЗХ фосфатного 
буфера/Tween 20) и разведите 1 литром приготовленной и отградуированной воды. Рн приготовленного раствора 
должен быть 7,35 ± 0,1. Данный раствор рассчитан примерно на 20 проб, храниться при 2-8°С. Его необходимо 
утилизировать при признаках контаминации.
Восстановление референсной плазмы осуществляется путем добавления 0,5 мл приготовленной воды. Тщательно 
перемешайте. Дайте отстояться в течение 10 минут перед использованием до полной гомогенизации. Оставьте 
максимум на 8 часов, затем храните при температуре 2-6°С. Соответствующая контрольная плазма приготавливается и 
храниться соответственно прилагаемой инструкции.
34. Для приготовление рабочего раствора для контроля и образцов надо:
Для общего протеина S: добавлением 20 р1 предварительно разведенной плазмы (1:2 разведенную плазму для 4 шага) 
до 500 р1 Образца дилюента .
Для свободного протеина S: добавлением 20 р1 PEG-разведенную плазму (для 4 шага) до 500 р1 Образца дилюента .
Г
г
Процедура проведения исследования
29. Достаньте микролуночную планшету, которая не использовалась, из рамки в приготовленное место для хранения.
Приготовьте каждую референсную плазму с общим и свободным протеином S в двух экземплярах. Дублирование, так же 
рекомендовано для контролей. Одна ячейка используется как бланк реагента, в другие добавляется образец 
разбавителя без сыворотки последовательно в 7 шагов в одной секции. Эта ячейка используется в качестве контроля, 
или образец образца последующего шага. Приготовленная вода помещается в каждую лунку, так чтобы заполнить до 
200 pL реагентной воды, до завершения приготовления сразу перед началом считывания. Так же должна 
использоваться одна лунка, как контроль образца воды.
Подготовьте плазму для исследования свободного протеина S. Подготовка осуществляется путем добавления во все 
образцы, контроля, референсы полиэтиленгликоля (PEG). Добавьте 15 р1 полиэтиленгликоля к 85 р1 плазмы. Если 
используется супернатант, то для приготовления референсной кривой (95 р1), добавьте 45 р1 PEG к 255 р1 референсной 
плазмы. Взболтайте и положите в лед на 30 минут. Центрифугируйте 10 минут при 3000 об/мин. Используйте 
супернатант для приготовления кривой и образцов разведения (см. пункт 5,6).
Чтобы развести все плазмы (1:2 разведения разбавителем образцов) следует:
Референс-ллазма; добавить lOOpL референсной плазмы к lOOpL разбавителя образца.
Контрольный образец и образец пациента:  добавить 20pL референсной плазмы к 20pL разбавителя образца.
Хорошо перемешать. Это предразведение используется в 4-5 шагах исследования.
Используя 1:2 разведенную плазму для 3 шага , приготовьте 6 рабочих позиций как описано ниже:
к
Р
►
104


--- стр. 105 ---
37. Инкубировать в течении 40 минут в комнатной температуре, затем тщательно переверните лунки и удалите жидкость. 
Не позволяйте контаминировать жидкостью соседние ячейки.
38. Промыть 4 раза рабочим моющим раствором (фосфатного буфера/Tween 20). Каждая лунка должна быть заполнена 
раствором при промывке. Промытые лунки необходимо тщательно высушить. Перевернутые лунки постучите, чтобы 
лучше освободить от жидкости. Рамка должна быть выдавлена в центр верхушки и дно сохраняет модуль микролунок в 
процессе промывки. Используйте абсорбентную бумагу, для остаточного удаления воды. Не позволяйте лункам 
сообщаться между собой.
39. Добавить 100 р1 коньюгата (синий) в каждую лунку (с тщательно удаленной водой).
40. Инкубировать в течение 10 минут в комнатной температуре после завершения инкубации тщательно перевернуть лунки 
и вытрихните раствор.
41. Промыть 4 раза рабочим раствором , как в пункте 9. Промывающий раствор не должен смешиваться в процессе 
процедуры. Используя пощелкивание, удалить остатки воды, затем использовать промокательную бумагу.
42. Добавить 100 р1 субстрата в каждую лунку (проверить хорошо ли удалена вода) и инкубировать 10 минут при комнатной 
температуре. Добавить субстрата в каждую исследуемую лунку в той же пропорции. Синий цвет должен появиться в 
позитивных образцах.
43. Добавить 100 р1 останавливающего раствора (0,36 М  серной кислоты) в каждую лунку (проверить, чтобы не было воды) 
для остановки реакции.. Добавляйте в тех же пропорциях, что и субстрат раствор. Синий раствор станет желтым, 
цветной - обесцветится. Не добавляйте останавливающий раствор в лунки с водой. Взамен, добавить 200 р1 воды для 
разведения реагента в ячейки с водой. Значение или ноль напротив лунки с водой. Считайте оптическую плотность 
(ОП) каждой ячейки при 450 нм, затем при 650 нм (если возможно). Для получения лучшего результата объемы 
оптических областей надо измерять спустя 30 минут после добавления останавливающего раствора.
Результаты
1. Сосчитать среднюю оптическую плотность дубликатов растворов референсных плазм, контролей выбранных для 
использования, образцов пациентов.
2. Отметьте среднюю ОП, наблюдаемую в каждом разведении референсной плазмы (ось X) напротив соответствующих 
значений референсных уровней (ось У). Рекомендуется использовать график с логарифмическими значениями на обеих 
осях, диаграммы и линейные графики. Составьте кривые для общего и свободного протеина S.
3. Используя значения ОП, определите контроль и сравнительные значения пациентов по графической кривой, или 
используя линейную регрессию.
4. Для подсчета уровня общего или свободного протеина S в % от нормы умножить контроль и относительное значение 
пациента, наблюдаемое на используемой кривой на заданное значение для референс плазмы (см. этикетку).
5. Для проверки того, что параметры находятся в пределах контроля качества (см. КК).
Контроль качества
9. Основная оптическая плотность (ОП) должна быть меньше 0.1, если спектрофотометр настроен правильно по образцу 
воды. Если ОП больше 0.1 , то возможно образец загрязнен примесью тромбоцитов.
Индивидуальные расхождения ОП в дубликатах может отклоняться от средней в пределах 20% в образцах с 
поглощением более 0.200.
Уровень протеина S в контролях должен быть в пределах, указанный производителем. Хотя некоторое отклонение 
возможно.
Каждая лаборатория должна периодически проверять определяемые значения по этой инструкции.
10.
11.
12
ИССЛЕДУЕМЫЕ УРОВНИ
Нормальный уровень: общий протеин S обычно измеряется в % от нормальной пулированной плазмы. Нормальный 
уровень общего протеина S составляет 60-150% Нормальный уровень свободного протеина S составляет 50-130%. Этот 
уровень признан нормальным в научной литературе и во всех наблюдаемых случаях исследований. Образцы с более 
высоким уровнем, чем калибровочная кривая, должны быть разбавлены до нормальных значений.
ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Уровни детекции;
Описанные уровни детекции антигена протеина S находятся в промежутке между 5-150%. Хотя, определяемые уровни завися 
от уровня антигена в референсной плазме. Для большей правильности, образцы с уровнем антигена находящимся за 
пределами уровней ОП необходимо перепроверить, предварительно разведя.
Точность:
Меж-исследовательская точность;
Для определения точности между плашками, три образца плазмы с известными концентрациями антигена протеина S 
(высоким, средним и низким) тестируются в 16 лунках двумя операторами на 6 плашках по 3 в каждой. Данные, 
представленные в следующей таблице, показывают средний коэффициент вариации - 10,1% для общего, коэффициент 
вариации - 6,6% для свободного между лотами. В примере показаны уровни антигена протеина S , определенные у 99 
пациентов в 3 лотах для выяснения точности показанной в данной инструкции. Показано , что КВ между дубликатами 
составляет 7,8% - для общего и 4,7% - для свободного,
Внутри-исследовательская точность;
6 образцов плазм с известными уровнями антигена протеина S между 57% и 159% были протестированы в дубликатах для
Меж­
исследовательская 
точность 
(вариабельность 
между плашками)
Уровень 
общего 
протеина S 
(% от нормы)
Коэффициент
вариации
общего
протеина S (3
основных
лота)
Уровень 
свободного 
протеина S 
(% от нормы)
Коэффициент
вариации
свободного
протеина S (3
основных
лота)
Повторы (х16) 105-107% 10,3-11,1% 76-86% 4,4-7,9%
53-83% 8,1-12,2% 38-80% 3,3-8,3%
44-45% 7,1-10,4% 34-40% 3,4-10,4%
Общий средний КВ 10,1% 6,6%
Дубликации Уровни Уровни
105


--- стр. 106 ---
Общий средний КВ 7,8% 4,7%
Внутри-
исследовательская 
точность 
(вариабельность 
между лотами)
46-95%
Коэффициент 
вариации (2 
лота) 
2,4-19,5%
37-83%
Коэффициент 
вариации (2 
лота) 
1,3-22,6%
Общий средний КВ 11,0% 10,5%
Линейность;
Двойное разведение плазмы, референсной по протеину S, тестируемой в трех лотах демонстрируют кривую со средним 
коэффициентом, определяемым в квадрате как 0,985 для общего и 0,992 для свободного протеинаЗ.
Точность:
Точность определяется с помощью тестирования смешенной референсной плазмы и заранее извесными объемами антигена 
протеина S и расчетом теоритических величин. Среднее значения процена восстановления в 3 лотах составило 101% со 
средним коэффициентом вариации 7,?1% , 5,0% соответственно.
ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТОВ;
Наблюдаемые сонцентрации антигена протеина S, использованные в данном исследовании определялись только для 
исследования. Каждый исследователь интерпритирует полученные данные, исходя из истории болезни, данных 
обследования, других аналитических данных. Пациенты с врожденной гомозиготной формой дефицита протеина S могут 
иметь неопределяемый (следовой) его уровень, а гетерозиготные - как правило между 50% от нормы. Приобретенный 
дефицит протеина S может встречаться при различных заболеваниях у новорожденных на 20-35% чаще, чем у взрослых: 
острая печеночная недостаточность, антикоагулянтная терапия, сахарный диабед,, синдром диссеминированного 
внутрисосудистого свертывания и др. Повышенный уровень протеина S может быть у больных с нефротическим синдромом. 
Образцы плазмы могут содержать сниженное количество протеина S из-за неправильного хранения или обработки в 
лаборатории. Плазма пациентов может содержать анти-антитела (мышиные, кроличьи, лошадиные и т.д.), если те вводились 
им в диагностических целях или в процессе лечения, которые могут связывать антитела в диагностических наборах. У  
данных пациентов возможно неадекватное снижение лабораторного определения антигена протеина S.
Тест-система "Свободный протеин S" (Free Protein S).
I. Применение
Набор предназначен для определения функциональной активности протеина S (Пр8) в плазме крови человека 
клоттинговым методом.
Протеин S - витамин К-зависимый белок, синтезируемый в печени, сосудистом эндотелии, мегакариоцитах, который 
играет важную физиологическую роль в противосвертывающей системе протеина С [1,2]. Эта антикоагулянтная система 
является одним из важнейших регуляторов гемостаза посредством ингибирования образования сгустка и активации системы 
фибринолиза. Пр8 функционирует как кофактор активированного протеина С (аПрС) на мембране клеток сосудистой стенки, 
усиливая скорость деградации фУа и фУШа, замедляя, таким образом, скорость образования сгустка.
В нормальной плазме приблизительно 40% Пр8 циркулирует в виде свободных молекул, в то время как 60 % 
состоят в комплексе с плазменным белком С4Ь классической системы комплимента. Только свободный Пр8 функционально 
активен и способен связываться с аПрС, тогда как связанный Пр8 не активен.
Набор для измерения Пр8 компании Helena предназначен для определения количества функционального Пр8. В 
данном методе разведения нормальной плазмы смешиваются с плазмой, дефицитной по Пр8. Смешанная плазма затем 
активируется реактивом, содержащим аПрС, фУа и фосфолипиды. После активации образование сгустка инициализируется 
добавлением кальция хлорида. Человеческий аПрС и фУа добавляются в таком количестве, чтобы нормализовать дефицит 
фактора в плазме пациента, предотвращая ложно положительные или отрицательные результаты функциональной 
активности Пр8. Удлинение времени свертывания, таким образом, напрямую связано с концентрацией Пр8 в плазме крови 
пациента.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности и способу утилизации. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на 
упаковке) антигенов к гепатиту В (HBsAg), Н1У1,2 и НСУ антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе 
следует обращаться с ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
8. активатор протеина S.
Каждый флакон содержит АРС торговой марки Polybrene и растворяющие компоненты.
Приготовление.  Растворить в 1 мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
9. плазма, дефицитная по протеину S.
Каждый флакон содержит дефицитную по Р8 плазму, полученную аффинным методом.
Приготовление.  Растворить в 1  мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
10. фактор Va.
Ка>кдый флакон содержит человеческий фУа и стабилизаторы.
Приготовление.  Растворить в 1мл дилюента для фУа. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
11. Дилюент для фактора Va.
Каждый флакон содержит элаговую кислоту, фосфолипиды, буфер, стабилизаторы и консерванты (включая 0.2% фенол).
<1
I»
<1
106


--- стр. 107 ---
Приготовление.  Реактив уже готов к применению, Аккуратно перевернуть несколько раз до получения гомогенной суспензии.
12. 25тМ раствор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 25т1\/1 раствор кальция хлорида.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
13. 0.9% солевой раствор.
Каждый флакон содержит 0.9% раствор натрия хлорида и 0.09% азида натрия в качестве консерванта.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
14. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
7. активатор протеина S  о -Разведенный реактив годен к применению в течение 1 недели при температуре хранения 2+6 С или 8 часов при комнатной 
температуре. Не замораживать!
8. плазма, дефицитная по протеину S
Разведенный реактив годен к применению в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 4 часа при комнатной 
температуре или 1 месяц при -20°С, если реактив будет разморожен только один раз.
9. фактор Va
Разведенный реактив годен к применению до 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 3.5 часа при комнатной температуре. 
Не замораживать!
10. разбавитель для фактора Va
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
11. 25тМ раствор кальция хлорида
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
12. 0.9% солевой раствор
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение 
SARP кат ном 5185.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана в пробирку с 3.2% или 3.8% цитратным антикоагулянтом (1 часть). После центрифугирования при оборотах 
2000+3000 * g в течение 15 минут плазму отделить. Плазму следует хранить при температуре 2+б“С. Тестирование должно 
быть проведено в течение 4 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при температуре -20 С 
в течение 2 недель или при -70°С в течение 1 месяца. Разморозить быстро при 37°С перед проведением измерений. Не 
держать при 37°С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Измерения рекомендуется дублировать.
Внимание:  Перед каждым измерением следует строить новую калибровочную кривую. Следует убедиться, что разведено 
достаточное для измерений количество реактива. При необходимости, одинаковые по составу флаконы можно пулировать. 
Ручной метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Поместить 25тМ раствор кальция хлорида в инкубатор
на 37°С.Приготовить исходный раствор стандарта путем смешивания 200мкл референсной плазмы и 1800мкл солевого раствора.
Щ
Сток V стандарта, мкл V солевого р-ра, мкл активность, %
1 400 0 100
2 300 100 75
3 200 200 50
4 100 300 25
5 0 400 0
Подготовить разведения контроля и образцов плазмы пациента добавлением 50мкл плазмы к 450мкл солевого 
раствора.Все стандарты, разведения контроля и плазмы пациента держать на льду и провести измерения в течение 30 минут.
В кювету для коагулогических измерений добавить:
11. Ю Омкл дефицитной по PS плазмы.
12. Ю Омкл разведения стандарта, контроля или плазмы пациента.
13. Ю Омкл реактива активатора PS.
14. Ю Омкл реактива фVa.
15. Инкубировать 3 минуты при 37°С.
16. добавить Юмкл раствора кальция хлорида
17. запустить таймер
18. заметить время свертывания с точностью до 0.1 секунды,
19. построить график зависимости активности ПрЗ (ось X) от времени свертывания (осьУ).
20. Интерполировать значения контроля и плазмы пациента по калибровочной кривой.
107


--- стр. 108 ---
Автоматизированный метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Запустить АС-4, используя опцию PS-test в настройках
Start=15sec Method=coag M ix=1 Patient (pat) Vol=6pl 
Pos=35 (CP)
Def plasma (DP)
Vol=60pl
Pos=34
lncub=180sec Math=lin Clean=1 Buffer (saline)
Vol=54pl
Pos=39
PS activator (RO) 
VoI= 6 0mI  Po s= 29
Runtime=300sec Sens=3 t-corr=0%
s-corr=0%
Clear (CLR) 
Vol=0ul
Factor V (R1) 
VoI= 6 0mI  Po s= 3 1
CaCI2 (R2) 
Vol=60pl Pos=26
VIII. Интерпретация результатов
Дефицит Пр8, как врожденный, так и приобретенный, может приводить к серьезным тромботическим осложнениям, 
таким как тромбофлебиты, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Распространение дефицита ПрЗ среди массы 
населения оценивается как менее 1  случая на 300 человек. 2/3 пациентов с врожденным дефицитом ПрЗ (уровень менее 
50% от нормы) могут страдать венозным тромбозом в зрелом возрасте [5,6]. Среди молодых пациентов (до 35 лет) с 
историей тромбозов, распространенность может достигать 15+18% П. Приобретенный дефицит ПрЗ может возникать при 
беременности, во время применения оральных контрацептивов или оральной антикоагулянтной терапии, при заболеваниях 
печени, сахарном диабете, послеоперационных осложнениях, сепсисе и других инфекционных синдромах [8]. Сниженная 
активность ПрЗ в плазме может иметь место при низкой концентрации или нарушенной функции молекулы ПрЗ.
Снижение активности ПрЗ в плазме связано с возросшей частотой возникновения тромбоэмболизма [9]. Сниженная 
активность ПрЗ необязательно означает снижение концентрации. Для лабораторной диагностики дефицита ПрЗ нужно 
проводить качественный (функциональный) и количественный (по уровню антигена) анализы. Компания Helena предлагает 
наборы для проведения твердофазного иммуноанализа (ELISA) как с полноценным содержанием ПрЗ, так и со свободным 
от его содержания, (кат ном 5286, 5293).
IX. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы, доступные для использования с данным набором 
реактивов: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC-2.
X. Ограничения
8. Сбор образцов. Убедитесь, что использовано правильное соотношение антикоагулянта/крови.
9. >150% протеина 3. Образцы пациентов с повышенным уровнем содержания ПрЗ должны измеряться после
разбавления для получения точных результатов. Откорректированный уровень ПрЗ должен быть получен при 
разбавлении по крайней мере в 2 раза.
10. Влияние гепарина/варфарина. Гепарин в концентрации >1ед\мл может вызывать удлинение времени свертывания и,
следовательно, оказывать эффект завышенного содержания ПрЗ. Пациенты, получающие варфарин, могут иметь 
ложно заниженную активность ПрЗ.
VIII. Содержание >200% не влияет на результат.
11. Волчаночный антикоагулянт. Образцы, содержащие волчаночный антикоагулянт с удлиненным значением АЧТВ могут
давать ложно завышенные значения ПрЗ и должны быть подтверждены тестом со свободным антигеном.
12. Мутация фУ Лейден. Граница низкого функционального уровня ПрЗ пациентов с фУ-Лейден мутацией должна быть
проверена тестом со свободным антигеном.
13. Влияние ингибитора тромбина. Ингибиторы тромбина (гирудин, бивалирудин и др.) в образце пациента могут приводить
к завышению содержания ПрЗ.
XI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от 
используемых методов и анализаторов. В связи с этим, каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений.
Ожидаемая область нормальных значений протеина 3 гендер-специфична [11].
Мужчины 85+157% Женщины 65+136%
ХН.Аналитические характеристики
Представленные характеристики измерений были определены компанией Helena или ее представителями и 
являются примером. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Внутри одной аналитической серии.
Уровень npS,% 
n=8 98.1
коэф. вар. внутри пробы, %
5.04
n=8 32.4 6.14
Между разными аналитическими сериями.
Уровень ПрЗ,% 
п=8 96.7
коэф. вар. между пробами, %
2.8
п=8 25.4 11.19
Между партиями.
Уровень ПрЗ,% 
п=8 91.7
коэф. вар. внутри пробы, %
8.69
п=8 26.4 15.33
108


