Набор реагентов "Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий" по ТУ 21.10.60-116-14237183-2017 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
Инструкция по применению Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциа- ции энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Регистрационный номер медицинского изделия___________ 1 НАЗНАЧЕНИЕ Изделие для диагностики in vitro предназначено для идентификации и дифференциации до рода и вида микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae (выделенных в ходе бактериоло- гического исследования из биологического материала человека) по биохимической активности хромогенным методом (для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae от других групп микроорганизмов). Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике инфекций, вы- званных бактериями группы кишечной палочки или кишечных инфекций бактериальной этио- логии. Показания к применению изделия в соответствии с его назначением. Противопоказания при применении изделия согласно инструкции – отсутствуют. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ СОСТАВ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ. Состав (комплектность) медицинского изделия: 1. СИБ с сорбитом - 1 флакон (50 дисков). 2. СИБ для определения сероводорода - 1 флакон (50 дисков). 3. СИБ для определения β-галактозидазы - 1 флакон (50 дисков). 4. СИБ с инозитом - 1 флакон (50 дисков). 5. СИБ с фенилаланином - 1 флакон (50 дисков). 6. СИБ с хлоридом железа - 1 флакон (50 дисков). 7. СИБ для определения индола - 1 пробирка (50 полос). 8. СИБ для определения уреазы - 1 флакон (50 дисков). 9. СИБ с лизином - 1 флакон (50 дисков). 10. СИБ с орнитином - 1 флакон (50 дисков). 11. СИБ для реакции Фогеса-Проскауэра - 1 флакон (50 дисков). 12. СИБ с малонатом натрия - 1 флакон (50 дисков). 13. СИБ с цитратом натрия - 1 флакон (50 дисков). 14. СИБ для определения оксидазы - 1 пробирка (5 полос). В комплект поставки входят: - инструкция по применению медицинского изделия; - паспорт качества на серию медицинского изделия. Характеристика компонентов. Системы индикаторные бумажные (СИБ) для идентификации микроорганизмов представ- ляют собой диски диаметром 9-10 мм или полоски шириной 7-8 мм, длиной 70-80 мм из бумаги хроматографической, содержащие определенные количества реагентов (субстратов в сочетании с индикатором), стабилизированные поливиниловым спиртом. Гигроскопичны, при хранении на свету возможно изменение цвета. 2 | Наименование СИБ | Основной реагент СИБ | Индикатор | Стабилиза- тор | Прочие ингре- диенты | Внешний вид СИБ в сухом виде | | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | | СИБ с сорбитом | D(+) сорбит | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | Пептон сухой ф е р м ентатив- ный для бакте- риологических целей | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ для определения сероводорода | Железа цитрат, натрий сернова- тистокислый 5- водный | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски кремо- вого цвета | | СИБ для определения β- галактозидазы | 2-нитрофенил- β-D- галактопирано- зид | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого цвета | | СИБ с инозитом | Мезоинозит | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | Пептон сухой ф е р м ентатив- ный для бакте- риологических целей | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ с хлоридом железа | – | Железа (III) хлорид 6- водный | Спирт поли- виниловый | – | Диск желтого цвета | | СИБ с фенилаланином | L-фенилаланин | – | Спирт поли- виниловый | – | Диск белого цвета | | СИБ для определения индола | L-триптофан | Реактив Эрлиха: п-диметилами- нобензальдегид, кислота орто- фосфорная | Спирт поли- виниловый | Лак АК-113 | Полоски, ко- роткий конец – зеленовато- серый или желтый, длин- ный – белый | | СИБ для определения уреазы | Карбамид (мо- чевина) | Фенолфталеин | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого цвета | | СИБ с лизином | L-лизин гидро- хлорид | Бромтимоловый синий | Спирт поли- виниловый | Пептон сухой ферментатив- ный для бакте- риологи-ческих целей Витамин В 6 | Диски желто- горчичного цвета | | СИБ с орнитином | L-орнитин гид- рохлорид | Бромтимоловый синий | Спирт поли- виниловый | Пептон сухой ферментативный для бактериологи- ческих целей Витамин В 6 | Диски желто- горчичного цвета | | СИБ для реакции Фогеса- Проскауэра | D(+) глюкоза, L-аргинин гид- рохлорид | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого или кремового цвета | | СИБ с малонатом натрия | Натрий малоно- во-кислый | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | – | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ с цитратом натрия | Натрий лимон- нокислый 3- замещенный 5,5-водный | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | – | Диски от оранжевого до красного цвета | Таблица 1 Описание основных функциональных элементов изделия 3 1 2 3 4 5 6 СИБ для определения N,N-диметил-п- – Спирт поли- – Полоски от оксидазы фениленди- виниловый серовато- амин сернокис- сиреневого до лый темно- -нафтол фиолетового цвета ПРИНЦИП АНАЛИТИЧЕСКОГО МЕТОДА И ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ Принцип действия основан на идентификации микроорганизмов по способности к ферментации углеводов и многоатомных спиртов (сорбита, инозита), декарбоксилирова- нию аминокислот (лизина, орнитина), утилизации цитрата и малоната натрия, фермента- тивной активности (уреазы, β-галактозидазы, фенилаланиндезаминазы, оксидазы), индолооб- разованию, образованию сероводорода, поскольку биохимическая активность различных групп микроорганизмов может отличаться. Способность к ферментации углеводов и многоатомных спиртов оценивают по изме- нению окраски вследствие образования органических кислот (уменьшение рН), вызываю- щих изменение окраски индикатора. При реакции Фогес-Проскауэра ацетилкарбинол, продуцирующийся при ферментации глюкозы, окисляется в присутствии щелочи до диацетила, который соединяясь с гуанидиновы- ми группами L-аргинина в присутствии α-нафтола, образует комплекс, имеющий красную окраску. В среде, содержащей В (кофактор декарбоксилаз), стимулируется декарбоксилазная 6 активность в отношении лизина/орнитина, в результате декарбоксилирования лизина образуется кадаверин, орнитина – путресцин. Образовавшиеся амины защелачивают среду и ее цвет меняется в присутствии индикатора, если декарбоксилирования нет, цвет среды не меняется. Определение индолообразования в выращенной культуре проводят по появлению окрашивания с реактивом Эрлиха, которое свидетельствует о наличии индола. Определение оксидазной активности. В присутствии оксидаз бактерий происходит перенос электронов к N,N-диметил-п-фенилендиаминy, из него образуется индофенол – вещество синего цвета. Определение уреазной активности. При расщеплении мочевины образуется аммиак, который защелачивает среду, что сопровождается изменением цвета индикатора. Определение образования сероводорода основано на выявлении окрашенных в чер- ный цвет сульфидов железа, образующихся в результате взаимодействия серы, образую- щейся при ферментации серосодержащих неорганических соединений, с водородом и индикатором. 