--- стр. 109 ---
ё
Точность
Сравнение набора для определения ПрЗ (коагулогичекий метод) фирмы Helena с другим коммерчески доступным 
набором (Stago Staclot Assay) дало результат с хорошей корреляцией (г=0.82).
Чувствительность
Метод чувствителен к 10% ПрЗ,
Линейность
Метод обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 10+150% ПрЗ.
Тест-система "Протеин S" (Protein S).
I. Применение
Набор предназначен для определения функциональной активности протеина 3 (ПрЗ) в плазме крови человека 
клоттинговым методом.Протеин 3 - витамин К-зависимый белок, синтезируемый в печени, сосудистом эндотелии, мегакариоцитах, который 
играет важную физиологическую роль в противосвертывающей системе протеина С [1,2]. Эта антикоагулянтная система 
является одним из важнейших регуляторов гемостаза посредством ингибирования образования сгустка и активации системы 
фибринолиза. ПрЗ функционирует как кофактор активированного протеина С (аПрС) на мембране клеток сосудистой стенки, 
усиливая скорость деградации ф\/а и ф\/111а, замедляя, таким образом, скорость образования сгустка.
В нормальной плазме приблизительно 40% ПрЗ циркулирует в виде свободных молекул, в то время как 60 % 
состоят в комплексе с плазменным белком С4Ь классической системы комплимента. Только свободный ПрЗ функционально 
активен и способен связываться с аПрС, тогда как связанный ПрЗ не активен.
Набор для измерения ПрЗ компании Helena предназначен для определения количества функционального ПрЗ. В 
данном методе разведения нормальной плазмы смешиваются с плазмой, дефицитной по ПрЗ. Смешанная плазма затем 
активируется реактивом, содержащим аПрС, ф\/а и фосфолипиды. После активации образование сгустка инициализируется 
добавлением кальция хлорида. Человеческий аПрС и ф\/а добавляются в таком количестве, чтобы нормализовать дефицит 
фактора в плазме пациента, предотвращая ложно положительные или отрицательные результаты функциональной 
активности ПрЗ. Удлинение времени свертывания, таким образом, напрямую связано с концентрацией ПрЗ в плазме крови 
пациента.
II. Меры предосторожностиРеактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности и способу утилизации. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на 
упаковке) антигенов к гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе 
следует обращаться с ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
1М . Реактивы
15. активатор протеина S.
Каждый флакон содержит АРС торговой марки Polybrene и растворяющие компоненты.
Приготовление.  Растворить в 1  мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
16. плазма, дефицитная по протеину S.
Каждый флакон содержит дефицитную по РЗ плазму, полученную аффинным методом.
Приготовление.  Растворить в 1  мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
17. фактор Va.
Каждый флакон содержит человеческий фУа и стабилизаторы.
Приготовление.  Растворить в 1мл дилюента для фУа. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
18. Дилюент для фактора Va.
Каждый флакон содержит элаговую кислоту, фосфолипиды, буфер, стабилизаторы и консерванты (включая 0.2% фенол). 
Приготовление.  Реактив уже готов к применению. Аккуратно перевернуть несколько раз до получения гомогенной суспензии.
19. 25тМ раствор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 25тМ раствор кальция хлорида.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
20. 0.9% солевой раствор.
Каждый флакон содержит 0.9% раствор натрия хлорида и 0.09% азида натрия в качестве консерванта.
Приготовление.  Реактив уже готов к применению.
21. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильностьЗапечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения.
13. активатор протеина S ^
Разведенный реактив годен к применению в течение 1 недели при температуре хранения 2+6 С или 8 часов при комнатной
температуре. Не замораживать!
14. плазма, дефицитная по протеину S
Разведенный реактив годен к применению в течение 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 4 часа при комнатной 
температуре или 1 месяц при -20°С, если реактив будет разморожен только один раз.
15. фактор Va  „ -Разведенный реактив годен к применению до 8 часов при температуре хранения 2+6 С, 3.5 часа при комнатной температуре.
Не замораживать!
16. разбавитель для фактора Va
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
//f
109


--- стр. 110 ---
17. 25тМ раствор кальция хлорида
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
18. 0.9% солевой раствор
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение
SARP кат ном 5185.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана в пробирку с 3.2% или 3.8% цитратным антикоагулянтом (1 часть). После центрифугирования при оборотах 
2000+3000 * g в течение 15 минут плазму отделить. Плазму следует хранить при температуре 2+6°С. Тестирование должно 
быть проведено в течение 4 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при температуре -20°С 
в течение 2 недель или при -70°С в течение 1  месяца. Разморозить быстро при 37°С перед проведением измерений. Не 
держать при 37“С более 5 минут.
VII. Пошаговое руководство 
Измерения рекомендуется дублировать.
Внимание:  Перед каждым измерением следует строить новую калибровочную кривую. Следует убедиться, что разведено 
достаточное для измерений количество реактива. При необходимости, одинаковые по составу флаконы можно пулировать. 
Ручной метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Поместить 25тМ раствор кальция хлорида в инкубатор
на 37°С.
Приготовить исходный раствор стандарта путем смещивания 200мкл референсной плазмы и 1800мкл солевого раствора.
Немедленно использовать исходный раствор стандарта для приготовления следующих разведений:
Сток V стандарта, мкл V солевого р-ра, мкл активность, %
1 400 0 100
2 300 100 75
3 200 200 50
4 100 300 25
5 0 400 0
Подготовить разведения контроля и образцов плазмы пациента добавлением 50мкл плазмы к 450мкл солевого 
раствора.
Все стандарты, разведения контроля и плазмы пациента держать на льду и провести измерения в течение 30 минут.
В кювету для коагулогических измерений добавить:
21. Ю Омкл дефицитной по PS плазмы.
Ю Омкл разведения стандарта, контроля или плазмы пациента.
Ю Омкл реактива активатора PS.
Ю Омкл реактива фVa.
Инкубировать 3 минуты при 37°С. 
добавить Юмкл раствора кальция хлорида 
запустить таймер
заметить время свертывания с точностью до 0.1 секунды.
построить график зависимости активности Пр8 (ось X) от времени свертывания (осьУ).
Интерполировать значения контроля и плазмы пациента по калибровочной кривой.
Автоматизированный метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Запустить АС-4, используя опцию PS-test в настройках
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
Start=15sec Method=coag M ix=1 Patient (pat) Vol=6pl 
Pos=35 (CP)
Def plasma (DP)
Vol=60pl
Pos=34
1лсиЬ=180зес Math=lin Clean=1 Buffer (saline)
Vol=54pl
Pos=39
PS activator (RO) 
Vol=60pl Pos=29
Runtime=300sec Sens=3 t-corr=0%
s-corr=0%
Clear (CLR) 
Vol=0pl
Factor V (R1) 
Vol=60gl Pos=31
CaCI2 (R2) 
Vol=60pl Pos=26
VIII. Интерпретация результатов
Дефицит Пр8, как врожденный, так и приобретенный, может приводить к серьезным тромботическим осложнениям, 
таким как тромбофлебиты, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Распространение дефицита Пр8 среди массы 
населения оценивается как менее 1 случая на 300 человек. 2/3 пациентов с врожденным дефицитом Пр8 (уровень менее 
50% от нормы) могут страдать венозным тромбозом в зрелом возрасте [5,6]. Среди молодых пациентов (до 35 лет) с 
историей тромбозов, распространенность может достигать 15+18% [^. Приобретенный дефицит Пр8 может возникать при 
беременности, во время применения оральных контрацептивов или оральной антикоагулянтной терапии, при заболеваниях 
печени, сахарном диабете, послеоперационных осложнениях, сепсисе и других инфекционных синдромах [8]. Сниженная 
активность Пр8 в плазме может иметь место при низкой концентрации или нарушенной функции молекулы Пр8.
Снижение активности Пр8 в плазме связано с возросшей частотой возникновения тромбоэмболизма [9]. Сниженная 
активность Пр8 необязательно означает снижение концентрации. Для лабораторной диагностики дефицита Пр8 нужно 
проводить качественный (функциональный) и количественный (по уровню антигена) анализы. Компания Helena предлагает 
наборы для проведения твердофазного иммуноанализа (ELISA) как с полноценным содержанием Пр8, так и со свободным 
от его содержания, (кат ном 5286, 5293).
# 1
110


--- стр. 111 ---
i
e l
ik
IX. Контроль качестваКаждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы, доступные для использования с данным набором 
реактивов: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC-2.
15.
16.
X. Ограничения
14. Сбор образцов. Убедитесь, что использовано правильное соотношение антикоагулянта/крови.
>150% протеина S. Образцы пациентов с повышенным уровнем содержания Пр8 должны измеряться после 
разбавления для получения точных результатов. Откорректированный уровень ПрЗ должен быть получен при 
разбавлении по крайней мере в 2 раза.
Влияние гепарина/варфарина. Гепарин в концентрации >1ед\мл может вызывать удлинение времени свертывания и, 
следовательно, оказывать эффект завышенного содержания ПрЗ. Пациенты, получающие варфарин, могут иметь 
ложно заниженную активность ПрЗ. 
фУШ. Содержание >200% не влияет на результат.
Волчаночный антикоагулянт. Образцы, содержащие волчаночный антикоагулянт с удлиненным значением АЧТВ могут 
давать ложно завышенные значения ПрЗ и должны быть подтверждены тестом со свободным антигеном.
Мутация фУ Лейден. Граница низкого функционального уровня ПрЗ пациентов с фУ-Лейден мутацией должна быть 
проверена тестом со свободным антигеном.
Влияние ингибитора тромбина. Ингибиторы тромбина (гирудин, бивалирудин и др.) в образце пациента могут приводить 
к завышению содержания ПрЗ.
17,
18
19.
20.
XI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от 
используемых методов и анализаторов. В связи с этим, каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений.
Ожидаемая область нормальных значений протеина 3 гендер-специфична [11].
Мужчины 85+157% Женщины 65+136%
ХИ.Аналитические характеристикиПредставленные характеристики измерений были определены компанией Helena или ее представителями и 
являются примером. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Внутри одной аналитической серии.
Уровень ПрЗ, % коэф. вар. внутри пробы, %
п=8 98.1 5.04
п=8 32.4 6.14
Между разными аналитическими сериями.
Уровень ПрЗ,% 
п=8 96.7
коэф. вар. между пробами, %
2.8
п-8 25.4 11.19
Между партиями.
Уровень ПрЗ,% 
п=8 91.7
коэф. вар. внутри пробы, %
8.69
п=8 26.4 15.33
ТочностьСравнение набора для определения ПрЗ (коагулогичекий метод) фирмы Helena с другим коммерчески доступным 
набором (Stago 3taclot Assay) дало результат с хорошей корреляцией (г=0.82).
Чувствител ьность
Метод чувствителен к 10% ПрЗ,
Линейность
Метод обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 10+150% ПрЗ.
Тест-система "Протеин С антиген" (Protein С Antigen (ELISA).
Только для in vitro диагностики.
ПРИМЕНЕНИЕ
Ферментативно - связанный иммуносорбентный анализ (ELI3A) для количественного определения антигена протеина С в 
цитратной человеческой плазме.
ВВЕДЕНИЕ
Протеин С является витамин К зависимым фактором, синтезирующимся преимущественно гепатоцитами, играет важную 
роль в протеин С антикоагулянтной системе. Вместе с тромбином и эндотелиальными клетками, через комплекс каскадных 
реакций обеспечивают контроль гемостаза под при взаимодействии свертывающей и противосвертывающей систем.
Протеин С зависимая противосвертывающая система активируется при переходе тромбина в трамбомодулин в присутствии 
трансмембранных рецепторов на эндотелиальных клетках. Активированный протеин С взаимодействует с протеином 3 на 
мембране эндотелиальных клеток и тромбоцитах. Образующийся комплекс инактивирует V-активированный и VIII- 
активированный факторы свертывания, что снижает потенциал свертывающей системы. Активированный протеин С так же 
участвует в активации тканевого активатора плазминогена путем отщепления от него молекулы ингибитора (PAY-1), тем 
самым усиливая разрушение тромба и фибринолиз. Врожденный или приобретенный дефицит протеина С может приводить 
к выраженным тромботическим осложнениям, таким как тромбофилия, тромбозам глубоких ведет и тромбоэмболии легочной
111
И 2


--- стр. 112 ---
артерии. Пациенты с врояаденной гетерозиготной формой дефицита протеина С обычно страдают венозными тромбозами как 
правило с молодого возраста. Проявления врожденной гомозиготной формы - это фульминантное течение тромботической 
пурпуры в неонатальный период. Частота встречаемости дефицита протеина С в популяции составляет 1  на 300. У людей до 
40 - 45 лет с венозными тромбозами, частота дефицита протеина С может достигать 10- 15%. Приобретенный дефицит 
протеина С, проявляющийся внезапными тромбозами часто встречается при заболеваниях печени, у хируггических больных, 
больных находящихся на оральной антикоагулянтной терапии, анифосфолипидном синдроме. Снижение активности 
протеина С в плазме может быть результатом уменьшения его количества и качаственного дефекта (первый тип) и только 
его функциональной активности (второй тип). Исследование протеина С - дефицита в лабораторных условиях может 
установить как количественные, так и качественные его недостатки. Количественное определение протеина С основано на 
таких иммунологических исследованиях, как радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез, ферментативно - 
связанный иммуносорбентный анализ (EL1SA). ELISA может проводится в небольших лабораториях, и приводит к получению 
объективных, точных и воспроизводимых результатов. Проведение ELISA возможно на специальных автоматических 
приборах.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принципом анализа протеина С является метод сендвич ELISA. Связанные специфические антитела против человеческого 
протеина С находятся в 96-луночной полиэстеровой планшете. Разведенная плазма пациентов инкубируется в лунках с 
прикрепленными на их поверхности антителами. Затем лунки промываются для удаления плазмы. Количество связанного 
протеина С высчитывается применением лошадиной пероксидазы конъюгированной с человеческими анти протеин С 
антителами. Связанные конъюгаты удаляются в процессе смывания. Хромогенный субстрат тетраметилбензидин (ТМВ) и 
гидрогенезированная пероксидаза приводят к появлению окрашивания, степень которого измеряется с помощью измерения 
оптической плотности на спектрофотометре с длинной волны 450 нм. Процент концентрации протеина С в плазме больного 
высчитывается по кривой построенной по контрольной плазме, поставляемой в наборе.
РЕАГЕНТЫ
Хранение при 2“ - 8°С. Не замораживать. Каждый протеин С антиген набор, содержащийся в 96 лунках, содержит:
12x8 лунок с антителами к человеческому протеину С.
60 мл разбавитель образцов (сине-зеленый раствор); содержащий азид натрия.
3 пузырька X 0,5 мл лиофилизированной референсной плазмы, с полоской для анализа.
12 мл анти-протеин С человеческий коньюгат (синий раствор).
13 мл субстрата (тетраметилбензидин (ТМБ) и перекись водорода).
13 мл останавливающего раствора (0,36 N серной кислоты)
30 мл моющего концентрата (ЗЗХ раствора фосфатного буфера с 0,01% Tween 20)
ВНИМАНИЕ: турбидиметрия может возникать в промывочной концентрации, не имеющей необходимых компонентов 
анализа, тогда надо произвести разбавление.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Для in vitro диагностики.
21. Человеческий материал использованный для приготовления референсной плазмы, содержащийся в данном наборе, 
протестирован и является негативным по НВэАГ, HCV, ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Иногда, дериваты, полученные из человеческого 
материала образцов пациентов, могут быть потенциально инфицированными.
Не пипетируйте ртом.
Не курите, не принимайте пищу и не пейте в тех местах, где могли находиться составные части набора.
При повреждении перчаток при работе с компонентами набора незамедлительно тщательно промойте руки.
Компонент набора может вызывать покраснение глаз и кожи. Возможно проникновение через кожу. Пользуйтесь 
перчатками при работе с наборами и мойте руке после работы. Держите реагенты вдали от источников огня. Изгибайте 
контакта с окислительными агентами.
Образцы содержат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может образовывать азид меди, поэтому избегайте 
контакта с этим металлом. Азид этого метала является взрывоопасным. Все растворы, содержащие азиды, должны быть 
немедленно промыты достаточным количеством воды во избежание накопления их в промывочной системе.
На компонентах реагентов имеются следующие предупреждения, указанные на наклейках: опасно при проглатывании (R 
22). Возможно покраснение глаз и кожи при контакте (R 36/38). Избегайте контакта с глазами и кожей (S 24/25). При 
попадании в глаза промойте большим количеством воды и обратитесь за медицинской помощью (S 26). Носите удобную 
защищающую одежду (S 36).
22.
23.
24.
25.
26.
27.
ПОДГОТОВКА И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ОБРАЗЦА
Плазма, содержащая 3,2% - 3,8% цитрат натрия в качестве антикоагулянта, может быть использована, как основа. Кровь, 
взятая из вены, должна быть сразу отцентрифугирована. Полученная плазма, должна храниться при 2°- 8°С. После 8 часов 
хранения плазма не должна использоваться, для этого ее надо хранить при -70°С и использовать в течение 1  месяца..
ИНСТРУКЦИЯ по ИСПОЛЬЗОВАНИЮ
Протеин С антиген набор для полного изучения:
4 # |
НЕ ВКЛЮЧЕННЫЕ В НАБОР МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
Рекомендована протеин С контрольная плазма с известными и сохраняемыми параметрами.
Пригодная для приготовления фосфатного бyфepaЯween 20 моющего раствора, восстановления плазмы и для нулевого 
или известного считывания с пластины во время исследования.
Градуированный цилиндр.
Пригодная пипетка на 5 и 1000 микролитров, с наконечниками.
Различная стеклянная посуда, пригодная для малых объемов.
Сосуд или бутыль на 1 литр.
Моющиеся бутыли, предпочтительно переносимые, предназначенные для проведения ручной или полуавтоматической 
промывки.
Доступные перчатки, предпочтительно без порошка.
Считывающий спектрофотометр с длинною волны 450 нм (по возможности с 650нм).
Многоканальный дозатор, предпочтительно 8 каналов.
Микропипетки для приготовления образцов.
112


--- стр. 113 ---
в>
в»
После процедуры все
41.
42.
43.
44.
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ
40. Согрейте до комнатной температуры образцы и реагенты (18-26°) и хорошо перемешайте, 
неиспользованные образцы и реагенты охлабите до 2°-8°С.
Все приготовленные для использования растворы и референсные плазмы должны быть использованы.
Одна плашка в каждом тесте должна содержать один образец воды. Нельзя добавлять в неё ни образец ни реагент. 
Поместите 200 pL воды для калибровки прибора сразу перед исследованием в спектрофотометре. Считыватель плашек 
должен быть установлен на ноль или бланкирован после считывания.
Для проведения исследования необходимо использовать только хорошо промытую, чистую технику. Предпочтительно 
использовать направленный поток моющего раствора из сминаемой пластиковой бутыли с широким наконечником на 
дне микропипетки. Моющий раствор не должен перемешиваться с водой во время процедуры. Автоматический 
промыватель планшет так же может быть использован.
ВАЖНО; неадекватное удаление резидуального количества фосфатного буфераЯ\«ееп 20 может вызвать 
нехарактерный цвет субстрата.
Предпочтительно использование многоканального (8 канального) дозатора.
Тщательно проверяйте каждый шаг приготовления процедуры. Каждый образец, контроль, референт - разбавитель 
должен быть добавлен не познее через 5 минут. Объем образца не должен превышать количество, которое может быть 
добавлено за 5 минут.Для всех инкубаторов, страт инкубирования начинается по завершении добавления реагентов или образцов. 
Добавление всех образцов и реагентов должно осуществляться в одинаковых количествах и одинаковой 
последовательности.Температура инкубирования выше или ниже комнатной температуры (18-26°) может привести к неточным результатам 
исследования.
Избегайте контаминации реагентами при открывании и закрывании первичных флаконов.
Не используйте компоненты набора после срока годности.
Содержащиеся в наборах микропланшеты, конъгаты, субстраты не должны использоваться с другими наборами.
45.
46.
47.
48.
49.
50.
51.
52.
Приготовление реагентов
8.
Моющий раствор —  фосфатного буфераЯ\л/ееп 20 раствор: Отмерьте 30 мл моющего концентрата (ЗЗХ фосфатного 
буфераЯуд/ееп 20) и разведите 1  литром приготовленной и отградуированной воды. Рн приготовленного раствора 
должен быть 7,35 ± 0,1. Данный раствор рассчитан примерно на 20 проб, храниться при 2-8°С. Его необходимо 
утилизировать при признаках контаминации.
Восстановление референсной плазмы осуществляется путем добавления 0,5 мл приготовленной воды. Тщательно 
перемешайте. Дайте отстояться в течение 10 минут перед использованием до полной гомогенизации. Оставьте 
максимум на 8 часов, затем храните при температуре 2-6°С. Соответствующая контрольная плазма приготавливается и 
храниться соответственно прилагаемой инструкции.
45.
Процедура проведения исследования
44. Достаньте микролуночную планшету, которая не использовалась, из рамки в приготовленное место для хранения.
Приготовьте каждую референсную плазму в двух экземплярах. Дублирование, так же рекомендовано для контролей. 
Одна ячейка используется как бланк реагента, в другие добавляется образец разбавителя без сыворотки 
последовательно в 7 шагов в одной секции. Эта ячейка используется в качестве контроля, или образец образца 
последующего шага. Приготовленная вода помещается в каждую лунку, так чтобы заполнить до 200 pL реагентной воды, 
до завершения приготовления сразу перед началом считывания. Так же должна использоваться одна лунка, как 
контроль образца воды.
Чтобы развести все плазмы (1:2 разведения разбавителем образцов) следует:
Рефвренс-плазма:  добавить lOOpL референсной плазмы к lOOpL разбавителя образца.
Контрольный образец и образец пациента:  добавить 20pL референсной плазмы к 20pL разбавителя образца.
Хорошо перемешать. Это предразведение используется в 4-5 шагах исследования.
Используя 1:2 разведенную плазму для 3 шага , приготовьте 6 рабочих позиций как описано ниже:
46.
47.
Объем референс-плазмы 
(1:2)
Объем дилюента 
образца
‘Референсный
уровень
30 M l + 500 M l = 15 0
2 0  M l + 500 M l = 10 0
1 5  M l + 500 M l = 7 5
1 0  M l + 500 M l = 50
1 0  M l + 10 0 0  M l = 25
J ° M ! ___________________________________
+ 2000 M l = 1 2 ,5
48.
49.
50.
51.
52.
53.
54.
55.
Приготовление рабочего раствора для контроля и образцов добавлением 20 р1 предварительно разведенной плазмы 
(1:2 разведенную плазму для 3 шага) до 500 р1 Образца дилюента (соответствует 100% разведенной референсной 
плазмы)Тщательно перемешать и добавить 100 р1 рабочего раствора (референсная плазма, контроль и образец пациента) в 
соответствующую лунку.
Добавить 100 р1 разбавителя образца реагент-бланк лунку. Полностью удалите из нее воду.
Инкубировать в течении 40 минут в комнатной температуре, затем тщательно переверните лунки и удалите жидкость. 
Не позволяйте контаминировать жидкостью соседние ячейки.
Промыть 4 раза рабочим моющим раствором (фосфатного буфера/Tween 20). Каждая лунка должна быть заполнена 
раствором при промывке. Промытые лунки необходимо тщательно высушить. Перевернутые лунки постучите, чтобы 
лучше освободить от жидкости. Рамка должна быть выдавлена в центр верхушки и дно сохраняет модуль микролунок в 
процессе промывки. Используйте абсорбентную бумагу, для остаточного удаления воды. Не позволяйте лункам 
сообщаться между собой.
Добавить 100 р1 коньюгата (синий) в каждую лунку (с тщательно удаленной водой).
Инкубировать в течение 10 минут в комнатной температуре после завершения инкубации тщательно перевернуть лунки 
и вытрихните раствор.Промыть 4 раза рабочим раствором , как в пункте 9. Промывающий раствор не должен смешиваться в процессе 
процедуры. Используя пощелкивание, удалить остатки воды, затем использовать промокательную бумагу.
9
113


--- стр. 114 ---
56.
57.
Добавить 100 pi субстрата в каждую лунку (проверить хорошо ли удалена вода) и инкубировать 10 минут при комнатной 
температуре. Добавить субстрата в каждую исследуемую лунку в той же пропорции. Синий цвет должен появиться в 
позитивных образцах.
Добавить 100 р1 останавливающего раствора (0,36 М  серной кислоты) в кахздую лунку (проверить, чтобы не было воды) 
для остановки реакции.. Добавляйте в тех же пропорциях, что и субстрат раствор. Синий раствор станет желтым, 
цветной - обесцветится. Не добавляйте останавливающий раствор в лунки с водой. Взамен, добавить 200 р1 воды для 
разведения реагента в ячейки с водой. Значение или ноль напротив лунки с водой. Считайте оптическую плотность 
(ОП) каждой ячейки при 450 нм, затем при 650 нм (если возможно). Для получения лучшего результата объемы 
оптических областей надо измерять спустя 30 минут после добавления останавливающего раствора.
2 .
3.
4.
Результаты
1. Сосчитать среднюю оптическую плотность дубликатов растворов референсных плазм, контролей выбранных для 
использования, образцов пациентов.
Отметьте среднюю ОП, наблюдаемую в каждом разведении референсной плазмы (ось X) напротив соответствующих 
значений референсных уровней (ось У). Рекомендуется использовать график с логарифмическими значениями на обеих 
осях, диаграммы и линейные графики.
Используя значения ОП, определите контроль и сравнительные значения пациентов по графической кривой, или 
используя линейную регрессию.
Для подсчета уровня протеина С в % от нормы умножить контроль и относительное значение пациента, наблюдаемое 
на используемой кривой на заданное значение для референс плазмы (см. этикетку).
Для проверки того, что параметры находятся в пределах контроля качества (см. КК).
Контроль качества
13. Основная оптическая плотность (ОП) должна быть меньше 0.1, если спектрофотометр настроен правильно по образцу 
воды. Если ОП больше 0.1 , то возможно образец загрязнен примесью тромбоцитов.
Индивидуальные расхождения ОП в дубликатах может отклоняться от средней в пределах 20% в образцах с 
поглощением более 0.200.
Уровень протеина С в контролях должен быть в пределах, указанный производителем. Хотя некоторое отклонение 
возможно.
Каждая лаборатория должна периодически проверять определяемые значения по этой инструкции.
5.
14
15,
16.
ИССЛЕДУЕМЫЕ УРОВНИ
Нормальный уровень: антиген протеина С обычно измеряется в % от нормальной пулированной плазмы. Нормальный 
уровень антигена протеина С в пулированной плазме составляет 72-160%, (среднее 110%, СО 24%). Этот уровень признан 
нормальным в научной литературе и во всех наблюдаемых случаях исследований. Образцы с более высоким уровнем, чем 
калибровочная кривая, должны быть разбавлены до нормальных значений.
ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Уровни детекции:
Описанные уровни детекции антигена протеина С находятся в промежутке между 5-200%. Хотя, определяемые уровни 
завися от уровня антигена в референсной плазме. Для большей правильности, образцы с уровнем антигена находящимся за 
пределами уровней ОП необходимо перепроверить, предварительно разведя.
Внутри-исследовательская точность:
6 образцов плазм с известными уровнями антигена протеина С между 39% и 112% были протестированы в дубликатах для 
определения точности между лотами. Средний КВ составил 7,5%, как видно в таблице.
Меж-исследовательская
точность
(вариабельность между 
плашками)
Уровень протеина С 
(% от нормы)
Коэффициент
вариации
Общий
коэффициент
вариации
Повторы (х16) 82%-89% 4,6-12,6%
44%-116% 2,9-13,0%
37%-41% 2,9-21,7% 7,0%
Дубликации Уровни 6,0%
Внутри-
исследовательская
точность
(вариабельность между 
лотами)
39%-112% 1,4-10,0% 7,5%
Линейность:
Двойное разведение плазмы, референсной по протеину С, тестируемой в трех лотах демонстрируют кривую со средним 
коэффициентом, определяемым в квадрате как 0,992. Индивидуальные точки получения реагента от 15,2% до 21,3%.
Точность:
Точность определяется с помощью тестирования смешенной референсной плазмы и заранее извесными объемами антигена 
протеина С и расчетом теоритических величин. Среднее значения процена восстановления в 3 лотах составило 99,4% со 
средним коэффициентом вариации 6,1%.
114
t
1
Точность:
Меж-исследовательская точность:
Для определения точности между плашками, три образца плазмы с известными концентрациями антигена протеина С 
(высоким, средним и низким) тестируются в 16 лунках двумя операторами на 6 плашках по 3 в каждой. Данные, 
представленные в следующей таблице, показывают средний коэффициент вариации - 7% между лотами. В примере 
показаны уровни антигена протеина С , определенные у 99 пациентов в 3 лотах для выяснения точности показанной в 
данной инструкции. Показано , что КВ между дубликатами составляет 6%.
* 1
4


--- стр. 115 ---
%
Наблюдаемые сонцентрации антигена протеина С, использованные в данном исследовании определялись только для 
исследования. Каждый исследователь интерпритирует полученные данные, исходя из истории болезни, даннь^ 
обследования, других аналитических данных. Пациенты с врожденной гомозиготной формой дефицита "Р°т® и^^ 
иметь неопределяемый (следовой) его уровень, а гетерозиготные - как правило мехаду 30-60/ о  от нормы. Г>Риобретенныи 
дефицит протеина С может встречаться при различных заболеваниях у детей на 20-50/ о  чаще, чем у взрослых, острая 
печеночная недостаточность, антикоагулянтная терапия, послеоперационный период, антифосфолипидныи синдром, 
синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания и др. Повышенный уровень протеина С может быть у больных
Обоазцы°плазмы могут содержать сниженное количество протеина С из-за неправильного хранения или обработки в 
лаборатории. Плазма пациентов может содержать анти-антитела (мышиные, кроличьи, лошадиные и т.д.), если те вводились 
им в диагностических целях или в процессе лечения, которые могут связывать антитела в диагностических наборах. У  
данных пациентов возможно неадекватное снижение лабораторного определения антигена протеина С.
Тест-система "Протеин С, клоттинговый метод" (Protein С Clotting).
* *  Набор предназначен для определения функциональной активности протеина С (ПрС) в плазме крови человека
клоттинговым^методо^^^^^^^ К-зависимый белок, синтезируемый в печени, сосудистом эндотелии, мегакариоцитах, который 
играет важную физиологическую роль в противосвертывающей системе протеина С [1,2]. Эта антикоагулянтная система 
является одним из важнейших регуляторов гемостаза посредством ингибирования образования сгустка и активации сг^темы 
фибринолиза ПрС функционирует как кофактор активированного протеина С (аПрС) на мембране клеток сосудистой стен и, 
усиливая скорость деградации фVa и фVllla, замедляя, таким образом, скорость образования сгустка.
^ В нормальной плазме приблизительно 40% ПрС циркулирует в виде свободных молекул, в то время как 60 /о
состоят в комплексе с плазменным белком С4Ь классической системы комплимента. Только свободный ПрС функционально
активен и способен связываться с аПрС, тогда как связанный ПрС не активен. *„u.„.u^u 3ni.unrr. ПпГ RНабор для измерения ПрС компании Helena предназначен для определения количества функционального Про. ь 
данном методе разведения нормальной плазмы смешиваются с плазмой, дефицитной по ПрС. Смешанная плазма затем 
активируется реактивом, содержащим аПрС, фVa и фосфолипиды. После активации образование
добавлением кальция хлорида. Человеческий аПрС и фVa добавляются в таком количестве, чтобы нормализовать Дефицит 
фактора в плазме пациента, предотвращая ложно положительные или отрицательные
активности ПрС. Удлинение времени свертывания, таким образом, напрямую связано с концентрацией ПрС в плазме крови 
пациента.
II. Меры предосторожности ,Реактивы, содержащиеся в наборе, предназначены только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности и способу утилизации. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на 
упаковке) антигенов к гепатиту В (НВСАд), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе 
следует обращаться с ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
22. активатор протеина С.
Каждый флакон содержит АРС торговой марки Polybrene и растворяющие компоненты.
Приготовление. Растворить в 1 мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
23. плазма, дефицитная по протеину С.
Каждый флакон содержит дефицитную по PC плазму, полученную аффинным методом.
Приготовление. Растворить в 1 мл очищенной воды. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед 
использованием.
24. фактор Va.
Каждый флакон содержит человеческий ф\/а и стабилизаторы. __
Приготовление. Растворить в 1мл дилюента для фУа. Выдержать в течение 20 минут и хорошо перемешать перед
использованием.
25. Дилюент для фактора Va. п оо/ \
Каждый флакон содержит элаговую кислоту, фосфолипиды, буфер, стабилизаторы и консерванты (включая 0.2/о фенол). 
Приготовление. Реактив уже готов к применению. Аккуратно перевернуть несколько раз до получения гомогенной суспензии.
26. 25тМ раствор кальция хлорида.
Каждый флакон содержит 25тМ раствор кальция хлорида.
Приготовление. Реактив уже готов к применению.
27. 0.9%  солевой раствор.
Каждый флакон содержит 0.9% раствор натрия хлорида и 0.09% азида натрия в качестве консерванта.
Приготовление. Реактив уже готов к применению.
28. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильностьЗапечатанные флаконы годны к применению до срока, указанного на упаковке при соблюдении условий хранения,
19. активатор протеина С „
Разведенный реактив годен к применению в течение 1 недели при температуре хранения 2+6 С или 8 часов при комнатной 
температуре. Не замораживать!
20. плазма, дефицитная по протеину С
115


--- стр. 116 ---
Разведенный реактив годен к применению в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С, 4 часа при комнатной 
температуре или 1  месяц при -20°С, если реактив будет разморожен только один раз.
21. фактор Va
Разведенный реактив годен к применению до 8 часов при температуре хранения 2+6°С, 3.5 часа при комнатной температуре. 
Не замораживать!
22. разбавитель для фактора Va
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
23. 25тМ раствор кальция хлорида
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
24. 0.9% солевой раствор
Если в лаборатории поддерживается соответствующая чистота, то вскрытый флакон будет годен к применению до срока, 
указанного на упаковке. Не замораживать!
V. Требуемое, но не поставляемое оснащение 
CARP кат ном 5185.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь (9 частей) должна 
быть собрана в пробирку с 3.2% или 3.8% цитратным антикоагулянтом (1 часть). После центрифугирования при оборотах 
2000+3000 * g в течение 15 минут плазму отделить. Плазму следует хранить при температуре 2+6°С. Тестирование должно 
быть проведено в течение 4 часов после забора образцов, либо плазму можно заморозить и хранить при температуре -20°С 
в течение 2 недель или при -70°С в течение 1 месяца. Разморозить быстро при 37°С перед проведением измерений. Не 
держать при 37“С более 5 минут.
VI!. Пошаговое руководство 
Измерения рекомендуется дублировать.
Внимание:  Перед каждым измерением следует строить новую калибровочную кривую. Следует убедиться, что разведено 
достаточное для измерений количество реактива. При необходимости, одинаковые по составу флаконы можно пулировать. 
Ручной метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Поместить 25тМ раствор кальция хлорида в инкубатор
на 37°С.
Приготовить исходный раствор стандарта путем смешивания 200мкл референсной плазмы и 1800мкл солевого раствора.
Сток V стандарта, мкл V солевого р-ра, мкл активность, %
1 400 0 100
2 300 100 75
3 200 200 50
4 100 300 25
5 0 400 0
Подготовить разведения контроля и образцов плазмы пациента добавлением 50мкл плазмы к 450мкл солевого 
раствора.
Все стандарты, разведения контроля и плазмы пациента держать на льду и провести измерения в течение 30 минут.
В кювету для коагулогических измерений добавить:
31. Ю Омкл дефицитной по PC плазмы.
32. Ю Омкл разведения стандарта, контроля или плазмы пациента.
33. Ю Омкл реактива активатора PC.
34. Ю Омкл реактива фVa.
35. Инкубировать 3 минуты при 37°С.
36. добавить Юмкл раствора кальция хлорида
37. запустить таймер
38. заметить время свертывания с точностью до 0.1 секунды.
39. построить график зависимости активности ПрС (ось X) от времени свертывания (осьУ).
40. Интерполировать значения контроля и плазмы пациента по калибровочной кривой.
Автоматизированный метод.
Растворить достаточное количество флаконов реактивов. Запустить АС-4, используя опцию PC-teCt в настройках
Ctar1=15Cec Method=coag M ix=1 Patient (pat) Vol=6pl 
PoC=35 (CP)
Def plaCma (DP)
VoI= 6 0mI
PoC=34
!ncub=180Cec Math=lin C!ean=1 Buffer (Caline)
Vo!=54pl
PoC=39
PC activator (RO) 
VoI= 6 0mI  PoC =29
Runtime=300Cec CenC=3 t-corr=0%
C-corr=0%
Clear (CLR) 
Vol=0g!
Factor V (R1) 
VoI= 6 0mI  PoC = 3 1
CaCI2 (R2) 
Vol=60pl PoC=26
VIII. Интерпретация результатов
Дефицит ПрС, как врожденный, так и приобретенный, может приводить к серьезным тромботическим осложнениям, 
таким как тромбофлебиты, тромбоз глубоких вен, легочный эмболизм. Распространение дефицита ПрС среди массы 
населения оценивается как менее 1 случая на 300 человек. 2/3 пациентов с врожденным дефицитом ПрС (уровень менее 
50% от нормы) могут страдать венозным тромбозом в зрелом возрасте [5,6]. Среди молодых пациентов (до 35 лет) с 
историей тромбозов, распространенность может достигать 15+18% [7]. Приобретенный дефицит ПрС может возникать при 
беременности, во время применения оральных контрацептивов или оральной антикоагулянтной терапии, при заболеваниях 
печени, сахарном диабете, послеоперационных осложнениях, сепсисе и других инфекционных синдромах [8]. Сниженная 
активность ПрС в плазме может иметь место при низкой концентрации или нарушенной функции молекулы ПрС.
116


--- стр. 117 ---
/ f :
Снижение активности ПрС в плазме связано с возросшей частотой возникновения тромбоэмболизма [9]. Сниженная 
активность ПрС необязательно означает снижение концентрации. Для лабораторной диагностики дефицита ПрС нужно 
проводить качественный (функциональный) и количественный (по уровню антигена) анализы. Компания Helena предлагает 
наборы для проведения твердофазного иммуноанализа (ELICA) как с полноценным содержанием ПрС, так и со свободным 
от его содержания, (кат ном 5286, 5293).
IX . Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Перед измерением каждой партии образцов 
пациентов необходимо протестировать нормальную и абнормальную плазму, чтобы удостовериться в удовлетворительной 
работе оборудования и оператора. Если контрольные измерения не совпадают с ожидаемыми значениями, то измеренные 
данные пациентов следует считать недостоверными.
Компания Helena предлагает следующие контрольные реактивы, доступные для использования с данным набором 
реактивов: 
кат ном 5301 SAC-1. 
кат ном 5302 SAC-2.
22.
23.
X. Ограничения
21. Сбор образцов. Убедитесь, что использовано правильное соотношение антикоагулянта/крови.
>150% протеина С. Образцы пациентов с повышенным уровнем содержания ПрС должны измеряться после 
разбавления для получения точных результатов. Откорректированный уровень ПрС должен быть получен при 
разбавлении по крайней мере в 2 раза.
Влияние гепарина/варфарина. Гепарин в концентрации >1ед\мл может вызывать удлинение времени свертывания и, 
следовательно, оказывать эффект завышенного содержания ПрС. Пациенты, получающие варфарин, могут иметь 
ложно заниженную активность ПрС. 
фут. Содержание >200% не влияет на результат.
Волчаночный антикоагулянт. Образцы, содержащие волчаночный антикоагулянт с удлиненным значением АЧТВ могут 
давать ложно завышенные значения ПрС и должны быть подтверждены тестом со свободным антигеном.
Мутация фУ Лейден. Граница низкого функционального уровня ПрС пациентов с фУ-Лейден мутацией должна быть 
проверена тестом со свободным антигеном.
Влияние ингибитора тромбина. Ингибиторы тромбина (гирудин, бивалирудин и др.) в образце пациента могут приводить 
к завышению содержания ПрС.
24.
25.
26
27.
XI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от 
используемых методов и анализаторов. В связи с этим, каждая лаборатория должна определить свою собственную область 
нормальных значений.
Ожидаемая область нормальных значений протеина С гендер-специфична [11].
Мужчины 85+157% Женщины 65+136%
ХМ.Аналитические характеристики
Представленные характеристики измерений были определены компанией Helena илипредставителями и
являются примером. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Внутри одной аналитической серии.
Уровень ПрС, % 
п=8 98.1
коэф. вар. внутри пробы, %
5.04
п=8 32.4 6.14
Между разными аналитическими сериями.
Уровень ПрС, % 
п=8 96.7
коэф. вар. между пробами, %
2.8
п=8
Между партиями.
Уровень ПрС, %
25.4
коэф. вар. внутри пробы, %
11.19
п=8 91.7 8.69
п=8
Точность
26.4 15.33
Сравнение набора для определения ПрС (коагулогичекий метод) фирмы Helena с другим коммерчески доступным 
набором (Ctago Ctaclot АССау) дало результат с хорощей корреляцией (г=0.82).
Чувствительность
Метод чувствителен к 10% ПрС.
Линейность
Метод обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 10+150% ПрС.
117