4 Определения фенилаланиндезаминазы. Дезаминирование аминокислоты фенилаланина ве- дет к образованию фенилпировиноградной кислоты, которая при взаимодействии с хлорным железом образует цикличное соединение зеленого цвета. Тест на утилизацию цитрата/малоната натрия основан на способности некоторых бактерий использовать в качестве основного источника углерода цитрат натрия/ малонат натрия, при этом происходит подщелачивание среды, вызывающее изменение окраски индикатора. Определение β-галактозидазы. β-галактозидаза – фермент, обеспечивающий гидролиз лак- тозы с образованием глюкозы и галактозы. 2-нитрофенил-β-D-галактопиранозид имеет струк- турное сходство с лактозой. β-галактозидаза расщепляет галактопиранозид с образованием глюкозы и ортонитрофенила – вещества, имеющего желтый цвет. ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Изделие рассчитано на проведение 50 анализов. Комплектация. Изделие (12 флаконов по 50 дисков: СИБ с инозитом, СИБ с лизином, СИБ с орнитином, СИБ с малонатом натрия, СИБ с цитратом натрия, СИБ с сорбитом, СИБ с фенилаланином, СИБ с хлоридом железа, СИБ для определения уреазы, СИБ для определе- ния сероводорода, СИБ для определения β-галактозидазы, СИБ для реакции Фогеса – Проска- уэра; 1 пробирка (50 полос) СИБ для определения индола; 1 пробирка (5 полос) СИБ для определения оксидазы) инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки). Изделие предназначено для лабораторной диагностики, для однократного применения по назначению. Целевой аналит – энтеробактериии. Вид аналита – качественный. Изделие ремонту и обслуживанию не подлежит. Монтаж, наладка, калибровка и про-чие операции, необходимые для ввода изделия в эксплуатацию и его правильной эксплуата-ции не требуются. Изделие является нестерильным. Пользователями изделия могут быть медицинские специалисты по лабораторной диагностике с высшим и средним специальным образованием, прошедшие специальную под- готовку и допущенные к работе с патогенными микроорганизмами в соответствии с СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекцион- ных болезней». АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Время срабатывания: СИБ для определения оксидазы от 30 до 60 с; СИБ для определения индола от 40 мин до 2 ч; СИБ для определения уреазы от 40 мин до 5 ч; СИБ с фенилаланином, СИБ с хлоридом железа – от 1 до 2 ч. 5 | | СИБ для определения β-галактозидазы – от 1 до 5 ч; | | | СИБ для определения сероводорода – от 5 до 18 ч; | | СИБ с сорбитом, СИБ с инозитом, СИБ с лизином, СИБ с орнитином, СИБ с малонатом | | | натрия, СИБ с цитратом натрия, СИБ для реакции Фогеса-Проскауэра – от 18 до 24 ч. | | | Чувствительность: при суспендировании полной бактериологической петли или посеве | | | в питательную среду уколом культуры положительно реагирующих тест-штаммов микроорга- | | | низмов семейства Enterobacteriaceae (Klebsiella pneumoniae 579, Proteus vulgaris HX 19 222, | | | Escherichia coli 9001/ Еscherichia coli 675) должен изменяться цвет раствора (после погружения | | | СИБ-диска), цвет питательной среды (после размещения СИБ-диска на поверхности) или цвет | | | полоски (после погружения или нанесения культуры тест-штамма) спустя время срабатывания в | | | соответствии с таблицей учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками | | | тест - штаммов. | | | Специфичность (правильность дифференциации тест-штаммов бактерий семейства | | | Enterobacteriaceae от тест-штаммов бактерий других групп): тест-штаммы бактерий семейства | | | Enterobacteriaceae (Klebsiella pneumoniae 579, Proteus vulgaris HX 19 222, Escherichia coli 9001/ | | | Еscherichia coli 675) и бактерий других групп (Vibrio cholerae non 01 Р-9741, Aeromonas | | | hydrophila 401, Alcaligenes faecalis 73) должны изменять цвет раствора (после погружения | | | СИБ-диска), цвет питательной среды (после размещения СИБ-диска на поверхности) или цвет | | | полоски (после погружения или нанесения культуры тест-штамма) спустя время срабатывания в | | | соответствии с таблицей учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками | | | тест – штаммов. | | МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ Потенциальный риск применения набора – класс 2 б. Медицинское изделие является безопасным при транспортировании, хранении и примене- нии и не приносит вреда окружающей природной среде и здоровью человека. Исследуемые материалы, а также их растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ним в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, при работе с кото- рым необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с: - ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности»; - СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике ин- фекционных болезней»; Оборудование и материалы, находящиеся в контакте с исследуемыми образцами также представляют собой потенциально инфекционный материал, и обращаться с ними следует осторожно. Необходимо: 6 - работать в боксированных помещениях для проведения микробиологических иссле- дований с применением индивидуальных средств защиты (защитной одежды и одноразовых резиновых перчаток); - не пипетировать ртом; - при попадании на кожу или слизистые оболочки компонентов набора место контакта необходимо промыть большим количеством воды; - в случае пролива образцов и рабочих растворов на рабочие поверхности, необходимо проводить дезинфекционную обработку с использованием дезинфицирующих средств, эф- фективность которых подтверждена в отношении используемого в работе возбудителя; - инструменты и оборудование (до и после работы) подвергать обработке с использова- нием дезинфицирующих средств, эффективность которых подтверждена в отношении ис- пользуемого в работе возбудителя; - утилизировать все использованные материалы, а также их растворы, исследуемые об- разцы и их растворы в соответствии с действующими санитарными правилами работы с па- тогенными микроорганизмами. Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и обезза- раженных изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответ-ствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к содержа- нию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой во-де и питье- вому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, экс-плуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению сани-тарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий». СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ ПЕРЕЧЕНЬ РИСКОВ, ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫХ В ПРОЦЕССЕ АНАЛИЗА РИСКОВ И МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ. ПЕРЕЧЕНЬ РИСКОВ, ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫХ В ПРОЦЕССЕ АНАЛИЗА РИСКОВ И МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ. Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий: - для получения четких результатов необходимо соблюдение температурного режима тер- мостата (37±1) °С, рН применяемых питательных сред и режима обработки посуды. - соблюдения условий хранения (при температуре от 2 до 25 оС в герметично укупоренном виде) и транспортирования, изделия, транспортированные и хранившиеся с нарушением темпе- ратурного режима, применению не подлежат; - не использовать изделие с истекшим сроком годности; - не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркировки, нарушении целостности упаковки компонентов и компоненты от разных серий изделия; 7 | ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ, | | | НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ | | | | • Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С; | | | • Бокс микробиологической безопасности II класса; | | | • Автоклав; | | | • Пробирки стеклянные; | | | • Чашки Петри; | | | • Пинцеты; | | | • Петля бактериологическая № 3; | | | • Палочка стеклянная; | | | • Вата медицинская гигроскопическая; | | | • Натрия хлорида раствор 0,9% рН (7,3±0,1), стерильный; | | | • Фосфатно-солевой буферный раствор рН (5,5±0,2) (АО «НПО «Микроген»); | | | • Масло вазелиновое стерильное; | | | • α-нафтола раствор спиртовой 6 %; | | | • Натрия гидроксида раствор 40 % | - погружение дисков (полосок) в пробирки производят обожженным пинцетом; - критерием правильности учета реакции должны быть четкие различия в окраске по сравнению с контролем (за исключением аминокислот, где в опытной пробирке слабое зеленое окрашивание свидетельствует об отрицательном результате, в то время как в контроле диски с аминокислотами окрашены в желтый цвет). АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Тип анализируемого образца - образцы чистой культуры или отдельных колоний, выде- ленных в ходе бактериологического исследования из биологического материала человека с дифференциально-диагностических питательных сред для выделения и культивирования энте- робактерий в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г.). Требования к отбору, транспортировке и хранению до исследования анализируемых об- разцов в соответствии с МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории. Методические указания», Все работы по взятию, транспортированию и подготовке проб осуществляют в строгом соответствии с требованиями с СанПиН 3.3686-21 (в части требований к работе с папогенными микроорганизмами), Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не содержащую следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию посуды и других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 2%-м растворе пищевой соды. Для получения культур используют питательные среды для культивирования и диффе- 8 ренциации энтеробактерий в соответствии с действующей нормативной документацией в зави- симости от объекта исследования. Все образцы должны быть промаркированы (идентифицированы). ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Определение оксидазной активности. Бактериальную культуру, выросшую на поверхности питательной среды для культивирова- ния микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, растирают платиновой петлей или стеклянной палочкой на индикаторной полоске СИБ, помещенной в чашку Петри. На одной полоске можно исследовать 10-14 культур (не более). Время реакции указано таблице 2. Определение утилизации углеводов и многоатомных спиртов. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с соответствующим углеводом или многоатомным спиртом. Среда в пробирках в результате быстрой диффузии в нее индикатора становится красной. В случае необ- ходимости учета газообразования рекомендуется использовать небольшой комочек стериль- ной гигроскопической ваты, который помещают в пробирку. В качестве контроля служат СИБ-диски, погруженные в пробирки со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Пробирки инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение активности β-галактозидазы. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с 2-нитрофенил-β-D-галактопиранозидом. В качестве контроля служит СИБ-диск, погруженный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Пробирки инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 1 до 5 ч. Определение индолообразования. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С. Полоску для определе- ния индола складывают по намеченной на ней линии вдвое и пинцетом опускают на дно пробирки так, чтобы длинный бесцветный конец погрузился в суспензию культуры, а короткий окрашенный: конец находился над поверхностью суспензии. В качестве контроля используют полоску, помещенную в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 40 мин до 2 ч. 9 Определение уреазной активности. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь по- гружают СИБ-диск с мочевиной. В качестве контроля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при темпе- ратуре (37±1) °С, время инкубирования от 40 мин до 5 ч. Определение декарбоксилаз лизина, орнитина и дегидролазы аргинина. В пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН (5,5±0,2) сус- пендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культиви- рования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с одной из аминокислот: лизином, орнитином или аргинином и вно- сят 0,2 мл стерильного вазелинового масла. В качестве контроля используют СИБ-диски с соответствующими аминокислотами, погруженные в пробирки со стерильным фосфатно- солевым буферным раствором рН (5,5±0,2) с добавлением 0,2 мл стерильного вазелинового масла. Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение активности фенилаланиндезаминазы. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь по- гружают СИБ-диск с фенилаланином. В качестве контроля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при темпе- ратуре (37±1) °С в течение 1-2 часов, затем помещают в пробирки СИБ диск с хлоридом железа. Определение образования сероводорода. СИБ-диски на сероводород помещают в пробирки на поверхность питательного агара рН (7,3±0,1), содержащего 0,5 – 0,7 % агара микробиологического, засеянного бактериоло- гической петлей уколом культурой, выросшей на поверхности питательной среды для культи- вирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С. В качестве кон- троля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку на поверхность стерильного питательно- го агара. Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение утилизации цитрата и малоната натрия. В пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН (5,5±0,2) сус- пендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культиви- рования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с цитратом или малонатом натрия. В качестве контроля используют 10 СИБ-диски с цитратом или малонатом натрия, погруженные в пробирки со стерильным фос- фатно-солевым буферным раствором рН (5,5±0,2). Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение ацетилметилкарбинола (реакция Фогеса - Проскауэра). В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск. В качестве контроля служит СИБ-диск, погруженный в пробирку со сте- рильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем вносят в пробирки по 1 - 2 капле α-нафтола спиртового раствора 6 % и натрия гидроокиси раствора 40 %, инкубируют 15 – 20 минут при температуре (37±1) °С. Примечание: стерильный натрия хлорида раствор 0,9 % рН (7,3±0,1), α-нафтола спир- товой раствор 6 % и натрия гидроокиси раствор 40 % готовит потребитель (хранение α-нафтола спиртового раствора 6 % в посуде из темного стекла при температуре 20 - 25°С не более 7 суток, натрия гидроокиси раствора 40 % при температуре 20 - 25°С – 6 месяцев). РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Регистрацию результатов анализа проводят визуально. Учет результатов производят в соответствии с таблицей 2. Таблица 2 Учет результатов испытания Цвет раствора Результат испытания Время сраба- Тесты после погруже- тывания положительный отрицательный ния СИБ Оксидазная активность окрашивание (СИБ для определения окси- - от 30 до 60 с синий цвет отсутствует дазы) Утилизация углеводов и многоатомных желтый или оранже- красный от 5 до 18 ч красный цвет спиртов (СИБ с инозитом, вый цвет СИБ с сорбитом), β-галактозидазная актив- окрашивание ность (СИБ для определе- бесцветный от 1 до 5 ч желтый цвет отсутствует ния β-галактозидазы) окрашивание корот- Индолообразование (СИБ окрашивание бесцветный от 40 мин до 2 ч к о г о к о нца в розово- для определения индола) отсутствует малиновый цвет розово-малиновый Уреазная активность (СИБ от 40 мин до 5 цвет окрашивание бесцветный для определения уреазы) ч отсутствует Определение декарбокси- лаз лизина, орнитина (СИБ синий или интен- желтый или светло- желтый от 5 до 18 ч с лизином, СИБ с орнити- сивно зеленый цвет зеленый цвет ном) Образование сероводорода окрашивание (СИБ для определения се- - от 5 до 18 ч черный цвет отсутствует роводорода) 11 Цвет раствора Результат испытания Время сраба- Тесты после погруже- тывания положительный отрицательный ния СИБ Фенилаланиндезаминазная через 10- 15 с после погружения индикатор- активность (СИБ с фенил- ного диска с хлоридом железа бесцветный от 1 до 2 ч аланином. СИБ с хлоридом окрашивание зеленый цвет железа) отсутствует Утилизация цитрата натрия оранжевей, и малоната натрия (СИБ с красный, малиново- оранжевый, красно- красно- от 5 до 18 ч цитратом натрия, СИБ с красный цвет оранжевый оранжевый малонатом натрия) через 15-20 минут после внесения по 1-2 Реакция Фогеса- капле α-нафтола спиртового раствора 6 % и Проскауэра бесцветный от 18 до 24 ч натрия гидроокиси раствора 40 % (СИБ для реакции Фогеса- окрашивание Проскауэра) малиновый цвет отсутствует Информация о биохимических свойствах некоторых бактерий семейства Enterobacteriaceae, имеющих медицинское значение, указана в таблице 3. Идентификация и дифференциация до рода и вида микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae по биохимической активности являются частью комплекса идентификаци- онных тестов, включая контроль культурально-морфологических и тинкториальных и др. свойств в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г.).. Полную идентификацию следует производить с учетом результатов всех исследований (включая информацию об источнике получения), принимая во внимание биохимические характеристики бактерий УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ ИЗДЕЛИЯ Условия эксплуатации. Нормальные климатические условия: - температура окружающего воздуха от плюс (25±10) °С; - относительная влажность воздуха 45-80 %; - атмосферное давление - от 630 до 800 мм рт. ст. Транспортирование должно проводиться всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 25 °С. Допускается транспортирование при температуре от минус 20 до 2 °С не более 14 суток. Хранение при температуре от 2 до 25 °С в защищенном от света месте. При вскрытии флаконов (пробирок) в асептических условиях компоненты набора подлежат хранению до истечения срока годности в герметично закрытых флаконах (пробирках) при температуре от 2 до 25 °С в защищенном от света месте. Срок годности - 2 года со дня приемки. Изделие с истекшим сроком годности использованию не подлежит. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей 12 инструкции по применению. Рекламации по вопросам, касающимся качества и обращения медицинского изделия в те- чение срока годности с обязательным указанием серии и даты изготовления следует направлять в адрес Акционерного общества «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» (АО «НПО «Микроген»): Россия, 115088, г. Москва, ул. 1-я Дубровская, д. 15, строение 2, тел. (495) 710-37-87, e-mail: info@microgen.ru и в адрес производства: Россия, 603006, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Грузин- ская, д. 44; Россия, 603093, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Родионова, д. 192; Россия, 603105, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Чачиной, д. 27; тел.. (831) 296-91-16. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ НА УПАКОВКЕ И ЭТИКЕТКАХ Графический символ Изображение Изготовитель Температурный диапазон Код партии Использовать до Обратитесь к инструкции по применению или к инструкции по применению в электронном виде Запрет на повторное применение Содержимого достаточно для проведения <n> тестов Медицинское изделие для диагностики in vitro Хрупкое, обращаться осторожно Не допускать воздействия влаги Верх ____________________________ Взамен инструкции, утвержденной 10.06.2020 г. 13 Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 1. СИБ с сорбитом - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 2. СИБ с инозитом - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 3. СИБ с фенилаланином - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 4. СИБ с хлоридом железа - - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 5. СИБ для определения уреазы - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 6. СИБ с лизином - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 7. СИБ с орнитином - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 8. СИБ для реакции Фогеса-Проскауэра - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 9. СИБ с цитратом натрия - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 10. СИБ с малонатом натрия - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 11. СИБ для определения сероводорода - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 12. СИБ для определения индола – 1 пробирка ( 50 полос) Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 13. СИБ для определения β-галактозидазы - 1 флакон (50 дисков). Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциации энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Дата выдачи: 22.08.2025 14. СИБ для определения оксидазы - 1 пробирка (5 полос). Инструкция по применению Набор реагентов «Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор № 2 для межродовой и видовой дифференциа- ции энтеробактерий» по ТУ 20.59.52-116-20401675-2023 Регистрационный номер медицинского изделия___________ 1 НАЗНАЧЕНИЕ Изделие для диагностики in vitro предназначено для идентификации и дифференциации до рода и вида микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae (выделенных в ходе бактериоло- гического исследования из биологического материала человека) по биохимической активности хромогенным методом (для дифференциации представителей семейства Enterobacteriaceae от других групп микроорганизмов). Функциональное назначение - вспомогательное средство в диагностике инфекций, вы- званных бактериями группы кишечной палочки или кишечных инфекций бактериальной этио- логии. Показания к применению изделия в соответствии с его назначением. Противопоказания при применении изделия согласно инструкции – отсутствуют. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ СОСТАВ МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ. Состав (комплектность) медицинского изделия: 1. СИБ с сорбитом - 1 флакон (50 дисков). 2. СИБ для определения сероводорода - 1 флакон (50 дисков). 3. СИБ для определения β-галактозидазы - 1 флакон (50 дисков). 4. СИБ с инозитом - 1 флакон (50 дисков). 5. СИБ с фенилаланином - 1 флакон (50 дисков). 6. СИБ с хлоридом железа - 1 флакон (50 дисков). 7. СИБ для определения индола - 1 пробирка (50 полос). 8. СИБ для определения уреазы - 1 флакон (50 дисков). 9. СИБ с лизином - 1 флакон (50 дисков). 10. СИБ с орнитином - 1 флакон (50 дисков). 11. СИБ для реакции Фогеса-Проскауэра - 1 флакон (50 дисков). 12. СИБ с малонатом натрия - 1 флакон (50 дисков). 13. СИБ с цитратом натрия - 1 флакон (50 дисков). 14. СИБ для определения оксидазы - 1 пробирка (5 полос). В комплект поставки входят: - инструкция по применению медицинского изделия; - паспорт качества на серию медицинского изделия. Характеристика компонентов. Системы индикаторные бумажные (СИБ) для идентификации микроорганизмов представ- ляют собой диски диаметром 9-10 мм или полоски шириной 7-8 мм, длиной 70-80 мм из бумаги хроматографической, содержащие определенные количества реагентов (субстратов в сочетании с индикатором), стабилизированные поливиниловым спиртом. Гигроскопичны, при хранении на свету возможно изменение цвета. 2 | Наименование СИБ | Основной реагент СИБ | Индикатор | Стабилиза- тор | Прочие ингре- диенты | Внешний вид СИБ в сухом виде | | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | | СИБ с сорбитом | D(+) сорбит | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | Пептон сухой ф е р м ентатив- ный для бакте- риологических целей | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ для определения сероводорода | Железа цитрат, натрий сернова- тистокислый 5- водный | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски кремо- вого цвета | | СИБ для определения β- галактозидазы | 2-нитрофенил- β-D- галактопирано- зид | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого цвета | | СИБ с инозитом | Мезоинозит | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | Пептон сухой ф е р м ентатив- ный для бакте- риологических целей | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ с хлоридом железа | – | Железа (III) хлорид 6- водный | Спирт поли- виниловый | – | Диск желтого цвета | | СИБ с фенилаланином | L-фенилаланин | – | Спирт поли- виниловый | – | Диск белого цвета | | СИБ для определения индола | L-триптофан | Реактив Эрлиха: п-диметилами- нобензальдегид, кислота орто- фосфорная | Спирт поли- виниловый | Лак АК-113 | Полоски, ко- роткий конец – зеленовато- серый или желтый, длин- ный – белый | | СИБ для определения уреазы | Карбамид (мо- чевина) | Фенолфталеин | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого цвета | | СИБ с лизином | L-лизин гидро- хлорид | Бромтимоловый синий | Спирт поли- виниловый | Пептон сухой ферментатив- ный для бакте- риологи-ческих целей Витамин В 6 | Диски желто- горчичного цвета | | СИБ с орнитином | L-орнитин гид- рохлорид | Бромтимоловый синий | Спирт поли- виниловый | Пептон сухой ферментативный для бактериологи- ческих целей Витамин В 6 | Диски желто- горчичного цвета | | СИБ для реакции Фогеса- Проскауэра | D(+) глюкоза, L-аргинин гид- рохлорид | – | Спирт поли- виниловый | – | Диски белого или кремового цвета | | СИБ с малонатом натрия | Натрий малоно- во-кислый | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | – | Диски от оранжевого до красного цвета | | СИБ с цитратом натрия | Натрий лимон- нокислый 3- замещенный 5,5-водный | Феноловый красный | Спирт по- ливиниловый | – | Диски от оранжевого до красного цвета | Таблица 1 Описание основных функциональных элементов изделия 3 1 2 3 4 5 6 СИБ для определения N,N-диметил-п- – Спирт поли- – Полоски от оксидазы фениленди- виниловый серовато- амин сернокис- сиреневого до лый темно- -нафтол фиолетового цвета ПРИНЦИП АНАЛИТИЧЕСКОГО МЕТОДА И ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ Принцип действия основан на идентификации микроорганизмов по способности к ферментации углеводов и многоатомных спиртов (сорбита, инозита), декарбоксилирова- нию аминокислот (лизина, орнитина), утилизации цитрата и малоната натрия, фермента- тивной активности (уреазы, β-галактозидазы, фенилаланиндезаминазы, оксидазы), индолооб- разованию, образованию сероводорода, поскольку биохимическая активность различных групп микроорганизмов может отличаться. Способность к ферментации углеводов и многоатомных спиртов оценивают по изме- нению окраски вследствие образования органических кислот (уменьшение рН), вызываю- щих изменение окраски индикатора. При реакции Фогес-Проскауэра ацетилкарбинол, продуцирующийся при ферментации глюкозы, окисляется в присутствии щелочи до диацетила, который соединяясь с гуанидиновы- ми группами L-аргинина в присутствии α-нафтола, образует комплекс, имеющий красную окраску. В среде, содержащей В (кофактор декарбоксилаз), стимулируется декарбоксилазная 6 активность в отношении лизина/орнитина, в результате декарбоксилирования лизина образуется кадаверин, орнитина – путресцин. Образовавшиеся амины защелачивают среду и ее цвет меняется в присутствии индикатора, если декарбоксилирования нет, цвет среды не меняется. Определение индолообразования в выращенной культуре проводят по появлению окрашивания с реактивом Эрлиха, которое свидетельствует о наличии индола. Определение оксидазной активности. В присутствии оксидаз бактерий происходит перенос электронов к N,N-диметил-п-фенилендиаминy, из него образуется индофенол – вещество синего цвета. Определение уреазной активности. При расщеплении мочевины образуется аммиак, который защелачивает среду, что сопровождается изменением цвета индикатора. Определение образования сероводорода основано на выявлении окрашенных в чер- ный цвет сульфидов железа, образующихся в результате взаимодействия серы, образую- щейся при ферментации серосодержащих неорганических соединений, с водородом и индикатором. 