--- стр. 118 ---
Тест-система
АДФ
'Агрегация тромбоцитов" (Platelet Aggregation Kit).
I. Применение
Набор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов 
гепатита В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
1. АДФ-реактив. (2х1мл)
Реактив до растворения представляет собой однородный белый порошок.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор 200м кМ  АДФ.
2. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
АДФ-реактив.  Разведенный реактив устойчив в течение 1  недели при температуре хранения 2+6°С или 3 месяца при -20°С.
V. Сбор и приготовление образцовСледует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250x109\л. Плазму ^следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов ■  .
VI. Пошаговое руководство
Перед использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
VII. Контроль качестваКаждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
VIII. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX. Аналитические характеристикиВ одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
ЭПИНЕФРИН
I. ПрименениеНабор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверхедения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожностиРеактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), H1V1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека. Эпинефрин-реактив токсичен при вдыхании, контакте с 
кожей и проглатывании. Может нанести вред плоду (при беременности). В случае инцидента или если вы почувствовали себя 
плохо при работе с реактивом, немедленно обратитесь за медицинской помощью (по возможности, покажите маркировку 
продукта).
III. Реактивы
эпинефрин-реактив. (2x1 мл)
Кахщый флакон содержит 1мг виннокислого эпинефрина, что эквивалентно 548мкг (ЗмкМ) эпинефрина. Реактив до 
растворения должен представляет собой стекловидную массу или однородный белый порошок.
118


--- стр. 119 ---
i
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор ЗмкМ  эпинефрина.
Другие компоненты набора.
Кахедый набор содержит инструкцию по применению.
IV . Хранение и стабильностьЗапечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Эпинефрин-реактив.  Разведенный реактив стабилен течение 1 недели при температуре хранения 2+6°С.
V . Сбор и приготовление образцовСледует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250x109\л. Плазм;|^^следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов .
VI. Пошаговое руководствоПеред использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
VII. Контроль качестваКаждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
V III. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX . Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
%
Коллаген
I. ПрименениеНабор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожностиРеактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
Коллаген-реактив. (2x1 мл)
Каждый флакон содержит Ю Омкг коллагена из сухожилий лошади. После аккуратного помешивания реактив представляет 
собой однородную прозрачную суспензию. Изменение цвета или инородные включения (взвеси) могут свидетельствовать о 
загрязнении реактива. Аккуратно перемешайте перед применением.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильностьЗапечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Коллаген-реактив.  Вскрытый реактив стабилен течение 4 недель при температуре хранения 2+6°С.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250х109\л. Плазм^^следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов '.
VI. Пошаговое руководствоПеред использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
119


--- стр. 120 ---
VII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
VIII. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX. Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
Тест-система "Агрегация эпинефрином" (Epinephrine).
I. Применение
Набор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека. Эпинефрин-реактив токсичен при вдыхании, контакте с 
кожей и проглатывании. Может нанести вред плоду (при беременности). В случае инцидента или если вы почувствовали себя 
плохо при работе с реактивом, немедленно обратитесь за медицинской помощью (по возможности, покажите маркировку 
продукта).
III. Реактивы
эпинефрин-реактив. (2х1мл)
Каждый флакон содержит 1мг виннокислого эпинефрина, что эквивалентно 548мкг (ЗмкМ) эпинефрина. Реактив до 
растворения должен представляет собой стекловидную массу или однородный белый порошок.
Приготовление: растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор ЗмкМ эпинефрина.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Эпинефрин-реактив. Разведенный реактив стабилен течение 1  недели при температуре хранения 2+6°С.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250х109\л. Плазму следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов’’ ^.
VI. Пошаговое руководство
Перед использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
VII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
VIII. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX. Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
I
120


--- стр. 121 ---
т
f
1
♦
i
I
69. Тест-система "Агрегация коллагеном" (Collagen).
I. ПрименениеНабор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожностиРеактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
Коллаген-реактив. (2х1мл)
Ка>едый флакон содержит Ю Омкг коллагена из сухожилий лошади. После аккуратного помешивания реактив представляет 
собой однородную прозрачную суспензию. Изменение цвета или инородные включения (взвеси) могут свидетельствовать о 
загрязнении реактива. Аккуратно перемешайте перед применением.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV . Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Коллаген-реактив. Вскрытый реактив стабилен течение 4 недель при температуре хранения 2+6°С.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250x109Vn. Плазму следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов '
VI. Пошаговое руководствоПеред использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
VII. Контроль качестваКаждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
V III. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX . Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
Тест-система "Агрегация ристоцетином" (Ristocetin).
I. ПрименениеРеактив предназначен для использования в исследовании агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
Ристоцвтин-реактив (10x0,5мл).
Каждый флакон содержит 7.5мг сульфата ристоцетина. Реактив до растворения должен представляет собой однородный 
белый порошок.
121


--- стр. 122 ---
Приготовление: растворите содержимое каждого флакона в 0.5мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бес14ветный 
раствор 15 мг/мл сульфата ристоцетина.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Ристоцетин-реактие. Разведенный реактив устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2->^°С или 30 дней при -
20°С.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250х109\л. Плазму следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов'’^
VI. Пошаговое руководство
Перед использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
если
VII. Контроль качества
Ках<дая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
VIII. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX. Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
71. Тест-система "Агрегация арахидонатом натрия" (Arachidonic Acid).
I. Применение
Набор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
Арахидоновая кислота. (2x1 мл)
Каждый флакон содержит 5мг натриевой соли арахидоновой кислоты. Реактив до растворения должен представляет собой 
однородный белый порошок.
Приготовление: растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор 5 мг/мл натрия арахидоната. В период использования , если реактив долго хранится, может произойти окисление 
арахидоновой кислоты, в результате чего раствор приобретет желтую окраску, или препарат не сможет вызывать по крайней 
мере 70%-ую агрегацию в суспензии нормальных тромбоцитов. В этом случае реактив нельзя использовать.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Арахидоновая кислота. Разведенный реактив устойчив в течение 24 часов при температуре хранения 2+6°С. По 
возможности флаконы следует затыкать пробкой, чтобы избежать окисления арахидоновой кислоты.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250x109\л. Плазму следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов '
122


--- стр. 123 ---
0
V I. Пошаговое руководство
Перед использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
если
V II. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными,
V III. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX . Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при
Тест-система "Агрегация АДФ (аденозин дифосфат)" (Adenosine Diphosphate).
I
I. ПрименениеНабор предназначен для использования в исследованиях агрегационных свойств тромбоцитов для подтверждения 
специфических нарушений тромбоцитов.
II. Меры предосторожностиРеактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов 
гепатита В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними стой же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
III. Реактивы
АДФ-реактив. (2x1 мл)
Реактив до растворения представляет собой однородный белый порошок.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор 200мкМ АДФ.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV . Хранение и стабильностьЗапечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
АДФ-реактив.  Разведенный реактив устойчив в течение 1 недели при температуре хранения 2+6°С или 3 месяца при -20°С.
V. Сбор и приготовление образцовСледует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9;1. После центрифугирования при 
оборотах 150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную 
тромбоцитами плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую 
тромбоцитами плазму бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250х109\л. Плазм;|г следует хранить при 
температуре 18+25°С. Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов ■
VI. Пошаговое руководствоПеред использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
VII. Контроль качестваКаждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
V III. Референсные значенияЗначения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
IX . Аналитические характеристикиВ одной аналитической серии коэффициент вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
123


--- стр. 124 ---
Тест-система "Ристоцетин-кофактор (фактор Виллебранда)" (Ristocetin Cofactor Kit).
I. Применение
Тест Ристоцетин-кофактор предназначен для количественного определения активности, отражающей активность 
фактора Виллебранда в плазме\
Набор Ристоцетин-кофактор измеряет способность плазмы пациента вызывать агглютинацию тромбоцитов, 
фиксированных формалином, в присутствии ристоцетина. Скорость ристоцетин-индуцируемой агглютинации тромбоцитов 
зависит от концентрации фактора Виллебранда.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1.2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта. Для предотвращения азидного нароста в 
свинцовых или медных канализационных трубах смывайте сливаемые в раковину реактивы большим количеством воды и 
регулярно удаляйте примеси раствором гидроксида натрия.
III. Реактивы
3. Лиофилизованные тромбоциты. (4х5мл)
Флакон содержит фиксированные формалином тромбоциты в Tris-буфере.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 5мл Tris-буфера. Аккуратно интенсивно перемешайте 
круговыми движениями, дайте постоять 20 минут.
4. Калибратор SARP. (2х1мл)
Флакон содержит 1мл лиофилизованной нормальной человеческой плазмы, с известной активностью ристоцетин-кофактора. 
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1мл очищенной воды. Аккуратно интенсивно перемешайте 
круговыми движениями, дайте постоять 10 минут. Перед применением аккуратно перемешайте. Не трясти.
5. Tris-буфер. (1х35мл)
Флакон содержит 35мл 0.05М Tris и 0.15М хлорида натрия с азидом натрия в качестве консерванта. Tris-буфер уже готов к 
использованию.
6. Патологичный контроль ристоцетин кофактора. (2x0.5мл)
Флакон содержит 0.5мл лиофилизованной плазмы от донора с болезнью Виллебранда. Значение активности дано во 
вложенной инструкцию по применению набора.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 0.5мл очищенной воды. Аккуратно интенсивно перемешайте 
круговыми движениями, дайте постоять 10 минут. Перед применением аккуратно перемешайте. Не трясти.
7. Ристоцетин. (2x1.5мл)
Флакон содержит 10 мг/мл ристоцетина, лиофилизованного со стабилизаторами.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1.5мл очищенной воды. Аккуратно интенсивно перемешайте 
круговыми движениями, дайте постоять 10 минут. Перед применением аккуратно перемешайте. Не трясти.
8. Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке.
1. Лиофилизованные тромбоциты.  Разведенный реактив устойчив в течение 24 часов при температуре хранения 2+6°С 
или 30 дней при -20°С.
2. Калибратор SARP.  Разведенный реактив устойчив в течение 2 часов при температуре хранения 2+6°С или 30 дней при - 
20'С.
3. Tris-буфер.  Вскрытый флакон должен храниться при температуре 2+6°С.
4. Патологичный контроль ристоцетин кофактора .  Разведенный реактив устойчив в течение 8 часов при температуре 
хранения 2+6°С или 30 дней при -20“С.
5. Ристоцетин.  Разведенный реактив устойчив в течение 8 часов при температуре хранения 2+6°С или 30 дней при -20°С.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
8. Кат.номер 5371/5356 лиофилизованные тромбоциты.
9. Кат.номер 5185 SARP.
10. Кат.номер 5365/5355 Tris-буфер.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. Кровь собирается в вакутейнеры. 
Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9:1. Натрия цитрат может быть 3.2% или 3.8%. 
Отцентрифугируйте при 2000-3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Тесты должны 
проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20°С в течение 2 недель или месяц при - 
70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовьте все реактивы в соответствии с прилагаемой инструкцией для каждого реактива. Выставите настройки 
агрегометра, следуя указаниям инструкции пользователя.
1. Построение калибровочной кривой.
Постройте калибровочную кривую, используя соответствующие разведения (в Tris-буфере), чтобы, по крайней мере, 3 точки 
кривой находились в интервале 10+60% активности.
Перемешивайте без встряхивания.
2. Приготовление образцов пациента.
Приготовьте 1+1 и 1+3 разведения плазмы пациента или контрольной плазмы в Tris-буфере. Перемешайте, без 
встряхивания.
3. Приготовление холостой пробы для агрегации.
>
124


--- стр. 125 ---
в
в агрегационную кювету с мешалкой поместить 0.25мл суспензии тромбоцитов и 0.25мл Tri-буфера. Это необходимо для 
установления 100%-го уровня активности.
4. Выполнение теста.
1. Используя холостую пробу для агрегации установите 100%-ю активность в каждом измерительном канале.
2. добавьте 400мкл суспензии тромбоцитов из образцов, приготовленных для тестирования в 
измерительные кюветы. Поместите во все кюветы мешалки.
3. Поместите кюветы агрегометр и добавьте 50мкл ристоцетина. Инкубируйте при 37°С точно 3 минуты.
4. добавьте 50мкл стандарта, разведения плазмы пациента или контрольной плазмы.
5. Наблюдайте процесс агрегации тромбоцитов в течение 5 минут.
V III. Интерпретация результатов
Постройте график зависимости угла наклона агрегационной кривой (ось Y) от активности разведений SARP (ось X) в 
двойных логарифмических координатах. Аппроксимируйте прямой линией. Интерполируйте угол наклона кривой пациента по 
графику для нахождения процента активности. Скорректируйте полученные результаты с соответствующим разведением и 
установленной активностью SARP.
V II. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
Патологичный контроль ристоцетин кофактора, поставляемый в наборе, должен использоваться неразведенным и 
давать результаты, укладывающиеся в обозначенную область.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для использования сданным продуктом.
7. Кат.номер 5301 SAC-1.
8. Кат.номер 5302 SAC-2.
X II. Ограничения
Активность кофактора ристоцетина не может точно определить нарушения, связанные с фактором Виллебранда в 
некоторых случаях, таких как беременность^, введении концентрата фактора Vlll’’^, волчаночной терапии®. В таком случае, 
фактор Виллебранда-ристоцетин-кофактор может быть скорректирован, даже если время кровотечении остается 
удлиненным. Кроме того, уровень фактора Виллебранда-ристоцетин-кофактора может быть нормальным при заболевании 
Виллебранда II типа, даже при удлиненном времени кровотечения®.
V III. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, 
которые используют лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо 
установить свой собственный нормальный диапазон. Ожидаемые значения для активности ристоцетин-кофактора для 
взрослого населения лежат в диапазоне 58+166% (0.58+1.66 ед/мл). Каждой лаборатории настоятельно рекомендуется 
определить собственную область нормальных значений для конкретных приборов/реактивов при их рутинном использовании.
IX . Аналитические характеристики
Нижеприведенные аналитические характеристики измерений были определены компанией Helena BioSciences или 
ее представителями как стандартные. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Ристоцетин кофактор производства компании Helena обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 
10+60% без предварительного разведения. В пределах одной аналитической серии коэффициент вариации не должен 
составлять не более 10%.
т
i
i
Контроль качества (патология) для тест-системы "Ристоцетин-кофактор (фактор  
Виллебранда)" (Ristocetin Cofactor Abnormai Control).
I. Применение
Тест Ристоцетин-кофактор предназначен для количественного определения активности, отражающей активность 
фактора Виллебранда в плазме\
Набор Ристоцетин-кофактор измеряет способность плазмы пациента вызывать агглютинацию тромбоцитов, 
фиксированных формалином, в присутствии ристоцетина. Скорость ристоцетин-индуцируемой агглютинации тромбоцитов 
зависит от концентрации фактора Виллебранда.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта. Для предотвращения азидного нароста в 
свинцовых или медных канализационных трубах смывайте сливаемые в раковину реактивы большим количеством воды и 
регулярно удаляйте примеси раствором гидроксида натрия.
III. Реактивы
Патологичный контроль ристоцетин кофактора. (2x0.5мл)
Фпакон содержит 0.5мл лиофилизованной плазмы от донора с болезнью Виллебранда. Значение активности дано во 
вложенной инструкцию по применению набора.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 0.5мл очищенной воды. Аккуратно интенсивно перемешайте 
круговыми движениями, дайте постоять 10 минут. Перед применением аккуратно перемешайте. Не трясти.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
125


--- стр. 126 ---
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке.
6. Патологичный контроль ристоцетин кофактора .  Разведенный реактив устойчив в течение 8 часов при температуре 
хранения 2+6°С или 30 дней при -20°С.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
11. Кат.номер 5371/5356 лиофилизованные тромбоциты.
12. Кат.номер 5185 SARP.
13. Кат.номер 5365/5355 Tris-буфер.
14. Кат.номер 5372 Ристоцетин
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. Кровь собирается в вакутейнеры. 
Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9:1. Натрия цитрат может быть 3.2% или 3.8%. 
Отцентрифугируйте при 2000-3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Тесты должны 
проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20°С в течение 2 недель или месяц при - 
70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовьте все реактивы в соответствии с прилагаемой инструкцией для каждого реактива. Выставите настройки 
агрегометра, следуя указаниям инструкции пользователя.
5. Построение калибровочной кривой.
Постройте калибровочную кривую, используя соответствующие разведения (в Tris-буфере), чтобы, по крайней мере, 3 точки 
кривой находились в интервале 10+60% активности.
Перемешивайте без встряхивания.
6. Приготовление образцов пациента.
Приготовьте 1+1 и 1+3 разведения плазмы пациента или контрольной плазмы в Tris-буфере. Перемешайте, без 
встряхивания.
7. Приготовление холостой пробы для агрегации.
В агрегационную кювету с мешалкой поместить 0.25мл суспензии тромбоцитов и 0.25мл Tri-буфера. Это необходимо для 
установления 100%-го уровня активности.
8. Выполнение теста.
6. Используя холостую пробу для агрегации установите 100%-ю активность в каждом измерительном канале.
7. добавьте 400мкл суспензии тромбоцитов из образцов, приготовленных для тестирования в 
измерительные кюветы. Поместите во все кюветы мешалки.
8. Поместите кюветы агрегометр и добавьте 50мкл ристоцетина. Инкубируйте при 37°С точно 3 минуты.
9. добавьте 50мкл стандарта, разведения плазмы пациента или контрольной плазмы.
10. Наблюдайте процесс агрегации тромбоцитов в течение 5 минут.
)
VIII. Интерпретация результатов
Постройте график зависимости угла наклона агрегационной кривой (ось Y) от активности разведений SARP (ось X) в 
двойных логарифмических координатах. Аппроксимируйте прямой линией. Интерполируйте угол наклона кривой пациента по 
графику для нахождения процента активности. Скорректируйте полученные результаты с соответствующим разведением и 
установленной активностью SARP.
VII. Контроль качества
Ка>кдая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
Патологичный контроль ристоцетин кофактора, поставляемый в наборе, должен использоваться неразведенным и 
давать результаты, укладывающиеся в обозначенную область.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для использования сданным продуктом.
9. Кат.номер 5301 SAC-1.
10. Кат.номер 5302 SAC-2.
XII. Ограничения
Активность кофактора ристоцетина не может точно определить нарушения, связанные с фактором Виллебранда в 
некоторых случаях, таких как беременность^, введении концентрата фактора Vlll’'^, волчаночной терапии®. В таком случае, 
фактор Виллебранда-ристоцетин-кофактор может быть скорректирован, даже если время кровотечении остается 
удлиненным. Кроме того, уровень фактора Виллебранда-ристоцетин-кофактора может быть нормальным при заболевании 
Виллебранда II типа, даже при удлиненном времени кровотечения®
VIII. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, 
которые используют лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо 
установить свой собственный нормальный диапазон. Ожидаемые значения для активности ристоцетин-кофактора для 
взрослого населения лежат в диапазоне 58+166% (0.58+1.66 ед/мл). Каждой лаборатории настоятельно рекомендуется 
определить собственную область нормальных значений для конкретных приборов/реактивов при их рутинном использовании.
IX. Аналитические характеристики
Нижеприведенные аналитические характеристики измерений были определены компанией Helena BioSciences или 
ее представителями как стандартные. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Ристоцетин кофактор производства компании Helena обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 
10+60% без предварительного разведения. В пределах одной аналитической серии коэффициент вариации не должен 
составлять не более 10%.
126


--- стр. 127 ---
'I
Лиофилизированный реагент для тест-системы  
Виллебранда)" (Lyophilised Platelets).
'Ристоцетин-кофактор (фактор
I. Применение
Тест Ристоцетин-кофактор предназначен для количественного определения активности, отражающей активность 
фактора Виллебранда в плазме'.
Набор Ристоцетин-кофактор измеряет способность плазмы пациента вызывать агглютинацию тромбоцитов, 
фиксированных формалином, в присутствии ристоцетина. Скорость ристоцетин-индуцируемой агглютинации тромбоцитов 
зависит от концентрации фактора Виллебранда.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта. Для предотвращения азидного нароста в 
свинцовых или медных канализационных трубах смывайте сливаемые в раковину реактивы большим количеством воды и 
регулярно удаляйте примеси раствором гидроксида натрия.
III. Реактивы
Лиофилизованные тромбоциты.
Флакон содержит фиксированные формалином тромбоциты в Tris-буфере.
Приаотовление:  растворите содержимое каждого флакона в 5мл Tris-буфера (для кат номера 5371) или в 10 мл Tris-буфера 
(для кат номера 5356). Аккуратно интенсивно перемешайте круговыми движениями, дайте постоять 20 минут.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV . Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке.
7. Лиофилизованные тромбоциты.  Разведенный реактив устойчив в течение 24 часов при температуре хранения 2+6°С 
или 30 дней при -20°С.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
15. Кат.номер 5185 SARP.
16. Кат.номер 5365/5355 Tris-буфер.
17. Кат.номер 5372 Ристоцетин
18. Кат.номер 5373 Патологичный контроль.
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. Кровь собирается в вакутейнеры. 
Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9:1. Натрия цитрат может быть 3.2% или 3.8%. 
Отцентрифугируйте при 2000-3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Тесты должны 
проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20°С в течение 2 недель или месяц при - 
70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут.
V II. Пошаговое руководство
Подготовьте все реактивы в соответствии с прилагаемой инструкцией для каждого реактива. Выставите настройки 
агрегометра, следуя указаниям инструкции пользователя.
9. Построение калибровочной кривой.
Постройте калибровочную кривую, используя соответствующие разведения (в Tris-буфере), чтобы, по крайней мере, 3 точки 
кривой находились в интервале 10+60% активности.
Перемешивайте без встряхивания.
10. Приготовление образцов пациента.
Приготовьте 1+1 и 1+3 разведения плазмы пациента или контрольной плазмы в Tris-буфере. Перемешайте, без 
встряхивания.
11. Приготовление холостой пробы для агрегации.
В агрегационную кювету с мешалкой поместить 0.25мл суспензии тромбоцитов и 0.25мл Tri-буфера. Это необходимо для 
установления 100%-го уровня активности.
12. Выполнение теста.
11. Используя холостую пробу для агрегации установите 100%-ю активность в каждом измерительном канале, 
добавьте 400мкл суспензии тромбоцитов из образцов, приготовленных для тестирования в 
измерительные кюветы. Поместите во все кюветы мешалки.
Поместите кюветы агрегометр и добавьте 50мкл ристоцетина. Инкубируйте при 37°С точно 3 минуты, 
добавьте 50мкл стандарта, разведения плазмы пациента или контрольной плазмы.
Наблюдайте процесс агрегации тромбоцитов в течение 5 минут.
12.
13.
14.
15.
Vili. Интерпретация результатов
Постройте график зависимости угла наклона агрегационной кривой (ось Y) от активности разведений SARP (ось X) в 
двойных логарифмических координатах. Аппроксимируйте прямой линией. Интерполируйте угол наклона кривой пациента по 
графику для нахождения процента активности. Скорректируйте полученные результаты с соответствующим разведением и 
установленной активностью SARP.
Vii. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора.
127


--- стр. 128 ---
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
Патологичный контроль ристоцетин кофактора, поставляемый в наборе, должен использоваться неразведанным и 
давать результаты, укладывающиеся в обозначенную область.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для использования сданным продуктом.
11. Кат.номер 5301 SAC-1.
12. Кат.номер 5302 SAC-2.
XII. Ограничения
Активность кофактора ристоцетина не может точно определить нарушения, связанные с фактором Виллебранда в 
некоторых случаях, таких как беременность^, введении концентрата фактора Vl№ '*, волчаночной терапии^. В таком случае, 
фактор Виллебранда-ристоцетин-кофактор может быть скорректирован, даже если время кровотечении остается 
удлиненным. Кроме того, уровень фактора Виллебранда-ристоцетин-кофактора может быть нормальным при заболевании 
Виллебранда II типа, даже при удлиненном времени кровотечения°.
VIII. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, 
которые используют лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо 
установить свой собственный нормальный диапазон. Ожидаемые значения для активности ристоцетин-кофактора для 
взрослого населения лежат в диапазоне 58+166% (0.58+1.66 ед/мл). Каждой лаборатории настоятельно рекомендуется 
определить собственную область нормальных значений для конкретных приборов/реактивов при их рутинном использовании.
IX. Аналитические характеристики
Нижеприведенные аналитические характеристики измерений были определены компанией Helena BioSciences или 
ее представителями как стандартные. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Ристоцетин кофактор производства компании Helena обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 
10+60% без предварительного разведения. В пределах одной аналитической серии коэффициент вариации не должен 
составлять не более 10%.
Тестовый реагент "Ристоцетин кофактор, ТРИС-буфер" (Tris-Buffered Saline).
I. Применение
Тест Ристоцетин-кофактор предназначен для количественного определения активности, отражающей активность 
фактора Виллебранда в плазме'.
Набор Ристоцетин-кофактор измеряет способность плазмы пациента вызывать агглютинацию тромбоцитов, 
фиксированных формалином, в присутствии ристоцетина. Скорость ристоцетин-индуцируемой агглютинации тромбоцитов 
зависит от концентрации фактора Виллебранда.
II. Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro. Не принимать внутрь! 
При работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Некоторые компоненты набора содержат азид натрия в качестве консерванта. Для предотвращения азидного нароста в 
свинцовых или медных канализационных трубах смывайте сливаемые в раковину реактивы большим количеством воды и 
регулярно удаляйте примеси раствором гидроксида натрия.
III. Реактивы
Tris-буфер.
Содержит 35мл 0.05М Tris и 0.15М хлорида натрия с азидом натрия в качестве консерванта. Tris-буфер уже готов к 
использованию.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке.
8. Tris-буфер.  Вскрытый флакон должен храниться при температуре 2+6°С.
V. Необходимое, но не поставляемое оснащение
19. Кат.номер 5371/5356 лиофилизованные тромбоциты.
20. Кат.номер 5185 SARP.
21. Кат.номер 5372 ристоцетин.
22. Кат.номер 5373 патологический контроль
VI. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в 
пробирку с цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. Кровь собирается в вакутейнеры. 
Соотношение объемов крови и натрия цитрата должно быть 9:1. Натрия цитрат может быть 3.2% или 3.8%. 
Отцентрифугируйте при 2000-3000д в течение 15минут. Плазма должна храниться при температуре 2+6°С. Тесты должны 
проводиться в течение 2 часов с момента сбора или плазму можно хранить при -20°С в течение 2 недель или месяц при - 
70°С. Быстро разморозить при 37°С. Не хранить при 37°С более чем 5 минут.
VII. Пошаговое руководство
Подготовьте все реактивы в соответствии с прилагаемой инструкцией для каждого реактива. Выставите настройки 
агрегометра, следуя указаниям инструкции пользователя.
128


--- стр. 129 ---
13. Построение калибровочной кривой.
Постройте калибровочную кривую, используя соответствующие разведения (в Tris-буфере), чтобы, по крайней мере, 3 точки 
кривой находились в интервале 10->-60%  активности.
Перемешивайте без встряхивания.
14. Приготовление образцов пациента.
Приготовьте 1+1 и 1+3 разведения плазмы пациента или контрольной плазмы в Tris-буфере. Перемешайте, без  
встряхивания.
15. Приготовление холостой пробы для агрегации.
В агрегационную кювету с мешалкой поместить 0.25мл суспензии тромбоцитов и 0.25мл Tri-буфера. Это необходимо для 
установления 100%-го уровня активности.
16. Выполнение теста.
16. Используя холостую пробу для агрегации установите 100%-ю активность в каждом измерительном канале.
17. добавьте 400мкл суспензии тромбоцитов из образцов, приготовленных для тестирования в  
измерительные кюветы. Поместите во все кюветы мешалки.
18. Поместите кюветы агрегометр и добавьте 50мкл ристоцетина. Инкубируйте при 37°С точно 3 минуты.
19. добавьте 50мкл стандарта, разведения плазмы пациента или контрольной плазмы.
20. Наблюдайте процесс агрегации тромбоцитов в течение 5 минут.
VIII. Интерпретация результатов
Постройте график зависимости угла наклона агрегационной кривой (ось Y) от активности разведений SARP (ось X) в 
двойных логарифмических координатах. Аппроксимируйте прямой линией. Интерполируйте угол наклона кривой пациента по 
графику для нахождения процента активности. Скорректируйте полученные результаты с соответствующим разведением и 
установленной активностью SARP.
VII. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
Патологичный контроль ристоцетин кофактора, поставляемый в наборе, должен использоваться неразведанным и 
давать результаты, укладывающиеся в обозначенную область.
Компания Хелена предлагает следующие контроли для использования сданным продуктом.
13. Кат.номер 5301 SAC-1.
14. Кат.номер 5302 SAC-2.
XII. Ограничения
Активность кофактора ристоцетина не может точно определить нарушения, связанные с фактором Виллебранда в 
некоторых случаях, таких как беременность^, введении концентрата фактора Vlll^'*, волчаночной терапии®. В таком случае, 
фактор Виллебранда-ристоцетин-кофактор может быть скорректирован, даже если время кровотечении остается  
удлиненным. Кроме того, уровень фактора Виллебранда-ристоцетин-кофактора может быть нормальным при заболевании 
Виллебранда II типа, даже при удлиненном времени кровотечения®.
VIII. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, 
которые используют лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо 
установить свой собственный нормальный диапазон. Ожидаемые значения для активности ристоцетин-кофактора для 
взрослого населения лежат в диапазоне 58+166% (0.58+1.66 ед/мл). Каждой лаборатории настоятельно рекомендуется 
определить собственную область нормальных значений для конкретных приборов/реактивов при их рутинном использовании.
IX. Аналитические характеристики
Нижеприведенные аналитические характеристики измерений были определены компанией Helena BioSciences или 
ее представителями как стандартные. Каждая лаборатория должна определить свои собственные значения.
Ристоцетин кофактор производства компании Helena обеспечивает линейность калибровочной кривой в области 
10+60% без предварительного разведения. В пределах одной аналитической серии коэффициент вариации не должен 
составлять не более 10%.
Тест-система "Определение мутации Фактора II (ПЦР)" (Factor II (PCR).
ПРИМЕНЕНИЕ
Этот продукт предоставляет все реагенты за исключением Taq-полимеразы, необходимые
для обнаружения фактора IIG / 20210 мутации.
ПРИМЕЧАНИЕ: Taq полимеразыполучены от лицензированного производителя должны быть использованы при выполнении 
этого теста. Этот комплект основан на аплификации 350Ьр человеческого гена фактора II (протромбина).
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
Все реагенты для ин-витро диагностики. Не глотать и не пипетировать ртом ни ОДИН из компонентов.
СОСТАВ
Cat. No. FTM10 -10 определений
1. FII Master - 1 флакон с синей крышкой 250 мкл
2. Control (1C) -1 флакон с оранжевой крышкой 10 мкл
3. Hind III -1 флакон с желтой крышкой 10 мкл
4. Control DNA Wild Type -1 флакон с красной крышкой 10 мкл
5. Control DNA Heterozygous -1 флакон с зеленой крышкой 10 мкл
129


--- стр. 130 ---
6.
7.
10/1 ТЕ -1 флакон с прозрачной крышкой 500 мкл
100 Ьр DNA Ladder (готовый для использования) -1 флакон с черной крышкой 50 мкл
приготовленный 
с реагентом.
3. Другие компоненты набора
Каждый набор содержит руководство пользователя.
Хранение и сроки годности
Хранить при-20 ° С. Перед использованием реагенты разморозить при 15... 30 °С. Смешайте каждый 
раствор очень тщательно и по возможности держите на льду во время работы  
Заморозьте неиспользованные реагенты. ПРИМЕЧАНИЕ: Не размораживать в теплой водяной бане.
Пошаговая процедура 
А. ПЦР Метод
1. Добавьте 2р1 Taq polymerase (5 units/pl) к 250р1 FII MasterMix = Синяя крышка MasterMix (ВММ). Смешайте пипеткой. ВММ 
может быть использован в шаге 2 или м.б. сохранен при -20°С до 12 месяцев.
2. Добавьте 23р1 ВММ в одну или более реакционную пробирку. Добавьте 1мкл 1C  (пробирка 2). Добавьте 1р1 контроля ДНК 
(пробирка 4 и 5) или генома ДНК ( 50 -100 пд). Смешайте пипеткой.
3. Наложите с минеральным маслом если используете термоциклер без подогрева.
4. Поместите пробирку в термоциклер и запрограммируйте, как указано ниже:
Начало денатурации: 95°С через 3 мин, следуйте 30 циклам:
95°С через 30 сек 
63°С через 60 сек 
72°С через 60 сек 
Рестрикция
5. Добавьте 1р1 Hind III (пробирка 3). Смешайте пипеткой и инкубируйте при 37°С в течении 2-4 часов.
Электрофорез
6. Загрузите 10р1 приготовленного образца в 2.0% или 2.5% агарозный гель (содержащий этид бромид) и рядом разместите 
10р1100 Ьр DNA ladder (пробирка 7). Здесь нет необходимости добавлять загрузочный буфер.
ПРИМЕЧАНИЕ. В образце разделение 350 и 322 Ьр эти фрагменты необходимо запустить вместе с образцами и миграция 
должна быть до синего фронта как минимум 6 см.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
G/A переход в позиции 20210 гена фактора II можно определить по размеру, если изменилась структура Hind  
III подготовленного ПЦР фрагмента. Дикие типы ДНК не будут сокращать с Hind III и работать без изменений,  
как 350Ьр фрагмент, в то время как ДНК, содержащий мутацию сократит с Hind III в области 322 и 28Ьр фрагментов. 
Внутренний контроль ДНК всегда будет сокращен на Hind III в 550 и 150Ьр фрагментах.
Рис. 1 ниже, 2,2% агарозный гель, показывает результаты Фактора II (20210). Протокол определения мутации слева - 
направо.
Линия 1. Ю ОЬр ladder.
Линия 2. Wild type uncut. 
Линия 3. Wild type cut.
Линия 4. Heterozygote uncut. 
Линия 5. Heterozygote cut.
Тест-система "Определение мутации Фактора V (ПЦР)" (Factor V (Leiden).
ПРИМЕНЕНИЕ
Этот продукт предоставляет все реагенты за исключением Taq-полимеразы, необходимые
для обнаружения фактора V мутации Леден.
ПРИМЕЧАНИЕ: Taq полимеразыполучены от лицензированного производителя должны быть использованы при выполнении 
этого теста. Этот комплект основан на аплификации 147Ьр человеческого гена фактора V (Лейден мутация).
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
Все реагенты для ин-витро диагностики. Не глотать и не пипетировать ртом ни ОДИН из компонентов.
СОСТАВ
10 определений
8. FV Master Mix - 1 флакон с белой крышкой 250 мкл
130


--- стр. 135 ---
Тест система "Определение криоглобулинов" (Cryokit).
ПРИМЕНЕНИЕ
Криоглобулины - белки сыворотки, которые выпадают в осадок или производят гелеобразные соединения при температуре 
ниже 37 'С и вновь полностью растворяются при 37 °С. Криопреципитат обычно состоит из иммуноглобулинов, как правило 
это 1дМ  и IgG. Другие белки могут выпадать в осадок, в том числе фибронектин, некоторые факторы, а иногда и Р2- 
макроглобулин, липопротеиды и фибриноген.
Криоглобулины могут присутствовать в естественных условиях в различных клинических ситуациях. Криоглобулинемия и 
криоглобулиновый синдром может протекать у пациентов бессимптомно и могут быть не связаны с другими  
заболеваниями (эфирная криоглобулинемия) или могут быть связанны с другими заболеваниями, такими как хронические и 
острые инфекционные заболевания (то есть смешанная криоглобулинемия HCV-связь), соединительной ткани,  
гематологические или 
лимфопролиферативных заболевания.
Криоглобулины классифицируются как тип I, II и III по Brouet классификации, однако бывают более сложные методы - 
промежуточные типы, которые могут быть также обнаружены по данным Musset и Tissot.  
Набор компании Хелена Биосайенсее Еуроп CryoKit позволяет просто и быстро стандартизовать криопреципитат.
В наборе используется Промывочный раствор (А) и криоглобулиновый солюбилизирующий раствор Раствор (В). Раствор В 
содержит пептид-подобные соединения, которые способны разделить иммунноглобулины так, чтобы их было легко 
идентифицировать с помощью электрофореза и иммунофиксации.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
Все реагенты для ин-витро диагностики. Не глотать и не пипетировать ртом ни ОДИН из компонентов.
СОСТАВ
1. Раствор А. 2 X 100 мл щелочного промывочного раствора. Раствор поставляется готовым к использованию.
2. Раствор Б. 1 X 50 мл криоглобулиновый солюбилизирующий раствор, содержит BSA и пептид-подобные соединения. 
Раствор поставляется готовым к использованию.
3. Пробирки. 20 пробирок для отбора проб и определения объема криокрита. Пробирки в упаковке и готовы к использованию. 
Пробирки одноразового использования.
4. Крыщки для пробирок. 20 крышек для пробирок, только для использования с пробирками, чтобы 
избежать утечки и перекрестного загрязнения образцов. Крышки упакованы и готовы к использованию.
5. Пипетки Пастера. 100 шт. пипеток Пастера для удаления надосадочной жидкости из пробирок после центрифугирования. 
Одноразового использования, чтобы избежать перекрестного заражения образцов.
6. Другие компоненты набора. Каждый набор содержит инструкции по применению.
Хранение и сроки годности
Раствор А. Раствор должен храниться при температуре 15 ...30 ° С и стабилен до истечения срока годности, указанного на 
этикетке.
2. Раствор Б. Раствор должен храниться при температуре 15 ...30 ° С и стабилен до истечения срока годности, указанного на 
этикетке.
Компоненты необходимые для работы, но не вошедшие в набор. 
Холодильник способный поддерживать температуру 4 °С.
Центрифуга с охла>кдением, способная поддерживать температуру 4  
иммунофиксацию Каталожный номер 200300 или 300300.
°С, и вращение 2000 G. Наборы на
Сбор и подготовка образцов
Примерно требуется 20 мл свежесобранной крови. Держите пробирки с собранной кровью  
при температуре 37 'С до образования сгустка. Центрифугируйте при 2000 G в течение 15 минут. После  
центрифугирования сыворотку собирают и точно 5 мл помещают пипеткой в пробирку.
Охладите образцы при температуре 4 °С в течение 7 дней.
♦
Пошаговая процедура
1. Убедитесь, что раствор хранился при температуре 2 ... 6 ° С в течение по крайней мере, 30 минут перед использованием. 
2 а. Отцентрифугируйте образец при 2000 G в течение 15 минут при 4 ° С.
2 Ь. Использование градуировки на пробирке позволит рассчитать криокрит (% по объему криопреципитата на единицу 
объема сыворотки) следующим образом:
Объем криопреципитата (мл) /Первоначальный объем сыворотки (мл) х 100 = %  криокрита (CRT).
Например, если криопреципитат объемом 0.15 ml и начальный объем сыворотки 5 мл:
0,15/5,0x100 = 3% CRT
3. Очистка криоглобулинов:
a. Удалите супернатант из криопреципитата с помощью пипетки Пастера. Сделать гранул до 5 мл с раствором при 
температуре 4 ° С. Хорошо перемешать повторно приостанавливать осадка и центрифуги при 4 ° С, в течение 15 минут 
при 2000G.
b. Повторите шаг 3 один раз.
c. Удалите супернатант. Повторно растворите криопреципитат в растворе В, добавив 0,2 мл на каждый 1%
от ЭЛТ. Инкубация при температуре 37 ° С может быть использован для обеспечения криопреципитата полностью 
растворился.
4. иммунофиксация
a. Для иммунофиксации запустите очищенной криоглобулиновый образец аккуратно на соответствующем наборе 
200300/300300. Минимальный объем 210р1 будут необходим для запуска аккуратные образцов на иммунофиксации.
b. Дополнительное разведение образца может потребоваться, если происходит процесс прозоны.
Предложите схему разведения виммунофиксации руководствуясь инструкцией по эксплуатации.
5. Дополнительное тестирование
а. Определение Общего белка для повторного растворенного криопреципитата может быть полезным в определении 
правильного разведения для иммунофиксации (например, Биуретовый метод). Helena Biosciences наборы для определения 
фракций белка 200100 / 200200 / 300100 / 300200, также могут оказаться полезными при определении концентрации
135