4 Определения фенилаланиндезаминазы. Дезаминирование аминокислоты фенилаланина ве- дет к образованию фенилпировиноградной кислоты, которая при взаимодействии с хлорным железом образует цикличное соединение зеленого цвета. Тест на утилизацию цитрата/малоната натрия основан на способности некоторых бактерий использовать в качестве основного источника углерода цитрат натрия/ малонат натрия, при этом происходит подщелачивание среды, вызывающее изменение окраски индикатора. Определение β-галактозидазы. β-галактозидаза – фермент, обеспечивающий гидролиз лак- тозы с образованием глюкозы и галактозы. 2-нитрофенил-β-D-галактопиранозид имеет струк- турное сходство с лактозой. β-галактозидаза расщепляет галактопиранозид с образованием глюкозы и ортонитрофенила – вещества, имеющего желтый цвет. ОСНОВНЫЕ ПОТРЕБИТЕЛЬСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Изделие рассчитано на проведение 50 анализов. Комплектация. Изделие (12 флаконов по 50 дисков: СИБ с инозитом, СИБ с лизином, СИБ с орнитином, СИБ с малонатом натрия, СИБ с цитратом натрия, СИБ с сорбитом, СИБ с фенилаланином, СИБ с хлоридом железа, СИБ для определения уреазы, СИБ для определе- ния сероводорода, СИБ для определения β-галактозидазы, СИБ для реакции Фогеса – Проска- уэра; 1 пробирка (50 полос) СИБ для определения индола; 1 пробирка (5 полос) СИБ для определения оксидазы) инструкция по применению, паспорт (в комплекте поставки). Изделие предназначено для лабораторной диагностики, для однократного применения по назначению. Целевой аналит – энтеробактериии. Вид аналита – качественный. Изделие ремонту и обслуживанию не подлежит. Монтаж, наладка, калибровка и про-чие операции, необходимые для ввода изделия в эксплуатацию и его правильной эксплуата-ции не требуются. Изделие является нестерильным. Пользователями изделия могут быть медицинские специалисты по лабораторной диагностике с высшим и средним специальным образованием, прошедшие специальную под- готовку и допущенные к работе с патогенными микроорганизмами в соответствии с СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекцион- ных болезней». АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Время срабатывания: СИБ для определения оксидазы от 30 до 60 с; СИБ для определения индола от 40 мин до 2 ч; СИБ для определения уреазы от 40 мин до 5 ч; СИБ с фенилаланином, СИБ с хлоридом железа – от 1 до 2 ч. 5 | | СИБ для определения β-галактозидазы – от 1 до 5 ч; | | | СИБ для определения сероводорода – от 5 до 18 ч; | | СИБ с сорбитом, СИБ с инозитом, СИБ с лизином, СИБ с орнитином, СИБ с малонатом | | | натрия, СИБ с цитратом натрия, СИБ для реакции Фогеса-Проскауэра – от 18 до 24 ч. | | | Чувствительность: при суспендировании полной бактериологической петли или посеве | | | в питательную среду уколом культуры положительно реагирующих тест-штаммов микроорга- | | | низмов семейства Enterobacteriaceae (Klebsiella pneumoniae 579, Proteus vulgaris HX 19 222, | | | Escherichia coli 9001/ Еscherichia coli 675) должен изменяться цвет раствора (после погружения | | | СИБ-диска), цвет питательной среды (после размещения СИБ-диска на поверхности) или цвет | | | полоски (после погружения или нанесения культуры тест-штамма) спустя время срабатывания в | | | соответствии с таблицей учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками | | | тест - штаммов. | | | Специфичность (правильность дифференциации тест-штаммов бактерий семейства | | | Enterobacteriaceae от тест-штаммов бактерий других групп): тест-штаммы бактерий семейства | | | Enterobacteriaceae (Klebsiella pneumoniae 579, Proteus vulgaris HX 19 222, Escherichia coli 9001/ | | | Еscherichia coli 675) и бактерий других групп (Vibrio cholerae non 01 Р-9741, Aeromonas | | | hydrophila 401, Alcaligenes faecalis 73) должны изменять цвет раствора (после погружения | | | СИБ-диска), цвет питательной среды (после размещения СИБ-диска на поверхности) или цвет | | | полоски (после погружения или нанесения культуры тест-штамма) спустя время срабатывания в | | | соответствии с таблицей учета результатов испытаний и биохимическими характеристиками | | | тест – штаммов. | | МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ Потенциальный риск применения набора – класс 2 б. Медицинское изделие является безопасным при транспортировании, хранении и примене- нии и не приносит вреда окружающей природной среде и здоровью человека. Исследуемые материалы, а также их растворы, оборудование и материалы, находящиеся с ним в контакте, представляют собой потенциально инфекционный материал, при работе с кото- рым необходимо соблюдать правила техники безопасности в соответствии с: - ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования безопасности»; - СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике ин- фекционных болезней»; Оборудование и материалы, находящиеся в контакте с исследуемыми образцами также представляют собой потенциально инфекционный материал, и обращаться с ними следует осторожно. Необходимо: 6 - работать в боксированных помещениях для проведения микробиологических иссле- дований с применением индивидуальных средств защиты (защитной одежды и одноразовых резиновых перчаток); - не пипетировать ртом; - при попадании на кожу или слизистые оболочки компонентов набора место контакта необходимо промыть большим количеством воды; - в случае пролива образцов и рабочих растворов на рабочие поверхности, необходимо проводить дезинфекционную обработку с использованием дезинфицирующих средств, эф- фективность которых подтверждена в отношении используемого в работе возбудителя; - инструменты и оборудование (до и после работы) подвергать обработке с использова- нием дезинфицирующих средств, эффективность которых подтверждена в отношении ис- пользуемого в работе возбудителя; - утилизировать все использованные материалы, а также их растворы, исследуемые об- разцы и их растворы в соответствии с действующими санитарными правилами работы с па- тогенными микроорганизмами. Утилизация изделий, пришедших в негодность, с истекшим сроком годности и обезза- раженных изделий после контакта с биологическими образцами осуществляется в соответ-ствии с требованиями СанПиН 2.1.3684-21 «Санитарно-эпидемиологические требования к содержа- нию территорий городских и сельских поселений, к водным объектам, питьевой во-де и питье- вому водоснабжению, атмосферному воздуху, почвам, жилым помещениям, экс-плуатации производственных, общественных помещений, организации и проведению сани-тарно- противоэпидемических (профилактических) мероприятий». СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ ПЕРЕЧЕНЬ РИСКОВ, ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫХ В ПРОЦЕССЕ АНАЛИЗА РИСКОВ И МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ. ПЕРЕЧЕНЬ РИСКОВ, ИДЕНТИФИЦИРОВАННЫХ В ПРОЦЕССЕ АНАЛИЗА РИСКОВ И МЕРЫ ПО СНИЖЕНИЮ РИСКОВ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ ИЗДЕЛИЯ. Объективные результаты анализа гарантируются при выполнении следующих условий: - для получения четких результатов необходимо соблюдение температурного режима тер- мостата (37±1) °С, рН применяемых питательных сред и режима обработки посуды. - соблюдения условий хранения (при температуре от 2 до 25 оС в герметично укупоренном виде) и транспортирования, изделия, транспортированные и хранившиеся с нарушением темпе- ратурного режима, применению не подлежат; - не использовать изделие с истекшим сроком годности; - не использовать изделие при отсутствии на его упаковке соответствующей маркировки, нарушении целостности упаковки компонентов и компоненты от разных серий изделия; 7 | ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ, | | | НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С ИЗДЕЛИЕМ | | | | • Термостат, обеспечивающий температуру (37±1) °С; | | | • Бокс микробиологической безопасности II класса; | | | • Автоклав; | | | • Пробирки стеклянные; | | | • Чашки Петри; | | | • Пинцеты; | | | • Петля бактериологическая № 3; | | | • Палочка стеклянная; | | | • Вата медицинская гигроскопическая; | | | • Натрия хлорида раствор 0,9% рН (7,3±0,1), стерильный; | | | • Фосфатно-солевой буферный раствор рН (5,5±0,2) (АО «НПО «Микроген»); | | | • Масло вазелиновое стерильное; | | | • α-нафтола раствор спиртовой 6 %; | | | • Натрия гидроксида раствор 40 % | - погружение дисков (полосок) в пробирки производят обожженным пинцетом; - критерием правильности учета реакции должны быть четкие различия в окраске по сравнению с контролем (за исключением аминокислот, где в опытной пробирке слабое зеленое окрашивание свидетельствует об отрицательном результате, в то время как в контроле диски с аминокислотами окрашены в желтый цвет). АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Тип анализируемого образца - образцы чистой культуры или отдельных колоний, выде- ленных в ходе бактериологического исследования из биологического материала человека с дифференциально-диагностических питательных сред для выделения и культивирования энте- робактерий в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г.). Требования к отбору, транспортировке и хранению до исследования анализируемых об- разцов в соответствии с МУ 4.2.2039-05 «Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории. Методические указания», Все работы по взятию, транспортированию и подготовке проб осуществляют в строгом соответствии с требованиями с СанПиН 3.3686-21 (в части требований к работе с папогенными микроорганизмами), Для отбора проб используют чистую стерильную посуду, не содержащую следов дезинфицирующих растворов. Стерилизацию посуды и других средств забора материала проводят автоклавированием, сухим жаром или кипячением в 2%-м растворе пищевой соды. Для получения культур используют питательные среды для культивирования и диффе- 8 ренциации энтеробактерий в соответствии с действующей нормативной документацией в зави- симости от объекта исследования. Все образцы должны быть промаркированы (идентифицированы). ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Определение оксидазной активности. Бактериальную культуру, выросшую на поверхности питательной среды для культивирова- ния микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, растирают платиновой петлей или стеклянной палочкой на индикаторной полоске СИБ, помещенной в чашку Петри. На одной полоске можно исследовать 10-14 культур (не более). Время реакции указано таблице 2. Определение утилизации углеводов и многоатомных спиртов. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с соответствующим углеводом или многоатомным спиртом. Среда в пробирках в результате быстрой диффузии в нее индикатора становится красной. В случае необ- ходимости учета газообразования рекомендуется использовать небольшой комочек стериль- ной гигроскопической ваты, который помещают в пробирку. В качестве контроля служат СИБ-диски, погруженные в пробирки со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Пробирки инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение активности β-галактозидазы. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с 2-нитрофенил-β-D-галактопиранозидом. В качестве контроля служит СИБ-диск, погруженный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Пробирки инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 1 до 5 ч. Определение индолообразования. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С. Полоску для определе- ния индола складывают по намеченной на ней линии вдвое и пинцетом опускают на дно пробирки так, чтобы длинный бесцветный конец погрузился в суспензию культуры, а короткий окрашенный: конец находился над поверхностью суспензии. В качестве контроля используют полоску, помещенную в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 40 мин до 2 ч. 9 Определение уреазной активности. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь по- гружают СИБ-диск с мочевиной. В качестве контроля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при темпе- ратуре (37±1) °С, время инкубирования от 40 мин до 5 ч. Определение декарбоксилаз лизина, орнитина и дегидролазы аргинина. В пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН (5,5±0,2) сус- пендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культиви- рования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с одной из аминокислот: лизином, орнитином или аргинином и вно- сят 0,2 мл стерильного вазелинового масла. В качестве контроля используют СИБ-диски с соответствующими аминокислотами, погруженные в пробирки со стерильным фосфатно- солевым буферным раствором рН (5,5±0,2) с добавлением 0,2 мл стерильного вазелинового масла. Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение активности фенилаланиндезаминазы. В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь по- гружают СИБ-диск с фенилаланином. В качестве контроля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют при темпе- ратуре (37±1) °С в течение 1-2 часов, затем помещают в пробирки СИБ диск с хлоридом железа. Определение образования сероводорода. СИБ-диски на сероводород помещают в пробирки на поверхность питательного агара рН (7,3±0,1), содержащего 0,5 – 0,7 % агара микробиологического, засеянного бактериоло- гической петлей уколом культурой, выросшей на поверхности питательной среды для культи- вирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С. В качестве кон- троля используют СИБ-диск, помещенный в пробирку на поверхность стерильного питательно- го агара. Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение утилизации цитрата и малоната натрия. В пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН (5,5±0,2) сус- пендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культиви- рования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с цитратом или малонатом натрия. В качестве контроля используют 10 СИБ-диски с цитратом или малонатом натрия, погруженные в пробирки со стерильным фос- фатно-солевым буферным раствором рН (5,5±0,2). Инкубируют при температуре (37±1) °С, время инкубирования от 5 до 18 ч. Определение ацетилметилкарбинола (реакция Фогеса - Проскауэра). В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН (7,3±0,1) суспен- дируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательной среды для культивиро- вания микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем погружают в пробирку СИБ-диск. В качестве контроля служит СИБ-диск, погруженный в пробирку со сте- рильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН (7,3±0,1). Инкубируют 18-24 ч при температуре (37±1) °С, затем вносят в пробирки по 1 - 2 капле α-нафтола спиртового раствора 6 % и натрия гидроокиси раствора 40 %, инкубируют 15 – 20 минут при температуре (37±1) °С. Примечание: стерильный натрия хлорида раствор 0,9 % рН (7,3±0,1), α-нафтола спир- товой раствор 6 % и натрия гидроокиси раствор 40 % готовит потребитель (хранение α-нафтола спиртового раствора 6 % в посуде из темного стекла при температуре 20 - 25°С не более 7 суток, натрия гидроокиси раствора 40 % при температуре 20 - 25°С – 6 месяцев). РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Регистрацию результатов анализа проводят визуально. Учет результатов производят в соответствии с таблицей 2. Таблица 2 Учет результатов испытания Цвет раствора Результат испытания Время сраба- Тесты после погруже- тывания положительный отрицательный ния СИБ Оксидазная активность окрашивание (СИБ для определения окси- - от 30 до 60 с синий цвет отсутствует дазы) Утилизация углеводов и многоатомных желтый или оранже- красный от 5 до 18 ч красный цвет спиртов (СИБ с инозитом, вый цвет СИБ с сорбитом), β-галактозидазная актив- окрашивание ность (СИБ для определе- бесцветный от 1 до 5 ч желтый цвет отсутствует ния β-галактозидазы) окрашивание корот- Индолообразование (СИБ окрашивание бесцветный от 40 мин до 2 ч к о г о к о нца в розово- для определения индола) отсутствует малиновый цвет розово-малиновый Уреазная активность (СИБ от 40 мин до 5 цвет окрашивание бесцветный для определения уреазы) ч отсутствует Определение декарбокси- лаз лизина, орнитина (СИБ синий или интен- желтый или светло- желтый от 5 до 18 ч с лизином, СИБ с орнити- сивно зеленый цвет зеленый цвет ном) Образование сероводорода окрашивание (СИБ для определения се- - от 5 до 18 ч черный цвет отсутствует роводорода) 11 Цвет раствора Результат испытания Время сраба- Тесты после погруже- тывания положительный отрицательный ния СИБ Фенилаланиндезаминазная через 10- 15 с после погружения индикатор- активность (СИБ с фенил- ного диска с хлоридом железа бесцветный от 1 до 2 ч аланином. СИБ с хлоридом окрашивание зеленый цвет железа) отсутствует Утилизация цитрата натрия оранжевей, и малоната натрия (СИБ с красный, малиново- оранжевый, красно- красно- от 5 до 18 ч цитратом натрия, СИБ с красный цвет оранжевый оранжевый малонатом натрия) через 15-20 минут после внесения по 1-2 Реакция Фогеса- капле α-нафтола спиртового раствора 6 % и Проскауэра бесцветный от 18 до 24 ч натрия гидроокиси раствора 40 % (СИБ для реакции Фогеса- окрашивание Проскауэра) малиновый цвет отсутствует Информация о биохимических свойствах некоторых бактерий семейства Enterobacteriaceae, имеющих медицинское значение, указана в таблице 3. Идентификация и дифференциация до рода и вида микроорганизмов семейства Enterobacteriaceae по биохимической активности являются частью комплекса идентификаци- онных тестов, включая контроль культурально-морфологических и тинкториальных и др. свойств в соответствии с «Методическими указаниями по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями» (М., 1984 г.).. Полную идентификацию следует производить с учетом результатов всех исследований (включая информацию об источнике получения), принимая во внимание биохимические характеристики бактерий УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ ИЗДЕЛИЯ Условия эксплуатации. Нормальные климатические условия: - температура окружающего воздуха от плюс (25±10) °С; - относительная влажность воздуха 45-80 %; - атмосферное давление - от 630 до 800 мм рт. ст. Транспортирование должно проводиться всеми видами крытого транспорта при температуре от 2 до 25 °С. Допускается транспортирование при температуре от минус 20 до 2 °С не более 14 суток. Хранение при температуре от 2 до 25 °С в защищенном от света месте. При вскрытии флаконов (пробирок) в асептических условиях компоненты набора подлежат хранению до истечения срока годности в герметично закрытых флаконах (пробирках) при температуре от 2 до 25 °С в защищенном от света месте. Срок годности - 2 года со дня приемки. Изделие с истекшим сроком годности использованию не подлежит. ГАРАНТИИ ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение настоящей 12 инструкции по применению. Рекламации по вопросам, касающимся качества и обращения медицинского изделия в те- чение срока годности с обязательным указанием серии и даты изготовления следует направлять в адрес Акционерного общества «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген» (АО «НПО «Микроген»): Россия, 115088, г. Москва, ул. 1-я Дубровская, д. 15, строение 2, тел. (495) 710-37-87, e-mail: info@microgen.ru и в адрес производства: Россия, 603006, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Грузин- ская, д. 44; Россия, 603093, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Родионова, д. 192; Россия, 603105, Нижегородская область, г. Нижний Новгород, ул. Чачиной, д. 27; тел.. (831) 296-91-16. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ НА УПАКОВКЕ И ЭТИКЕТКАХ Графический символ Изображение Изготовитель Температурный диапазон Код партии Использовать до Обратитесь к инструкции по применению или к инструкции по применению в электронном виде Запрет на повторное применение Содержимого достаточно для проведения <n> тестов Медицинское изделие для диагностики in vitro Хрупкое, обращаться осторожно Не допускать воздействия влаги Верх ____________________________ Взамен инструкции, утвержденной 10.06.2020 г. 13