--- стр. 136 ---
отдельных моноклональных антител в образце, после полного определения белка. Это поможет в выборе используемых 
для разведения иммунофиксаций.
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
3 основныхипа криоглобулинов были определены:
Тип1:Состоитодного моноклонального иммуноглобулина.
ТипМ : моноклональный компонент (чаще 1дМ) с дополнительной активностью антител, поликлональный IgG.
Тип III: Смешанный тип -  это поликлональные иммуноглобулины (обычно IgG и 1дМ), а иногда и без молекул  
иммуноглобулина (например, липопротеины).
Типы II и III являются наиболее распространенными. Промежуточные типы известны, как Тип II-III, также были описаны, 
используя методы, отличные от иммунофиксации.
Кожные и сосудистые симптомы наиболее распространены у пациентов при Типе I  и II.  
Хроническая сосудистая пурпура и мягкий синдром Raynauds часто видели в Типе II и III, как и нарушения почек 
и неврологические проблемы. Иммунопролиферативные заболевания, связанные с типом 1и11, в то время,  
как аутоиммунные расстройства при типе пациентов III.
i
Контроль качества для тест-системы "Гомоцистеин" (Homocysteine Controls).
Применение
Контроли качества с нормальным и патологичным значениями общего L-гомоцистеина.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Реактивы, содержащиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики In vitro.
НЕ ГЛОТАТЬ. При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одехщу. В 
реагентах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реагенты как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
СОСТАВ
1. Каждый пузырек содержит 1.0ml лиофилизированного гомоцистеина.
2. Подготовка: Разведите каждый пузырек соответствующего контроля 1.0ml дистиллированной или  
деионизированной воды. Плавно перемешайте и дайте отстоятся при комнатной температуре в течение 30 минут. 
До использования (заранее) необходимо перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
ХРАНЕНИЕ И СРОК ГОДНОСТИ
Невскрытые пузырьки устойчивы до конца срока годности, когда хранятся при условиях, обозначенных на ярлыке набора или 
пузырьке.
Разведенные контроли устойчивы в течение 7 дней при 15-25 гр.Ц 2 месяца, при хранении в холодильнике (2... 6°С), 
Держите их закрытыми.
ПРОЦЕДУРА ВЫПОЛНЕНИЯ АНАЛИЗА
Каждый контроль нужно анализировать также, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте.
РЕФЕРЕНСНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов используемых в 
них. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Обратитесь к инструкции на тест-систему «гомоцистеин».
Тест-система "Гомоцистеин" (Homocysteine).
Применение.
Этот набор предназначен для количественного определения L-Гомоцистеина. Анализ проводится в цитратной плазме на 
автоматическом анализаторе.
Реагенты.
Буфер: 2  флакона х 9 мл PBS (фосфатный буфер с консервантами)
Редуктант:  2 флакона х 2 мл аденозина и Трис
(2-карбоксиэтил) фосфин (ТСЕР) раствор в Бис-Трис буфере с консервантами.
Энзим: 2  флакона х 2 мл рекомбинантный S-аденозил-Л-гомоцистеин-гидролаза (SAHH) зраствор в фосфатном буфере с 
стабилизаторами и консервантами.
Коньюгат. 2  флакона х 2.5 мл раствора коньюгата в PBS 
(раствор фосфатного буфера) с стабилизаторами и консервантами.
LR a-SAH латекс реагент : 2  флакона х 2 мл лиофилизированной
суспензии полистереновых латексных частиц покрытых антителами к 8-аденозил-Е-гомоцистеин (SAH) в буфере с бычьим 
сывороточным альбумином и 0.02% Bronidox(tm) в качестве консерванта.
Калибратор : 2  флакона х 1 мл 8-аденозил-Е-гомоцистеин(8АН) в РВ8 (фосфатный буфер) с консервантами. 
Предупреждения
Реагент предназначен только для ин-витро диагностики. Вы должны следовать всем нормам предосторожности принятым в 
лаборатории.
Содержит натрия азид .который может реагировать с медью и цинком с образованием взрывчатого вещества. Поэтому 
избегайте контакта с металлической поверхностью ( например не выливайте в канализацию).
Информация по рискам и безопасности отражена на этикетках и во вложенном в набор листке.
136


--- стр. 137 ---
i
Приготовление.
a-SAH латекс реагент:  добавьте 2 мл дистиллированной воды. Перемешайте. Убедитесь в полном растворении.  
Выдержите при 15-25‘’С 30 минут и перемешайте перед использованием. Не трясите.
Другие реагенты и калибратор:  Перемешайте перед использованием.Готовы к использованию.
Хранение и стабильность.
Весь набор должен хранится в холодильнике при температуре 2-6гр. Все неоткрытые флаконы годны до окончания срока 
годности.
a-SAH латекс реагент -  стабильность после разведения: 2 месяца при 2-8°С в оригинальной упаковке, 8 часов при 15°С. Не 
замораживать.
Другие реагенты -  Вскрытые стабильны: 2 месяца при 2-8°Св оригинальной таре, 8 
Часов при 15°С. Не замораживать.
Пробоподготовка.
Венозная кровь собирается в пробирку с 3.2% натрия цитратом в соотношении 9 к 1.
9 объемов крови и 1 объем антикоагулянта. Этот объем является критическим. Убедитесь , что при заборе крови -в пробирке 
не образовались пустоты. Избегайте травм и застоя крови при заборе. Нельзя забирать кровь через гепариновый замок. 
Присутствие микроттромбов в пробе может искажать результаты.
Центрифугировать при 1500д 15 минут при комнатной температуре. Если проба сразу не будет анализироваться- то отделите 
плазму от осадка и поместите в пластиковую пробирку. Плазма может хранится 4 часа при температуре 2-6гр или может быть 
заморожена при -20гр(годна 1 месяц). Замороженная плазма должна быть быстро разморожена при 37гр .аккуратно 
перемешана и немедленно проанализирована.
Контроль качества
Кахедая лаборатория должна устанавливать диапазон контролей и ставить контроли ежедневно. Перекалибровка должна 
производится при непрохождении контролей. Затем заново должны быть протестированы контроли. Если они опять не 
пройдут -то обратитесь к представителям компании Хелена.
Результаты.
Все пробы изначально анализируются неразведанными. Результаты выдаются в микромоль/л.
Аналитическая чувствительность напрямую связана с прибором на котором проводят анализ. Для дополнительной 
информации обратитесь к протоколу от компании Хелена. Максимальное значение неразведанной плазмы не должно 
превышать максимальное значение на калибровочной кривой. Если результаты анализа превысили максимальное значение 
- переделайте анализ с разведением
Ожидаемые значения
Каждая лаборатория должна сама устанавливать свои референсные значения 
Ориентировочные данные: 4.0-11.2 микромоль/л.
Тест-система "Фактор XIII антиген" (Factor XIII Antigen).
Применение.
Этот набор предназначен для количественного определения фактор XIII антигена. Анализ проводится в цитратной плазме на 
автоматическом анализаторе.
Реагенты.
Латексный реагент : 2  флакона х 2.5 мл суспензия полистирен латексных частиц покрытых антителами кролика к А- 
субчастице фактора XIII, содержит буферы, стабилизаторы и консерванты.
Буфер: 2  флакона х 5 мл TRIS буфер содержит бычий сывороточный альбумин, стабилизаторы и консерванты.
Diluent: 2  флакона х 6 мл TRIS буфер содержит бычий сывороточный альбумин, стабилизаторы и консерванты.
Предупреждения
Реагент предназначен только для ин-витро диагностики. Вы должны следовать всем нормам предосторожности принятым в 
лаборатории.
Содержит натрия азид .который может реагировать с медью и цинком с образованием взрывчатого вещества. Поэтому 
избегайте контакта с металлической поверхностью ( например не выливайте в канализацию).
Информация по рискам и безопасности отражена на этикетках и во вложенном в набор листке.
Приготовление.
Перемешайте перед использованием. Готовы к использованию.
Хранение и стабильность.
Весь набор должен хранится в холодильнике при температуре 2-6гр. Все неоткрытые флаконы годны до окончания срока 
годности.
Вскрытые стабильны: 1 месяц при 2-8°Св оригинальной таре,
4 дня при 15°С. Не замораживать.
Пробоподготовка.
Венозная кровь собирается в пробирку с 3.2% натрия цитратом в соотношении 9 к 1.
9 объемов крови и 1 объем антикоагулянта. Этот объем является критическим. Убедитесь , что при заборе крови -в пробирке 
не образовались пустоты. Избегайте травм и застоя крови при заборе. Нельзя забирать кровь через гепариновый замок. 
Присутствие микроттромбов в пробе может искажать результаты.
Центрифугировать при 1500д 15 минут при комнатной температуре. Если проба сразу не будет анализироваться- то отделите 
плазму от осадка и поместите в пластиковую пробирку. Плазма может хранится 4 часа при температуре 2-6гр или может быть
137


--- стр. 141 ---
и
за
#
54. Все приготовленные для использования растворы и референсные плазмы должны быть использованы.
55. Одна плашка в каждом тесте должна содержать один образец воды. Нельзя добавлять в неё ни образец, ни реагент. 
Поместите 200 pL воды для калибровки прибора сразу перед исследованием в спектрофотометре. Считыватель плашек 
должен быть установлен на ноль или бланкирован после считывания.
56. Для проведения исследования необходимо использовать только хорошо промытую, чистую технику. Предпочтительно 
использовать направленный поток моющего раствора из сминаемой пластиковой бутыли с широким наконечником на дне 
микропипетки. Моющий раствор не должен перемешиваться с водой во время процедуры. Автоматический промыватель 
планшет так же может быть использован.
57. ВАЖНО: неадекватное удаление резидуального количества фосфатного буфера/Tween 20 может вызвать  
нехарактерный цвет субстрата.
58. Предпочтительно использование многоканального (8 канального) дозатора.
59. Тщательно проверяйте каждый шаг приготовления процедуры. Каждый образец, контроль, референт - разбавитель 
должен быть добавлен не познее через 5 минут. Объем образца не должен превышать количество, которое может быть 
добавлено за 5 минут.
60. Для всех инкубаторов, страт инкубирования начинается по завершении добавления реагентов или образцов.
61. Добавление всех образцов и реагентов должно осуществляться в одинаковых количествах и одинаковой  
последовательности.
62. Температура инкубирования выше или ниже комнатной температуры (18-26°) может привести к неточным результатам 
исследования.
63. Избегайте контаминации реагентами при открывании и закрывании первичных 
флаконов.
64. Не используйте компоненты набора после срока годности.
65. Содержащиеся в наборах микропланшеты, конъгаты, субстраты не должны использоваться с другими наборами. 
Приготовление реагентов
9. Моющий раствор - фосфатного буфераЯ\л/ееп 20 раствор: Отмерьте 30 мл моющего концентрата (ЗЗХ фосфатного 
буфера/Tween 20) и разведите 1 литром приготовленной и отградуированной воды. PH приготовленного раствора должен 
быть 7,35 ±0,1. Данный раствор рассчитан примерно на 20 проб, храниться при 2-8°С. Его необходимо утилизировать при 
признаках контаминации.
10. Восстановление референсной плазмы осуществляется путем добавления 0,5 мл приготовленной воды. Тщательно 
перемешайте. Дайте отстояться в течение 10 минут перед использованием до полной гомогенизации. Оставьте максимум на 
8 часов, затем храните при температуре 2-6°С. Соответствующая контрольная плазма приготавливается и храниться 
соответственно прилагаемой инструкции.
Процедура проведения исследования
58. Достаньте микролуночную планшету, которая не использовалась, из рамки в приготовленное место для хранения.
59. Приготовьте каждую референсную плазму в двух экземплярах. Дублирование, так же рекомендовано для контролей. 
Одна ячейка используется как бланк реагента, в другие добавляется образец разбавителя без сыворотки последовательно в 
7 шагов в одной секции. Эта ячейка используется в качестве контроля, или образец образца последующего шага.  
Приготовленная вода помещается в каждую лунку, так чтобы заполнить до 200 pL реагентной воды, до завершения 
приготовления сразу перед началом считывания. Так же должна использоваться одна лунка, как контроль образца воды.
60. Подготовьте плазму для исследования. Подготовка осуществляется путем добавления во все образцы, контроли, 
референсы полиэтиленгликоля (PEG). Добавьте 15 р1 полиэтиленгликоля к 85 р1 плазмы. Если используется супернатант, то 
для приготовления референсной кривой (95 р1), добавьте 45 р1 PEG к 255 р1 референсной плазмы. Взболтайте и положите в 
лед на 30 минут. Центрифугируйте 10 минут при 3000 об/мин. Используйте супернатант для приготовления кривой и 
образцов разведения (см. пункт 5,6).
61. Чтобы развести все плазмы {V.2 разведения разбавителем образцов) следует:
Референс-плазма:  добавить lOOpL референсной плазмы к lOOpL разбавителя образца.
Контрольный образец и образец пациента:  добавить 20pL референсной плазмы к 20pL разбавителя образца.
Хорошо перемешать. Это предразведение используется в 4-5 шагах исследования.
62. Используя 1:2 разведенную плазму для 3 шага , приготовьте 6 рабочих позиций как описано ниже:
Объем референс-плазмы Объем дилюента  
образца
•Референсный
уровень
30 ц1 + 500 M l = 150
20 ц1 + 500 M l = 100
15 ц1 + 500 M l = 75
10 ц1 + 500 M l = 50
10 ц1 + 1000 M l = 25
10 M l + 2000 M l = 12,5
Референсные уровни объема, используемые только для построения референсной кривой
63. Для приготовление рабочего раствора для контроля и образцов надо:
Для ингибитора протеина С1: добавлением 20 р1 предварительно разведенной плазмы (1:2 разведенную плазму для 4 шага) 
до 500 р1 Образца дилюента .
Для ингибитора протеина С1: добавлением 20 р1 PEG-разведенную плазму (для 4 шага) до 500 р1 Образца дилюента . 
(Внимание: это разведение соответствует 100% референсной плазмы)
64. Тщательно перемешать и добавить 100 р1 рабочего раствора (референсная плазма, контроль и образец пациента) в 
соответствующую лунку.
65. Добавить 100 р1 разбавителя образца реагент-бланк лунку. Полностью удалите из нее воду.
66. Инкубировать в течении 40 минут в комнатной температуре, затем тщательно переверните лунки и удалите жидкость. 
Не позволяйте контаминировать жидкостью соседние ячейки.
67. Промыть 4 раза рабочим моющим раствором (фосфатного буфера/Tween 20). Каждая лунка должна быть заполнена 
раствором при промывке. Промытые лунки необходимо тщательно высушить. Перевернутые лунки постучите, чтобы лучше 
освободить от жидкости. Рамка должна быть выдавлена в центр верхушки и дно сохраняет модуль микролунок в процессе
141


--- стр. 142 ---
г
промывки. Используйте абсорбентную бумагу, для остаточного удаления воды. Не позволяйте лункам сообщаться между 
собой.
68. Добавить 100 р1 коньюгата (синий) в каждую лунку (с тщательно удаленной водой).
69. Инкубировать в течение 10 минут в комнатной температуре после завершения инкубации тщательно перевернуть лунки 
и вытрихните раствор.
70. Промыть 4 раза рабочим раствором , как в пункте 9. Промывающий раствор не должен смешиваться в процессе 
процедуры. Используя пощелкивание, удалить остатки воды, затем использовать промокательную бумагу.
71. Добавить 100 р1 субстрата в каждую лунку (проверить хорошо ли удалена вода) и инкубировать 10 минут при комнатной 
температуре. Добавить субстрата в каждую исследуемую лунку в той же пропорции. Синий цвет должен появиться в 
позитивных образцах.
72. Добавить 100 р1 останавливающего раствора (0,36 М  серной кислоты) в каждую лунку (проверить, чтобы не было воды) 
для остановки реакции.. Добавляйте в тех же пропорциях, что и субстрат раствор. Синий раствор станет желтым, цветной - 
обесцветится. Не добавляйте останавливающий раствор в лунки с водой. Взамен, добавить 200 р1 воды для разведения 
реагента в ячейки с водой. Значение или ноль напротив лунки с водой. Считайте оптическую плотность (ОП) каждой ячейки 
при 450 нм, затем при 650 нм (если возможно). Для получения лучшего результата объемы оптических областей надо 
измерять спустя 30 минут после добавления останавливающего раствора.
Результаты
1. Сосчитать среднюю оптическую плотность дубликатов растворов референсных плазм, контролей выбранных для 
использования, образцов пациентов.
2. Отметьте среднюю ОП, наблюдаемую в каждом разведении референсной плазмы (ось X) напротив соответствующих 
значений референсных уровней (ось У). Рекомендуется использовать график с логарисрмическими значениями на обеих 
осях, диаграммы и линейные графики.
3. Используя значения ОП, определите контроль и сравнительные значения пациентов по графической кривой, или 
используя линейную регрессию.
4. Для подсчета уровня ингибитора протеина С1 в %  от нормы необходимо умножить контроль и относительное значение 
пациента, наблюдаемое на используемой кривой на заданное значение для референс плазмы (см. этикетку).
5. Для проверки того, что параметры находятся в пределах контроля качества (см. КК).
Контроль качества
17. Основная оптическая плотность (ОП) должна быть меньше 0.1, если спектрофотометр настроен правильно по образцу 
воды. Если ОП больше 0.1 , то возможно образец загрязнен примесью тромбоцитов.
18. Индивидуальные расхождения ОП в дубликатах может отклоняться от средней в пределах 20% в образцах с  
поглощением более 0.200.
19. Уровень ингибитора протеина С1 в контролях должен быть в пределах, указанный производителем. Хотя некоторое 
отклонение возможно.
20. Каждая лаборатория должна периодически проверять определяемые значения по этой инструкции.
ИССЛЕДУЕМЫЕ УРОВНИ
Нормальный уровень: ингибитора протеина С1 измеряется в %  от нормальной пулированной плазмы. Нормальный уровень 
составляет 60-150%. Этот уровень признан нормальным в научной литературе и во всех наблюдаемых случаях  
исследований. Образцы с более высоким уровнем, чем калибровочная кривая, должны быть разбавлены до нормальных 
значений.
ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Уровни детекции:
Описанные уровни детекции антигена находятся в промежутке между 5-150%. Хотя, определяемые уровни завися от уровня 
антигена в референсной плазме. Для большей правильности, образцы с уровнем антигена находящимся за пределами 
уровней ОП необходимо перепроверить, предварительно разведя.
Точность:
Межисследовательская точность:
Для определения точности между плашками, три образца плазмы с известными концентрациями ингибитора протеина С 
(высоким, средним и низким) тестируются в 16 лунках двумя операторами на 6 плашках по 3 в каждой. Данные,  
представленные в следующей таблице, показывают средний коэффициент вариации - 10,1% для общего, коэффициент 
вариации - 6,6% для свободного между лотами. В примере показаны уровни ингибитора протеина С, определенные у 99 
пациентов в 3 лотах для выяснения точности показанной в данной инструкции. Показано, что КВ между дубликатами 
составляет 7,8.
Линейность:
Двойное разведение плазмы, референсной по ингибитору протеина С, тестируемой в трех лотах демонстрируют кривую со 
средним коэффициентом 0,985.
Точность:
Точность определяется с помощью тестирования смешенной референсной плазмы и заранее извесными объемами  
ингибитора протеина С и расчетом теоритических величин. Среднее значения процента восстановления в 3 лотах составило 
101% со средним коэффициентом вариации 7,1%.
142


--- стр. 143 ---
ДУ
Буфер имидазоловый (Imidazole Buffer).
Применение этого набора.
Это универсальный буфер .который используют при коагулогических исследованиях человеческой плазмы -например : 
фибриноген по Клаусу и факторы свертывания.
Этот буфер используют для приготовления стандартных разведений при калибровке фибриногена и факторов. Также его 
используют при рутинных измерениях этих показателей.
Этот буфер пригоден при работе вручную, на полуавтоматическом анализаторе и на автомате.
Предосторожности
Регент представленный в этом наборе- только для ин-витро диагностики-НЕ ГЛОТАТЬ. Надевайте перчатки при работе с 
компонентами этого набора. Внимательно смотрите этикетки на которых отмечены подстерегающие опасности и способы 
утилизации.
1. Имидазоловый буфер
Кахедый флакончик содержит водный раствор имидазола, натрия хлорида (конц 125.4 тМ) и 0.05% натрия азида .рН=7.2-7.6
2. Также в набор входит инструкция по применению.
Хранение и стабильность
Неоткрытый флакон годен до окончания срока годности указанного на упаковке . При загрязнении буфера Вы должны 
заменить его.
Контроль качества на ВА низкий (Lupus Control L).
4
Применение
Эта плазма приготовлена из множества плазм полученных от людей болеющих волчанкой.
Такая плазма должна опознаваться как плазма больного волчанкой , при работе с следующими реактивами: ВА-скрининг 
реагент (Drwt-screen каталожный номер 5484), ВА-подтверждение peareHT.(Drwt-confimi каталожный номер 5485), и тесты 
типа АЧТВ-такие например как APTT-Si (каталожные номера 5491 и 5492).
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro.
НЕ ГЛОТАТЬ. При работе с любым из компонентов набора реагентов применяйте соответствующую защитную одежду. В 
реагентах не содержится антигенов к гепатиту В (HBsAg), Anti-HCV и HCV антителам. Рассматривайте реагенты как источник 
потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, применяйте все меры предосторожности.
СОСТАВ
1. Lupus anticoagulant(1*1ml)
Каждый флакончик содержит 1мл лиофилизированной .цитратной плазмы.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ: Разведите любой флакончик 1мл дистиллированной воды. Слегка перемешайте и оставьте на 15 минут. 
Хорошо перемешайте перед использование (но не трясите).
2. Другие компоненты набора.
Также в набор вложена инструкция по приготовлению плазмы, и инструкция со значениями для плазмы.
Хранение и сроки годности.
Неоткрытый флакон годен до окончания срока годности, указанном на его этикетке( при правильном хранении).  
Разведенную(приготовленную) плазму нужно поставить на лед-при 2-6гр Ц она стабильна 4 часа.
Пошаговая процедура.
Каждый контроль должен анализироваться как обычная плазма от пациента- то есть в соответствии с правилами работы с 
тест-наборами и прибором.
Референсные значения.
Референсные значения могут различаться между лабораториями., из-за различной техники и систем. Поэтому каждая 
лаборатория должна сама устанавливать референсные значения.
Данная плазма должна показать абнормальные(удлиненное время свертывания) результаты на скрининговом реагенте 
(5484), и нормальные результаты (нормальное время свертывания) на подтверждающем реагенте(5485). Точные цифры 
указаны на вложенном в набор листке.
Аналитические характеристики.
Приведенные характеристики были получены компанией Хелена или ее представителями. Эти характеристики приведены как 
образец. Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические характеристики.
Определяли ВА-позитив контроль следующими реактивами-Протромбиновое время-LI, АЧТВ-Si, Скрининг-реактив Хелены и 
Подтверждающий Реактив Хелены. Для расчета коэффициента вариации брали разные флакончики одной и той-же серии.
Drwt
PT-Li APTT-Si Screen Confimi Ratio
Время
свертывания(сек)
12.3 34.20 47.3 33.8 1.40
CV 0.72 1.00 4.96 2.52 4.86
I
143


--- стр. 144 ---
Контроль качества на ВА высокий (Lupus Control Н).
Применение
Эта плазма приготовлена из пула плазм, полученных от людей, болеющих волчанкой.
Такая плазма должна приниматься как плазма больного волчанкой, при работе со следующими реактивами:
ВА-скрининг реагент (Drwf-screen кат ном 5484)
ВА-подтверждение реагент (Drwt-confirm кат ном 5485) 
и тесты типа АЧТВ (APTT-Si кат ном 5491 и 5492).
Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать sHyrpbi 
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
Реактивы
f
3. Lupus anticoagulant(1*1 мл).
Каждый флакон содержит 1мл лиофилизированной цитратной плазмы.
Приготовление.  Развести любой флакон 1мл дистиллированной воды. Слегка перемешать и оставить на 15 минут. Хорошо 
перемешать перед использованием. Не трясти!
4. Другие компоненты набора.
В каждый набор вложена инструкция по приготовлению плазмы, и листок со значениями.
Хранение и стабильность
Запечатанный флакон годен до окончания срока годности, указанного на паковке (при правильном хранении). Разведенную 
плазму нужно поместить на лед. При 2+6°С она стабильна 4 часа.
Пошаговое руководство
Каждый контроль должен анализироваться как обычная плазма пациента (в соответствии с правилами работы с 
тест-наборами и прибором).
Референсные значения
Референсные значения могут различаться между лабораториями из-за различной техники и систем. Поэтому 
каждая лаборатория должна сама устанавливать референсные значения.
Данная плазма должна показать абнормальные (удлиненное время свертывания) результаты на скрининговом 
реагенте (кат ном 5484), и нормальные результаты (нормальное время свертывания) на подтверждающем реагенте (кат ном 
5485). Точные цифры указаны во вложенном в набор листке.
Аналитические характеристики
Приведенные значения были получены компанией Helena или ее представителями, следует их рассматривать в качестве 
примера. Каждая лаборатория должна установить свои собственные аналитические характеристики.
Определяли ВА-позитив контроль следующими реактивами: Протромбиновое время-LI, АЧТВ-Si, Скрининг-реактив и 
Подтверждающий-реактив компании Helena. Для расчета коэффициента вариации брали разные флаконы одной серии.
Drwt
PT-Li APTT-Si Screen Confirm Ratio
Время свертывания (сек) 12.3 34.20 47.3 33.8 1.40
CV 0.72 1.00 4.96 2.52 4.86
Контроль качества на гепарин низкий (Heparin Control L).
I. Применение
Контроля приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Контроль качества на гепарин разработан для контроля в 
тестах по определению гепарина хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
Каждый пузырек содержит 1.0мл лиофилизированную человеческую плазму (с добавлением буфера). Контроля получены из 
пула человеческой плазмы с добавлением натриевой соли гепарина для моделирования плазмы, полученной от пациентов, 
получающих гепариновую терапию.
Приготовление.  Развести каждый пузырек соответствующего контроля в 1.0 мл дистиллированной воды. Плавно  
перемешать и дать отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием необходимо 
перемешать.
Другие компоненты набора.
144
Г
41
«


--- стр. 145 ---
4
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. Разведенные контроли устойчивы в течение 8 часов, при хранении в холодильнике (2+6°С). Держать их плотно 
закрытыми.
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль нужно анализировать так же, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте.
VI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, используемых в 
лабораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения.
Контроль качества на гепарин высокий (Heparin Control Н).
4
4
I. Применение
Контроли приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Контроль качества на гепарин разработан для контроля в 
тестах по определению гепарина хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
Каждый пузырек содержит 1.0мл лиофилизированную человеческую плазму (с добавлением буфера). Контроли получены из 
пула человеческой плазмы с добавлением натриевой соли гепарина для моделирования плазмы, полученной от пациентов, 
получающих гепариновую терапию.
Приготовление.  Развести каждый пузырек соответствующего контроля в 1.0 мл дистиллированной воды. Плавно  
перемешать и дать отстояться при комнатной температуре в течение 10 минут. Перед использованием необходимо 
перемешать.
Другие компоненты набора.
Каждый комплект содержит руководство пользователя.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанные флаконы устойчивы до указанной даты окончания срока действия, при условиях хранения, указанных на 
упаковке. Разведенные контроли устойчивы в течение 8 часов, при хранении в холодильнике (2+6“С). Держать их плотно 
закрытыми.
V. Пошаговое руководство
Каждый контроль нужно анализировать так же, как неизвестный образец в соответствии с инструкциями, приведенными в 
каждом тесте.
VI. Референсные значения
Референсные значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, используемых в 
лабораториях. По этой причине каждая лаборатория должна установить свои собственные значения.
Контроль качества на гепарин (Heparin Control).
I. Применение
Контроли приготовлены из нормальной человеческой плазмы. Контроль качества на гепарин разработан для контроля в 
тестах по определению гепарина хромогенным методом.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для In-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
III. Реактивы
Лиофилизированная плазма.
145


--- стр. 149 ---
/Я
i
«
4
t
4
Reagent RT* (20...25X) + 2 ...8 X -20“C
TGA substrate (SUB) 1 week 1 month 6 months
TGA buffer (BUF) 8 hours 1 week 1 month
TGA thrombin calibrator (CAL) 8 hours 1 week 6 months
TGA reaqent В (RB) 8 hours 1 week 6 months
TGA reagent C (RC) Low and 
High 8 hours 1 week 6 months
TGA reagent D (RD) 8 hours 1 week 6 months
TGA controi 1 (Cl) 4 hours 8 hours 1  month
TGA control 2 (C2) 4 hours 8 hours 1 month
TGA control 3 (C3) 4 hours 8 hours t month
Реагенты хранятся при 2-8°С. Не замораживать.
Не использовать реагенты после истечения срока годности, указанного на упаковке 
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ
Для анализа ТГА необходима цитратная плазма (богатая тромбоцитами,
бедная по тромбоцитам или не содержащая тромбоцитов). Все виды перечисленных плазм могут быть использованы, в 
зависимости от конкретных задач.
Для разделения плазмы, смешать 9 частей венозной крови и 1 часть натрия
цитрата (0,11 моль/л) и центрифугировать в течение 15 минут (в соответствии со стандартом DIN 58905).
Для специальных требований, подготовка других плазм может быть необходима:
-Для богатой тромбоцитами плазмы (PRP) центрифугирование в течение 5 минут при 1000 G;
- Для бедной тромбоцитами плазме (РРР) центрифугируйте в течение 10 минут при 1500 G;
- Для получения плазмы без тромбоцитов и микрочастиц, центрифугируйте 30 
минут при 15000 G.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ
Лиофилизированные реагенты должны быть растворены в объеме дистиллированной воды 
указанной на флаконах. Все приготовленные реагенты должны достичь комнатной 
температуры перед использованием.
Ровно через 20 минут после разведения и тщательного перемешивания (используйте Vortex), реагенты готовы к 
использованию.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Температура во время измерений: 37 ° С. Флуориметр: длин волн: ~ 360 нм / ~ 460 нм [возбуждение / эмиссия] 
Внимание! Предварительно считайте значение бланка.
1.) Калибровочная кривая тромбина: 10 мин с интервалом в 30 сек для измерения 
Калибровочная кривая тромбина должна быть сделана отдельно от образца измерения.
2) Образцы: в зависимости от материала образца 60 мин (Для терапии ингибиторами фактора VIII, 90 - 120 мин) с 
интервалом измерений в 1 мин.
Образцы и растворенные реагенты должны достичь комнатной температуры 
перед использованием.
1.) Калибровочная кривая тромбина
Калибровочная кривая тромбина должна быть сделана отдельно от образца 
измерения. Концентрация калибратора (CAL) тромбина указана на этикетке на флаконе.
Калибратор тромбина разводят буфером TGA, как указано в таблице ниже:
1®* dilution (1:2): 
(STD 1)
+ 200 pL Thrombin Calibrator (CAL) 
200 pL TGA buffer (BUF)
2"^ dilution (1:4): 
(STD 2)
+ 100 pL 1®* dilution
100 pL TGA buffer (BUF)
3"* dilution (1:20): 
(STD 3)
+ 20 pL Thrombin Calibrator (CAL) 
380 pL TGA buffer (BUF)
4“’ dilution (1:200): 
(STD 4)
+ 20 pL З"* dilution
180 pL TGA buffer (BUF)
Все разведения калибратора, должны быть определены дважды. 
Добавить реагенты в следующей последовательности:
40 |JL 
50 |Ji-
callbrator dilution (STD 1 - STD 4) 
TGA substrate (SUB)
Провести ИЗМЕРЕНИЕ в течение 10 мин с интервалом в 30 сек при 37 ° С
Считывание образцов должно быть сразу после пипетирования субстрата. 
ТОЛЬКО ОДНА калибровочная кривая должна быть сделана для каждого лота!
149


--- стр. 150 ---
2.) Пример измерения
Реагенты должны быть добавлены в следующей последовательности:
Measurement with:
Reagent TGA RB TGARC
Low
TGA RC 
High TGA RD
sampte 40 ML 40 pL 40 pL 40 pL
TGA RB 10 pL - - -
TGA RC Low - 10 pL - -
TGA RC High - - 10 pL -
TGA RD - - - 10 pL
TGA SUB 50 pL 50 pL 50 pL 50 pL
f
Провести ИЗМЕРЕНИЕ в течение 60 мин (для терапии ингибиторами фактора VIII 90 -120 мин) с интервалом в 1 минуту при 
температуре 37 ° С.
Считывание образцов должно быть сразу после пипетирования субстрата.
Внимание! Мы рекомендуем проводить измерение в дубле для каждого образца.
АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ
Оценка производится автоматически с использованием программного обеспечения.
Программное обеспечение включает калибровочную кривую и пример оценки.
Калибровочная кривая тромбина используется при условии оценки программного обеспечения.
СТАНДАРТИЗАЦИЯ
Калибратор тромбина калибруется против референсного калибратора тромбина, приготовленного по рекомендациям ВОЗ. 
АНАЛИЗ ОБРАЗЦОВ
При использовании программного обеспечения происходит определение тромбина в образцах в течении времени.  
Результаты приведены в нМ генерирации тромбина в образце для ка>кдой точки времени, в течение целого  
процесса коагуляций. После начала коагуляции в образцы добавляют СаС12 и фосфолипиды тканевого фактора смеси. 
Картина напоминает рисунок, предоставленный
ниже:
Следующие параметры могут быть использованы в качестве считывания на программном обеспечении:
1. Лаг-фаза от момента времения до добавления TGA реагента в том числе 
СаС12 добавляется до первой волны образования тромбина
2. Наклон: отображает нарастание скорости тромбина в минуту.
Рассчитывается программным обеспечением, как индекс скорости:
. .. . . , peak  thrombin
V .lo cily lndex= peaHime-lag time
3. Пик тромбина: Максимальная концентрация образовавшегося тромбина.
4. AUC: площадь под кривой
Наклон и пик тромбина могут зависеть от количества фосфолипидов 
присутствующих в образце. Так как при условии, количество фосфолипидов в
реагентах низкое. Эта величина определяется в РРР. Количество и состав микро-частиц, присутствующих в образце. В 
большинстве случаев существует хорошая корреляция между налоном и пиком тромбина.
Оба параметра зависят также от усиления начальной генерации тромбина в антикоагулянтной терапии или у пациентов 
с нарушениями свертываемости крови.
»
150


--- стр. 151 ---
1 Ц г
НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
Ожидаемые значения для РРР и PRP плазмы являются:
Sample Reagent Peak Thrombin  
nM
SD
(Standard dteviation)
РРР
(Platelet Poor  
Plasma)
RB 311.7 149.2
RC Low 289.5 151.9
RC High 597.0 225.7
PRP
(Platelet Rich
Plasma)
RB 593.3 108.9
RC Low 602.2 106.9
RC High 733.4 102.8
Ф Ш
Тест-система "Для установки МИЧ" (Direct ISI).
Применение
Этот набор разработан компанией Helena для точного расчета Международного Индекса Чувствительности (МИЧ) (для 
стандартизации теста Протромбиновое время) для автоматических коагулометров. При этом тромбопластин должен быть 
либо человеческим, либо кроличьим и его изначальный МИЧ (указанный в инструкции) должен быть меньше 2.
Поскольку МИЧ зависит не только от природы тромбопластина, но и в определенной мере от прибора, то определение его 
«локального» значения заметно повысит точность результатов. Также при работе с этим набором Вам не придется: 
делать двойные измерения - референсным и коммерческим тромбопластином 
обращаться в организацию International Reference Preparation для обработки результатов 
искать пациентов, принимающих варфарин.
В набор входит лиофилизированная плазма, искусственно обедненная по варфарин-зависимым факторам. Профессор 
Томпсон и др. ученые доказали, что такая плазма идентична по свойствам плазме пациентов, принимающих варфарин [1]. 
Плазма обоих видов может применяться для исследования влияния прибора на МНО (Международное Нормализованное 
Отношение) [1-7].
Величина МИЧ зависит также от многих факторов пробоподготовки. «Локальный» МИЧ будет определен следующим 
образом:
3. Вы измеряете значения ПВ для всех 20 флаконов набора и сообщаете результаты дистрибьютеру.
4. Через определенное время Вам сообщают значение МИЧ.
Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vitro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все меры 
предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к гепатиту В 
(HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой  
осторожностью.
Реактивы
Калибровочные плазмы. 20 флакончиков с различными номерами.
Каждый флакончик содержит 0,5мл плазмы здорового человека, с искусственно изъятыми факторами свертывания. Также 
содержатся буфер и консерванты для низких температур.
Приготовление.  Добавить в каждый флакончик ровно 0,5мл дистиллированной воды. Оставить на 10 минут и затем 
перемешать. Не трясти!
Другие компоненты набора.
В набор также входит инструкция и бланк для занесения результатов.
Хранение и стабильность 
1.Калибровочная плазма
Запечатанные флаконы стабильны до окончания срока годности при условии правильного хранения (указаны на флаконе или 
коробке). Разведенная плазма стабильна 30 минут при 15+30°С или 4 часа при 2+6 С. Дальнейшее хранение не  
рекомендуется.
Лиофилизированная плазма представляет собой сухую массу бледно-желтого цвета. Если после добавления воды Вы не 
получаете однородный раствор и/или присутствуют инородные тела, то продукт испорчен.
Требуемое, но не поставляемое оснащение
5) . Высококачественный коагулометр (оптический способ детекции).
6) . Пипетка на 0,5мл
7) , 20 свежесобранных плазм от здоровых доноров обоего пола различного возраста (желательно охватить
наибольший диапазон). Кровь (9 часть) должна собираться в пластиковые пробирки с консервантом (1 часть). 
Консервантом может быть 3,2% или 3.8% натрия цитрат. Хорошо перемешайте и немедленно  
центрифугируйте при 1500+2500 g в течение 10 минут. Отделите плазму и переместите ее в пластиковые 
пробирки. Определение следует закончить в течение 2 часов с момента сбора.
8) . Реактив на ПВ (тромбопластин, приготовить в соответствии с инструкцией).
Пошаговое руководство
Важно. Вы рассчитываете МИЧ только для данного прибора и для данной серии реактива. Этот набор также имеет серию, 
поэтому нельзя брать калибраторы из разных коробок.
6). Приготовить 20 калибровочных плазм (см.выше).
151


--- стр. 152 ---
7) . Измерить ПВ для каждого флакона 4 раза (нужны только секунды).
8) . Внести все полученные значения в специальный бланк, вложенный в набор. Рассчитать среднее
арифметическое для каждого флакона и также внесите его в бланк. Каждый флакон имеет свой номер, это 
отражено в бланке.
9) . Измерить 4 раза плазмы, полученные от здоровых доноров (нужны только секунды). Рассчитать среднее
арифметическое. Внести это значение в ячейку MNPT.
10) . Передать полученные результаты дистрибьютеру.
Отметим, что коэффициент вариации для четырех измерений каждого калибратора должен быть меньше 5% 
(только в этом случае будут проводиться расчеты). Расчет «локального» МИЧ будет произведен в течение двух дней. Если 
CV больше 5%, то всю процедуру нужно повторить. Если результаты снова будут выше 5%, то нужно искать причину 
разбросов.
Аналитические характеристики
Качество этого набора оценивали в двух крупных исследованиях:
3. Данные собирались только в Англии.
4. Данные собирались в разных странах.
Оказались охваченными 95 торговых марок приборов и 11 торговых марок реактивов на ПВ. Приняли участие 37 
лабораторий из США, Канады, Франции, Германии, Италии и Испании. Расхождения по МНО для варфариновых пациентов 
между этими лабораториями достигало 14,41%. После установления «локального» МИЧ для каждой лаборатории ( для 
каждого прибора) с помощью этого набора, эта цифра уменьшилась до1,04%.
В таблице указаны: наименование прибора, наименование реактива (тромбопластина), изначальный МИЧ и количество 
приборов данной марки, принявших участие.
ISI = МИЧ (английская абревиатура).
МИЧ определяли только в диапазоне 1.07+2.00.
INSTRUMENT THROMBOPLASTIN MANUFACTURER ISI NO . OF SYSTEMS
KoaguLab RecombiPlasTm 0.99 10
KoaguLab Ortho Br^n Thromboplastin 1.92 10
KoaguLab Stago. France 1.79-2.04 2
Koa^Lab Thromboplastin C 2.80 I
M IA * RecombiPlasTb 0.99 10
MLA* Ortho Bran Throrr^oplastin 1.92 10
M IA * Thromboplastin C 2.80 1
MLA* Innovin 0.96-1.04 3
MLA* IS, Baxter # 2
MLA* Thromboplastin C + # 2
ACL** RecombiPI^Tin 0.99 13
ACL** C ^ho Br^n Thromboplastin 1.92 13
ACL** A a 1.41-2.42 3
ACL** Stago, France 1.79-2.04 1
A a * * Siniplastin XL # 2
C o^A -M ata RecombiPlasTm 0.99 3
Cbag-A-Mata Ortho Brain Thromboplastin 1.92 3
Coag-A-Mita Stago, France 1.79-2.04 2
Coag-A-Mate Thrombomat # 1
Behring BFA ВесотЫР1ааТ1п 0.99 1
Behring BFA Ortho Brain Thromboplastin 1.92 I
Boxing BFA Thromborel S # 1
* MLA =  Madcal Laboratory Automation
* *  ACL =  Automated Coagulation Laboratory
#  ISI ranged between 1.07-2.00
Калибровку этим набором следует проводить при смене серии реактива, после сервисного обслуживания прибора 
и/или в случае непрохождения контролей.
Это набор может использоваться только для тромбопластина с ожидаемым МИЧ ниже 2. Тромбопластин может 
быть только кроличьм или человеческим.
Тест-система "Агрегация TRAP-6" (TRAP-6).
Применение
Тромбиновый активатор рецепторов пептида - 6 (TRAP-6) - реагент, котороый используется для 
диагностики дисфункции тромбоцитов в образце богатой тромбоцитами человеческой плазмы или в цельной крови. 
TRAP-6 представляет собой синтетический гексапептид, который активирует рецепторы тромбина, которые отвечают за 
его расщепление. Это соответствует аминокислотам 42 и 47 рецепторов тромбина и это имитирует эффект 
тромбина. Тромбин является очень мощным активатором тромбоцитов. Его действие не блокируется 
антитромбоцитарными препаратами, такими как аспирин или клопидогрель.
TRAP-6 может быть использован как альтернатива такому активатору тромбоцитов, как тромбин, так как он
легко стандартизирован и более стабилен, чем тромбин. TRAP-6 может быть использован для обнаружения действия
антагонистов ГП M b / Ilia.
152


--- стр. 153 ---
i
%
Меры предосторожности
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! При 
работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам  
предосторожности. Плазменные продукты были проверены на содержание (если другого не указано на упаковке) антигенов 
гепатита В (HBsAg), HIV1,2 и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, при работе следует обращаться с 
ними с той же осторожностью, что и с образцами плазмы человека.
Реактивы
TRAP-61mM-IX 1.0ml
Реактив до растворения представляет собой однородный белый порошок.
Приготовление:  растворите содержимое флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно  
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный 
раствор 1 мМ TRAP-6.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
!V. Хранение и стабильность
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке, 
TRAP-6. Разведенный реактив устойчив в течение 1 недели при температуре хранения 2+6°С или 3 месяца при -20“С.
V. Сбор и приготовление образцов
Следует использовать только пластиковые или силиконизированные стеклянные пробирки. Кровь забирается в пробирку с 
цитратным антикоагулянтом (3.2% или 3.8% цитрат натрия) в соотношении 9:1. После центрифугирования при оборотах 
150+200 * g в течение 10+15 минут (18+25°С) отделить богатую тромбоцитами плазму. Отделить бедную тромбоцитами 
плазму после центрифугирования при оборотах 2000+3000 * g в течение 15 минут. Разбавить богатую тромбоцитами плаз^му 
бедной для получения образца с содержанием тромбоцитов 250х109\л. Плазму следует хранить при температуре 18+25 С. 
Тестирование должно быть проведено в течение 2 часов после забора образцов.
Vi. Пошаговое руководство
Перед использованием не нужно проводить никаких дополнительных разбавлений, однако, в случае, если 
разбавление необходимо, то его следует делать в физиологическом растворе и немедленно использовать реактив.
V!!. Контроль качества
Каждая лаборатория должна установить программу контроля качества. Рекомендуется проводить один нормальный 
и патологичный контроль при каждом определении образцов, для гарантии правильности работы анализатора и оператора. 
Если контроли не укладываются в установленные данной лабораторией пределы, то результаты измерений образцов 
пациентов нужно считать недействительными.
Viii. Референсные значения
Значения могут варьировать между лабораториями в зависимости от методов и анализаторов, которые используют 
лаборатории для выполнения данного теста. По этой причине каждой лаборатории необходимо установить свой собственный 
нормальный диапазон.
iX. Аналитические характеристики
В одной аналитической серии коэффициент 
использовании PACKS-4 составил менее 5%.
вариации для реактивов агрегации тромбоцитов Helena при
Тест-система "Рептилазного времени" (Reptilase time).
ПРИМЕНЕНИЕ
Рептилазное время (RT) - это анализ крови для обнаружения недостатков или нарушений в фибриногене. Рептилаза - 
это фермент обнаруженный в яде змей Bothrops, имеет активность близкою к тромбину. В отличие от тромбина, рептилаза 
устойчива к ингибированию антитромбина III. Таким образом, рептилазное время не продлевается в образцах крови 
содержащей гепарин, гирудин или прямые ингибиторы тромбина, тогда как тромбиновое время продлится в этих 
образцах. Рептилаза также отличается от тромбина, так как высвобождает фибринопептид А, но 
не фибринопептид В, участвующий в расщепления фибрина.
Другие причины длительного времени рептилазы включают наличие продуктов деградации фибрина, которые 
препятствуют полимеризации фибрина.
РЕАКТИВЫ
Рептилаза-реактив. (10х1мл)
Реактив до растворения представляет собой однородный белый порошок.
Приготовление:  растворите содержимое каждого флакона в 1.0мл дистиллированной воды. Перед применением аккуратно 
перемешайте, убедитесь в полном растворении. После растворения каждый флакон содержит прозрачный бесцветный.
Другие комлоненты набора.
Каждый набор содержит инструкцию по применению.
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ
Запечатанные реактивы устойчивы до указанного срока действия, при соблюдении условий хранения, указанных на упаковке. 
Релтилаза-реактив.  Разведенный реактив устойчив в течение 1 недели при температуре хранения 2+6°С или 3 месяца при - 
20”С.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Кровь для исследования забирают из локтевой вены в пластиковую или силико 
нированную пробирку, содержащую 3,8% раствор натрия лимоннокислого 3-х замещен 
ного (цитрата натрия), соотношение объемов крови и цитрата натрия - 9:1. Кровь цен
153


--- стр. 154 ---
трифугируют при 1000 об/мин (240 д) в течение 7 мин. Богатую тромбоцитами плазму 
переносят в другую пробирку и повторно центрифугируют при 3000-4000 об/мин (1200- 
1400 д) в течение 15 мин, в результате получают бедную тромбоцитами плазму.
Внимание! Для получения воспроизводимых и точных результатов по приведен 
ным методикам особое внимание должно уделяться соблюдению режима и последова 
тельности центрифугирования.
Центрифугирование должно проводиться непосредственно после взятия крови, а 
отбор плазмы на исследование - сразу же после центрифугирования. Не допускается 
анализ плазмы больных, содержащей гепарин, имеющей сгустки, гемолиз и полученной 
более 2 ч назад, а также замороженной плазмы крови.
Во всех исследованиях используют бедную тромбоцитами плазму.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ И ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Разведение рептилазы.
Во флакон с рептилазой внести 3,0 мл дистиллированной воды и растворить содержимое при комнатной температуре 
(+18...+25 С) и легком покачивании в течение 20 мин. В результате получают маточный раствор рептилазы, который 
хранят при +2...+8 С в течение 1 мес.
Рабочий раствор рептилазы (далее по тексту - раствор рептилазы) получить путем 
смешивания в пробирке 0,1 мл маточного раствора с 2,0 мл дистиллированной воды.
Данный раствор можно хранить при комнатной температуре не более 1 дня и при температуре +2...+8 С не более 3 дней.
В норме время свертывания в рептилазном тесте при мануальном исследовании должно быть равным 45-55 с, а при 
исследовании на коагулометре - 35-45 с. При другой активности яда в пробирку дополнительно ввести маточный раствор 
рептилазы или дистиллированную воду, осуществляя подгонку активности яда к нужному уровню. Это предварительное 
тестирование раствора рептилазы следует проводить лишь на свежей цитратной бедной тромбоцитами плазме  
здоровых людей (контрольной нормальной плазме).
Контроль коагуляции, уровень П1 (Routine Control А1).
I. Применение
Контрольная плазма может использоваться как нормальный/абнормальный контроль для таких тестов как: факторы 
И , V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, фибриноген, фактор Виллебранда, ПрС (и его активность) и Пр8 (общий и свободный). Также для 
хромогенных тестов: АТ III, ПрС, фактор VIII и плазминоген.
Этот контроль должен анализироваться так же, как и свежая плазма пациента.
II. Меры предосторожности
Реактивы, представленные в этом наборе только для in-vltro диагностики. Не принимать внутрь!
Надевайте перчатки при работе с компонентами этого набора. Информация по безопасности и способу утилизации 
отражена на упаковке и во вложенной в набор инструкции.
Рассматривайте реагенты как источник потенциальной биологической опасности и, в связи с этим, принимайте все 
меры предосторожности. Компоненты, входящие в состав данного набора были проверены на содержание антигенов к 
гепатиту В (HBsAg), HIV и HCV антител с отрицательным результатом, тем не менее, с ними следует обращаться с особой 
осторожностью.
III. Реактивы
Контрольная плазма (10*1мп).
Содержит лиофилизат свежей цитратной плазмы (с добавлением буфера).
Приготовление.  Добавить 1мл дистиллированной воды. Аккуратно перемешать. Оставить на 20 минут до полного  
растворения.
Важно; Если Вы хотите поставить этот контроль на тест Фибриноген на приборе АС-4, то надо предварительно развести 
готовый контроль в 2 раза. Затем полученный результат следует умножить на 2. Это будет истинное значение, которое нужно 
сравнивать с референсным диапазоном.
Другие компоненты набора.
Каждый набор содержит руководство пользователя и лист со значениями.
IV. Хранение и стабильность
Запечатанный флакон стабилен до окончания срока годности, при условии правильного хранения. Фактор VIII, 
фактор Виллебранда и ристоцетин кофактор стабильны в течение 2 часов при температуре 2+6°С. Остальные показатели 
стабильны 4 часа при 2+6°С.
Контроль представляет собой сухую, слегка желтоватую массу. Любое отклонение от этого описания может говорить о 
плохом качестве продукта. В таком случае, обратитесь в представительство компании Helena.
V. Использование
Этот контроль может использоваться на любых оптических и механических коагулометрах в комплексе с любыми 
подходящими коммерчески доступными реактивами.
VI. Ограничения
Результаты анализа зависят от множества факторов (прибор, реагенты и прочее). Поэтому Вы должны сами 
рассчитывать референсные диапазоны для этого контроля.
VII. Интерпретация результатов
Если Вы не измеряли контроля, то все полученные результаты считаются недостоверными. Убедитесь, что номер 
лота (серии) флаконов равен номеру на вложенном
154


--- стр. 156 ---
Раствор очищающий (Cleaning Solution).
Применение
Специальный моющий раствор для использования между тестами. Совместим с целым рядом автоматических  
коагулометров.
Состав:
В основе содержит 100 мМ соляной кислоты.
Упаковка
1 флакон на 500 мл
Очиститель 1  (СА Clean 1).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Очиститель 1 необходим для использования между тестами. Совместим с целым рядом автоматических коагулометров. 
СОСТАВ:
В основе содержит 100 мМ соляной кислоты.
УПАКОВКА
Пластиковые флаконы по 50 мл.
Очиститель 2 (СА Clean 2).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Очиститель 2 необходим для использования между тестами, а также для проведения процедуры ежедневной промывки. 
Совместим с целым рядом автоматических коагулометров.
СОСТАВ:
В основе содержит 100 мМ соляной кислоты.
УПАКОВКА
Пластиковые флаконы по 500 мл.
Жидкость промывочная (Rinse solution).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Реагент для промывания используется для промывки пробозаборника между тестами. Предназначен для использования на 
автоматическом анализаторе Helena АС-4.
СОСТАВ:
В основе содержит 100 мМ соляной кислоты.
УПАКОВКА
Реагент для промывания поставляется в пластиковом контейнере объемом 1,25 литра.
Жидкость чистящая (Cleaning solution).
Применение
Жидкость чистящая применяется для обеззараживания при измерении потенциально 
инфицированных образцов.
Состав:
В основе содержит гипохлорид натрия.
Упаковка
1 флакон на 500 мл
ш
Раствор калибровочный для агрегометра (Platelet scale set).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Раствор калибровочный для агрегометра предназначен для калибровки агрегометров PACKS-4 и AggRAM, работающих на 
длине волны 650 нм.
РЕАГЕНТЫ
Состав: Раствор калибровочный № 1 представляет собой водный раствор, содержащий буфер и стабилизатор. Раствор 
калибровочный № 2 дополнительно содержит микрошарики. Никаких специальных мер предосторожности не требуется. 
Реактивы, содержавшиеся в этом наборе, предназначены только для диагностики in vitro. Не принимать внутрь! При 
работе с компонентами набора следует надевать перчатки. Ознакомьтесь с инструкцией продукта по мерам 
предосторожности.
156


--- стр. 157 ---
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ; растворы должны храниться при температуре 2-8 ° С, и 
стабильны до истечения срока годности, указанного на упаковке. НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ!
Признаки нарушения качества растворов: Раствор калибровочный № 1 должен быть прозрачной, однородной жидкостью, 
если смотреть в кювете. Любая мутность может
указывать на загрязнение.Раствор калибровочный № 2 должен быть белой, 
мутной суспензией. Если цвет не белый, то это может указывать на загрязнение.
Избегайте замораживания, которое может вызвать распад микрошариков .
АНАЛИЗАТОРЫ
Применяется только для работы на анализаторах PACKS-4 и AggRAM 
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА НА АГРЕГОМЕТРЕ HELENA AggRAM.
Процедура калибровки анализатора AggRAM проводится ежемесячно в следующей последовательности:
1. Раствор калибровочный № 1 и раствор калибровочный № 2 достаньте из холодильника и выдержите при комнатной 
температуре (15-30 ° С).
2. Включите AggRAM, принтер, монитор и компьютер. Когда Вы увидете значок HemoRAM, введите ID пользователя и 
пароль.
3. Дайте инструменту прогреться в течение 20 минут или до тех пор пока температура в оптических каналах не достигнет 37 
°С.
4. Выполните ежедневную процедуру оптический проверки и калибровки используя Руководство по эксплуатации AggRAM.
5. Подготовьте анализатор для выполнения калибровки, см. раздел 10.1.5 
Руководства оператора.
6. Поместите две кюветы в штатив.
7. Аккуратно накапайте не менее 400 мкл (около 6 капель) раствор калибровочного № 1 в 
первую кювету. Поставьте кювету в штатив.
8. Также накапайте не менее 400 мкл раствор калибровочного № 2 во вторую кювету.
9. Кюветы должны быть очищены безворсовой тканью так, чтобы они
не содержали никаких отпечатков пальцев или пятен при проведении оптического чтения.
Поместите кюветы в канал.
10. Сначала проверяется раствор калибровочный № 1, см. раздел 10.1.5 Руководства.
11. Затем проверяется раствор калибровочный № 2, см. раздел 10.1.5 Руководства.
12-13. Если значения для раствора №1 и №2 будут приемлемы, то анализатор примет калибровку автоматически, если нет, 
то предложит пройти процедуру повторно. 14. Распечатайте полученные значения, выбрав Печать.
15. Все параметры автоматически сохраняются, когда окно закрывается.
16. Для выхода выберите X, который находится на верхней правой части окна.
Бумага для термопринтера (Thermal paper).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Бумага для термопринтера используется для распечатывания результатов анализов или данных калибровки на анализаторе 
Helena АС-4.
УПАКОВКА:
Поставляется в полиэтиленовых пакетах по 5 рулонов, шириною 80 мм каждый.
Кювета (Cuvette).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Кювета применяется для проведения анализа на различных автоматических и полуавтоматических коагулометрах.
СОСТАВ:
Пластик.
УПАКОВКА 
1000 шт. в упаковке.
157


--- стр. 158 ---
Блок кювет (Cuvette block).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Блок кювет используется для выполнения анализов, а также для проведения процедуры калибровки на анализаторе Helena 
АС-4.
СОСТАВ:
Пластиковые кюветы содержащие четыре реагентных ячейки в одном блоке.
УПАКОВКА
В каждой коробке содержится 200 блоков кювет. Одна коробка предназначена для проведения 800 определений.
Кювета с магнитными мешалками и CuvCARD (Cuvettes Micro with Mixer,  
CuvCARD).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Кювета с магнитными мешалками и CuvCARD используется для выполнения анализов, а также для проведения процедуры 
калибровки на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001.
СОСТАВ:
Каждая пластиковая кювета содержит металлический стержень магнитной мешалки. Упаковка кювет содержит пластиковую 
чип карту для активации кювет на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001.
УПАКОВКА
В каждой коробке содержится 5 паллет по 100 кювет с магнитными мешалками в каждой. В каждую коробку вложена 
инструкция и чип-карта для активации кювет на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001. Чип карта предназначена для 
активации 500 кювет. Одна коробка предназначена для проведения 500 определений.
ПРИМЕНЕНИЕ:
Кювета с магнитными мешалками и CuvCARD используется для выполнения анализов, а также для проведения процедуры 
калибровки на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001.
СОСТАВ:
Каждая упаковка содержит пластиковые кюветы, металлические стержни магнитных мешалок и пластиковые чип карты для 
активации кювет на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001.
УПАКОВКА
В каждой коробке содержится 2500 кювет (5x500), 2500 магнитных мешалок (5x500). В каждую коробку вложена инструкция и 
5 чип-карт для активации кювет на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001. Чип карта предназначена для активации 500 
кювет. Одна коробка предназначена для проведения 2500 исследований (5x500 определений).
Кювета с магнитными мешалками (CC-Cuvette with Mixer in Dispo System).
ПРИМЕНЕНИЕ:
Кювета с магнитными мешалками и CuvCARD используется для выполнения анализов, а также для проведения процедуры 
калибровки на анализаторе Helena CoaDATA 2001 или 4001.
СОСТАВ:
Каждая пластиковая кювета содержит металлический стержень магнитной мешалки.
УПАКОВКА
В каждой коробке содержится 5 паллет по 100 кювет с магнитными мешалками в каждой. В каждую коробку вложена 
инструкция. Одна коробка предназначена для проведения 500 определений.
158
Кн
ПР1
К Ю Е
агр
СО
Ст<
Кювета с магнитными мешалками в разовой упаковке и CuvCARD (Cuvettes  
Micro with Mixer in Dispo System, CuvCARD). ^
УП 
в к
Ki
ПР
Кю
noj
cc
Пл
УП
B k
K i
П
Kk
no
C(
Пг
У Г
В
IV
ai
C


--- стр. 160 ---
г
Груша для капилляра (Pipette bulbs).
Применение
Используется для работы с капилляром для образца. Используется для дозирования взятого образца.
Состав;
Резина
Упаковка:
6 шт. в упаковке.
Дозатор для капилляров (Micro pipetting aid).
ПРИМЕНЕНИЕ
Используется для работы с капилляром для образца. Используется в качестве пипетки.
СОСТАВ:
Пластик
УПАКОВКА
Дозатор для капилляров в картонной упаковке по 1 шт. Каждая упаковка содержит инструкцию по использованию дозатора.
Капилляр для образца (Micropipettes).
ПРИМЕНЕНИЕ
Капилляры для образца предварительно откалиброваны и предназначены для пользователей, которым требуется взять 
очень точный объем образца. Капилляры для образца изготавливаются по нормативной документации ISO 7550.
Точность взятия образца для капилляров соответствует значениям указанным ниже.
1-5 \1\
10-200 р1
Асе
± 0 ,30 % 
± 0.25 %
CV
0,50 %
СОСТАВ:
Стеклянные капилляры.
УПАКОВКА
Капилляры упакованы в картонные флаконы по 250 шт. Все капилляры стандартной длины 125 мм, каждый  
капилляр снабжен цветовым кодом обозначающим его объем от основания до соответствующей отметки.
Ротор для анализов (1x20 позиций) (Rotors (20 cuvette).
Применение
Ротор для анализов используется для проведения анализов и калибровки на анализаторах типа ACL производства Beckman 
Coulter (США).
Состав:
Пластик.
Упаковка
100 роторов в 1 упаковке, для проведения 1800 определений.
160
ч
щ
Чс
ан
К(
4i
П
п
п
И (
К
п


--- стр. 161 ---
ять
,ый
lan
Чашечка для образцов объемом 0.5/2.0/4.0мл (Sample cups 0.5/2.0/4.0ml).
Применение
Чашечка для образцов используется для проведения процедуры калибровки и выполнения анализов пациентов на 
анализаторе Helena АС-4.
Комплектация
Чашечка для образцов выпускается различных объемов по 0,5 мл; 2,0 мл и 4,0 мл. Чашки упакованы в пакеты по 1000 шт.
Пробирка реакционная (Reaction Tube).
Применение
Пробирка реакционная используется для проведения анализа на Helena АС-4. Пробирка реакционная предназначена для 
использования вместе с планшетом для образцов.
Комплектация
Пробирка реакционная поставляется в упаковках по 100 штук. Емкость пробирки 8 мл.
Планшет для образцов (Sample tray).
Применение
Планшет для образцов используется для проведения процедуры калибровки вместе с пробирками для образцов на 
анализаторе Helena АС-4. Планшет предназначен для одновременной загрузки 12 образцов. Планшет для образцов можно 
также использовать с другими типами пробирок. Высота пробирок не должна превышать 120 мм, а диаметр 25 мм.
Комплектация
Планшет для образцов поставляется в упаковке по 1 шт.
Пробирка для образцов (Reaction cuvettes)
Применение
Л Пробирка для образцов используется для проведения процедуры калибровки на анализаторе Helena АС-4.
Комплектация
Пробирка для образцов поставляется в упаковках по 100 штук. Емкость пробирки 4 мл.
Набор сервисный для АС-4: пробозаборник, дозатор, изоляционный держатель с  
кабелем, моющая станция, клапан с трубкой (Service set for Helena AC-4: Cap-piercing  
pipette probe with tubing; Syringe; Insulating block with cable; Waste complete, standard;  
Tubing pump - container).
Применение
Набор сервисный для АС-4 предназначен для ежегодного обслуживания и/или переодического ремонта автоматического 
коагулометра Helena АС-4.
Меры предосторожности
Набор сервисный для АС-4 предназначен только для анализатора Helena АС-4 и не может использоваться для других целей. 
Комплектация
Набор сервисный для АС-4 включает в себя следующие аксессуары:
- пробозаборник;
- дозатор;
- изоляционный держатель с кабелем;
- моющая станция;
- клапан с трубкой


--- стр. 162 ---
Всего в настоящем документе  
прошнурованОг пронумеровано и  
скреплено печатью листов.
CU
rg ад
Е . «=s^  та-  
.S